REPUBLIQUE GABONAISE FILIERE : Sciences et Technologies de

Laboratoire
BACCALAUREAT TECHNOLOGIQUE SOUS-EPREUVE :Spécialité biotechnologie
SESSION JUILLET 2022 Option : Biotechnologie
DUREE : 2 heures COEFFICIENT : 4

Ce corrigé comporte 03/03 pages

CHOIX D’UNE METHODE DE RECHERCHE DE SALMONELLA

DANS UNE ENTREPRISE AGRO-ALIMENTAIRE

I. ETUDE DE LA METHODE NORMALISEE EN/ISO 6579 POUR LA RECHERCHE

DE SALMONELLA

R1. D’après le document 1 l’analyse dure 4 jours. (0.5 pt)

R2. Ordre des étapes : pré-enrichissement (0.25 pt), enrichissement (0.25 pt),
isolement (0.25 pt), identification (0.25 pt), sérotypage (0.25 pt)

R3. D’après le document 3, Salmonella enterica est lactose – H2S +(0.25 pt).
Donc sur gélose SS, le milieu n’aura pas changé de couleur à pH alcalin (0.25
pt) et les colonies seront à centre noir (0.25 pt). Donc les colonies suspectes
sont incolores à centre noir (0.25 pt).

R4. Proteus mirabilis donne le même aspect de colonies. (0.5pt)

R5. La recherche de l’uréase permet de distinguer Salmonella enterica qui est

« uréase – » de Proteus mirabilis qui est « uréase + ». (1 pt)

R6. Dans le milieu urée-tryptophane, l’indicateur de pH est le rouge de phénol

(0.5 pt). Les bactéries « uréase + » hydrolysent l’urée. Cela entraîne
l’alcalinisation du milieu. Le rouge de phénol à pH alcalin (pH = 8,2) absorbe
d’après le spectre d’absorption du document 4 à 550 nm. D’après le tableau
de correspondance entre longueur d’absorption et couleur, le rouge de
phénol à pH alcalin sera de couleur rouge (1pt).

R7. Le tube ensemencé avec Salmonella enterica sera de couleur inchangée

(orange) car Salmonella est « uréase – ». (1 pt)
R8. D’après le document 5, la qualité du lot est insatisfaisante si la présence de
la bactérie est détectée dans au moins une unité analysée (0.5 pt). Or 1 unité
a révélé la présence de Salmonella (0.5 pt). Donc la qualité du lot est
insatisfaisante (1 pt).

R9. Ce genre bactérien peut être responsable de gastro-entérites sévères (0.5

pt). L’entreprise doit retirer le lot du marché (1 pt).

2. ETUDE D’UNE METHODE DE DETECTION DE SALMONELLA PAR

IMMUNOSEPARATION ET AMPLIFICATION GENIQUE

R10. L’étape d’immuno-séparation utilise des anticorps anti-Salmonella donc

cette recherche et bien spécifique de Salmonella (1 pt).

R11. L’ADN est une molécule chargée négativement (à cause des

groupements phosphates) donc la molécule migre du pôle négatif vers le pôle
positif (attraction des charges opposées) (1pt).

R12. Au cours d’une électrophorèse sur gel d’agarose, les molécules migrent
dans le champ électrique en fonction de leur taille(0.5 pt). Plus la taille est
petite, plus les molécules passent au travers du maillage du gel et migrent loin
(0.5 pt). Inversement les molécules de grande taille sont freinées rapidement et
migrent moins loin (0.5 pt). Donc le fragment de 100 pb migre loin par rapport
au puits de dépôt. Le fragment de 1500 pb migre peu et est proche du puits
de dépôt. (1 pt)

R13. Témoin négatif : produit de PCR issu du mélange réactionnel sans ADN.
Ce témoin permet de montrer la spécificité de la méthode 0.5 pt). En absence
de Salmonella on a bien une absence de son ADN et donc de bande (0.5 pt).
Témoin positif : produit de PCR issu du mélange réactionnel contenant de
l’ADN d’une bactérie du genre Salmonella. Ce témoin permet de montrer
l’efficacité de la méthode (0.5 pt). En présence de Salmonella on a bien une
présence de son ADN révélée par une bande à 150 pb (0.5 pt).
R14. Les 5 unités sont analysées et les unités 3 et 5 montrent une bande à 150
pb et donc la présence de Salmonella (0.5 pt). Dans la méthode normalisée,
seule une unité s’est révélée positive (0.5 pt).

R15. L’entreprise voulait développer une méthode plus spécifique et plus

rapide. La méthode par immuno-précipitation (0.5 pt) suis d’une PCR (0.5 pt)
est plus spécifique du fait de l’utilisation des anticorps anti-Salmonella. Elle
permet d’identifier 2 unités positives contre 1 par la méthode normalisée (0.5
pt). D’autre part, cette méthode permet de donner un résultat un jour et demi
contre 4 pour la méthode normalisée (0.75 pt).