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Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG)

1. Gnralits
Les CPG sont des chromatographies analytiques qui se caractrisent par :
- La phase mobile est un gaz.
- La phase stationnaire peut tre :
- un solide adsorbant, on parle alors de CPG d'adsorption ou CPG gaz-solide. L'adsorbant le plus
utilis est la silice (adsorbant trs polaire).
- un liquide imprgnant totalement la surface d'un support devenu inerte, on parle alors de CPG
gaz-liquide ou CPG de partage (terme impropre mais trs utilis). La phase stationnaire liquide doit tre
non volatile dans les conditions de chromatographie pour ne pas s'puiser au fil des analyses. Ce type
de support est en train de disparatre.
- un motif chimique dtermin greff par liaison covalente sur un support devenu inerte (support
silice greff d'un motif organique par exemple), on parle de CPG sur phase greffe. Cette technologie
permet une varit de phases stationnaires infinie (toute la gamme des polarits) et une rsistance des
phases stationnaires trs leve (pas de phnomne d'puisement de la phase stationnaire par
volatilisation).
Les gaz utiliss comme phase mobile sont le dihydrogne ou l'hlium ou le diazote ou le dioxyde de
carbone. La fonction du gaz phase mobile est d'tre le vecteur d'entranement travers la colonne des
molcules analytes lorsqu'ils se trouvent l'tat gazeux en tat de non rtention par la phase
stationnaire.
La phase mobile se comporte ainsi en gaz vecteur inerte (c'est dire qu'elle n'occasionne aucune
interaction avec les analytes sparer).
Remarque : en chromatographie liquide, la phase mobile joue un rle plus actif puisqu' interviennent des
solubilisations des analytes dans la phase mobile et pas seulement des rtentions diffrentielles par la
phase sttionnaire. De ce point de vue, CPG et CL sont trs diffrentes.
Quels sont les facteurs de sparation des analytes en CPG ? Ils sont de deux ordres :
1) la volatilit (il suffira de comparer les valeurs de point d'bullition des diffrents analytes
sparer) diffrente des analytes. La phase mobile est un gaz, elle ne permet donc l'avancement que des
analytes qui sont l'tat gazeux un instant donn. Ainsi, plus un analyte est volatil, plus son lution
sera rapide toutes choses tant gales par ailleurs.
2) les interactions (faibles) plus ou moins importantes entre les analytes et la phase stationnaire :
- interactions faibles de surface de type adsorption si CPG gaz-solide
- solubilisations diffrentielles dans la phase stationnaire liquide en CPG gaz-liquide
- interactions faibles diffrentielles avec le motif chimique greff en CPG sur phase
On retiendra donc le couple (volatilit de l'analyte, interactions analyte-phase sttionnaire) comme tant
le couple permettant de caractriser le comportement d'un analyte.

2. Les diffrents types de colonnes

On distingue les colonnes remplies classiques et les colonnes capillaires.
2.1. Colonnes remplies : il s'agit de colonnes de mtal ou de verre (inerte vis vis des composants
analyser) de quelques mm de diamtre, de 1 quelques mtres de longueur (en enroulement spiral).
Chaque colonne est remplie du support granuleux dsir :
- silice si CPG d'adsorption, par exemple ;
- polyethylne glycol imprgnant de la silice en CPG liquide, par exemple.
2.2. Colonnes capillaires : les colonnes se prsentent sous forme d'un capillaire dont la surface interne
porte un fin film de phase stationnaire. Le diamtre interne est de 0,1 0,6 mm ; l'paisseur de film de

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phase stationnaire est de 0,2 0,5 m ; la longueur dpasse 10 m, atteint gnralement 30 m ou plus.
La colonne est prsente en un enroulement spiral. Les colonnes capillaires ont aujourd'hui la faveur
des analystes et une trs trs grande varit de phases greffes sont disponibles sur le march. Les
phases greffes utilisent la chimie du greffage covalent d'un motif organique choisi sur une base silice
(voir le polycopi HPLC).
La construction obit au schma :

3. L'chantillon analyser, l'injection

Les analytes doivent absolument tre injects l'entre de colonne l'tat de gaz (c'est
fondamental !!). C'est pourquoi on injecte l'chantillon dans une chambre d'injection porte une
temprature telle que la volatilisation des analytes qui vont rentrer dans la colonne soit totale et
immdiate. La temprature de la chambre d'injection est donc, par principe, toujours suprieure celle
de la colonne. (Tout ce qui n'est pas volatilis dans la chambre d'injection ne rentrera pas dans la
colonne).
L'analyse CPG exige ainsi que les analytes sparer dans l'chantillon soient volatilisables des
tempratures qui ne les dgradent pas. Ceci exclut l'analyse CPG des composs qui sont dtruits par
les hautes tempratures avant toute vaporisation. Pour mettre en uvre une analyse CPG, on procde
ainsi :
- L'injection est ralise dans la chambre d'injection-vaporisation en perforant un opercule tanche. La
volatilisation de tous les composs chromatographier doit y tre immdiate. D'une faon gnrale, le
volume exact inject dans la colonne n'est pas exactement connu et l'utilisation d'talons internes
s'impose pour les analyses quantitatives.
- Le gaz vecteur qui accde au systme via la chambre de vaporisation va faire entrer les analytes (
l'tat vapeur) dans la colonne.
- L'analyse quantitative exige l'utilisation d'talon(s) interne(s) (voir chapitre sur les analyses
quantitatives en chromatographie).
- si l'chantillon contient, en plus des composs volatils analyser, des composs totalement non
volatilisables aux tempratures de l'analyse, ceux-ci vont se dposer et encrasser la tte de colonne. La
colonne va perdre peu peu ses performances, il faudra en changer ou la nettoyer (certaines colonnes
phase greffe sont rincables par des solvants). Une solution usuelle consiste extraire les analytes
volatilisables chromatographier par un solvant trs volatil qui n'extrait pas les substances non
volatilisables non dsires. Le solvant d'extraction conduira un pic solvant puisqu'il sera
chromatographie.
Lorsque les analytes qu'on dsire chromatographier ne sont pas volatilisables (cas des molcules
dgrades avant volatilisation ou cas de colonnes ne supportant pas les tempratures thoriques qui
seraient ncessaires), il faut envisager une analyse aprs drivation : il s'agit de "transformer" les
analytes en drivs volatilisables stables. Exemples : les oses ne sont pas volatilisables et donc sont a
priori non analysables en CPG. Cependant, les oses peuvent tre rduits en leurs polyols
correspondants puis actyls. Les drivs ainsi obtenus sont volatilisables, analysables en CPG. La
mthylation des acides gras longues chanes les rend volatils et facilement analysables en CPG.

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4. Temprature de colonne
La colonne d'analyse est place dans un four dont la temprature doit tre parfaitement rgle. En effet
tout changement de temprature se traduit par la modification de la pression de vapeur saturante des
analytes et modifie ainsi leur temps de sortie. Toute lvation de la temprature se traduira par des
temps de sortie plus courts (on favorise l'tat gazeux, l'entranement par la phase mobile). En
s'exprimant avec un vocabulaire de chromatographie liquide, on peut dire qu'augmenter la temprature
en CPG, c'est augmenter la force d'lution de la phase mobile.
Dans certaines analyses (rarissime aujourd'hui), on travaille en technique isotherme : la temprature de
la colonne est la mme pendant toute l'analyse (quivalent l'analyse isocratique en chromatographie
liquide).
Pour des analyses complexes, pour des chantillons comportant des analytes aux tempratures
d'bullition trs diffrentes et/ou aux interactions avec la phase stationnaire trs diffrentes, il n'est pas
possible d'obtenir une sparation convenable en technique isotherme (pics de tte non spares ou pics
de queue qui tranent trop). On travaille alors en gradient de temprature (quivalent travailler en
gradient de force luante de phase mobile en chromatographie liquide). On augmente la temprature (le
pouvoir luant) au fur et mesure de l'analyse.

5. Dtecteurs
On peut disposer :
- d'une analyse par spectromtrie de masse couple la sortie de colonne. On peut ainsi identifier
chimiquement les analytes lues. Les quipement sont aujourd'hui trs populaires car des prix
relativement accessibles et d'emploi assez simple. Il n'est pas possible d'expliquer en quelques lignes le
couplage CPG-spectromtrie de masse et ce polycopi renvoie le lecteur - ce sujet - des ouvrages
spcialiss.
- de dtecteurs simples et quasi universels comme le catharomtre, le dtecteur ionisation de flamme
(FID), le dtecteur capture d'lectrons. Ces dtecteur signalent la sortie des analytes de la colonne
mais n'en rvlent aucune proprit chimique.
5.1. Catharomtre (dtecteur conductivit thermique) (trs peu utilis de nos jours)
Deux proprits fondent le principe de ce dtecteur :
- la temprature prise par un fil mtallique chauff lectriquement dpend de la conductivit thermique
du gaz qui l'entoure ;
- la rsistance lectrique d'un conducteur varie avec la temprature.

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Le pont de Weahstone schmatis droite est plac une temprature assez leve pour que tous les
analytes lues soient l'tat de gaz. Il est quilibr au dpart lorsque la cellule de rfrence et la cellule
de mesure sont traverses par le gaz vecteur (rglage de zro en contrlant R1 et R2).
Lorsqu'un analyte sort de la colonne et arrive dans la cellule de mesure, sa prsence modifie la
conductivit thermique de l'atmosphre de celle-ci. Selon ce qui a t dcrit ci-avant, le pont de
Weahstone se retrouve en
dsquilibre et un courant lectrique est mesurable par le microampremtre mA Le dsquilibre est
amplifi et enregistr sous forme d'un signal s de tension lectrique. Ainsi, chaque analyte donne un pic
d'lution ou la relation surface de pic = coefficient X quantit d'analyte est applicable (voir chapitre
analyse quantitative et chromatographie).
5.2. Le dtecteur ionisation de flamme (FID) (trs utilis)
Dans une flamme dihydrogne/dioxygne, la combustion de tout compos organique conduit du CO 2
et des sous produits ioniss. Un FID mesure les ions de combustion sous forme d'un courant
lectrique grce la polarisation du brleur. Ainsi, chaque analyte donne un pic d'lution ou la relation
surface de pic = coefficient X quantit d'analyte est applicable (voir chapitre analyse quantitative et
chromatographie).
Remarque :
H2O (pas de combustion videmment), CS2 et HCOOH ne sont pas dtects ;
L'ensemble de dtection est inclus dans un bloc rgl en temprature (en gnral 250C).
Le FID est un dtecteur plus sensible que le catharomtre.

5.3. Dtecteur capture d'lectrons

Dans un dtecteur capture d'lectrons, une source radioactive ionisante (on utilise du tritium ou du
63
Ni) met des lectrons libres dans une chambre d'ionisation et les lectrons ragissent avec les
molcules d'analytes qui atteignent la chambre.

6. Bibliographie
Mthodes instrumentales d'analyse chimique et applications, mthodes chromatographiques,
lectrophorses
et mthodes spectrales ; G. Burgot et J.L. Burgot ; Tec&Doc Lavoisier 2002
Daniel C. Harris, Quantitative chemical anarysis, 6 dition, Freeman and Company, 2003.
M.-L. Garrigues , M. Veron, Apport de la chromatographie gaz-liquide au diagnostic microbiologique, Ann
Biol.
Clin.,1987. 45, 135-143.
Analysing fatty acids by capillary column gas chromatography, GC Bulletin 855, Supelco 1990.

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