Développement et caractérisation de

l’analyse de l’éthanol par GC-FID

Rapport laboratoire analyse et qualité

Da Silva Meneses Ana Rita & Misk Hamza

Sous la supervision de Dr. Isabelle Windal

Rue Royale, 150, 1000 Bruxelles
Table des matière

s
1 Objectifs.............................................................................................................................3
2 Description du GC.............................................................................................................. 3
3 Développement de la méthode.........................................................................................3
4 Mode opératoire................................................................................................................4
4.1 Développement du mode opératoire........................................................................5
4.1.1 Solutions étalons...................................................................................................5
4.1.2 Solution à analyser................................................................................................5
5 Résultats du développement de la méthode.....................................................................6
5.1 Droite d’étalonnage.................................................................................................. 6
5.2 Répétabilité de l’appareillage....................................................................................6
5.3 Répétabilité de la procédure.....................................................................................7
6 Observations et explications..............................................................................................7
7 Conclusion......................................................................................................................... 8
Bibliographie............................................................................................................................. 8
1 Objectifs
L’objectif de cette manipulation est de développer et de valider une méthode analytique
de l’éthanol par GC-FID, alors ceci passe par l’établissement d’une droite d’étalonnage
interne pour l’analyse d’un mélange biphasique éthanol-eau. Il est très impératif avant
l’établissement de cette droite d’étalonnage, de trouver les meilleures conditions
opératrices possibles (température de l’injecteur, température du four, débit du gaz porteur,
et température du détecteur…etc). Ces données seront utilisées au second quadrimestre lors
de la manipulation de distillation de l’éthanol au laboratoire de génie chimique.

2 Description du GC
La chromatographie gazeuse (GC) est une méthode analytique permettant la séparation
de composés en fonction de leurs affinités pour une phase stationnaire immobilisée sur un
support inerte. Elle est généralement couplée à un détecteur FID (ionisation de flamme) qui
permet la détection et la quantification des analytes qui traversent la colonne. Cette
méthode est largement répandue dans les domaines très variés, tels que la parfumerie,
l’industrie pétrolière, la biologie, la chimie fine et l’industrie des matières plastiques. Des
explications plus détaillées se trouvent dans les syllabus de chimie analytique 1 et 2.

3 Développement de la méthode
La procédure pour analyse et quantification de l’éthanol passe d’abord par l’optimisation
des différentes conditions d’analyse possibles pour les différentes composantes de
l’appareillage. L’utilisation de la GC-FID oblige l’utilisation d’un standard interne. L’utilisation
d’un standard interne permet de pallier une erreur sur la concentration mesurée due à une
éventuelle variation de volume d’analyte au niveau de l’injecteur. Ceci dans le but d’avoir au
niveau de l’injection, une analyse la plus reproductible possible dans le temps, afin d’éviter
une déviation de la linéarité. Les étalons seront donc analysés par l’ajout d’un volume bien
connu d’étalon interne, avant injection. Le choix du standard interne se base sur deux
caractéristiques :
 Sa composition, ses propriétés physico-chimiques et son comportement proches de
l’éthanol
 Pas de recouvrement des pics du standard et de l’analyte
Le choix s’est porté sur le propanol et le butanol, car ils possèdent une structure semblable à
l’éthanol. Une première analyse est menée avec un mélange de 0,5 ml d’éthanol pur, 0,5 ml
de propanol pur et 0,5 ml de butanol pur. Les résultats obtenus lors de la première analyse
permettent de dire que l’ordre de sortie des composés est le suivant : éthanol, propanol et
butanol. La figure 1 montre le chromatogramme obtenu :
 Figure 1 : chromatogramme de l'échantillon contenant l'éthanol et le propanol

À l’aide du résultat de cette première analyse, le choix s’est porté sur le propanol comme
standard interne. En effet, le pic correspondant au propanol se situe à proximité du pic de
l'éthanol dans le chromatogramme. Toutefois, il est également séparé de manière résolue,
contrairement au pic du butanol qui n'a pas été inclus dans le chromatogramme. Cette
omission est due à l'incapacité d'injecter la solution de butanol en raison de sa dissociation
avec le reste de la solution. Le tableau ci-dessous reprend les caractéristiques des produits
utilisés :

4 Mode opératoire
Pour l’analyse sur GC-FID des solutions étalons plus ajouts des volumes connus de
standard interne, les conditions optimisées suivantes ont été utilisées durant la manipulation
du GC FID.
o Température de l’injecteur : 130°C
o Température du four : 50°C
o Température du détecteur : 200°C
o Le débit du split a été augmenté à 190 ml/l afin d’éviter un plafonnement des pics.

L’analyse d’un échantillon se fait avec 1 ml d’échantillon prélevé à la pipette et 200 µl de

standard interne prélevé à la pipette automatique de 200 µl.
Ensuite le développement de la méthode s’est porté sur la plage de concentration qui sera
couverte. Comme l’analyse est centrée sur un échantillon provenant d’une distillation, il a
été décidé que la concentration maximale en éthanol sera de 100 % et la limite minimale
sera la plus basse possible. Afin de déterminer la concentration minimale, une série de
mesures a été menée en analyse de solutions allant de 0,5 % en éthanol et en augmentant
de 0,5 % la concentration à chaque mesure. Les mesures ont été effectuées jusqu’à ce qu’un
pic apparaisse sur le chromatogramme. Il a été déterminer que la concentration minimale en
éthanol est de 0,25 %.Les solutions d’étalonnage sont données dans le tableau 2 :

Étalon 1 2 3 4 5 6 7
%
volumique 0 0,25 20 40 60 80 100
d’éthanol
dans l’eau
Tableau 2 : Solutions étalons

4.1 Développement du mode opératoire

Afin d’analyser un échantillon contenant de l’éthanol provenant de la distillation d’une
solution eau/éthanol :
4.1.1 Solutions étalons
 Préparer 7 solutions étalons dont les concentrations volumiques sont disponibles
dans le tableau 2.
 Pour chaque étalon, prélever 1 ml à la pipette et m’introduire dans une fiole à
analyser avec 200 µl de propanol prélevé à l’aide de la pipette à piston. Une droite
d’étalonnage peut ainsi être tracée ( reprise à la figure2), exprimant la concentration
volumique des solutions étalons en fonction du rapport des aires des pics
étalon/standard.
4.1.2 Solution à analyser

 Afin d’analyser l’échantillon, prélever 1 ml d’échantillon et l’introduire dans une fiole

à analyser avec 200 µl de propanol prélevé à l’aide de la pipette à piston. Le rapport
des aires des pics est reporté dans l’équation de la droite d’étalonnage.

5 Résultats du développement de la méthode

5.1 Droite d’étalonnage
Le mode opératoire suivi a été décrit au point 4.1. La droite d’étalonnage est illustrée par la
figure 2 :
La droite obtenue présente un R2 de 0,9987 ce qui est acceptable dans la cadre de la
manipulation de distillation. Cette droite permettra de doser l’éthanol lors de la
manipulation de génie chimique.
5.2 Répétabilité de l’appareillage
Un test de répétabilité de l’appareillage a été mené en analysant le même étalon 5
fois. L’étalon choisi est celui ayant une concentration de 60 % en éthanol. Les résultats sont
présentés dans le tableau 3 :
 Droite d'étalonnage
6

Rapport des airs des pics

5 f(x) = 0.0534713608649876 x + 0.144639983381248
R² = 0.998659235342895
4
3
2
1
0
0 20 40 60 80 100 120
Concentration volumique [%]

Concentration 1 60.2588
Concentration 2 59.1201
Concentration 3 60.9928
Concentration 4 60.2431
Concentration 5 59.1338
Écart type en % 0,724
Moyenne 59,940
Tableau 3 :Paramètre de répétabilité.

5.3 Répétabilité de la procédure

Il aurait été nécessaire de procéder à un test de répétabilité de la méthode en préparant
cinq fois la solution étalon, laquelle aurait dû présenter une concentration d'éthanol de 40
%. Néanmoins, en raison de contraintes temporelles, cette démarche n'a pu être entreprise.
Par conséquent, aucune conclusion quant à la reproductibilité de la procédure ne pourra
être établie.

6 Observations et explications
Plusieurs essais ont été faits sur la GC-FID afin de trouver les meilleures conditions d’analyse.
Certains paramètres ne peuvent être changés et seront fixes. Les paramètres optimisés sont
les suivants :
o Température de l’injecteur
o Le temps de d’analyse
o Température du four
o Débit du gaz vecteur

Ces paramètres ci-dessus ont été réglés afin d’avoir une analyse la plus optimale possible.
a) Température de l’injecteur
La température de l’injecteur a été maintenue à 130°C afin de vaporiser les espèces volatiles
présentes dans le vial. À savoir, l’éthanol et le propanol qui possèdent respectivement les
températures d’ébullition suivantes : 79°C et 97°C.
b) Le temps d’analyse
Le temps d’analyse par défaut dans la méthode « alcool » était de 10 min. Puisque les pics
d’éthanol et propanol sortent avant 1,5 min d’analyse. Il a été décidé de réduire ce temps
d’analyse à 2 min afin de rendre l’analyse plus rapide.
c) Température du four
Cette température fait varier le temps de rétention, par conséquent la résolution des pics
également. Puisque les pics possédaient déjà une bonne résolution, la température du four a
été maintenue à 50 °C.
d) Débit du gaz vecteur
Les colonnes capillaires se surchargent facilement ce qui donne des pics
chromatographiques surchargés, car la colonne capillaire est remplie et l’analyte
supplémentaire n’est pas retenue, ce qui a pour conséquence d’élargir considérablement les
sommets. Afin d’éviter ce problème de surcharge, il faut diminuer la quantité d’analyte à
injecter, ce ci ce fait en changeant le débit de split qui a été adapté à 190 mL/min.

7 Conclusion

Le mode opératoire ainsi que les paramètres nécessaires ont été définis. Les conditions
opératoires pour les analyses ont été établies et optimisées spécifiquement pour ce dosage,
avec le principal ajustement étant le débit de séparation, ajusté à 190 mL/min. De plus, une
courbe d'étalonnage précise a été élaborée, présentant un coefficient de détermination (R²)
de 0,9987. Cette courbe sera utilisée ultérieurement pour quantifier la présence d'éthanol
lors de la distillation.

Bibliographie

[1] I.WINDAL, Syllabus de chimie analytique 2, ISIB, Révision 2022

[2] I.WINDAL, Syllabus de laboratoire d’analyse et qualité, ISIB, Révision 2022
[3] I.WINDAL, Syllabus de chimie analytique 1, ISIB, Révision 2022
[4] Principe d’analyse instrumentale, skoog, Holler et Nieman (1ère édition française,
traduite de la 5ème édition américaine).
[5] Fiche de données de sécurité, source internet : www.merckmillipore.com (consulté le
6/3/2024)