ÉCHANTILLONNAGE ET

MANIPULATION DES ÉCHANTILLONS

D’EAUX

Exposé par le groupe 10 :

Emmanuel Stephane TAMBE NKOLO
Superviseur
Bérénice Ange TAMEKEM DJIOGUE
Dr KORO
Joseph Rodolphe TINA MANANGA
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Cynthia Leila TONDA NYAMEN
 PLAN

INTRODUCTION
I- PREPARATION DU MATERIEL
II- ECHANTILLONNAGE
III- MANIPULATION DES ECHANTILLONS
IV- CONCLUSION
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INTRODUCTION

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 INTRODUCTION 1/2
 L’échantillonnage constitue la première étape d’une enquête et est une phase
critique de l’analyse et de la crédibilité des résultats obtenus. C’est la phase
« in situ » avant la phase « in vitro »

 Cette étape nécessite une optimisation de précision et une minimisation

d’erreurs pour ne pas faucher l’objectif de l’enquête (quand bien même un

échantillon(nage) ne saurait être parfait)

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 INTRODUCTION 2/2
Problématique: comment doit-on échantillonner l’eau et quelles sont les
méthodes appropriées à la manipulation de ses échantillons à destination du
laboratoire, de façon à garantir la fiabilité de l’enquête ?

Objectif: la description des étapes et consignes d’échantillonnage et de

manipulation pré-analytiques des échantillons d’eaux jusqu’à ce qu’ils arrivent
au laboratoire.

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I- PRÉPARATION DU MATÉRIEL

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 I- Préparation du matériel 1/3
 Préparer sa descente sur le terrain est la première chose à faire.

 Identifier à l’avance l’environnement, le site des eaux à prélever, ainsi que la

démarche, le plan ou le protocole d’échantillonnage

 Définir les objectifs de l’enquête et les paramètres critiques de

l’échantillonnage, de façon à rendre fiable la prospection.

 En déduire l’inventaire du matériel nécessaire et des équipements appropriés

à la réalisation de cet échantillonnage.
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 I- Préparation du matériel 2/3
 Etiquetage des bouteilles de prélèvement (date, heure, code…et toute autre
information qui devra être décryptable par les analystes lors de la phase du
laboratoire

 Le matériel le plus couramment utilisé pour l’échantillonnage de l’eau est

composé de :
 Récipients en verre ou en plastique neuf (et à usage unique) étiquetés et stérilisés
à l’avance (bouteilles, flacons etc…)
 Des glacières ou engins de transport réfrigérés et à l’abri du soleil 8
 I- Préparation du matériel 3/3
pour arrêter l’activité des microorganismes.
 Des équipements personnels appropriés (gants, bottes etc…)
 Prévoir un turbidimètre pour empêcher la turbidité de l’eau et des appareils pour
mesurer quelques paramètres physicochimiques (Thermomètre, pH-mètre,
héliogramme etc….)

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II- ÉCHANTILLONNAGE

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 II- Échantillonnage de l’eau 1/11
L’échantillon est un élément d’un tout, sélectionné ou choisit de manière objective,
qui représente les particularités de tout l’ensemble du lot et à partir duquel les
résultats de l’analyse au laboratoire seront reportés sur l’ensemble du lot.

L’échantillonnage consiste donc aux procédures d’inspection et de prélèvement

d’un échantillon représentatif d’un lot de produit, en vue de l’analyser au laboratoire
pour agréer ou désagréer un produit.

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 II- Échantillonnage de l’eau 2/11
Un échantillonnage pourra donc être sélectif (prélèvement orienté vers les zones ou
produits de forte suspicion de la contamination) ou objectif (choix aléatoire avec
égalité de chance au moment du tirage de la zone ou des produits).

la collecte des échantillons d’eau est un exercice délicat nécessitant une justesse,
précision, hygiène et maitrise particulières pour ne pas faucher «
intentionnellement » les résultats.

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 II- Échantillonnage de l’eau 3/11
1- INSPECTION ET SONDAGE
- Prospecter l’entourage du site de prélèvement.
- L’enquêteur prend des notes de quelques observations sur le cadre de
l’échantillonnage.
- Le sondage des puits, lacs, piscines, usines, robinets ou autres eaux à prélever
doit concourir à l’optimisation de l’objectif de l’échantillonnage.

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 II- Échantillonnage de l’eau 4/11
2- PRISE DE PARAMÈTRES PHYSICOCHIMIQUES
 PARAMÈTRES  VARIABLES SECONDAIRES  LIEN SIGNIFICATIF  APPAREILS DE
MESURE
 Turbidité  Matières en suspension totales La turbidité peut être liée à la  Turbidimètre
(MST) quantité de matières solides en
suspension.

    La quantité d’oxygène dissous dans  

Température Oxygène dissous l’eau s’accroît à mesure que la Thermomètre
température baisse.

    La toxicité de l’ammoniac dans l’eau  

pH-Température Ammoniac s’accroît à mesure que le pH et la pH-mètre et thermomètre
température augmentent.

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 II- Échantillonnage de l’eau 5/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 1/6
Précautions (1/2):
- Commencer par une hygiène appropriée du manipulateur et des outils du
prélèvement. (prélèvement aseptique, outils stériles)
- Veiller à ce qu’il ne se forme pas des bulles lors du prélèvement. A cela, on
peut ajouter les précautions ci-après.
- Avant d'effectuer le prélèvement de votre eau, il est recommandé de vous
laver les mains. 15
 II- Échantillonnage de l’eau 6/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 2/6
Précautions (2/2):
- Ne jamais fumer pendant l'échantillonnage ou lors du transport des
échantillons
- Ne jamais échantillonner immédiatement après avoir effectué le plein
d'essence d'une voiture;
- Éviter de prélever des échantillons d'eau dans des salles de bain (présence de
désodorisants chimiques de composition identique à certains composés organiques mesurés)
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 II- Échantillonnage de l’eau 7/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 3/6
Étapes de prélèvement (1/4):
L'eau est peut être le principal élément à prélever dans une usine alimentaire,
puisqu'elle est utilisée pour le nettoyage, qui est l'un des principaux facteurs de
réduction de la contamination bactérienne. Pour prélever des échantillons d'eau
en vue d'un examen microbiologique, nous pouvons procéder comme suit:

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 II- Échantillonnage de l’eau 8/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 4/6
Étapes de prélèvement (2/4):
1° Utiliser des bouteilles stériles fournies par le laboratoire. Si l'eau est chlorée, il faut
neutraliser le chlore. Dans ce cas, le laboratoire verse dans les bouteilles, avant la stérilisation, une quantité de thiosulfate de
sodium correspondant à 100 mg/1 d'échantillon. Lorsque l'échantillon est prélevé, le thiosulfate de sodium empêche le chlore
d'agir sur les micro-organismes (bactéries) pendant le transport de l'échantillon jusqu'au laboratoire, de sorte que la charge

microbiologique, au moment de l'examen, est la même qu'au moment du prélèvement .

2° Inspecter soigneusement l'extérieur du robinet auquel l'échantillon va être

prélevé. Si le robinet perd par la poignée, prélever si possible l'échantillon à un autre robinet; sinon, signaler la fuite au
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laboratoire.
 II- Échantillonnage de l’eau 9/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 5/6
Étapes de prélèvement (3/4):
3° Nettoyer et sécher l'extérieur du robinet. Il n'est pas nécessaire de le flamber.
4° Laisser couler l'eau du robinet grand ouvert pendant au moins 30 secondes
avant de prélever l'échantillon, ou pendant deux ou trois minutes, selon la
longueur de la conduite d'eau.
5° Refermer partiellement le robinet pour pouvoir prélever l'échantillon sans
éclaboussures.
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 II- Échantillonnage de l’eau 10/11
3- PRÉLÈVEMENT : CAS D’UNE EAU DE ROBINET 6/6
Étapes de prélèvement (4/4):
6° Ouvrir avec précaution la bouteille pour éviter la contamination, comme
pour tout autre prélèvement aseptique, en veillant à ce que rien d'autre que
l'eau ne touche l'intérieur de la bouteille ou l'intérieur du bouchon. Ne pas
rincer la bouteille.
7° Remplir soigneusement la bouteille sans éclaboussures et prendre soin pour que
l'eau passée sur les mains de l’échantillonné ou sur des objets extérieurs ne pénètre pas dans la
bouteille. Ne remplir la bouteille qu'aux trois quarts.
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Sauf indications contraires, le volume minimal nécessaire pour un examen microbiologique est de 100 ml.
 II- Échantillonnage de l’eau 11/11
Après prélèvement, remettre ou envoyer l'échantillon rapidement au laboratoire.

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III- MANIPULATION DES ECHANTILLONS

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 III- Manipulation des échantillons 1/5
La manipulation d’un échantillon est l’ensemble de traitements manutentionnaires
(empaquetage, stockage, étiquetage, transport…) ou physicochimiques (conservation
au froid, conditionnement spécialisé etc…) appliqués à l’échantillon afin de le
maintenir intact jusqu’à son installation au laboratoire pour analyse.

Pour l’échantillon d’eau, Il s’agira de l’étiquetage (peut être déjà fait lors de la
préparation du matériel) du stockage (ou conservation), du transport et de
l’installation au laboratoire.
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 III- Manipulation des échantillons 2/5
1- STOCKAGE ET TRANSPORT 1/2
Si l'échantillon n'est pas analysé dans les 24-48 heures qui suivent le
prélèvement, les résultats risquent d'être faussés.
- Transporter l'échantillon dans une caisse isotherme à température de
réfrigération.
- Il peut aussi être nécessaire de prélever des échantillons d'eau dans des
réservoirs ouverts et des cuves.

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 III- Manipulation des échantillons 3/5
1- STOCKAGE ET TRANSPORT 2/2
- Il faut veiller à ne pas contaminer les réservoirs et le récipient qui va recevoir
l'échantillon. Frotter l'intérieur et l'extérieur d'un récipient gradué en acier inoxydable à l'aide d'un-gros tampon de
coton imprégné d'éthanol à 95 pourcent ou d'isopropanol à 70 pourcent. Chauffer ce récipient à la flamme pour enflammer
l'alcool et laisser celui-ci flamber complètement. Refroidir le récipient d'acier dans l'eau à échantillonner et en le vidant
deux fois

- Prélever l'échantillon d'eau et le verser immédiatement dans un récipient

stérile. Ensuite le transporter, dans une chaine de froid (4°) qui inhibe l’activité
microbiologique, jusqu’au laboratoire. 25
 III- Manipulation des échantillons 4/5
2- INSTALLATION AU LABO 1/2
Les échantillons d’eau doivent mettre dans l’idéal, un maximum de 48h entre
l’instant de leur prélèvement et celui de leur analyse, surtout pour des analyses
de paramètres microbiologiques. Pour des analyses toxicologiques (paramètres
chimiques), ils devront mettre beaucoup moins de temps, soit 30 minutes au
maximum dans l’idéal.

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 III- Manipulation des échantillons 5/5
2- INSTALLATION AU LABO 2/2
Ils devront arriver bien avant le délai au laboratoire et pourront être
directement installés ou conservés dans les mêmes conditions que celles de
transport avant de procéder à l’analyse (phase post-échantillonnage), tout
dépendra du protocole de réception et d’analyse des échantillons.

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CONCLUSION

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 III- CONCLUSION 1/2
A NOTRE ATTENTION,
L’eau c’est la vie. Sa qualité reflète très souvent la santé d’une communauté.
Son analyse est donc un exercice permanent pour évaluer et améliorer la santé
des populations.
Il est alors important d’optimiser la fiabilité et la crédibilité de son
échantillonnage pour se rassurer du niveau de risque de la contamination
microbiologique ou toxicologique de l’eau.

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 III- CONCLUSION 2/2
…ET EN RESUME ,
Nous venons de parcourir les différentes étapes d’échantillonnage, partant de la
préparation du matériel, passant par le prélèvement jusqu’à l’installation des échantillons
au laboratoire. La prise de paramètres physicochimiques, le prélèvement et la conservation
des échantillons sont des points critiques pour lesquels sans leur maitrise et optimisation,
l’échantillonnage ne serait pas réussi. Il faut donc faire très attention et être à même de
produire de meilleurs échantillons représentatifs au laboratoire pour bien démarrer
l’investigation qui se poursuit par des analyses in vitro et la promulgation des résultats.

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MERCI POU
R VOTRE AIM
AB LE ATTENTI
ON