EPIGRAPHE

« Aucune science ne profite à celui qui n’y prend goût »

Fernando de Rojas

i
 DEDICACE

A mes parents Monsieur MABENGA Omer et Madame

MATAVUDISA Christine, qui nous ont premièrement donné la vie et se sont donnés corps et
âme pour nous soutenir dans nos études depuis le premier jour jusqu’aujourd’hui,

A ma sœur, et

A mes frères,

Je dédie ce travail.

MABENGA MOSHI Paola

ii
 REMERCIEMENTS

Nous exprimons, avant tout, notre gratitude à l’Eternel, le Maître des

temps et des circonstances, pour la vie, pour son amour, sa miséricorde, et toutes les grâces
dont nous avons été bénéficiaire tout au long de notre cheminement malgré notre finitude
humaine.

Nous adressons nos plus vifs remerciements au Professeur Dr Désiré

MUSUYU MUGANZA pour l’intérêt qu’il a donné à notre sujet, pour sa rigueur scientifique,
ses encouragements ainsi que pour sa disponibilité et sa patience. L’amélioration de ce travail
est le fruit de ses remarques.

Nous tenons à remercier tous les membres de notre famille pour leurs
conseils, leurs prières et spécialement pour leur soutien multiforme et indéfectible. Merci à
vous tous : Enock MABENGA, Siméon MABENGA, Arthios MABENGA ainsi qu’à toi ma
sœur Merveille MABENGA.

Nous remercions nos meilleur(e)s ami(e)s et connaissances qui nous

ont si bien entourée dans les moments de joie, de désespoir ou de doute. Merci à vous d’avoir
été là : Nathan KAZADI, Horty MAVINGA, Armelle NANIWAMBOTE, Enta MPOLO,
Patiano NSEWANGA et Affermie VITA.

Nous nous en voudrons de ne pas adresser nos plus vifs remerciements

à nos collègues de promotion, compagnons de lutte pour les moments de bonheur et pour le
long chemin partagé ensemble tout au long de notre formation. Nous pensons à : Jonathan
MUKANYA, Myriam LUZALA, Messie MUIPATA, Alice KAHINDO, Christ MBELA,
Rael KAVIRA et Astrid MAZALA.

Enfin, nous remercions tous les héros dans l’ombre qui ont contribué de près ou de loin à la
réalisation de ce travail.

iii
TABLE DES MATIERES

EPIGRAPHE...............................................................................................................................i
DEDICACE................................................................................................................................ii
REMERCIEMENTS.................................................................................................................iii
TABLE DES MATIERES.........................................................................................................iv
ABREVIATIONS-SYMBOLES-CONVENTIONS................................................................vii
LISTE DES FIGURES............................................................................................................viii
LISTE DES TABLEAUX.........................................................................................................ix
RESUME....................................................................................................................................x
ABSTRACT...............................................................................................................................xi
INTRODUCTION......................................................................................................................1
CHAPITRE I. GENERALITES SUR LE DIABETE.................................................................5
I.1. DEFINITION....................................................................................................................5
I.2. HISTORIQUE...................................................................................................................5
I.3. LES CHIFFRES DU DIABETE DANS LE MONDE.....................................................6
I.4. ETIOLOGIE ET CLASSIFICATION..............................................................................7
I.4.1. Etiologie.....................................................................................................................7
I.4.2. Classification..............................................................................................................8
I.5. FACTEURS DE RISQUES DU DIABETE...................................................................11
I.6. PRISE EN CHARGE DU DIABETE.............................................................................11
I.6.1. Le régime alimentaire...............................................................................................12
I.6.2. Le régime d’activité physique..................................................................................12
I.6.3. La médication...........................................................................................................13
I.6.4. L’éducation...............................................................................................................13
I.6.5. Plantes médicinales et Phytothérapie du diabète......................................................14
CHAPITRE II. GENERALITES SUR PENIANTHUS LONGIFOLIUS..................................15
II.1. GENERALITES SUR LA FAMILLE...........................................................................15
II.2. DESCRIPTION DE LA PLANTE................................................................................16
II.3. POSITION SYSTEMATIQUE.....................................................................................17
II.4. HABITAT ET REPARTITION GEOGRAPHIQUE....................................................17
II.5. SYNONYMES..............................................................................................................18
II.6. NOMS VERNACULAIRES.........................................................................................18
II.7. USAGES........................................................................................................................19
II.8. ÉTUDES ANTERIEURES PHYTOCHIMIQUES, PHARMACOLOGIQUES ET
TOXICOLOGIQUES............................................................................................................20

iv
CHAPITRE III. GENERALITES SUR ANNICKIA AMBIGUA..............................................23
III.1. GENERALITES SUR LA FAMILLE.........................................................................23
III.2. DESCRIPTION DE LA PLANTE...............................................................................23
III.3. POSITION SYSTEMATIQUE....................................................................................24
III.4. HABITAT ET REPARTITION GEOGRAPHIQUE...................................................25
III.5. SYNONYMES.............................................................................................................25
III.6. NOMS VERNACULAIRES........................................................................................26
III.7. USAGES......................................................................................................................26
III.8. ÉTUDES ANTERIEURES PHYTOCHIMIQUES, PHARMACOLOGIQUES ET
TOXICOLOGIQUES............................................................................................................26
CHAPITRE IV. MATERIELS ET METHODES.....................................................................30
IV.1. MATERIEL D’ETUDE...............................................................................................30
IV.1.1. Identification des plantes.......................................................................................30
IV.1.2. Récolte du matériel végétal...................................................................................30
IV.1.3. Matériels de laboratoire.........................................................................................31
IV.1.4. Réactifs et solvants................................................................................................31
IV.1.5. Animaux de laboratoire.........................................................................................32
IV.2. METHODES................................................................................................................33
IV.2.1. Préparation des extraits totaux aqueux..................................................................33
IV.2.2. Fractionnement des extraits totaux aqueux...........................................................33
IV.2.3. Détermination de l’activité antihyperglycémiante in vivo....................................33
IV.2.3.1. Tests sur les extraits totaux................................................................................34
IV.2.3.2. Tests sur les fractions.........................................................................................34
IV.2.3.3. Détermination des pourcentages d’inhibition.....................................................34
IV.2.3.4. Analyse statistique des résultats.........................................................................35
IV.2.4. Caractérisation sur Chromatographie sur Couche Mince (CCM).........................35
IV.2.4.1. Mise en évidence des polyphénols (flavonoïdes)...............................................35
IV.2.4.2. Mise en évidence des alcaloïdes.........................................................................35
IV.2.4.3. Mise en évidence des terpènes et stéroïdes........................................................36
CHAPITRE V. PRESENTATION DES RESULTATS ET DISCUSSION.............................37
V.1. PRESENTATION DES RESULTATS.........................................................................37
V.1.1. Activité antihyperglycémiante...................................................................................37
V.1.1.1. Tests sur les extraits totaux aqueux.....................................................................37
V.1.1.2. Tests sur les fractions issues des extraits totaux..................................................39
V.1.2. Profil phytochimique sur CCM..................................................................................42
V.2. DISCUSSION...............................................................................................................44
CONCLUSION.........................................................................................................................47

v
REFERENCES.........................................................................................................................48
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES................................................................................48
REFERENCES SITOGRAPHIQUES...................................................................................54
ANNEXES................................................................................................................................55

vi
ABREVIATIONS-SYMBOLES-CONVENTIONS

 µg : microgramme
 ADO : antidiabétiques oraux
 AP. J.-C. : après Jésus-Christ
 AUC : Area under curve (Aire sous courbe)
 CC50 : 50% Cytotoxic Concentration
 CCM : Chromatographie sur Couche Mince
 cm : centimètre
 DG : Diabète gestationnel
 DID : Diabète insulinodépendant
 DNID : Diabète non insulinodépendant
 g : gramme
 GAD : Glutamate acide décarboxylase
 HbA1c : Hémoglobine glyquée
 HFE: Human homeostatic iron regulator protein
 HNF : Hepatocyte Nuclear Factor
 IC50 : Concentration inhibitrice médiane
 IMC : Indice de masse corporelle
 INRB : Institut National de Recherches Biomédicales
 Kcal : Kilocalorie
 Kg : Kilogramme
 L : litre
 mg : milligramme
 mm : millimètre
 MODY: Maturity Onset Diabetes of the Young
 MRC-5: Medical Research Council cell strain 5
 OMS : Organisation Mondiale de la Santé

vii
LISTE DES FIGURES

Figure 1 : Feuilles et fruits de Penianthus longifolius Miers

Figure 2 : Répartition géographique de Penianthus longifolius Miers

Figure 3 : Quelques molécules déjà isolées de Penianthus longifolius Miers

Figure 4 : Vue d’une coupe de l’écorce du tronc (à gauche), des feuilles et des fruits (à droite)
d’Annickia ambigua (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas

Figure 5 : Distribution géographique d’Annickia ambigua (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas

Figure 6 : Formules de certaines substances déjà isolées des plantes du genre Annickia

Figure 7 : Carte de la RD Congo avec un focus sur le site de LuiKotale et les environs

Figure 8 : Vues des animaux dans les cages (à gauche) et d’une opération de gavage des
souris par sonde gastrique

Figure 9 : Courbes de l’évolution des glycémies dans le temps suite à l’action des extraits
totaux

Figure 10 : Aires sous courbes correspondant à l’évolution des glycémies dans le temps suite
à l’action des extraits totaux

Figure 11 : Courbes de l’évolution des glycémies dans le temps suite à l’action des
différentes fractions testées

Figure 12 : Aires sous courbes correspondant à l’évolution des glycémies dans le temps suite
à l’action des différentes fractions testées

Figure 13 : Chromatogrammes CCM des fractions polaires des deux extraits tels qu’observés
à 366 nm (à gauche) et à la lumière du jour (à droite) après application du réactif de Neu

Figure 14 : Plaques CCM présentant les chromatogrammes CCM des fractions polaires des
deux extraits tels qu’observés après sprayage avec le réactif de Dragendorff (à gauche) et
avant sprayage (à droite)

Figure 15 : Chromatogrammes CCM des fractions polaires des deux extraits tels qu’observés
à la lumière du jour (Photo à gauche) et à 366 nm (Photo à droite) après sprayage avec le
réactif de Lieberman-Burchard

viii
LISTE DES TABLEAUX

Tableau I : Résultats du test des extraits totaux aqueux sur l’évolution des glycémies
moyennes en fonction du temps (en minutes) chez les souris.

Tableau II : Taux d’inhibition (en %) des glycémies de base par les extraits totaux aux
différents temps

Tableau III : Résultats du test des fractions des extraits totaux sur l’évolution des glycémies
moyennes en fonction du temps (en minutes) chez les souris.

Tableau IV. Taux d’inhibition (en %) des glycémies de base par les différentes fractions des
extraits totaux aux différents temps

Tableau V : Résultats du test de Tukey (comparaisons par paires) sur les aires sous courbes

ix
RESUME

Objectifs :

Évaluer les activités antihyperglycémiantes des extraits aqueux totaux lyophilisés

d'écorces de tronc d'Annickia ambigua et d'écorces de racines de Penianthus longifolius et de
leurs fractions respectives.

Matériels et méthodes :

Les effets antihyperglycémiants des extraits d'Annickia ambigua et de Penianthus

longifolius ont été étudiés chez des souris Swiss rendues hyperglycémiques par surcharge en
glucose à des doses d’extraits de 250 et 500 mg/kg d'un côté, et de l'autre côté, les fractions
polaires et non polaires obtenues à partir de ces extraits totaux aqueux ont également été
testées dans le même modèle antihyperglycémique.

Résultats :

Les extraits aqueux bruts dosés à 500 mg/ kg ont montré une activité significative
comparable à celle du glibenclamide, la référence utilisée.

Globalement, les fractions polaires ont présenté des effets dose-dépendants plus prononcés
que ceux des fractions non polaires mais cette activité n'a pas été aussi significative que celle
du glibenclamide dans le test de tolérance au glucose par voie orale.

Conclusion :

Les résultats obtenus tendent à confirmer les usages contre le diabète des plantes
testées en ethnomédecine. L'activité antihyperglycémique des échantillons trouvés plus actifs
des deux plantes pourrait être plus probablement attribuée à la présence d'alcaloïdes en
particulier les polaires, et dans une certaine mesure aux substances polyphénoliques présentes
dans les extraits testés.

x
ABSTRACT

Objectives:

To assess the antihyperglycemic activities of lyophilized total aqueous extracts of

Annickia ambigua trunk bark and Penianthus longifolius root barks and of their fractions.

Materials and methods:

The antihyperglycemic effects of the extracts of Annickia ambigua and Penianthus

longifolius were studied in glucose-overloaded hyperglycemic Swiss mice at doses of 250 and
500 mg/kg on one side, and on the other side, polar and non-polar fractions obtained from the
crude aqueous extracts were as well tested in the same antihyperglycemic assay.

Results:

The crude aqueous extracts at doses of 500 mg/ kg showed a significant activity
which was comparable to glibenclamide’s, the used reference.

Globally, the polar fractions exhibited dose-dependent effects which were more pronounced
than that of non-polar fractions but this activity was not as significant as that of glibenclamide
in the oral glucose-tolerance test.

Conclusion:

The obtained results tend to confirm the antidiabetic uses of the tested plants in the
ethnomedicine. The antihyperglycemic activity of most active tested samples of the two plants
could be more likely attributed to the presence of alkaloids in particular the polar ones, and to
a certain extent to polyphenolic substances present in the tested extracts.

xi
INTRODUCTION

A l’heure actuelle où l’humanité fait face à des maladies de toutes sortes et où la

prise en charge des questions sanitaires se révèle être un véritable problème de société, surtout
dans les pays en voie de développement, un recours aux ressources locales facilement
disponibles constituerait une véritable solution palliative (Mangambu et al., 2014). Malgré les
progrès de la biologie et de la médecine, la majorité des populations des pays en voie de
développement n’ont pas suffisamment accès aux soins de santé suite à leur faible pouvoir
d’achat. Dans ce contexte, les ressources végétales occupent une grande place dans la vie de
ces populations (Stora, 2010).

Le diabète est l’une des quatre maladies non transmissibles (MNT) prioritaires
identifiées par l’OMS, aux côtés des maladies cardiovasculaires (qui couvrent les crises
cardiaques et les accidents vasculaires cérébraux), du cancer et des affections respiratoires
chroniques. Reconnu par l’OMS comme une épidémie mondiale, le diabète inflige
aujourd’hui un lourd fardeau aux systèmes de santé, déjà fort dépourvus, des pays à bas et
moyens revenus et pourrait devenir la septième principale cause de décès dans le monde d’ici
2030 (Traoré-Kissima et al., 2021).

En effet, le diabète, une maladie endocrinienne ubiquitaire touche environ 2% de la

population mondiale et selon l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS), le nombre des
personnes atteintes du diabète est passé de 108 millions en 1980 à 422 millions en 2014. La
prévalence mondiale du diabète chez les adultes de plus de 18 ans est passée de 4.7% en 1980
à 8.5% en 2014. Pour 2017, on estime que plus de 9% de la population mondiale adulte âgée
de 20 à 79 ans étaient atteints par le diabète (Statista Research Department, 2018).

En République Démocratique du Congo (RDC), où les problèmes de santé sont

préoccupants, le diabète représente 1% de la population (OMS- profils des pays pour le
diabète 2016). Un mauvais suivi des diabétiques conduit fréquemment à la mort. La chronicité
de cette affection, exige chez le diabétique un traitement à vie, bien suivi, très onéreux, faisant
appel à l’association de plusieurs thérapies et une auto-surveillance régulière (Bielelile et al.,
2000). Ces coûts prohibitifs pour les populations des pays pauvres, qui accèdent difficilement
aux médicaments modernes, orientent la plupart des malades diabétiques surtout dans les pays
dits moins avancés vers les remèdes traditionnels.

Selon l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS, 2013), plus de 80% des

populations africaines font recours à la médecine et la pharmacopée traditionnelles pour faire
face aux problèmes de santé. Sur plus ou moins 300.000 espèces de plantes recensées sur la

1
planète, plus de 200.000 se trouvent dans les pays tropicaux d’Afrique et ont des vertus
médicinales. Dans cet arsenal, les plantes utilisées pour traiter le diabète occupent une place
importante (Mangambu et al., 2014). Un grand nombre de plantes ont prouvé leur efficacité
dans la prise en charge du diabète notamment de l'hyperglycémie (Rizvi et al., 2013 ;
Mentreddy et al., 2008). Par exemple, le glucophage hypoglycémiant populaire (metformine)
est dérivé de Galega officinalis (Grover et al., 2002).

Le manque d'efficacité, le traitement à vie avec des médicaments modernes, les effets
secondaires sur la santé associés et les prix élevés, entre autres, sont des réalités de l’existence
difficile qui provoquent de lourdes charges sanitaires et économiques pour les patients, en
particulier dans les pays en développement. Aujourd'hui, cela a incité la recherche de
médicaments bon marché, sûrs et fiables notamment à partir de plantes médicinales. Ainsi, les
chercheurs de par le monde ont initié des programmes de recherche permettant d’avoir une
connaissance plus large sur les plantes médicinales notamment sur leur composition, leur
innocuité et leur efficacité et de valoriser leurs utilisations.

Pour apporter notre contribution à ce programme, nous avons entrepris dans le cadre
de notre travail de fin d’études, les investigations sur les écorces de racines de Penianthus
longifolius et les écorces de tronc d’Annickia ambigua.

Le choix de ces plantes a été motivé par leurs utilisations en médecine traditionnelle
comme antidiabétiques et aphrodisiaques, mais également parce que très peu de travaux
chimiques et pharmacologiques ont été antérieurement effectués sur celles-ci. Notre
contribution vise à évaluer l’activité antihyperglycémiante par administration orale des
extraits aqueux de ces plantes chez les souris, ainsi que la composition chimique de l’extrait
étudié.

QUESTION DE RECHERCHE
Penianthus longifolius et Annickia ambigua posséderaient-elles quelques propriétés
hypoglycémiantes par voie orale et seraient-elles atoxiques ?

HYPOTHESE
Penianthus longifolius et Annickia ambigua posséderaient une importante activité
hypoglycémiante, qui justifierait leur forte utilisation en médecine traditionnelle dans le
traitement du diabète et des faiblesses sexuelles qui en sont une des conséquences.

BUT
Le but poursuivi par la présente étude est de contribuer à l’amélioration de la prise en
charge des patients diabétiques.
2
OBJECTIFS

Objectif général :
L’objectif général de ce travail consiste à évaluer in vivo l’activité
antihyperglycémiante des extraits aqueux des écorces des racines de Penianthus longifolius et
d’écorces de tronc d’Annickia ambigua par voie orale.

Objectifs spécifiques :
 Obtenir des extraits totaux aqueux lyophilisés des deux plantes en étude ;
 Déterminer in vivo l’activité antihyperglycémiante chez les souris Swiss de l’extrait
aqueux des écorces des racines de Penianthus longifolius par voie orale ;
 Déterminer in vivo l’activité antihyperglycémiante chez les souris Swiss de l’extrait
aqueux des écorces de tronc d’Annickia ambigua par voie orale ;
 Opérer un fractionnement de ces 2 extraits ;
 Déterminer in vivo l’activité antihyperglycémiante des différentes fractions obtenues
chez les souris Swiss ;
 Etablir les profils chimiques des extraits et/ ou fractions les plus efficaces.

INTERET DE L’ETUDE
Cette étude pourra permettre de :
 Fournir des éléments pharmacologiques pour une bonne prise en charge des patients
diabétiques ;
 Mettre au point des initiatives pouvant déboucher sur la fabrication des médicaments
traditionnels améliorés.

LIEU D’ETUDE
La présente étude a été réalisée à l’INRB (Institut National de Recherches
Biomédicales) de Kinshasa avec le concours de différents services (Laboratoire de
Toxicologie, Laboratoire de Biochimie, Laboratoire Max Planck Institute & Service
d’Animalerie).

DIVISION DU TRAVAIL
Outre l’introduction et la conclusion, notre travail comprend deux parties :

 La première comportant 3 chapitres qui traitent de l’aperçu général sur le diabète sucré et
des généralités sur les plantes en étude (Penianthus longifolius et Annickia ambigua) ;

3
 La seconde partie contenant 2 chapitres, présente les matériels et méthodes utilisés, les
résultats obtenus ainsi que la discussion desdits résultats.

PARTIE
BIBLIOGRAPHIQUE

4
 CHAPITRE I. GENERALITES SUR LE DIABETE

I.1. DEFINITION

Le diabète est une maladie métabolique caractérisée par la présence d’une

hyperglycémie chronique résultant de :

o Une déficience de la sécrétion d’insuline (insulinopénie) ;

o Une anomalie de l’action de l’insuline sur les tissus cibles (insulinorésistance) ;
o L’association des deux (OMS, 2013).

I.2. HISTORIQUE

Le diabète existe probablement depuis la haute antiquité, car aussi loin que nous
puissions remonter dans l’histoire de l’humanité, il a été fait mention dans les documents très
anciens de la médecine égyptienne des signes de l’existence de ladite maladie.

Le mot diabète vient du grec ancien tiré du verbe grec diabaïno, qui signifie «
traverser ». Les médecins grecs de l’école d’Hippocrate de Cos, avaient observé ce syndrome
diabétique : les malades semblaient uriner aussitôt ce qu'ils venaient de boire, comme s'ils
étaient « traversés par l'eau » sans pouvoir la retenir. Puis ils maigrissaient, malgré une
nourriture abondante, et mourraient en quelques semaines ou mois.

C'est Praxagoras de Cos (384-322 av. J.-C.) disciple d'Hippocrate, qui évoqua pour la
première fois la nocivité des humeurs sucrées. Au VIIème siècle ap. J.-C., les Chinois
faisaient part de leurs observations et de leurs interprétations concernant les urines sucrées et
proposaient un traitement proche des méthodes modernes qui recommandent aux diabétiques
de s'abstenir de consommer de l'alcool et de l'amidon. Et au XVIIème siècle, on découvrit que
dans certains cas les urines n'avaient pas de goût (diabète insipide), dans d'autres, les urines
étaient sucrées (diabète sucré ou hyperglycémie). Ce n’est que plus tard que Claude Bernard
mettra en évidence le sucre dans le sang des personnes atteintes du diabète. Selon l’histoire
moderne du diabète, retenons que Joseph Von Mering et Oskar Minkowski ont observé en
1889 que le retrait du pancréas conduit à une augmentation de la glycémie, suivi d'un coma et
enfin de la mort, symptômes du diabète sucré. En 1922, Frederick Banting et son assistant
Charles Best ont remarqué que l'homogénéisation d'un pancréas et l'administration par
injection de l'extrait qui en dérive améliore au contraire l'état du sujet. En 1942, la découverte
de l’activité hypoglycémiante des sulfamidés et de leur mécanisme d’action par Auguste
Loubatières à Montpellier (France) furent une autre avancée.

5
 La mystérieuse hormone responsable de cet effet, l'insuline, n'a été séquencée par
Frederick Sanger qu'en 1953. Et entre 1959 et 1960, Yalow et Berson mirent au point un
dosage radioimmunologique de l’insuline, point de départ méthodologique extrêmement
fructueux de la plupart des dosages hormonaux.

I.3. LES CHIFFRES DU DIABETE DANS LE MONDE

Le diabète est « l’un des principaux tueurs au monde », avec l’hypertension artérielle
et le tabagisme, selon l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS). Cette maladie constitue un
problème de santé publique majeur et malgré les efforts de prévention, la pandémie se
poursuit.

En 2014, le diabète affectait 422 millions de personnes au niveau mondial, alors qu’il
ne concernait que 108 millions de patients dans le monde en 1980 et que les premières
prévisions de l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) et de l’International Diabetes
Federation (IDF) s’inquiétaient en 1990 du risque de voir le diabète affecter 240 millions de
personnes en 2025…

En 2019, le diabète affecte plus de 463 millions de personnes dans le monde, dont
59 millions en Europe (Atlas 2019 de la International Diabetes Federation). En 2021, le
diabète affecte plus de 537 millions de personnes dans le monde (soit 1 personne sur 10), dont
61 millions en Europe (Atlas 2021 de la International Diabetes Federation). De plus, 6, 7
millions de personnes sont décédées en cette année en raison de leur diabète, soit une
augmentation de 2,5 millions par rapport à 2019 (4,2 millions de décès) !

En 2021 toujours, on a estimé que 81 % des adultes diabétiques vivaient dans des
pays à revenu faible ou intermédiaire (contre 79 % en 2019). Les prévisions actuelles de ces
deux organismes (OMS et IDF) sont très préoccupantes : ils annoncent 643 millions de
patients diabétiques pour 2030 et 784 millions pour 2045 (http://ceed-diabete.org/fr/le-
diabete/les-chiffres/).

Les chiffres, en valeur absolue, sont sans doute très inquiétants mais ce qui l'est plus
c'est la progression vertigineuse de la maladie. L'incidence aura été multipliée par 15 (au
moins) en 40 ans. Le diabète est un fléau contre lequel les forces mobilisées se révèlent
encore très insuffisantes.

6
I.4. ETIOLOGIE ET CLASSIFICATION

I.4.1. Etiologie

Le diabète est d’une étiologie difficile à déterminer. Mais, selon les origines nous
avons :

Le diabète dit "essentiel" qui se divise en Diabète Insulinodépendant (DID) ou de

type 1 et en Diabète Non Insulinodépendant (DNID) ou de type 2.

Le diabète du type 1 est insulinoprive. La carence en insuline proviendrait de la

présence d’anticorps anti-cellules bêta et des signes inflammatoires dans l’îlot de Langerhans
provoquant une insulinite.

Le poids de l’hérédité diffère selon qu’il s’agit du diabète de type 1 ou du diabète de

type 2. Dans le diabète de type 1, le risque se situe entre 4 et 8%, plus précisément 8 % si le
père est diabétique, 4 % si c’est la mère (mais 30 % si les deux parents le sont). Il est donc
utile de se construire un arbre généalogique pour repérer les membres de sa famille
diabétiques et connaître son patrimoine génétique.

Par contre, dans le diabète de type 2, l’hérédité semble être la cause principale du
développement de la maladie. Lorsque l’un des deux parents est diabétique de type 2, le
risque de transmission à la descendance est de l’ordre de 40 % et si les deux parents sont
atteints, le risque grimpe à 70 %. Cependant, ils ont 50% de risque d’être porteurs du gène
diabétique sur le chromosome 6
(https://www.federationdesdiabetiques.org/information/diabete).

L’obésité joue aussi un rôle majeur ; la forte libération d’acides gras libres dans la
circulation, entraîne l’insensibilité des cellules à l’insuline et par conséquent une
hyperglycémie.

Outre le diabète dit "essentiel", il existe aussi les diabètes secondaires qui ont des
causes multiples :

o Les causes pancréatiques : pancréatectomie, pancréatite chronique, cancer du

pancréas, hémochromatose...
o Les causes endocriniennes : hypersécrétion d'une hormone hyperglycémiante
(acromégalie, syndrome de Cushing, phéochromocytomes...) ou inhibition de
l'insulinosécrétion (syndrome de Conn avec hypokaliémie) ;
o Les causes iatrogènes : corticoïdes, œstrogènes, diurétiques hypokaliémiants...

7
 o Les syndromes génétiques : trisomie 21, syndrome de Turner ...
o Les diabètes nutritionnels de 3ème type observés dans certains pays du tiers-monde.

I.4.2. Classification

Les données essentielles pour le diagnostic étiologique sont cliniques : âge, poids,
existence d’une cétonurie, hérédité familiale de diabète (OMS, 2021 ; FID, 2021).

A. Diabète de type 1
Il est remarquable par son début brutal : syndrome cardinal associant
polyuropolydipsie, polyphagie, amaigrissement et asthénie chez un sujet jeune, mince,
avec cétonurie associée à la glycosurie. On ne retrouve d’antécédent familial que dans
1 cas sur 10. Il survient essentiellement avant 20 ans, mais connaît 2 pics d’incidence
vers 12 et 40 ans. Il peut être associé à d’autres maladies auto-immunes (vitiligo,
maladie de Basedow, thyroïdites, maladie de Biermer).
B. Diabète de type 2
A l’opposé, il se caractérise typiquement par la découverte fortuite d’une
hyperglycémie chez un sujet de plus de 40 ans avec un surpoids ou ayant été obèse,
avec surcharge pondérale de prédominance abdominale (rapport taille / hanche
supérieur à 0,8 chez la femme, supérieur à 0,95 chez l’homme). Le plus souvent, on
retrouve une hérédité familiale de diabète non insulino-dépendant. Le diabète de type
2 est souvent associé à une hypertension artérielle essentielle et/ou à une
hypertriglycéridémie. Le diagnostic se fait le plus souvent lors d’un examen
systématique. En effet, le diabète de type 2 est asymptomatique. Le retard au
diagnostic est d’environ 5 ans. Ainsi, dans 20 % des cas, il existe une complication du
diabète au moment du diagnostic.
C. Le diabète gestationnel (DG)

Se caractérise par une glycémie élevée au cours de la grossesse.

Il peut survenir à n’importe quel moment de la grossesse (il cependant plus fréquent après
24 semaines) (FID, 2019).

D. Les diabètes iatrogènes

Ils correspondent aux hyperglycémies provoquées par :

o Corticoïdes (sous toutes les formes) ;

o Bétabloquants non cardio-sélectifs ;
o Diurétiques hypokaliémiants ;
8
 o Progestatifs de synthèse de type norstéroïdes etc.
E.

9
 E. Les autres étiologies du diabète

Elles ne sont pas à rechercher systématiquement. En cas de doute diagnostique

uniquement (diabète n’ayant pas les caractères habituels du type 1 ou du type 2), on évoquera
une autre étiologie en fonction du contexte clinique :

o Pancréatite chronique calcifiante :

La découverte d’un diabète chez un homme de plus de 40 ans, dénutri, avec
des antécédents d’alcoolisme doit la faire suspecter. La pancréatite chronique
calcifiante associe au déficit endocrine, une insuffisance pancréatique externe
avec stéatorrhée et parfois malabsorption dont le traitement relève des extraits
pancréatiques. Le traitement de ces malades par insulinothérapie comporte un
risque majeur d’hypoglycémies sévères en raison d’une carence associée en
glucagon. Des calcifications pancréatiques peuvent être mises en évidence sur
le cliché d’abdomen sans préparation, voire le scanner abdominal. On observe
également des pancréatites chroniques calcifiantes familiales ou pancréatites
calcifiantes nutritionnelles, chez les immigrés africains en particulier.
o Hémochromatose :
Elle peut également s’accompagner d’un diabète. Le dosage du fer sérique et
du coefficient de saturation de la transferrine permet le diagnostic confirmé par
la mise en évidence de la mutation HFE. Le seul traitement efficace de la
surcharge ferrique consiste en des saignées initialement hebdomadaires mais le
diabète est irréversible.
o Diabètes endocriniens :
Ils sont associés à l’hyperthyroïdie, au phéochromocytome, au syndrome de
Cushing, à l’acromégalie, à la maladie de Conn, au glucagonome, au
somatostatinome. Seuls les signes cliniques évocateurs de ces différentes
pathologies doivent amener à pratiquer des dosages hormonaux nécessaires au
diagnostic.
o Cancer du pancréas :
L’échographie et le scanner du pancréas ne doivent pas être systématiques lors
de la découverte d’un diabète non insulino-dépendant. Si le tableau clinique est
évocateur (amaigrissement, vitesse de sédimentation accélérée, fièvre, ictère...)
chez un sujet de plus de 40 ans sans antécédent familial de diabète, on pourra
demander des examens d’imagerie pancréatique ou des marqueurs biologiques
à la recherche d’un cancer du pancréas.

10
o Diabète de type 3 :
Il doit être suspecté chez les africains et les indiens. Ce diabète apparaît entre
30 et 40 ans. Son début est aigu, généralement avec cétose. L’évolution se fait
secondairement vers un mode non insulino-dépendant. Il n’y a pas de
marqueur d’auto-immunité, pas d’insuffisance pancréatique externe. Ce
diabète associe carence insulinique et insulinorésistance.
o Diabète MODY (Maturity Onset Diabetes of the Young):
C’est un diabète d’hérédité autosomale dominante. Il s’agit d’un diabète non
insulinodépendant, survenant avant l’âge de 25 ans, parfois même dans
l’enfance. Le diabète MODY II réalise une hyperglycémie bénigne familiale
due à une mutation de la glucokinase, enzyme dont le métabolisme régule la
sécrétion d’insuline. Tout se passe comme si le « lecteur de glycémie » de la
cellule β du pancréas était déréglé, lisant 1 g/l lorsque la glycémie est en réalité
à 1,20 ou 1,40 g/l. Les diabètes MODY I, III et IV sont dus à des mutations de
facteur de transcription nucléaire (HNF) retrouvés au niveau du foie et du
pancréas. Ils s’accompagnent d’une carence insulino-sécrétoire et leur
évolution est souvent plus sévère que celle du MODY II, avec nécessité parfois
d’une insulinothérapie.
o Diabète secondaire à une mutation de l’ADN mitochondrial :
Il associe une surdité de perception et se caractérise par une hérédité
maternelle. Il peut s’associer à des atteintes tissulaires diverses, musculaires,
neurologiques, cardiaques ou rétiniennes. Ce diabète est parfois d’emblée
insulino-dépendant.
o Diabète lipoatrophique congénital ou acquis :
Il est caractérisé par la disparition du tissu adipeux. Il existe une insulino-
résistance majeure avec hyperlipidémie et stéatose hépatique. A l’examen
clinique, on peut retrouver un acanthosis nigricans (pigmentation brunâtre
avec aspect épaissi et velouté de la peau et nombreux papillomes au niveau du
cou, des aisselles, de l’ombilic) témoin de l’insulino-résistance.
o Autres étiologies rares : pancréatectomie totale, mucoviscidose, cirrhose
hépatique, insuffisance rénale sévère. Formes cliniques atypiques
o Diabète de type 1 d’évolution lente : il s’observe chez les personnes de plus de
40 ans avec ou sans surpoids, présentant un diabète non insulino-dépendant
non cétosique mais associé à une maladie auto-immune (dysthyroïdie, maladie
de Biermer, vitiligo). Chez ces patients, l’existence d’une insulinite auto-

11
 immune mise en évidence par la positivité de marqueurs d’auto-immunité
(anticorps anti-îlots de Langerhans, anticorps anti-GAD (Glutamate Acide
Decarboxylase)) est un argument en faveur d’une insulinothérapie dès le
diagnostic. Le diabète est alors facile à équilibrer avec de petites doses
d’insuline.

I.5. FACTEURS DE RISQUES DU DIABETE

Les principaux facteurs de risques sont :

a. Obésité et facteurs environnementaux

 IMC>30
 Alimentation
 Sédentarité
b. Hérédité
 Prédisposition familiale.
c. Age
 Patients les plus touchés entre 40 et 59 ans.
d. Grossesse
 Diabète gestationnel : 3% des femmes enceintes ;
 Risque ultérieur de diabète de type 2 ;
 Risque plus élevé chez l’enfant ;
 Syndrome métabolique.

I.6. PRISE EN CHARGE DU DIABETE

Elle se fait par :

 La recherche des facteurs de risques ;

 Recherche des complications : oculaires, rénales, neurologiques,
cardiovasculaires, lésions des pieds ;
 Contrôle de l’HbA1c : ≤ 7

La thérapie repose ainsi sur les quatre piliers suivants :

 Régime alimentaire ;
 Régime d’activité physique ;
 Médication ;
 Éducation.

12
I.6.1. Le régime alimentaire

Le régime alimentaire joue un rôle très important aussi bien chez les patients
insulinodépendants que chez les patients non insulinodépendants. Il doit être établi en rapport
avec l’activité et le poids du patient.

Ainsi, chez le diabétique non obèse, les besoins énergétiques seront de :

 25 kcal/kg/24 heures pour un adulte au repos soit 1750 à 2100 kcal pour un
sujet de 70 kg ;
 30 à 40 kcal/kg/24 heures pour un travailleur sédentaire soit environ 2100 à
2300 kcal par jour pour un sujet de 70 kg.

Chez le diabétique obèse, la ration calorique doit être diminuée pour provoquer un
amaigrissement.

Ainsi, on recommande :

- 1000 à 1200 kcal/24 heures chez l’adulte au repos ;

- 1400 à 1700 kcal/24 heures chez les sujets ayant une activité professionnelle
modérée ; la restriction glucidique est très marquée, se situant entre 100 à 120 g
de glucides par 24 heures.

Dans certains cas, le régime alimentaire suffit à lui seul comme traitement efficace.

I.6.2. Le régime d’activité physique

L’activité physique est le pilier du traitement non pharmacologique du diabète.

En règle générale, l’exercice physique a un effet hypoglycémiant qui se fait sentir

immédiatement ou entre la sixième et la quinzième heure après la séance. Cet effet peut
persister pendant vingt-quatre heures.

Lors des activités musculaires intenses, les muscles utilisent davantage le glucose
comme source d’énergie facilement utilisable et de ce fait, ils deviennent plus sensibles à
l’action de l’insuline. Lorsque le glucose vient à, manquer, l’organisme recourt aux lipides
comme source énergétique pour continuer le travail.

Pour qu’il soit bénéfique, le programme d’exercice physique recommandé à un

patient diabétique doit comprendre un minimum de trois séances par semaine d’au moins 20
minutes chacune. Idéalement, il devrait consister en une séance quotidienne de 30 minutes.

13
Il permet, non seulement la perte de poids chez le sujet obèse, mais aussi l’absorption du
glucose par les muscles. Mais cela doit toujours tenir compte de la forme physique et de l’état
de santé de chaque patient.

I.6.3. La médication

 Pour le diabète de type 1 :

L’insuline est essentielle pour la survie. Elle ne doit jamais être cessée. L’arrêt
prolongé de l’insuline provoquera un phénomène d’acidocétose diabétique. Ce déséquilibre
biologique causé par le manque d’insuline résulte en une accumulation d’acide lactique et de
cétose qui sont mortels. L’insulinothérapie avec 2 à 4 injections sera nécessaire pour contrôler
les glycémies de la journée.

 Pour le diabète de type 2 :

Lorsque la diète, le contrôle du poids et l’exercice ne suffisent pas pour acquérir un

contrôle idéal des glycémies, une thérapie médicamenteuse sera nécessaire. Plusieurs régimes
thérapeutiques sont possibles :

o Une monothérapie orale :

 Les biguanides
 Les sulfamidés hypoglycémiants
 Les inhibiteurs de l’alpha-glucosidases
 Insulino-sécréteurs
o Une bithérapie orale : en cas d’un échec primaire ou secondaire de la monothérapie
orale initiale, il est recommandé une bithérapie orale c'est-à-dire une association de
deux classes d’hypoglycémiants :
 Biguanides et sulfamidés ;
 Biguanides et inhibiteurs des alpha-glucosidases ;
 Sulfamidés et inhibiteurs des alpha-glucosidases.
o Une insulinothérapie : si un diabète de type 2 demeure mal équilibré, il faut passer à
un traitement par insuline. Si l’insulinothérapie ne permet pas d’obtenir une
amélioration nette du contrôle de glycémie, on peut l’associer à des biguanides qui en
potentialisent l’action.

14
I.6.4. L’éducation

Le patient doit comprendre le lien étroit entre la médication, l’exercice physique et le

régime alimentaire pour qu’il s’implique lui-même dans la réussite du traitement.

L’hygiène des pieds joue un rôle de premier plan chez les diabétiques, sinon on peut
craindre la survenue : d’ulcères de tailles variables, susceptibles de creuser en profondeur
l’épaisseur de la jambe. De mal perforant plantaire, constitué par une ulcération indolore. Il
peut entraîner une lésion pouvant atteindre l’os et nécessitant la suppression des points
d’appui ainsi qu’une désinfection locale avec, si besoin, l'utilisation d’antibiotiques par voie
générale.

Un autre moyen de lutter contre les complications du diabète est d'éviter ce que la
médecine appelle "les facteurs de risque", c'est à dire un terrain qui favorise l'apparition et le
développement d'une pathologie. Dans le cas des complications du diabète, le tabac, l'excès
d'alcool et de cholestérol sont clairement montrés du doigt.

I.6.5. Plantes médicinales et Phytothérapie du diabète

Le diabète de type 2 est une maladie dont l’incidence ne cesse de croître. Les thérapeutiques
évoluent afin de permettre une meilleure prise en charge des patients. Ces derniers sont de
plus en plus favorables aux thérapeutiques naturelles. Le recours à la phytothérapie dans le
traitement du diabète est fréquent dans tous les continents et plus particulièrement en Afrique.
Sa pratique est transmise oralement et de façon rituelle. Aussi plusieurs études ayant pour
objet d’inventorier les plantes antidiabétiques ont déjà été menées et de nombreuses autres
continuent à être conçues et exécutées ci et là à travers le monde, et notamment en R.D.
Congo (Zabo et al., 2018 ; Mangambu et al., 2014 ; Katemo et al., 2012 ; etc.)

Il en résulte que sur la base de la tradition ou d’études pharmacologiques ou cliniques, les

plantes employées dans le diabète de type 2 et ses complications, sont essentiellement des
plantes qui favorisent la perte de poids, diminuent la glycémie, la tension artérielle et la
cholestérolémie. Certaines plantes antioxydantes pourraient également être bénéfiques.

Plusieurs composés bioactifs isolés des plantes à propriété antidiabétique ont déjà été mis en
évidence. Ils appartiennent à diverses classes phytochimiques à l’instar des mucilages
(glucomannanes et autres), des pectines, des glycanes et peptidoglycanes, des protéines et
peptides, des polyphénols comme les flavonoïdes (épicatéchine, quercétine etc.), des stéroïdes
et triterpénoïdes (acide oléanolique, ginsénosides etc.), des alcaloïdes (berbérine, dioscorétine,

15
galégine etc.) et divers autres composés (e.g. S-allylcystéine sulfoxyde, S-méthylcystéine
sulfoxyde etc.) (Gbekley et al., 2017).

16
 CHAPITRE II. GENERALITES SUR PENIANTHUS LONGIFOLIUS

II.1. GENERALITES SUR LA FAMILLE

Penianthus longifolius est une plante appartenant à la famille des Menispermaceae.

C’est une famille des plantes dicotylédones qui comprend environ 520 espèces réparties en 75
genres. Ce sont pour la plupart des lianes ou des arbustes érigés ou rampants des régions
tempérées chaudes à tropicales.

Cette famille est réputée pour sa richesse en dérivés

benzyltetrahydroisoquinoliniques et aporphiniques y compris sous leurs formes dimériques.
Près de 1900 alcaloïdes ont déjà été décrits dans cette famille, dont certains se sont révélés
d’une importance certaine dans le domaine médical et pharmaceutique, à l’instar de la
tubocurarine, aux propriétés myorelaxantes, isolée des Curarea, Chondrodendron,
Sciadotenia et Telitoxicum et qui a depuis servi au développement d’autres analogues
synthétiques plus efficaces comme atracurium (Marshal & Waigh, 1994). Par ailleurs, les
racines de Jateorhiza palmata sont utilisées pour soigner les maladies gastriques et la
dysenterie. Les Tinospora sont connues en Asie pour leurs vertus antipyrétiques.

D’autres Menispermaceae sont utilisées comme poisons de pêche à l’exemple des

fruits d’Anamirta cocculus ou encore servent dans la fabrication des colorants à l’instar des
écorces de Fibraurea etc.

Les espèces du genre Penianthus sont des arbrisseaux à arbustes aux feuilles simples,
rassemblées au sommet des rameaux ; pétiole anguleux, épaissi aux deux extrémités ; limbe
entier, souvent très grand, obovale, ovale-oblong ou oblancéolé, cunéé ou arrondi à la base,
obtusément acuminé au sommet, cartacé, penninervé. Inflorescences en pseudo-ombelles ou
en glomérules naissant sur les troncs ou sur les rameaux feuillés. Fleurs ♂ à 6-10 sépales,
souvent 3-verticillés ; fleurs ♀ à 6 sépales, 2-verticillés, les extérieurs pubérulents, les
intérieurs concaves et subovales ; pétales 6, très petits ou absents ; staminodes 6 ou absents ;
carpelles 3 ; ovaires ellipsoïdes, uniovulés, pubescents ; styles réduits ou absents ; stigmates
étalés horizontalement. Les fruits sont des drupes 2, souvent réduites à 1 par avortement,
oblongues-elliptiques, droites, jaune orangé ; exocarpe coriace ; les graines sont exalbuminées
et les cotylédons charnus (Troupin, 1951).

17
II.2. DESCRIPTION DE LA PLANTE

Penianthus longifolius est un arbrisseau érigé, pouvant atteindre 2,50 m de haut,

gris olivâtre, entièrement glabre ; rameaux fortement anguleux, souvent verruqueux. Feuilles
érigées à pétiole dilaté à la base, géniculé au sommet, de 2-10 cm de long, limbe obovale à
obovale-oblong, cunéiforme à subarrondi à la base, cuspidé-acuminé au sommet, de 5-25 cm
de long et de 3-15 cm de large ; nervures secondaires au nombre de 5-10 paires, saillantes sur
la face inférieure, s’anastomosant près du bord du limbe, les 2 basilaires opposées, les
nervures tertiaires transversales et espacées. Inflorescences mâles situées dans la partie
feuillée des rameaux ; glomérules subglobuleux, de 3-6 mm de diamètre supportés par un
pédoncule de 37 mm. Fleurs mâles très brièvement pédicellées, le plus souvent sessiles,
nombreuses ; sépales 8-10, groupés en 2 verticilles, les extérieurs au nombre de 3-4, de plus
ou moins 1mm de long, les intérieurs 5-6, obovales, de 2-3 mm de long ; pétales absents ;
étamines 5-6, libres ou subcoalescentes, de 2-3 mm de long. Inflorescences femelles en
ombelles axillaires ou extraaxillaires, brièvement pédonculées, entourées de nombreuses
bractées et terminées par 5-6 pédicelles de plus ou moins 2,5 mm de long ; sépales, les
extérieurs 3, de 1,2 mm de long et de 1 mm de large, les intérieurs de 2-2,5 mm de long et de
1-1,2 mm de large ; pétales 6 ou absents, subspatulés, charnus ; staminodes 6 ou absents ;
ovaire largement ellipsoïde, de 1,5 mm de long et de 1 mm de large. Infrutescences à
pédoncule de 1,5-2 cm de long ; drupes stipitées, le plus souvent solitaires, de 2,5 cm de long
et de 1,5-2 cm de large, jaunâtres, quelquefois ponctuées de taches claires. Graines de 2-2,5
cm de long (Troupin, 1951).

Figure 1 : Feuilles et fruits de Penianthus longifolius Miers (Photos @PROCUV)

18
II.3. POSITION SYSTEMATIQUE

Sur le plan taxonomique, cette espèce est classée comme suit d’après Cronquist (1981) :

 Règne : Plantae
 Taxon : Tracheobionta
 Embranchement : Angiospermes
 Classe : Magnoliopsida
 Sous-classe : Magnoliidae
 Ordre : Ranunculales
 Famille : Menispermaceae
 Genre : Penianthus
 Espèce : Penianthus longifolius Miers
Le genre Penianthus est classé dans la tribu des Burasaieae Endl. ou Peniantheae Diels (Ortiz
et al., 2016).
Suivant la classification phylogénétique APG III (Bremer et al., 2009), cette plante peut être
classée comme suit :

 Règne : Plantae
 Clade : Angiospermes
 Clade : Dicotylédones vraies
 Ordre : Ranunculales
 Famille : Menispermaceae

II.4. HABITAT ET REPARTITION GEOGRAPHIQUE

Penianthus longifolius est une espèce très répandue dans les forêts primitives de terre ferme,
en groupe et par pied isolé. La plante pousse bien dans un climat équatorial humide où la
température minimale moyenne est de 20°C et la température maximale moyenne de 29°C. La
pluviométrie annuelle moyenne dans son aire de répartition est d’environ 1800 mm et les sols
vont de sableux à rocailleux. Cette espèce est présente en Afrique tropicale, au Nigeria, au
Cameroun, en Angola jusqu’en République Démocratique Congo, où elle se rencontre dans le
Kasaï, le Mayumbe, l’Ubangui-Uele, et dans le Forestier Central (Troupin, 1951 ;
www.prota4u.org;).

19
Figure 2. Répartition géographique de Penianthus longifolius (carte tirée de
https://www.gbif.org/fr/species/3829519)

II.5. SYNONYMES

o Penianthus fruticosus Hutch. & Dalziel

o Penianthus gossweileri Exell.
(www.theplantlist.org/tpl1.1/record/kew-2547785 ; www.worldfloraonline.org).

II.6. NOMS VERNACULAIRES

En République Démocratique du Congo, Penianthus longifolius est connue sous

diverses appellations vernaculaires :

o Lokumbo (dial. Turumbu), Lofete (dial. Lomongo), Esembele, Sembele (Likimi),

Lupeti (dial. Bangala), Kumbe, Kelibu (Yambata) (Troupin, 1951)
o Songbolo, Sengbele (dial. Ngwaka), Agbukuko, Tshelengwe awuza (Mono) (Konda et
al., 2012)
o Kakubya (dial. Mashi, vers Itebero) (Yumoto et al., 1994)
o Agabolo (dial. Batiabetuwa) (Kawukpa & Mandango, 1994)
o Losimbelo, Pohoelele (Wamba) (Idani et al., 1994)
o Apalutu, Alocha (Pygmées Mbuti), Limpete (Kote), Lokumbo (Turumbu), Lokumbo
(Boyela) (Neuwinger, 1996)
o Tangbingi (Réserve de Yoko) (Katshunga, 2016)
o Lopetu ya bankoko (Nkundo, Bolongo) (Musuyu Muganza, 2006).

20
II.7. USAGES

En médecine traditionnelle, la plante est connue comme ayant de très nombreuses vertus :

* Contre les coliques et comme puissant émétique, l’extrait des racines édulcoré au jus de
canne à sucre est bu. Pour la maturation des abcès, les râpures des racines mouillées avec un
peu d’eau sont appliquées localement mais aussi contre diverses dermatoses (Neuwinger,
2000 ; Hulstaert, 1966) ;

* Le macéré des racines guérit les maladies vénériennes ; l’écorce sèche pulvérisée guérit les
plaies (Kawukpa & Mandango, 1994) ;

* En cas d’otites purulentes, le jus de racines est instillé dans l’oreille malade. Contre les
plaies infectées, les racines sont pilées, humectées d’eau et appliquées. Les feuilles mâchées
sont également appliquées sur les blessures (Musuyu Muganza, 2006 ; Kimpouni, 1999 ;
Troupin, 1951) ;

* La décoction aqueuse de l’écorce du tronc et la macération des racines dans le vin de palme
sont bues comme aphrodisiaque, anthelminthique, antipyrétique et antimalarien (Musuyu
Muganza, 2006) ;

* La tige sans feuilles de Penianthus longifolius ensemble avec les graines d’Aframomum
melegueta sont mâchées contre l’impotence, l’asthénie sexuelle, la frigidité et comme
aphrodisiaque (Adjanohoun et al., 1988) ; comme pansement : le pilat de l’écorce fraîche de la
racine (Konda et al., 2012) ;

* Contre les faiblesses sexuelles : une cuillerée de poudre de racines est prise dans une banane
mûre, dans du vin de palme ou dans la nourriture (Musuyu Muganza, 2006 ; Neuwinger,
2000, Kimpouni, 1999) ;

* Les feuilles sont mangées pour le traitement de la hernie (Bouquet, 1969) ;

* En cas d’infestation des orteils par les chiques, une préparation à base d’écorces des racines
pilées dans de l’huile de palme est appliquée localement (Musuyu Muganza, 2006 ;
Neuwinger, 2000) ;

* La macération de l’écorce du tronc est prise per os dans le traitement du diabète à Kisangani
en R.D. Congo (Katemo et al., 2012).

En outre, Penianthus longifolius entre dans la composition des poisons de flèche, (très
probablement du fait de son contenu en alcaloïdes) ; la plante est notamment ensemble avec

21
les feuilles et tiges de Periploca nigrescens, plus une scolopendre ou la glande à venin d’un
serpent venimeux ; et les jeunes tiges de P. longifolius servent de hampes pour les flèches
(Yongo et al., 2014).

II.8. ÉTUDES ANTERIEURES PHYTOCHIMIQUES, PHARMACOLOGIQUES ET

TOXICOLOGIQUES

Bien que Penianthus longifolius ait de nombreux usages médicinaux, ses propriétés
chimiques et pharmacologiques n’ont que peu été étudiées.

D’après Akah et al. (2001), l'extrait aqueux de feuilles a produit une contraction dose-
dépendante l’iléon des cobayes (effet purgatif) in vitro. L'extrait aqueux a également
potentialisé la contraction produite par l'acétylcholine. Cet extrait aqueux de feuilles contient
des glucides, protéines, flavonoïdes, tanins, saponine, alcaloïdes, aglycones stéroïdiens et
glycosides (cardiaques, anthracènes et cyanogénétiques).

La racine et la tige contiennent jusqu’à 1% d’alcaloïdes et les feuilles seulement des traces
(Bouquet & Fournet, 1975).

L’extrait aqueux lyophilisé des écorces de racines possède des propriétés aphrodisiaques par
l'administration orale de l'extrait aqueux lyophilisé à des doses respectives de 100, 200 et 400
mg/kg de poids corporel en termes d'augmentation significative de manière dose-dépendante
de la fréquence de montes, la fréquence d'intromission, la fréquence d'éjaculation, l’efficacité
copulatoire, le nombre d'intromissions, l’érection pénienne spontanée, le nombre de
spermatozoïdes et leur mobilité, ainsi que de la testostérone sérique (Cimanga et al., 2016).

L’extrait aqueux lyophilisé des écorces de racines a été trouvé peu actif contre la souche multi
résistante K1 de P. falciparum (IC50 = 27.10 µg/ ml) et contre Leishmania infantum (IC50 = 32
µg/ ml) ; ledit extrait a été trouvé dépourvu d’effet cytotoxique contre les cellules MRC-5
(Musuyu Muganza et al., 2012).

La vitexine, l’isovitexine et d’autres dérivés de l’apigénine ont été mis en évidence par
déréplication et ont été trouvés responsables de la forte activité muscarinique de cette plante et
de son effet antioxydant (Ngwoke et al., 2017). D’après Tane et al. (2007), dix substances ont
pu être isolées à partir d’un extrait CH 2Cl2-MeOH (1 :1) d’écorces du tronc trouvé actif contre
les souches D6 et W2 du Plasmodium falciparum. Parmi ces substances, on peut citer : ß-
sitostérol glycoside, viboquercitol, sucrose, N-methylcoridinium, palmatine et jatrorrhizine.

22
Ces 2 dernières substances étant les plus actives avec des valeurs de IC 50 respectives de 26,4
et 67,4 μg/ ml contre W2 et 37.36 et 142.43 μg/ ml contre D6.

Dans leur étude, Tabekoueng et al. (2019) ont pu isoler des racines, des feuilles et des
brindilles de Penianthus longifolius Miers, 14 composés dont deux diterpénoïdes néo-
clérodane non signalés auparavant, la pénanthine et son épimère C-8. Ces composés ont été
criblés contre le panel de cellules cancéreuses NCI60 mais n'ont montré aucune activité
significative à 10 μM.

En outre, l'O-méthylmoschatoline, le taraxérol, la taraxérone, la rubrostérone, la

panuostérone, la 22-épi-20-hydroxyecdysone, le peroxyde d'ergostérol et d’autres composés
comme stigmast-5-ène-3,7-dione, stigmastérol, β-sitostérol, stigmastérol glucoside et β-
sitostérol glucoside ont également été isolés de ces parties de la plante.

Sur le plan toxicologique, Sandberg & Cronlund (1982) ont trouvé la plante très toxique après
qu’un extrait alcoolique (EtOH 95%) des branches de P. longifolius ait tué les rats en 30
minutes à la dose de 375 mg/ kg administrée par voie intrapéritonéale. Les animaux ont
manifesté par ailleurs une dilatation des pupilles.

Dans la figure 3 ci-dessous, certaines molécules déjà isolées de Penianthus longifolius sont
présentées.

Penianthine 8-epi-Penianthine O-methylmoschatoline

Taraxérol Taraxérone Rubrostérone

23
 Panuostérone 22-epi-20-hydroxyecdysone Ergosterol peroxide

Oxypalmatine
Pseudopalmatine Palmatine

Columbamine
Jatrorrhizine N-methylcoridinium

Vitexine Isovitexine
Berbérine

Figure 3. Quelques molécules déjà isolées de Penianthus longifolius Miers

24
 CHAPITRE III. GENERALITES SUR ANNICKIA AMBIGUA

III.1. GENERALITES SUR LA FAMILLE

Annickia ambigua (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas est une plante appartenant à la
famille des Annonaceae qui regroupe des plantes dicotylédones primitives. Cette famille est
constituée de plus ou moins 2.500 espèces reparties en une centaine de genres. C’est la plus
grande famille de l’ordre des Magnoliales. Ses espèces peuvent être des arbres, des arbustes
ou des lianes et sont trouvables dans des zones tropicales ou subtropicales.

Le genre Annickia est strictement africain et ses huit espèces, endémiques à l’Afrique
continentale, sont des arbres à bois et sève jaunes ; indument de poils simples, géminés-
fasciculés ou étoilés. Fleurs ☿ solitaires, extraaxillaires ; pédicelle bractéolé ; sépales 3, libres,
valvaires ; pétales 3, oppositisépales, plus grands que les sépales ; étamines nombreuses ;
thèques linéaires, extrorses ; carpelles nombreux, libres, pubescents ; ovule 1, dressé. Fruits à
méricarpes libres, stipités, ellipsoïdes-oblongs. Graines ellipsoïdes-oblongues, munies d'un
bourrelet circulaire ± saillant (Couvreur et al., 2019 ; Versteegh and Sosef, 2007 ; Boutique,
1951).

III.2. DESCRIPTION DE LA PLANTE

Petit arbre de ± 10 m de haut et de 25-30 cm de diamètre ; rameaux glabres ; ramilles

densement pubérulentes. Feuilles à pétiole épais, de 4-5 mm de long, densement pubérulent ;
limbe oblong-elliptique, arrondi à la base, atténué au sommet, de 19-24 cm de long et de 5,5-
7,5 cm de large, subcoriace, ± luisant au-dessus, glabre mais à nervure primaire pubérulente
au-dessus, éparsement pubescent, à poils étoilés et à poils simples apprimés en dessous ;
nervures secondaires 10-14 paires. Fleurs à pédicelle de ± 1 cm de long, tomentelleux;
bractéole triangulaire, de 3 mm de long, tomentelleuse à l'extérieur, glabre à l'intérieur;
sépales triangulaires, ± aigus, de 5-7 mm de long et de ± 3,5 mm de large, tomentelleux à
l'extérieur, glabre à l'intérieur; pétales oblongs, de 12 mm de long et de 5 mm de large, épais,
à concavité basale ± triangulaire, tomentelleux à l'extérieur, glabres à l'intérieur; étamines de
± 2 mm de long; connectifs allongés-triangulaires au-dessus des thèques; ovaires ovoïdes, de
± 2 mm de long, tomenteux; stigmates linéaires, de ± 0,7 mm de long. Fruits à pédicelle
épais, de 1,5-1,8 cm de long, pubérulents à poils étoilés; méricarpes nombreux, stipités,
oblongs, de 2,2 cm de long et de 1,3 cm de large; stipes de 1,5-1,8 cm de long, charnus,
glabrescents. Graines de ± 2 cm de long et de 1,2 cm de large (Boutique, 1951).

25
Figure 4 : Vue d’une coupe de l’écorce du tronc (à gauche), des feuilles et des fruits (à droite)
d’Annickia ambigua (Photos @PROCUV)

III.3. POSITION SYSTEMATIQUE

Sur le plan taxonomique, cette espèce est classée comme suit d’après Cronquist (1981) :

 Règne : Plantae
 Taxon : Tracheobionta
 Embranchement : Angiospermes
 Classe : Magnoliopsida
 Sous-classe : Magnoliidae
 Ordre : Magnoliales
 Famille : Annonaceae
 Genre : Annickia
 Espèce : Annickia ambigua (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas
Suivant la classification phylogénétique APG III (Bremer et al., 2009), cette plante peut être
classée comme suit :

 Règne : Plantae
 Clade : Angiospermes
 Clade : Magnoliidées
 Ordre : Magnoliales
 Famille : Annonaceae

26
Les études récentes placent le genre Annickia dans la nouvelle tribu monogénérique des
Annickieae Couvreur (Couvreur et al., 2019).

III.4. HABITAT ET REPARTITION GEOGRAPHIQUE

Annickia ambigua est présente en Afrique tropicale, dans les forêts sempervirentes humides
en RD Congo, dans la région du sud du Gabon et au Congo-Brazzaville (Versteegh & Sosef,
2007). En RD Congo en particulier, cette espèce est trouvable dans le Forestier Central
(Boutique, 1951).

Figure 5 : Distribution géographique d’Annickia ambigua (Versteegh & Sosef, 2007)

III.5. SYNONYMES

Les différents synonymes répertoriés pour cette espèce sont les suivants :

 Annickia atrocyanescens (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas

 Annickia kwiluensis (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas

 Annickia olivacea (Robyns & Ghesq.) Setten & Maas

 Enantia ambigua Robyns & Ghesq.

 Enantia atrocyanescens Robyns & Ghesq.

 Enantia kwiluensis Robyns & Ghesq.

 Enantia olivacea Robyns & Ghesq. (Versteegh & Sosef, 2007; www.tela-
botanica.org ; https://www.gbif.org/fr/species/5407542).

27
III.6. NOMS VERNACULAIRES

En République Démocratique du Congo, cette espèce de plante est connue sous différents
noms vernaculaires comme suit :
- M’bila (Mongo), Mwamba m’bwaki (Kiumbe), Lunginu (Ceshiukutu, Kinkutu,
Kulumbi) (Versteegh & Sosef, 2007 ; Boutique, 1951) ;
- Ikodzi konga (Musuyu Muganza, 2006).

Au Congo-Brazzaville, les noms vernaculaires utilisés sont :

- Muamba-benki, Mwamba m’bwaki (Kiumbe) (Versteegh & Sosef, 2007).

III.7. USAGES

Les écorces du tronc sont utilisées en décoction contre la malaria, les vers et spasmes
intestinaux. On peut aussi les utiliser en mélange en décoction avec les écorces de tronc
Garcinia punctata et de Massularia acuminata contre l’asthénie sexuelle (Musuyu Muganza,
2006).

Les écorces du tronc sont utilisées comme pansement pour les plaies (Boutique, 1951).

Les écorces du tronc et le suc qui en coule, servent pour la production d’un colorant jaune et
dans le traitement de la jaunisse (Musuyu Muganza, 2006).

Le bois est utilisé pour construire des maisons indigènes comme les villageois le pensent peu
attaquable par les insectes xylophages (Musuyu Muganza, 2006).

Les fruits d’A. ambigua (ex A. olivacea) sont consommés par les primates à l’instar des
bonobos (Beaune, 2015 ; Beaune, 2012).

III.8. ÉTUDES ANTERIEURES PHYTOCHIMIQUES, PHARMACOLOGIQUES ET

TOXICOLOGIQUES

Le genre Annickia est beaucoup cité dans la littérature sous son synonyme « Enantia ». Très
peu de données phytochimiques, pharmacologiques ou toxicologiques sont disponibles sur la
plante A. ambigua (ex A. olivacea). Dans ce genre, les espèces les plus étudiées sont Annickia
chlorantha, A. polycarpa, et A. affinis. Les espèces de ce genre ont de nombreuses vertus
médicinales généralement attribuées en grande partie aux nombreux alcaloïdes qu’elles
contiennent.

Le genre Annickia (ex Enantia) est connu comme étant riche en alcaloïdes des familles
Isoquinoline et Quinoline tant tertiaires que quaternaires. La couleur jaune de l’écorce du
tronc des Enantia, par exemple, est essentiellement le fait des molécules comme berbérine,

28
columbamine et jatrorrhizine mais aussi des oxyaporphines liriodénine, lysicamine et O-
methylmoschatoline (Neuwinger, 1996).

Le manque d’informations sur Enantia ambigua (ex A. olivacea), lors de la recherche

bibliographique, montre que l’espèce n’a pas encore été étudiée à fond. Cependant, l’espèce
Enantia chlorantha a démontré, dans les études antérieures, ses propriétés antibactériennes
(Adesokan et al., 2007 ; Atata et al., 2003), antivirales (Wafo et al., 1999), anti-ulcéreuses
(Tan & al., 2000) et antimalariennes (Tan et al., 2007). Les études phytochimiques ont révélé
la présence des alcaloïdes, des flavonoïdes, des glycosides et des composés phénoliques
(Ayoade et al., 2007 ; Nwozo et al., 2006).

On pense que l'écorce et les feuilles d’A. polycarpa contiennent de la berbérine et des
protoberbérines. Ces composés peuvent être à l'origine de la bonne activité
antitrypanosomienne prouvée dans des expériences (Atindehou et al., 2004). La quinine et la
dihydroquinidine isolées de l'écorce valident l'utilisation traditionnelle de l'écorce contre le
paludisme en Afrique de l'Ouest. Des extraits d'écorces de tronc ont montré une activité
antibactérienne contre Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus et Klebsiella pneumoniae. On
pense que les alcaloïdes de la berbérine sont la raison des caractéristiques tinctoriales de
l'écorce (Obeng, 2011).

L'extrait aqueux d'écorces du tronc d'Enantia chlorantha a montré une activité prononcée
contre Trypanosoma cruzi avec des valeurs IC50 de 1,87 avec une sélectivité marginale (SI >
3,0). Les activités de cet extrait contre Trypanosoma b. brucei (IC50 = 8,36 g/ml),
Leishmania infantum (IC50 = 10,08 g/ml) et Plasmodium falciparum (IC50 = 7,77 g/ml)
peuvent être entièrement attribuées à une cytotoxicité non spécifique (CC50 = 5,66 g/ml, SI <
1).

La figure 6 ci-après présente les formules de certaines substances déjà isolées du genre
Annickia (ex Enantia).

29
Figure 6 : Formules de certaines substances déjà isolées des plantes du genre Annickia

30
PARTIE
EXPERIMENTALE

31
 CHAPITRE IV. MATERIELS ET METHODES

IV.1. MATERIEL D’ETUDE

IV.1.1. Identification des plantes

Les plantes de la présente étude ont été recensées dans le cadre des études
ethnobotaniques menées auprès des Nkundo de la chefferie de Bolongo, en province de Mai-
Ndombe (Mato, 2005 ; Musuyu Muganza, 2006). Elles ont été formellement identifiées par
Dr Jean-Pierre Habari et Monsieur Boniface L. Nlandu de l’herbarium de l’INERA (Institut
National des Études et des Recherches Agronomiques) situé au Département de Biologie de la
Faculté des Sciences à l’Université de Kinshasa. Leurs vouchers respectifs, PROCUV/MPI-
2737 pour Annickia ambigua et PROCUV/MPI-2745 pour Penianthus longifolius, ont été
déposés dans l’herbarium dudit Institut.

IV.1.2. Récolte du matériel végétal

Le matériel végétal est constitué d’écorces des racines de Penianthus longifolius et

d’écorces de tronc d’Annickia ambigua.

Figure 7 : Carte de la RD Congo avec un focus sur le site de LuiKotale et les environs
(Muganza et al., 2015 ; Fruth et al. 2011).

32
 Ces matériels ont été récoltés en juin 2019 dans la forêt de Luikotale (0245.6' S, 20
22.7' E) (Hohmann and Fruth, 2003) dans la partie Sud-Ouest du bloc Sud du Parc National de
Salonga (en groupement de Bolongo, secteur de Lokolama, Territoire d’Oshwe, Province
Maï-Ndombe, République Démocratique du Congo ; Figure 7).

Les écorces de tronc d’Annickia ambigua et celles des racines de P. longifolius ainsi
récoltées ont été transportées le même jour à Kinshasa où elles ont été séchées au préalable à
l’air libre à l’ombre, puis broyées grâce à un moulin électrique (IKA ® A11 basic, Germany) et
tamisées (tamis Retsch® Germany, mailles 500 μm) pour obtenir les poudres.

IV.1.3. Matériels de laboratoire

 Balance analytique Kern Als 220-4

 Balance Kern 440-35N
 Chromatoplaques CCM
 Cuves Camag CCM (10 x 10 cm)
 Entonnoirs
 Erlenmeyer
 Gants stériles
 Glucomètre (One Touch Ultra) avec bandelettes correspondantes.
 Lampe UV
 Lyophilisateur Christ-Alpha 1-4 LSC
 Micropipettes
 Pieds gradués
 Seringues 1cc & 5cc
 Sonde gastrique
 Spatules
 Tubes à essais etc.

IV.1.4. Réactifs et solvants

 Acétate d’éthyle
 Acide acétique
 Acide formique
 Eau distillée
 Ethanol absolu

33
  Ether de pétrole 40-60°
 Glibenclamide 5 mg (Daonil®)
 Glucose en poudre
 Méthanol
 Sulfate de sodium anhydre etc.

IV.1.5. Animaux de laboratoire

Tous les animaux utilisés dans la présente étude ont été obtenus auprès du Service
d’Animalerie de l’INRB (Institut National de Recherches Biomédicales/ Kinshasa) où les
protocoles des différentes expérimentations ont été déposés et avalisés.
Au total, 60 souris Swiss, mâles et femelles, âgées de 10 semaines, pesant entre 20 et 25 g, ont
été utilisées pour le test de l’activité antihyperglycémiante (hyperglycémie orale provoquée
par surcharge en glucose) des extraits totaux aqueux des deux plantes en étude et de leurs
différentes fractions.

Les animaux ont été nourris avec un gâteau constitué d’un mélange de farine de froment, du
son de blé, viande, noix de palme et de l’aliment pour lapins ; et ont eu à disposition, de l’eau
de robinet dans des biberons comme boisson. Ils sont gardés dans des cages en plastique
tapissées au fond par une litière en copeaux de bois, surmontées d’un couvercle grillagé
métallique leur permettant un accès au biberon et à la nourriture.

Figure 8 : Vues des animaux dans les cages (à gauche) et d’une opération de gavage des
souris par sonde gastrique

34
IV.2. METHODES

IV.2.1. Préparation des extraits totaux aqueux

Les extraits aqueux ont été préparés par décoctions aqueuses (10%) des poudres
concernées suivies de la filtration sur ouate, de la congélation et de la lyophilisation (Christ
Alpha 1-4 LSC). Les lyophilisats ainsi obtenus ont été gardés dans des flacons
hermétiquement fermés. Ces extraits ont servi pour la réalisation des différents tests
biologiques.
Les autres extraits utilisés pour les screening chimiques ont été préparés par
macération (10%) de 48 heures de chaque poudre de plante dans différents solvants
organiques suivant les besoins.

IV.2.2. Fractionnement des extraits totaux aqueux

Une quantité pesée de 1g de chaque lyophilisat a été dispersée dans 200 ml d’un mélange
constitué comme suit : Ether de pétrole 40-60°/ Acétate d’éthyle/ Ethanol absolu/ Eau
(6/6/4/4). Le tout a été énergiquement agité dans une ampoule à décanter. Après séparation
des phases, les fractions polaires (phases inférieures) et les fractions apolaires (phases
supérieures) ont été décantées et recueillies séparément, après filtration dans des flacons
préalablement tarés. Les différentes fractions ont été placées à l’étuve à 50°C pour séchage.

IV.2.3. Détermination de l’activité antihyperglycémiante in vivo

Ce test a été mené en deux temps, en l’occurrence, d’abord sur les deux extraits totaux
aqueux, et puis sur les quatre fractions obtenues de ces deux extraits. Cette étude a été menée
suivant le protocole proposé par Jeyabalan & Palayan (2009).

Les souris Swiss ont préalablement été soumises à un jeun de 16 heures puis pesées avant la
prise de leurs glycémies de base. Après répartition des animaux suivant le traitement à
recevoir, ils ont été chargés en glucose (4 g/ kg) par gavage à l’aide d’une sonde gastrique 30
minutes après avoir reçu par le même moyen les extraits, le glibenclamide et le véhicule aux
doses respectives, selon le cas. Les glycémies ont été mesurées grâce au sang obtenu par
piqûre au niveau de la queue 0.5, 1, 2 et 3 heures après administration du glucose grâce au
glucomètre One Touch Ultra.

Il convient de souligner que le présent protocole d'étude a été soumis au Service d’Animalerie
de l’INRB qui en a autorisé l’exécution. Les animaux ont été donc manipulés et traités en
conformité avec les exigences dudit service.

35
IV.2.3.1. Tests sur les extraits totaux

Les 30 souris ont été réparties en 6 groupes (n = 5). Les souris des groupes 1 et 2 ont été
traitées avec l’extrait de Penianthus longifolius avec respectivement la dose de 500 mg/ kg et
celle de 250 mg/ kg ; le groupe 3 a reçu l’extrait d’Annickia ambigua à la dose de 500 mg/ kg
et le groupe 4 le même extrait, à 250 mg/ kg. Le groupe 5 a, quant à lui, été traité avec 5 mg/
kg de glibenclamide (Daonil®) tandis que le groupe 6 n’a reçu que le véhicule (eau distillée) à
raison de 0,5 ml/ 25 g de poids corporel.

IV.2.3.2. Tests sur les fractions

Les groupes d’animaux ont été ainsi constitués. Les 24 souris ont été réparties en 8 groupes (n
= 3). Les souris des groupes 1 et 2 ont été traitées avec la fraction polaire de l’extrait aqueux
de Penianthus longifolius avec respectivement la dose de 250 mg/ kg et celle de 125 mg/ kg ;
les groupes 3 et 4 ont reçu la fraction apolaire de l’extrait aqueux de Penianthus longifolius
avec respectivement la dose de 250 mg/ kg et celle de 125 mg/ kg. Les groupes 5 et 6 ont reçu
la fraction polaire de l’extrait d’Annickia ambigua aux doses respectives de 250 mg/ kg et
125mg/ kg ; les groupes 7 et 8 ont pour leur part reçu la fraction apolaire de l’extrait d’A.
ambigua aux doses respectives de 250 mg/ kg et 125 mg/ kg. Les deux derniers groupes ont
reçu soit 5 mg/ kg de glibenclamide (Daonil ®) pour le groupe 7, soit le véhicule (MeOH 20%)
à raison de 0,5 ml/ 25 g de poids corporel pour le groupe 8.

Ce test nous a permis de déterminer l’évolution de la glycémie chez chacun des

animaux en fonction du temps.

IV.2.3.3. Détermination des pourcentages d’inhibition

Le calcul des pourcentages d’inhibition des différentes glycémies moyennes des témoins en
fonction du temps (%IG) se fait par la formule suivante (Anwar et al., 2010) :

% IG = (Geau - Gx/ Geau) x 100

Geau = glycémies moyennes du groupe-témoins négatifs (eau) aux différents temps ;

Gx = glycémie à un temps donné x (en minutes) après administration des substances
à tester (extraits/fractions/glibenclamide/solvant).

36
IV.2.3.4. Analyse statistique des résultats

Les valeurs expérimentales de glycémies présentées sont des moyennes de 3 mesures ± écart-
type.

Les différences statistiques ont été analysées à l'aide d'une analyse de variance
unidirectionnelle suivie du test de Dunnett pour comparer les résultats des groupes de
traitement par rapport au contrôle négatif pour l’évolution des glycémies dans le temps ; ou
une ANOVA suivie du test de Tukey pour les comparaisons par paires des moyennes de tous
les groupes en étude pour les aires sous courbes (AUC). Une valeur de p < 0,05 a été
considérée comme significative.

IV.2.4. Caractérisation sur Chromatographie sur Couche Mince (CCM)

Cette analyse s’est faite sur les fractions qui se seront montrées plus actives dans le test
antihyperglycémique. Les solutions à analyser seront des solutions méthanoliques (20 mg/ ml)
des fractions retenues.

Les conditions chromatographiques reprises ci-après ont été inspirées de Wagner et al. (2013)
et Wagner & Bladt (1996).

Les CCM ont été effectués sur des plaques sur verre, à gel de silice 60 F 254 de 5 x 10
et 10 x 10 cm, la distance du front de solvant était de 7 cm.

IV.2.4.1. Mise en évidence des polyphénols (flavonoïdes)

Solution à analyser : une solution méthanolique des fractions à 20 mg/ ml.

Phase mobile:

EtOAc: HOOCH: CH3COOH: H2O (100: 11: 11: 27, v/v);

Révélateur : Réactif de Neu, suivi de l’observation à la lampe UV à 366 nm.

IV.2.4.2. Mise en évidence des alcaloïdes

Solution à analyser : une solution méthanolique des fractions à 20 mg/ ml.

Phase mobile :

Chloroforme : n-Butanol : Ammoniaque (10 : 50 : 4, v/v).

Solution de révélation :

Réactif de Dragendorff

37
IV.2.4.3. Mise en évidence des terpènes et stéroïdes

Solution à analyser : Extrait éthérique et chloroformique

Phase mobile :

Butanone : Toluène (2 : 3, v/v)

Révélation :

Réactif de Lieberman-Burchard, suivi du chauffage à 110 °C et observation de la plaque sous

UV 366 nm et à la lumière du jour.

38
CHAPITRE V. PRESENTATION DES RESULTATS ET DISCUSSION

V.1. PRESENTATION DES RESULTATS

V.1.1. Activité antihyperglycémiante
V.1.1.1. Tests sur les extraits totaux aqueux
Les résultats de l’évaluation de l’activité antihyperglycémiante des extraits totaux aqueux de
la poudre d’écorces du tronc d’Annickia ambigua et de celle des racines de Penianthus
longifolius chez les souris Swiss sont rendus en moyennes ± écart-type dans le tableau I ci-
après :

Tableau I. Résultats du test des extraits totaux aqueux sur l’évolution des glycémies
moyennes en fonction du temps (en minutes) chez les souris.

Echantillons Moyennes des glycémies

G0 G30 G60 G120 G180
P500 61.0 ± 3.6 235.3 ± 8.0* 169.7 ± 13.1* 104.7 ± 3.2* 83.0 ± 8.2*
P250 68.3 ± 369.0 ± 35.5* 206.0 ± 31.0* 113.3 ± 89.3 ± 13.4
14.2 19.6*
A500 72.0 ± 7.9 238.0 ± 21.0* 201.7 ± 18.9* 98.0 ± 10.0* 84.0 ± 11.1*
A250 74.0 ± 5.6 430.0 ± 45.2 226.0 ± 3.6* 123.0 ± 8.0* 90.0 ± 16.5
Glibenclamide 65.7 ± 5.5 204.0 ± 28.8* 115.0 ± 6.1* 87.0 ± 9.2* 69.0 ± 5.0*
Eau 82.0 ± 9.2 482.3 ± 27.7 471.0 ± 17.1 209.0 ± 14.5 119.0 ± 6.0
n = 5 ; *p<0.05, différence des moyennes significatives comparée aux témoins négatifs (Eau)
par ANOVA One Way suivie du test de Dunnett.

Légende :
P500 : Extrait aqueux de Penianthus longifolius à la dose de 500 mg/ kg ;

P250 : Extrait aqueux de Penianthus longifolius à la dose de 250 mg/ kg ;

A500 : Extrait aqueux d’Annicka ambigua à la dose de 500 mg/ kg

A250 : Extrait aqueux d’Annicka ambigua à la dose de 250 mg/ kg

G0 : Glycémie au temps O (glycémie de base) ; G30 : Glycémie 30 minutes après

administration du glucose ; G60 : Glycémie après 60 minutes ; G120 : Glycémie après 120
minutes ; G180 : Glycémie après 180 minutes.

39
 EVOLUTION DES GLYCEMIES
Taux de glycémie (mg/ dL) 600.00
500.00
400.00
300.00
200.00
100.00
0.00
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
Temps (en minutes)

P500 P250 A500

A250 Glibenclamide Eau

Figure 9 : Courbes de l’évolution des glycémies dans le temps suite à l’action des extraits
totaux

La figure 10 ci-dessous représente les surfaces sous courbe correspondant aux graphes de
l’évolution des glycémies (voir figure 9) pour chaque échantillon testé au cours du temps.

AUC
60000
53005
50000

40000
34260
30845
30000 25695
24380
19570
20000

10000

0
P500 P250 A500 A250 Gli EAU

Figure 10 : Aires sous courbes correspondant à l’évolution des glycémies dans le temps suite
à l’action des extraits totaux

Les pourcentages d’inhibition des différentes glycémies moyennes de base (Geau) par les
échantillons testés (extraits totaux aqueux et glibenclamide), en fonction du temps (%IG),
sont présentés dans le tableau II ci-dessous :

40
Tableau II. Taux d’inhibition (en %) des glycémies de base par les extraits totaux aux
différents temps

Echantillons Pourcentages d’inhibition des glycémies de base

IG30 IG60 IG120 IG180
P500 51.21 63.98 49.92 30.25
P250 23.50 56.26 45.77 24.93
A500 50.66 57.18 53.11 29.41
A250 10.85 52.02 41.15 24.37
Glibenclamid 57.71 75.58 58.37 42.02
e

Légende :
IG30, IG60, IG120 & IG180 : Taux d’inhibition de la glycémie (en %) 30, 60, 120 et 180
minutes après administration de la surcharge en glucose.

V.1.1.2. Tests sur les fractions issues des extraits totaux

Les résultats de l’évaluation de l’activité antihyperglycémiante des fractions issues des
extraits totaux aqueux de la poudre d’écorces du tronc d’Annickia ambigua et de celle des
racines de Penianthus longifolius chez les souris Swiss sont rendus en moyenne ± écart-type
dans le tableau III ci-après :

Tableau III. Résultats du test des fractions des extraits totaux sur l’évolution des glycémies
moyennes en fonction du temps (en minutes) chez les souris.

Echantillons Moyennes des glycémies

G0 G30 G60 G120 G180
AP250 59.0 ± 7.2 429.0 ± 46.1 254.0 ± 26.9* 104.0 ± 14.9* 76.0 ± 3.6*
AP125 55.0 ± 1.7 520.0 ± 40.9 362.0 ± 39.2 140.0 ± 12.5 93.0 ± 3.0
AA250 83.0 ± 5.3 427.0 ± 48.0 386.0 ± 27.4 126.0 ± 12.0 98.0 ± 7.5
AA125 60.0 ± 8.5 529.0 ± 37.0 426.0 ± 42.9 143.0 ± 5.0 110.0 ± 6.9
PP250 105.0 ± 10.0 463.0 ± 38.6 263.0 ± 36.4* 111.0 ± 11.4* 82.0 ± 8.9*
PP125 74.0 ± 5.6 503.0 ± 65.9 291.0 ± 20.4 118.0 ± 5.6 82.0 ± 8.5*
PA250 85.0 ± 1.0 476.0 ± 38.3 316.0 ± 32.4 135.0 ± 10.8 101.0 ± 10.8
PA125 70.0 ± 2.6 516.0 ± 13.5 370.0 ± 62.2 146.0 ± 8.9 105.0 ± 10.0
GLI 69.0 ± 6.2 267.0 ± 8.2* 100.0 ± 10.6* 65.0 ± 11.5* 61.0 ± 12.1*
BLA 67.0 ± 4.4 541.0 ± 22.1 435.0 ± 19.3 168.0 ± 10.5 115.0 ± 9.5

41
n = 3 ; *p<0.05, différence des moyennes significatives comparée aux témoins négatifs (Eau)
par ANOVA One Way suivie du test de Dunnett.

Légende :

PP125 & PP250 : Fraction polaire de l’extrait total aqueux de Penianthus aux doses
respectives de 125 et de 250 mg/ kg

PA125 & PA250 : Fraction apolaire de l’extrait total aqueux de Penianthus aux doses
respectives de 125 et de 250 mg/ kg

AP125 & AP250 : Fraction polaire de l’extrait total aqueux d’Annickia aux doses respectives
de 125 et de 250 mg/ kg

AA125 & AA250 : Fraction apolaire de l’extrait total aqueux d’Annickia aux doses
respectives de 125 et de 250 mg/ kg

GLI : glibenclamide

BLA : blanc (MeOH 20%)

La figure 11 ci-dessous présente les différents tracés relatifs à l’évolution des glycémies dans
le temps.

Evolution des glycémies dans le temps

600
500
Taux de glycémies

400
300
200
100
0
G0 G30 G60 G120 G180
Temps (en minutes)

AP250 AP125 AA250 AA125 PP250

PP125 PA250 PA125 GLI BLA

Figure 11 : Courbes de l’évolution des glycémies dans le temps suite à l’action des
différentes fractions testées

La figure 12 ci-dessous représente les surfaces sous courbe correspondant aux graphes de
l’évolution des glycémies (voir figure 11) pour chaque échantillon testé au cours du temps.

42
 AUC
60000

50340
50000 47820
43905 45090
41925 40905
40000 38835
36420
33705
30000

19275
20000

10000

0
AP250 AP125 AA250 AA125 PP250 PP125 PA250 PA125 GLI BLA

Figure 12 : Aires sous courbes correspondant à l’évolution des glycémies dans le temps suite
à l’action des différentes fractions testées

Les pourcentages d’inhibition des différentes glycémies moyennes de base (BLA) par les
échantillons testés (fractions des extraits totaux aqueux et glibenclamide), en fonction du
temps (%IG), sont présentés dans le tableau IV ci-dessous :

Tableau IV. Taux d’inhibition (en %) des glycémies de base par les différentes fractions des
extraits totaux aux différents temps

Echantillons Pourcentages d’inhibition des glycémies de base

IG30 IG60 IG120 IG180
AP250 20.70 41.61 38.10 33.91
AP125 3.88 16.78 16.67 19.13
AA250 21.07 11.26 25.00 14.78
AA125 2.22 2.07 14.88 4.35
PP250 14.42 39.54 33.93 28.70
PP125 7.02 33.10 29.76 28.70
PA250 12.01 27.36 19.64 12.17
PA125 4.62 14.94 13.10 8.70
GLI 50.65 77.01 61.31 46.96

43
V.1.2. Profil phytochimique sur CCM
Les résultats des essais de l’activité antihyperglycémique ont révélé qu’au niveau des
fractions, que ladite activité est plus notable pour les fractions polaires des extraits totaux
aqueux des deux plantes.
Les profils chimiques des deux fractions retenues sont donnés par les figures 13 à 15 ci-après.

V.1.2.1. Recherche des polyphénols (flavonoïdes)

Les profils chromatographiques des extraits méthanoliques ainsi que ceux des substances de
référence sont rendus dans la figure 13 ci-bas.

Figure 13 : Chromatogrammes CCM des fractions polaires des deux extraits tels qu’observés
à 366 nm (à gauche) et à la lumière du jour (à droite) après application du réactif de Neu

V.1.2.2. Recherche des alcaloïdes

Les profils chromatographiques des deux fractions analysées pour la mise en évidence des
alcaloïdes sont rendus par la figure 14 ci-après.

44
Figure 14 : Plaques CCM présentant les chromatogrammes CCM des fractions polaires des
deux extraits tels qu’observés après sprayage avec le réactif de Dragendorff (à gauche) et
avant sprayage (à droite)

V.1.2.3. Recherche des terpènes et stéroïdes

Les profils chromatographiques concernant la recherche des terpènes et stéroïdes dans les 2
fractions les plus intéressantes sont rendus dans la figure 15 ci-bas.

Figure 15 : Chromatogrammes CCM des fractions polaires des deux extraits tels qu’observés
à la lumière du jour (Photo à gauche) et à 366 nm (Photo à droite) après sprayage avec le
réactif de Lieberman-Burchard

45
V.2. DISCUSSION

L’équilibre glycémique chez les diabétiques peut diminuer le risque de développer les
complications microvasculaires et macrovasculaires dues à cette maladie (Latha & Pari,
2004). La phytothérapie, de plus en plus employée, peut être un moyen bénéfique associé aux
traitements et à d’autres mesures hygiéno-diététiques, car les patients diabétiques
généralement polymédicamentés sont à la recherche de mesures naturelles. Cependant,
l’emploi des plantes n’est pas sans danger, et des études chimiques, pharmacologiques et
cliniques sont très importantes pour permettre l’emploi ou non de celles-ci par la suite, de
sorte à garantir une réelle efficacité, une sécurité d’usage et l’absence de toxicité à court ou
long terme.

Dans la présente étude, nous avons projeté d’investiguer l'activité antihyperglycémiante

(après surcharge en glucose) chez les souris, des extraits aqueux lyophilisés d’Annickia
ambigua et de Penianthus longifolius ainsi que des fractions issues de ces extraits.

En ce qui concerne le test de l'activité antihyperglycémiante des extraits totaux, force

est de constater qu’après le pic hyperglycémique observé 30 minutes après administration du
glucose (G30), au bout des 3 heures (G180) du test, le glibenclamide ainsi que les 2 extraits
totaux aux doses de 500 mg/ kg ont montré une activité antihyperglycémiante significative par
rapport au groupe des souris non traitées. Ceci est une indication qui suggère l’effectivité de
l’action des extraits testés dans le contrôle de la glycémie. Les glycémies moyennes de tous
les groupes traités ont pu revenir dans la fourchette de la normoglycémie déjà 2 heures après
administration des traitements, et l’action des deux extraits aux deux doses (P500, P250,
A500 et A250) et celle du glibenclamide ont révélé une baisse significative des glycémies
chez les souris comparativement au groupe Témoins négatifs (Tableau I) même si les effets
des doses de 500 mg/ kg se sont avérés plus importants par rapport à ceux des mêmes
échantillons à 250 mg/ kg. Le tableau V (voir annexes) montre que l’action de l’échantillon
P500 est significativement différente de celle de P250 suggérant ainsi un effet
antihyperglycémiant dose-dépendant pour l’extrait aqueux de Penianthus longifolius. Cette
tendance est aussi vérifiable pour l’extrait aqueux d’Annickia ambigua. Il convient de noter
que les actions de A500, P500 et du glibenclamide ne sont pas significativement différentes,
et ceci confirme la bonne activité des extraits aqueux testés.

Une quantité excessive de glucose dans le sang induit la sécrétion d'insuline. Cette
insuline sécrétée stimulera la consommation de glucose au niveau périphérique et contrôlera
la production de glucose par le biais de différents mécanismes (Wright, 2000). La présente

46
étude a clairement montré que l'insuline sécrétée nécessite au moins deux heures pour
ramener le taux de glucose à un niveau normal. Dans une étude antérieure, Yokadi (2015)
avait trouvé que l’extrait total aqueux de Penianthus longifolius possédait l’activité
antihyperglycémiante aux doses de 500 mg/ kg et 1000 mg/ kg.

Le test de l'activité antihyperglycémiante sur les fractions, a été également mené sur
les souris Swiss surchargées en glucose. Il en découle que l’activité antihyperglycémiante
s’est révélée significativement forte pour les souris du groupe traité par le glibenclamide, et
pour les fractions polaires des extraits totaux surtout aux doses de 250 mg/ kg (AP250 &
PP250) comme cela est rendu par le tableau III. Ces échantillons ont pu ramener les
glycémies dans la fourchette de la normoglycémie déjà deux heures après la surcharge en
glucose, même si l’action antihyperglycémiante globale du glibenclamide durant les trois
heures du test se révèle être plus effective selon la figure 12 qui rapporte que l’aire sous
courbe correspondant à l’évolution des glycémies dans le temps suite à l’action du
glibenclamide est significativement différente de celles des autres différentes fractions testées
suivant le test de comparaison par paires de Tukey (tableau V). Ce même test renseigne que
l’activité de la fraction polaire de l’extrait aqueux d’Annickia ambigua à la dose de 250 mg/
kg (AP250) est significativement différente de celle de la même fraction à la dose de 125 mg/
kg (AP250), suggérant un effet dose-dépendant ; elle est également significativement
différente de celles des deux doses testées de la fraction apolaire du même extrait. Par contre,
pour la fraction polaire de l’extrait aqueux de Penianthus longifolius, aucune différence
significative n’a pu être relevée entre les deux doses testées (PP250 & PP125) et par rapport à
la fraction apolaire, les différences significatives n’ont pu être mises en évidence qu’avec la
dose de 125 mg/ kg (PA125).

Les profils antihyperglycémiques ci-haut évoqués sont comparables pour les deux
plantes et ceci est conforté par les analyses des profils chimiques par CCM des fractions
polaires, celles trouvées plus actives que les apolaires. En effet, les figures 13 à 15 démontrent
que les chromatogrammes des deux fractions polaires, celle de P. longifolius et celle d’A.
ambigua se ressemblent fortement. Les deux se caractérisent en effet surtout par leur richesse
en alcaloïdes des mêmes familles comme rapporté dans la littérature (figures 3 et 6), en plus
des polyphénols (acides phénols et flavonoïdes). Les terpènes et stéroïdes n’ont pu être mis en
évidence dans les fractions les plus actives quoique présents dans les fractions apolaires.

Les alcaloïdes, en particulier ceux de la famille de la berbérine bien présents dans les
deux plantes, sont cités comme possédant des propriétés hypoglycémiantes (Muhammad et
al., 2021 ; Vanhoebost, 2020 ; Liang et al., 2019 etc.). Les polyphénols (acides phénoliques,

47
flavonoïdes et autres) sont aussi cités parmi les groupes phytochimiques ayant des composés à
potentiel hypoglycémiant (Bai et al., 2019 ; Huang et al., 2018 etc.).

L’emploi de la phytothérapie depuis plusieurs siècles a permis la découverte de

molécules permettant le traitement du diabète de type 2. A titre exemplatif, le galéga (Galega
officinalis) est la plante à l’origine de la classe des biguanides, antidiabétiques oraux,
employés en première intention dans le traitement du diabète de type 2. Il est important de
continuer les recherches en phytothérapie afin de permettre l’élaboration éventuelle d’une
autre thérapeutique médicamenteuse comme celle décrite avec la metformine, ou d’employer
les plantes médicinales si leur rapport bénéfice/ risque s’avère favorable. Nous pensons qu’il
sera important d’obtenir et tester des fractions concentrées en alcaloïdes ou en polyphénols
des deux plantes étudiées, puis à long terme envisager d’isoler et de tester les composés à
partir desdites fractions dans le but de contribuer à l’arsenal thérapeutique contre ce fléau
qu’est le diabète.

48
CONCLUSION
Notre travail a porté sur l’étude de l’activité antihyperglycémiante des extraits totaux
aqueux issus des écorces du tronc d’Annickia ambigua (Annonaceae) et des écorces de racines
de Penianthus longifolius (Menispermaceae) ainsi que des fractions polaires et apolaires qui
en sont dérivées.

L’ensemble de ces résultats constitue une évidence scientifique validant le bien-fondé

de l’usage de ses plantes en en médecine traditionnelle pour traiter le diabète. En effet, l es
extraits totaux aqueux lyophilisés des deux plantes étudiées ont montré une très bonne activité
antihyperglycémiante qui est statistiquement comparable à celle de la référence utilisée, à
savoir le glibenclamide. Au niveau des fractions, l’activité est plus prononcée dans les
fractions polaires par rapport aux apolaires ; cette activité semble attribuable aux alcaloïdes,
notamment quaternaires normalement présents dans ces fractions polaires. L’activité
mentionnée peut au moins en partie, être aussi le fait des polyphénols présents dans les
échantillons plus actifs.

De plus amples recherches sont nécessaires pour trouver, isoler et tester les
constituants responsables de l'activité antidiabétique. En outre, il est souhaitable que d’autres
parties de la plante, qui peuvent être plus facilement renouvelables, puissent également être
étudiées pour éviter l’extinction de ces plantes du fait de la forte utilisation des racines pour
Penianthus longifolius d’une part ou des écorces du tronc pour Annickia ambigua d’autre part.

49
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ANNEXES

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Tableau V : Résultats du test de Tukey (comparaisons par paires) sur les aires sous courbes