Totipotence Chez Le Vegetal

Totipotence chez le végétal
Signification et limites
S7 : Technologie et biotechnologie
végétales
S7 : Technologie et biotechnologie végétales
Plan
 Quelques définitions
 Naissance et développement des cultures in
vitro
 Applications et limites de la totipotence
 Mécanismes sous-jacents à la totipotence
 Signification biologique de la totipotence des
cellules végétales
Quelques définitions
 Chez les plantes, la totipotence peut se définir comme la propriété
qu’ont certaines cellules de pouvoir régénérer un individu lorsqu’elles
sont placées dans des conditions appropriées, en passant
éventuellement par une étape de dédifférenciation
Spécificité du végétal
Chez les animaux

 Cellules totipotentes: cellules issues des premières division de l'oeuf fécondé
capables de donner naissance à tous les types de cellules de l'organisme et les
seules à permettre le développement complet d'un individu.
 Cellules pluripotentes : Capacité que possède une cellule de se différencier en
environ 200 types cellulaires représentatifs de l’ensemble des tissus (cellules
souches embryonnaires issues d’embryons de 5 à 7 jours)
 Cellules multipotentes : capables de donner naissance à plusieurs types
cellulaires (les cellules souches myéloïdes de la moelle osseuse sont à l’origine des
cellules sanguine)
Exemple : microbouturage du Saint Paulia
2 mois plus
tard
Source : http://www.didier-pol.net/1CLONES.html
Historique
La totipotence comme fil

conducteur de la naissance
des biotechnologies
végétales
végétales
Historique de la culture de tissus et d’organes

de plantes
 Contexte théorique au début du XXème siècle:

– Théorie cellulaire (Schleiden et Schwann)
Comment étudier le comportement de cellules
isolées ?
– Microbiologie et biochimie
Cultures en conditions Caractérisation de substances

stériles de croissance
S7 : Technologie et biotechnologie végétales Aspects historiques
G. Haberlandt : le concept de totipotence de

la cellule végétale
Deux idées importantes :
•la culture de cellules isolées constituerait
potentiellement un modèle de recherche
•maintient en vie de cellules isolées
•Pas de multiplication cellulaire http://users.ugent.be/~pdeberg
h/his/his2az1.htm
•on peut potentiellement régénérer une plante

entière à partir d’une cellule isolée  totipotence
•Échec (mauvais choix d’explants,
méconnaissance des substances de
croissance)
Émergence des techniques de culture
– Haberlandt (1902) : concept de totipotence

– White (1934) : culture in vitro de racines de tomates
– Gautheret (1935) : utilisation d’auxine pour cultiver
du cambium de saule
– 1939 : 1ère culture indéfinie de cals de carotte
https://www2.carolina.com
La culture de tissus est possible en utilisant des substances de

croissance et/ou des tissus méristématiques
Émergence des techniques de culture

– Braun (1941) : travaux sur le crown
gall
Croissance in vitro des tumeurs
sans ajout d’hormones
– Miller (1955) : cytokinines

– Murashige et Skoog (1953-1962) :
mise au point de milieux de culture efficaces
contenant des cytokinines et des auxines
Confirmation des hypothèses

d’Haberlandt
 1956 (Muir) suspensions

cellulaires
 1958 (Reinart et Stewart)

Embryogenèse somatique
chez la carotte
Confirmation des hypothèses de

Haberlandt
 1965 (Vasil et
Hilderbrandt)
Régénération d’un plant
de tabac à partir d’une
cellule unique
 1971 (Nagata et Takabe)

Régénération d’un plant
entier à partir d’un
protoplaste
Développements : des
outils agronomiques
 1965 (Morel) multiplication in vitro
des orchidées
 1972 (Sharp) : tomates haploïdes à

partir de pollen
 1973 : hybride issu d’une fusion de

protoplastes
Développements : production de
métabolites secondaires
 1977 : culture de cellules de tabac dans
un réacteur de 20 000 litres
 1983 (Mitsui Petrochemical) : production

industrielle de métabolites secondaires
Développements : la transgenèse
 Van Montaigu (1983) : tabac résistant à

la kanamycine
 1994 : Flavr Savr (Calgene, antisensage

d’une polygalacturonase)
 1996 : maïs transgénique commercialisé

aux USA
La totipotence : applications et
limites
végétales
Des cellules plus ou moins

totipotentes
Les méristèmes :
•un réservoir de cellules totipotentes
Les autres types cellulaires :
• une totipotence plus ou moins facile à exprimer
•Utilisation de substances de croissance exogènes
Variabilité •Régénération directe

interspécifique •Régénération en passant par un stade de cal
Limites de la totipotence :
impossibilité technique
 Différentiation irréversible : xylème (!)
 En fonction de la méthode de préparation des protoplastes,
récalcitrance à la régénération
 Pour beaucoup d’espèces d’intérêt agronomique, les
protoplastes ne sont pas totipotents (récalcitrants) ex : Vitis
vinifera
Limites de la totipotence :
 Variation somaclonale
Les plantes régénérées présentent souvent
des problèmes
– Perte de caractères chimériques
– Aneuploïdies , délétions chromosomiques
 Modification du caractère juvénile
– Impact sur la fertilité
Mécanismes sous-jacents à la
totipotence
Chez les cellules

végétales
végétales
Pourquoi les cellules végétales sont

totipotentes : Arguments classiques
 Petit nombre de types cellulaires

 Seulement 3 ou 4 types d’organes
fondamentaux (racine, tige, feuilles) dont les fleurs,
vrilles, épines, fruits et tubercules sont des dérivés
 Grande plasticité génomique
– la croissance peut rester presque normale malgré
de profonds remaniements chromosomiques
Etapes liées à la totipotence

 Etape 1 :
– Cellules différentiées : dédifférenciation nécessaire
– Cellules souches méristématiques
 Etape 2 : mise en route de l’activité mitotique  utilisation
de substances de croissance
 Etape 3 : autonomie de la croissance tissulaire vis-à-
vis des substances de croissance exogènes
Enjeux scientifiques actuels:

Comprendre les mécanismes de dédifférenciation
Comprendre la nature des cellules souches

Totipotence Chez Le Vegetal

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Totipotence chez le végétal

Chez les animaux

Exemple : microbouturage du Saint Paulia

La totipotence comme fil

Historique de la culture de tissus et d’organes

 Contexte théorique au début du XXème siècle:

Cultures en conditions Caractérisation de substances

G. Haberlandt : le concept de totipotence de

•on peut potentiellement régénérer une plante

Émergence des techniques de culture

– Haberlandt (1902) : concept de totipotence

La culture de tissus est possible en utilisant des substances de

Émergence des techniques de culture

– Miller (1955) : cytokinines

Confirmation des hypothèses

 1956 (Muir) suspensions

 1958 (Reinart et Stewart)

Confirmation des hypothèses de

 1971 (Nagata et Takabe)

 1972 (Sharp) : tomates haploïdes à

 1973 : hybride issu d’une fusion de

 1983 (Mitsui Petrochemical) : production

 Van Montaigu (1983) : tabac résistant à

 1994 : Flavr Savr (Calgene, antisensage

 1996 : maïs transgénique commercialisé

Des cellules plus ou moins

Variabilité •Régénération directe

Chez les cellules

Pourquoi les cellules végétales sont

 Petit nombre de types cellulaires

Etapes liées à la totipotence

Enjeux scientifiques actuels:

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