Uv Visible l3

PGS METHODES INSTRUMENTALES DE CARACTERISATION
ABSORPTION DANS LE
VISIBLE ET L’UTRAVIOLET
PLAN DU COURS
I : INTRODUCTION
II : RAPPELS SUR LES ORBITALES MOLÉCULAIRES
III: PRINCIPE DE LA SPECTROSCOPIE ELECTRONIQUE
IV: TYPES DE TRANSITIONS
V: OBTENTION DES SPECTRES UV-Visible
VI: LES GROUPEMENTS CHROMOPHORES
VII: RÈGLES DE WOODWARD-FIESER
VIII:LOI DE L’ABSORPTION: LOI DE BEER-LAMBERT
IX:APPAREILLAGE
X: APPLICATIONS
INTRODUCTION
 La lumière visible ne représente qu'une infime partie du spectre

électromagnétisme; mais étant détectable par l'oeil humain, elle fut donc un des
premiers moyens de caractérisation des composés chimiques.
 L’absorption de la lumière UV-VIS par les molécules se produit, comme pour les
atomes, du fait de transitions électroniques entre différents niveaux d’énergie.
 Un électron à l’état fondamental absorbe des radiations d’une énergie E suffisante

pour l’élever à un niveau d’énergie supérieur, l’état excité, (ce qui détermine la
longueur d’onde λ, par la relation E = h c / λ, où « h » est la constante de Planck et
« c » la vitesse de la lumière).
 Les transitions UV-visible (180 à 750 nm) mettent en jeu les énergies les plus
importantes de la chimie. Elles se situent entre 13.000 à 50.000 cm -1 soit 160 à
665 kJ. mol-1.
 L’ordre de grandeur des énergies mises en jeu est celui des énergies de liaisons
des molécules. Ces rayonnements peuvent provoquer des ruptures de liaisons.
INTRODUCTION
 Le domaine du visible et de l'UV a été abondamment

étudié et ce depuis longtemps. Mais s'il est
indispensable pour une approche expérimentale de la
nature de la liaison, il est pauvre en information
structurale.
 Le domaine UV-visible s'étend de 80 à 800 nm (10-9

m) pour l’UV et de 400 (bleu) à 800 (rouge) nm pour le
visible, l'UV proche de 200 à 400 nm et l'UV lointain de
80 à 200 nm.
 Son emploi est de plus en plus réservé à l'analyse

quantitative
DOMAINE DE L’UV-VISIBLE
 Les transitions électroniques sont provoquées par des photons de longueur

d'onde comprise entre, 103 et 8 x 103 angströms. Ce domaine spectral comprend
les régions ultraviolette et visible.
λ (A) 103 4x103 8x103 104
Proche
Ultraviolet Visible Infra
Rouge
 L'étude des spectres UV procure d'importants résultats concernant les énergies

de liaison et les niveaux d'énergie électroniques.
 L'utilisation des spectrophotomètres ultra-violets est maintenant courante

dans les laboratoires.
 L'absorption dans le visible est liée à la couleur, une des propriétés les plus
étonnantes des composés chimiques. Elle explique pourquoi l'ion Cu(H 2O)++
est bleu, I'ion Ni(H2O)6 ++, vert, I'ion Ti(H2O)63+, rouge violacé.
RAPPELS SUR LES ORBITALES MOLÉCULAIRES
Lorsque se forme une liaison entre deux atomes, il y a formation d'une orbitale
moléculaire résultant du recouvrement des orbitales atomiques. Elle possède deux
niveaux, un liant plus stable que les orbitales atomiques originelles et un antiliant
moins stable. Chacun ne peut recevoir que deux électrons au plus.
exemple de la molécule d’hydrogène
OM antiliante
E- σ*
1s 1s
Orbitale
atomique
OM liante σ
E+
Etat fondamental de la molécule
d’hydrogène
2pσ*
N:azote O: oxygène
2pπ*
2pN 2pσ
2pO
2pπ
2sσ*
2sN
2sO
2sσ
1sσ*
1sN 1sO
1sσ
Niveaux d’énergie des orbitales moléculaires de la molécule de NO

 Quand un électron est promu dans une orbitale d'énergie

supérieure par effet d'un photon incident, son état de spin est
conservé, du moins dans un premier temps. C'est l'état singulet.
Ensuite, le spin peut se retourner pour donner l'état triplet un
peu plus stable (règle de Hund).
 Chaque transition est caractérisée à la fois par sa longueur
d'onde et par son coefficient d'absorption molaire ε à cette

longueur d’onde.
 La grande stabilité des liaisons des composés organiques se

traduit par un écart important entre les niveaux orbitalaires
frontières correspondants. Cette transition d'un électron d'une
OM liante σ vers une OM antiliante σ* demande beaucoup
d'énergie ; elle est intense, pour la liaison C-C par exemple, et
située dans le lointain UV, vers 130 nm
(λmax, éthane = 135 nm, ε= 10.000).
C'est pourquoi les hydrocarbures saturés, tels l'hexane ou le

cyclohexane, qui ne présentent que des liaisons de type σ, sont
pratiquement transparents dans le proche UV.
PRINCIPE DE LA SPECTROSCOPIE UV-VISIBLE
Nous considérerons le cas le plus simple d'une molécule diatomique.
 À la température ordinaire, la plupart des molécules sont au niveau vibrationnel

fondamental v=0 de l’état fondamental.
 Les transitions issues de l'état électronique fondamental partiront en général de

ce niveau pour se terminer sur les différents niveaux vibrationnels de l'état
électronique excité.
 La figure suivante représente les courbes d'énergie potentielle d'une molécule

A-B à l'état fondamental et dans un état excité électronique.
Ces deux courbes ne sont pas superposables car la liaison A-B est plus faible dans
l'état excité que dans l'état fondamental et la distance internucléaire à l'équilibre,
pour un niveau de vibration donné, est plus grande dans l'état excité.
PRINCIPE DE LA SPECTROSCOPIE ELECTRONIQUE
Dissociation
Courbe de l’énergie
potentielle de la
molécule:état excité
Courbe de l’énergie
potentielle de la
molécule:état fonda-
mental
 Les transitions électronique sont extrêmement brèves, inférieures à l0 -

13
seconde et, par conséquent, nettement plus rapides que ne le sont les
vibrations des noyaux atomiques, beaucoup plus inertes que les
électrons.
 Le physicien allemand FRANCK et le physicien américain CONDON ont

émis I'hypothèse qu‘au début et à la fin d'une transition électronique la
distance internucléaire est la même; ce qui permet de représenter cette
transition par une droite verticale.
 Dans cette figure la transition électronique qui part d’un point P,

conduit en P’ à un niveau vibrationnel de l’état excité, mais celle qui part
de Q aboutit en Q’ à un niveau situé au-dessus de l’asymptote à la
courbe de l’énergie potentiel de l’état excité.
 Une telle transition aboutit à la dissociation de la molécule et

l’énergie en excès se transforme en énergie cinétique des atome
A et B.
Le spectre électronique se compose :
• d'un spectre continu au-delà de la fréquence v L qui correspond à la transition

NN'; en effet, il n'y a plus de niveaux discrets d'énergie dans la partie de la
courbe d'excitation située au-dessus de l'asymptote qui passe en N'.
• d'une série de bandes en deçà de cette fréquence v L. La fréquence la plus

basse correspond à la transition PP'.
• Dans cette partie les états sont quantifiés

• la bande la plus intense provient de la transition MM', M étant

le point milieu du segment PQ. En effet, la mécanique
quantique montre que, au niveau vibrationnel v = 0, la distance
internucléaire à l'équilibre OM = re est la plus probable.
•pour des états de vibration supérieurs, la probabilité maximale

est plus voisine des points extrêmes de la vibration. Rappelons
que la mécanique classique prévoit une probabilité maximale
en ces points extrêmes.
TYPES DE TRANSITIONS
 Pour prédire un spectre UV-visible, il faut pouvoir connaître précisement les niveaux
énergétiques de la molécule étudiée à l’aide de la mécanique quantique.
 La description exacte étant illusoire, on procède souvent par modélisation

moléculaire par informatique. On peut cependant dégager quelques règles générales.
 Comme nous l’avons vu dans le cours précédent, l’absorption de la lumière UV-VIS

par les molécules se produit, comme pour les atomes, du fait de transitions
électroniques entre différents niveaux d’énergie.
 Cependant, de nombreux autres niveaux d’énergie (dus à des vibrations, des

rotations et des transitions moléculaires) se superposent aux niveaux d’énergie
électroniques, et plusieurs transitions sont possibles.
 Le spectre résultant prend alors la forme d’une bande large sans caractéristique très
marquée comme le montre la figure suivante:
Dans l’UV-VIS, les transitions électroniques sont accompagnées par des

transitions de vibration entre les niveaux électroniques (c’est la « structure fine
vibrationnelle »). Ainsi, les pics ont l’apparence de bandes.
OBTENTION DES SPECTRES UV Visible
Atome Molécule diatomique
E2
V=0 E1
Quelques eV
Passage
E1 E2
V=0 V=1
2 J=-1
2J=0
2J=+1
OBTENTION DES SPECTRES UV-Visible
Bandes et pics d’absorption
A la transition v = 0 à v = 1 correspond une bande d'absorption.

Cette bande large est constituée de plusieurs pics d'absorption plus étroits dus aux
transitions entre les niveaux rotationnels qui accompagnent la transition entre les
niveaux de vibration.
Avec des instruments ayant une bonne résolution, on peut noter une structure fine.
En effet, il y a non seulement une ligne ou raie qui correspond aux transitions
d’énergie vibratoire ou électronique, mais également plusieurs lignes très
étroitement espacées à cause des variations de l’énergie rotationnelle qui ont lieu en
même temps pour les raies en infrarouge et des variations de l’énergie vibratoire et
rotationnelle pour celles en UV-visible, comme le montre le la figure suivante.
OBTENTION DES SPECTRES UV-Visible
OBTENTION DES SPECTRES UV - Visible
Niveaux
d’énergie Spectre
Structure
fine
Bande
En réalité, les divers types de transitions énergétiques provoquées par l’interaction

avec une onde électromagnétique peuvent se produire simultanément. Par
exemple, une transition dans le domaine UV-visible peut être composée d’une
transition UV-visible vraie mais aussi de transitions d’énergies beaucoup plus
faibles (dans l’infrarouge). Ainsi près de la transition vraie d’autres raies
apparaissent pour constituer une bande aux contours parfois peu nets suivant la
résolution. L’ensemble de ces raies est qualifiée de structure fine.
D’une manière générale, les transitions électroniques qui peuvent avoir lieu dans
une molécule sont les suivantes.
Transition dans l’UV

LES GROUPEMENTS CHROMOPHORES
σ *
Etat
excité
*
Le passage des électrons σ de l'état

fondamental à un état excité σ* peut
provoquer la dissociation de la molécule.

Etat
fondamental
σ
n σ*
n *
 *
σ σ*
Les transitions σ σ*
ΔE grand λ petit
Ces transitions sont très intenses, mais non

visibles dans les conditions de travail.
Les solvants possédant uniquement des électrons

σ pourront être utilisés pour préparer les
solutions (hydrocarbures saturés tel que le
méthane, hexane pour lesquels λ<140nm).
Les transitions n π
ΔE moyen λ moyen
ex CH3Cl λmax = 170 nm

CH3OH λmax = 183 nm
Ces transitions sont moyennement intenses.

Ces transitions ne sont pas observées dans les
conditions classiques de travail.
Les solvants possédant des électrons σ et n
pourront être utilisés pour préparer les solutions
(éthanol, eau, chloroforme).
Les transitions n π*
ΔE petit λ grand
Pour observer cette transition, la molécule doit

posséder des éléctrons σ, π et n.
ex: CH3COCH3 , l’acétone λ = 279 nm
Ces transitions sont visibles dans les conditions

classiques de travail, mais elles sont faiblement
intenses.
Les transitions π π*
ΔE moyen λ moyen
Visibles dans les composés carbonylés et les

autres composés possédant des liaisons
insaturées.
Elles sont intenses.

En résumé
L’absorption dans la région des ultraviolets met en jeu:
 les électrons σ des liaisons saturées

 les électrons π des liaisons insaturées
 les électrons n des doublets non liants des hétéroatomes.
λ nm
200 400
 Les groupements chromophores des composés organiques sont, à la

ressemblance des fonctions, des groupements d'atomes responsables d'absorptions
caractéristiques.
 Par extension, le chromophore correspond au site qui est dans la molécule, à

l'origine de la transition électronique.
 Les molécules appelées chromogènes sont formées d'un squelette porteur d'un ou
de plusieurs chromophores.
 Pour une série de composés possédant le même chromophore, la position ainsi

que l'intensité des bandes d'absorption restent sensiblement constantes, sauf s'il y a
accumulation de plusieurs chromophores à proximité les uns des autres.
 Lorsque les chromophores sont isolés, c'est-à-dire séparés par au moins deux
liaisons simples, on observe uniquement la superposition des effets individuels.
ABSORPTION DANS L’UV
CHROMOPHORES
Double liaison
Hétéroatome
(X,S etc)
Quelques exemples
Chromophore λmax Log ε

C=C (alcène) 170 3.5= 3162
(C=C)2(diène) 220 4.2=15849
(C=C)3 (triène) 260 4.6=39811
(C=C)4 (tétraène) 290 4.8=63096
COOH (acide) 210 1.6
C≡C (alcyne) 180 <2
CONH2(amide) 210 2.2
C=N (imine) 190 3.7
C≡N (nitrile) 170 <2
C=O (carbonyle) 290 1.3 =( 20)
C=S (thio) 330 1.0
N=N (azo) 370 1.2
Quelques exemples
λmax
NOM Chromophore ε max
(nm)
amine -NH2 195 3000
oxime -NOH 190 5000
nitro -NO2 210 3000
nitrite -ONO 230 1500
nitrate -ONO2 270 12
nitroso -N=O 300 100

Chromophore Exemple Excitation λmax nm ε Solvant
C=C Ethene π __> π* 171 15,000 hexane
C≡C Hex-1-yne π __> π* 180 10,000 hexane
n __> π* 290 15 hexane

C=O Ethanal
π __> π* 180 10,000 hexane
n __> π* 275 17 ethanol

N=O Nitromethane
π __> π* 200 5,000 ethanol
C-X X= Br Bromométhane n __> σ* 205 200 hexane

X= I Iodidométhane n __> σ* 255 360 hexane
Chromophores des systèmes conjugués
 Si plusieurs chromophores sont juxtaposés dans une même molécule,

l'ensemble forme un système conjugué de chromophores.
 Le spectre est fortement perturbé par rapport à la simple superposition des

effets produits par les chromophores isolés.
 Plus le nombre d'atomes sur lequel le système conjugué s'étend, plus la

délocalisation spatiale des électrons est importante et plus l'écart entre
niveau fondamental et niveau excité diminue.
 Dans les molécule polyéthylèniques, la bande d'absorption se déplace de

I'ultraviolet vers le visible à mesure que le nombre de double liaisons conjuguées
augmente. À partir de 8 double liaisons conjuguées, les corps absorbent dans le
visible.
 Ainsi la couleur orangée du β-carotène (formule ci-dessous), provient de la

réunion de onze doubles liaisons conjuguées entre elles λmax = 497 et 466 nm
dans le chloroforme.
β-carotène
Cas des éthyléniques
Molécule Nombre Transition Bande

De (= )  - 
*
d’absorption
1
1750 Å
Ethylène
2 2270 Å
Butadiène
2630 Å
3
3520 Å
CH3-(CH=CH)6-CH3 6
9 4130 Å
CH3-(CH=CH)9-CH3
Naphtalène Anthracène Tétracène
Plus la conjugaison augmente plus les λmax se déplacent vers les grandes
longueurs d’onde.
Les énergies de transition sont plus faibles

 L 'absorption des composés aromatiques est beaucoup plus complexe

que celle des éthyléniques.
 Plusieurs transitions, sont observées et elles présentent une structure

fine.
 La substitution du noyau modifie les bandes d'absorption de manière

très importante. Le spectre de la vapeur de benzène, obtenu a partir d'un
échantillon constitué d'une goutte déposée au fond d'une cuve de silice
de 1 cm de trajet optique, est un excellent test pour évaluer la résolution
des appareils du proche UV.
La présence dans une même molécule de plusieurs chromophores peut se traduire

soit :
• (1) par une simple additivité si ces chromophores sont indépendants,
• (2) par un déplacement vers les plus grandes longueurs d'onde en UV ou vers le
visible et une augmentation du coefficient d'absorption moléculaire lorsque
ces chromophores sont conjugués.
• C'est le cas des systèmes diéniques, polyéniques, aromatiques (plusieurs liaisons

>C=C<) ou résultant de la conjugaison de chromophores différents.
• Ces interactions obéissent à des règles qui permettent de prédire la zone

d'absorption maximale. Les spectres dépendent également des interactions avec le
solvant. Bien évidemment, dans l'eau, les spectres sont très souvent sensibles au
pH qui modifie l'ionisation de certaines fonctions chimiques.
SOLVATOCHROMIE
 Les solvants :
 L'étude de ces modifications permet de tirer quelques règles générales. Le spectre

UV Visible d’une molécule dépend du solvant dans lequel elle est dissoute. C’est le
phénomène de solvatochromie.
 La position, l'intensité et la forme des bandes d'absorption des composés en

solution, diffèrent lorsqu'on change de solvant. C'est une des raisons qui rendent les
bibliothèques de spectres UV difficilement exploitables.
 Ces changements traduisent les interactions physiques soluté/solvant qui

modifient la différence d'énergie entre état fondamental et état excité.
 Plus un solvant est polaire, plus une molécule polaire en solution est stabilisée;
plus il est apolaire, plus il stabilise les molécules apolaires.
SOLVATOCHROMIE
Les solvants :
 Ils doivent dissoudre le produit et être transparents dans la région examinée.

L'éthanol à 95% est le solvant le plus utilisé ; il est suffisamment bon solvant pour
beaucoup de composés organiques.
 Les hydrocarbures sont des solvants utilisés pour des substances non polaires ;
ils doivent être purifiés soigneusement pour éliminer toute trace de substances
aromatiques ou éthyléniques.
 L'eau distillée et les acides sont de bons solvants: leur transmission est très
bonne.
 Les solvants ont tout de même des effets : leur polarité changeant, on observe
des changements quant à la longueur d'onde et à l'intensité du maximum
d'absorption.
SOLVATOCHROMIE
Effet hypsochrome
Il existe des transitions pour lesquelles la polarité du chromophore diminue

quand on passe de l'état fondamental à l'état excité. Il en est ainsi pour la
transition n π* du carbonyle des cétones en solution.
Avant absorption, la polarisation C+-O- sera d'autant plus stabilisée que le

composé sera en présence d'un solvant polaire dont les molécules seront attirées
par effet électrostatique autour du soluté.
Ceci aura pour effet de nécessiter plus d'énergie pour provoquer la transition
électronique, d'où un déplacement du maximum d'absorption correspondant vers
les courtes longueurs d'ondes (effet hypsochrome) comparativement à la
position de la bande d'absorption de ce chromophore dans un solvant non
polaire. L'état excité étant atteint rapidement, la cage de solvant qui entoure le
carbonyle n'a pas le temps de se réorienter pour stabiliser la situation après
absorption du photon.
Cet effet s'observe également pour la transition n σ*

SOLVATOCHROMIE
Effet bathochrome
Pour les solutés peu polaires, il n'y a pas d'effet d'orientation des molécules de solvant
autour des molécules de soluté.
On rencontre cette situation pour la transition * des hydrocarbures éthyléniques

dont la double liaison de départ est moins polaire avant qu'après absorption du
photon.
Un solvant polaire a donc pour effet de stabiliser la forme excitée, ce qui

favorise la transition : on observe un déplacement vers les grandes
longueurs d'ondes.
Cet effet bathochrome est défini par rapport au spectre obtenu dans un solvant
non polaire (apolaire).
En résumé, l'étude du déplacement et des variations d'intensité des bandes

d'absorption par effet de la polarité des solvants peut aider à reconnaître la
nature électronique des transitions observées.
SOLVATOCHROMIE
Effet sur le coefficient d'absorption (ε):
 Lors de changement de solvant ou d'ajout de substituant sur la molécule, il peut y avoir une
modification du coefficient d'extinction molaire ε.
 Si ε diminue on a alors un effet hypochrome, les transitions sont moins

favorables et le nombre de photons absorbés diminue.
 L'effet inverse, pour ε qui augmente, est appelé effet hyperchrome.
Effet Conséquences
Hypsochrome (Blue shift) λmax diminue
Bathochrome (Red shift) λmax augmente
Hyperchrome Imax augmente
Hypochrome Imax diminue
EFFET DE L’ENVIRONNEMENT
Effets de solvant :
RÈGLES DE WOODWARD-FIESER
Dans la série des composés insaturés, il existe des règles

empiriques permettant de prévoir la λmax d'un composé (règles de
Woodward-Fieser).
Selon la nature cis ou trans du diène, λmax est différent. Pour

l’hexa-1,3,5-triène trans, λmax = 258 nm ; par contre, pour l’hexa-
1,3,5-triène cis, λmax = 256 nm :
RÈGLE DE WOODWARD-FIESER
Règle: Si le substituant est autre chose qu’un groupe alcoyle, il faut rajouter aux
λmax des incréments correspondant à la nature des substituants
Substituant Valeur à ajouter pour

chaque substiuant (nm)
Double liaison conjuguée

supplémentaire 30
Double liaison exocyclique 5
Alkyle 5
—O—R 6
—S—R 30
— Cl , — Br 5
— NR2 60
0
— O — CO — R
Cétones éthyléniques
Ici λmax = 215 nm (but-3-ène-2-one). S’il y a une double liaison supplémentaire, il
faut incrémenter de 30 nm si les doubles liaisons sont trans, et de 69 nm si elles
sont cis.
H2C CH H
C C (= ) en trans (E)
C O
H λmax = 215 + 30 = 245 nm
H H H3C
C C
H C O
H3C
H H
C C (= ) en Cis (Z)
λmax = 215 nm
H2C CH C O
λmax = 215 + 69 = 284 nm
H3C
Règles WOODWARD pour les composés carbonylés α,β insaturés

Molécules aromatiques
Le benzène présente trois bandes d’absorption U.V. :
la bande K : 184 nm (ε = 6000)
la bande B : 203 nm (ε= 7900)
la bande R : 256 nm (ε= 200)
Si l’on étudie la symétrie des orbitales moléculaires du benzène, on constate

que seules quatre transitions sont permises, dont deux de même énergie, d’où
les trois bandes K, B et R.
L’effet inductif des substituants ne modifie pas les niveaux énergétiques des
O.M.  .
Par contre l’effet mésomère les transforme profondément, et on a

rapprochement de ces O.M.
Valeurs des incréments pour les bandes B et R :

R
R peut être un groupement donneur ou attracteur
Il peut avoir un effet électronique inductif ou mésomère.
Substituant
Effet
-NH3+ - Cl - OH - NH2 - CO – CH3 - CHO
Mésomère
bande B +3 +6 +7 + 17 + 32 + 36
bande R +5 +7 + 14 + 24
NH2
H
Bande B : 203 nm (ε= 7900)
Bande R : 256 nm (ε= 200)
λB=203+17=220nm
λR=256+24=280nm
Règles Empiriques de l’Absorption dans les systèmes conjugués
Woodward-Fieser Rules for Calculating the λmax of Conjugated Dienes and Polyenes
λmax (calculated) = Base (215 or 260) + Substituent Contributions

Règles Empiriques de l’Absorption dans les systèmes conjugués
Some examples that illustrate these rules follow

Woodward-Fieser Rules for Calculating the π __> π* λmax of Conjugated Carbonyl Compounds
Core Chromophore Substituent and Influence

α- Substituent
R = Alkyl 215 nm

R- (Alkyl Group)
Cl- (Chloro Group)
Br- (Chloro Group)
+10 nm
+15
+25
R = H 210 nm HO- (Hydroxyl Group) +35
R = OR' 195 nm RO- (Alkoxyl Group) +35
RCO2- (Acyl Group) +6
β- Substituent
R- (Alkyl Group) +12 nm
Cl- (Chloro Group) +12
Cyclopentenone 202 nm Br- (Chloro Group) +30
HO- (Hydroxyl Group) +30
RO- (Alkoxyl Group) +30
RCO2- (Acyl Group) +6
RS- (Sulfide Group) +85

R2N- (Amino Group) +95
γ & δ- Substituents
R- (Alkyl Group) +18 nm (both γ & δ)
HO- (Hydroxyl Group) +50 nm (γ)
RO- (Alkoxyl Group) +30 nm (γ)
Further π -Conjugation
C=C (Double Bond) ... +30
C6H5 (Phenyl Group) ... +60
(i) Each exocyclic double bond adds 5 nm. In the example on the right, there are two exo-double bond
components: one to ring A and the other to ring B.
(ii) Homoannular cyclohexadiene component adds +35 nm (ring atoms must be counted separately as substituents)
(iii) Solvent Correction: water = –8; methanol /ethanol = 0; ether = +7; hexane/cyclohexane = +11
λmax (calculated) = Base + Substituent Contributions and Corrections
Some examples that illustrate these rules follow.

λ λ
MISE EN OEUVRE
LOI DE BEER-LAMBERT
I0 I
LOI DE L’ABSORPTION: LOI DE BEER-LAMBERT
Soit un rayon lumineux traversant une solution absorbante de concentration C et

de trajet optique égal à L. Si I0 est l'intensité du rayon lumineux à l'entrée de la
solution et I son intensité à la sortie, alors :
L = trajet optique
I0 I
I0 I
dl
L'absorption de la lumière se traduit par un nombre de photons (une intensité
lumineuse) plus faible à la sortie de l'échantillon qu'à l'entrée (I 0>I).
I L
dI
I – I0 = -dI = k.c.I. dl dI/I = - k.c.dl    kc  dl
I I
0
0
I
qui donne après intégration: Ln   kcL
I0
 On définit plutôt l'absorbance (A) selon A = - log (I/Io) = ε.c.L, où ε est le

coefficient d'absorption molaire (en M-1.cm-1). [ε = k/2,30]
 On utilise aussi quelquefois la transmission T = I/Io.
 Bien noter que 0<T<1 et 0<A<∞ et que l'absorbance est additive, tandis que la
transmission ne l'est pas.
Ii
A1 = - log (Ii/I0) ; A2 = - log (IS/Ii) ;
I0 IS Atotale = - log (IS/I0)

= - log (IS/Ii x Ii/I0)
= - log (IS/Ii) – log (Ii/I0)
= A1 + A 2
Atotale = ε1C1L + ε2C2L = L(ε1C1+ε2C2)
Les absorbances s’additionnent. Alors que la
transmission T = T1 x T2
Loi d'additivité des absorbances : à unetotale
longueur d'onde donnée, l'absorbance
A d'un mélange de solutions absorbantes est la somme des absorbances
individuelles.
En conclusion:
 La relation fondamentale utilisée en spectrophotométrie est présentée sous la

forme:
 L'épaisseur de la cuve est exprimée en centimètres.
 Le coefficient d'extinction ε dépend de la manière dont est exprimée la

concentration de la solution.
 Si la concentration est exprimée en grammes par litre, ε est appelé

coefficient d'extinction spécifique.
 Si la concentration est exprimée en moles par litre, ε est appelé

coefficient d'extinction molaire .
Domaines utiles de transparence des solvants
dans la région de l’UV proche
Déviation de la loi de Beer-Lambert
 De nombreux paramètres peuvent provoquer une déviation de la loi de Beer-

Lambert.
 Celle-ci n’est plus vraie quand la concentration devient trop élevée, quand une
réaction modifie la composition ou le pH, ou quand il reste des impuretés.
 En outre elle doit être adaptée en cas de liaisons hydrogène avec le solvant, de
solvatation, d’interactions molécule-molécule aux fortes concentrations.
 Le calibrage doit alors faire appel à des méthodes non linéaires.

 Pour des mesures précises l’absorbance ne doit pas excéder 1
Absorbance
l
εc
) tg α = ε l
C mol/L
Validité de la loi de Beer – Lambert :
Cette relation de proportionnalité n’est vraie que dans certaines conditions :
 lumière monochromatique (pour une longueur d’onde unique)
 concentration pas trop élevée
 pas de fluorescence ni d’hétérogénéité (fluorescence et diffusion

négligeables)
 la substance ne doit pas donner lieu à des réactions chimiques sous l’effet du
rayonnement incident
 la substance ne doit pas donner lieu à des associations variables avec le

solvant
Absorbance
l
εc
) tg α = ε l
C mol/L
Cas idéal: c’est une droite

Le spectre peut également être modifié par le rayon émergeant du

monochromateur qui possède une lumière assez différente de celle que l’on devrait
obtenir théoriquement.
 On appelle cette lumière la lumière parasite, due aux réflexions involontaires

dispersives dans le monochromateur.
 Soit S, l’intensité de radiation parasite non absorbée à la longueur d’onde λ, et I0

et I, les intensités de la lumière incidente et transmise à l0.
 L’absorbance apparente Aapp est donnée par :

Absorbance
Zone de linéarité
Concentration
APPLICATION DE LA LOI DE BEER-LAMBERT
Deux cas sont possibles :
 La substance à doser possède un pic d'absorption caractéristique dans

le visible (substance colorée) ou dans l'UV; on fait alors un dosage direct.
 La substance à doser ne possède pas de pic d'absorption caractéristique;

il faut alors effectuer une réaction colorée; on fait alors un dosage indirect.
Introduction d’un
Solution Gt chromophore
Solution absorbe
n’absorbe pas dans
Réaction chimique dans l’UV-Visible
l’UV-Visible ou
dérivatisation
APPLICATION DE LA LOI DE BEER-LAMBERT
Les conditions d'une bonne méthode de dosage sont les suivantes :
 spécificité : la réaction chimique doit être spécifique de la substance à doser

(qui doit être seule à réagir avec les réactifs de dérivatisation)
 solubilité : le produit dérivé obtenu doit être soluble; la solution doit être limpide
pour permettre une lecture en spectrophotométrie d'absorption.
 stabilité : le dérivé doit être stable pendant un certain temps, pour permettre
d'effectuer les lectures sans que l’absorbance n'évolue.
 proportionnalité : l'absorbance doit être proportionnelle à la quantité

de substance à doser présente; cela nécessite de mettre les réactifs de dérivatisation
en excès (pour que la réaction soit totale), et éventuellement de diluer la solution
à doser (pour être dans les conditions de validité de la loi de Beer-Lambert).
 sensibilité : la réaction de dérivatisation doit être sensible, pour permettre

de doser des solutions de faibles concentrations .
APPLICATIONS
Applications les plus courantes
 Mesure des couleurs : on analyse la lumière réfléchie par une surface. La couleur
correspond au complémentaire du spectre réfléchi.
 Mesure de l’épaisseur des films : cette mesure, se fait sur l’échantillon sans avoir
recours à des méthodes mécaniques qui pourraient l’endommager. Elle intervient par
exemple dans l’études des semi-conducteurs. On envoie le faisceau sur le film pour
plusieurs longueurs d’onde et on observe les interférences entre les lumières réfléchie
par le film et par le substrat. L’intensité totale du rayonnement réfléchie est une
sinusoïde fonction du nombre d’onde. Par transformée de Fourier, on en déduit
l‘épaisseur du film déposé sur le substrat. Il est aussi possible de travailler en
transmission: le film se comporte comme un interféromètre de Fabry-Pérot.
APPLICATIONS
Exemples concrets
La mesure du phénol pur dans l’eau en continu est possible dans la bande
200-300nm. La gamme de mesure s’étend de 0 à 500mg/L avec une
plage de pleine précision de 0 à 200mg/L.
L'analyse de chlorures se pratique en mode UV à 185nm suivant la loi de

Beer-Lambert; L'analyse s'opère dans une gamme de 0 à 300 mg/L
avec une précision de 2% et de 300 à 1000mg/L avec une précision de
10%.
La matière organique contenue dans l'eau et les effluents, les matières en

suspension et les nitrates possèdent un spectre d'absorption dans le
domaine UV.
On peut ainsi estimer la demande chimique en oxygène (DCO), la
demande biologique en oxygène (DBO), les nitrates et les détergents.
APPLICATIONS
Applications quantitatives:
 Plus de 90% des analyses médicales sont basées sur la spectrométrie

d’absorption UV-VIS. Ceci est dû à:
• Une bonne sensibilité: limite de détection 10-5 à 10-7 M

• Une bonne sélectivité: un seul composé absorbe à un λ donné
• Une bonne exactitude: les erreurs relatives sur la concentration
sont de l’ordre de 1-5%.
• Un champ d’application très vaste: même si l’analyte n’absorbe pas,
on peut lui faire une transformation chimique en le faisant réagir un
réactif possédant un groupement chromophore qui absorbe
(Cette réaction doit être quantitative)
• Facilité de mise en œuvre (méthodes automatisées).
APPLICATIONS
Titrages (spectro) photométriques :
Les mesures (spectro) photométriques peuvent être employées pour

déterminer le point équivalent (fin de titrage), si un ou deux composés
entrant dans la réaction absorbe.
La courbe de titrage est obtenue en portant l’absorbance en fonction du

volume titrant.
La courbe est constituée de 2 parties linéaires de pente différente, une droite

avant le P.E. une autre après le P.E.; le P.E. est donné par l’intersection des
2 droites.
APPLICATIONS
Titrant (B)
La réaction de dosage est:
A+B C+D
La réaction est totale Kéq>>1

Le dosage est suivi par UV-Vis
Corps titré
ou dosé (A)
APPLICATIONS
Rappel sur les titrages:
A + B C + D
t=0 C0 0 0 0
Avant le PE, x<1 (C0 - C0x) 0 C0x C0x
Au PE x=1 ≈0 ≈0 C0 C0
Après le PE 0 C0x – C0 C0 C0
Concentration ajoutée Concentration ajoutée

x 
Concentration initiale C0
 Concentration ajoutée  C0 x
APPLICATIONS

Les différents cas sont les suivants: seul le titrant absorbe
A + B C + D
Absorbance
A, C et D
n’absorbent pas
εi = 0
B en excès après le P.E.

commence à absorber
εB > 0
Volume du titrant (VB)

P.E.
APPLICATIONS
L’un des produit de la réaction absorbe

A + B C + D
Absorbance
C ou D
absorbe
εC > 0
A, B et C (ou D)
n’absorbent pas
εi = 0
P.E. Volume du titrant (VB)

APPLICATIONS

Seul le composé à doser absorbe
A + B C + D
Absorbance
Seul A absorbe
B, C et D
εA > 0
n’absorbent pas
εi = 0

P.E.
APPLICATIONS
Le composé à doser et le réactif absorbent
A + B C + D
Absorbance
A absorbe
εA > 0 et
B
absorbe
εB > 0

P.E.
APPLICATIONS
Un des produits de la réaction et le réactif absorbent
A + B C + D
Absorbance
C ou D absorbent
εC > 0 et εD > 0
B
absorbe
εB > 0
P.E.
APPLICATIONS
Un des produits de la réaction et le réactif absorbent
A + B C + D
Absorbance
C ou D absorbent
εC > 0 et εD > 0
B
absorbe
εB > 0
P.E.
APPLICATIONS

Soit le dosage photométrique à 745 nm de 100ml d’une solution de 2,0 x 10 -3 M
en Bi3+ et en Cu2+ par de l’EDTA 0,1 M (Éthylène diamine tétracétique (Y 4-).
l’EDTA forme dans l’eau des complexes stables avec les métaux de transition.
Cu2+ + Y4- CuY2- pKC= 18,8 ; Bi3+ + Y4- BiY- pKC>>18,8

Le complexe BiY- est plus stable que CuY2- : il se forme le premier.
La réaction de titrage est:
1) Bi3+ + Y4- BiY-
2) Cu2+ + Y4- CuY2-
BiY- n’absorbe pas dans UV-Vis
CuY2- absorbe
APPAREILLAGE
UV - Vis
APPAREILLAGE
Le schéma de principe est le suivant:
Source Monochromateur Échantillon Détecteur Lecture
Éléments constituant un spectrophotomètre U.V./visible

Éléments constituant un spectrophotomètre U.V./visible
APPAREILLAGE
source lumineuse
Elle est constituée par :

Une lampe à décharge au deutérium utilisée dans le domaine de 190
à 400 nm avec un maximum d'émission à 652,1nm.
lampe UV au deutérium
 Une lampe à filament de tungstène pour la région allant de 350 à 800 nm.
 La lampe à décharge au xénon est utilisée dans le domaine UV et visible.

Ce type de lampe est très énergétique. Elle fonctionne sous forme de
flash, juste au moment de faire une mesure.
monochromateur
L'élément de base est un prisme, un réseau ou un filtre coloré. Le rôle du

monochromateur est d'isoler le rayonnement sur lequel on fait la mesure.
Il est composé principalement d'un système dispersif, d'une fente d'entrée
et d'une fente de sortie.
monochromateur
Sa fonction est de séparer les radiations de longueur d'onde différente et

de sélectionner une longueur d'onde parmi le spectre du rayon incident.
Les monochromateurs les plus utilisés sont composés en général d'une

fente d'entrée, d'un dispositif de dispersion comme un prisme ou un
réseau, et d'une fente de sortie.
L'échantillon et le détecteur, placés juste derrière le monochromateur,

ne seront donc traversés que par un domaine étroit de longueurs d'onde.
Pour changer de longueur d'onde, il suffit alors de faire pivoter le
dispositif de dispersion. En réitérant cette opération, le spectre entier
sera balayé.
Les 2 types sont le prisme et le réseau .
Sa principale caractéristique est sa résolution (aptitude à séparer 2

longueurs d’onde voisines.
monochromateur
 le prisme
Son principe est basé sur la réfraction de la lumière . L'indice du verre ou

du quartz variant avec la longueur d'onde , la déviation du faisceau
lumineux sera différente suivant λ :

La résolution du prisme , au minimum de déviation est : R = E. (dn/dλ) ,
où E est la base du prisme et (dn/dλ) la variation de l'indice avec la
longueur d'onde .
monochromateur
monochromateur
 le réseau
C'est un bloc de silice sur lequel on a gravé des traits

Q est l'angle de blaze . La dispersion angulaire est donnée par la relation :
Dang= diz /dλ = ( k . n) / cos i2 , où k est l'ordre , n , le nombre de traits/mm et i2 ,

l'angle de réflexion ;
La résolution du réseau est donnée par la formule :

R0= k . n . L , où L est la longueur du réseau , on peut écrire également :
R0 = k . N , où N = n . L , c-à-d le nombre total de traits .
Les défauts des réseaux sont:

• la superposition éventuelle des différents ordres ;
• l'existence ,en voie de disparition, de ghosts liés à la présence de défauts
périodiques dans le tracé du réseau .
Q
monochromateur
La qualité du spectre obtenu par utilisation d’un instrument dispersif est

fonction de la monochromaticité du rayon incident.
Celle-ci dépend de la largeur des fentes du monochromateur ainsi que de

la quantité de lumière parasite.
Lorsque la largeur des fentes diminue, la forme de la courbe spectrale se

modifie jusqu’à ce qu’une image plus ou moins nette apparaisse
monochromateur
Effet de la largeur de fente spectrale sur le spectre du benzène

(largeur de fentes: 1 :2 mm ; 2 :1 mm ; 3 :0.5nm)
La cuve à échantillon
Elle contient soit l'échantillon soit la référence. La longueur de la cuve est

définie (1, 2, 4 ou 5cm de trajet optique). Elle doit être transparente aux
radiations d'étude. Par exemple en UV, les cuves sont en quartz, ne peuvent
être ni en verre ni en plastique.
Sa largeur influe sur la densité optique (absorption) d’une manière linéaire

comme le montre la loi de Beer-Lambert:
A ou D = ε C l avec l = largeur de la cuve.
Dans les appareils actuels, les spectrophotomètres sont équipés de deux

cuves; l’une servant de référence, l’autre pour l’échantillon à analyser.
détecteur
photodiode (semi-conducteur) :
Lorsqu'un photon rencontre un semi-conducteur, il peut transférer un

électron de la bande de valence (niveau énergétique bas) vers la bande
de conduction (niveau énergétique haut) en créant une paire électron -
trou. Le nombre de paires électrons - trous est fonction de la quantité
de lumière reçue par le semi-conducteur qui peut donc être utilisé en
tant que détecteur optique.
détecteur
•Le photomultiplicateur :
Une radiation incidente arrache un électron de la cathode par effet photoélectrique.
Cet électron est alors accéléré vers une seconde électrode appelée dynode portée à
un potentiel supérieur. L'énergie de l'électron incident est suffisante pour arracher
plusieurs autres électrons et ainsi de suite, d'où l'effet multiplicatif. Pour un
électron arraché sur la cathode on peut récupérer jusqu'à 10 6 électrons sur l'anode.
détecteur: barette de diodes
Ce type d’appareil ne comporte pas de monochromateur.

La lumière polychromatique de la source est envoyée sur la cuve qui en
transmet une partie vers un réseau. Le réseau disperse cette lumière.
Chaque photosite du capteur ne reçoit qu’un très petit intervalle de longueur

d’onde λ ± dλ sur lequel il mesure la puissance Po(λ) lorsque la cuve contient la
référence ou P(λ) lorsque la cuve contient l’échantillon.
L’intérêt d’un tel dispositif est que la mesure de la puissance transmise se fait
instantanément sur l’ensemble du spectre de longueurs d’onde.
détecteur: barette de diodes
•barrette de diodes : L'emploi d'une barrette de diodes permet une

mesure simultanée sur toute l'étendue du spectre.
• Une barrette CCD (Charge coupled device) est un alignement de

photodiodes de petites dimensions (14µm x 14 µm) qui fonctionnent en
intégrateur de lumière.
• Le détecteur est constitué de plusieurs centaines -ou milliers- de

capteurs élémentaires, ce qui permet la détection simultanée de toutes
les longueurs d’onde séparées par le réseau.
• Couplé à un ordinateur, le spectrophotomètre permet de tracer très

rapidement des spectres d'absorption. Le logiciel gère le temps de pose
du capteur CCD.
détecteur: barettes de diodes
« Polychromateur » à détecteur CCD (Charge coupled device)

APPAREILLAGE
détecteur: barrettes diodes
La barrette de diodes, bien que présentant un niveau de bruit assez élevé ( de

l'ordre de quelques milliers d'électrons par pixel) et étant sensible aux effets de
lumière parasite, possède divers avantages.
Tout d'abord, elle permet l'acquisition en seulement un dixième de secondes

avec une excellente sensibilité d'un spectre complet. C'est pourquoi on l'utilise
fréquemment pour la mesure de systèmes dynamiques tels que la détection en
chromatographie en phase liquide, les analyses en débit continu, le contrôle de
processus ou les mesures cinétiques.
Les spectrophotomètres à barrettes de diodes sont simples à utiliser: comme il n'y a

pas de fentes à régler et que la vitesse de balayage est sans effet sur la forme du
spectre, les possibilités d'erreur de manipulation sont réduites.
APPAREILLAGE
Le recueil du signal
Le détecteur est relié grâce à un convertisseur, à un microprocesseur, qui non

seulement recueille toute la série de mesures, mais également, dans certains
spectrophotomètre, conduit le pivotement du système optique (réseau ou prisme).
Grâce à l'amélioration de la reproductibilité des mesures, la spectrophotométrie par
absorption UV-visible apporte maintenant des réponses qualitatives.
La spectrophotométrie par absorption UV-visible peut être utilisé soit pour une
mesure qualitative grâce au tracé du spectre d'absorption en fonction de la longueur
d'onde, soit pour une analyse industrielle en déterminant la composition d'un
échantillon grâce à la loi de Beer-Lambert.
Actuellement, grâce aux spectrophotomètres modernes, on préfère effectuer une

analyse multicomposants plutôt qu'une analyse monocomposant: on obtient ainsi en
moins de 1 seconde la totalité des données, ce qui permet de résoudre des
problèmes de plus en plus complexes et de comparer les spectres de différents
échantillons.
APPLICATIONS
Applications les plus courantes
La spectrométrie UV-Visible s’utilise principalement dans deux cas:
 en laboratoire afin d’établir un tracé quantitatif d’un spectre d’absorption en

fonction de la longueur d’onde,
 en analyse industrielle soit pour déterminer la composition d’un échantillon, soit

pour mesurer des paramètres (couleur, turbidité, ...).
Parce que la majorité des molécules organiques complexes est transparente au

radiation de longueur d’onde supérieure à 180nm, la mesure d’un pic d’absorption
entre 200 et 400nm indique clairement la présence de molécules instaurées ou de
groupes d’atomes tels les sulfures ou les halogènes (groupements chromophores).
Ce genre de données complète parfaitement d’autres méthodes en particulier la

spectrométrie IR et de masse, la résonance magnétique nucléaire, les techniques
chromatographiques.
L’analyse monocomposants : on utilise directement la loi de Beer-Lambert.

Dans le cas d’une solution limpide sans recouvrement des spectres d’absorption des
composés, il suffit d’une seule longueur d’onde pour effectuer la mesure.
Pour un mélange de composés, il est possible d’utiliser plusieurs longueurs d’onde.

Uv Visible l3

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PGS METHODES INSTRUMENTALES DE CARACTERISATION

II : RAPPELS SUR LES ORBITALES MOLÉCULAIRES

III: PRINCIPE DE LA SPECTROSCOPIE ELECTRONIQUE

IV: TYPES DE TRANSITIONS

V: OBTENTION DES SPECTRES UV-Visible

VI: LES GROUPEMENTS CHROMOPHORES

VII: RÈGLES DE WOODWARD-FIESER

VIII:LOI DE L’ABSORPTION: LOI DE BEER-LAMBERT

 La lumière visible ne représente qu'une infime partie du spectre

 Un électron à l’état fondamental absorbe des radiations d’une énergie E suffisante

 Le domaine du visible et de l'UV a été abondamment

 Le domaine UV-visible s'étend de 80 à 800 nm (10-9

 Son emploi est de plus en plus réservé à l'analyse

 Les transitions électroniques sont provoquées par des photons de longueur

λ (A) 103 4x103 8x103 104

 L'étude des spectres UV procure d'importants résultats concernant les énergies

 L'utilisation des spectrophotomètres ultra-violets est maintenant courante

Niveaux d’énergie des orbitales moléculaires de la molécule de NO

 Quand un électron est promu dans une orbitale d'énergie

 Chaque transition est caractérisée à la fois par sa longueur

d'onde et par son coefficient d'absorption molaire ε à cette

 La grande stabilité des liaisons des composés organiques se

C'est pourquoi les hydrocarbures saturés, tels l'hexane ou le

Nous considérerons le cas le plus simple d'une molécule diatomique.

 À la température ordinaire, la plupart des molécules sont au niveau vibrationnel

 Les transitions issues de l'état électronique fondamental partiront en général de

 La figure suivante représente les courbes d'énergie potentielle d'une molécule

 Les transitions électronique sont extrêmement brèves, inférieures à l0 -

 Le physicien allemand FRANCK et le physicien américain CONDON ont

 Dans cette figure la transition électronique qui part d’un point P,

 Une telle transition aboutit à la dissociation de la molécule et

Le spectre électronique se compose :

• d'un spectre continu au-delà de la fréquence v L qui correspond à la transition

Le spectre électronique se compose :

• d'une série de bandes en deçà de cette fréquence v L. La fréquence la plus

• Dans cette partie les états sont quantifiés

Le spectre électronique se compose :

• la bande la plus intense provient de la transition MM', M étant

Le spectre électronique se compose :

•pour des états de vibration supérieurs, la probabilité maximale

 La description exacte étant illusoire, on procède souvent par modélisation

 Comme nous l’avons vu dans le cours précédent, l’absorption de la lumière UV-VIS

 Cependant, de nombreux autres niveaux d’énergie (dus à des vibrations, des

Dans l’UV-VIS, les transitions électroniques sont accompagnées par des

Atome Molécule diatomique

Bandes et pics d’absorption

A la transition v = 0 à v = 1 correspond une bande d'absorption.

En réalité, les divers types de transitions énergétiques provoquées par l’interaction

Transition dans l’UV

Le passage des électrons σ de l'état

Ces transitions sont très intenses, mais non

Les solvants possédant uniquement des électrons

ex CH3Cl λmax = 170 nm

Ces transitions sont moyennement intenses.

Pour observer cette transition, la molécule doit

ex: CH3COCH3 , l’acétone λ = 279 nm

Ces transitions sont visibles dans les conditions

Visibles dans les composés carbonylés et les

Elles sont intenses.

L’absorption dans la région des ultraviolets met en jeu:

 les électrons σ des liaisons saturées

 Les groupements chromophores des composés organiques sont, à la

 Par extension, le chromophore correspond au site qui est dans la molécule, à

 Pour une série de composés possédant le même chromophore, la position ainsi