Chimie analytique instrumentale

Notions de spectromtrie de Rsonance Magntique Nuclaire

Etienne QUIVET 04 91 10 62 43 etienne.quivet@univ-provence.fr
Laboratoire Chimie Provence, UMR 6264, Universit de Marseille

Rsonance Magntique Nuclaire

1. Dfinition 2. Principe 3. Instrumentation
F Bloch (1905-1983)

4. Interprtation des spectres

E Purcell (1912-1997)

Dfinition
La Rsonance Magntique Nuclaire (RMN) est une technique assez rcente (travaux de Bloch et Purcell dans les annes 50), au regard des spectroscopies classiques.

La RMN constitue actuellement la technique la plus puissante et la plus gnrale danalyse structurale des composs organiques.

Le principe de la RMN est relativement simple. La thorie est toutefois assez complexe.
(traitement mathmatique et physique du phnomne lourd)

Nous naborderons pas ces aspects mais approcherons la thorie lorsquelle est ncessaire la comprhension des spectres de RMN.

Dfinition
La RMN est ne en 1946 et a explos vers de multiples applications : - la chimie avec l'laboration des structures chimiques et la dynamique molculaire,
O CH3 O

Complexe aspirine phospholipase A2

H3C

4-mthylbenzophnone ou 2-mthylbenzophnone ??

- le domaine mdical avec l'Imagerie par Rsonance Magntique (IRM)...

Le qualificatif "Nuclaire" a disparu de l'intitul pour ne pas effrayer ( tort !) les malades...

Principe
Un noyau est observable par RMN s'il prsente des proprits magntiques caractrises par l'existence d'un nombre de spin I non nul. Tous les atomes des noyaux sont chargs positivement. Dans certains noyaux, la rotation de cette charge autour de laxe nuclaire dtermine lapparition dun diple magntique align sur cet axe.
r L r r
>0 <0
= rapport gyromagntique en rad.T-1s-1

r L

Le moment magntique caractrise limportance du diple nuclaire.

r r =L

Principe
Le nombre de spin I dtermine le nombre N dorientations (de positions) que peut prendre le noyau au sein dun champ magntique uniforme.
N = 2I + 1 I est la rsultante des spins des neutrons et des protons constituants le noyau

Observations systmatiques
1. 2. 3. Nombre de masse (A) impair 1H (I=), 13C (I=), 31P (I=), 23Na (I=3/ ) 2 Nombre de masse (A) pair, nombre de charge (Z) impair 2H (I=1), 14N (I=1), 10B (I=3) A pair, Z pair 12C (I=0), 16O (I=0) 32S (I=0)

I demi-entier I entier I=0

Principe
Proprits nuclaires des noyaux les plus tudis en RMN

Noyau I

1H

13C

15N

19F

29Si

31P

57Fe

109Ag

113Cd

119Sn

4,7

8,58

Abondance 99,98 1,11 0,37 100 naturelle (%)

100 2,19 48,18 12,26

Les noyaux qui possdent un nombre de spin = sont les plus intressants en RMN

Noyau I

2H

1Li

14N

17O

23Na

25Mg

27Al

33S

39K

43Ca

3/2

5/2

3/2 100

5/2

5/2

3/2 0,76

3/2

7/2

Abondance 0,015 92,58 99,63 0,037 naturelle (%)

10,13 100

93,1 0,145

Principe
Orientation des moments magntiques nuclaires En labsence de champ magntique En prsence dun champ magntique B0 uniforme

B0

Absence dorientation privilgie

Les spins prennent (2I + 1) orientations dfinies

Principe
nergie des spins
-.B0
cas I = 1/2
mI= -1/2

B0
mI= +1/2

+.B0

Les deux tats de spin ont des nergies diffrentes. Ils tournent autour de laxe du champ magntique B0. Il y a plus de spins (basse nergie) que de spins (haute nergie).

Principe
nergie des spins Elle dpend du noyau et du champ magntique B0. E = - . h . . B0 2 E = E = + . h . . B0 2
1H

h . . B0 2

E Energie (J) h constante de Planck (6,63.10-34 J.s) rapport gyromagntique (dpend du noyau) (rad.s-1.T-1) B0 champ magntique (Tesla, T) radian, rad

: = 26,75.107 rad.s-1.T-1 : = 6,725.107 rad.s-1.T-1

13C

Plus est important, plus le noyau est sensible

Principe
Rotation des spins Les spins tournent autour de laxe du champ magntique B0 la mme vitesse

zL

Bo

cas I = 1/2

B0
mI= -1/2

yL

xL

Prcession de Larmor la frquence 0

0 Equation de Larmor

mI= +1/2

0 = B0

Principe
Rotation des spins Elle dpend du noyau et du champ magntique B0. . B0 2

0 =

0 frquence de LARMOR (s-1 ou Hz) rapport gyromagntique (rad.s-1.T-1) B0 champ magntique (Tesla, T) radian, rad

La frquence de LARMOR est aussi appele frquence de rsonance

Principe
Rotation des spins Exemple de frquence de rsonance (MHz)
B0 (T) Noyau
1H

2,35 100 25 40,5 94,1

7,05 300 75 121,5 282,3

13C

31P

19F

Principe
La RMN met en jeu 2 phnomnes distincts mais simultans : 1. Perturbation de ltat dquilibre (excitation) 2. Retour lquilibre (relaxation)

Dispositif exprimental
Une bobine est place proximit de lchantillon. Elle met une onde lectromagntique dont la frquence est judicieusement choisie E = h.0 Phnomne de rsonance

FT FID Signal obtenu intensit = f(temps) intensit = f(frquence)

Instrumentation

Instrumentation
Aimant supraconducteur
( l'origine du champ magntique B0) Azote liquide (77K) Hlium liquide (4K) Bobine supraconductrice (alliage NbTi) Sonde de mesure

lectro-aimant constitu d'un solnode aliment par un courant continu stabilis.

Passage du courant lvation de temprature de l'aimant circuit de refroidissement de l'aimant B0 > 2 Tesla utilisation de cryoaimants utilisant des bobines supraconductrices refroidies l'hlium liquide

Instrumentation
metteur-rcepteur de radiofrquences RF
Ordinateur Echantillon C

Cet metteur est constitu d'une bobine alimente par un courant alternatif (de frquence gale la frquence de Larmor). Aprs l'impulsion, cette bobine est utilise en rcepteur pour capter le FID Ordinateur Coupl l'metteur-rcepteur et aux diffrents lments constitutifs de l'appareillage RMN

Instrumentation
Tubes RMN

C'est une petite prouvette de verre dont les dimensions (pour la RMN du proton) sont donnes ci-dessous. Elle est fabrique avec prcision puisqu'elle doit tourner. longueur du tube: 18 cm diamtre externe: 5 mm diamtre interne: 4 mm

Spectre RMN 1H
Comment se prsente un spectre RMN 1H ?

Pics de lchantillon

Rfrence

Intensit des pics

Dplacement chimique

Spectre RMN 1H
Dplacement chimique standardis ch - rf = rf . 106
en ppm

Le dplacement chimique est invariable avec le champ magntique

100 Hz 100 Hz

0 = 0 /2 = 100 MHz
2 1 0 ppm

0 = 200 MHz
2

200 Hz

200 Hz

0 ppm

300 Hz

300 Hz

0 = 300 MHz
2 1 0 ppm

Spectre RMN 1H
Choix du compos de rfrence Un seul type de proton Inerte chimiquement Apolaire Point dbullition peu lev (~ 20C) Bon march
CH3 H3C Si CH3 CH3

Ttramthylsilane (TMS)

Choix du solvant Permet de dissoudre le produit Ne comporte pas de proton : CCl4 solvants deutrs (ex: CDCl3)

Spectre RMN 1H
Frquence de rsonance . B0 2

Noyaux isols dans le champ magntique B0

0 =

En fait, les noyaux participent des liaisons chimiques : Environnements lectroniques diffrents Liaisons circulation dlectrons Cration de champs magntiques faibles opposs B0 Phnomne dcran dpendant de lenvironnement chimique blindage lectronique

Spectre RMN 1H
Blindage lectronique Noyau seul 0 = B0 frquence de Larmor Prsence de liaison chimique eff = Beff eff = Beff = (B0 - B0) = 0 (1 - ) = constante dcran

Spectre RMN 1H
Constante dcran Contributions de champs locaux de diverses origines

Symtrie des orbitales atomiques p et d

Anisotropie des liaisons

= i = d + p + a + r + s + ...
k

Charge du noyau

Courants de cycles

Effets de solvant

Spectre RMN 1H
Constante dcran
d = effet de llectrongativit
CH3F CH3OH CH3Cl

X-C-H
CH3Br CH3I TMS

Electrongativit () (ppm)

4,0 4,26

3,5 3,40

3,1 3,05

2,8 2,68

2,5 2,16

1,0 0,00

Plus X est lectrongatif, plus leffet est important Leffet diminue avec la distance

a = anisotropie des liaisons

Actylnique

Ethylnique (1H) ~ 5 ppm (13C) = 120-200 ppm (1H) = 2-3 ppm

Spectre RMN 1H
r = courants de cycle

Circulation dlectrons Champ magntique local, Bloc

B0

lintrieur du cycle : Bloc = - rB0 lextrieur du cycle : Bloc = + rB0

Exemples

Courant de cycle, 18 lectrons

- 1.4 ppm

0 ppm
Protons internes : -1.8 ppm Protons externes : 8.9 ppm

Spectre RMN 1H
r = effets de solvant

Dplacements chimiques de quelques solvants

Spectre RMN 1H
Consquences pour linterprtation dun spectre Pour un proton donn, linfluence principale sera le groupement chimique auquel il est attach dplacement chimique = ide du groupement chimique

Table des dplacements chimiques des protons

ppm

Source : Introduction to spectroscopy, Pavia et al, Saunders, 1979, ISBN 0-7216_7119-5

Spectre RMN 1H
Protons quivalents (isochrones) Protons chimiquement ou dynamiquement quivalents 1 seul et mme dplacement chimique

1 seul signal

Spectre RMN 1H
Surface des signaux
Surface dun signal toujours proportionnelle au nombre de protons de ce signal

Courbe en paliers hauteur de palier proportionnelle la surface et donc au nombre de protons de ce signal Vrai uniquement en RMN 1H

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin Signaux des diffrents protons multiplets (interactions transmises par les lectrons des liaisons)

6.0

H 3C CH H 3C O H

3.65

3.60

3.55

3.50

3.45

1.0
OH (
3

1.0
J C H -O H = 5 H z )

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

Multiplicit et intensit des signaux nature et nombre de protons coupls

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin Exemple : 2 protons voisins Ha et Hb ayant des dplacements chimiques diffrents

R1 Ha

R2 Hb

Hb perturbe le champ magntique ncessaire l'obtention de la rsonance de Ha

Ceci se traduit par deux perturbations magntiques : l'une cre un champ s'ajoutant B0 l'autre un champ s'opposant B0

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin Exemple : 2 protons voisins Ha et Hb ayant des dplacements chimiques diffrents

B0

B0

Sur le spectre 2 raies centres la frquence propre de rsonance de Ha Raies espaces d'une valeur note nJHaHb appele constante de couplage (en Hertz) n tant le nombre de liaisons sparant les noyaux coupls Valeur de J indpendante de B0 mais dpendante de la position relative des protons dans la molcule et de sa gomtrie

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin Cas des htronoyaux : On prcise la nature du noyau Si n = 1 1JC-H ou 1JH-F Si n > 1 couplages longues distances (faibles)

Cas du proton :
n 2 3 >3 Couplage Protons gmins Protons vicinaux Longues distances (faible)

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin Cas du proton : Quelques constantes de couplage reprsentatives (Hz)

11 to 18

6 to 15

0 to 5

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin : multiplicit des signaux

Cas du proton : un noyau a une influence sur son voisin ddoublement du signal

Gnralisation : un noyau de spin I dcompose les raies de rsonance de ses voisins en (2I+1) raies de transition Si le noyau est coupl avec n noyaux voisins quivalents de spin I, on aura (2nI+1) raies Lorsqu'on a plusieurs types de noyaux quivalents n et n', on obtient (2nI+1)x(2n'I+1) raies

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin : multiplicit des signaux

Si I = 1/2, les intensits relatives des raies suivent la rgle du triangle de Pascal :
n 0 1 2 3 4 5 Intensit des raies 1 11 121 1331 14641 1 5 10 10 5 1 Forme du signal Singulet Doublet Triplet Quadruplet Quintuplet Sextuplet

Spectre RMN 1H
Couplage spin-spin : multiplicit des signaux Exemple :
(CH2)
3J 3J 3J 3J 3J 3J

CH3 - CH2 - Y

Couplages successifs des 3 (1H) du CH3

3
3J 3J

3J

(CH2)

1 proton du CH2 coupl 3 protons du CH3 1 quadruplet

Spectre RMN 1H
Dcouplage : supprimer le couplage spin-spin
B0
zL

dcouplage
B2
yL

B1
xL

1H

Impulsion

Second champ r.f.

acquisition

RMN 1H

CH3 CH2 CH2 - I

Spectre avec couplages

0 ppm

dcouplage sur CH3

0 ppm

Spectre RMN 1H
La RMN du 13C donne des informations sur la structure des molcules (squelette carbon) Rappel : nergie des spins E =
rapport gyromagntique (dpend du noyau) (rad.s-1.T-1)

h . . B0 2
1H

: = 26,75.107 rad.s-1.T-1 : = 6,725.107 rad.s-1.T-1

13C

RMN 13C a une sensibilit plus faible que RMN 1H Acquisition en RMN 13C plus longue quen RMN 1H Beaucoup plus de bruit en RMN 13C

Spectre RMN 13C

Dplacement chimique Mme rfrence que pour la RMN 1H TMS = 0 ppm
Exemple de table de dplacement chimique

Spectre RMN 13C

Couplage spin-spin : multiplicit des signaux Couplage 13C-13C existe probabilit 1,1 % pas de couplage visible sur le spectre RMN 13C

Spectres 1H et 13C RMN du resvratrol trans-dhydrodimre

Spectre RMN 13C

Transfert de polarisation (DEPT)

Principe : transfrer les proprits magntiques des protons aux carbones lis ces protons ( observation des carbones avec une sensibilit proche de 1H)

Type de spectre Spectre total 13C DEPT 45 DEPT 90 DEPT 135

Rsultats Tous les carbones Carbones protons CH CH2

En pratique : spectre 13C (dplacement chimique de tous les carbones) et DEPT 135

Spectre RMN 13C

Transfert de polarisation (DEPT)
Exemple :

Spectre RMN 13C

Transfert de polarisation (DEPT)
Exemple :

Spectre RMN 13C

Transfert de polarisation (DEPT)
Exemple :

Autres techniques RMN

RMN 1 dimension
Spectre dcoupl : irradiation des frquences spcifiques durant lacquisition du signal qui supprime tous les couplages DEPT : cf exemples prcedents NOE (Nuclear Overhauser Effect) : irradiation des frquences spcifiques avant lacquisition du signal qui supprime les couplages avec le proton

RMN 2 dimensions
NOESY (Nuclear Overhauser Effect SpectroscopY) : version 2D de NOE COSY (COrrelated SpectroscopY) : version 2D pour corrler tous les protons coupls HetCor (Heteronulear shift Correlation) : corrlation entre les spectres RMN 13C et 1H

Liste non exhaustive