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Définition:
Microbiologie:
Chap.1. Historique et introduction à la
microbiologie générale.
Définition: Micro biologie:
Micro = Microorganismes.
Biologie = Science.
N.B:
• Un viroïde est une particule, plus petite que les virus,
composée d'un seul ARN circulaire et sans capside;
Le prion
N.B:
•Le prion dérive d’une protéine qui existe à l’état naturel
chez tous les mammifères. Pour une raison inexpliquée,
cette protéine peut se replier et changer de forme, elle
devient alors nocive et on l’appelle « prion ». Cette
protéine anormale est voisine des glycoprotéines décelées
dans la maladie d’Alzheimer.
Selon le type de microbe étudié, la Microbiologie
peut être divisée en:
● Bactériologie → Bactéries;
● Phycologie → Algues;
Plasmodium
● Protozoologie → Protozoaires; falciparum
responsable de la
malaria
Col en forme
De S
Relation entre microorganismes
et maladies:
b) Relation entre microorganismes et maladies:
A la fin du 19ème Siècle
→ une espèce bactérienne = une maladie
Exemples:
● En 1880- Eberth:
→ Salmonella typhi
→ maladie du Typhoïde;
b) Relation entre microorganismes et maladies:
● En 1882 - Robert Koch:
Virus de la rage
E) La fermentation : Pasteur : 1857-1877:
Définition:
La fermentation est une réaction biochimique de
conversion de l'énergie chimique contenue dans une source
de carbone en une autre forme d'énergie directement
utilisable par la cellule en l'absence de dioxygène (O2).
Désinfectant Antiseptique
Savons pour salle de bain pour la peau
L’oxydants le plus connu est l’eau de javel (NaOCl)
découverte en 1789.
3. Les progrès dans les techniques et le matériel de la
microbiologie:
Couvercle
Réceptacle
b) matériel:
• En 1881, l’invention de la gélose nutritive par Fannie Eilshemius-
Hesse,
Pseudomonas aeruginosa
II) Implication en Pathologie et Antibiotiques.
A) Implication en pathologie.
La pathologie → c’est l’étude des maladies infectieuses,
qui sont cliniquement et physiopathologiquement définies.
Propriétés:
noyau central
chaînes latérales des
Le lipide A sucres (antigènes O)
=
toxicité de
la molécule.
La phagocytose
E: Moyens de défense de l’hôte contre l’infection bactérienne:
c) le complément:
♦ les lymphocytes T :
B) l’immunité acquise ou spécifique:
♦ les lymphocytes B :
ils sont responsables de la production d’anticorps. Ces
anticorps sont des protéines capables de se fixer sur les
protéines étrangères, appelées antigènes, et de détruire le
pathogène. On les appelle également immunoglobulines.
Chez l’Homme, les lymphocytes B arrivent à maturité
dans la moelle osseuse;
B) l’immunité acquise ou spécifique:
♦ les lymphocytes T :
♦ les lymphocytes T :
Définition:
Un antibiotique est une Substance naturelle
(produite surtout par des micro-organismes), semi-
synthétique ou synthétique, ayant la propriété
d'empêcher la croissance des micro-organismes ou
de les détruire.
B. Antibiotiques (ATB).
Les propriétés:
Italique ou souligné
les bactéries à
Gram+ Les bactéries à
(violettes) Gram- (roses)
a) Critères morphologiques et structuraux:
♦ Mobilité;
♦♦ la capacité à sporuler;
Position centrale
Position subterminale
Position terminale
♦ Autres……..
b) Critères physiologiques et métaboliques:
Les critères les plus utilisés en taxonomie sont:
♦ la température de croissance;
b) Critères physiologiques et métaboliques (suite):
♦ pH du milieu.
֎ Microorganismes neutrophiles ;
֎ Microorganismes acidophiles;
֎ Microorganismes basophiles ou Alcalophile.
b) Critères physiologiques et métaboliques (suite):
♦ le mode respiratoire;
1 – Bactérie aérobie stricte; ex : Pseudomonas, Neisseria
2 – Bactérie microaérophile; ex : Campylobacter
3 – Bactérie aéro-anaérobie facultative = AAF ex :
Entérobactéries;
4 – Bactérie anaérobie stricte ex : Clostridium
b) Critères physiologiques et métaboliques (suite):
→ Eléments majeurs.
→ Les oligoéléments.
→Eléments majeurs: C, O, H, N, P, K+, Ca2+.
→ Les oligoéléments :
֎ Un rôle dans l’équilibre physico-chimique de la cellule
Bactérienne (exp. Na+, Mg2+ et Cl- );
֎ Entrent dans la constitution d’une enzyme ou coenzyme
( Exp. Le Fer des Cytochromes et le Magnésium de la
chlorophylle) ;
♦ La pathogénicité;
♦ Enzymatiques;
♦ La sensibilité aux antibiotiques;
♦ La sensibilité aux bactériophage.
c) Critères écologiques;
d) Critères immunologiques.
E) Critères moléculaires:
1) Le % GC ou le coefficient de chargaff;
2) L’hybridation ADN/ADN;
3) L’analyse et séquençage des ARN ribosomaux.
E.1) Le GC% ou coefficient de Chargaff:
ADN = double hélice selon le
modèle de Watson et Crick
Un nucléotide = association de 3 molécules:
● Une base azotée (en rouge)
● Un phosphate (en jaune);
═˃ le C6 est substitué
═˃ le C2 est substitué
par une fonction amine.
par une fonction amine
N.B: Elle est la seule des
et le C6 par une
bases nucléiques dont la
fonction cétone.
formule ne contient pas
d’atome d’oxygène.
♦ Les pyrimidines ont un noyau aromatique
hexagonal de 4 carbones et 2 azotes.
═˃ Thymine:
Un noyau pyrimidine: les C2 et
C4 portent des fonctions cétone,
mais dont le C5 est substitué par
un méthyl.
═˃ Uracile (au niveau ARN):
Un noyau pyrimidine: les C2 et
C4 portent des fonctions cétone.
E.1) Le GC% ou coefficient de Chargaff:
Principe:
Chaque base azotée (puriques (adénine et guanine)
et pyrimidiques (cytosine et thymine) est présente
dans une certaine concentration molaire dans une
molécule d’ADN donnée.
[G] + [C]
GC%= --------------------------- X 100
[G] + [C] + [A] + [T]
Ce rapport est mesurable grâce à
l’hypochromicité de l’ADN bicaténaire:
E.1) Le GC% ou coefficient de Chargaff:
Principe: ♦ ADN double brin
→ faible absorbance
dans l’UV à 260 nm;
Plus le nombre de
paires G≡C est élevé
plus la température de
dénaturation est
élevée.
Température de transition Tm
(temperature melting) =
augmentation de l’absorbance
de 50% par rapport à
l’absorbance maximale
Tm = température à laquelle
50% de l'ADN est dénaturé.
Refroidissement
Technique d’Hybridation des acides nucléiques
Résultat:
ARNr 16s
E-3-Séquençage des acides nucléiques
réverses.
► La ribonucléase T1 hydrolyse spécifiquement les
ARN en rompant les liaisons 3’-5’ phosphodiester,
de telle manière que le produit soit une guanosine
3’-phosphate ou un oligonucléotide se terminant
par une guanosine 3’-phosphate.
► Oligonucléotides: Un petit segment d'ADN (quelques
d'ADN à amplifier.
Merci de votre attention
Microbiologie Générale
• Algues (Botanistes);
les euglènes • Protozoaires
(zoologistes).
a) Les Myxo mycètes
spécifiques :
10-6 m);
♦ organisation simple;
♦ L’omniprésence et l’abondance.
III- Principales Caractéristiques du règne des protistes.
1) Protistes unicellulaires:
Une cellule unique qui constitue un organisme complet et
autonome, donc doué de toutes les fonctions de la vie :
nutrition, croissance et reproduction.
Chytridiomycetes
IV- Principaux groupes des bactéries:
La classification de Bergey sépare les bactéries en 4
divisions:
♦ Selon la présence ou non d’une paroi;
♦ Selon la nature de cette paroi, que l’on peut déterminer
grâce à la coloration de GRAM. En 1970, grâce aux
séquençages de l’ADN, les
==˃ Les Archaebactéries; bactéries ont été divisées en
deux taxons :
==˃ Les bactéries à GRAM négatif;
A) les Archéobactéries:
˃ Symbiotiques:
♦ Nitrobacter: joue un rôle important dans le cycle de
l'azote en oxydant le nitrite en nitrate dans le sol;
♦ Thiobacillus.
D’autres bactéries présentes dans le sol, l’eau douce ou
l’eau de mer, certaines sont pathogènes, forment la famille
des Pseudomonadaceae. On distingue:
♦ Pseudomamonas;
♦ Acetomonas;
♦ Xanthomonas.
B.3- Les Spirochètes
• Unicellulaires: Bacilles Gram négatif;
• Structure hélicoïdale;
• déplacement grâce aux fibrilles axiales dans des
solutions très visqueuses ou sur des surfaces solides;
• Multiplication par scission binaire transversale;
• Paroi mince et flexible entourée d’un manteau;
• Vie aquatique (eau douce, eau marine, boue);
• Ils possèdent une gaine externe multicouche de
peptidoglycanes recouvrant la membrane plasmique.
B.3- Les Spirochètes
Les spirochètes pathogènes de l’homme :
♦ Leptospira interrogans agent d’une jaunisse
infectieuse.
- Existence intracellulaire.
Inclusion de Chlamydia à
l’intérieur d’un lymphocyte
sanguin (voir flèche)
B.5) Les Chlamydies (suite) :
♣ ou totale.
● non photosynthétiques;
● En conditions défavorables,
elles se transforment en
myxospores dormantes
enfermées dans des structures
appelées sporanges.
B-7: Les Cyanobactéries : Algues bleues.
● Les cyanobactéries sont les seuls procaryotes
photosynthétiques.
Nostoc commune
B-7: Les Cyanobactéries : Algues bleues (suite).
♣ Morphologique;
♣ Physiologique;
♣ et Ecologique.
C.1-Les Bacilles:
Il existe deux groupes principaux :
♣ Le groupe sporulant (formation des endospores), est
composé de deux genres:
● le genre Bacillus;
● le genres Clostridium.
N.B: L’endospore est une forme de résistance aux
conditions défavorables;
♦ Les genres Bacillus et Clostridium sont très répondus
dans le sol, l’eau et d’autres habitats.
♣ Le groupe non sporulant qui regroupe les Lactobacilles.
C.1.1- Les Bacillus:
♦ La plus part sont mobiles sauf Bacillus antharcis;
♦ le genre Staphylococcus;
♦ le genre Streptococcus
Exp. Streptocoques:
Streptococcus sp
♦ Certains peuvent provoquer des infections qui touchent
tous les organes humains;
♦ Forme variable;
I) Transport passif:
♦ Division cellulaire.
1-2 : la paroi
==► Composition chimique:
˃ Les osamines (sucres aminés):
♦ N-acétylglucosamine : NAG ;
♦ N-acétylmuramique : NAM;
˃ Les acides aminés:
♦ L-Alanine;
♦ Acide D-Glutamique;
♦ D - Alanine.
==► Composition chimique (suite):
˃ Les acides teïchoïques:
♦ Existent uniquement chez les Gram+ ;
♦ Sont localisés à l’extérieur de la paroi;
♦ Peuvent avoir un rôle antigénique.
Abondants faibles
Osamines
Acides aminés
24 à 35% ≈ 50%
Acide Diaminopimélique
DAP Présent sans Lysine Présent avec Lysine
Présents Absents
Acide teïchoïque
20 à 60% 20 à 60%
Oses
1 à 2,5 % 10 à 22%
Lipides
1-2 : la paroi
==► Structure moléculaire:
˃ Peptidoglycane est un polymère composé de deux
• N-acétylglucosamine : NAG ;
• N-acétylmuramique : NAM.
==► Structure moléculaire:
Ces chaines sont reliées par des oligopeptides de 4 acides
aminés :
• L-alanine;
• D-glutamique;
• L’acide mésodiaminopimélique : DAP (ou L-Lysine);
• D-alanine.
Alternance de NAG et NAM + Tétrapeptide ( alternance
des acides aminés – L avec les acides aminés –D) + pont.
1-2 : la paroi
==► Structure moléculaire (suite):
Cette structure de polymère en réseau, qui donne à la
cellule sa rigidité, est caractérisée par:
♦ Les liaisons β(1-4) entre l’acide N-acétylmuramique et le
N-acétylglucosamine;
==► Structure moléculaire (suite):
Exp. E. coli
1-2 : la paroi
==► Structure moléculaire (suite):
˃ Chez les Gram+ une liaisons interpeptidiques longues
(pentaglycine) .
Peptidoglycane de Gram positif:
(selon V. JARLIER)
1-2 : la paroi
1-2 : la paroi
Différences structurelles entre les parois des bactéries Gram+
et Gram-:
==˃ Chez les bactéries Gram+:
♦ Les acides teïchoïques constituent le 2ème composant
essentiel de la paroi des bactéries Gram+: Il représente
50% du poids sec de la paroi et 10% du poids sec de la
cellule totale;
==˃ Chez les bactéries Gram-; la paroi est formée de 2
autres couches:
a) L’espace périplasmique ou périplasme;
b) La membrane externe:
1-2 : la paroi
a) L’espace périplasmique ou périplasme:
Entre la membrane plasmique et le peptidoglycane .
♦ Chez les bactéries Gram+: est un lieu d’accumulation
des exoenzymes:
♦ Protéases;
♦ Pénicillinases;
♦ colicines;
♦ Exotoxines;
1-2 : la paroi
==˃ Chez les bactéries Gram-:
a) L’espace périplasmique ou périplasme:
1-2 : la paroi
==˃ Chez les bactéries Gram-, l’espace périplasmique
retient les protéines synthétisées dans le cytoplasme:
→ Les lipoprotéines:
• Protéines lipidiques : exp. Lipoprotéine de Braun;
• Les lipoprotéines assurent une cohésion solide de
l’ensemble de la structure.
b) La membrane externe:
→ Les lipopolysaccharides (LPS = Endotoxines):
˃ Le lipide A est considéré comme le support de la toxicité;
Le lipide A est un glycophospholipide c.à.d polymère composé de:
* Unités disaccharidiques de glucosamine, reliées entre elles par
des ponts pyrophosphates;
* Longues chaines d’acides gras;
le cétodésoxyctorate (KDO).
Exp. Chez salmonella, le core est constitué de: cinq
hexoses, deux heptoses et trois KDO.
b) La membrane externe:
Bactérie Gram +:
Exp. Bacillus sbtilis
Les β(1-4) entre l’acide
N-acétylmuramique et
Lysozyme
le N-acétylglucosamine
détruit les β (1-4)
(perforation de la paroi)
Milieu isotonique
Milieu hypotonique 1%0 de saccharose
Cellule
bactérienne
-
Bactérie Gram :
Exp. E.Coli
Les β(1-4) entre l’acide
N-acétylmuramique et le
Lysozyme
N-acétylglucosamine
détruit les β (1-4)
(perforation de la paroi)
Milieu isotonique
Milieu hypotonique 1%0 de saccharose
Cellule
bactérienne
Fragments
de
Gonflement
la paroi
Cellule
bactérienne Sphéroplaste conserve Une cellule sphérique
toutes les propriétés Avec des fragments de la paro
Lyse de la cellule initiale = Sphéroplaste .
1-2 : Fonctions de la paroi
1-2 : Propriétés antigéniques de la paroi.
♦ Chez les bactéries Gram+:
Les acides teichoïques ou leur sous-unités osidiques
constituent les principaux antigènes chez les
streptocoques, deux catégories d’antigènes ont été
isolés:
==˃ Des antigènes de nature polyosidiques: appelés
antigène C.
Selon la classification antigénique de LANCE-FIELD, il y
a plusieurs groupes sérologiques: A, B, C, D,……;O.
1-2 : Propriétés antigéniques de la paroi
♦ Chez lzs bactéries Gram+:
* Rhamnose;
♦ Antigène C
* N-acétylglucosamine;
˃ Le groupe sérologique G
* Rhamnose;
♦ Antigène C
* N-acétylgalactosamine;
♦ Chez lzs bactéries Gram+:
==˃ Des antigènes de nature protéiques: appelés antigène
M, T, R.
La protéine M est très importante sur le plan
sérologique et physiologique. Elle permet de
différencier à l’intérieur du groupe A, 56 types
sérologiques.
Donc,
► Un groupe sérologique est l’ensemble de bactéries ayant
le même antigène C;
* Un antigène flagellaire H;
♦ Chez lzs bactéries Gram-:
la spécificité antigénique dépend de la nature des sucres
ainsi que de leur mode de liaison.
En se basant sur la diversité des facteurs O et H,
KAUFFMAN et WHITE ont pu classer les salmonella
en groupes sérologiques puis sérotypes.
Exp. Le groupe sérologique D regroupe toutes les souches
de différentes espèces de salmonella ayant en commun
l’antigène O9. Ce groupe sérologique se subdivise à
son tour en sérotypes (selon la diversité de
l’antigèneH).
1-2 : Fonctions de la paroi:
˃ Granules de fer;
► Chromatophores :
˃ Capables d’autoreproduction;
C. neoformans (encre de
Pneumocoque (Gram)
Chine)
A- La nature chimique de la capsule:
Exp.
˃ E. coli;
˃ Klebsiella pneumoniae.
Conclusion:
Cette différence de virulence s’explique essentiellement
par le fait que les bactéries capsulées résistent à la
phagocytose.
► rôle (suite) :
D’autres fonctions sont attribuées à la capsule :
● Résistance aux bactériophages ;
● Résistance à la dessiccation ;
flagelles
♦ Il existe deux types:
▪ pili communs:
Au Fort Gr.
▪ Les pili sexuels:
˃ Nombre de 1 à 4 /bactérie;
˃ Plus grands en taille;
Pont cytoplasmique
▪ Les pili sexuels:
♦ Mobilité;
♦ Chimiotactisme;
2) Manque d’eau;
3) Température défavorable;
5) pH défavorable;
- La spore bactérienne
˃ La position peut être:
► Centrale;
► Subterminale;
► Terminale.
Position centrale
Position subterminale
Position terminale
Position terminale
Propriétés de la spore :
˃ Résistance à:
→ la chaleur;
→ La dessiccation;
→ Aux désinfectants ;
▪ Physique : chaleur;
▪ Chimique : acidité.
2) Initiation :