Atelier de préparation à l’examen de laboratoire, BION01

Section 1 : Règles de sécurité en laboratoire

1. Vous devez connaître les règles de sécurité en labo-

ratoire. Dans une mise en situation, vous devez être en
mesure de dépister le comportement fautif et sug-
gérer une façon de le corriger. Exemple: Ce jeune
homme est prêt à entrer au laboratoire bleu pour
travailler avec des solutions, dont de l’acide. En re-
gardant sa tenue, trouvez deux éléments à corriger.

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Section 2 : Comment rédiger un rapport

2. Il faut que vous soyez en mesure de rédiger une hy-

pothèse complète, de bien cibler la question de re-
cherche, de constituer les groupes à l’étude, de déterminer correctement les va-
riables dépendante et indépendante, de circonscrire les paramètres à contrôler,
etc. De plus, beaucoup de détails techniques ont été appris, notamment pour
présenter les graphiques et les tableaux. Il se peut que je vous demande de véri-
fier une présentation de données pour vous assurer qu’elle est bien faite, et au
besoin, de suggérer des améliorations.

Exemple : Voici un graphique remis par un étudiant. Lors de son expérience sur
la catalase par la méthode traditionnelle, il a mesuré 4 fois le volume d’oxygène
libéré chaque minute. Trouvez les erreurs de présentation et suggérez une façon
plus simple de présenter ses résultats.

1
 Graphique
35

30

25

20

15

10

0
0 1 2 3 4 5 6 7

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Section 3 : Les glucides et protéines

3. Vous devez connaître chaque colorant et la couleur qu’il donne selon la sub-
stance en contact. Ainsi, si je vous donne un liquide avec un mélange de sub-
stances, vous êtes en mesure de prédire la couleur qu’on devrait observer. Pour
vous aider, complétez ce tableau. Entre parenthèse, précisez si la couleur in-
dique un test positif ou négatif.

Substance Lugol Benedict Biuret

Monosaccharide

2
Amidon

Cellulose

Acide aminé

Peptide

Peptide dénaturé

4. Vous devez aussi savoir ce que font l’amylase, l’hydrolyse acide, les anticorps
et la chaleur sur ces substances et ainsi prédire les couleurs des différents
tests selon les combinaisons. Exemple : Voici le contenu de différentes éprou-
vettes. Indiquez la couleur qu’on obtiendra avec les tests de Lugol, Benedict et
Biuret.

Contenu de
Lugol Benedict Biuret
l’éprouvette
Amidon + amylase

Glucose + amylase
Albumine + amy-
lase
Albumine + hydro-
lyse acide
Glucose + amidon

Albumine + amidon

Section 4 : Cinétique enzymatique (catalase)

Connaître les facteurs pouvant dénaturer la catalase. Connaître les facteurs pou-
vant accélérer ou ralentir la catalase sans la dénaturer.

Dans une mise en situation, prédire comment se fera la réaction de la catalase.

5. Tableau : Mettez un X au bon endroit. Vous pouvez ajouter des lignes au ta-
bleau.

Augmente l’acti- Diminue l’activi-

vité enzymatique té enzymatique Dénaturation
Facteur d’influence comparé aux comparé aux (activité enzy-
conditions opti- conditions opti- matique nulle)
males males

pH extrême bas

pH extrême élevé
Augmentation de la
3
concentration de la ca-
talase
Augmentation de la
concentration en per-
oxyde d’hydrogène
Augmentation de la
concentration de solu-
tion saline (par exemple,
5% NaCl)
Présence d’un cofacteur
Présence d’un inhibiteur
non compétitif
Température de 4°C
(comparée à 37°C)
Température de 40°C
(comparée à 37°C)
Température de 100°C
(comparée à 37°C)

Lors de la rédaction de votre rapport, vous avez présenté des explications sur les
mécanismes de fonctionnement de la catalase. Il faut être capable d’expliquer la
même chose. Vous avez aussi relevé des sources de variabilité des résultats. Il
faut être capable de les expliquer en vos mots, mais le faire comprendre à votre
correcteur. Vous devez bien connaître les étapes des manipulations pour détecter
un problème dans une expérience mal réussie.

Section 5 : Laboratoire sur la microbiologie

Dans ce laboratoire, il faut connaître les étapes pour travailler de façon aseptique
et sécuritaire. Il faut aussi comprendre le principe de stérilité.

Vous devez être capable d’estimer le nombre de bactéries initiales dans un échan-
tillon liquide à partir d’un dénombrement sur gélose.

Vous devez être capable de choisir entre différentes méthodes d’ensemencement

selon les besoins de votre étude (quantitatif ou qualitatif) et votre source de bacté-
ries (liquide ou sur une surface, très concentrée ou peu concentrée).

6. Dans un échantillon d’eau d’une buvette du Parc du Mont-Royal que vous avez
dilué 1000 fois (10-3), vous ensemencez 500 µl (0,5 ml) de cette dilution sur gé-
lose TSA. Après 48h d’incubation, vous dénombrez 88 colonies. Quelle était la
concentration initiale de bactéries (nb de bactéries/ml) au moment du prélève-
ment?

Démarche : ______________________________________________________________________

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Section 6 : Laboratoire diffusion et osmose ou perméabilité membranaire

Vous devez être capable de prédire sur un montage comportant deux comparti-
ments séparés d’une membrane semi-perméable le sens de déplacement à partir
des concentrations de solutés diffusibles, de solutés non diffusibles et d’eau.
.
À partir d’un montage constitué d’un sac avec un colorant et la description des dif-
férentes solutions, vous devez pouvoir indiquer s’il y a eu osmose ou diffusion,
dans quel sens, et quelle molécule s’est déplacée.

Vous devez être en mesure de comprendre comment certains facteurs (présence/

absence de canaux ou transporteurs, taille de la substance, présence/absence de
groupements fonctionnels polaires ou ionisés, solubilité lipidique ou coefficient de
partition, configuration stérique, etc,) influencent le temps d’hémolyse.

Pour vous aider, complétez les questions à la fin de votre protocole de laboratoire.

Section 7 : Génétique de la drosophile

Vous avez reçu un croisement entre une femelle et un mâle portant chacun une
mutation au laboratoire pour lequel vous deviez faire un croisement parental, récol-
ter la F1 et la F2, puis analyser les données. Faites le même travail, mais inversez
le sexe des mouches pour chaque mutation. Puis, étudiez deux mutations autoso-
miques non liées. Le document « blanc » se trouve sur LÉA. Vous devez être ca-
pable de faire un Xhi2 en examen. Nous vous fournirons la table de Xhi2.

Section 8 : Initiation à l’usage du microscope

Vous devez savoir comment transporter, installer et ranger correctement votre mi-
croscope.

5
Vous devez être capable de monter une lame correctement et de faire la mise au
point d’une lame (toutefois, l’examen n’est pas évalué par une manipulation directe
du microscope).

Vous devez calculer le grossissement total d’un microscope en regardant les me-
sures de grossissement de l’oculaire et de l’objectif.

Vous devez être capable de calculer le diamètre d’un champ de vision à partir du
diamètre de champ de vision à un autre grossissement.

Si on vous donne le diamètre du champ de vision d’un microscope, vous devez être
capable d’estimer la taille d’un objet observé.

Vous devez être en mesure de comprendre et d’expliquer l’effet de la profondeur de

champ quand on passe d’un petit grossissement à un fort grossissement, ou l’in-
verse.

Comprendre comment une image (texte) est modifiée quand on la regarde au mi-
croscope.

Vous devez être en mesure d’effectuer une préparation de cellules de l’épithélium

buccal et d’épithélium d’oignon et de l’observer au microscope.

7. On vous procure un nouveau microscope. L’oculaire grossit 10 fois et l’objectif

que vous avez choisi grossit 50 fois. Combien de fois est grossie l’image que
vous regardez dans ce microscope?

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8. Le diamètre du champ de vision de votre microscope est de 1,5 mm au grossis-

sement 100x. Quel sera le diamètre de votre champ de vision au grossissement
300x?

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9. Vous avez un microscope dont le champ

de vision est de 5mm à un grossissement
total de 40x. Vous regardez une cellule à
un grossissement total de 400x. Voici
l’image de cette cellule. Quel est son péri-
mètre? Quel est le diamètre de son noyau?

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___________________________________________________________________________________________

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Section 9 : Observation des cellules eucaryotes

Vous devez être capable de reconnaître les différentes cellules observées lors du
laboratoire en faisant vous-même la mise au point ou en observant à un micro-
scope :

Élodée (frais et fixée)

Euglène (fraiche et fixée)
Paramécie (fraiche et fixée)
Amibe (fraiche et fixée)
neurone multipolaire (fixé)
globules rouges et blancs (fixés)
spermatozoïdes de rat et d’humain (fixés, évidemment…)

Vous devez pouvoir comparer les modes de locomotion des protistes.

Vous devez pouvoir distinguer ces spécimens en identifiants leurs organites ou

leur forme spécifiques.

Vous devez être capable de faire un lien entre la structure et la fonction des cel-
lules observées.

10. Remplissez le tableau de reconnaissance des différentes cellules.

cellule forme couleur taille particularité

Élodée

Euglène

Paramécie

Amibe

7
Neurone

Globule rouge

Globule blanc
Spermatozoïde
de rat
Spermatozoïde
d’humain