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Biologie Université
9 janvier 2020, 20:42 ·

Les étapes du séquençage d'ADN (selon la méthode de

Sanger):
1 - Pour le séquençage, tout se passe initialement dans un
tube à essai, en présence des acteurs de la synthèse de l'ADN
: de l'ADN à séquencer, des nucléotides, une amorce et de
l'ADN polymérase. Chacun de ces acteurs est présent en
grande quantité. La réaction de séquençage fait donc
intervenir de multiples réactions.
2 - L'ADN polymérase utilise aléatoirement les nucléotides
présents dans le milieu pour copier le brin (ou fragment, ou
chaîne) matrice en synthétisant un ADN de séquence
complémentaire, du moment que la base (A, C, G ou T) est
respectée.
3 - Lorsque l'ADN polymérase choisit par hasard un
didésoxynucléotide (ce qui est rare puisqu'il y en a moins que
des nucléotides) et qu'elle l'incorpore dans la chaîne en
synthèse, celle-ci s'interrompt prématurément. Puisque
chaque didésoxynucléotide est marqué par un fluorochrome
différent (A vert, T rouge, G jaune et C bleu), une chaîne qui se
termine par exemple par un A sera verte.
4 - Puisqu'un grand nombre de réactions de synthèse ont lieu
dans le tube, il existe statistiquement des chaînes de toutes les
tailles (correspondant à un arrêt de la synthèse à chaque
nucléotide) et beaucoup de fragments d'une même taille. Ces
chaînes commencent toutes au même endroit sur l'ADN
matrice (déterminé par l'amorce utilisée), toutes celles qui
possèdent la même longueur se terminent donc par le même
didésoxynucléotide marqué.
5 - Il est alors possible de séparer les chaînes d'ADN obtenues
en fonction de leur taille, sur un gel d'acrylamide en présence
d'un courant électrique. Plus les chaînes sont courtes, plus
elles migrent loin et tous les fragments d'une même taille
migrent à la même distance. On obtient alors une succession
de bandes colorées, chacune correspondant au dernier
nucléotide incorporé. Il suffit alors de lire la succession des
couleurs pour connaître l'ordre des nucléotides, c'est-à-dire la
séquence de l'ADN, étape assurée automatiquement par les
détecteurs du séquenceur.
Historiquement, le marquage était radioactif et l'on ne pouvait
donc pas distinguer un didésoxynucléotide des trois autres. Le
séquençage était réalisé dans quatre tubes différents, chacun
d'entre eux possédant un seul type de didésoxynucléotide.
L'analyse des contenus des quatre tubes sur un gel
d'acrylamide dans quatre pistes côte à côte montrait alors la
succession des bases.
Futura - Explorer le monde

132 partages

‫ﺷٮ*ﻤﺎء ٮ'ﺎﻟﻬﻤﺰة‬
# ‫ﻣﻤﻜﻦ ٮ‬
‫يﺔ‬#‫ﺎﻟﻌرٮ‬#‫ﺮﺣﻤﺔ اﻟ *ٮﺺ ٮ‬0
2 mois Signaler

Alex Lina
Go ahead
3 ans Signaler

Arsène Ngabo
Pour faire le séquençage de l'ADN et son
emplification on passe par des étapes suivantes: La
dénaturation, l'hybridation et l'élongation ; ce ci en
differentes température par PCR. L'emplacement des
ammorces se fait dans les deux sens, sur les 2 brins
d'ADN 3'-5' et 5'-3', ces amorces comptent à peu
près 30 nucléotides , à la fin de chaque ammorce on
place un ADN polymerase qui continue la suite de
copie de la séquence en utilisant les nucléotides
présent dans le milieux. Il existe plusieurs types de
séquençage, dont sanger, NGS/séquençage de la
2ème génération et le séquençage de la 3ème
génération. Ces 3 se distinguent par la possibilité de
nombre de bases séquencées. Les informations
manipulées sont soit l'ADN(génome),
ARN(transcriptome) ou les protéines(protéome). Le
thermocycleur reste un appareil important dans
l'emplification et la BIOINFORMATIQUE en
BIOTECHNOLOGIE en est une science informative.
3 ans Signaler

Imen Guesmi a répondu · 1 réponse

Wissam Ghieh
Good
3 ans Signaler

Chaima BL
Allah allah Sanger jit ndwrr khrjli sur FB hada lin9s
Kawter Mde Noor Bld
3 ans Signaler

Kawter Mde a répondu · 2 réponses

Joel Ake
Super. Je dois le faire.
3 ans Signaler

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25 novembre, 11:20 ·

Cette seringue peut stopper une hémorragie en 20 secondes.

Explore Science 25 novembre, 11:00 ·

Cette seringue peut stopper une hémorragie en 20

secondes.

24 partages

Biologie Université
21 octobre, 12:05 ·

( ) Voici Trexo ! Cette start-up a développé un dispositif qui

redonne de l'espoir et de la mobilité à tous les enfants touchés
par la paralysie cérébrale.
Trexo est né d'une expérience personnelle. Elle a commencé
en 2011 lorsque l'ingénieur Manmeet Maggu a appris que son
neveu, Praneit, avait reçu un diagnostic de paralysie cérébrale.
Désireux de lui venir en aide, l’ingénieur a réussi à mettre au
point cet étonnant robot marcheur.
L'exosquelette permet aux enfants paralysés de marcher et
d’être indépendant. Il a été réalisé sur-mesure et il est réglable
en taille.

Futura - Inspirons l'avenir 21 octobre, 10:03 ·

( ) Voici Trexo ! Cette start-up a développé un dispositif

qui redonne de l'espoir et de la mobilité à tous les enfants
touchés par la paralysie cérébrale.
Trexo est né d'une expérience personnelle. Elle a
commencé en 2011 lorsque l'ingénieur Manmeet Maggu a
appris que son neveu, Praneit, avait reçu un diagnostic de
paralysie cérébrale.
Désireux de lui venir en aide, l’ingénieur a réussi à mettre au
point cet étonnant robot marcheur.
L'exosquelette permet aux enfants paralysés de marcher et
d’être indépendant. Il a été réalisé sur-mesure et il est
réglable en taille.
L’unique point qui reste assez problématique pour ce type
d’appareil, c'est son prix...
L’entreprise poursuit une approche « directe » au
consommateur qui verrait sa technologie se vendre 899 $
par mois grâce à un modèle de location avec un acompte
de 1 000 $ sur 36 mois.
Les clients peuvent aussi le louer pour 999 $ avec au moins
une période de location de 12 mois ou ils peuvent l’acheter
29 900 $....

14 partages

Biologie Université
15 octobre, 10:46 ·

( ) Le tronc d'un arbre peut cacher un torrent !

Ces Américains l'ont appris en voulant tronçonner cet arbre,
probablement vieux et malade.
Au centre du tronc, on peut apercevoir un creux duquel jaillit
l'eau. Les arbres se creusent à la suite d'un stress intense,
biotique ou abiotique.
Il se pourrait que ce soit l'œuvre de champignon xylophage qui
dévore le bois ou plus précisément la lignine, l'un de ses
constituants principaux.
Les arbres creux servent aussi de refuges pour les animaux
comme pour les mésanges ou encore les pic-verts.
Quant à l'eau, elle s'est sans doute infiltrée suite à d'intenses
pluies ou d'une inondation.
L'Alabama, l'état où la vidéo a été tournée, a déjà été le théâtre
de cru-éclairs ou d'orages violents, notamment en automne-
hiver 2021.
Le tronc creux semble avoir stocké tout cette eau jusqu'à que
des hommes décident de l'abattre et découvrent le torrent
caché en son sein.

Futura - Inspirons l'avenir 15 octobre, 09:00 ·

( ) Le tronc d'un arbre peut cacher un torrent !

Ces Américains l'ont appris en voulant tronçonner cet
arbre, probablement vieux et malade.
Au centre du tronc, on peut apercevoir un creux duquel
jaillit l'eau. Les arbres se creusent à la suite d'un stress
intense, biotique ou abiotique.
Il se pourrait que ce soit l'œuvre de champignon xylophage
qui dévore le bois ou plus précisément la lignine, l'un de ses
constituants principaux.
Les arbres creux servent aussi de refuges pour les animaux
comme pour les mésanges ou encore les pic-verts.
Quant à l'eau, elle s'est sans doute infiltrée suite à
d'intenses pluies ou d'une inondation.
L'Alabama, l'état où la vidéo a été tournée, a déjà été le
théâtre de cru-éclairs ou d'orages violents, notamment en
automne-hiver 2021.
Le tronc creux semble avoir stocké tout cette eau jusqu'à
que des hommes décident de l'abattre et découvrent le
torrent caché en son sein.

46 partages

Arthu Edimo
Pourquoi vous ne filmez pas vers le haut vous prenez
souvent les gens pour des fous hein !!!!
3 mois Signaler

Damien Cumant
Gwendoline Madeleinat montre sa a Nico !! Il a déjà
vu sa ??
3 mois Signaler

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