Introduction

• En chromatographie en phase gazeuse, l’échantillon est

vaporisé et injecté au sommet de la colonne

• L’élution est assurée par un flux de gaz inerte qui sert de

phase mobile
Chromatographie en phase
gazeuse • Gaz inerte --> pas d'interactions avec l’analyte

• Contrairement aux autres types de chromatographie, la

seule fonction de la phase mobile et de transporter
l’analyte

• Pas d’échanges entre analyte et phase mobile

 Introduction Introduction
• 2 types de chromato phase gazeuse: chromato gaz-
• La chromatographie gaz-liquide est basée sur le partage
liquide et chromato gaz-solide
de l’analyte entre la phase gazeuse mobile et une phase
liquide immobilisé sur la surface d’un support inerte
• La chromato gaz-solide utilise une phase stationnaire
solide
• Principe de base en 1941, 1er appareils en 1955
• La rétention des analytes se fait via adsorption physique
• Développement extraordinaire
• Applications limitées car temps de rétentions trop élevés
• Plus de 200 000 appareils en fonctionnement dans le
pour les molécules polaires et pics d’élution trop étalés
monde
(car l’adsorption est non linéaire)
 Introduction

• 30 fabricants, 130 modèles, de 1500 à 40 000€...

• Développement lié à l’électronique, l’informatique et

surtout aux colonnes capillaires

Appareillage gaz-liquide
• Explication du matériel utilisé en chromato gaz-liquide
 Déctecteur à conductivité
Chromato gaz-liquide
thermique
• Le gaz vecteur doit être chimiquement inerte (argon,
azote, hélium,...)

• Souvent choisi en fonction du détecteur

• Bouteille gaz + régulateur de pression, débitmètre in et

out, tamis moléculaire pour éliminer eau et impuretés

• Pressions et débits différents si colonne remplie ou

colonne capillaire
Chromato gaz-liquide Chromato gaz-liquide

• Afin d’avoir une bonne efficacité, l’échantillon doit

occuper un volume adéquat

• On l’introduit sous forme d’un «bouchon» de vapeur

• Si on injecte trop lentement, on va élargir les pics du

chromatogramme

• La méthode la plus courante est d’injecter l’échantillon

liquide à l’aide d’une microseringue à travers un septum
 Chromato gaz-liquide Chromato gaz-liquide
• L’échantillon arrive alors dans la chambre de vaporisation
instantanée

• Ordre de grandeur: 50°C de plus que la température

d’évaporation du composé le plus lourd

• Volumes de 0,1 à 20 microlitre

• Dans les colonnes capillaires, les volumes sont encore

plus petits et on utilise un système diviseur qui n’injecte
qu’une petite fraction de l’échantillon, le reste est évacué
 Chromato gaz-liquide
• Il existe 2 types de colonnes en GC: les colonnes
remplies et les colonnes capillaires
• Longueur entre 2 et 50 m
• Soit en acier inox, en verre, en silice fondue ou en Téflon
• Elles sont généralement enroulées en cercles de 10 à 30
cm de diamètre afin d’être placée dans un four
thermostatique
Chromato gaz-liquide
• La température de la colonne est un paramètre très très
important qu’il faut bien maîtriser
• En fonction du point d’ébullition et du degré de
séparation voulu
• Soit on fixe une température constante si les composés
du mélange le permettent
• En général, on travaille avec une programmation de
température lorsque les T° d’évaporation des
échantillons sont très différentes
Chromato gaz-liquide Chromato gaz-liquide
• Ensuite vient les détecteurs

• Evolution importante depuis le début de la

chromatographie

• Différents types développés par la suite

• Le détecteur idéal doit avoir une sensibilité appropriée

(entre 10-8 et 10-15 g/s)

• Une bonne reproductibilité et stabilité

• Une réponse linéaire dans une large gamme de

concentration
 Déctecteur à ionisation de
Chromato gaz-liquide
flamme
• Une T° de fonctionnement compris entre la T° ambiante
• Le détecteur à ionisation de flamme (FID) est le plus
et 400°C
utilisé
• Un temps de réponse rapide et indépendant de la vitesse
• L’éluat qui sort de la colonne est mélangé à de l’air et de
d’écoulement
l’hydrogène
• Fiable, facile d’emploi et d’entretien
• Ce mélange est enflammé électriquement
• Une réponse uniforme vis à vis de tous les solutés ou
• La plupart des composés produisent des ions et des
alors une réponse spécifique à une (des) classe(s) de
électrons lorsqu’ils sont pyrolisés
solutés

• Ne pas détruire l’échantillon

 Déctecteur à ionisation de Déctecteur à ionisation de
flamme flamme
• Ces ions et électrons sont capables de transporter
l’électricité à travers la flamme

• On applique une ddp (qques centaines de V) entre

l’entrée du brûleur et une électrode collectrice

• On mesure (et amplifie) le courant résultant à cette

migration d’ions et d’électrons

• Courant très très faible: 10-12 A

 Détecteur à ionisation de Déctecteur à ionisation de
flamme flamme
• Le nombre d’ions produits est proportionnel au nombre
• Détecteur ne répond pas à H2O, CO2, SO2 et NOx
de carbone d’un composé organique

• Le FID répond au nombre d’atomes de carbone, il est • Détecteur d’utilisation générale pour les composés
organiques
donc sensible à la masse plutôt qu’à la concentration

• L’avantage est qu’il est insensible à des variations de • Sensibilité de l’ordre de 10-13 g, une réponse linéaire dans
un très large domaine et un bruit faible
débit de la phase mobile

• Par contre, certains groupements ne produisent que très • Robuste et facile d’utilisation
peu d’ions
• Par contre, le gros inconvénient est qu’il détruise
l’échantillon
 Déctecteur à conductivité Déctecteur à conductivité
thermique thermique
• Détecteur à conductivité thermique = catharomètre
• La valeur de la résistance du filament est une fonction de
la température qui dépend de la vitesse à laquelle le gaz
• Basé sur la mesure des variations de conductivité environnant évacuent l’énergie thermique par
thermique d’un flux gazeux dues à la présence de
conduction
molécules d’analyte
• On utilise habituellement une système de détection
• Composé d’un élément chauffé par un courant constant
différentiel
dont la température dépend de la conductivité
thermique du gaz environnant
• Un élément est placé avant la colonne, l’autre après la
colonne
• Peut être platine, tungstène, or,...
 Déctecteur à conductivité Déctecteur à conductivité
thermique thermique
• On compense alors les variations dues à la conductivité
thermique du gaz vecteur et d’autres paramètres de
colonne qui sont difficile à maintenir constant

• Ou alors on peut diviser le flux gazeux

• Dans les 2 cas, l’effet de la conductivité thermique du gaz

vecteur s’annule, les variations de débit, de pression et
de courant électrique sont minimisées
 Déctecteur à conductivité
Déctecteur thermoionique
thermique
• TID est un détecteur spécifique aux composés
• Les conductivités thermiques de l’hydrogène et de organiques qui contiennent du phosphore et de l’azote
l’hélium sont 6 à 10x plus grandes que celles des
composés organiques
• Comparé au FID, il est 500x plus sensible au phosphore,
50x plus à l’azote
• La présence des ces molécules va donc entraîner une
diminution importante de la conductivité thermique du
flux --> élévation de la température du détecteur • Utile dans le domaine des pesticides

• Si catharomètre: uniquement hélium ou hydrogène • La structure du TID est semblable à celle du FID
comme gaz vecteur
 Autres détecteurs
• On combine régulièrement la chromato gazeuse avec
des techniques sélectives de spectrométrie et
d’électrochimie

• Ces méthodes couplées (GC-MS) sont des outils

puissants pour identifier les composés d’un mélange Colonnes de GC et phase
complexe
stationnaire
• Ces détections spécifiques peuvent analyser en continu
l’éluat qui sort de la colonne --> la colonne ne sert qu’à
la séparation
 Colonnes GC
• Dans les années 50, on utilisait des colonnes remplies
dans lesquelles la phase stationnaire était constituée d’un
film mince de liquide adsorbé à la surface d’un support
solide finement divisé
• Des études ont montré qu’une meilleure séparation en
un laps de temps plus court pouvait être obtenu à l’aide
de colonnes non remplies et de diamètre très petit
(dixième de millimètre)
Ici, la phase stationnaire est un film uniforme de
liquide extrêmement fin qui tapisse l’intérieur d’un
capillaire
Colonnes GC
• Les colonnes capillaire ne se sont développées que 20
ans plus tard à cause de problèmes techniques:
• Faible volume à injecter, fragilité, raccord de la colonne
au détecteur
• Difficulté de réaliser un dépôt reproductible sur les
parois, faible durée de vie, tendance à se boucher
• Brevet d’un seul fabricant
• Actuellement, les plus utilisées et développées
 Colonnes remplies
• Actuellement, les colonnes remplies sont des tubes en
verre, en métal ou en Téflon entre 2 et 3 m de long et 2
à 4 mm de diamètre intérieur
• On y tasse un solide finement divisé préalablement
recouvert d’une fine couche (0,05 à 1 micron) de phase
stationnaire liquide
• Ces tubes sont enroulés en spirales
Colonnes remplies
• Dans ce cas, le support solide ne sert qu’a supporter la
phase stationnaire liquide
• La surface de contact entre la phase stationnaire et la
phase mobile doit être la plus grande (afin de maximiser
les transferts)
• Le support le plus utilisé est constitué à partir d’un
matériau naturel: la terre de diatomées = squelettes en
silice d’algues qui vivaient autrefois dans les lacs et les
mers
 Colonnes remplies Colonnes remplies
• Ces algues rejetaient leurs déchets par diffusion à travers
• Pression max = 3,5 bar --> diamètre limite des
leurs pores --> parfait pour faire le même en chromato particules: 0,2 mm
• Ce support doit avoir une bonne résistance mécanique,
résister à la température et avoir une surface spécifique
de plus de 1m2/g

• La granulométrie doit être petite pour augmenter

l’efficacité de la colonne

• Mais le différence de pression nécessaire à maintenir le

débit est inversement proportionnel au carré du
diamètre des particules
 Colonnes capillaire
• On classe les différentes colonnes capillaire en fonction
des caractéristiques de la phase stationnaire
• WCOT = film qui tapisse la paroi interne = simple
capillaire recouvert d’une couche mince de phase
stationnaire
• SCOT ou PLOT = fines particules poreuses adhérantes
= tapissé d’un film mince d’un matériau de support
(terre de diatomées)
Colonnes capillaire
• Colonnes SCOT peuvent contenir plus de phase
stationnaire que les WCOT --> on peut injecter un plus
grand volume d’échantillon
• Mais efficacité moins bonne que WCOT
• Au début, les colonnes WCOT étaient en acier inox, alu,
cuivre, plastique, verre
• Les nouvelles colonnes sont en silice fondue = FSOT
 Colonnes capillaire Colonnes capillaire

• Fabriqué à partir de silice extrêmement pure

• Parois beaucoup plus fine qu’avant et renforcée avec du

polyamide

• Colonnes flexibles que l’on peut enrouler

• Diamètre intérieur de l’ordre de 0,15 - 0,3 mm

 Phase stationnaire Phase stationnaire
• La phase liquide immobilisée dans une colonne de
chromato gaz-liquide doit avoir les caractéristiques • Le choix de la bonne phase stationnaire doit être
suivantes: déterminé en pratique

• Faible tension de vapeur (100°C au dessus de la T° • Le tR est fonction du coefficient de distribution (K) et
les coefficients de distribution du liquide doivent être
max de la colonne)
différents pour chaque composé à analyser
• Stabilité thermique
• Mais ni trop grand, ni trop petit
• Inertie chimique
• Pour que le soluté présente un temps de rétention
correct, il faut qu’il ait une certaine affinité avec la
• Propriétés de solvant pour que k’ et α aient des
phase stationnaire
valeurs idéales pour la séparation
 Phase stationnaire Phase stationnaire

• On va être attentif à la polarité du soluté et de la • Les solutés polaires sont les alcools, les acides et les
phase stationnaire amines

• Les phases stationnaires polaires contiennent des • Les moyennement polaires sont les éthers, les cétones
groupement CN, CO et OH et les aldéhydes

• Les polyester sont très polaires • Les apolaires sont les hydrocarbures saturés

• Les phases stationnaire hydrocarbonées et les dialkyl • Généralement, on choisi une phase stationnaire qui a
siloxanes sont apolaires la même polarité que les constituants du mélange et
l’ordre d’élution est déterminé par le points
d’ébulition des composés
 Phase stationnaire Phase stationnaire

• 5 sur les 6 sont des polysiloxanes

• Pour la 1ère, R = CH3 --> apolaire

• Pour les 2 et 3, R = C6H5 avec un % de C6H5 par rapport

aux CH3

• Pour la 4, R = C3H6CF3

• Pour la 6, R = C3H6CN
• 6 phases stationnaires principales classés par ordre de
polarité • Pour la 5, polymère polaire
 http://chemistry4all-zaki48.blogspot.com/
Phase stationnaire Phase stationnaire

• Les fabricants proposent aujourd’hui des phases

stationnaires greffées (réticulées)

• Permet d’augmenter la durée de vie des colonnes car

petit à petit un peu de liquide immobilisé sort de la
colonne avec l’élution

• Si on doit décontaminer la colonne avec un solvant, ça

amplifie le phénomène

• On vient accrocher la phase stationnaire (parmis les 6

précédents en général) à la surface de la silice
 Phase stationnaire
• Ensuite, on chauffe la colonne afin de former des liaisons
C-C = réticuler

• Films beaucoup plus résistants et meilleure stabilité

thermique

• L’épaisseur du film est de l’ordre de 0,1 à 5 micron Application

• Cela affecte principalement les temps de rétention des
composés

• Plus le film est épais, et plus les temps de rétention sont

longs
 Application
• La chromato gaz-liquide peut servir de méthode de
séparation
• Pour ça, c’est la meilleur méthode!
• On peut aussi l’utiliser en analyse qualitative ou
quantitative
• Mais là, la technique montre ses limites --> on couple à
des appareils d’identifications plus perfectionnés (MS)
Application
• On l’utilise par exemple pour tester la pureté des
composés organique, pour rechercher un polluant
• On utilise alors un étalon interne = polluant que l’on
passe dans la colonne pour déterminer son temps de
rétention
• Il faut alors analyser l’échantillon avec exactement les
mêmes conditions pour voir si on voit un pic à ce temps
là
 Application

• Grâce aux détecteurs actuels, on peut aussi travailler en

quantitatif

• Le plus important est la qualité de l’échantillon injecté et

le contrôle strict et rigoureux des conditions
opératoires
Comparaison entre la CG et
l’HPLC

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 Comparaison Comparaison

• En règle générale, la CG est rapide et simple

d’appareillage

• Mais l’HPLC peut s’appliquer aux substances non

volatiles, aux ions inorganiques et aux matériaux
thermiquement instables

• Les 2 techniques sont souvent complémentaires et

peuvent même être utilisée en série = chromatographie
bidimensionnelle

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