Méthodes de Séparation 2007-2008 Mélanie ABONNENC

Série 2: Chromatographie sur couche mince

Batteries de Craig

Exercice 1: Chromatogrphie sur couche mince

Trois composés A, B et C sont chromatographiés par CCM sur plaque de silice. L’éluant utilisé
est l’hexane.

a) Déterminer le rapport frontal Rf des composés A, B et C.

b) Quel composé (A, B, ou C) est le plus polaire? Justifier.
c) Si l’éluant est remplacé par de l’acétone, comment évolueraient les valeurs de Rf des
composés?
d) Si on remplace la plaque de silice par une plaque d’alumine, quels seraient les
changements des rapports frontaux?

Exercice 2: Chromatographie sur couche mince

Vous essayez de déterminer le bon système de solvants à utiliser pour une CCM, afin de séparer
les composés X, Y et Z. Vous déposez vos trois composés et utilisez un mélange hexane/acetate
d’ethyle 95:5 comme éluant. Le résultat est représenté par le schéma suivant:
Comment pourriez-vous changer le système de solvants afin d’améliorer la chromatographie?
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Exercice 3 : Chromatographie sur couche mince

Un mélange de deux composés A et B conduit après migration à deux tâches aux caractéristiques
suivantes (distance de migration x et diamètre du spot w):

xA=27mm wA=2mm
xB=33mm wB=2.5mm

La migration du front de solvant dans cette expérience est de 60mm.

a) Calculer Rf, N et H pour chacun des composés.

b) Calculer le facteur de résolution entre les deux composés A et B.
c) Etablir la relation entre le facteur de sélectivité et le Rf des deux composés. Calculer sa
valeur numérique.

Exercice 4: Chromatographie sur couche mince

La figure ci-après représente le résultat de la scannérisation d’une plaque de CCM en phase

normale (phase mobile: hexane/acétone 80:20). Les trois composés ont pour structures A, B et C.

a) Attribuer à chaque pic de l’enregistrement le composé qui lui correspond.

b) Quel serait l’ordre d’élution des composés A, B et C sur une colonne HPLC contenant le
même type de phase stationnaire et la même phase mobile?
c) Quel serait l’ordre d’élution des composés A, B et C sur une colonne HPLC contenant
une phase de type RP-18 avec comme éluant un mélange acétonitrile/méthanol (8:2)?
d) Calculer le Rf du composé qui migre le plus rapidement sur la plaque.

A O B Me
Me C CH2OH
CH2OH Me
Me OH
HO OH
OH
Me
Me
Me

O
O O
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Exercice 5 : Modèle de Craig

Calculer la distribution d’une substance après 3 transferts dans une machine de Craig pour
laquelle Vs= 2 mL, Vm= 4 mL et le coefficient de transfert KD= 3.

Exercice 6 : DCCC

Lors d’une expérience de DCCC (Droplet Counter Current Chromatography), une petite quantité
de soluté reste toujours dans la première cellule, quels que soient le nombre de transferts et le
coefficient de distribution. Supposant que Vs = Vm et que KD = 1, quelle fraction de soluté reste
dans les deux premières cellules après 10 transferts ?

Exercice 7 : Moments d’une gaussienne

Par définition, le premier moment d’une gaussienne correspond au temps de rétention.

Le second moment central correspond à la variance :

2 =  = 2
 (x
x ) 2
f (x)dx = μ 2
μ12
0

avec 1 et 2, les premier et second moments, respectivement.

a) Exprimer le troisième moment central 3 en fonction des moments 1, 2 et 3

En comparant un pic à une gaussienne, on peut exprimer la déviation par le skew, S, qui est
définit par :

3
S=
3

Une valeur positive de S indique un « tailing » du pic.

b) Exprimer le quatrième moment central 4 en fonction des moments 1, 2 et 4

De même, par comparaison avec une gaussienne, on peut exprimer l’« excess », E, définit par :

4
E=
4

Une valeur positive de E indique un pic plus « fin » qu’une gaussienne.