Université Denis Sassou Nguesso

Faculté des Sciences Appliquées

Parcours : Biologie ; Spécialité : Microbiologie Appliquée
Année académique 2023-2024
ème
Contrôle 3 année de Licence MIB, L3S5. Session Ordinaire
UE : Immunologie 3
ECUE : Immunophénotypage
Epreuve – Immunophénotypage : 2h (Cours du Dr Arsène BIKOUÉ, PhD)
NB : Les réponses doivent être précises.

Exercice 1 : 8 points « La cytométrie multiparamétrique dans le diagnostic et le management des leucémies

aigues »

Un diagnostic précis, fait à temps, des tumeurs hématologiques malignes est crucial pour une prise en charge
appropriée. Les leucémies aiguës constituent un groupe de diverses malignités avec différentes
présentations cliniques, différents prognostiques et protocoles de traitement choisis. Les systèmes de
classification historiques reposaient principalement sur les caractéristiques morphologiques et
cytochimiques, mais actuellement, des données immunophénotypiques, cytogénétiques et moléculaires
sont incorporées pour définir des catégories de diagnostics cliniquement pertinentes. La cytométrie en flux
multiparamétrique permet une détermination rapide et détaillée du profil de l’expression des antigènes
dans les leucémies aiguës qui, en conjonction avec l’évaluation morphologique suggère souvent un
diagnostic définitif ou différentiel étroit. De nombreuses aberrations moléculaires ou cytogénétiques
récurrentes sont associées à des caractéristiques immunophénotypiques distinctes et, par conséquent, la
cytométrie en flux est un outil important pour orienter des tests supplémentaires. De plus, la détection
d’antigènes spécifiques peut avoir une implication pronostique ou thérapeutique, même au sein d’un seul
sous-type de leucémie aiguë. Après le diagnostic initial, une empreinte immunophénotypique d’une
leucémie fournit une référence utile pour surveiller principalement la réponse au traitement et la récidive.

1- Analyser ce texte en faisant ressortir les notions importantes (15 lignes maximum avec
introduction, développement et conclusion)
2- Commenter les deux phrases soulignées.
3- Décrire succinctement les étapes d’un marquage direct et indirect des leucocytes avec de
l’immunofluorescence tout en justifiant les anticorps utilisés et en précisant leurs cibles.
4- Vous disposez pour l’immunophénotypage d’une leucémie particulière des réactifs des marqueurs
suivants : CD45, CD3, CD19 et CD20. Dire sur quelles lignées cellulaires ces marqueurs sont
exprimés. Ensuite, par trois (3) histogrammes successifs reliés entre eux, séparer d’abord les
populations leucocytaires, puis séparer les lymphocytes T et B, et enfin montrer des cellules
CD19+CD20+ et CD19-CD20-.

Exercice 2 : 6 points « Le test de Coombs chez les patients atteint de covid-19 »

Des rapports de cas antérieurs ont décrit des patients atteints d'anémie hémolytique auto-immune (AIHA)
associée au COVID-19, et la maladie des agglutinines froides (CAD) qui se caractérise par une antiglobuline
directe positive (DAT) ou test de "Coombs", mais le mécanisme n'est pas bien compris. Étudier l'importance
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Licence Biologie. L3S5. MIB. Microbiologie Appliquée. Contrôle session Ordinaire. Immunophénotypage. 18.01.2024.
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de la réactivité du test de Coombs parmi Patients COVID-19, nous a conduit à mener une étude rétrospective
sur les patients COVID-19 hospitalisés et traités. Il y avait 27 (20%) patients dans le groupe Coombs-positif
et 108 (80 %) dans le groupe Coombs négatif. Le titre d'agglutinine froide a été examiné chez 22 patients en
raison de symptômes évocateurs de la maladie des agglutinines froides, et tous se sont révélés négatifs.
Nous avons démontré une association significative avec les résultats réactifs du test de Coombs dans une
analyse univariée à travers des résultats cliniques tels que le taux d'admission aux soins intensifs, la gravité
du COVID-19 et plusieurs résultats de laboratoire tels que les taux de CRP, de D-dimères et de lactate
d'hémoglobine déshydrogénase. Cependant, seuls les taux d'hémoglobine et la gravité de la maladie
présentaient une association statistiquement significative dans l'analyse multivariée. Une explication
possible des Coombs positifs associés au COVID-19 est hyperinflammation induite par la tempête de
cytokines, activation du système du complément, altérations des globules rouges, liaison des Protéines
SARS-CoV-2 à l'hémoglobine ou à ses métabolites, et production d'auto-anticorps.

1- Définir le test de Coombs et dans quel cas en particulier utilise-t-on le plus souvent le test de
Coombs ?
2- Interpréter le texte et dire ce qu’apporte cette étude ?
3- A l’aide de schéma, décrire les types de test de Coombs que vous connaissez en précisant la
molécule recherchée.
4- Commenter la phrase soulignée dans le texte.
5- Conclure sur l’importance de la réactivité du test de Coombs chez les patients Covid-19+

Exercice 3 : 6 points « les anomalies du groupage sanguin »

Dans le cas de groupage sanguin, il peut avoir des anomalies qui rendent l’interprétation difficile.
1- Citer les deux grandes épreuves de groupage sanguin.
2- Expliquer en quelques lignes (5 au maxi), la stratégie (la réglementation) pour déterminer le groupe
sanguin d’un patient particulier dans un laboratoire.
3- Citer les anomalies rencontrées dans chaque épreuve de détermination du groupe sanguin.
4- Pour chaque épreuve, expliquer une anomalie au choix.
5- Expliquer les recommandations des contrôles témoins pour traiter les anomalies.

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