Anne Laure Bañuls, Massila Senghor & Jorian Prudhomme 5 Novembre 2013

Phlébotomes et leishmanioses

Le phlébotome :
le plus bel
insecte connu !
Le phlébotome
VS
 Systématique

• Classe : Insecta
• Ordre : Diptera
• Sous ordre : Nematocera
• Famille : Psychodidae
• Sous famille : Phlebotominae
 Morphologie

Petite taille (2 à 5mm)

Corps velu
Longues pattes
Ailes lancéolées

Abonnec 1972
 Tête aile

Génitalia mâle Génitalia femelle

 Identification

Thorax

Head

Abdomen

Abonnenc, 1972
 Biologie
• Alimentation
- Adultes :

Sucs végétaux

Hématophage
Telmophage

- Larves : Saprophytes et phytophages

Milieux organiques
Types d’hématophagie chez l’insecte

Solénophagie Telmophagie
 Biologie
• Habitats

Case Enclos Termitière

Barbacane Chenil Trou sous rocher

 Biologie
• Reproduction

Larve 4 stades :
- Apode
- Saprophyte
- phytophage

Terricoles
obscurité, humidité
-> milieux organiques calmes
• Répartition cosmopolite
- Mai à octobre en zone tempérée
- Toute l’année en zone tropicale

• Comportement
- Activité crépusculaire et nocturne
- Température 25°C
- Humidité relative 70-90%
- Vent faible
- Dispersion de 200 m à 1 km environ
 Méthode de capture

Piège lumineux Piège collant

Pulvérisation intradomiciliaire
 Elevage de phlébotome
• Collection d’œufs

Recherche de
femelles gorgées
VOLAILLES

Capture CDC

Isolation des
femelles gorgées

Gorgées dans pots de ponte Récupération des gorgées

25-26°C, 4 à 9 jours
 Elevage de phlébotome

Méthode de colonisation

Incubation à 28-29°C
œufs Pots d’élevage 4 -7 jours

Cycle biologique

nymphes
5-8 jours

Éclosion, larve stade I

Adultes
3-4 jours
24, 25°c

stade III stade II

4-6 jours 4-6 jours
Larve stade IV 5-7 jours
 Vecteur de pathogènes
• Phlébovirus

Depaquit, 2010

• Leishmania
 Etre vecteur ?
TRANSMISSION

RENCONTRE ET COMPATIBILITE
(Euzet et Combes)

Pour le vecteur la transmission se passe à 3 niveaux

DIMENSION DIMENSION DIMENSION

ECOLOGIQUE ETHOLOGIQUE METABOLIQUE et
IMMUNOLOGIQUE
(cohabiter) (se rencontrer) (s’accepter mutuellement)
Vivre au même endroit Etre en contact

CAPACITE COMPETENCE
Recherche d’un hôte Barrière physique
Vivre longtemps (membrane péritrophique)
Immunité

BASES GENETIQUES
 Capacité vectorielle

• Densité de population (Fréquence des piqûres)

• Indice d’infestation
• Espérance de vie ( 2 semaines à 2 mois)
• Durée du cycle gonotrophique (1 à 2 semaines)
• Comportement trophique :
- Exophile / Endophile
- Intradomiciliaire / péridomiciliaire
 Système hôte / vecteur / pathogènes

Etre vecteur ?
Biologique
1. Cohabiter
2. Etre en contact
Physique
3. Se tolérer
Socio-économique

Environnement Vecteur

Ecologie
vectorielle

Susceptibilité

Hôte Agent pathogène

Parlons un peu des leishmanioses…
 Pourquoi les leishmanioses ?

Un groupe de maladies parasitaires

- dues a un protozoaire flagellé du genre

Leishmania, transmis par un insecte
vecteur, le phlébotome,

- qui touchent divers mammifères dont

l’Homme.
Les leishmanioses : distribution

En France métropolitaine :
Entre 2001 et 2003, 75 cas de leishmanioses.
40% des patients VIH+.

En Guyane Française :
 250 cas par an de leishmanioses cutanées.
Entre 1999 et 2009
241 cas autochtones
721 cas importés

P. ariasi
P. perniciosus
P. mascitii
P. papatasi
P. sergenti
S. minuta
 Taxonomie
Du côté dudes Leishmania
parasite
Subkingdom Protozoa

Order Kinetoplastida

Family Trypanosomatidae

Genus Crithidia Leptomonas Herpetomonas Blastocrithidia Leishmania Sauroleishmania Trypanosoma Phytomonas Endotrypanum

Subgenus Leishmania Viannia

Complex L. donovani L. tropica L. major L. aethiopica L. mexicana L. braziliensis L. guyanensis L. naiffi L. lainsoni

Species L. archibaldi L. killicki L. major L. aethiopica L. amazonensis L. braziliensis L. panamensis L. naiffi L. lainsoni
L. chagasi L. tropica L. garnhami L. peruviana L. guyanensis
L. infantum L. mexicana Non pathogenic for L. shawi No final
humans classification
L. donovani L. pifanoi Old World L. colombiensis
L. venezuelensis L. arabica L. equatorensis
L. gerbilli
L. forattinii L. turanica
New World
L. aristidesi
L. enrietti
L. deanei
20 espèces pathogènes L. hertigi Association avec
pour l’homme les formes cliniques
Bañuls et al. 2007
 Du côté du vecteur
800 espèces (monde)

Genre Ancien monde Genre Nouveau monde

- Sergentomyia -Brumtomyia, - Warileya
- Phlebotomus - Lutzomyia

~ 70 vectrices
Spécificité Leishmania / phlébotome

• L. major : P. (P.) papatasi, P. (P.) duboscqi

• L. tropica : P. (Para.) sergenti
• L. infantum : Phlebotomus (Larroussius)…

• L. amazonensis : Lu. (Nyss.) flaviscutellata

• L. braziliensis : Lutzomyia (Psychodopygus)
• L. mexicana : Lu. (Nyss.) olmeca olmeca
• L. guyanensis : Lu. (Nyss.) umbratilis
 Vecteur ancien monde
Genre Sous genre Espèces incriminées Leishmanies

Phlebotomus Phlebotomus papatasi, duboscqi major

Paraphlebotomus sergenti tropica

alexandri donovani
caucasicus (alexandri) major
Synphlebotomus martini donovani
guggisbergi tropica
ansarii (major)
Larroussius ariasi, langeroni, neglectus,
perfiliewi,
perniciosus, tobbi infantum
longicuspis, pedifer aethiopica
Adlerius chinensis infantum
Euphlebotomus argentipes donovani
 Vecteur nouveau monde
Genre Sous genre Espèces incriminées Leishmanies

Lutzomyia Lutzomyia longipalpis infantum

(=chagasi)
diabolica mexicana
Nyssomyia olmeca olmeca mexicana
flaviscute/lata amazonensis
olmeca bicolor venezuelensis
intermedia braziliensis
umbratilis, anduzei, whitmani, guyanensis
trapidoi panamensis
Psychodopygus wellcomei braziliensis
panamensis (panamensis)
Helcocyrtomyia peruensis peruviana

Pintomyia pessoai (braziliensis)

 Cycle des leishmanioses
Repas sanguin :
Transmission Phagocytose
Division
(promastigote
metacyclique)

Infection

Maturation (promastigote)

Transformation
(amastigote)

Repas sanguin :
Transmission Multiplication
(amastigote)
Les réservoirs
- 62 espèces de mammifères réparties en

21 familles et 7 ordres

- Parmi elles :
• Homo sapiens

• Mammifères domestiques

ex : Canis familiaris

• Nombreux mammifères sauvages

ex : Psammomys obesus
 Nombreux mammifères sauvages
- Carnivora

- Rodentia

- Hyracoidea

- Edentata

- Marsupialia

- Perissodactyla

- Primates
 Leishmaniose
chez le rongeur
 J.A. Rioux J.A. Rioux

J.A. Rioux Leishmaniose

chez le chien
J.A. Rioux
Mécanisme de la transmission (vecteur)
3 phases :

1. Infection du vecteur
(repas sanguin)

2. Le développement du
pathogène chez le vecteur

3. Infection de l’hôte vertébré

1. Infection du vecteur

• Femelles hématophages

• Se gorgent toutes les 1 à 2

semaines (pour la maturation des œufs)

• Acquisition des leishmanies lors

d’un repas sur un hôte infecté
2. Développement chez le vecteur
3. Infection de l’hôte vertébrés
• Par piqûre (après un repas sanguin infestant)
- Régurgitation (effort du phlébotome pendant la
piqûre)
- Dommage valve stomodéale (action des PSG)
Promastigote Secretory Gel
Mécanisme de la transmission (homme)
3 phases :

1. Infection de l’hôte
(action de la salive)

2. Le développement du
pathogène chez l’hôte

3. (Ré)Infection du vecteur
1. Infection de l’hôte

Action de la salive
Vasodilatation (Maxadilan)
Anti agrégation plaquettaire (Apyrase)
Immunosupression locale (Maxadilan)
Immunogénicité
(Diverses protéines et carbohydrates)
2. Développement chez l’hôte
 L’homme
2. Développement chez l’hôte
Zoonose : infection ou Anthroponose : maladie
infestation naturellement infectieuse propre à
transmissible de l'animal à l’homme. Leishmania
l'homme et vice versa. La donovani et L. tropica
majorité des espèces de
Leishmania

Statut biologique de
l’homme :
VIH, statut nutritionnel
Impact sur la
Activités de l’homme : transmission
Loisirs, activités
professionnelles
 Différente formes cliniques
Cutanée Cutanée diffuse

C. Duhamel et A Dompmartin P. Desjeux P. Desjeux M. Develoux

Muco-cutanée Viscéral

CHU Angers P. Desjeux P. Desjeux et JP. Dedet S.Belazzoug

 Trois types épidémiologiques

Affection surtout des Affection animale mais Affection exclusivement

animaux sauvages. Cas touche cette fois des humaine. Elle évolue sur
humains sporadiques animaux proches de un mode endémique
avec localement des l’homme. Elle passe chez avec des poussées
poussées épidémiques. l’homme sur un mode épidémiques.
endémique.
Les moyens de lutte
Contrôle : interrompre le cycle épidémiologique

Réservoir

Vecteur Vecteur
Agent pathogène

Réservoir

Homme
1. Lutte contre les réservoirs
• Méthodes
- Dépistage systématique des individus
infectés
- Traitement
- Élimination

• Contraintes
- Nature du réservoir (animal sauvage,
animal domestique, homme)
- Limites du traitement
 Contrôle du réservoir
• Réservoir humain exclusif :
- Dépistage et traitement des cas

• Réservoir animal :
- Domestique (chien) : dépistage et élimination
des chiens infectés
- Sauvage :
• Mammifère terricole
• Mammifère non terricole
Dépistage et traitement des cas humains : le cas de la
LCM au Pérou
 Dépistage et élimination du réservoir canin : le
Programme de contrôle de la LV au Brésil (1980-1993)

 Chiens examinés (sérologie) : 3.009.205

 Chien abattus : 145.121

 Maisons visitées : 85.414

 Localités : 40.696
 Municipalités : 962
(données : Fundação Nacional de Saùde)
2. Lutte contre les vecteurs
• Méthodes :
- Lutte anti-larvaire
- Destruction des gites larvaires ( domestiques, péri-
domestiques et sauvages) Ex : labourage profond

- Lutte anti-adulte
- Ex : Epandage d’insecticides, ceintures de déforestation
autour des villages

• Limites :
- Biotopes larvaires inconnus
- Zoonoses sauvages
3. Diminution contact vecteur / homme
• Mesures individuelles :
- Éviter d’installer l’habitat dans des zones à risque,
- Éviter les sorties dans les lieux à risque, aux périodes à
risque
- Vêtements couvrants
- Répulsifs
- Moustiquaires imprégnées

• Mesures collectives :
- Ceinture de déforestation
Destruction des réservoirs : Programme de lutte contre
la LC zoonotique dans le sud de l’URSS

- labourage
profond (50 cm)
- canaux
d’irrigation
- ceinture autour
des villages
Habitat permanent dans des zones à risque
Habitat temporaire dans des zones à risque
Éviter les périodes à Emploi de
risque moustiquaires
imprégnées

Variations mensuelles des % de

cas de contamination humaine
Emploi de vêtements couvrants

Tenue adaptée….
Solution finale : la lutte extrême…
Ce sera eux ou nous…
Etudier les populations de
vecteurs
Différentes approches pour comparer les
populations
• Génétique (microsatellites, séquençage…)

• Morphologique

• Morphométrique
 Approche géo-morphométrique

Morphométrie

Peut être abordée par

deux approches
différentes

Morphométrie classique Géo-Morphométrie

LANDMARK BASED GEOMETRIC
MORPHOMETRICS
SUMMARY
 Analyse des données morphométriques
Jorian Prudhomme
- Analyse en composante principale (PCA)
Logiciel Tps, IMPnew
- Comparaison des Centroid size
Logiciel Tps, R
- Analyse canonique des variables (CVA)
Logiciel IMPnew, Morpheus
 Contexte

Vladimίr Motyčka

CDC Public
Health
 Lieu d’étude

Sidi Athmane

Dar Bachir

Ait Brahim
Akhlij

Errachidia
Boumaine
Mirna Es Sfalate

Tafat
Tigmi Jdid
 Préparation des échantillons
Dissection des individus
- Tête et génitalia montés entre lame et lamelle
- Ailes gardées pour la morphométrie
- Corps entreposés à -20°C

Préparation des ailes

- Préparées, colorées, montées, photographiées
Jorian Prudhomme
 Analyse des données morphométriques

- PCA
 Analyse des données morphométriques (suite)
- CVA

(Wilcoxon-Mann-Whitney test, p = 4,6.10-4)

• Différences morphologiques
- Plasticité phénotypique

- Différentes capacités vectorielles ?

- Résultats confirmés par analyse génétique
Merci pour votre attention

Les entomologistes sont partout !