CORRIGÉ - Atelier de préparation à l’examen de laboratoire, BION01

Section 1 : Règles de sécurité en laboratoire

1. Vous devez connaître les règles de sécurité en labo-

ratoire. Dans une mise en situation, vous devez être en
mesure de dépister le comportement fautif et sug-
gérer une façon de le corriger. Exemple: Ce jeune
homme est prêt à entrer au laboratoire bleu pour
travailler avec des solutions, dont de l’acide. En re-
gardant sa tenue, trouvez deux éléments à corriger.

Ben le ti-pit n’a ni son sarrau, ni ses lunettes. Pour les

cheveux, ça ira puisqu’ils sont courts et il ne porte pas
de rallonge! Pour les souliers, il a bien des souliers fer-
més; les gougounes et autres souliers ouverts sont
proscrits!

Section 2 : Comment rédiger un rapport

2. Il faut que vous soyez en mesure de rédiger une hypothèse complète. De plus,
beaucoup de détails techniques ont été appris, notamment pour présenter les
graphiques et les tableaux. Il se peut que je vous demande de vérifier une pré-
sentation de données pour vous assurer qu’elle est bien faite, et au besoin, de
suggérer des améliorations.

Exemple : Voici un graphique remis par un étudiant. Lors de son expérience sur
la catalase, il a mesuré 4 fois le volume d’oxygène libéré chaque minute. Trou-
vez les erreurs de présentation et suggérez une façon plus simple de présenter
ses résultats.

Graphique
35
30
25
20
15
10
5
0
0 1 2 3 4 5 6 7

1
Cette liste n’est pas exhaustive. 1) Il n’y a pas de titre et le graphique n’est pas
numéroté. 2) Les unités sont omises dans le titre des deux axes. 3) On présente
des essais séparés; il faut plutôt présenter la moyenne et l’écart-type pour une
même série de données. 4) Le coco ne se rend pas compte que mettre des
courbes en couleur n’est pas du tout une bonne idée car les rapports sont impri-
més en noir et blanc. 5) S’il présente plusieurs séries de données, il serait perti-
nent d’ajouter une légende. 5) Le temps « 0 » est inexistant…

2
Section 3 : Les glucides et protéines

3. Vous devez connaître chaque colorant et la couleur qu’il donne selon la sub-
stance en contact. Ainsi, si je vous donne un liquide avec un mélange de sub-
stances, vous êtes en mesure de prédire la couleur qu’on devrait observer. Pour
vous aider, complétez ce tableau. Entre parenthèse, précisez si la couleur in-
dique un test positif ou négatif.

Substance Lugol Benedict Biuret

Monosaccharide Ambre (-) Rouille (+) Bleu (-)
Cellulose Ambre (-) Bleu (-) Bleu (-)
Amidon Noir-bleu (+) Bleu (-) Bleu (-)
Acide aminé Ambre (-) Bleu (-) Bleu (-)
Peptide Ambre (-) Bleu (-) Mauve (+)
Peptide dénaturé Ambre (-) Bleu (-) Mauve (+)

4. Vous devez aussi savoir ce que font l’amylase, l’hydrolyse acide, les anticorps
et la chaleur sur ces substances et ainsi prédire les couleurs des différents
tests selon les combinaisons. Exemple : Voici le contenu de différentes éprou-
vettes. Indiquez la couleur qu’on obtiendra avec les tests de Lugol, Benedict et
Biuret.

Contenu de
Lugol Benedict Biuret
l’éprouvette
Ambre (-) si l’hy-
Amidon + amylase drolyse est com- Rouille à vert (+) Mauve (+)
plète
Glucose + amylase Ambre (-) Rouille (+) Mauve (+)
Albumine + amy-
Ambre (-) Bleu (-) Mauve (+)
lase
Bleu (-) seulement
Albumine + hydro- si l’hydrolyse est
Ambre (-) Bleu (-)
lyse acide complète; sinon,
mauve (+)
Glucose + amidon Noir-bleu (+) Rouille (+) Bleu (-)
Albumine + amidon Noir-bleu (+) Bleu (-) Mauve (+)

Section 4 : Cinétique enzymatique (catalase)

Connaître les facteurs pouvant dénaturer la catalase. Connaître les facteurs pou-
vant accélérer ou ralentir la catalase sans la dénaturer.

Dans une mise en situation, prédire comment se fera la réaction de la catalase.

3
5. Tableau : Mettez un X au bon endroit. Vous pouvez ajouter des lignes au ta-
bleau.

Augmente l’acti- Diminue l’activi-

vité enzymatique té enzymatique Dénaturation
Facteur d’influence comparé aux comparé aux (activité enzy-
conditions opti- conditions opti- matique nulle)
males males
pH extrême bas X
pH extrême élevé X
Augmentation de la
concentration de la ca- X
talase
Augmentation de la X (si vmax
concentration en per- n’était pas at-
oxyde d’hydrogène teint)
Augmentation de la
concentration de solu-
X
tion saline (par exemple,
5% NaCl)
Présence d’un cofacteur X
Présence d’un inhibiteur
X
non compétitif
Température de 4°C
X
(comparée à 37°C)
Température de 40°C
X
(comparée à 37°C)
Température de 100°C
X
(comparée à 37°C)

Lors de la rédaction de votre rapport, vous avez présenté des explications sur les
mécanismes de fonctionnement de la catalase. Il faut être capable d’expliquer la
même chose. Vous avez aussi relevé des sources de variabilité des résultats. Il
faut être capable de les expliquer en vos mots, mais le faire comprendre à votre
correcteur. Vous devez bien connaître les étapes des manipulations pour détecter
un problème dans une expérience mal réussie.

Section 5 : Laboratoire sur la microbiologie

Dans ce laboratoire, il faut connaître les étapes pour travailler de façon aseptique
et sécuritaire. Il faut aussi comprendre le principe de stérilité.

Vous devez être capable d’estimer le nombre de bactéries initiales dans un échan-
tillon liquide à partir d’un dénombrement sur gélose.

4
Vous devez être capable de choisir entre différentes méthodes d’ensemencement
selon les besoins de votre étude (quantitatif ou qualitatif) et votre source de bacté-
ries (liquide ou sur une surface, très concentrée ou peu concentrée).

6. Dans un échantillon d’eau d’une buvette du Parc du Mont-Royal que vous avez
dilué 1000 fois (10-3), vous ensemencez 500 µl de cette dilution sur gélose TSA.
Après 48h d’incubation, vous dénombrez 88 colonies. Quelle était la concentra-
tion initiale de bactéries (nb de bactéries/ml) au moment du prélèvement?

88 colonies*1000 = 1,8x105 bactéries/ml

0,5 ml

ou

88 colonies = 1,8x105 bactéries/ml

0,5 ml * 10-3

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Section 6 : Laboratoire diffusion et osmose

Vous devez être capable de prédire sur un montage comportant deux comparti-
ments séparés d’une membrane semi-perméable le sens de déplacement à partir
des concentrations de solutés diffusibles, de solutés non diffusible et d’eau.
.
À partir d’un montage constitué d’un sac avec un colorant et la description des dif-
férentes solutions, vous devez pouvoir indiquer s’il y a eu osmose ou diffusion,
dans quel sens, et quelle molécule s’est déplacé.

Pour vous aider, complétez les questions à la fin de votre protocole de laboratoire.

Section 7 : Génétique du Maïs

Vous devez être en mesure d’appliquer les règles de transmission de divers carac-
tères par croisement monohybride et dihybride.

Section 8 : Initiation à l’usage du microscope

Vous devez savoir comment transporter, installer et ranger correctement votre mi-
croscope.

Vous devez être capable de monter une lame correctement et de faire la mise au
point d’une lame.

Vous devez calculer le grossissement total d’un microscope en regardant les me-
sures de grossissement de l’oculaire et de l’objectif.

Vous devez être capable de calculer le diamètre d’un champ de vision à partir du
diamètre de champ de vision à un autre grossissement.

Si on vous donne le diamètre du champ de vision d’un microscope, vous devez être
capable d’estimer la taille d’un objet observé.

Vous devez être en mesure de comprendre et d’expliquer l’effet de la profondeur de

champ quand on passe d’un petit à un fort grossissement, ou l’inverse.

Comprendre comment une image est modifiée quand on la regarde au microscope.

Vous devez être en mesure d’effectuer une préparation de cellules de l’épithélium

buccal et d’épithélium d’oignon et de l’observer au microscope.

7. On vous procure un nouveau microscope. L’oculaire grossit 10 fois et l’objectif

que vous avez choisi grossit 50 fois. Combien de fois est grossie l’image que
vous regardez dans ce microscope?

6
500X

8. Le diamètre du champ de vision de votre microscope est de 1,5 mm au grossis-

sement 100x. Quel sera le diamètre de votre champ de vision au grossissement
300x?

1,5 mm* 100X = 0,5 mm ou 500 µm

300X

9. Vous avez un microscope dont le champ

de vision est de 5mm à un grossissement
total de 40x. Vous regardez une cellule à
un grossissement total de 400x. Voici
l’image de cette cellule. Quel est son péri-
mètre? Quel est le diamètre de son noyau?

1) Le diamètre de champ à 400X est de

0,5 mm ou 500 µm.
2) La longueur de la cellule = environ 2x
plus petite que le diamètre de champ,
donc = 250 µm.
3) La largeur de la cellule = environ 3x
plus petite que sa longueur, donc = 85
µm.
4) Le périmètre = (2*L) + (2*l) = 670 µm.
5) Le diamètre du noyau est un peu plus petit que la largeur de la cellule, donc
autour de 75-80 µm.

Section 9 : Observation des cellules eucaryotes

Vous devez être capable de reconnaître les différentes cellules observées lors du
laboratoire en faisant vous-même la mise au point ou en observant à un micro-
scope :

Élodée (frais et fixée)

Euglène (fraiche et fixée)
Paramécie (fraiche et fixée)
Amibe (fraiche et fixée)
neurone multipolaire (fixé)
globules rouges et blancs (fixés)
spermatozoïdes de rat et d’humain (fixés, évidemment…)

Vous devez pouvoir comparer les modes de locomotion des protistes.

Vous devez pouvoir distinguer ces spécimens en identifiants leurs organites ou

leur forme spécifiques.

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Vous devez être capable de faire un lien entre la structure et la fonction des cel-
lules observées.

10. Remplissez le tableau de reconnaissance des différentes cellules.

autre commen-
cellule forme couleur taille
taire
présence de
verte, sans
Élodée rectangulaire chloroplastes
colorant
(cyclose)
Présence de
verte sans co- chloroplastes
Euglène cylindrique
lorant et présence
d’un flagelle
cylindrique présence de
aux extrémi- claire sans co- cils autour de
Paramécie
tés légère- lorant toute la cel-
ment pointées lule
dépend du co- pseudopodes
informe ou
Amibe lorant utilisé, et phagocy-
étoilée
sinon, claire tose
mauve (dé- prolonge-
Neurone étoilée pend du colo- ments cyto-
rant) plasmiques
rond, bicon-
Globule rouge rouge
cave
mauve (dé-
présence d’un
Globule blanc rond pend du colo-
noyau
rant)
tête en forme
Spermatozoïde
de crochet + claire flagelle
de rat
flagelle
Spermatozoïde tête ronde + plus petit que
noire flagelle
d’humain flagelle celui du rat