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NOTIONS

FONDAMENTALES
DE
CHROMATOGRAPHIE
MariePauleBassez
http://chemphys.ustrasbg.fr/mpb

PLAN
1.Introduction
2.Grandeurschromatographiques
2.1RapportdedistributionKdusolut
2.2Thermodynamiquedelachromatographie
2.3Tempsdertentiondusolut
2.4Facteurdertention
2.5Facteurdeslectivitoudesparation
2.6CourbedeGauss
2.7Rsolutiondespics
2.8Lathoriedesplateaux
2.9Lathoriecintique
2.10Exempled'application
Bibliographie

1. Introduction
La chromatographieestunetechniqueanalytiquequipermetdesparerles
constituantsd'unmlangehomogneliquideougazeux.
Ondistinguedeuxtypesdechromatographie:surcolonneetplanaire.

Une colonne est remplie avec une


phasestationnaireoufixe.
Une phase mobile, ou solvant
ouluant
organique(oumlangedesolvants)
ouphasemobile
ou luant, est introduite au sommet
de la colonne et entrane les mlange
constituants(ousoluts)dumlange. sparer
Lesolvantentranelesmolculesde
soluts. Il existe une srie de
transfertsentreles2phases.
Les
constituants du mlange
migrentavecdesvitessesdiffrentes. oustationnaire
Ils sont lus (dplacs) et recueillis
sparment, en solution dans la
phase mobile, dans un dtecteur de
concentration.
oudtecteur
Un chromatogramme prsente des
picsenfonctiondutemps.
Fig.Chromatographie
d'lution sur colonne

Fig.Sparationdes
constituantsd'un
mlangepar
chromatographie
d'lutionsurcolonne.

dtecteur

Ref.D.A.Skoogethttp://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf

Classementdesmthodesdechromatographiesurcolonne
1.Lachromatographieenphaseliquide,CPL:laphasemobileestunliquide.
2.Lachromatographieenphasegaz,CPG:laphasemobileestungaz.
3.Lachromatographieenfluidesupercritique,CFS:P.M.=fluidesupercritique.
Chromatographieenphaseliquide
phasestationnaire
typedesparation
CLL

Liquidefixsurunsolide

CLPgreffeGroupemtorg.lichimiquementungel
CLS

Partageentreliquidesnonmiscibles

Solideougel

Partageentreliq.etsurfacegreffe
Adsorption

CLG
Liq.dslesporesd'ungeldepolymrerticulPartage/Tamisage(sieving)
(Chr.liquidegel;permation;sizeexclusion)
C.Ionique

Polymreorganiquerticulgreff

Echanged'ions

C.AffinitSupportgreffporteurd'ions(IMAC)Liaisondonneuraccepteur
ElectroCgeldesiliceoupolymreorgan.greffMobilitdschamplectr.

2. Grandeurs chromatographiques
2.1 Rapport de distribution K du solut
(rappel:solut=corpsminoritairedansunsolvant;corpssimple=entitmolculaireforme
d'atomesidentiques:ex.O2;corpscompos=entitmolculaireformed'atomesdiffrents:H2O;
corpspur=corpsformd'entitsmolculairesidentiques).

Lessparationschromatograph.sontbasessurlarpartitiondessolutsdans
deuxphases:solutA(phasemobile)solutA(phasestationnaire)
Laconstanted'quilibredecetteractionestappele:rapportdedistributionK
C'estletermerecommandparl'UICPA(UnionInternationaledeChimiePureet
Applique)depuis1993aulieudeconstantededistribution,coefficientde
distributionetcoefficientdepartageencoreutiliss.
KestgalaurapportdesconcentrationsdusolutAdanslesdeuxphases:
KA=[A]stat/[A]mob
[A]stat=concentrationenmol.L1dusolutdansla phasestationnaire=[A]S
ou[A]orgconc.danslaphaseorganiquegreffesurunsupport.
[A]mob=......

phasemobile=[A]M

2.2 Thermodynamique de la chromatographie


Lesrelationsdelathermodynamiques'appliquentauxquilibresdedistribution.
solutA(phasemobile) solutA(phasestationnaire)
KA=[A]stat/[A]mob
G=RT.lnK
G=HTS
delavaleurdeKondduitG,HetTS
Lestroisfonctionssont<0.Laractionestspontane.
S<0:l'entropiediminuequandleconstituantquittelaphasemobilepourse
fixersurlaphasestationnaire.
Equationdevan'tHoff:dlnK/dT=H/RT2
permetdecalculerl'effetdelatempraturesurletempsdertention.

signaldu 2.3 Temps de rtention du solut


dtecteur
tR
tM
temps
Fig.Courbed'lutionouChromatogrammed'unmlange2constituants
Lepicdegauchecorrespondausolutquin'estpasretenuparlaphasestationnaireet
quiatteintledtecteurlammevitessequecelledel'luant.Sontempsdertention
tMestletempsncessairepourqu'unemolculedelaphasemobiletraverselacolonne.

tM=tempsmort=t0=tempsncessairepourquelepicd'unconstituantnonretenupar
laPSapparaisse(retentiontimeofanunretainedpeakorsolventfront).
tR=tempsdertentiond'unconstituantretenuparlaPS(retainedpeak)
=tempscoulentrel'injectionetlemomentoleconstituantsortdelacolonne.

t'R=tRtM=tempsdertentionrduitoucorrig(adjustedretentiontime)

v=L/tR=vitessemoyennededplacementdusolut(L=longueurdelacolonne)
u=L/tM=vitessemoyennedesmolculesdelaphasemobile(cm.s1).
v=u.f(fractiondetempspassparlesolutdanslaphasemobile)
V =V = volumedelaPMdanslacol.=vol.interstitielaccessible(=vol.mort).
M
0
Ilestmesurparintroductiond'unsolutnonretenuparlaPS.
VM=tM.DDestledbitdelaphasemobile(flowrate)
c'estunvolumeparunitdetemps:cm3.s1oumL.s1
u=D/S(S=sectiondelacolonne)(cm3.s1/cm2).
V =volumedelaPS=V(colonnevide)V
S
M

VR=volumed'lutionoudertentiondusolut=volumedelaPMncessaire

pourentranerlesolutjusqu'lasortiedelacolonne=V(P.M.)quis'estcoulentre
lemomentdel'injectionetceluicorrespondantausommetdupic.VR=tR.D
V'R=VRV0=volumedertentionrduitdusolut(adjustedretentionvolume)

Rem.dfinitiondudbit:quantitd'unegrandeur,icilevolume,parunitdetemps.
dbitd'information=quantitd'informationtransmiseparunitdetemps:baud=bit.s1

13,5%dela
hauteur
D'aprsPRWScott,PrincipleandPracticeofChromatographyonlinetextbook
http://www.chromatographyonline.org/Principles/Nomenclature/rs11.html

.4 Facteur de rtention

UncomposdemassemTserpartitenmMdanslaphasemobileetmSdanslaphase

stationnaire.Silesconditionsopratoiresnechangentpas,mMetmSrestentconstantesau

coursdelamigrationdanslacolonne.LeurrapportestindpendantdemT.Ilestappel

facteur de rtention (recommand par UICPA) plutt que facteur de capacit. Ce n'est
pasuneconstante.
k'A=mS/mM=CS.VS/CM.VM=KA.VS/VM

aveclerapportdephase=VM/VS:KA= .k'A

SiK=0,lesolutmigreaussivitequelesolvant;siK=lesolutrestesurlacolonne.
Ondmontre:k'A=(tRtM)/tM=t'R/tM(doncKA=.t'A/tM)
rem.(2tMtM)/tM=1doncsitR<2tMalorsk'A<1;lutiontrsrapide,difficiletudier.
sik'A>20ou30;dured'lutiontrslongue.
EnHPLC,lasparationestoptimalepour2<k'<10afinqueletempsdepassagedes
constituantsnesoitpastroplong;k'=5=valeur"idale".
Lefacteurdertentionexprimemathmatiquementlacapacitplusoumoins
grandedelacolonneretenirchaqueconstituant.

2.5

Facteur de slectivit ou de sparation


=KB/KA

=rapportdedistributionduconstituantBleplusretenusurlerapportdedistribution
duconstituantAlemoinsretenu(1erpic).
KB=[B]S/[B]Metesttoujours>1
k'A=KA.VS/VMk'B=KB.VS/VMdonc:KB/KA=k'B/k'Aet
=k'B/k'A

=[(tR(B)tM)/tM].[tM/(tR(A)tM)]
=t'R(B)/t'R(A)

Lefacteurdeslectivitexprimelapositionrelativede2picssurle
chromatogramme.
pourlesolutA:KA=[A]S/[A]MetGA=RT.lnKA
enthalpielibrededissolutiondusolutAdanslaphasestationnaire
pourlesolutB:KB=[B]S/[B]MetGB=RT.lnKB
GBGA=RT.(lnKBlnKA)=RT.(lnKB/KA)=RT.ln
GBGA=RT.ln

=KB/KA =exp(GAGB)/RT

exemple

exemple

tR
tM

tM
4

tR(A)
14

tR(B)
19

facteurdertention:k'A=(tRtM)/tM=t'R/tM=10/4=2,5
k'B=15/4=3,75
facteurdeslectivitoudesparation:=t'R(B)/t'R(A)=3,75/2,5=1,5

temps
(min)

2.6 Courbe de Gauss


Lespicschromatographiquesontunealluregaussienne
L'airedespicsestcalculeenassimilantlepicuntriangle.
Lalargeurd'unecourbedeGaussestdfiniepar

,, :
=carttype=largeurdupiclahauteurdespoints
d'inflexion,60,6%delahauteur.

=2,35 = largeurmihauteur

=4 =1,7=largeurmesure
13,5%delahauteur=largeurlabase
dupic

Fig.CourbedeGauss
dusite:http://www.acnancymetz.fr/enseign/physique/CHIM/Jumber/Chromato/Chromato_gen.htm

2.7 Rsolution des pics


Larsolutionestlagrandeurquicaractrisel'aptituded'unsystmechromatographique
(colonne,soluts,solvants)sparer2soluts.Lebutdelachromatographieest
d'obtenirlameilleurersolutiondansletempslepluscourt.

Fig.Sparationde2picsadjacents
LespicssontrsoluspourR=1,5
tR(A)tR(B)

Facteurdersolution:R=2[tR(B)tR(A)]/[ (B)+ (A)]


Effetdesfacteursdeslectivitetdertentionsurlarsolution:

R=[(N1/2/4)].[(1)/].[k'B/(1+k'B)](1)
efficacitslectivitrtention
EfetdeRsurletempsdertention:tR(B)=(16R2H/u).[/(1)]2.[(1+k'B)3/k'B2](2)
ondduit:R1/R2=(N1/N2)1/2ettR1(B)/tR2(B)=R12/R22

Unebonnesparationestuncompromisentreunersolutionsuffisantedespicset
untempsdesparationraisonnable.

R/QettR(B)/Q'

minimumk'B=2

R/Q

tR(B)/Q'
k'B(sansunit)

Fig.Effetdufacteurdertentionk'BsurlefacteurdersolutionRetsur
letempsdertentiontR(B)
Lesquations1et2prcdentespeuventtrerarranges:
R=Q.k'B/(1+k'B)ettR(B)=Q'(1+k'B)3/k'B2
Les courbes ont t traces avec Q et Q' cts. C'est l'influence de k' qui est value
indpendammentdesautrestermes.IlfautremarquertoutefoisqueQ'varieavecR.
Rem.Lesvaleursdek'B >10correspondentunefaibleaugmentationdelarsolutionpourun
tempsdesparationpluslong.Ilvautmieuxlesviter.Lessparationssontoptimalesengnral
pour2<k'B<10.EnCPL,k'peutvarieravecunemodificationdelacompositiondumlange
desolvants(enCPGaveclatemprature).
fig.d'aprsD.A.Skoogethttp://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf.

c)estlemeilleurchromatogramme:
bonnersolution
ettempspluspetitqu'end)

tR(min)
Fig.Effetdelamodificationdelacompositiondusolvantsurlasparationdessoluts
D'aprsD.A.Skoogethttp://web.uconn.edu/rusling/StuartLC3.pdf

Fig.Sparationd'un
mlangecomplexesde6
constituants
d'aprsD.A.Skooget
www.unige.ch.....

tR
a)Lesconditionsdel'expriencepermettentauxpics1et2d'avoirunersolutionoptimale,
avecdesfacteursdertention2<k'<10.Mais5et6ontdestRtropgrandsetsontmalrsolus.
b)Avecd'autresconditions,5et6apparaissentbienmais12et34nesontpasrsolus.

c)3et4sontrsolusmaispas12ni56.
Pourbiensparerlespics,ilestparfoispossibledefairevarierlesconditionsexprimentalesau
coursdel'lution:audbutdel'lutionlesconditionssontcellesquiconduisentau
chromatogrammea,aprsapparitiondespics1et2,lesconditionssontchangespourdevenir
cellesoptimalespour3et4(c)puisdenouveauchangespourfaireapparatre5et6(b).
Unebonnesparationdesconstituantsd'unmlangeestainsiobtenueenuntempsminimum.

Fig.Effetdelalongueurd'unecolonneCPGsurlarsolution
Modificationdelalongueurdelacolonnecapillaire:endoublantL,Restmultiplipar2
F.etA.RouessacetsocitWatersethttp://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf

2.8 La thorie des plateaux


Elleestutilisepourexpliquerlaformedespics.
En1941,MartinetSyngeontconsidrlacolonnedechromatographiecomme
unecolonnededistillation,constituedeplateauxthoriques.
Auniveaudechaqueplateau,l'quilibreestralisentrelesdeuxphases.Ilya
changedematirehorizontalement,jusqu'cequeKA=[A]stat/[A]mobsoit
atteint.Iln'yapasd'changevertical.

En fait cet tat d'quilibre ne peut


jamais tre atteint en prsence d'une
phase mobile en mouvement continu.
Lathoriedesplateauxestdeplusen
plus remplace par la thorie
cintique.
http://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf

[Descriptionqualitativedespicschromatographiques
Les pics d'un chromatogramme ont une allure de courbe de Gauss reprsentant une
distribution symtrique de la grandeur tudie (nbre de molcules) de part et d'autre
d'unevaleurmoyenne.Lesmolculessubissentdetrsnombreuxtransfertsentrela
phase mobile et la phase stationnaire. Elles ont des comportements individuels
alatoires, certaines pouvant rester dans la phase stationnaire plus longtemps que la
dure moyenne. La largeur de la bande augmente en longueur au cours du
dplacement dans la colonne et cela se rpercute dans la largeur du pic du
chromatogrammeenfonctiondutemps.

nombredemolcules
Fig. Distribution des molcules dans la
colonne au temps tR, quand le solut atteint la

L - L

L+L

sortiedelacolonne.
L

injection
colonne
L

d'aprsD.A.Skoog


Hauteurquivalenteunplateauthorique,dfiniepar: H(cm)= 2L/L=HEPT
2
L

Nombredeplateauxthoriques=L/HdoncN=L /
2

cm2

tRetsontdanslemmerapportqueLetL:

N=tR2/ 2=tR2/(/4)2=16tR2/ 2=5,54.tR2/ 2

Nombredeplateauxthoriqueseffectifs,ouefficacitrelle:Neff=t'R2/ 2
Cenombrecorrespondaunombred'quilibressuccessifsqu'arencontrunsolut.
+Ngrand,+lacolonneestefficaceet+lepicestfin.
Nestunegrandeurcaractristiqued'unsystmechromatographique.Ilpeuttre en
rduisantledbitdelaPM,maistRestaussi.
Hauteurdeplateaueffectif:Heff=L/Neff
Hauteurdeplateaurduite:h=H/dp=L/(N.dp)

dp=diamtremoyendesparticulessphriquesdescolonnes;
descolonnesayantmmeL/dpontdesefficacitsouperformancessemblables.
Lenombredeplateauxthoriquesexprimel'efficacitdelacolonne.
tableau:HEPTpourchromatoCPGetCPL(masterchimieParisSud)

2.9 La thorie cintique

EquationdevanDeemter(1956):H=A+B/u+C.u
C'estunedescriptionmathmatiquepourcomprendrelaformedespics.
Les3termesA,BetCcontribuentl'largissementdespics.

u=L/tM=vitessemoy.dedplacementoud'coulementdesmol.delaP.M.(mm.s1)

A:lil'anisotropied'coulement;dpenddelatailleetdelarpartitiondesparticulesdelaPS.

Lalargeurdelabandedpenddescheminsquepeuventsuivrelesmolculesdurantl'lution.Les
molculesdesolutarriventensortiedecolonnedesinstantsdiffrents.C'estlephnomnede
diffusionturbulente.
coulement
Le chemin parcouru par la molcule 2 est suprieur celui de la
molcule1.1arriveenBavant2.Letrajetdpenddudiamtredes
particulesquiremplissentlacolonne.
A=facteurdediffusiond'Eddy=2.dp(m)
outermedediffusionturbulente
=cteconcernantlargularitduremplissage(voisinde1)
dp=diamtredesparticules.Agdsidpgd.
Pluslesparticulessontpetites,plusleremplissageesthomogne,
plusApetitetplusl'efficacitdelacolonneaugmente.
LacontributiondeAestnullepourunecolonnecapillairede
d'aprsD.A.Skooget
chromatographieenphasegaz.
http://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf

B/u:termedediffusionmolculairelongitudinaleB/u=2 .DM

inversementproportionnellavitessed'coulementdelaphasemobile.B/upetitsiugd.
L'efficacitd'unecolonneaugmenteaveclavitessedelaP.M.

Lesmolculesdesolutdiffusentdesrgionslesplusconcentresverslesplusdilues.
Ellessedispersentdanstouteslesdirections,d'autantplusqueledbitestfaible.
EnCLHP,unefortepressionestexercesurlaphasemobile,cequipermetd'obtenirdes
dbits convenables avec des microparticules de 2 5 m de diamtre. De bonnes
sparationssontainsiobtenuesenCLHP.
(diffusion=quandunegrandeurchangededirection;ex.transfertdematiredl'agitationmolculaire.)

B=termeliladiffusionmolculairelongitudinale(encm2.s1).
=ctesansdimensionliel'espaceentrelesparticulesderemplissage.
=0,6pourlescolonnesremplieset1,0pourlescolonnescapillaires.
DM=coefficientdediffusiondusolutdanslaphasemobile(encm2.s1).Ilest5fois+
gdenCPGqu'enCPL.Lacontributiondeladiffusionlongitudinaleestconsidre
commengligeableenCLHP.

HEPT

Hminimum

a:CPL

u,vitessed'coulementcm.s1
HEPT

b:CPG

u,vitessed'coulementcm.s1

Fig.CourbesdevanDeemter
Effetdelavitessed'coulementdelaPMsurHEPT
a)pourlaCPLetb)pourlaCPG.
Lapenteest<0pourufaible.L'effetestplusimportantquandlaPMestungaz
(carlescoefficientsdediffusiondanslesgazsont>ceuxenphaseliq.).
D'aprsD.A.Skoogethttp://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf

PrincipleandPracticeofChromatographyRPWScott,onlinetextbook
http://www.chromatographyonline.org/Principles/Introduction/rs1.html

C.u=(CS+CM).u

=termedersistanceautransfertdemassedusolutentrelesdeuxphases.
LetransfertdemolculesentrelaPMetlaPSn'estpasinstantan.Parex.lesmolcules
loignesdelaPSpeuventtreentranesavantd'tretransfressurlaPS.
LetermeCdevientimportantquandlavitessed'coulement(cm.s1)delaphasemobile
ou son dbit (cm3.s1) est trop rapide. Cette rsistance empche la formation de
l'quilibre:solutdansPMsolutdansPS.
Plusupetit,pluslesmolculespntrentdanslaPSetpluslacolonneestefficace.
2
C ,termedetransfertdemassedanslaphasestationnaire;estproportionneld /D
S
f
S
df=paisseurmoyennedelacouchedePSdposesurlesparticulesdusupportsolide.
DS=coefficientdediffusiondusolutdanslaphasestationnaire
2
C
,termedetransfertdemassedanslaphasemobile;estproportionneld
/DM
M
p
dp=diamtredesparticulesderemplissage.
DM=coefficientdediffusiondusolutdanslaphasemobile.
Lescolonnesefficacessontrgulirementremplies,avecundpleplusfaiblepossible.
Ilestaussiprfrabled'utiliserunsolvantdefaibleviscositpourminimiserC.
L'largissementlongitudinaldupicprovientdudplacementdesmolcules
dansdesdirectionsparalllesl'coulement
L'largissementdautransfertdemasseprovientdeladiffusiondansune
directionperpendiculairel'coulement.

EtinversementpourletransfertPSversPM.
RPWScotthttp://www.chromatography
online.org/Principles/Peak
Dispersion/StationaryPhase/rs46.html

P.M.
P.S.

Ref.http://www.ucergy.fr/rech/labo/equipes/lppi/IMG/1ChroM1

Hm
H=A+B/u+C.u
LacourbedevanDeemter
estunehyperbole.
Ilexisteunminimumde
H=L/N.Ilcorrespondune
efficacitmaximaledela
colonne,pourunevitesseu
optimale(ouundbit
optimal)etpourunnbrede
plateauxthoriquesN
maximal.

minimum

Fig.CourbedevanDeemterd'unecolonnede

chromatographie.Lespointssontlesdonnesexprimentales.
LescourbesinfrieuresreprsententlestermesA,B/uetCu.

etmonolithes

Fig.Hauteurquivalenteunplateauthoriqueenfonctiondelavitessede
laphasemobilepourdescolonnesavecdiffrentsdiamtresdeparticules
Pourdesparticulesdediamtreinfrieur5m,Hgardesavaleurminimalequandu.
Descolonnesparticulesdepetitdiamtreourempliesd'unmonolithe,peuvent
treutilisesavecdesgrandesvitessesdephasemobilesansperted'efficacit.
D'aprsC.POOLE,p38ethttp://web.uconn.edu/rusling/Stuart_intro.PDF

termedelasocitWaters

dP<2m

Ref.dessin:http://nteserveur.univlyon1.fr/afsep/fichier/306_10_2_2006.pdf

Ilexisted'autresquations:deGolay:H=B/u+C.u
oudeKnox:h=A/u1/3+B/u+C.u
ApeuimportantenCPLestnulpourlescolonnescapillairesWCOTenCPG
(cfequ.Golay).

Pressuredrop(bar)
h=H/dp

dp=5m

vitessedelapm(mm.s1)
dbitdelapm(mL.mn1)

Ref: http://www.americanlaboratory.com/articles/al/a0010ver.pdf.
"NextgenerationuniversalcolumnsforReversedPhaseLiquidChromatography.
RPLC".Octobre2000

Fig.Exemplede
chromatogramme
avecdescription
desconditions
opratoires
Varian

2.10 Exemple d'application


Technique
Colonne

:HPLC
:PhaseStationnaire:C18,

15cmx4,6mm,dP=5m

PhaseMobile :actonitrile,CH3CN
Temprature

:30C
M

tM=1,07min
tR(A)=2,40min;A=5s(largeurdupicmihauteur)
tR(B)=2,85min;B=6s
Rem:C18:chanealkyleenC18:(CH2)17CH3quiat
greffesurdugeldesilice:SiOSi(CH3)2(CH2)17CH3
actonitrile=cyanuredemthyle

1.Calculdufacteurdeslectivit
=KB/KA==k'B/k'A==t'R(B)/t'R(A)
=K(solutle+retenu:picloign)/K(solutleretenu:1erpic)
=(2,851,07)/(2,401,07)=1,34

2.calculdufacteurdersolution
R=2[tR(B)tR(A)]/[(B)+(A)]
=1,7
R=2.(2,852,40).60/1,7.(6+5)=2,89
3.Calculdunombredeplateauxthoriquesdelacolonne
rgimeisocratique:1seulsolvantdecompositionconstante
R=[(N1/2/4)].[(1)/].[k'/(1+k')]k'=(k'A+k'B)/2
k'A=t'R/tM=(2,401,07)/1,07=1,24

k'B=t'R/tM=(2,851,07)/1,07=1,66(=k'B/k'A=1,66/1,24=1,34)

N=[4.2,89.1,34.(1+1,45)]2/[(1,341).1,45]2=4646plateauxthoriques
4.Calculdeladiffrenced'enthalpielibrededissolutiondes2solutsdans
laphasestationnaire
solutA(PM) solutA(PS)
GBGA=RT.ln(cf.par.facteurdeslectivit)
GBGA=8,314.303.ln1,34=737J.mol1

BIBLIOGRAPHIE

GwenolaBURGOTetJeanLouisBURGOT,MthodesInstrumentalesd'Analyse
Chimique,TecetDoc2002.
ColinF.POOLE,TheEssenceofChromatography,Elsevier2003.
DouglasA.SKOOG,F.JamesHOLLER,TimothyA.NIEMAN,Principes
d'AnalyseInstrumentales,DeBoeck2003.
FrancisROUESSACetAnnickROUESSAC,Analysechimique,Dunod2004.
Rem.Denombreuxgraphiquesdecesiteontttrouvssurlatoilel'adresse:
http://www.unige.ch/cabe/chimie_anal/chromato.pdf.

Complments:
http://www.masterchimie1.upsud.fr/Chromatoweb/optimisation.html#A63