ECBC

EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE
DES CRACHATS
Présenté par : HADHRI MALEK

Encadré par : Mme SONIA ABIDI

Terrain de stage : CHU FATTOUMA

BOURGUIBA SERVICE BACTERIOLOGIE

Année scolaire : 2022/2023

 PLAN

DEFINITION

PHASE PRE- PRELEVEMENT

TECHNIQUES DE
ANALYTIQUE RECUEIL

EXAMEN MACROSCOPIQUE
FLUIDICATION PHASE
CULTURE
EXAMEN MICROSCOPIQUE
ANALYTIQUE
RESULTATS ET
INTERPRETATI
ON
 DEFINITION
● L'examen cytobactériologique des crachats (ECBC) analyse les crachats (=
mucus épais sécrété au niveau des bronches) ou expectorations. Difficile à
réaliser et à interpréter, cet examen porte souvent à controverse et fait partie
des analyses des infections des voies aériennes inférieures.
L’ECBC réponds à trois objectifs :
● la recherche de bactéries responsables d’infections broncho-pulmonaires
(pneumopathies) .
● la détermination du traitement à mettre en place .
● la surveillance de l’efficacité du traitement .
 PHASE PRE ANALYTIQUE
1 . Prélèvement :

Le matin au réveil , après rinçage bucco-pulmonaire .

Lors d’un effort de toux .
Recueil dans un pot stérile (conique).
Acheminement rapide au laboratoire (au moins 2h)

2 . Techniques de recueil :

Face aux risques de contamination, le recueil des expectorations doit être très rigoureux.
Plusieurs techniques de recueil des sécrétions bronchiques peuvent être utilisées :

 Expectoration spontanée :

Le patient recueille lui-même ses crachats après un lavage de dents et des gargarismes
avec de l'eau stérile ou un agent antiseptique pour éliminer au maximum la salive. Le
prélèvement est effectué de préférence le matin, grâce à un effort de toux, et emmené dès
que possible au laboratoire.
 Expectoration provoquée :

Une solution salée est nébulisée pour induire l'expectoration des sécrétions bronchiques.
 PHASE ANALYTIQUE
• L’examen macroscopique :
Les caractéristiques générales des expectorations sont décrites avec précision :

 L’aspect : muqueux (gelée) , mucopurulent (avec des traces de pus) , salivaire (fluide) ,fluide et
purulent , visqueux, adhérent .
 La couleur : rouille , verdâtre ou jaunâtre , rose à rouge si traces de sang .
 L’odeur : parfois désagréable en lien avec la présence de certaines bactéries.
● Fluidication des crachats : sous hotte :

 Décontamination : ajout de soude 20 %

 Agitation au vortex
 Incubation pendant 1/4 d’heure dans l’étuve
 Centrifugation
 Elimination de surnagent
 Répéter 3 fois
 Récupérer le culot ( frottis et coloration )
● Culture :

 10 ul de solution déjà dilué 1/2 dans 10 ml d’eau distillée .

 Vortexer 3 fois (10s chacune)
 Ensemencer en numération par une anse calibrée (strie centrale , étalée sur toute la boite) les milieux
suivants : GS , ANC , Drig , Cet , Iso .
 Incubation à 37°c de 24 à 48 h .
● Examen microscopique :
1- Gram :
 Validation du crachats : observé à l’objectif 10 .

classe cellules leucocytes/ interprétation

épith/champ champ
1 >25 <10 contamination salivaire

2 >25 10-25 contamination salivaire

3 >25 >25 contamination salivaire

+réaction inflammatoire
4 10-25 >25 contamination salivaire
+réaction inflammatoire
5 <10 >25 crachat valide
 Evaluation des différents morphotypes bactériennes : observation 10 .

- Flore monomorphe : Présente un seul type de bactérie : Cocci GRAM positif en

diplocoque : streptococcus pneumoniae .
-Flore polymorphe : Présente plusieurs types de bactéries .
 2-Bleu de méthylène :

 La coloration au bleu de méthylène est une coloration simple où un seul colorant est utilisé pour
souligner des structures particulières dans l'échantillon, la forme (la taille et la disposition des bactéries).
 Noter le nombre de cellules épithéliales et de polynucléaires neutrophile par champ .
 RESULTATS ET INTERPRETATION
Nombre de Aspect de culture Résultats
cellules l’échantillon
épithéliales et de
PNN
CE<10 Purulent avec souillure -Nombre de -Identification +
PNN>25 salivaire acceptable germes>10*7 UFC/ml antibiogramme des types
(50 colonies) de colonies
-Nombre de -Culture non significative
germes<10*7 UFC/ml

CE>10 Purulent avec souillure -Nombre de Identification +

PNN>25 salivaire importante germes>10*7 UFC/ml antibiogramme des types
(50 colonies) de colonies
-Flore bactérienne -Culture non significative
polymorphe et nombre
de germes<10*7 UFC/ml

CE<10 Purulent avec souillure -Flore bactérienne Identification +

PNN<25 salivaire acceptable monomorphe antibiogramme des types
Flore bactérienne de colonies
polymorphe et nombre -Culture non significative
de germes<10*7 UFC/ml
MERCI POUR VOTRE
ATTENTION