Processus dynamique d'interaction phospholipide-protéine

étudié par focalisation isoélectrique capillaire avec

détection d'imagerie sur colonne entière

Les liposomes sont des vésicules formées par l'agrégation de molécules de phospholipides
amphiphiles, qui peuvent imiter les membranes cellulaires naturelles. L'interaction entre le
liposome et la protéine est importante pour la structure et la fonction des membranes
cellulaires naturelles. Dans cette étude, une méthode CIEF avec détection d'imagerie sur
colonne entière a été développée pour surveiller le processus dynamique des interactions
phospholipides–protéines. Les profils CIEF aux temps d'interaction successifs ont clairement
montré la formation des différents conjugués entre phospholipide et protéine à différents
stades. En raison de la diversité des propriétés chimiques et physiques des protéines ciblées
dans cette étude (inhibiteur de la trypsine, b-lactoglobuline B, phosphorylase b et
trypsinogène), différents processus dynamiques d'interactions phospholipides–protéines ont
été mis en évidence. Le type de phospholipides a joué un rôle important dans le processus
dynamique d'interaction phospholipide-protéine, comme le montre l'utilisation du
phospholipide zwittérionique (phosphatidylcholine) et du phospholipide acide
(phosphatidylsérine). Les mécanismes impliqués dans ces interactions ont été discutés en
surveillant les processus dynamiques dans cette étude.

Mots clés: Focalisation isoélectrique capillaire / Processus dynamique / Phospholipides /

Protéine / Détection d'imagerie sur colonne entière

Liposomes are vesicles formed by the aggregation of amphiphilic phospholipid molecules

[1,2], which can encapsulate a wide range of solutes and provide controlled bulk delivery of
enzymes, drugs, hormones, proteins, and DNA into cells. Structurally, liposomes closely
resemble natural cell membranes, and they are extensively used in medical and
pharmaceutical research as models for mimicking the structure and the function of cell
membranes. Phospholipid–protein interactions are central to many basic cellular processes,
since proteins can usually perform their functions when they bind to, or pass through the
biomembrane [3–8]. In addition, the phospholipid–protein interactions determine the
structure and function of natural cell membranes. Proteins can interact with the liposomes
in different ways depending on their chemical and physical properties. Some proteins are
considered to be bound at the membrane surface by electrostatic and hydrogen-bond
interactions with the phospholipids and protein components of the bilayer. Some proteins
are incorporated within the phospholipid bilayer and are held there principally by
hydrophobic effects. The phospholipid chains interact with the hydrophobic surface of the
protein and the phospholipid head groups interact with the protein residues located at the
polar–apolar interface of the membrane. A basic structural feature that determines the
phospholipid interaction with proteins is the matching of the effective phospholipid chain-
length to the intramembranous hydrophobic span of the protein. Dynamic process is crucial
for the study of phospholipid and protein interactions, which can elucidate the possible
mechanisms involved in these interactions. The dynamic process can be monitored, provided
that the kinetics of the interaction is slower than the analysis speed of a selected approach
or intermediates involved have long enough life-span compared to the analysis time.