CHAPITRE II

SPECTROSCOPIE
D’ABSORPTION DANS
L’UV-VISIBLE
 I - DOMAINE UV-VISIBLE
Domaine UV-visible ≈ 800 - 10 nm
 visible : 800 nm (rouge) - 400 nm (indigo)
 proche-UV : 400 nm - 200 nm
 UV-lointain : 200 nm - 10 nm
 II - PRINCIPE ET REGLES DE SELECTION
 Transition UV-visible (souvent 180 à 750 nm) :

saut d’un électron d’une orbitale

moléculaire fondamentale occupée à une
orbitale moléculaire excitée vacante.
La matière absorbe alors un photon dont l'énergie
correspond à la différence d'énergie entre ces niveaux
fondamental et excité.
 Transitions dans UV-visibles  énergies les plus
importantes de la chimie (13000 à 50000 cm-1 soit
160 à 665 kJ.mol-1)

Ces énergies  Ordre de grandeur des énergies de

liaison des molécules
 
parfois Plus généralement
ruptures de transitions électroniques
liaisons entre différents
niveaux d’énergie des
molécules
III - ABSORPTION DE LA LUMIERE &
LOI DE BEER-LAMBERT - SPECTRE
D’ABSORPTION
 lumière
monochromatique
 solution
absorbante de
concentration C
 cuve d’épaisseur l

Une partie de ce
rayonnement absorbée par
l’échantillon et une partie
transmise
Relations entre I0 et I d’après Bouguer, Lambert
et Beer
Intensité d'une lumière monochromatique
traversant un milieu où elle est absorbée
décroît de façon exponentielle :
I = I0e-klC
* I0 intensité de la lumière incidente
*I intensité transmise
*l épaisseur de la cuve (cm)
*C concentration des espèces absorbantes
*k constante caractéristique de l’échantillon
I = I0e-klC  log(Io/I) = klC/2.3 =  l C
 log(I0/I) = A : absorbance
 I/I0 = T : transmission
%T : transmittance
 : coefficient d'extinction
molaire
caractéristique de la substance à une λ donnée
Si C est la molarité,  en L.mol-1.cm-1


loi de Beer-Lambert : A = - log T =  l C
Validité de la loi de Beer-Lambert
 s'applique pour des radiations monochromatiques
 s’applique pour des solutions suffisamment diluées
pour ne pas modifier les propriétés des molécules
(association, complexation …)
 SPECTRE D’ABSORPTION
• Spectre UV-visible : tracé de l’absorbance
en fonction de la longueur d’onde
(usuellement exprimée en nm)

• Bande caractérisée par position λmax , son

intensité reliée au coefficient d’extinction
molaire εmax

A = ε l C ; valeur de ε
indique si transition
permise ou interdite
Si une seule transition, couleur du complexe :
couleur complémentaire de la couleur absorbée
pendant la transition
Spectres d'un grand
nombre de molécules
 corrélations entre Règles empiriques
structures et maxima
d'absorption de Woodward,

Fieser et Scott
pour diènes et
Tableaux avec composés
incréments reliés aux carbonylés

divers facteurs de insaturés
structure 
Prévoir   *
VI - APPLICATIONS DE LA
SPECTROSCOPIE UV-VISIBLE
VI.1 - Analyse qualitative
Peu de renseignements sur la structure
moléculaire
Le spectre UV ou visible ne permet pas
l’identification d’un produit mais celle
du groupement chromophore qu’il
contient.
VII.2 - Analyse quantitative

Très employée

Utilisation de la loi de Beer-Lambert

Ces mesures ont des applications

dans divers domaines
- En laboratoire :

 Suivi de la cinétique d’une réaction

 Mesure des constantes de dissociation d’acides

et de bases ou des constantes de complexation…

 Dosage du benzène dans le cyclohexane

 Détermination de la composition d’un mélange

 Etude d’isomérie cis-trans ou de tautomérie

- Police scientifique & Expertise judiciaire
- Environnement :
 Ozone dans l’air des villes
 Métaux lourds dans l’eau
 Mesure du phénol dans l’eau (à la bande 200-300
nm)
 Matière organique, matières en suspension,
nitrates contenus dans l'eau
- Lutte antidopage
- Mesure des couleurs (industrie des peintures)
- Agroalimentaire (turbidité…)
 En spectroscopie UV, la caféine présente
une bande caractéristique.
 Sachant que l'absorbance est
proportionnelle à la concentration de la
substance , il va être possible de doser la
caféine par spectrométrie UV à 272 nm.
- Pharmacie :
 dosage du fer dans un médicament
 Dosage des molécules actives dans une
préparation pharmaceutique
Exemple d’application au dosage et à la
caractérisation de principes actifs
Aspirine

Spectre UV de l’acide
acétylsalicylique
- Parfums et cosmétiques
Les crèmes solaires contiennent des filtres UV
ou « écrans solaire ».
Ces filtres absorbent les radiations UV les plus
dangereuses pour la peau.

UV C 200-290 UV B 290-320 UV A 320-400

nm nm nm

Effets Biologiques Dangereux Coup de soleil Bronzage

Absorption Totale Partielle Faible
atmosphérique
Spectre UV du 4-méthoxycinnamate de [2-
éthyl-1-hexyl], Filtre typique UV B :
O
CH3O CH CH C C2H5
O CH2 CH
C4H9

1.2
1
Absorbance

0.8

0.6
0.4
0.2
0
250 300 350 400 450
Longueur d'onde / nm

ε 30 000 L.mol-1.cm-1 à λmax = 310 nm

VII - TECHNIQUES EXPERIMENTALES
VII.1 - Appareillage

 Etude des absorptions  appareil appelé

spectromètre
Schéma de principe d'un spectromètre
d'absorption UV- visible double faisceau
 Source
 Rôle : fournir la radiation lumineuse

Région UV (190 à 400 nm), lampe à

décharge au deutérium

 Région 350-800 nm : une lampe

à filament de tungstène
 Monochromateur

 Rôle : disperser le rayonnement

polychromatique provenant de la source

 radiations monochromatiques
Afin d’éviter de détériorer l’échantillon avec
le rayonnement UV provenant de la source,
celui-ci est placé à la sortie du
monochromateur et ne sera donc traversé que
par un domaine étroit de longueurs d'onde.
 Diviseur de faisceau ou photomètre
 Lumière monochromatique sortant du
monochromateur séparée en deux faisceaux
compartiment de l’échantillon
compartiment de la référence
Le détecteur est relié à un enregistreur qui
permet de tracer un spectre d’absorption
de l’échantillon analysée
VII.2 - Echantillonnage

 Composés étudiés dans divers états

physiques : gazeux
liquide
solide

L’ étude se fait en solution diluée

VII.2.1 - Solvants
Solvant doit :
- dissoudre le produit
- être transparent dans la région d’étude

Exemple : Hexane utilisable comme solvant à

des longueurs d’onde supérieures à 210 nm
 VIII.2.2 - Cellules

* Solution placée dans une cellule ou cuve

* Différentes épaisseurs
* En quartz pour le domaine UV-visible
* En verre pour le domaine visible