Université Sultan Moulay Slimane

Ecole supérieure de technologie BÉNI

MELLAL
DUT Génie des procédés

FLUORESCENCE

Réalisé par :
OUMOULID Lahcen
BAHRA Chayma
EL GHAZI Oumssaad
Proposé par :
BAYA Meryam Pr .Wafa TEROUZI
LEMBARKI Meryem
Année Universitaire : 2021/2022
 INTRODUCTION

type de fluorescence

Différences entre fluorescence et

FLUORESCENCE

phosphorescence
PLAN DE
TRAVAIL : les caractéristique des fluorophores

MICROSCOPIE À FLUORESCENCE

les avantage et les application

CONCLUSION
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 introduction

HISTORIE
FLUORESCENCE

Première observation de la fluorescence en 1845 par Sir John F.W. Herschel avec une solution
de quinine et la lumière du soleil . Développement du premier spectrofluorimètre. C’est G.G.
Stokes qui donne pour la première fois le nom de fluorescence à ce phénomène (1853). C’est
Jablonski qui développa la fluorescence vers les années 1920-30. Il est considéré comme le
père de la fluorescence
DÉFINITION
La fluorescence est un phénomène physique provenant des fluorophores, qui sont des espèces
chimiques capables d'émettre de la lumière après une excitation par la lumière

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 type de fluorescence

Fluorescence naturelle Fluorescence artificielle

 Les acides aminés aromatiques  Dans les lampes fluorescentes
 certaines vitamines du groupe
FLUORESCENCE

(comme dans les lampes

B fluocompactes),
 les ions CO+  un gaz émet de la lumière
 l'eau, l'élément le plus abondant ultraviolette lorsqu'il est traversé
dans les comètes, après avoir par une décharge électrique.
absorbé la lumière du Soleil,  Un revêtement de phosphore
réémettent par fluorescence une absorbe cette lumière ultraviolette
lumière bleue qui donne sa et la transforme par fluorescence
couleur à la queue d'ions…… en lumière visible…….

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 Différences entre fluorescence et phosphorescence

Fluorescence et phosphorescence sont deux

FLUORESCENCE

formes différentes de luminescence qui

diffèrent notamment par la durée de
l'émission après excitation : la fluorescence
cesse très rapidement tandis que la
phosphorescence perdure plus longtemps. La
fluorescence peut entre autres servir à
caractériser un matériau

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 Différences entre fluorescence et phosphorescence
FLUORESCENCE

5
 Molécules fluorescentes utilisées en microscopie
FLUORESCENCE

6
 Quelque molécules fluorescence
FLUORESCENCE

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 Les caractéristiques des fluorophores

 Coefficient d'extinction (ou absorption molaire) : Reflète la

probabilité d’absorption d’une molécule à une longueur d’onde
donnée entre 5000 et 250 000 cm-1 M-1
FLUORESCENCE

par exemple : ℇ =80 000 cm-1 M-1 pour 488 nm pour la fluorescéine

 Rendement quantique : efficacité relative de la fluorescence

comparée aux autres voies de désexcitation
nombre de photons émis
Ꝋ=
nombre de photons absorbés

 Intensité de fluorescence : dépend de la longueur d’onde d’excitation

ex alors que l’allure du spectre de fluorescence est indépendante de
cette dernière Pour une solution diluée : I = 2,3.Ꝋ.I0 .A
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 Les caractéristiques des fluorophores

 Durée de vie à l'état excité : c'est

la durée caractéristique pendant
FLUORESCENCE

laquelle la molécule reste à l'état

excité avant de retourner à l’état
fondamental .

 Qu’est ce qu’un bon fluorochrome?

 Coefficient d’extinction important
 Fort rendement quantique (0,8-0,9)
 Grand décalage de Stokes
 Faible photoblanchiment
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 MICROSCOPIE À FLUORESCENCE

 La Microscopie à fluorescence Cette

technique est utilisées pour certaines
molécules qui émettent de la lumière
quand on les éclaire avec une lumière
FLUORESCENCE

de longueur d'onde supérieure .

 On éclaire l'échantillon avec une

lumière ultraviolette, violette ou
bleue.

 Consiste à utiliser une coloration

fluorescente. Deux colorants très
utilisés sont : la rhodamine (émet une
lumière rouge) et la fluorescéine
(lumière verte).
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FLUORESCENCE
MICROSCOPIE À FLUORESCENCE

Peut provoquer chez le fœtus

En effet, le parasite une toxoplasmose latente
traverse le placenta, susceptible de se révéler
surtout en fin de plusieurs mois après la
grossesse. naissance par une
choriorétinite.

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 les application

Les substances fluorescentes sont Des matériaux fluorescents

largement utilisées dans la recherche et avec un temps de désintégration
le diagnostic en microbiologie et en de 10−9 à 10−7 secondes seront
FLUORESCENCE

médecine, où les colorants fluorescents, utilisés pour identifier et mesu-

tels que la fluorescence, la rhodamine rer les rayonnements de haute
utilisé pour distinguer et suivre les énergie, tels que les rayons X et
protéines. les rayons gamma.

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 les application

Condensation des écrans En tant qu’assistant dans l’exploration de

en radiographie médicale certains métaux, tels que la sceélite (tungs-
tat de calcium) et la willémite (silicate de
FLUORESCENCE

médicale
zinc)

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 les avantage

Réponse rapide aux Non destructif pour

changements de concentration l'échantillon
FLUORESCENCE

Analyse des différents Produits dérivés non

états d'agrégation (liquide ou dangereux
solide , forme irrégulière)
Détection des composés
Bien adapté pour des présents dans l'air ou l'eau,
études in situ au laboratoire et même à des
directement sur le terrain concentra-
tions très faibles

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 CONCLUSION

techniques de spectrofluorescence sont très sensibles. La fluorescence est

FLUORESCENCE

fortement influencée par son environnement immédiat tels que la température, la

polarité, le pH ….
Pour un chimiste analytique, la spectroscopie de fluorescence permet ainsi de
développer des méthodes d’analyse rapide qui, associés à la chimiométrie,
permettent de remplacer les méthodes d’analyse plus longues telles que HPLC,
LC-MS, RMN….

15
MERCI POUR VOTRE
ATTENTION

D
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D
 REFERENCES BIBLIOGRAPHOQUES:

1_« Histoire de la FLUORESCENCE» [archive], sur www.fluomin.org (consulté le 5

février 2021)
2_https://www.techniques-ingenieur.fr/edito/contact.html
3_https://www.techno-science.net
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