Loi n° 18‐11 du 2 juillet 2018 relative à la

santé
• Ce sont les produits stables dérivés du sang ou du
plasma humain.

• Possédant des propriétés curatives et préventives à

l’égard des maladies humaines.

• Administrés à l’homme en vue de rétablir les fonctions

déficitaires ayant entrainé des états pathologiques.

DU DON DU SANG AUX PRODUITS SANGUINS

aphérèse
sang total
Produits
Sanguins PSL plaquettes
Ce sont des produits préparés industriellement à globules rouges
Labiles leucocytes
partir de plasma humain, à chaque composant plaquettes
plasmatique correspond une fonction physiologique. globules rouges

• Les MDS sont obtenus par fractionnement des différentes plasma plasma
protéines contenues dans le plasma (obtenu par centrifugation du
par aphérèse) ou par technologie de
sang total ou
Médicaments albumine
recombinaison génétique. .
Dérivés du MDS immunoglobulines
• Les MDS sont fabriqués par industrie pharmaceutique et soumis à
l’agence national de contrôle de qualité. Sang facteurs de coagulation
 Loi n°93 5 du 4 janvier 1993 relative à la sécurité en matière de transfusion
sanguine et de médicament
PSL (Produits sanguins labiles)
 CGR phénotypés, irradiés,
déplasmatisés
 CP phénotypés, irradiés, déplasmatisés
 PFC sécurisé et PVA
 Distribution : ETS
 Hémovigilance
Conformément aux recommandations de la directive n° 89/381/CEE, la loi de janvier
MDS (Médicaments Dérivés du Sang) 1993 instaure le statut de médicament pour les produits dérivés du sang :
 Concentré de Facteurs de Coagulation « Les produits stables préparés à partir du sang et de ses composants constituent
des médicaments dérivés du sang ... »(art. L 670‐1).
 Albumine
 Ig Par conséquent ces médicaments sont soumis aux mêmes dispositions réglementaires
Colle biologique que tous les médicaments.
 Distribution : Pharmacie
 production par un établissement pharmaceutique,
 Pharmacovigilance
 respect des bonnes pratiques de fabrication,
 respect des règles d'étiquetage,
 obtention d'une AMM ou d'une ATU délivrée par l'Agence du médicament,
 distribution par le réseau pharmaceutique hospitalier ou officinal.
• Le fractionnement est effectué à l’échelle industrielle, il faut des
quantités importantes de plasma (2000‐5000L) pour préparer les
MDS.
• Nécessite plusieurs opérations successives de fractionnement, de
concentrations, de purification, d’élimination et/ou inactivation
virale.
• Les principales techniques de fractionnement utilisées sont la
précipitation fractionnement éthanolique et de purification
(chromatographie, filtration, ultrafiltration).
  30 à 40 % du plasma fractionné au monde est issu de la collecte de sang
total

 60 à 70 % de collecte par aphérèse.

 Le volume moyen de plasma du don de sang total est compris entre 200
et 250 ml

 le volume collecté est au minimum de 450 ml mais peut atteindre 880 ml

(avec l’anticoagulant).

 Leuco‐réduction: Assurée par l’utilisation de différents filtres, permettant

l’élimination des agents infectieux leucotropes connus (comme le CMV et
le HTLV‐I) ou inconnus. (GB résiduels< 10 )

 Il existe trois catégories de plasma pour le fractionnement selon la durée

prélèvement et de la congélation • Des contrôles administratifs: vérification des conditions
Catégorie 1 Catégorie 2 Catégorie3 Réception de transport, des numéros des dons et des résultats
biologiques effectués sur ces dons
Délai entre le pvt et la durée de prélèvement > congélation entre 24 et 72
congélation :6 h 10 min h
FVIII 0,8UI/l après congélation au max dans FVIII est faible
décongélation les 24 h  utilisé pour production • systématique avant le fractionnement du plasma, d’une
destinés pour la F VIII≥ 0,7 UI/ml d’albumine et
Mise en durée de 90 jours : permet le recueil d’informations post‐
don ou post‐transfusionnelle transmise par les unités
fabrication des facteurs destinés pour la immunoglobulines : quarantaine d’hémovigilance des ETS au LFB.
de coagulation fabrication du fibrinogène Anti tétanique [Ac] min est
et de l’albumine de 8 UI/l
Anti D [Ac] minimal est de Nouveaux • réalisés sur des mini pool de 512 échantillons de 1 ml
1μ/ml avant fractionnement
Anti CMV [Ac] min 10 UI/ml
contrôles • DGV des virus suivants : parvovirus B19, VIH, VHB, VHC et
Anti rabique [Ac] min est 5 virologiques VHA
UI/ ml
 Contrôles Cryo‐précipitation Précipitation par l’éthanol
• les échantillon représentant ces unité de plasma sont re‐
virologiques testé pour identifier l’unité défectueuse qui sera éliminée.
positifs
La décongélation lente du plasma (congelé – 50 basée sur une succession de précipitations par
et – 80 °C ) à une T° se situant entre +2° et +4°C, l’éthanol à froid en fonction des paramètres :
• dépistage viral génomique du parvovirus B19, VIH, VHB,
dernier contrôle VHC et VHA est effectué sur le pool de production.
permet d’obtenir :
PH, Température, de la concentration en éthanol
sérologique • Constitué d’environ 4000 litre plasma représentant environ
10000 dons
(alcool)

Cryo‐surnageant (Alb, Ig, VII, XI, IX, X, V, II, des forces ioniques et de la concentration en
ATIII, PC) protéines

• techniques de précipitation : la séparation des principales

protéines plasmatique Cryo‐précipité (VIII, I, VWF)
Fractionnement • techniques de chromatographie : une extraction (fine) des
protéines plasmatiques présentes en faibles concentrations.

Précipitation par l’éthanol Précipitation par l’éthanol

Etape 1 : l’éthanol à 8% ; PH : 7,3, T° :‐2°C.

Les précipitations successives sont suivies
centrifugation : un surnageant et un précipité (la fraction 1 de
d’une étape de séparation: Cohn : le fibrinogène).

Etape 2 : l’éthanol à 25% ; PH : 6,8, T° :‐6°C.

par centrifugation ou filtration permettant
centrifugation : un surnageant et la fraction 2 et 3 de Cohn i
de recueillir le précipité et le surnageant. (les facteurs vit K dépendants et les différentes Ig).
 Chromatographie
séparation sélective et la purification des différentes
Précipitation par l’éthanol protéines plasmatique particulièrement celle présente en
faible concentration,

Chromatographie d’échange d’ions : fixation des protéines

sur un support constitué d’une matrice insoluble sur laquelle
seront greffés des résidus cationiques ou anioniques.
Utilisée pour la production de certaines Ig, thrombine, ATIII,
Etape 3: l’éthanol à 43% ; PH : 6, T° :‐6°C. VIII, IX, VII, XI.

Centrifugation : la fraction 4 de Cohn (Ig. Pures).
Etape 4 : l’éthanol à 43% ; PH : 4,8, T° :‐6°C.
Centrifugation : la fraction 5 de Cohn (Albumine).
Chromatographie d’affinité avec ligands immunologiques :
consiste à faire passer le mélange des protéines sur une
colonne, sur laquelle sont griffés des Ac (Ig) spécifiques aux
protéines que l’on veut isoler, puis les protéines sont
recueillis en modifiant les liaisons Ag‐Ac.

Chromatographie
Chromatographie sur gel : séparation des protéines en
fonction de leur taille moléculaire

Chromatographie DEAE Sephadex : les billes DEAE

chargés positivement sont mélangés à la solution. Ainsi
les billes retiennent les contaminants protéiques
plasiques chargés négativement (IgA, IgM, activateurs
prékallikréine)

Cette étape assure la réduction de tout les virus nus et

certains virus à enveloppe.
Méthode Description Principe de séparation Application

Ultrafiltration Processus de Séparation basée sur Tous les produits. Méthode Description Principe de séparation Application
fractionnement sur la différence de masse Précipitation par PEG Les PEG sont des Agent de précipitation Purification de l’ATIII,
membranes ayant des moléculaire. polymères non dénaturant l’alpha‐1
pores de taille définie hydrosolubles capable antithrypsine,
et retirent les de précipiter les inhibiteur de la C‐1
molécules de bas proteines selon leur estérase
poids moléculaire et taille
les sels.

Microfiltration. Procédure de Tous les produits.

séparation sur
membrane à basse
pression et
écoulement
transversale.
Séparation des
colloïdes et des Agent de précipitation
particules variant de non dénaturant
0.2 à 10 µm.
 VII, XI, II, V, X, ATIII, PC
VIII, vWF, I
procédé de fabrication d'un F VIII purifié par chromatographie d'échange d'ions
A. Inactivation par la chaleur humide:
La pasteurisation : est un chauffage en milieu liquide à 60C°
durant 10h. Elle est efficace vis‐à‐vis des virus du HIV, des
Hépatites, pas toujours active sur le parvovirus B19.
procédé de fabrication d'un F IX purifié par chromatographie d'échange d'ions et
chromatographie d'affinité sur support d'Héparine‐Sépharose
B. Inactivation par méthode solvant détergeant :
Consiste en une incubation de la solution plasmatique en
présence de solvant organique et d’un détergeant, dans des
conditions précises de durée et de températures.
Cette technique est la technique de référence pour les fractions
coagulante.
C. Nanofiltration : • 5 familles :
Filtration réalisée sur des membranes dont le diamètre des
Albumine
pores est de l’ordre de 15 à 35 nm. Il permet l’élimination de
virus de petite taille parmi lesquels on peut retrouver des virus
Fractions coagulantes

nus très résistants. Immunoglobuline

Fraction antiprotéasique

Colles biologiques

• 52% du pool protéique du plasma. • Dégrée de pureté 95% avec trace IgA, alpha2 macroglobuline.
• Fait à partir d’un pool de plasma≈10
• 2 types d’albumine : hyperosmotique à 20%, iso‐oncotique à 4%.
• Inactivation virale (aucun risque viral)
• Ce MDS se conserve à 4°C pendant 5ans
• Joue un rôle dans :
 Le maintien de la pression oncotique, • Indication :
 La cicatrisation des plaies,  Restauration du volume plasmatique (état de choc, brulures),
 Le remplissage,
 Hypo protéinémie sévère (par défaut de synthèse ou fuite urinaire),
 La restitution de déplétion protéique.

• Formes pharmaceutiques : flacon de 50, 10, 100 ml.  Prévention et traitement de l’œdème cérébral (Albumine 20%),
• Contenu: Na Cl=145mEq/L, K Cl=2mEg/L  Prévention de l’ictère nucléaire chez nouveau‐né et prématurées.
• Risque : • Corrigent les troubles d’hémostase
 Surcharge circulatoire s’il y a une insuffisance rénale.
• Dose minimale efficace : dépend du poids du
 Allergies
malade, degré du déficit et durée de vie de
• Demi‐vie : 18 jours.

• Conserve à température ambiante.

fraction.

• Le débit d’administration : 2 ml/min pour éviter

l’hémoconcentration dans les brulures.

• Flacon de 20 ml. • Le taux protecteur : 30% (0.3 UI/ml) lors d’hémorragie minimes,

• Durée de conservation : 2 ans dans l’acte chirurgical il faut un taux de 50‐60%.

• Il est concentré à 25 unités/ml (25x20=500UI) • En cas d’acte chirurgical poursuivre l’administration jusqu’à

• Il est indiqué dans la prévention et traitement des hémorragie, cicatrisation.

couverture des actes chirurgicaux, maladie de vW. • En cas de présence d’ACC (10% des hémophiles) il faut augmenter la

• Durée de vie : 8 à 12h dose.

• Posologie : 20 à 40 unités/Kg (8 à 12h), il faut diminuer le délai n cas • Si le titre d’ACC est élevé : facteur ne répond pas on a recours à la

d’hémorragie ou de fièvre. corticothérapie, plasmaphérèse, immunoglobuline.

• (médicament recombinant par génie génétique) • Divers degrés de pureté.
• Formes : • Durée de vie : 18‐20H.
• Concentré de FVIIIa standard : de pureté
• Indication : prévention traitement de
intermédiaire.
l’hémorragie liée à l’hémophilie B.
• Concentré de FVIIIa de haute pureté.
• Concentré de FVIIIa de très haute pureté.

• 4 facteurs vitamino‐ K‐ dépendant aux concentrations suivantes :

• Concentré en FVIII spécial maladie VW indiqué
• FII : 30‐40 UI/ml.

dans des hémorragies liées à la maladie de • FIX : 25‐30 UI/ml.

• FX : 30‐ 40 UI/ml.
VW type III. • FVII : 10‐20 UI/ml.

• On trouve aussi protéine PC : 35 à 40 UI/ml.

• Dans cette fraction il y a 25 à 38 mg de protéines et 5 ml d’héparine pour empêcher la

formation de thrombine.

• Conservée 3 ans à 4°C.

• Flacon de 10 à 20 ml.
• Indication : • Fraction I de COHN (lyophilisat dans flacon de 200 à 300 ml) à
• Déficit en facteur chez des malades qui nécessite un apport faible en volume. concentration 1%, se conserve 3 ans à 4°C, utilisé immédiatement après
• Hémophilie B, déficit congénital en facteur, hémorragies importantes avec reconstitution.
insuffisance hépatique sévère, surdosage aux AVK, avitaminose K, maladies
• Indication :
hémorragiques sans insuffisance hépatique et sans CIVD.
• Hypo et afibrinogénémies congénitales car il y a risque hémorragique
• Le taux hémostatique des facteurs pro coagulants : 40%.
• Couverture d’acte chirurgical avec afibrinogénémie
• Contre‐indication :
• Syndrome de défibrination aigue avec hémorragie importante
• CIVD confirmé ou suspectée.

• Posologie : 20 à 30 UI/Kg. • Durée de vie : 3‐5 j

• Posologie : taux protecteur 0.8 à 1 g/l

• Prévention d’hémorragie lors des déficits sévères • Antithrombine :

• Durée de vie : 4‐ 6 h • Se présente en flacon de 20 cc, de de 500à 1000UI D’AT et un degré de pureté > 2
UI/mg.
• Se conserve 2 ans à 4°C pour prévenir et traiter les thromboses veineuses en cas
de déficit constitutionnel.
• Indication : Dans CIVD associe au PFC.
• Posologie :
• 25 à 60 UI/Kg à renouveler toute 24 à 48 h
• Dans CIVD : 100UI/kg
• Il faut maintenir un taux > 75%
 • Ig Polyvalentes :
• Dans le cas de traitement préventif on
En injection IV

augmente le taux d’AT et on rajoute ensuite IgG‐A dose>75%

Indication :
l’héparine, une fois le taux est normalisée.  Déficit immunitaire humorales.

 Dans déficit acquis : kahler, hémopathies malignes, syndrome néphrotique, brulures étendus.
• Concentré de protéine C :
 Traitement préventif : zoona, herpes, encéphalite, maladies sous immunosuppresseurs

• Formes sévères homozygote de déficit en PC.  Traitement curatif : virose, diphtérie, maladies infectieuses et virales graves.

 Les Ig polyvalentes sont utilisés dans un but immuno modulateur dans cytopénie,

thrombopénie auto‐immune, MHAI, hémophilie A et B avec ACC.

• Ig spécifiques : Exemples : anti HBS, anti rabique, antitétanique, anti D.