UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAH

FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES

DEPARTEMENT DE BIOLOGIE

L’intérêt de l’immunofluorescence directe dans

le diagnostique des dermatoses bulleuses

PRÉSENTÉ PAR : ENCADRÉ PAR: SOUTENU DEVANT LE JURY COMPOSÉ DE :

-GHAYTA ES-SHIMDI Pr OMAR EL FARRICHA Pr OMAR EL FARRICHA

- Dr LAILA TAHIRI EL OUSROUTI - Dr LAILA TAHIRI EL OUSROUTI

Pr R,BENCHEIKH

1
ANNÉE UNIVERSITAIRE 2022-2023
 PLAN :
•Introduction
•Généralités
•Méthodologie de travail
•Résultats et discussion
•Conclusion
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 introduction

INTRODUCTION
Les dermatoses bulleuses constituent un groupe de maladies nombreuses et hétérogènes, Elles sont
secondaires à une atteinte des différents constituants de la peau : l’épiderme, la jonction dermo-
épidermique ou le derme.
Le diagnostic de cette maladie est basé sur l’association entre l’examen clinique, histologique et
plus souvent être complété par l'examen d’immunofluorescence directe (IFD).

La technique de l’IFD permet l’approche diagnostic ,pathogénique et de différenciée entre

dermatoses bulleuses auto-immuns et non auto-immuns avec les différentes classe de DBAI
3
 Généralités
4
 Généralités

Système de jonction cutanée

desmosomes

Système
de
jonction
cutané
Jonction
dermo-
épidermique
5
 Généralités

les desmosomes :
sont des jonction d’encrage liant entre deux kératinocytes, composés de:

les plaques desmosomales 

les desmoglènes

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 Généralités
Jonction dermo-épidermique :
système moléculaire complexe qui assure l’adhésion entre l’épiderme et le derme
- à coté de de l’épiderme les kératinocytes sont fixé à la membrane basale de l’épiderme
par le complexe hémidesmosome-filament d’encrage
- à côté du derme les fibres sont accrochées à la membrane basale par des fibres
d’ancrages

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 Généralités

Technique d’immunofluorescence directe:

Est une technique de marquage,

permet de révéler des complexes immuns
dans des structures cellulaires ou tissulaires.

basée sur l’application des anticorps spécifiques

conjugués à de la fluorescéine pour des antigènes
donnés

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 Généralités

Définition:

Les dermatoses bulleuses sont un ensemble hétérogène des

maladies très diverses, peu fréquentes et à pronostic variable,
parfois péjoratifs
Elles sont dues à l’ altération des structures cutanées de l’épiderme
ou de la jonction dermo-épidermique

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 Généralités

Physiopathologie des dermatoses bulleuses

DBAI : sont liées à la production des auto-anticorps dirigés contre les

protéines de jonction cutanée, c’est-à-dire la modification de
différents systèmes d'adhérence.
DB non AI : provoqué généralement par une prise médicamenteuse
ou par l’exposition à un agent soit physique ou chimique.

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 Généralités

Histopathologie des dermatoses bulleuses

L’accumulation des AC au niveau de la onction cutanée provoque un

clivage dans les différentes niveau da la peau

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 Généralités

Classification de dermatoses bulleuses:

dermatoses bulleuses auto-immunes

dermatoses bulleuses non auto-

immunes
12
 Généralités

dermatoses
bulleuses auto-
immunes

Dermatoses bulleuses auto- Dermatoses bulleuses auto-

immunes intra-épidermiques immunes sous-épidermiques
(pemphigus) ou jonctionelles (Pemphigoïde)

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 Généralités

Les pemphigus:
Acantholyse due à la fixation d’auto-anticorps dirigés contre une ou plusieurs
molécules de complexe desmosomal

Sont classés selon les résultats de l’histologie et de l’IFD, et on distingue :

pemphigus profond
pemphigus superficielle
formes particulières
14
 Généralités

Pemphigus vulgaire : Pemphigus végétant :

Pemphigus
profond

15
 Généralités

Pemphigus érythémateux
(séborrhéiques)
Pemphigus foliacé:

Pemphigus
superficiels

16
 Généralités

Formes
particulières

Pemphigus paranéoplasique: Pemphigus induit

médicamenteux : Pemphigus à IgA 

17
 Généralités

Pemphigoïde
Un groupe de maladies caractérisées par un clivage sous-
épidermique avec dépôts d’auto-anticorps dirigés contre la
jonction dermo-épidermique
Elles sont classées selon les Ig fixées dans la peau et les
antigènes cibles reconnus par les auto-anticorps

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 Généralités

Pemphigoïde
⮚ Pemphigoïde bulleuse
⮚ Pemphigoïde gestationnelle (gravidique)
⮚ Pemphigoïde Cicatricielle (Pemphigoïde des muqueuses)
⮚ Epidermolyse bulleuse acquise
⮚ Le lupus bulleux
⮚ Dermatite herpétiforme
⮚ Dermatoses à IgA linéaire 

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 Généralités

dermatoses bulleuses non auto-immunes 

Elles sont connues par leurs aspects cliniques, leurs évolutions

et surtout la négativité de l'IFD

20
Méthodologie de travail

21
 Méthodologie

Type d’étude:
Notre étude est une analyse rétrospective de 80 cas des dermatoses
bulleuses réalisées au laboratoire d’anatomopathologique du centre
hospitalier universitaire HASSAN 2 de Fès sur une durée de 3ans
(2019 →2021)
Cette étude reposait sur des rapports d'anatomopathologique des
biopsies cutanées comprenant des immunofluorescences directes

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 Méthodologie

Prélèvements tissulaires:
- les biopsies doivent être réalisées en peau péri-lésionnelle
- deux biopsies cutanées pour chaque patient
- Les échantillons expédiés frais au laboratoire
- le fragment pour IFD est envoyé au laboratoire d'anatomie pathologique
et congelé immédiatement dans un congélateur à -80 degrés
- Le fragment pour l’étude histologique est fixé dans du formol tamponné
à 10 %.

23
 Méthodologie

Méthode de travail :

Examen histologique 

Examen
immunofluorescence
directe 
24
 Méthodologie

Examen histologique :
 

Réalisation
Fixation L’inclusion des Coloration Montage
coupes des lames

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 Méthodologie

Examen d’immunofluorescence directe:

⮚ La biopsie cutanée sectionné en coupes au Cryostat
⮚ les coupes sont placées sur les lames et congelées à -50°C
⮚ Au moment de l’examen IFD on sortit les lames, les sécher 5min, fixer
par l’acétone 10 min à +4°C puis ont les séchées 2 min
⮚ la préparation une dilution de 1/20 des AC par le tampon phosphate
salin
⮚ une goutte de AC déposée sur la lame puis elle est étalée et laissée à
l’obscurité environ 30 min

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Résultats et Discussion

27
 Résultats et
discussion

Caractéristiques générales :
Le sexe:
Notre étude autre étude(Ines Zaraa,
Nadia Kerkeni ...)

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61% 39% 63% 47%
 Résultats et
discussion

L'âge:
notre étude autre étude (Abla Sefako Akakpo,
Aurel Abilogun-Chokki…)

60 ans
45±24 ans

29
 Résultats et
discussion

Caractéristiques cliniques :

Siège d’atteinte des dermatoses bulleuses

30
 Résultats et
discussion

DB Les membres Les membres Tous le corps

inférieurs supérieurs

DB auto-immuns - 33.33% 66.66%

Intra-épidermique (6cas) (12cas)
(18 cas)

DB auto-immuns 20.40% 6.12% 73.47%

Sous- (10 cas) (3 cas) (36 cas)
épidermique
(49 cas)
DB non auto- 33.33% 8.33% 58.34%
immuns (4cas) (1 cas) (7cas)
31 (12cas)
 Résultats et
discussion

ORPHANET montre que les Pemphigoïde bulleux atteints

les deux moitiés du corps

Lahlou, Hali, Chiheb ont montré que le tronc était la

localisation préférentielle (78 %) suivi par les membres
inférieurs (11 %) en cas de DB AI intra-épidermiques
(Pemphigus)

32
 Résultats et
discussion

Aspect clinique

33
 Résultats et
discussion

Présence de prurit
Abla Sefako Akakpo,
Aurel Abilogun-
Chokki… sont montré
que le prurit presque
présent chez tous les
DB

34
 Résultats et
discussion

Présence de l’atteinte muqueuse

Duvert-lehembre et Joly
montre que dans les DB AI
sous-épidermiques l’atteinte
muqueuse n’est trouvée que
dans 10% à 20% cas de
Pemphigoïde bulleuse et
rarement dans les
dermatoses à IgA linéaire et
peut être parfois grave chez
d’autre DB sous-
épidermiques, concernent
les DB AI intra-épidermique
l’atteinte muqueuse présente
chez toute les sous-classes
35
 Résultats et
discussion

Caractéristiques histologiques: 
Infiltrat inflammatoire
l'infiltrat inflammatoire présente à 85% chez les DB AI intra et sous épidermique, et à
71.4 % chez les DB non AI. Cet infiltrat en majorité des cas riches en PNN et PNE avec
un aspect plus souvent séreux.

Grain de milium
Les grains de milium présentent seulement chez les DB AI sous-épidermique
(épidermolyse bulleuse acquise, Pemphigoïde bulleuse) avec un pourcentage de
9,75%.

36
 Résultats et
discussion

L’étude de (Pamela El Nemnom, Marie Baeck …) montre que la

plupart des DB AI sous-épidermique possèdent un infiltrat
inflammatoire et certains d’entre eux (Pemphigoïde bulleuse,
Pemphigoïde herpétiforme) caractérisent par la présence des
grains de milium dans quelque cas.

37
 Résultats et
discussion

Niveau de clivage 
Classe de DB Niveau de clivage selon Niveau de clivage selon
notre étude d’autre étude

DB AI intra-épidermique Intra épidermique Intra-épidermique

DB AI sous-épidermique Sous-épidermique Sous-épidermique

DB non AI Sites de clivage Sous-épidermique

différents( derme
superficiel,
interkératynocytes, sous-
épidermique …)
38
 Résultats et
discussion

l’examen de l’immunofluorescence directe

IFD positive et négative

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 Résultats et
discussion

IFD positive : les DB AI

DB AI les sous classe Les AC Aspect
Intra-épidermique Pemphigus vulgaire IgG/C3  
Pemphigus végétant IgG/C3 En résilles
Pemphigus érythémateux IgG/C3
 
 
Sous-épidermique Pemphigoïde bulleuse IgG/C3
 
Pemphigoïde gestationnelle IgG/C3
Pemphigoïde bulleuse IgG/C3 Linéaire

acquise
Pemphigoïde à IgA linéaire IgA/C3
40 Pemphigoïde herpétiforme IgA/IgG/C3
 Résultats et
discussion

Autre étude (CEDEF)

DB AI sous-épidermique DB AI intra-épidermique
-Pemphigoïde bulleuse (dépôts
linéaires IgG, C3)  
-Dermatite herpétiforme (dépôts -Pemphigus (dépôts IgG, C3 en
granuleux IgA) mailles)
-Dermatoses à IgA linéaire (dépôts  
linéaires IgA)
-Épidermolyse bulleuse acquise
(dépôts linéaires IgG/C3)

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 Résultats et
discussion

Diagnostics retenus
DB Sous classes nombre Pourcentages
DB AI intra-épidermique Pemphigus profonds 08 10%
Pemphigus superficielles 10 12.5%
(19 cas)
 
DB AI sous-épidermiques Pemphigoïde bulleuse 31 38.75%
Pemphigoïde gestationnelle 04 05%
(49 cas)
Epidermolyse bulleuse acquise 09 11.25%
Pemphigoïde herpétiformes 03 3.75%
Dermatose à IgA linéaire 02 2.5%
  Bourgeon charnu 01 1.25%
Purpura 2 2.5%
 
eczéma 2 2.5%
  calcinose 1 1.25%
toxicité cutanée du a chimiothérapie 1 1.25%
DB non AI
vascularite leucocytaire 1 1.25%
(12 cas) pityriasis rosé de glibert 1 1.25%
42
toxidermie 2 2.5%
Syndrome de Steven Johnson 01 1.25%
Total 80 100%
 Conclusion
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 Résultats et
discussion

❑ Les dermatoses bulleuses sont des maladies très diverses des pronostics variables à la fois
péjoratives.
❑ L’âge moyen de nos patients était 60 ans avec une prédominance féminine à un sex-ratio 0,6
❑ caractéristiques cliniques montrent que les DB en majorité attaques tous les membres du
corps avec un aspect irrégulier dans la plupart des cas, accompagne à un prurit surtout dans les
DB AI et l’atteinte muqueuse qui est plus remarquée chez DB AI sous-épidermique et DB non AI
❑ Les caractéristiques histologiques montrées que l’infiltrat inflammatoire présent chez la plupart
des DB avec une prédominance dans les DB AI et on remarque que les grains de milium
présentes seulement dans quelque cas chez les DB AI sous-épidermique, et le niveau de
clivage varie selon chaque type de DB.
❑ L’IFD est positive 85% et 15% négative. Pour les AC qui ont montrés dans IFD positives formé
par les IgG/C3 dans les cas de DB AI intra-épidermique et les IgG/C3/IgA dans les cas de DB AI
sous-épidermique selon chaque sous-classe
44
Merci