Hématopoïèse

Généralités
- La durée de vie du globule rouge est : 120 jours
- Dans notre organisme nous avons 25 Téra de globules rouges
- notre organisme produit 200milliard de GR/jr soit 2 million de GR/s
- QE : les leucocytes sont des cellules nucléés/les plaquettes et les GR sont des cellules anucléées
- 9
L’hématologie a été créée en 1027
⑳ par Claude BERNARD
- Le premier cancer induit génétiquement (LMC) et la première maladie induite génétiquement
(drépanocytose) ont été découverts grâce à l’hématologie
- Coloration métachromatique : la couleur finale est différente de la couleur
- initiale du colorant (L'azurs de méthylène)
- coloration orthochromatique : la couleur finale est la même couleur initiale du colorant (Bleu de
méthylène, L’éosine)

Les cellules nucléées du sang peuvent être classées selon 2 modes

Aspect nucléaire Aspect du cytoplasme

Polynucléaires Mononucléaires Granulocytes Cellules a granulaires

- Polynucléaires - Les lymphocytes

- Cellules diploïdes - Les lymphocytes
(neutrophiles, basophile, - (les lymphocytes granulés ne
- 1 noyau plusieurs lobes et les monocytes
éosinophiles) et les sont pas considérés comme
- Le noyau peut donner une
- 1 noyau plusieurs lobes mastocytes des cellules granuleuses
idée sur le sexe (d’après
- Le noyau
étude peut donner une
du caryotype)
idée sur le sexe () Schéma classique de l’hématopoïèse
CSH : cellule souche hématopoïétique, acquises dès la naissance avec un nombre fixe (10 à 100 milliers) et
qui évolue à la baisse

(Prolifération conservative) (Prolifération d’engagement)

CSH Cellules pro géniteurs

(Voie de différentiation) (Prolifération conservative)

Précurseurs Pro géniteurs

Cellules sanguines
 - les CSH et les pros géniteurs existent dans le sang et dans la moelle osseuse
- le comportement tinctorial des colorations panoptiques ne permet pas de
différentier entre les CSH et pro géniteurs
- les lymphocytes (T, B, NK) ne sont pas distingués grâce aux colorations
panoptiques, mais grâce à des techniques immuno phénotypiques
- QE : à l’état normal, les lymphocytes T sont majoritaires (dans le sang et
dans la moelle osseuse), et en pathologie maligne, les lymphocytes B dominent
- Les polynucléaires neutrophiles agissent par production de l’eau de javel
- Les lymphocytes ont une durée de vie très longue (jusqu’à 20 ans)
- BCG est un vaccin d’origine animale (vache, veau)
- Henrietta LACKS : femme décédé à cause d’un cancer de l’utérus, ses cellules
qui ont un pouvoir de se multiplier infiniment ont donné les cellules de
cultures HELA
- QE : les hématies et les plaquettes (pas de noyaux) et les polynucléaires
(noyau indivisible) ne se divisent pas
- QE : les monocytes ne se divisent pas, ils se différentient en macrophages
- QE : les lymphocytes se divisent et se différentient

Ontogénie de l’hématopoïèse

Hématopoïèse primitive Hématopoïèse Hématopoïèse médullaire

mésodermique intra utérine hépatosplénique

- Débute le 21e jour après la fécondation - A partir du 3emois - Dès le 4e mois de grossesse
- Essentiellement érythroblastique (les CSH - Se termine à la naissance - A la naissance l’hématopoïèse est médullaire
nichent dans le sac vitellin >> (lymphocytes B e lignée myéloïdes) et
érythroblastes) thymus (lymphocytes T et NK)

Topographie de la moelle osseuse

Moelle rouge active Moelle jaune inactive
hématopoïétique graisseuse
- A la naissance : la quasi-totalité des os sont remplis de moelle osseuse active
- A partir de l’âge de 5 ans : involution adipeuse progressive (la moelle inactive se
développe au dépend de la moelle active)
- A 40 ans : 50% moelle active et 50% moelle inactive⑲ (Vertèbres, sternum, côtes,
crâne, os iliaques maxillaire...)
- Fémur et tibia contiennent de la moelle rouge avant l’âge de 18-24 ans.
- Pathologie : aplasie médullaire (100% de moelle inactive)
 Compartiment cellulaire de l’hématopoïèse
CSH - Prolifèrent de façon autonome (conditions IN VIVO)
- Présentes dans le sang et la moelle
- Pas reconnu par la coloration classique MGG
- Quiescentes : Stade G0 du cycle cellulaire
- Multipotentes : CSH peuvent donner naissance à toutes les cellules de l'hématopoïèse.
- On distingue des CSH primitives (intensité de renouvèlement élevée) et des CSH tardives
(intensité de différentiation élevée)
- Etudiés par la technique Till et Mc Culloch des CFU-S (technique IN VIVO sans ajouts de
produits qui a été la base de la transplantation) ou par la technique d’immunophenotypage par
cryométrie de flux (IN VITRO)
- La technique MC Culloch = nous avons injecté de la moelle osseuse a un rat irradié, après un
certain temps nous avons trouvés des CSH dans la rate du rat
- Chez le rat, la rate est hématopoïétique à l’âge adulte
Progéniteurs - CSH progéniteurs multi lignée myéloïdes (CFU-GEMM)
Lymphoïdes médullaires (B « moelle » ; NK «thymus »)
Progeniteurs restreints A deux lignées (CFU-GM)
A une seule lignée (CFU-G, CFU-M)
- Les cellules myéloïdes : GR, plaquettes, polynucléaires, monocytes
- Les cellules lymphoïdes : LT , LT et NK
- Plaquettes et GR sont cousins (proviennent du même progéniteur bipotent)
- En cas d’anémie ferriprive le taux de Plaquette augmente
- Monocyte et polynucléaire neutrophile sont cousins (proviennent du même progéniteur bipotent
le CFU-GM)
- La culture des progéniteurs a lieu dans un milieu semi liquide (gélose+serurum de veau) et elle
est restreinte aux facteurs de croissance hématopoïétique (ex= érythropoïétine)
- La culture dure jusqu’à 3 semaine et les constats se sont le 14e et le 21e jour
Entre le 7é et le 14e jour ; poussent les CFU-E (tardifs)
Le 21e jour : poussent les BFU-E (structure non organisée primitive)
- L’étude des progéniteurs se fait aussi par immunophenotypage par cryométrie in flux
- Dans le sang et la moelle les progéniteurs ne peuvent pas pousser spontanément
Précurseurs - La quasi-totalité des précurseurs sont reconnus par leur comportement tinctorial dans la moelle
osseuse (myélogramme) et par la coloration classique MGG sauf 3 exceptions (QE : les
réticulocytes)
QE : les réticulocytes sont des précurseurs anucléés du GR, non reconnu par le
MGG, cellules sanguine médullaire (existent dans le sang et la moelle)
Le réticulocyte est étudié dans le sang et non pas dans la moelle
- La quasi-totalité des précurseurs vont subir des cycles mitotiques et de synthèse
- QE : les précurseurs qui ne se divisent pas sont :
Les réticulocytes
Les érythroblastes acidophiles (précurseurs des réticulocytes)
- Moyens d’étude des précurseurs labo myélogramme
Biopsie ostéo médullaire
Radiologie (exmpl : PET-SCANN)
 - Myélogramme : étude semi-quantitative
examen cytologique de la moelle osseuse
chez l’adulte le sternum (croisement de la ligne horizontale passant par le 2 EIC
et la ligne médiane du corps) est le site privilégié pour cytoponction (sans
anesthésie), on peut aussi ponctionner les crêtes iliaques (anesthésie locale)
chez l’enfant les crêtes iliaques sont le site de cytoponction (anesthésie locale)
- biopsie osteo médullaire (BOM) : examen histologique de la moelle osseuse
permet d’étudier l’architecture de la moelle osseuse (MO+environnement)
on prélève 1cm qui correspond à 10 logettes (1 logette=1mm de diamètre)
la BOM renseigne sur le rapport de la moelle hématopoïétique et la moelle
graisseuse (permet de diagnostiquer l’aplasie médullaire)
A l’état normal, on note une prolifération périphérique (endostale et peri-
endotheliale) des CSH et progéniteurs, et une maturation centrale
Dans le cas e pathologies malignes c’est le contraire (prolifération centrale)
Cellules - Les cellules matures existent dans le sang et la moelle
matures - La coloration MGG permet de reconnaitre la plupart des cellules matures sauf les lymphocytes

Coloration MGG (May-Grünewald Giemsa)

- Coloration MGG = coloration combinée (plsrs produits), panoptique (le produit qui colore est
invisible)

- Produits utilisés

May-Grünewald Giemsa Eau du robinet Eau tamponnée à

ph=7-7,2
Solution métanolique qui
Utilisée diluée au dixième par de l’eau
contient l’éosine, le bleu de
tamponnée (1volume de Giemsa et 9 volume
méthylène à l’état
d’eau).
moléculaire
-Solution aqueuse qui contient :

71 cation : éosinophile, acide, colorant

orthochromatique (rouge et colore en rouge)

3 2 anions : bleu de méthylène (base, colorant

orthochromatique « bleu et colore en bleu »)
et l’Azur de méthylène (base, colorant
métachromatique « bleu et colore en rouge »)
 Etapes de la coloration Fixation des cellules sur le verre

1- le frotti sanguin réagit en premier avec le May-Grünewald >> double fixation Fixation de l’éosine et u bleu de
méthylène à la surface cellulaire
2-Ajout e l’eau tamponnée >> initie la coloration en créant un gradient de polarité qui va aboutir à
que l’éosine devient acide et le bleu de méthylène devient basique (création du panoptisme)

3-Ajout de la GIEMSA diluée >> renforcer la coloration de l’éosine et du bleu de méthylène

PS : l’azur de méthylène ne réagit qu’à cette 3e étape avec les acides cellulaires nommé azurophyle

5-Ajout de l’eau du robinet : délicatement pour éliminer l’excès de produits