Étude Des Procédés D'extraction Et de Purification de Produits Bioactifs PDF

THSE
En vue de l'obtention du
DOCTORAT DE LUNIVERSIT DE TOULOUSE

Dlivr par Institut National Polytechnique de Toulouse Discipline ou spcialit : Gnie des Procds et de l'Environnement
Prsente et soutenue par Petko Ivanov PENCHEV Le 20/07/2010 Titre : tude des procds dextraction et de purification de produits bioactifs partir de plantes par couplage de techniques sparatives basses et hautes pressions
JURY M. Mme M. M. M. Mme BECHKOV Venko BARTH Danielle DIMITROV Krasimir CONDORET Jean-Stphane ANGELOV George CAMY Sverine Prsident Rapporteur Rapporteur Directeur de thse Directeur de thse Membre
Ecole doctorale : Mcanique, Energtique, Gnie Civil, Procds (MEGeP) Unit de recherche : Laboratoire de Gnie Chimique (Toulouse) Institut de Gnie Chimique de lAcadmie Bulgare des Sciences (Sofia, Bulgarie) Directeur(s) de Thse : CONDORET Jean-Stphane et ANGELOV George
REMERCIEMENTS
Nombreuses sont les personnes que je souhaite remercier pour mavoir aide et soutenue durant ces quatre ans.
Jadresse mes remerciements mes co-directeurs de thse, professeur George Angelov et professeur Jean-Stphane Condoret qui mont encadr pendanant ces quatre ans.
Je remercie Sverine de mavoir aid au niveau de la science.
Je voudrais remercier mon collgue et ami Pablo pour son aide au niveau de la modlisation mathmatique et pour les moments agrables passs ensemble.
Jadresse mes remerciements galement Alec et Jean-Luis pour le support technique.
Merci tous les collgues et amis de la pause-caf de mavoir fait la vie plus interssante.
Je noublie pas le support de mes parents et mes amis.
Merci vous tous ! !
SOMMAIRE
INTRODUCTION I. Bibliographie
I.1. Introduction I.2. Les antioxydants I.3. Lacide rosmarinique I.4. La mlisse I.5. Citral et caryophyllne I.6. Techniques extractives I.7.Les fluides supercritiques
I.7.1. Le domaine supercritique I.7.1.1. Gnralits I.7.1.1.1. Diagramme de phase dun corps pur I.7.1.1.2. Masse volumique autour du point critique I.7.1.1.3. Influence de la temprature sur la solubilit I.7.1.2. . Principaux fluides supercritiques I.7.1.3. Utilisation des fluides supercritiques I.7.2. Extraction par fluides supercritiques (ESC) I.7.2.1. Gnralits .7.2.2. Avantages et inconvnients I.7.2.3.Mise en uvre de lextraction supercritique I.7.2.3.1. Traitement de matrices solides I.7.2.3.2.Mlanges liquides I.7.2.4 Aspects nergtiques du procd dextraction semi-batch I.7.2.5. Choix des conditions opratoires pour lextraction I.7.2.6. Solubilit dans le CO2 supercritique I.7.2.7. Utilisation de co-solvants I.7.2.8. Applications industrielles I.7.2.9. Extraction supercritique dacide rosmarinique I.7.2.10. Modlisation mathmatique
1 5
5 6 7 10 15 16 21
21 21 22 23 24 26 27 27 27 28 29 29 31 32 33 34 35 35 36 37
I.7.2.11. Conclusion
38
I.8. Nanofiltration I.9. Schmas de couplage de diverses techniques dextraction, de prtraitement et de sparation I.10. Conclusion
39
40 42
II. Matriel et mthodes

II.1. Matire vgtale - mlisse (Melissa officinalis L.) II.2. Techniques dextraction, purification et concentration utilises
II.2.1. Extraction par CO2 supercritique (ESC) II.2.2. Soxhlet II.2.3. Extraction en mode batch (chelle laboratoire) II.2.4. Concentration des extraits par nanofiltration
46
46 48
48 50 52 53
II.2.5. Application semi-industrielle de lextraction solide-liquide dans un extracteur rotatif 54
II.3. Techniques analytiques

II.3.1. Chromatographie en phase liquide haute performance HPLC II.3.2. Chromatographie en phase gazeuse
56
56 58
III. Extractions par le CO2 supercritique

III.1. Introduction III.2. Les exprimentations III.3. Rsultats
III.3.1. Influence des paramtres opratoires sur la cintique dextraction supercritique III.3.1.1. Influence de la temprature III.3.1.2. Influence de la pression III.3.1.3. Influence de la granulomtrie III.3.1.4. Influence du dbit du CO2 III.3.2. Influence de la prsence de co-solvants dans le solvant supercritique III.3.2.1. Co-solvant thanol
63
63 63 65
65 67 70 71 74 77 77
III.3.2.2. Co-solvant eau III.3.2.3. Cintique dextraction supercritique avec du co-solvant thanol III.3.3. Influence de la gomtrie de la cellule dextraction III.3.4. Modlisation III.3.4.1. Modle t
n
83 87 88 90 91 91 92 94 94 94 95 97 97 98 98 101 101 101 103 107 108 108 109
III.3.4.1.1. Equation gnrale III.3.4.1.2. Rsultats du modle compars avec lexprience III.3.4.2. Single Sphere Model III.3.4.2.1. Hypothses gnrales du modle III.3.4.2.2. Equation gnrale III.3.4.2.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux III.3.4.3. Single Plate Model III.3.4.3.1. Hypothses gnrales du modle III.3.4.3.2. Equation gnrale III.3.4.3.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux III.3.4.4. Modle dextraction en lit fixe III.3.4.4.1. Hypothses gnrales III.3.4.4.2. Equations gnrales III.3.4.4.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux III.3.4.5. Modle de J. M. del Valle III.3.4.5.1. Hypothses gnrales du modle III.3.4.5.2. Equations gnrales III.3.4.5.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux
III.3.4.5.4. Application du modle de del Valle pour diverses configurations gomtriques 115
III.4. Extraction de lhuile essentielle de la mlisse par ESC

III.4.1 Estimation de la capacit de linstallation rcuprer le citral et le caryophyllne III.4.2. Extraction de la mlisse
117
118 120
III.5. Conclusions
124
IV. Extractions pression atmosphrique et nanofiltration

IV.1. Introduction
129
129
IV.2. Extraction Soxhlet

IV.2.1. Exprimentations IV.2.2. Rsultats IV.2.2.1. Extraction Soxhlet de la mlisse avec divers solvants IV.2.2.2. Double extraction Soxhlet IV.2.2.3. Prtraitement avec lESC IV.2.3. Conclusions
129
130 130 130 132 133 135
IV.3. Extraction en mode batch (chelle laboratoire)

IV.3.1.Dtermination de la teneur totale en acide rosmarinique dans la matire premire IV.3.2. Rsultats et discussion IV.3.2.1. Influence de la concentration des solvants IV.3.2.2. Influence de la temprature IV.3.2.3. Cintique gnrale du processus IV.3.2.4. Choix du solvant appropri IV.3.2.5. Cintique de lextraction avec le mlange thanol-eau IV.3.2.6. Hydromodule IV.3.2.7. Influence de la granulomtrie IV.3.2.8. Triple extraction IV.3.2.9. Couplage avec lESC IV.3.2.9.1. Prtraitement supercritique sans co-solvant IV.3.2.9.2. Influence de la prsence du co-solvant thanol dans ltape supercritique
136
136 136 137 138 139 140 140 143 144 145 146 146 149
IV.3.2.9.3. Influence du pr-traitement supercritique sur la cintique de lextraction conventionnelle IV.3.2.10. Modlisation IV.3.2.10.1. Hypothses de modlisation IV.3.2.10.2. Equations gnrales IV.3.2.10.3. Comparaison aux rsultats exprimentaux IV.3.3 Conclusions 153 154 154 154 156 159
IV.4. Nanofiltration
IV.4.1. Paramtres de base IV.4.2. Choix de la membrane IV.4.3. Exprimentations
160
160 161 162
IV.4.4. Rsultats IV.4.4.1. Bilan de matire de lacide rosmarinique IV.4.4.2. Rejet du compos-cible IV.4.4.3. Dtermination du flux et modlisation IV.4.4.4. Rutilisation du filtrat en tant que solvant IV.4.4.5. Conclusions
164 165 165 166 171 172
IV.5. Application semi-industrielle : extraction solide-liquide dans un extracteur rotatif

IV.5.1. Exprimentations et rsultats IV.5.1.1. Influence de la granulomtrie sur lextraction de lacide rosmarinique IV.5.1.2. Cintique de lextraction IV.5.1.3. Couplage avec lESC IV.5.1.4. Modlisation
173
173 174 175 177 178
V. Couplages des diffrentes techniques

V.1. Couplage de deux extracteurs Soxhlet V.2. Couplage de lextraction supercritique avec lextraction Soxhlet V.3. Couplage de lextraction supercritique avec lextraction batch V.4. Couplage de lextraction batch avec la nanofiltration
183
184 185 186 187
V.5. Couplage de lextraction supercritique, de lextraction batch et de la nanofiltration V.6. Couplage de lextracteur rotatif avec lextraction supercritique V.7. Conclusion 188 189 190
VI. Conclusions gnrales et perspectives Nomenclature Rfrences Annexes
193 199 205 218
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Cette thse de doctorat sest effectue en co-tutelle entre lInstitut de Gnie Chimique de lAcadmie Bulgare des Sciences et le Laboratoire de Gnie Chimique (UMR CNRS 5503) de lInstitut National Polytechnique Toulouse. Elle porte sur ltude des procds dextraction et de purification de produits bioactifs partir de plantes.
Les substances naturelles connaissent un intert croissant pour des applications dans de nombreux produits de consommation. En effet, leur utilisation est encourage car les produits quivalents issus de synthses chimiques ont, tort ou raison, mauvaise presse parmi le grand public. Les plantes reprsentent une source de principes actifs inpuisable et renouvelable, dont l'usage traditionnel et mdical est connu depuis bien longtemps. Il existe donc un besoin de production de substances bioactives isoles, concentres et purifies, pour une utilisation dans un large champ dapplication (cosmtiques, pharmaceutiques, additifs nutritionnels...), domaines dans lesquels la France est traditionnellement engage. Pour sa part, la Bulgarie est un producteur important dherbes mdecinales au niveau europen.
Les procds dextraction sont bass sur la diffrence de solubilit des composs prsents dans un mlange et dans un solvant. Nous nous intressons ici lextraction partir dun systme solide, la plante. Il existe plusieurs techniques dextraction des produits haute valeur ajoute prsents dans les plantes. Ces techniques peuvent tre dites conventionnelles (utilises depuis longtemps) et nouvelles (dveloppes plus rcemment).
Les techniques conventionnelles utilisent des solvants organiques (tels que lhexane, lactone, le mthanol, lthanol etc.) ou leau et se ralisent, en gnral, pression atmosphrique. Les nouvelles techniques utilisent des pression et/ou des tempratures leves.
Lextraction avec un fluide supercritique tel que le CO2 est une alternative lutilisation des solvants chimiques, et le CO2 a t utilis pour lextraction et la sparation des produits naturels haute valeur ajoute. Au voisinage du point critique, le pouvoir solvant est sensible aux variations de temprature et de pression. La sparation des extraits et du solvant est trs facile et se ralise tout simplement en diminuant la pression. De plus, les
INTRODUCTION
proprits de transport des fluides supercritiques (viscosit, diffusivit) permettent une pntration plus profonde dans la matrice solide des plantes et donc en gnral une extraction efficace et rapide.
La mlisse est une plante largement utilise dans la mdecine traditionnelle en raison de ses proprits sdatives, carminatives, antispasmodiques, anti-inflammatoires, antivirales et surtout antioxydantes. Ces proprits de la mlisse sont attribues principalement lacide rosmarinique. Son huile essentielle prsente une activit antibactrienne, anti-parasitique, antihistaminique et antifongique.
Ce doctorat a pour ambition scientifique l'tude des mthodes sparatives puissantes en vue de leur application couple, visant l'isolement de principes actifs issus de mlisse. Il sagit de l'extraction conventionnelle solide-liquide (tudes menes en Bulgarie et en France), l'extraction par fluide supercritique (tudes menes intgralement en France), ainsi que dautres techniques sparatives.
Chapitre I
Bibliographie
Chapitre I. Bibliographie
I. Bibliographie
I.1. Introduction
Lapplication des antioxydants naturels dans le domaine cosmtique et mme pharmaceutique est un domaine trs prometteur en plein dveloppement. Cela conduit des recherches de plus en plus nombreuses, destines diversifier les ressources de ses substances naturelles et amliorer leurs voies de rcupration et de purification.
Dans cette synthse bibliographique, nous dfinirons les substances oxydantes en gnral, puis nous dtaillerons les proprits de lun dentre eux, lacide rosmarinique, dont la rcupration fait lobjet de ce travail de thse. La mlisse, plante cultive en Bulgarie qui constituera notre source dacide rosmarinique, sera ensuite dcrite. Les mthodes dextraction de lacide rosmarinique traditionnellement utilises seront ensuite prsentes. Enfin, nous dtaillerons les raisons qui nous ont mens envisager la technique dextraction au CO2 supercritique comme mthode dextraction complmentaire aux mthodes conventionnelles, en vue du traitement de la mlisse.
-5-
I.2. Les antioxydants

Un antioxydant est une molcule qui diminue ou empche l'oxydation d'autres substances chimiques. Les antioxydants sutilisent pour rduire l'oxydation du produit auquel ils sont mlangs. Leffet des antioxydants provient de deux mcanismes : 1) Ils neutralisent les radicaux libres et empchent les ractions en chaine initialises par ces derniers. 2) Les antioxydants dtruisent les hydroperoxydes (composs intermdiaires formant des radicaux libres en interrompant la liaison O-O), diminuant ainsi la vitesse de formation de radicaux libres. [1] Loxydation des lipides reprsente un problme important pour certaines industries, puisquelle est responsable de la baisse de qualit et de la diminution de la dure de conservation des produits cosmtiques [2] et alimentaires [2-6]. Ce phnomne conduit lodeur rance des nourritures en putrfaction. Laddition des antioxydants est une solution pour protger de tels produits de loxydation [6]. Les antioxydants jouent un rle important dans le mtabolisme humain. Les ractions biochimiques qui ont lieu dans notre organisme produisent des radicaux libres initiant des ractions doxydation en chane qui ont une action nfaste sur les cellules de notre corps, en les abmant et en acclrant le processus de vieillissement. Normalement, le corps humain maintient lquilibre entre les antioxydants et les radicaux libres en produisant simultanment les deux types de substances dans le processus mtabolique. Le dsquilibre entre ces deux types de composs conduit un phnomne appel stress oxydatif. [2]. Linitiation des phnomnes de ractions doxydations en chane dans lorganisme humain peut conduire des pathologies comme l'athrosclrose [2, 3], le cancer, linfarctus, les allergies [3], les rhumatismes et dautres [2]. Les antioxydants synthtiques sont utiliss depuis de nombreuses annes. Mais, rcemment, beaucoup dtudes ont port sur la toxicit leve des antioxydants synthtiques utiliss dans lindustrie alimentaire, comme, par exemple, le butylhydroxytolune (BHT), lhydroxyanisol butyle (BHA), le tert-butylhydroquinone (TBHQ), etc. [1-8]. Le besoin de rduire lutilisation des antioxydants synthtiques (maintenant limite dans plusieurs pays en raison de leurs possibles effets indsirables sur la sant humaine) impose dorienter le march vers des antioxydants dorigine naturelle et stimule la recherche dans ce domaine [9]. Les plantes reprsentent une source trs riche et renouvelable dantioxydants naturels [1-8]. L'industrie des alicaments propose plusieurs antioxydants naturels comme additifs
-6-
alimentaires. Le dveloppement de mthodes de production de ces substances naturelles, spcialement partir de plantes, est un domaine prometteur et en pleine croissance [2]. Lacide rosmarinique, dont les proprits sont prsentes ci-dessous, reprsente un exemple dantioxydant pouvant tre une bonne alternative aux antioxydants de synthse car il est prsent dans plusieurs plantes.
I.3. Lacide rosmarinique

Lacide rosmarinique (C18H16O8) a t isol pour la premire fois ltat pur par deux chimistes italiens, Scarpati et Oriente, en 1958 [10, 11, 12]. Son nom provient du nom de la plante partir de laquelle il a t isol, le romarin (Rosmarinus Officinalis). Lacide rosmarinique (fig.I.1) est un ester de lacide cafique et de lacide 3,4-
dihydroxyphenyllactique [10-13].
Figure I.1. Structure de lacide rosmarinique
Lacide rosmarinique pur se prsente sous forme de poudre cristalline de couleur crme, sensible aux rayons UV et la lumire du jour. Dans la nature, lacide rosmarinique existe sous forme de trans-isomre, mais, expos la radiation de la lumire du jour, il se transforme en cis-isomre [14, 15]. Cest un compos polaire, qui est donc soluble dans les solvants polaires comme leau et lthanol. Ses proprits physiques sont indiques dans le tableau I.1.
Tableau I.1. Proprits physiques de lacide rosmarinique Formule brute Masse molculaire, g/mol Point de fusion, C Solubilit dans leau 25 C, g/L Solubilit dans lthanol 25 C, g/L C18H16O8 360,4 171-175 [16] > 15 [15] 25 [15]
Lacide rosmarinique est prsent dans les espces de la famille des Lamiacea [1, 3, 10, 12, 17-24, 25, 30], ainsi que dans certaines plantes de la famille des Boraginaceae [1, 10, 22, -7-
25] et des Apiaceae [25]. Le rle biologique de l'acide rosmarinique chez les plantes est la dfense contre les pathognes et les herbivores [26]. Lacide rosmarinique est intressant pour ses proprits biologiques : antiinflammatoire, antimutagne, antibactrienne [3-10, 13-24, 26-30], antivirale et surtout antioxydante [3-10, 13-24]. Une activit anti-VIH de lacide rosmarinique a galement t rapporte dans la littrature [1]. Lactivit anti-oxydante de lacide rosmarinique est due la prsence de quatre groupes hydroxyles dans sa molcule [14]. Certains extraits de plantes aromatiques contenant de lacide rosmarinique ont des applications dans les domaines alimentaire, cosmtique, pharmaceutique, dans la production des boissons, etc. [20] Les mdicaments Neurex (Smart), Persen (Lek Pharmaceuticals d.d.) ou les additifs alimentaires PAX+ (Arcopharm), Life Extension (Herb soul), ou encore le conservateur alimentaire Aquarox (Vitira) constituent quelques exemples de produits contenant lacide rosmarinique. Lacide rosmarinique constitue donc un bon exemple dantioxydant, largement rpandu dans la nature. Nous lavons donc choisi comme compos cible pour notre travail.
Lacide rosmarinique peut tre extrait de plusieurs sources vgtales : la Sauge (Salvia) [17, 19, 23, 27, 30], la Bourrache Officinale (Borago Officinalis L.) [ec.19], le Lierre (Hedera Helix L.) [11], le Romarin (Rosmarinus officinalis) [31, 32, 16, 30], la Lavande (Lavandula) [4, 17, 22], le Thym (Thymus Vulgaris L.)[17, 29], le Tilleul petites feuilles (Tilia Cordata Mill.), le Dactyle agglomr (Dactylis Glomerata L.), le Ftuque (Festuca Rubra L.), le Bromus (Bromus Inermis et Bromus Marginatus) [29], lOrigan (Origanum Vulgare)[ec.2, ec.27], le Lycope d'Europe (Lycopus Europaeus), la Brunelle commune (Prunella Vulgaris) [30], la Menthe (Mentha Piperita), lHysope (Hyssopus Officinalis L.), le Basilic (Ocimum Basilicum L.), la Sarriette (Satureja Hortensis L.) [17] . G. Janicsak et al.(1999) [18] ont tudi lextraction de lacide rosmarinique partir de 77 taxons de la famille des Lamiaceae (subfamille des Nepetoideae) ; J.L. Lamaison et al. [33] - de 52 taxons Lamiaceae (subfamille Saturejoidae) et de 24 taxons des familles Lamiacea, Boraginaceae et Apiaceae [25]. Cependant, la mlisse (Melissa Officinalis L.) est rapporte dans la littrature comme une plante contenant de lacide rosmarinique en grande quantit [7, 9, 13-15, 17, 18, 21, 2325, 29, 30]. Elle a donc t choisie comme source naturelle dacide rosmarinique. -8-
La variation du contenu en acide rosmarinique provenant de 10 plantes de la famille des Lamiacea, est prsente sur la figure I.2.[17]
Figure I.2. Contenu en acide rosmarinique de diverses espces de la famille des Lamiaceae. Sh Sarriette (Satureja hortensis L.) ; Ob Basilic (Ocimum basilicum L.) ; Mo Mlisse (Melissa officinalis L.) ; Ro Romarin (Rosmarinus officinalis L.) ; Tv Thym (Thymus vulgaris L.) ; So Sauge (Salvia officinalis L.); Om Origan (Origanum majorana L.) ; Ho Hysope (Hyssopus officinalis L.); Mp Menthe (Mentha piperita (L.) ; Hudson) ; Lo Lavande (Lavandula officinalis Chaix) [17]
Cette figure montre que la mlisse est une des plantes les plus riches en acide rosmarinique. De plus, elle est largement rpandue en Europe, ce qui justifie notre choix de la mlisse comme source dacide rosmarinique.
-9-
I.4. La mlisse (Melissa Officinalis L.)

La mlisse (fig. 3.) est une plante vivace souche longue. La tige, longue de 30 80 cm, est dresse de faon plus ou moins rameuse. Les feuilles, opposes, longuement ptioles, ovales, crneles, gaufres, sont luisantes, d'un beau vert fonc sur le dessus, plus ples en dessous. Les fleurs, blanches, qui apparaissent de juin septembre, sont disposes la base des feuilles suprieures. Le fruit, entour par un calice persistant, contient des graines luisantes brun fonc.
Figure I.3. La mlisse.
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La mlisse est rpandue dans la flore naturelle de la rgion Mditerranenne, dans l'Europe du Sud, lAfrique de Nord et lest jusquau Caucase et lIran de Nord [13, 34, 35, 36]. La mlisse est cultive en France, Allemagne, Italie, Roumanie, Bulgarie [36], Slovaquie du Sud, Moravie [13] et Amrique du Nord [36]. Le nom latin Melissa trouve ces racines dans le nom grec Meleia (du mot grec meli, melitos - miel), et provient de lattirance importante des abeilles pour cette plante. Le terme officinalis a t ajout pour la premire fois par celui qui a cr les bases du systme moderne de la nomenclature binominale, le naturaliste sudois Carl von Linn (1707 - 1778). Ce terme a t mentionn dans la pharmacope en France en 1733. Lutilisation du mot franais officine pour signifier pharmacie, laboratoire, a t documente pour la premire fois en 1812. Le nom lemon balm (mlisse en anglais) provient du citron (en raison de lodeur caractristique de cette plante) et du balsam qui signifie baume, balme [9]. Dautres noms de la mlisse connus en France sont mlisse citronnelle, citronnelle, citronne, herbe au citron, mlisse des boutiques, piment des abeilles ou des ruches, cline, ponchirade, th de France. La mlisse est connue depuis des sicles en tant que plante mdicale. Le philosophe, crivain et mdecin perse Avicenne (980 - 1037) recommandait la mlisse pour renforcer le cur. Les moines et nonnes en France ainsi que le mdecin suisse Paracelse (1493 1541) prparaient des boissons fortifiantes (toniques) appeles lixir de la vie contenant de la mlisse. Lcrivain anglais John Evelyn (1620 - 1541) a dcrit la mlisse comme une plante qui structure le cerveau, renforce la sant mentale et supprime la mlancolie [36]. Cette plante est trs utile pour le traitement des agitations nerveuses, comme somnifre [9]. Dans la mdecine traditionnelle, la mlisse est utilise sous-forme de jus, crme ou th [9] pour soigner : cphale, nervosit, troubles gastro-intestinaux [9, 14, 15, 34, 35, 37], bronchite, dpression, hystrie [9, 35], rhumatisme [9, 14], flatulence, nause, anmie, vertige, syncope, asthme, amnorrhe, insuffisance cardiaque, troubles de la conduction cardiaque, insomnie, pilepsie, psychose, ulcres, blessures [35], troubles de labdomen infrieur, migraine, faiblesse nerveuse, mal de dents, hypertension artrielle [9]. Par voie externe, (sous forme de compresse), elle est utilise contre la douleur des nerfs et le torticolis [9]. La plante contient une grande varit de composs dont les principaux, selon diverses sources, sont prsents dans le tableau I.2.
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Tableau I.2. Composs principaux de la mlisse selon diffrentes sources Composs Huile essentielle Composs flavonodes : - Cynaroside - Cosmosin - Rhamnocitrin - Isoquercitrin Drives du Luteolin Drives hydroxycinnamique Cires Strols Chlorophylles Acides phnoliques : - Acide rosmarinique - Acide protocatechuique - Acide caffeique - Acide P-hydroxbenzoque - Acide gentisique - Acide carsonique Acides de triterpene - Acide ursolique - Acide olnoique [9] [9] [9, 13-15, 17, 18, 20, 21, 24, 25, 30, 37]. [14, 17, 21] [9, 14, 17, 18, 20, 21], [17] [17] [9] Rfrence [1, 14, 13, 24, 34-38] [9, 24, 34] [9] [9] [9] [9] [24] [24] [21, 24] [21] [1, 21]
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Les proprits sdatives, carminatives, antispasmodiques, anti-inflammatoires, antivirales et surtout anti-oxydantes de la mlisse sont attribues lacide rosmarinique [1, 8, 13, 15, 14, 21, 35, 37]. La teneur en acide rosmarinique par rapport au poids sec de la plante varie de 0,5 4,75 % selon les tudes [13, 14, 15, 17, 18, 20, 21, 24, 25, 30, 37].
La quantit dhuile essentielle prsente dans la mlisse nest pas trs importante (0,02 0,32 % du poids sec de la mlisse) [1, 13, 24], mais son prix est lev [1]. Lhuile essentielle de mlisse prsente des activits antibactriennes, anti-parasitiques,
antihistaminiques et antifongiques [34]. Les composs principaux de lhuile essentielle sont le citral (reprsent par les deux stro-isomres nral et geranial), le caryophyllne et le citronellal [1, 13, 24, 34-36, 37, 38]. Dautres composs y sont prsents en petits quantits tels que germarcne D, ocimne, citronellol [24], oxyde de caryophyllne [1, 38], nral actate [38], linalol, geraniol [1]. La composition de lhuile essentielle de mlisse selon trois sources et deux diffrentes techniques dextraction (hydrodistillation et extraction au CO2 supercritique) est prsente dans le tableau I.3.
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Tableau I.3 Composition de lhuile essentielle de mlisse (exprime en pourcentage) selon diffrentes sources. Rfrence Technique [34] HydroDistillation Compos Octen-3-ol 6-methyl-hepten-2-one Trans--ocimene Linalool Para-menth-3-en-8-ol Citronellal Citronellol Nral Geraniol Geranial -Cubebne Eugnol Actate de Geranyl Caryophyllne Germacrne Actate dEugenol Oxyde de caryophyllne Actate de nral -pinne Cis--ocimne Oxyde de cis-linalool 1,3 0,3 0,5 0,9 0,2 12,9 6,2 24,5 0,7 35,3 0,2 0,1 7,1 4,9 0,2 0,1 2,7 0,35 0,3 0,56 39,47 0,63 20,40 0,18 27,84 0,58 2,37 0,67 0,11 0,1 0,39 5 33,63 47,06 1,23 3,56 N/A 2,87 3,53 21,77 23,3 61,40 63,23 6,63 - 8,47 0,9 2,63 0 1,57 [24] Hydrodistillation [38] Hydrodistillation [38] ESC
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I.5. Citral et Caryophyllne

En parallle de notre compos cible, lacide rosmarinique, lhuile essentielle de la mlisse prsente un intrt particulier pour nous. Cette huile au prix lev [1] (entre 6 et 34 /mL dans le commerce) est utilise en mdecine, en pharmacologie, en cosmtique et dans lindustrie alimentaire [34, 35]. Dans lhuile essentielle obtenue par extraction supercritique ces deux composs reprsentent plus de 90 % [38]. Le citral (ou lmonal) est un aldhyde aliphatique, liquide de couleur jaune ple avec une forte odeur de citron. Sa formule brute est C10H16O. Il est prsent sous forme de deux stro-isomres, le granial (trans) et le nral (cis) (fig. 4).
a)
b)
Figure I.4. Structure des isomres du citral : a) Nral ; b) Gneral
Le granial a une trs forte odeur de citron alors que le nral a une odeur plus douce. Le citral est insoluble dans l'eau et trs soluble dans les solvants organiques. Certaines proprits physiques du citral sont donnes dans le tableau I.IV. Le citral tant un compos aromatique, il est largement utilis dans lindustrie alimentaire (comme flaveur des nourritures, boissons, bonbons etc.) et en parfumerie pour son odeur de citron [39, 40]. Il est galement utilis pour enrichir l'huile de citron. Le citral est utilis dans la pharmacie pour la synthse des vitamines A et E, ainsi que comme carotnode [40]. Il a de fortes proprits antimicrobiennes [41], antivirales, sdatives, antifongiques. Il est aussi considr comme antitumoral [39]. Le rle du citral dans les plantes est reli son effet phromone pour les insectes [42, 43]. Le caryophyllne (ou -caryophyllne, ou encore ()-trans-caryophyllne) est un sesquiterpne bicyclique [44, 45]. Sa formule brute est C15H24. A ltat pur, cest un liquide huileux incolore jaune ple avec une forte odeur ligneuse (boise), sche, pice [46]. Il est
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insoluble dans leau et soluble dans des solvants organiques et certaines huiles [46, 47]. Quelques-unes de ses proprits physico-chimiques sont listes dans le tableau I.4. Il est utilis dans la cosmtique et la parfumerie pour ces qualits darme (fragrances) [45]. Le caryophyllne a un effet anti-inflammatoire [44, 48, 50] et antiallergique [50] et possde une activit analgsique avec des effets gastriques cytoprotectifs [44]. Cela le rend utilisable dans les domaines de la pharmacie et de la mdecine. Le caryophyllne est approuv par la FDA (U.S. Food and Drug Administration) comme additif alimentaire et est ingr quotidiennement comme additif alimentaire aux Etats-Unis.
Figure I.5. Structure du caryophyllne
Tableau I.4. Proprits physiques du citral et du caryophyllne Citral Formule brute Masse molculaire, g/mol Point dbullition, C Masse volumique, kg/m3 C10H16O 152,24 229 893 Caryophyllne C15H24 204,36 261 905,2
I.6. Techniques extractives

Le procd dextraction est bas sur la diffrence de solubilits des composs dun mlange dans un solvant. Le mlange peut tre solide ou liquide et le solvant liquide ou fluide supercritique. Dans notre travail, nous nous intressons aux procds dextraction partir dun systme solide, la plante. Il existe plusieurs techniques dextraction des produits de haute valeur ajoute prsents dans les plantes. Ces techniques peuvent tre dites conventionnelles (utilises depuis longtemps) et nouvelles (dveloppes plus rcemment) [51]. Parmi les techniques conventionnelles, on trouve lentrainement la vapeur (hydrodistillation) [24, 31, 32, 35, 38, 52], lextraction par Soxhlet [13, 29, 53 54], - 16 -
lextraction en mode batch [9, 17, 24, 27, 32] et lextraction assiste par sonication [14, 18-20 55]. Dans la catgorie techniques nouvelles on peut citer lextraction assiste par microondes (Microwave Assisted Extraction) [29, 53, 54], lextraction acclre par solvants (Accelerated Solvent Extraction) [21, 54, 56], et lextraction avec des fluides supercritiques [21, 29, 31, 32, 53-55, 87]. Il existe galement dautre techniques extractives, moins rpandues, comme, par exemple, lextraction solide-liquide moyenne pression (medium-pressure solid-liquid extraction - MSLE) dont le principe est le suivant : le solvant, aliment par une pompe, traverse sous une certaine pression (~10 bar ) une colonne remplie de matriel extraire (colonne lit fixe) [35] Lentrainement la vapeur (hydrodistillation) est une technique largement utilise pour lextraction des huiles essentielles [24]. Lavantage de cette technique rside en l'abaissement de la temprature de distillation ; les composs sont donc entrans des tempratures beaucoup plus basses que leur temprature dbullition, ce qui vite leur dcomposition [24]. Le Soxhlet est une mthode classique pour lextraction solide-liquide. Les avantages du Soxhlet sont les suivants : lchantillon entre rapidement en contact avec une portion fraiche de solvant, ce qui aide dplacer lquilibre de transfert vers le solvant. Cette mthode ne ncessite pas de filtration aprs extraction. Le Soxhlet est indpendant de la matrice vgtale. Les inconvenients les plus significatifs de cette mthode, par comparaison avec les autres techniques conventionnelles sont : la dure importante dextraction et la grande quantit de solvant consomme, ce qui conduit non seulement des pertes conomiques mais pose aussi des problmes sur le plan environnemental. Les chantillons tant ports haute temprature pendant une priode relativement longue, le risque de thermodestruction de certains composs nest pas ngliger si la matire vgtale contient des composs thermolabiles. Etant donn la grande quantit de solvant utilise, ltape postrieure dvaporation/concentration devient limitante. Des chauffements locaux sont galement possibles [53]. Cette technique est limite dun point de vue de la slectivit du solvant et nest pas facilement automatisable [51, 53, 56]. Lavantage majeur de lextraction en mode batch par agitation devant le Soxhlet est la possibilit de travailler facilement avec des mlanges de solvants (par exemple diverses proportions alcool-eau) et de contrler la temprature dextraction, en vitant le risque de
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destruction des composs thermolabiles. Cest une mthode simple et efficace mais qui exige des procdures postrieures de filtration et de concentration relativement longues [53]. Lextraction par sonication est une mthode simple, efficace et peu couteuse. Ses avantages les plus significatifs sont lis laugmentation du rendement dextraction et une acclration de la cintique par rapport une extraction classique. Elle permet de travailler des tempratures relativement basses et dviter la thermodestruction des composs. Cette technique est facile mettre en uvre. Comme le Soxhlet, lextraction par sonication permet dutiliser une large gamme de solvant afin dobtenir diffrents composs naturels. Cependant, leffet de lextraction par ultrasons sur le rendement et la cintique dextraction est li la nature de la matrice vgtale. La prsence dune phase disperse mne lattnuation des ondes ultrasonores et les zones actives dans lextracteur restent proximit de lmetteur dultrasons [56]. Cette mthode ne permet pas de renouveler le solvant pendant le processus. Ltape limitante est la filtration et le rinage aprs lextraction [58].
Lextraction assiste par microondes est galement une alternative aux mthodes dextraction conventionnelles [56]. Elle utilise de plus petites quantits de solvant, nest pas couteuse [53, 54, 56] et est considrablement rapide. Cependant, la temprature opratoire de cette technique est relativement haute (100 150 C), ce qui pose des problmes quand il sagit de lextraction dantioxydants [53, 54]. Les autres inconvnients de cette technique sont dune part le rendement faible lorsque les soluts ou les solvants sont apolaires et dautre part le besoin de ltape postrieure de filtration ou de centrifugation pour liminer le rsidu solide de lextrait [56]. Lextraction acclre par solvants (Accelerated Solvent Extraction ASE ) est une technique brevete de la socit DIONEX qui utilise les solvants conventionnels des tempratures (50 200 C) et des pressions 100 150 bar) leves. La pression est maintenue assez leve pour maintenir le solvant ltat liquide temprature leve. Pendant lASE, le solvant reste toujours en dessous de ses conditions critiques [56]. Les avantages de cette technique devant les techniques conventionnelles sont les suivants : on vite les chauffements locaux et on consomme de plus petites quantits de solvant en comparaison lextraction par Soxhlet et par batch avec agitation. Ses inconvnients sont lis sa nonslectivit, ce qui impose des procdures supplmentaires de nettoyage des extraits [54, 56]. Les tempratures opratoires leves peuvent mener une dgradation des soluts thermolabiles [56].
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Lextraction avec des fluides supercritiques est une mthode trs attractive qui mrite une attention particulire (cf. I.7.2). Les avantages de cette mthode devant les mthodes conventionnelles sont bass sur une dure dextraction plus courte, une slectivit leve et la facilit dliminer le solvant aprs lextraction par simple dcompression [58].
Ces diffrentes techniques ont t utilises pour raliser des tudes sur lextraction de lacide rosmarinique partir de mlisse. Janicsak et al. (1999) [18] ont appliqu lextraction par ultrasons avec un mlange mthanol-eau 60 : 40 %. Avec cette technique, ils ont obtenu un extrait contenant 0,44 % dacide rosmarinique par masse de matire premire. Caniova et Brandsteterova (2001) [14] ont appliqu la mme mthode avec divers solvants (60 :40 % thanol-eau ; 60 : 40% thanol-eau pH = 2,5; 60 % mthanol-eau ; 60 % mthanol-eau pH = 2,5 et eau pH 2,5). Les rsultats varient entre 1,2 et 1,7 % dacide rosmarinique par masse de matire premire. Wang et al. (2004) [20] ont obtenu par extraction aux ultrasons (solvant thanol -eau 30 :70) 2,74 % dacide rosmarinique par masse de matire premire. Toth et al. (2003) [13] ont appliqu lextraction Soxhlet avec du mthanol. Les rsultats varient entre 3,5 et 3,9 % en fonction de la phase ontognique de la plante lors de la moisson. Zgorka et Glowniak (2001) [17] ont utilis lextraction en mode batch, avec du mthanol reflux, et ont obtenu un extrait contenant 1 % dacide rosmarinique par masse de matire premire. Le contenu maximum en acide rosmarinique est gal 4,75% et a t obtenu par Fialova et al. (2008) [37] qui ont extrait de lAR en mode batch reflux avec un mlange thanol-eau 50 % . Les rsultats varient de 3,79 4,75 % selon la saison de la moisson de la plante. Carnat et al. (1998) [24] ont obtenu un extrait dacide rosmarinqiue avec de leau bouillante en mode batch et ont ainsi rcupr 4 % par masse de matire premire. Le contenu en acide rosmarinique dextrait obtenus par extraction en mode batch avec de lthanol 50% par Lamaison et al (1990)[25], Lamaison et al (1991)[30] et Lamaison et al (1991)[33] est gal respectivement 2,7, 4,7et 4,7%. Dastmalchi et al. (2008) [35] ont appliqu lextraction solide-liquide moyenne pression (medium-pressure solid-liquid extraction) avec comme solvant un mlange thanoleau, et le rendement obtenu est environ 3 % dacide rosmarinique par masse de matire premire. Ribeiro et al. (2001) [1] ont utilis lextraction au CO2 supercritique pour liminer des composs non dsirs (chlorophylle en grande quantit, vrifi spectrophotomtriquement) de la matrice vgtale. Lacide rosmarinique a t extrait ensuite, partir du rsidu supercritique - 19 -
et partir de la mlisse non-traite, par extraction en mode batch avec de leau bouillante comme solvant. Dans la plupart des cas le prtraitement supercritique amliore lextraction conventionnelle. Marongiu et al. (2004) [8] ont ralis lextraction avec du CO2 supercritique et ont limin les huiles essentielles et les composs plus lourds en deux tapes (90 bar- 50 C et 300 bar-50 C, respectivement) et ils ont obtenu des rsidus enrichis en acide rosmarinique. Le tableau I.5 prsente les rendement dextraction de lacide rosmarinique obtenus partir de mlisse par diffrentes techniques dextraction.
Tableau I.5. Quantit dacide rosmarinique extraite partir de mlisse par masse de la matire premire, rapport par diffrents auteurs Rfrence Janicsak et al. (1999) [18] Caniova et Brandsteterova (2001) [14] Wang et al. (2004) [20] Toth et al. (2003) [13] Zgorka et Glowniak (2001) [17] Lamaison et al. (1990) [25] Lamaison et al.(1991) [30] Lamaison et al.(1991) [33] Fialova et al. (2008) [37] Carnat et al. (1998) [24] Dastmalchi et al. (2008) [35] Technique Sonication Sonication Sonication Soxhlet Batch Batch Batch Batch Batch Batch MSLE Quantit dAR extraite, % 0,44 1,2-1,7 2,74 3,5 3,9 % 1% 4,7 4,7 2,4 3,79 - 4,75 4 3
Etant donn la variation du rendement selon les diverses tudes, on peut supposer que la teneur initiale en acide rosmarinique dans la matire premire nest pas identique pour tous les chantillons traits. Cependant, la tendance est dextraire plus dacide rosmarinique avec le mlange thanol-eau quavec le mlange mthanol-eau. Lextraction en mode batch et par Soxhlet est plus efficace que lextraction laide dultrasons. Le CO2 supercritique a t utilis pour prtraiter la matire premire avant lextraction conventionnelle. Cependant, linfluence des paramtres opratoires (type et concentration du solvant, temprature, taille des particules solides, hydromodule, etc.) sur la cintique dextraction de lacide rosmarinique partir de mlisse na pas t pas systmatiquement tudie. Il en est de mme pour linfluence des conditions opratoires sur le prtraitement supercritique.
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Pour la rcupration de lhuile essentielle de mlisse, deux techniques ont t utilises : lentranement la vapeur (hydrodistillation) [24, 34, 35, 38] et lextraction au CO2 supercritique [1, 38]. Le rendement de lhuile essentielle issue de lextraction supercritique est plus lev et lextrait est plus riche en composs principaux (plus de 90 % de citral et caryophyllne) que dans le cas de lhydrodistillation [38]. Pour cette raison nous avons tudi la possibilit disoler lhuile essentielle par le procd dextraction supercritique.
Dans nos tudes dextraction, nous avons utilis deux techniques conventionnelles lextraction en mode batch et lextraction Soxhlet, choisies pour leur simplicit de mise en uvre et leur efficacit, ainsi quune technique plus rcente, lextraction supercritique, dont les caractristiques vont maintenant tre dtailles.
I.7. Les fluides supercritiques

I.7.1. Le domaine supercritique I.7.1.1. Gnralits Dun point de vue physique, le phnomne supercritique peut tre expliqu de la manire suivante : lorsque deux molcules dun fluide se rapprochent une temprature telle que leur vitesse relative est faible, les forces dattraction agissent pour crer une association temporaire ces molcules. Si la masse volumique du fluide est suffisamment importante (c'est--dire si la pression est suffisamment leve), la condensation sera possible. Au contraire, si la temprature, et donc la vitesse relative, sont leves, les forces dattraction entre molcules seront trop faibles par rapport la vitesse et la condensation ne se produira pas. Ainsi, pour chaque substance, il existe une temprature appele temprature critique audessous de laquelle la condensation du liquide est possible mais au-dessus de laquelle cette transformation nest plus possible. Au-dessus de la temprature critique la substance nexiste plus en tant que liquide ou gaz, mais plutt comme un fluide. Ce phnomne a t mis en vidence exprimentalement pour la premire fois par le Baron Charles Cagniard de la Tour (1822) [49]. Le domaine supercritique est dfini quand la temprature et la pression de la substance dpassent leurs valeurs critiques. Les fluides supercritiques ont des caractristiques physico-chimiques intermdiaires entre celles des gaz et des liquides. En les comparant avec les solvants liquides, les fluides supercritiques prsentent les avantages principaux suivants:
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(1) le pouvoir solvant des fluides supercritiques est trs flexible et dpend de leur masse volumique, c.--d. quil est ajustable en modifiant la temprature et/ou la pression. (2) la tension superficielle des fluides supercritiques est trs faible, ils ont une diffusivit leve et une viscosit faible, ce qui favorise le transfert de matire et permet une pntration facile dans les pores dune matrice solide [56].
I.7.1.1.1 Diagramme de phases dun corps pur Sur le diagramme de phases dun corps pur, le point critique est dfini par sa temprature et sa pression critique et prend des valeurs particulires pour chaque substance [49]. Lexemple dun diagramme de phases (dioxyde de carbone) est prsent sur la Figure I. 6.
Figure I.6. Diagramme de phases du CO2 Sur la Figure I. 6, on distingue les zones o la substance existe sous forme de solide, de liquide ou de vapeur. Les courbes reprsentent la zone de coexistence entre deux phases. Au point triple (-56,4 C; 5,2 bar) les trois phases coexistent. Si on augmente la temprature et la pression partir du point triple, on se dplace vers le haut sur la courbe liquide-vapeur. Le liquide devient moins dense cause de lexpansion thermique et la vapeur devient plus - 22 -
dense cause de laugmentation de la pression. Finalement, au point critique, les masses volumiques des deux phases deviennent identiques, on ne distingue plus la vapeur et le liquide. Au-del de ce point les substances existent sous forme dune seule phase, le fluide supercritique.
I.7.1.1.2 Masse volumique autour du point critique Les proprits des fluides supercritiques se situent entre celles des gaz et celles des liquides lorsque la pression augmente. Ainsi en est-il par exemple de la masse volumique comme le montre la Figure I. 7, qui reprsente le cas du CO2.
Figure I. 7. Isothermes masse volumique-pression pour le CO2 Aux tempratures lgrement suprieures la temprature critique, la masse volumique varie beaucoup pour de faibles variations de pression. Aux tempratures plus leves ce changement est moins brusque et se manifeste pressions plus leves. Par consquent, il est plus difficile de bien contrler la masse volumique autour de la temprature
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critique. Les autres proprits thermodynamiques, telles que lenthalpie, varient de la mme manire [49, 59].
I.7.1.1.3. Influence de la temprature sur la solubilit La solubilit dans le CO2 supercritique change avec la temprature sous linfluence comptitive de deux phnomnes [49, 60]: la tension de vapeur du solut qui augmente avec la temprature, et le pouvoir solvant du CO2 supercritique qui diminue avec la temprature en raison de la diminution de la masse volumique du fluide. A basse temprature, la solubilit diminue lorsque la temprature augmente en raison de leffet prdominant de la diminution de masse volumique du fluide devant laugmentation de la pression vapeur du solut. Au-del dune certaine temprature, le dernier effet devient prdominant, la solubilit passe par un minimum, puis augmente avec la temprature. La temprature solubilit minimale est plus leve pression plus faible. La figure I. 8, qui concerne un mlange modle naphtalne-CO2, en reprsente un exemple : une faible pression, le pouvoir solvant du CO2 dcroit lorsque la temprature augmente. Par contre, pression leve, la solubilit augmente avec la temprature.
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Figure I.8. Solubilit du naphtalne dans le CO2 en fonction de la temprature, daprs [61] Il est souvent plus commode dexprimer la solubilit dun compos dans un fluide supercritique en fonction de la masse volumique de ce dernier. Un tel exemple est prsent sur la Figure I. 9.
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Figure I.9. Solubilit du naphtalne dans le CO2 en fonction de la masse volumique du CO2, daprs [61] Cette figure met en vidence, dune part, laugmentation du pouvoir solvant dun fluide supercritique avec la masse volumique une temprature donne et, dautre part, laugmentation du pouvoir solvant dun fluide supercritique avec la temprature une masse volumique donne.
I.7.1.2. Principaux fluides supercritiques Au cours des dernires annes, les proprits de beaucoup de fluides supercritiques ont t tudies. Parmi eux, le CO2 est le fluide supercritique prsentant les proprits les plus satisfaisantes : il est peu couteux et disponible une puret leve, sa pression (74 bar) et sa temprature (31C) critiques sont relativement faciles atteindre, il est inerte, noninflammable et non-toxique, et en dehors des applications radioactives il est chimiquement stable [38, 49, 56]. Cependant, le CO2 na pas de moment dipolaire permanent et sa polarit est comparable celles du pentane ou de lhexane liquides [38, 49, 54]. Cela en fait un bon solvant pour les composs apolaires mais pas pour les composs polaires. Un fluide alternatif est le monoxyde dazote, N2O, dont le moment dipolaire est lgrement plus lev (0,17 D). Les inconvnients du N2O sont le risque doxydation et dexplosion en prsence de composs organiques [54]. Lutilisation dautres fluides supercritiques est galement limite en raison des risques vis--vis de lenvironnement et/ou pour leurs tempratures et pressions critiques
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leves. Il sagit de composs de moment dipolaire lev comme le Freon-22, le Fron-23, le mthanol [54, 56] ou lhexane [56]. Leau supercritique [49, 56], subcritique ou surchauffe [49, 54, 56] est un trs bon solvant pour les composs polaires mais sa temprature et pression critiques sont relativement leves, ce qui la rend inadapte pour le traitement de composs thermolabiles. De plus, elle est trs corrosive en prsence doxygne [49, 54, 56]. Les proprits physiques et les moments dipolaires de quelques fluides sont prsents dans le tableau I.6. Dautres substances utilises comme fluides supercritiques sont le dimthyl ther [26], le propane, le mthane, le fluoroforme, lthylne, lthane etc. [62].
Tableau I.6. Coordonnes critiques et moment dipolaire de certains fluides supercritiques [54] Fluide CO2 H2O N2O Freon-22 (CHClF2) Freon-23 (CHF3) Mthanol Temprature critique, C 31,1 374,1 36,5 96 25,9 240 Pression critique, bar 74 221,1 72,6 49,1 47,5 79,5 Moment dipolaire, D 0 1,85 0,17 1,29 1,65 1,7
I.7.1.3. Utilisation des fluides supercritiques Dans les trente dernires annes les fluides supercritiques ont t utiliss en tant que solvants dans divers procds : la micronisation haute pression, la chromatographie [26, 63] et pour des ractions chimiques et biochimiques [26, 31]. Cependant, leur application la plus rpandue et la plus dveloppe lchelle industrielle concerne les procds dextraction [49, 59], que nous allons dcrire plus en dtails dans le paragraphe suivant.
I.7.2. Extraction par fluides supercritiques (ESC) I.7.2.1. Gnralits Le dveloppement de nouvelles technologies de sparation dans lindustrie chimique, pharmaceutique, cosmtique et alimentaire est li aux exigences pour la protection de lenvironnement, la sant publique et au besoin de minimiser la consommation nergtique des procds. Par exemple, lutilisation des solvants organiques pour le traitement des matires vgtales est soumise des restrictions de plus en plus fortes, en particulier depuis la mise en uvre de la directive REACH, visant assurer un niveau lev de protection de la
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sant humaine et de lenvironnement, contre les risques que peuvent poser les produits chimiques. Ces restrictions sont particulirement importantes dans le domaine de lindustrie alimentaire, pour laquelle il devient urgent de proposer des substances alternatives aux solvants organiques traditionnellement utiliss dans les procds dextraction ou de purification de la matire vgtale. Lextraction par fluide supercritique et plus particulirement par le CO2 supercritique a t introduite comme alternative ces procds dextraction par solvants [2].
Le phnomne au cours duquel une molcule (solut) ou un groupe de molcules transfre vers la phase supercritique, peut tre prsent, dune part, comme une vaporisation, puisque la molcule en question passe de la phase condense vers une phase plus expanse (le solvant supercritique). Dautre part, ce phnomne peut aussi tre considr comme une dissolution car une interaction solutsolvant apparat. Les phnomnes de
vaporisation/dissolution caractrisent la nature intermdiaire de ltat supercritique. Pour comprendre le comportement solutsolvant, il est ncessaire de connatre la masse volumique du solvant et linteraction entre le solvant et les divers composs qui composent la phase solide [32].
I.7.2.2. Avantages et inconvnients Les plus grands avantages des fluides supercritiques apparaissent au voisinage de sa temprature et pression critiques, car leur masse volumique et donc leur pouvoir solvant sont trs flexibles, ce qui peut offrir une grande slectivit [49, 56]. Cependant, ils sont aussi trs utiliss aux pressions beaucoup plus leves, puisque le pouvoir solvant augmente avec la pression [32, 56, 60, 8, 65, 66, 68]. Les fluides supercritiques sont des solvants puissants avec des proprits uniques. Ils ont un potentiel important dapplication dans un grand nombre de procds dextraction [62]. Les avantages les plus importants de lextraction au CO2 supercritique par rapport lextraction conventionnelle sont les suivants : (1) Les proprits dj mentionnes des fluides supercritiques : sa diffusivit leve, sa viscosit faible [38, 49, 56], et sa tension de surface faible [38, 56], (2) Cest un procd flexible dans lequel il est possible de contrler le pouvoir solvant et donc la slectivit du fluide supercritique en modifiant les conditions de temprature et de pression. (3) Lextraction supercritique est gnralement plus rapide. - 28 -
(4) La temprature critique est relativement basse (31 C) [49, 56, 60], ce qui permet d'viter la thermodestruction ventuelle des composs, de minimiser les risques dhydrolyse et disomrisation des produits [38]. (5) Cette mthode permet dliminer des manipulations postrieures coteuses de purification de lextrait par limination des solvants car il suffit tout simplement de baisser la pression pour liminer le solvant. On vite aussi lutilisation deau [38] ou de solvants organiques polluants. Cest donc un procd non-toxique. (6) Le CO2 est facilement disponible. Il est produit en grande quantit comme sousproduit de la fermentation, combustion, la synthse dammoniac etc. Il est mis dans latmosphre sil nest pas utilis comme fluide supercritique [1, 49]. Ces procds nont donc pas dimpact ngatif supplmentaire en tant que gaz effet de serre.[1].
Les inconvnients majeurs de lextraction supercritique concernent surtout laspect conomique, car ces procds sont considrs comme plus coteux en investissement que les procds dextraction traditionnels [56]. Cette technologie exige une consommation dnergie non-ngligeable pour tablir les pressions et les tempratures pendant les diffrentes tapes dextraction (extraction, sparation et recyclage du solvant).
I.7.2.3.Mise en uvre de lextraction supercritique Dans la plupart des cas la matire premire se prsente sous forme solide. Cependant, dans certains cas, comme par exemple un procd de dsolvantisation dhuile essentielle obtenue grce un procd dextraction traditionnel, la matire traiter est sous forme liquide. Suivant ltat de la matire traiter, le procd sera diffrent [64], comme nous allons le voir maintenant.
I.7.2.3.1. Traitement de matrices solides Lextraction supercritique partir de matrices solides peut tre mene en mode batch ou en mode semi-batch. En mode batch, la matire premire est dispose dans lextracteur et le solvant supercritique est introduit jusqu ce que les conditions opratoires souhaites soient atteintes. Le contact entre la matrice et le solvant est maintenu pendant un temps relativement long (plusieurs heures) afin datteindre la composition lquilibre. Dans ce type de fonctionnement, il faut viter les variations locales de temprature et de pression.
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Cette approche est similaire la mthode analytique qui sert gnralement mesurer la solubilit dun solut dans un fluide supercritique, mais elle peut tre limite par laffinit ventuelle du solut avec la matrice solide. La force motrice du procd est plutt gale la concentration lquilibre des soluts entre la phase solide et le fluide, qu la solubilit du compos pur dans la phase fluide. De plus, plusieurs soluts peuvent tre extraits simultanment, il faut donc faire lhypothse que les soluts ninfluent pas lun sur lautre. Enfin, si on ne peut pas extraire toute la quantit du solut, lchantillon de la phase fluide ne nous fournit pas dinformation sur le contenu total de ce compos dans la matrice.
Le procd en mode semi-batch est le plus largement utilis. La matire premire est dans ce cas place dans lextracteur sous forme dun lit fixe de particules. Le solvant supercritique est introduit en continu par une pompe haute pression et le dbit est maintenu constant. Un ou plusieurs tages de sparation peuvent tre utiliss dans ce schma afin de sparer les soluts de la solution supercritique. Ces systmes utilisent des extracteurs de volume allant de 10 200 cm3 lchelle laboratoire et jusqu 5 L environ l chelle pilote[64]. Dans ces systmes, le solvant est en gnral recycl. Dans ce cas, la pression et la temprature dans le dernier sparateur doivent tre maintenues des valeurs telles que le solvant gazeux qui en est issu puisse tre liqufi dans le condenseur. Plusieurs procdures de sparation solut-solvant ont t mises en uvre, en commenant par le cas le plus simple, la sparation en une tape. La sparation en plusieurs tapes peut tre conduite lorsque la masse volumique du solvant ltape dextraction est leve. Il est aussi possible de sparer une partie des soluts en modifiant la temprature plutt que la pression. Le choix des conditions opratoires appropries pour les tapes de sparation peut conditionner la russite du procd de rcupration. Le principe du procd dextraction en mode semi-batch suivie de la sparation solut(s)-solvant par dtentes multi-tage avec recyclage du CO2 est schmatis sur la figure I.10.
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extracteur
S1
S2
S3
CO2
rchauffage
condensation
Figure I.10 Reprsentation schmatique dun procd semi-batch dextraction supercritique avec dtente multi-tage et recyclage du solvant
Mme si la sparation fractionne a t utilise principalement lchelle laboratoire, ce mode de sparation des soluts pourrait mis en uvre lchelle industrielle.
I.7.2.3.2.Mlanges liquides Dans le cas des mlanges liquides, le fractionnement peut seffectuer en mode semibatch ou en continu. Le mode semi-batch peut tre mis en uvre en adsorbant le matriel sur un support qui retient slectivement les divers composs de la matrice liquide. Les dispositifs dextraction semi-batch utiliss pour lextraction partir de matrices solides, peuvent alors tre utiliss pour raliser une dsorption fractionne du liquide. Lautre possibilit consiste raliser un fractionnement en mode continu en utilisant une colonne de sparation contre-courant fonctionnant haute pression. Dans ce type de procds, le mlange liquide est introduit en tte de colonne et le solvant supercritique est introduit en pied, de manire circuler contre-courant. Deux fractions liquides sont collectes : la fraction lgre au sommet de la colonne et la fraction lourde en pied. Les paramtres du procd choisir sont : la pression, la temprature ou le profil de la temprature (pour ventuellement crer un reflux interne), le type de garnissage de la colonne, le rapport hauteur/diamtre, le taux de reflux [64]. Dans ce type de procd, le solvant peut tre recycl aprs rcupration du solut par dcompression.
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I.7.2.4 Aspects nergtiques du procd dextraction semi-batch Le comportement de lenthalpie et de lentropie des fluides supercritiques peut tre prsent sur lexemple de lextraction au CO2 supercritique avec recyclage issu de la rfrence [49]. Le processus est schmatis sur la figure I.11. Afin de bien illustrer la situation, on suppose que les proprits du fluide restent gales celles du CO2 pur dans tout le procd.
Figure I.11. Diagramme schmatique du processus dextraction supercritique [49]
Le point A correspond au moment o le CO2 se trouve dans le condenseur une temprature gale -3 C et une pression gale 40 bar. Ensuite, il est comprim jusqu 200 bar au point B, rchauff jusqu 47 C et introduit dans lextracteur (point C) o le processus dextraction a lieu. Aprs extraction, le CO2 est dtendu jusqu 40 bar dans le sparateur (point D) tout en tant chauff pour rester ltat gazeux (la temprature reste ainsi gale 47 C). Le CO2 est ensuite refroidi puis renvoy au point A pour tre recycl. La compression dun liquide pouvant tre considre comme adiabatique et rversible, lentropie du CO2 entre le point A et le point B reste pratiquement constante et gale 136 J.mol-1K-1. La temprature du CO2 augmente de 10 C, an raison du travail de compression qui a t fourni. Au point A, -3 C et 40 bar, lenthalpie est gale 21,7 kJ.mol-1 tandis qu 7 C et 200 bar, elle est lgrement suprieure et gale 22,4 kJ.mol-1. La diffrence de 0,7 kJ.mol-1 correspond au travail ncessaire pour comprimer le CO2 liquide de 40 200 bar. Au
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point B le CO2 le CO2 doit tre vaporis pour devenir supercritique. Cette opration requiert 3,8 kJ.mol-1 lchangeur de chaleur. Aprs lextraction, le CO2 est dtendu et chauff, ce qui ncessite 8,6 kJ.mol-1. Cest cette tape qui ncessite lapport nergtique sous forme dnergie thermique le plus important, du fait du changement important des proprits du fluide, qui va passer de ltat liquide ltat vapeur entre les points C et D. Afin de condenser nouveau le CO2 jusqu 40 bar, lenthalpie doit tre rduite jusqu sa valeur au point A. Entre ces tapes, 13,1 kJ.mol-1 doivent donc tre retires au fluide dans lchangeur entre le point D et A. La quantit totale dnergie retire au niveau de cet changeur doit tre gale lnergie totale fournie au systme pour la compression et le rchauffement entre les points A et D [49].
I.7.2.5. Choix des conditions opratoires pour lextraction Le choix des conditions opratoires pour lextraction de matrices solides dpend du compos ou du groupe de composs soumis lextraction. Il est ncessaire de toujours tenir compte de la masse molaire et de la polarit du constituant extraire. Cependant, quelques rgles gnrales peuvent tre appliques [60] : Si lon extrait des composs thermolabiles, la temprature doit tre maintenue dans la gamme de 35 60 C, c..d. suprieure la pression critique du CO2 et la plus basse possible afin dviter la thermodestruction. Pour une pression fixe, nous avons vu plus haut que linfluence de la temprature sur la solubilit des composs dans un fluide supercritique tait relativement complexe et difficile prdire priori. Aussi, le paramtre le plus significatif pour le procd est la pression. Elle peut tre utilise pour ajuster la slectivit de lextraction supercritique. La rgle gnrale est la suivante : une pression leve conduit une capacit solvant plus leve mais, en mme temps, la slectivit diminue. Souvent, la capacit solvant aux conditions opratoires donnes est dcrite en fonction de la masse volumique du CO2, qui dpend de la temprature et de la pression. Les autres paramtres importants de lextraction supercritique sont le dbit de CO2, la taille des particules, la dure dextraction, et ventuellement le pr-traitement de la matire premire. Le choix appropri de ces paramtres permet deffectuer lextraction complte dun compos en un temps le plus court possible. Ces paramtres sont relis la thermodynamique (la solubilit) et au transfert de matire. Le choix des conditions opratoires est totalement dpendant du mcanisme qui contrle lextraction : le plus lent parmi eux dtermine la vitesse totale du processus. Le dbit de CO2 est un paramtre significatif si le processus est contrl - 33 -
par la rsistance au transfert de matire externe ou par la solubilit du solut dans le solvant. Dans ce cas, la vitesse dextraction est dtermine par la quantit de CO2 introduite dans lextracteur. La taille des particules joue un rle dterminant si le procd est contrl par la rsistance au transfert de matire interne. Une petite taille de particules diminue la dure de la diffusion du solvant au sein des particules. Cependant, si les particules sont trop petites, des problmes de passages prfrentiels (canalisations) du solvant peuvent apparaitre. Dans ce cas, une partie du solvant peut circuler par des canaux forms dans le lit dextraction sans entrer en contact avec les soluts. La dure dextraction est gnralement relie au dbit de CO2 et la taille des particules et doit tre minimise afin dobtenir le rendement maximal dextraction.
I.7.2.6. Solubilit dans le CO2 supercritique La connaissance de la solubilit du compos cible dans le solvant ainsi que celle des composs non-dsirs dont la co-extraction doit tre vite est une information fondamentale dans le domaine de lextraction supercritique. Cette information est autant plus utile quand il sagit de lextraction de flaveurs ou de fragrances [64]. Les matrices vgtales contiennent beaucoup de composs lipophiles qui sont facilement extractibles avec du CO2 supercritique. La connaissance de la solubilit de ces composs va donc permettre de slectionner la pression et la temprature dextraction. Elle donne aussi certaines informations sur les conditions de sparation, en particulier dans le cas o une sparation en plusieurs tapes est envisage. Les donns de solubilit doivent gnralement tre obtenues exprimentalement car il est souvent difficile de les obtenir par des calculs prdictifs. Les donnes de solubilit sont obtenues par diverses mthodes exprimentales, les plus largement utilises tant les mthodes statistique-analytique, statistique-synthtique et dynamique. Dans le cas des mthodes statistiques, le compos est plac dans un volume ferm et les conditions dquilibre sont obtenues en attendant un temps assez long. Dans le cas de la mthode dynamique le solvant supercritique passe au travers du solut. Le temps de contact tabli dans le systme est suffisamment long pour que les conditions proches de lquilibre soient obtenues. La diffrence principale entre la mthode analytique et la mthode synthtique est que pour cette dernire, lquilibre, des petits chantillons des deux phases sont retirs et la quantit rcupre dans la phase condense est mesure en pesant les flacons des chantillons. Dans le cadre de la mthode synthtique, on ne prlve pas dchantillons et la dtection de la
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transition des phases est obtenue par observation visuelle du phnomne lintrieur de la cellule dquilibre.
I.7.2.7. Utilisation de co-solvants Comme cela a t dit plus haut, la polarit du CO2 est intermdiaire entre celle dun solvant non-polaire comme lhexane et dun solvant faiblement polaire [26, 59, 65, 69, 70]. Le CO2 est alors trs bon solvant pour des molcules apolaires mais un mauvais solvant bon pour des molcules polaires. Cependant, la polarit du solvant peut tre augmente en ajoutant des co-solvants polaires au CO2 [49]. Le rsultat est une amlioration de laffinit et du pouvoir solvant par rapport aux molcules polaires. Les co-solvants gnralement utiliss sont le mthanol [49, 66], lthanol [53, 68], leau ou des huiles vgtales [68]. Ces trois derniers sont non-toxiques et donc plus intressants. Des tests avec de lacide caprylique et de lester mthylique de lacide caprylique pour lextraction dantioxydants partir de l'herbe aux bisons (Hierochlo odorata) ont montr quils sont moins efficaces que lthanol, et que, par ailleurs, leur limination de lextrait est difficile [53]. Par contre, les hydrocarbures aliphatiques diminuent la polarit du solvant CO2 [49]. Au-del de la polarit, les co-solvants peuvent permettre de modifier dautres caractristiques des solvants. Par exemple, dans le cas du CO2, le tolune peut lui tre ajout pour lui transmettre de laromaticit [49], le (R)-butan-2-ol pour ajouter de la chiralit [49] et le phosphate de tributyle, pour augmenter la solvatation des complexes mtalliques [49].
I.7.2.8. Applications industrielles Une large gamme de rsultats exprimentaux de lextraction grce aux fluides supercritiques est disponible aujourdhui. Lextraction partir de matire vgtale naturelle est lapplication la plus rpandue. Le plus souvent, les vgtaux sont traits afin datteindre deux objectifs : produire des extraits naturels sans usage de solvants organiques, ou bien laver la matire premire et liminer des composs non-dsirs, afin de faciliter ensuite lextraction conventionnelle [1, 26, 8, 71.]. La plupart des tudes portant sur lextraction supercritique a t ralise sur des installations lchelle laboratoire [1, 2, 26, 32, 38, 52, 53, 56, 8, 70, 72-75] ou lchelle pilote [31, 69, 76-78]. Malgr labondance des produits quil est possible dobtenir grce cette technique, seule une petite partie est aujourdhui produite lchelle industrielle : extraction dpices (Inde, Allemagne), dcafination du caf et du th (Allemagne, EtatsUnis, Italie), extraction du houblon pour la brasserie (Europe) (figure I.12.), uf liquide - 35 -
dgraiss (Chine), nettoyage du riz pour limination de pesticides (Taiwan), limination de lacide trichloractique (TCA) des bouchons de lige (Espagne) [71]. Pourtant, dautres applications industrielles paraissent galement intressantes, en particulier pour lextraction/isolement des huiles essentielles, lextraction dhuiles vgtales, lextraction des alicaments et mdicaments etc. [56, 60]
Figure I.12. Application industrielle pour lextraction supercritique du houblon (Pologne) Source M. Perrut SEPAREX
I.7.2.9. Extraction supercritique dacide rosmarinique Des composs antioxydants ont t extraits partir des plantes, comme par exemple, la coriandre (Coriandrum sativum) [2], lherbe aux bisons (Hierochloe odorata) [53], l'origan (Origanum vulgare), [77] etc Dans les schmas dextraction supercritique de la mlisse [1] et des autres plantes de la mme famille (par exemple le romarin [26, 72]), la substance qui prsente lactivit antioxydante, notamment lacide rosmarinique, reste dans le rsidu supercritique. Certains antioxydants moins actifs passent dans les extraits supercritiques ([32, 63, 73]), comme par exemple lacide carnosique dans le cas du romarin, ou le squalne et l-tocopherol (vitamine E) dans le cas de la mlisse.
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Il y a peu dinformation sur lextraction supercritique de la mlisse et aucune tude approfondie systmatique sur loptimisation des conditions opratoires et sur le couplage avec dautres techniques sparatives.
I.7.2.10. Modlisation mathmatique La modlisation mathmatique est une approche rationnelle ouvrant la possibilit danalyser les rsultats exprimentaux et, si elle est russit, dobtenir par simulation des indications pour des systmes diffrents des systmes exprimentaux. La modlisation est galement utile en cas de passage de lchelle laboratoire une chelle plus grande (pilote ou industrielle). Tout cela rend la modlisation mathmatique intressante, ce qui, dans le cas de lextraction supercritique se reflte aux travers des nombreuses tentatives prsentes dans la littrature [39, 60, 67, 76, 79-83 89, 90]. Lorsquon applique un modle mathmatique un procd dextraction supercritique partir de vgtaux, il faut tenir compte de certains aspects gnraux : a) Laspect botanique et/ou les structures macroscopiques de la matire vgtale (peuvent tre visualises par microscopie optique ou par microscopie lectronique balayage MEB (SEM, abrviation anglaise pour Scanning Electron Microscopy)). b) Lemplacement du solut extraire. La substance extractible peut tre libre la surface du solide ou ferme dans la structure de la matrice vgtale. En gnral, si le solut est libre, le processus est contrl soit par la solubilit du solut dans le solvant soit par la rsistance au transfert de matire externe. Dautre part, si le solut est ferm dans la structure, cest la rsistance au transfert de matire interne qui limite le processus dextraction. c) Les interactions des soluts avec la matrice vgtale. Selon ces interactions, divers quilibres peuvent avoir lieu. Sil ny a pas dinteraction entre le solide et le solut, un quilibre bas sur la solubilit aurait lieu. En cas dadsorption du solut lextrieur ou/et a lintrieur du solide, lquilibre de partition entre la phase fluide et solide doit tre pris en compte. d) Les cellules casses ou intactes. Dans le cas des cellules casses, une quantit de solut peut tre plus facilement disponible au solvant cause de la destruction des parois des cellules pendant le prtraitement de la matire premire. Dans ce cas une partie considrable du solut se trouve la surface des particules. Dans le cas de cellules intactes, le solut est enferm dans les cellules et son contact avec le solvant est beaucoup plus difficile.
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e) La forme des particules. Les particules peuvent tre sphriques, plates, cylindriques etc. en fonction de la forme de la matire vgtale (par exemple, grain, feuilles, tiges etc.). La forme peut influencer la diffusion du solvant supercritique. Pour modliser les mcanismes dextraction, dautres considrations sont ncessaires. Lextraction peut tre contrle par lquilibre si le solut est largement disponible et est distribu sur ou proche de la surface. Le type dquilibre dpend de linteraction (si elle existe) avec le solide. La rsistance au transfert de matire peut tre, en gnral, de deux types : externe ou interne. Afin de prendre en compte la rsistance au transfert de masse, lintgration du bilan diffrentiel du transfert de masse doit tre appliqu [60].En gnral, trois approches diffrentes sont appliques la modlisation de lextraction supercritique : (1) empirique ; (2) base sur lanalogie avec le transfert de matire et de la chaleur ; (3) intgration du bilan diffrentiel de transfert de masse [60, 89]. Lanalyse le plus complte est obtenue par lintgration du bilan diffrentiel du transfert de masse. Dans ce cas des profils de concentration sont obtenus pour la phase fluide et solide en fonction du temps. La courbe dextraction est calcule partir de la concentration dans la phase fluide la sortie de lextracteur. Certains modles mathmatiques utiliss dans ce travail seront dcrits plus en dtails dans la partie de ce mmoire de thse relative aux rsultats (III.4).
I.7.2.11. Conclusion En ce qui concerne lutilisation de lextraction au CO2 supercritique, trois
applications majeures peuvent tre distingues : lextraction dhuiles vgtales, lextraction de composs haute valeur ajoute et daromes pour les besoins de lindustrie alimentaire, cosmtique et pharmaceutique et llimination de composs non-dsirs de la matrice vgtale en vue dune extraction conventionnelle. Lextraction supercritique est donc une mthode dextraction et purification puissante, que nous allons mettre en uvre dans lobjectif dobtenir de lacide rosmarinique partir de la mlisse. Dans un objectif de comprhension des mcanismes mis en jeu, et en vue dun ventuel changement dchelle, nous allons utiliser diffrents modles mathmatiques et slectionner celui qui dcrit le mieux notre systme. Le choix dun modle mathmatique appropri nous permettra de simuler le comportement de lextraction pour diffrentes conditions opratoires et identifier les paramtres caractrisant le processus de transfert de - 38 -
matire partir de donnes exprimentales. Les rsultats et linformation reue vont faciliter le choix de modles pour des systmes extractifs similaires et seront utiles au transfert du procd de lchelle laboratoire lchelle industrielle.
I.8. Nanofiltration
Le domaine des oprations de sparation par membranes est interdisciplinaire. Il comprend la science et le gnie des matriaux, la synthse chimique et la caractrisation de matriaux membranaires, la fabrication et la modification des membranes, le gnie des procds, l'intgration des procds membranaires dans les procds industriels, ainsi que les aspects conomique, cologique, et de scurit etc. En gnral, la slectivit des membranes est base sur la taille des pores et il est vident que les pores plus petits retiendront les particules plus petites. Il existe plusieurs procds pour les sparations au niveau molculaire. Parmi eux nous allons regarder plus en dtails la nanofiltration, qui va tre mise en uvre dans ce travail dans un objectif de concentration des extraits. Une nanomembrane spare des substances en fonction de leur masse molculaire lie la taille de la molcule. Une telle membrane laisse passer le solvant et les substances ayant une masse molculaire plus faible que celle du compos-cible en retenant ce dernier et des substances de masse molculaire plus leve. La force motrice est la diffrence de pression des deux cots de la membrane. Le terme nanofiltration a t utilis pour la premire fois en 1984 pendant le Filmtech meeting. A cette poque il na pas t encore bien dfini. En 1996, la nomenclature UICPA (IUPAC) a distingu ce processus en fonction de la taille du solut retenu. La nanofiltration est dfinie comme un procd membranaire retenant des soluts de taille infrieure 2 nm. Ainsi est-elle situe entre le procd dosmose inverse (o ce nest que le solvant qui passe travers la membrane) et le procd dultrafiltration (o les soluts entre 2 nm et 0,1 m sont retenus) [84]. Dans le cas de la nanofiltration, le transfert de matire travers la membrane est une combinaison de deux mcanismes la diffusion (loi de Fick) due la diffrence de concentration et le tamisage poreux (pore sieve separation) (loi de Poiseuille) [85]. La filtration par nanomembranes reprsente donc une mthode de sparation de composs en solution en fonction de leur masse molculaire [85]. Ce procd trouve aujourdhui des applications pharmaceutiques et biologiques o beaucoup de composs sont spars par cette technique. [86].
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I.9. Schmas de couplage de diverses techniques dextraction, de prtraitement et de sparation

Divers schmas de couplage de techniques dextraction, prtraitement et sparation sont rapports dans la littrature. Afin dobtenir des produits riches en antioxydants, lextraction supercritique a t utilise pour nettoyer des extraits conventionnels du romarin en les concentrant ainsi en acide rosmarinique [26] ou en autres antioxydants [31]. Dans ces tudes deux solvants supercritiques ont t utiliss le CO2 et lther de dimthyle. Dans le cas du dioxyde de carbone, le produit concentr en antioxydants a t le rsidu supercritique [26, 31], tandis que dans le cas de lther de dimthyle, lextrait supercritique est le produit riche en compos cible [26]. Ribeiro et al. (2001) [1] ont utilis le rsidu de lextraction supercritique partir de la mlisse comme matire premire de lextraction conventionnelle avec de leau bouillante. Le produit final de ce schma est plus riche en antioxydants. Un schma similaire est rapport Hodulin et al [26]. Marongiu et al. (2004) [8] ont effectu une double extraction avec du CO2 supercritique. Ils ont travaill dabord basse pression, puis ont ralis un traitement haute pression. Pendant la premire tape ils ont extrait lhuile essentielle. Lextrait haute pression est enrichi en composs de masse molculaire leve. Afin disoler des antioxydants partir de lherbe aux bisons (Hierochlo odorata), Grigonis et al. [53] utilisent trois techniques une ou deux tapes selon les schmas prsents sur la figure I. 13
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Figure I.13. Schmas dutilisation des diverses techniques dextraction [53] : extraction Soxhlet, extraction assiste par microondes (MAE) et extraction au CO2 supercritique (SFE)
Selon cette tude, en travaillant en une tape il ny a pas de diffrence remarquable entre les rsultats obtenus par les trois techniques. De plus, aucune des mthodes ne donne des rsultats satisfaisants et on doit appliquer les schmas deux tapes. Le Soxhlet donne les meilleurs rsultats, mais selon les auteurs, cette technique nest pas toujours acceptable lchelle industrielle du fait de la dure leve de lextraction, de la consommation leve de solvants dangereux etc. Lalternative propose est lextraction supercritique avec le deuxime meilleur rsultat. Lextraction assiste par microondes est plus rapide, mais elle ncessite du temps supplmentaire pour refroidir lextrait, ce qui aboutit une dure totale du procd plus leve. En dveloppant une mthode automatise rapide pour lidentification des antioxydants dans le romarin, Tena et Valcarcel (1997) [55] ont appliqu lextraction supercritique ou lextraction assiste par sonication la matire premire prtraite par broyage ordinaire et tamisage, et par broyage en prsence dazote liquide. On constate que 1) les rsultats obtenus par le broyage conventionnel sont meilleurs 2) les rsultats de lextraction supercritique sont meilleurs par rapport ceux obtenus par sonication. Un couplage de lextraction en mode batch et de pr-concentration avec membrane liquide est rapport Boyadzhiev et Dimitrova [15] qui ont mis en uvre ce couplage pour traiter des extraits aqueux dacide rosmarinique obtenus partir de mlisse. Les rsultats sont
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prometteurs, mais le procd est relativement compliqu, exigeant en particulier un bon contrle et ajustement du pH. Une combinaison intressante est le couplage de lextraction par CO2 supercritique avec la nanofiltration [87]. Lide est dutiliser la pression dans des sparateurs comme force motrice pour la nanofiltration. Wang et Waller (2006) [81] proposent des systmes innovants tels que des extracteurs intgrant, par exemple, la haute pression ou lnergie des microondes avec lextracteur Soxhlet, ce qui amnerait des nouveaux modles de Soxhlet haute pression ou assists par microondes. Le CO2 supercritique pourrait aussi tre intgr dans un appareil avec le Soxhlet. Lutilisation dultrasons combine avec lextraction supercritique pourrait augmenter le transfert de matire, etc.
I.10. Conclusion
Nous avons effectu cette tude bibliographique afin dvaluer ltat de lart ainsi que les tendances concernant les domaines couverts par notre tude : les antioxydants dorigine naturelle, les sources, les techniques dextraction et de sparation et leur couplage. On constate que, souvent, les antioxydants synthtiques sont considrs comme toxiques, ce qui impose lorientation du march vers des antioxydants dorigine naturelle. Cette recherche bibliographie nous a aid choisir lacide rosmarinique comme compos cible. Le choix est justifi par le fait que cette substance de forte activit antioxydante est prsente en grande quantit dans certaines plantes. Une des sources naturelles les plus riches de cet antioxydant - la mlisse, a t choisie comme matire premire pour tudier les processus disolation de lacide rosmarinique. Etant donne la valeur ajoute leve de lhuile essentielle de mlisse, ltude sur les conditions de sa sparation reprsente un intrt supplmentaire. Il nexiste pas dtudes systmatiques sur les diffrents procds et sur loptimisation des conditions opratoires dextraction de lacide rosmarinique. Diverses techniques sont utilises pour effectuer lextraction solide-liquide. Chaque technique a ses avantages et inconvnients. Le couplage entre elles a le potentiel de combiner leurs points forts, permettant ainsi de crer des schmas synergiques.
Dans ce travail nous avons choisi dtudier sparment et en couplage plusieurs mthodes extractives :
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- Deux mthodes conventionnelles simples, efficaces, et largement utilises lextraction en mode batch et lextraction Soxhlet ; - Deux mthodes plus rcentes et plus sophistiques : lextraction avec du CO2 supercritique, offrant la possibilit dobtenir des fractions de compositions diffrentes en jouant sur le rgime opratoire de SCE, et la nanofiltration, approprie pour la ralisation de notre objectif de concentration des extraits.
Les objectifs gnraux de ce travail sont : - L'largissement des connaissances sur les mcanismes de transfert de matire en milieux polyphasiques, basse et haute pression, en vue de mieux matriser les processus. - La dtermination des conditions optimales dextraction et purification dune substance particulire (notre compos cible, lacide rosmarinique), ainsi que dautres composs dintrt se trouvant dans la plante mlisse. - Ltude des schmas de couplage de techniques choisies avec lide de rassembler leurs avantages pour obtenir le compos cible dans ltat plus concentr et purifi.
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Chapitre II
Matriels et mthodes
Chapitre II. Matriels et mthodes
II. Matriels et mthodes

II.1. Matire vgtale - mlisse (Melissa officinalis L.)
La mlisse provient de la socit bulgare Bilcocoop, et se prsente sous forme de parties ariennes (feuilles et tiges) sches, rcoltes en 2006 et 2007 dans la rgion orientale sous-Balkanique de la Bulgarie (Karlovo/Kazanlak). La plante a subi un traitement prliminaire : broyage, tamisage et sparation en fractions de diffrentes granulomtries. Trois fractions ont t principalement utilises dans nos tudes : particules de taille 0,630 1,25 mm (taille moyenne 0,94 mm) ; 1,25 1,4 (taille moyenne 1,33) et 1,4 2 (taille moyenne 1,70 mm). La matire broye contient des particules de deux formes gomtriques planes et cylindriques, provenant de diverses parties de la plante (feuilles et tiges). Le pourcentage de feuilles (particules de forme plane) varie de 70 90 % selon le lot. Nous avons utilis la microscopie lectronique balayage MEB (ou SEM, abrviation anglaise pour Scanning Electron Microscopy) pour dterminer les dimensions caractristiques des particules. Nous avons trouv une paisseur moyenne de feuilles gale 30 m et un diamtre moyen de tiges gal 626 m. (voir les photos sur figure II.1).
Figure II.1 Photographies des diverses parties de la plante mlisse (Melissa offcinalis L.) obtenues par microscopie lectronique balayage diffrents agrandissements - 47 -
La masse volumique de la mlisse a t dtermine par la mthode suivante : dans un cylindre gradu nous avons mis une masse donne de mlisse, puis nous avons ajout jusqu' 20 ml dhexane et nous avons pes la masse de mlange mlisse+hexane. La masse dhexane a t calcule en retirant la masse de la plante de celle du mlange. Le volume dhexane a t calcul en divisant sa masse sa masse volumique. Ensuite, en soustrayant le volume dhexane du volume total (20 ml) nous avons obtenu le volume de la plante. Enfin, la masse volumique de la mlisse a t calcule en divisant sa masse par son volume. La valeur moyenne ainsi dtermine est gale s = 799 kg/m3.
II.2. Techniques dextraction, purification et concentration utilises

Les techniques dextraction, purification et concentration utilises dans ce travail sont dcrites en dtails dans les chapitres respectifs. Ici, nous donnons simplement une liste des techniques dextraction, purification et concentration utilises dans ce travail. Elles sont dcrites en dtails dans les chapitres indiqus ci-dessous.
II.2.1. Extraction par CO2 supercritique (ESC) Le CO2 supercritique a t utilis en tant que solvant dextraction. Nous avons utilis cette technique principalement pour prtraiter la matire vgtale (la mlisse), et pour raliser lextraction des substances de haute valeur ajoute (citral, cariophyllene etc.) se trouvant dans lhuile essentielle de la plante. Les expriences ont t ralises avec une installation pilote construit par la socit Separex Chimie Fine, France (srie 3417 type SF 200). Linstallation comprend un extracteur de 200 ml et trois sparateurs ( photo : figure II.2.a)). Le dbit maximal de CO2 est 5 kg/h. Le schma de linstallation est prsent sur la figure 13.
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Figure II.2. a) Linstallation dextraction Separex
Figure II.2. b) Schma de linstallation dextraction supercritique
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Lextracteur E et les trois sparateurs S1, S2 et S3 sont connects en srie. Les tempratures sont maintenues constantes par un systme de contrle de temprature qui comprend les groupes chauds GC1 et GC2 et des changeurs de chaleur doubles enveloppes autour E, S1, S2 et S3. Dans certains schmas dextraction, le sparateur S1 peut tre aussi refroidi laide du groupe froid GF. Le systme est aliment grce du CO2 liquide contenu dans une bouteille sous pression B (pression gale la tension de vapeur la temprature ambiante). Le CO2 est maintenu ltat liquide avant et dans la pompe P laide du groupe froid GF puis est port au-del de sa temprature critique grce un changeur tubulaire avant dtre introduit dans lextracteur E en passant par le dbitmtre FM. La pression dans lextracteur est maintenue constante laide du rgulateur de pression (dverseur de pression) DE. Les pressions dans les sparateurs S1 et S2 sont maintenues grce aux vannes de contrle D1 et D2. En sortie de lextracteur et de chaque sparateur se trouve une vanne de vidange (AE, A1, A2 et A3, respectivement) permettant de diriger le solvant vers lvent (en cas de travail en circuit ouvert). Il est galement possible de travailler en circuit ferm (avec recyclage du CO2) en fermant les vannes de vidange et en ouvrant la vanne de recyclage R. Dans ce cas le CO2 passe par la ligne de recyclage. Sur la figure II.2, les symboles TI et PI sont respectivement des indicateurs de temprature et de pression. Ces indicateurs sont relis un enregistreur (Endress+Hauser) permettant lenregistrement de ces grandeurs au cours du temps. Les TR sont des rgulateurs de la temprature des groupes chauds et du group froid.
Cette installation permet galement lutilisation de co-solvants. Ils sont introduits par la pompe P-CS partir du rservoir du co-solvant R-CS, mlangs et dissous dans le CO2 juste avant lentr de extracteur.
II.2.2. Soxhlet Lextraction par Soxhlet est une mthode simple et convenable permettant de rpter infiniment le cycle dextraction avec du solvant frais jusqu' lpuisement complet du solut dans la matire premire. Dans cette tude, lextraction Soxhlet a t utilise pour valuer linfluence du prtraitement supercritique de la matire premire sur lextraction conventionnelle de lacide rosmarinique Le schma dun appareil Soxhlet est reprsent sur la figure II.3 Il est compos d'un corps en verre, dans lequel est place une cartouche en papier-filtre pais (une matire pntrable pour le solvant), d'un tube siphon et d'un tube de distillation. Dans le montage, - 50 -
l'extracteur est plac sur un ballon contenant le solvant d'extraction. Le ballon est chauff afin de pouvoir faire bouillir son contenu. La cartouche contenant le solide extraire est insre dans l'extracteur, au dessus duquel est plac un rfrigrant servant liqufier les vapeurs du solvant.
Figure II.3. Schma de lextracteur Soxhlet
Le ballon tant chauff, le liquide est amen lbullition, les vapeurs du solvant passent par le tube de distillation et rentrent dans le rfrigrant pour tre liqufies. Ensuite, le condensat retombe dans le corps de l'extracteur sur la cartouche, faisant ainsi macrer le solide dans le solvant. Le solvant condens s'accumule dans l'extracteur jusqu'au niveau du sommet du tube-siphon, suivi par le retour dans le ballon du liquide de lextracteur accompagn de substances extraites. Ainsi le solvant dans le ballon s'enrichit progressivement en composants solubles. Lextraction continue jusqu lpuisement de la matire solide charge dans la cartouche. La sparation du solvant de lextrait est fait laide de lappareil appel Rotavapor (voir la photo figure II.4). Dans cet appareil on ralise une vaporation sous vide en utilisant une pompe vide avec une vanne de contrle. Pendant lvaporation le ballon est mis en
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rotation et plong dans un bain liquide chauff. Lappareil est muni d'un rfrigrant avec un ballon-collecteur de condensat. La rotation du ballon cre une surface dchange plus grande et renouvelle permettant donc deffectuer une vaporation rapide.
Figure II.4. Photo de lappareil Rotavapor
Labaissement de la pression permet dvaporer le solvant temprature rduite, vitant ainsi la dgradation thermique ventuelle des composs. Cest une mthode dvaporation simple, utile, douce et rapide
II.2.3. Extraction en mode batch (chelle laboratoire) Il sagit dun dispositif simple compos de fioles de 500 ml (o lon dispose la matire premire et le solvant) et dun agitateur secoueur (figure II.5.) thermostat. Les expriences qui ont t ralises grce cette technique nous ont permis destimer linfluence de divers paramtres (nature et concentration du solvant, hydromodule (rapport solvant-matire solide), granulomtrie, temprature etc.) sur le processus dextraction de lacide rosmarinique.
Figure II.5. Photographie de lagitateur secoueur utilis pour lextraction batch
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Les expriences dextraction de lAR ont t menes en mode batch. Des chantillons de la matire premire vgtale (la mlisse) sont pess et introduites dans des fioles de 500 mL. Ensuite, les volumes ncessaires de solvant sont mesurs et ajouts. Aprs fermeture, les fioles sont places dans un agitateur-secoueur thermostat pour assurer des conditions dagitation intensive temprature constante. Afin de suivre le dveloppement du processus au cours de temps, des chantillons sont pris priodiquement et analyss par la technique HPLC.
II.2.4. Concentration des extraits par nanofiltration La partie principale du dispositif exprimental de nanofiltration est une membrane dont les pores sont de tailles molculaires. La membrane spare des substances en fonction de leur masse molculaire. Dans notre cas, elle laisse passer le solvant et certains produits nondsirs, mais retient le compos cible lacide rosmarinique. La force motrice est la diffrence de pression de part et dautre de la membrane. La pression est impose grce du gaz inerte (azote) provenant d'une bouteille sous pression. Nous avons utilis cette technique afin de concentrer les extraits liquides contenant l'acide rosmarinique. Nous avons utilis un schma de nanofiltration (fig. 17) avec alimentation frontale (voir le dessin en encadr sur la mme figure). Cette mthode dalimentation est typique pour des tudes exprimentale. Lquipement utilis (cellule agite de 270 ml et rgulateur de pression Figure II.6 photo) a t fourni par Membrane Extraction Technology Ltd., GrandeBretagne. Dans la cellule, la surface effective de la membrane est 54 cm. Les expriences ont t menes temprature ( 210.5 C ) et pression (30 bar) constantes, cette dernire tant maintenue par de lazote haute puret (99,996 %) provenant dune bouteille sous pression aprs dtendeur. Une agitation de 350 trs/min a t applique afin de minimiser la couche de polarisation (en anglais concentration polarization ). Il sagit de la formation dune couche de plus haute concertation en compos cible proximit de la membrane qui provoque un gradient de concentration en sens inverse du flux.
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Figure II.6 a) Schma de lappareillage de nanofiltration
Figure II.6. b) Photo de la cellule avec le rgulateur de la pression
II.2.5. Application semi-industrielle de lextraction solide-liquide dans un extracteur rotatif Il sagit dune installation dextraction solide-liquide conventionnelle de capacit plus importante (semi-industrielle tambour de diamtre intrieur 45 cm et hauteur 25 cm). La matire vgtale charge dans lappareil est mise en contact avec le solvant par rotation de lextracteur, crant ainsi des conditions intensives de transfert de matire, proches de celles de lextraction lchelle laboratoire en mode batch. Cest un extracteur solide-liquide (photo) dont la partie principale est un tambour tournant (figure II.7). Le tambour (1) est perfor et divis en sections, dans lesquelles on
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charge des conteneurs (2) remplis de la matire solide. Les conteneurs sont faits en tissu filtrant. Le tambour est plac dans un autre tambour immobile (5). Le solvant (3) est introduit par louverture suprieure (6) du tambour (5) et occupe sa partie basse. Louverture (7) du tambour sert pour lvacuation des vapeurs
Figure II.7. a) Photo de lextracteur rotatif (tableau de commande et rservoirs)
Figure II.7. b) Schma principal de lextracteur rotatif
Pendant le cycle dextraction, le tambour tourne lentement autour de son axe (4) et chaque tour la matire vgtale se trouvant en partie basse du tambour est immerge dans le solvant. En passant par la partie haute du tambour, le solvant limin partiellement de la matire solide par gravit. Par rptition de cette action une squence de trempage et
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gouttage est ralise, gnrant ainsi un bon mlange entre le matriel vgtal et le solvant, ainsi que lvacuation et le renouvellement du solvant autour des particules solides. A la fin du cycle de contact, la sparation du solvant de la matire solide est assure par augmentation de la vitesse de rotation du tambour en utilisant la force centrifuge. Afin de rcuprer ou liminer les rsidus de solvant dans la plante, un cycle de lavage de solide peut tre ajout. Le systme de rservoirs et vannes permet la ralisation de diffrents schmas de contact contact simple, extraction multiple, percolation, courants croiss, contre-courant. Le mode opratoire contient plusieurs cycles de longueur rglable. Toutes ces oprations sont automatises sauf la charge et dcharge de la matire solide. Cest un appareil polyfonctionnel, capable de raliser plusieurs actions : extraction solide-liquide, sparation des phases, filtration, ainsi que plusieurs schmas de contact du solide avec le solvant. Il est bien adaptable au traitement de matires premires diffrentes. La capacit de lextracteur est environ 5 kg de matire vgtale sche. Il produit autour de 10 L/h dextrait liquide. Nous avons utilis cet appareil dabord pour tudier la cintique du processus dextraction et ensuite pour produire une quantit plus importante dextrait de mlisse ncessaire aux expriences prvues dans ltape suivante de ltude
II.3. Techniques analytiques

II.3.1. Chromatographie en phase liquide haute performance HPLC La chromatographie en phase liquide haute performance (labrviation anglaise HPLC - High Performance Liquid Chromatography est plus frquemment utilis) est une technique de sparation analytique base sur l'hydrophobicit des molcules d'un compos ou dun mlange de composs. Lchantillon analyser est pouss par un luant liquide (appele aussi phase mobile) dans une colonne remplie d'une phase stationnaire compose de grains solides trs fins. Le dbit d'luant est assur par une pompe haute pression. Dans la colonne, les divers composs de lchantillon sont spars lun de lautre en raison de leurs diverses affinits lgard des deux phases stationnaire et mobile. A la sortie de la colonne les composs sont dtects laide dun dtecteur (pouvant tre UV, IR etc.). Dans nos tudes, des dtecteurs UV bass sur la mesure de la longueur donde des composs ont t utiliss. Le schma (fig. II.8.)prsente le principe gneral de la mthode.
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Figure II.8. Schma principal de la chromatographie en phase liquide haute performance. 1- Rservoirs des solvants, 2 - Dgazeur, 3 - Valve de gradient d'lution, 4 - Doseur de phase mobile (ou luant), 5 - Pompe haute pression, 6 - Vanne d'injection en position "inject", 6' Vanne d'injection en position "load", 7 - Boucle dinjection de l'chantillon, 8 Prcolonne (ventuelle), 9 - Colonne analytique, 10 Dtecteur, 11 - Acquisition du signal, 12 Dcharge dchets
La mthode HPLC a t utilise pour analyser la concentration en acide rosmarinique dans les extraits. Les systmes chromatographiques utiliss pour nos tudes ont t les suivants :
Pour les analyses effectues lInstitut de Gnie Chimique, ABS Sofia (en Bulgarie), le systme HPLC comprend les lments suivants : Pompe s-1000 Knauer Colonne Discovery C18 (25cm x 4.6 mm, 5), Supelco Intgrateur Chromatopac C-R6A Shimadzu Dtecteur UV variable vawelengh detector-Knauer
Pour les analyses effectues au Laboratoire de Gnie Chimique, INP Toulouse, (en France), le systme HPLC est le suivant : Pompe Spectra System p1000XR Colonne Discovery C18 (25cm x 4.6 mm, 5), Supelco Chromatographe Spectra SYSTEM Dtecteur UV 2000
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Dans les deux cas, lluant utilis est un mlange mthanol : eau 80 : 20 (v:v) avec une valeur de pH fix 2,5 laide de lacide formique. Le dbit dluant est gal 0,4 ml/min et le volume inject 20 l. Le spectre UV pour lanalyse de lAR a t fix 280 nm. Toutes les analyses ont t effectues temprature ambiante. La solution standard a t prpare partir dacide rosmarinique pur (Fluka). Les solutions opratoires ont t prpares en diluant la solution standard avec du mthanol. La courbe de calibration : cf. Annexe 10.
II.3.2. Chromatographie en phase gazeuse Comme lHPLC, la chromatographie en phase gazeuse (CPG) est une technique permettant de sparer les composs d'un mlange. Elle s'applique principalement aux composs gazeux ou susceptibles d'tre vaporiss par chauffage sans dcomposition. La diffrence principale par rapport lHPLC vient du fait que dans la CPG la phase mobile est gazeuse. Le mlange analyser est vaporis l'entre de la colonne. La phase stationnaire dans la colonne peut tre solide (notre cas) ou liquide. Le mlange est transport travers celle-ci l'aide d'un gaz porteur (ou gaz vecteur). Les diffrentes molcules du mlange se sparent et sortent de la colonne les unes aprs les autres aprs un certain laps de temps dpendant de l'affinit de la phase stationnaire avec ces molcules. A la sortie de la colonne, les composs rencontrent un lment essentiel - le dtecteur. Il value en continu la quantit de chacun des constituants spars au sein du gaz porteur grce la mesure de diffrentes proprits physiques du mlange gazeux et envoie un signal lectronique vers un enregistreur. Dans nos tudes, nous avons utilis un dtecteur ionisation de flamme (FID). Le principe de fonctionnement de ce type de dtecteur est le suivant : une tension de l'ordre de la centaine de volts est maintenue entre la buse de la flamme hydrogne-air et une lectrode entourant la flamme. Lorsque les molcules traversent la flamme, elles deviennent ionises, ce qui provoque un courant lectrique entre les lectrodes qui est ensuite amplifi. Le schma principal de la CPG est prsent sur la figure II.9.
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Figure II.9. Schma simplifi de la chromatographie en phase gazeuse
Nous avons utilis ce type danalyse pour analyser le contenu des composs majeurs de lhuile essentielle de la mlisse dans les extraits supercritiques.
Le dispositif CPG utilis est le suivant : - Chromatographe comprenant linjecteur, le four et le dtecteur FID : Thermo Frinnigan - Colonne : Varion WCOT Fused Silica (25 m x 0,25 mm; epaisseur du film 0,4 m) - Conditions opratoires : gaz vecteur : hlium, 2 ml/min ; temprature de la colonne = 40 240 C, 7 C/min, temprature dinjection 240 C ; le volume dinjection 2 l, ratio split 1:5.
Les composs purs ncessaires lidentification des composs dans lextrait ont t achets dans le commerce : Citral (Sigma-Aldrich), Citronellal (Sigma-Aldrich), caryophyllene (Fluka). Les solutions standards ont t prpares et les solutions opratoires ont t faites en diluant les solutions standards avec de lthanol. Les courbes de calibration : cf. Annexe 9.
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Chapitre III
Extractions par le CO2 supercritique
Chapitre III. Extractions par le CO2 supercritique
III. Extractions par le CO2 supercritique

III.1. Introduction
Le CO2 tant un solvant apolaire, il ne dissout quasiment pas les composs polaires tels que notre compos cible, lacide rosmarinique. Pour cette raison, dans la plupart de nos tudes, lextraction au CO2 supercritique a t utilise pour liminer des composs nondsirs, cest--dire pour prtraiter la matire vgtale, ainsi que pour isoler des composs de haute valeur ajoute (autres que lAR) pouvant tre contenus dans lhuile essentielle de mlisse. Linfluence de divers paramtres sur la cintique du processus (la pression et la temprature dans lextracteur, le volume de la cellule dextraction, la taille des particules, le dbit de CO2 etc.) et sur la puret de lextrait supercritique (la pression et la temprature de lextracteur et des sparateurs, la dure dextraction) a donc t tudie en dtails.
III.2. Les exprimentations

Avant une exprience, la matire premire est charge dans une cellule dextraction qui est ensuite pese avant dtre positionne dans lextracteur. Ce dernier est alors ferm et le CO2 est aliment avec un dbit constant. La pression et la temprature dans lextracteur et dans les trois sparateurs sont maintenues galement constantes. En fin dextraction, la cellule est nouveau pese afin destimer la perte de masse de la matire premire. Lors des expriences servant tablir la cintique dextraction, lextraction est priodiquement arrte, lextracteur ramen pression atmosphrique, la cellule pese et la perte de masse de matire premire dtermine. Ensuite lextraction est reprise. A partir de ces mesures de perte de masse nous avons construit les courbes cintiques dextraction.
Les rsultats concernant la cintique dextraction sont prsents en traant lvolution de la fraction de masse extraite (g extrait/kg matire premire) en fonction de la quantit de CO2 utilise par unit de masse de matire premire (kg CO2/kg matire premire). Lautre paramtre utilis pour exprimer les rsultats dans ce chapitre est le Rendement total de lextrait supercritique:
SC (% ) = YEX
mEX mMat . prem.
x100
(III.1.)
o : mMat. prem est la masse initiale de la mlisse et mEX est la masse de lextrait supercritique
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total. Ce paramtre caractrise la perte de matire non-dsire de la matrice vgtale lorsque lESC est utilise comme tape du prtraitement de la mlisse.
Dans les cas de la rcupration des composs haute valeur ajoute, les rsultats sont exprims par la concentration dans lextrait supercritique Ci :
Ci (% ) =
mi x100 mEX
(III.2.)
avec mi tant la masse extraite du compos i. Lorsque des co-solvants sont utiliss, on calculera le rendement en acide rosmarinique :
SC Y AR (%) =
m AR m Mat . prem.
x100
(III.3.)
ici mAR est la masse de lacide rosmarinique extraite. Afin dtudier la cintique dextraction supercritique en termes de perte de masse de la matire premire, nous avons choisi dutiliser une cartouche en papier: La cartouche, type Soxhlet (papier filtre, hauteur 52 mm, diamtre extrieur 32 mm, diamtre intrieure 28 mm, volume 32 mL) a t place dans la cellule dextraction sur le support inox fritt, et remplie avec la matire premire puis bouche avec un couvercle du mme matriau que la cartouche elle-mme. Aprs une priode donne lexprience a t arrte, la cartouche pese et la perte de masse calcule. Pour les tudes sur le couplage de lESC avec dautres techniques sparatives (cf. chapitre IV), nous avons travaill avec la cellule originelle (hauteur 152 mm, diamtre intrieur 32 mm donc de volume gal 122 mL) de faon pouvoir traiter une quantit plus importante de matire vgtale pour produire suffisamment de rsidu supercritique, en vue de son utilisation en tant que matire premire pour lextraction conventionnelle de lacide rosmarinique. Nous avons galement utilis la cellule originelle lors de ltude de linfluence du co-solvant sur la cintique dextraction.
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III.3. Rsultats
La Figure III.1. donne une ide gnrale des rsultats (exprims en Rendement de lextrait total supercritique) obtenus avec la cellule cartouche pour diffrentes valeurs de pression et temprature.
14 Rendement de l'extrait total supercritique, % 12 10 8 6 4 2 0 100
120
140
160
180
200 P, bar
220
240
260
280
300
SC Figure III.1. Rendement de lextrait total supercritique YEX en fonction de la pression, dbit
de CO2 = 5 g/min, taille moyenne des particules 0,94 mm. . 60 C 40 C ;; Lensemble de ces rsultats montre globalement une amlioration du rendement total dextraction plus hautes pressions et tempratures. Dans ce qui suit, nous allons prsenter en dtails les cintiques des processus dextraction supercritique sous ces conditions opratoires, de manire dcrire linfluence des paramtres pression et temprature sur lextraction
III.3.1. Influence des paramtres opratoires sur la cintique dextraction supercritique.
Lobjectif de ce chapitre est dtudier exprimentalement linfluence des paramtres opratoires principaux (temprature, pression, granulomtrie, dbit de CO2 et prsence de cosolvant) sur la cintique du processus dextraction supercritique, afin de pouvoir slectionner des conditions oprationnelles favorables lextraction.
La vitesse dextraction reprsente la masse de matire extraite (mg) par unit de temps (min). Ce paramtre permet de mettre en vidence le rgime d'extraction a un temps donn.
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La Figure III.2. prsente la variation de la vitesse dextraction en fonction de la quantit de CO2 passe dans lextracteur (kg CO2 / kg matire premire), pour une exprience classique.
7 6 Vitesse d'extraction, mg/min 5 4 3 2 1 0 0 50 100 150 200 250 300 350
kg CO2 / kg mat. premire
Figure III.2. Vitesse moyenne dextraction en fonction de la quantit du CO2 par kg de la
matire premire, T= 40 C, P=200 bar, taille de particules moyenne 0.94 mm, dbit du CO2 = 30 g/min.
Cette Figure III.2. montre une courbe typique dextraction supercritique, sur laquelle on peut distinguer trois priodes. Une courbe similaire est dcrite dans [67]. Pendant la priode initiale, relativement courte, la vitesse dextraction est leve et constante. Cela correspond lextraction du solut facilement accessible se trouvant la surface des particules. Pendant cette priode, le processus est essentiellement contrl par la solubilit des soluts dans le CO2 et/ou le transfert de matire externe autour de la particule . Pendant la deuxime priode, la vitesse dextraction commence diminuer. Cette priode correspond une extraction simultane des substances se trouvant la surface, mais aussi lintrieur des particules (c..d., certaines zones dans la cellule sont en limitation la solubilit/transfert externe et dautres en limitation diffusionnelle).. La troisime priode est caractristique dune vitesse dextraction diminuant plus faiblement par rapport la priode prcdente. Le solut sur la surface est dj consomm et le processus continue faible vitesse, dtermine par le transfert partir des cellules internes (contrl par la rsistance interne). Notre systme dextraction correspond donc un systme de cintique standard [79].
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III.3.1.1. Influence de la temprature La Figure III.3 a - d prsente des isothermes dextraction 40 et 60C. Sur chacune de ces figures, on remarque une priode initiale pendant laquelle le rendement dextraction volue linairement en fonction de la quantit de CO2, et qui correspond un processus contrl par la solubilit. La pente de cette partie linaire de lisotherme peut servir la dtermination dune valeur approximative de la solubilit apparente de la substance extraite dans le fluide supercritique. [67]
90 80 g extrait / kg mat. premire 70 60 50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 kg CO2 / kg mat. premire 200 250 300
a)100 bar
140 120 g extrait / kg mat. premire 100 80 60 40 20 0 0 50 100 150 200 250 300 kg CO2 / kg mat. premire
b) 200 bar
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140 120 g extrait / kg mat. premire
100 80
60 40
20 0 0 50 100 150 200 kg CO2 / kg mat. premire 250 300
c) 250 bar
d) 280 bar
Figure III.3. Courbes cintiques tempratures diffrentes, taille moyenne de particules 0.94
mm, dbit de CO2 = 5 g/min. 60 C ; 40 C ; a) P = 100 bar, b) P = 200 bar, c) P = 250 bar, d) P = 280 bar
On observe que pour tous les rgimes de pression, la rsistance due la solubilit du solut dans le CO2 est plus grande temprature plus faible. Ce comportement peut tre attribu laugmentation de la solubilit avec la temprature. Il semble que la gamme de
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temprature dans laquelle nous travaillons correspond la zone o la solubilit augmente avec la temprature. On est donc dans la zone o leffet de la tension de vapeur des soluts sur la solubilit est prdominant par rapport celui de la masse volumique du solvant. En comparant les figures 23. a-d, on constate que linfluence de la temprature pendant la premire priode linaire devient plus faible plus haute pression. Cela peut tre expliqu par lamlioration de la solubilit grce laugmentation de la masse volumique du solvant. Pour linterprtation de rsultats concernant la rsistance interne, nous allons distinguer deux zones de pression : celle de basse pression, 100 bar, illustre par la Figure III.3 a) et celle haute pression, suprieure ici 200 bar, figures 23. b - d). Cette distinction est ncessaire, puisque, daprs les informations de la littrature [1, 8, 60, 89] la slectivit change en fonction de la pression. En effet, basse pression, on extrait prfrentiellement les huiles essentielles et des cires, tandis qu plus haute pression on extrait aussi des molcules de masse molculaire leve (chlorophylle, etc.). Visuellement, nous avons pu constater une diffrence daspect des extraits, les extraits obtenus basse pression tant plutt jauntres. En solubilisant ces extraits dans de l'thanol, nous avons constat une prcipitation des cires (qui sont peu solubles dans lthanol). La sparation des cires de lhuile essentielle est prsente plus loin dans la partie III.3.5. Les extraits obtenus hautes pressions sont verts foncs, en raison de la prsence probable de chlorophylle [1]. A basse pression (fig.23 a), on observe que linfluence de la temprature est trs prononce. A 60 C, le plateau, correspondant au dbut de la priode o lextraction est limite par la diffusion interne, est assez rapidement atteint, tandis qu temprature plus basse (40 C) il semble que ce rgime ne soit pas atteint la fin de lexprience, puisque le plateau nest pas encore mis en vidence (dans ce cas le processus est encore en rgime transitoire, avec linfluence des deux rsistances, la solubilit et la rsistance interne). Ce comportement peut tre attribu la une solubilit du ou des soluts, plus faible 40C, Dans la zone des pressions leves la rsistance interne (plateaux, fig. 23. b, c, d) est peu affecte par la temprature. Les rsultats exprimentaux de ce chapitre montrent que pour tous les rgimes de pression lefficacit du processus augmente avec la temprature. Nous allons donc considrer que 60 C est une valeur raisonnable, prservant, dune part les composants actifs de la plante dune destruction thermique et, dautre part, assurant un rgime cintique intensif.
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III.3.1.2. Influence de la pression Sur la Figure III.4 linfluence de la pression sur le rendement de lextrait total
SC supercritique YEX est prsente.
14 Rendement de l'extrait total supercritique, % 12
10 8 6 4
2 0 100 200 Pression, bar 250 280
SC Figure III.4. Rendement de lextrait total supercritique YEX diffrentes pressions.
40 C ; 60C. Dbit de CO2 = 5 g/min. Taille moyenne de particules 0,94 mm. Dure dextraction = 330 min
Les rsultats exprimentaux montrent une augmentation du rendement avec la pression. Ceci peut tre attribu laugmentation du pouvoir solvant du CO2 haute pression en raison de laugmentation de sa masse volumique, et dun hydromodule plus lev. Comme cela a t mentionn dans la partie III.3.1.1, on distingue deux groupes de rgimes. A pression modre (100 bar) le rendement est sensiblement plus faible et lextrait contient surtout des cires et de lhuile essentielle. A haute pression (>200 bar) le rendement est amlior, mais on extrait davantage de composs de masse molculaire leve (chlorophylle). On peut donc conclure quen augmentant la pression dextraction, on obtient une meilleure efficacit du solvant, mais sa slectivit diminue. Dans le contexte de notre tude, o lobjectif consiste liminer le maximum de matire possible grce au prtraitement supercritique, il semble donc prfrable de choisir une pression opratoire leve. Dans le cas o lobjectif disoler des composs haute valeur ajoute, cest--dire lhuile essentielle, il sera par contre indiqu de travailler pression modre. Dans ce cas, nous verrons dans la
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partie III.3.5 quil est ncessaire dajuster prcisment les paramtres opratoires, car la slectivit de lextraction est trs sensible ces changements.
III.3.1.3. Influence de la granulomtrie La Figure III.5. a et b montre leffet de la pression sur la cintique dextraction pour des particules de classes de tailles diffrentes.
140 120 g extrait / kg mat. premire 100 80 60 40 20 0 0 50 100 150 200 250 300
kg CO2 / kg mat. premire
Figure III.5 a) Quantit extraite en fonction de la quantit de solvant utilise T = 60 C,
dbit de CO2 = 5 g/min, taille moyenne de particules = 0,94 mm. 280 bar ; 250 bar ; 200 bar ; 100 bar
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120
100 g extrait / kg mat. premire
80
60
40
20
0 0 50 100 150 kg CO2 / kg mat. premire 200 250 300
Figure III.5 b) Quantit extraite en fonction de la quantit de solvant utilise , T = 60 C,
dbit de CO2 = 5 g/min, taille moyenne des particules = 1,33 mm. 280 bar ; 250 bar ; 200 bar
Dans le cas des petites particules (Fig. 25 a), la priode initiale est identique et ne dpend pas de la pression. En effet, les diffrences de comportement apparaissent pendant la priode transitoire. Ici on peut facilement distinguer les deux groupes de rgimes ( basse et haute pression). Comme cela a t dj dit, la slectivit diminue haute pression et on extrait une plus grande quantit de composs diffrents par rapport au rgime plus slectif basse pression (100 bar). Dans lintervalle de pressions 200 250 bar le processus se dveloppe dune manire trs similaire, tandis que 280 bar il est sensiblement meilleur vers la fin. Lindication ci-dessus peut servir la slection des conditions opratoires convenables selon lobjectif du procd. Dans le cas de particules de plus grande taille (fig. 25 b) seule lextraction hautes pressions (> 200 bar) a t reprsente. A 200 et 250 bar on distingue des cintiques diffrentes pour la priode initiale et transitoire, tandis que pendant la priode finale (plateau) le comportement devient similaire comme dans le cas des petites particules. Ce comportement semble attribuable laugmentation de la rsistance interne dans le cas des plus grandes particules. Les plus grandes particules prsentent une surface spcifique moins importante, rendant lextraction des soluts prsents lintrieur des particules plus difficile. Ici encore, les rsultats obtenus 280 bar sont les plus intressants en termes de rendement total dextraction.
- 72 -
La Figure III.6 montre la quantit extraite dans la gamme des hautes pressions (>200 bar) pour des particules de taille moyenne diffrente. On voit clairement une augmentation de la quantit dextrait lorsque la pression est suprieure 250 bar. Ce rsultat nous indique que le prtraitement efficace de la matire vgtale doit tre effectu une pression suprieure 250 bar.
140 120 g extrait / kg mat. premire 100 80 60 40 20 0 190
200
210
220
230
240 Pression, bar
250
260
270
280
290
Figure III.6. Quantit extraite en fonction de la pression, T = 60 C, dbit du CO2 = 5 g/min.
0, 94 mm ; 1,33 mm
La Figure III.7 prsente les cintiques dextraction pour des fractions de taille moyenne diffrente 60C et 280 bar.
- 73 -
Figure III.7. Cintique dextraction pour diverses tailles de particules, T = 60 C, P = 280
bar, dbit de CO2 = 5 g/min. 0, 94 mm ; 1,33 mm ; 1, 7 mm Logiquement, on observe que le meilleur rsultat est obtenu avec des petites particules, ceci en raison de leur plus grande surface spcifique. et donc une plus grande surface de contact solvant-solide. Dautre part, dans ce cas la quantit de cellules vgtales ouvertes et localises plus prs de la surface est plus leve, ce qui rend le solut plus accessible au solvant et diminue la rsistance interne. On voit sur la figure que la rsistance interne augmente avec la taille des particules. Il est donc prfrable de travailler avec des particules plus fines. Cependant, il faut toujours tenir compte au fait que des trop petites particules peuvent entraner des problmes technologiques dus des bouchage des installations, laugmentation de la perte de charge dans lappareil, et contribuer la cration des passages prfrentiels ( channelling ) et zones non percoles. Dun point de vue technologique, il faut toujours chercher un compromis entre la taille des particules utiliser, la construction particulire de linstallation et lefficacit de son fonctionnement.
III.3.1.4. Influence du dbit du CO2 Afin de couvrir une large plage de variation pour ce paramtre, nous avons test deux valeurs extrmes (petite et grande) du dbit de CO2 : 5 et 30 g/min.
- 74 -
Dabord nous avons suivi la cintique dextraction prsente en masse extraite par unit de masse de la matire premire (g extrait / kg matire premire) en fonction de la quantit de CO2 utilise par unit de la matire premire (kg CO2 / kg matire premire). Les rsultats obtenus 40 et 60 C sont prsents sur les figures 28 et 29
120
100 g extrait / kg mat. premire
80
60
40
20
0 0 500 1000 kg CO2 / kg mat. premire 1500 2000
Figure III.8. Influence du dbit de CO2 sur la cintique dextraction, T = 40 C, P = 280 bar,
taille des particules 0,94 mm. 5 g/min ; 30 g/min
140 120 g extrait / kg mat. premire 100 80 60 40 20 0 0 500 1000 kg CO2 / kg mat. premire 1500 2000
Figure III.9. Influence du dbit de CO2 sur la cintique dextraction, T = 60 C, P = 280 bar,
taille des particules 0,94 mm. 5 g/min ; 30 g/min - 75 -
Pour chaque temprature on peut distinguer les trois priodes standards dextraction: la priode initiale contrle par la solubilit et/ou le transfert de matire externe, la priode transitoire avec linfluence mixte de deux rsistances externe (solubilit et le transfert de matire) et interne, et la troisime priode contrle par la rsistance interne (transfert de matire lintrieur des particules). En augmentant le dbit de CO2 le temps de sjour du solvant diminue. Pendant la premire priode, le transfert de masse devient moins intensif. Cela rsulte de lhydrodynamique, et une limitation de transfert de matire externe apparait. Par consquence, cette priode devient plus longue dbit plus lev. La mme raison est valable pour la seconde priode transitoire contrle simultanment par les rsistances externes et interne. Elle, aussi, devient plus longue cause du plus court temps de sjour du solvant. La diffrence entre les deux dbits est beaucoup plus marque 60 C qu 40 C, o les deux courbes sont beaucoup plus proches (fig. 29 ). Cela signifie qu 40 C la rsistance externe est beaucoup plus importante (solubilit plus faible 40 qu 60oC).
Dautre part, il semble qu 40 C le rle de la rsistance interne soit moins important. Pour vrifier cette affirmation, nous avons trac lvolution du rendement dextraction au cours du temps (min) sur la Figure III.10
120
g extrait / kg mat. premire
100
80
60
40
20
0 0 50 100 150 200 250 300 350
Temps, min
Figure III.10. Influence du dbit de CO2 sur la cintique dextraction au cours de temps.
T = 40C, P = 280 bar, taille des particules 0,94 mm. 5 g/min ; 30 g/min
- 76 -
140
120
g extrait / kg mat. premire
100
80 60
40
20
0 0 50 100 150 Temps, min 200 250 300 350
Figure III.11. Influence du dbit de CO2 sur la cintique dextraction au cours de temps. T =
60 C, P = 280 bar, taille des particules 0,94 mm. 5 g/min ; 30 g/min
A 40 C (fig. 30), la zone de croissance linaire (qui correspondant la priode contrle par la solubilit) apparait clairement et dpend fortement du dbit. Pour un plus grand dbit de CO2, la quantit de solvant entrant en contact avec des soluts pendant un temps t augmente, ce qui se traduit par une plus grande quantit dextrait. Le processus est donc dans ce cas limit par la solubilit du solut dans le solvant. En consquence, la pente de la partie linaire devient plus grande. Au contraire, 60 C (fig. 30), les rsultats obtenus pour les des deux dbits sont parfaitement identiques, avec une zone linaire trs courte, signifiant que la rsistance lie solubilit est ngligeable et que le phnomne est principalement limit par le transfert de matire interne.
En conclusion, il apparait, qu plus haute temprature (60 C) un dbit plus faible soit plus convenable tandis qu temprature plus faible (40 C), il sera prfrable de travailler avec un dbit plus lev afin de limiter la dure de lextraction.
- 77 -
III.3.2. Influence de la prsence de co-solvants dans le solvant supercritique
Dans notre dispositif exprimental, le co-solvant a t introduit et mlang au CO2 juste avant lentre dans lextracteur grce une pompe HPLC. Nous avons test deux cosolvants, lthanol et leau. Lthanol a t choisi car cest un co-solvant polaire classique, non-toxique largement utilis. De son ct, leau est un co-solvant moins utilis, mais aussi videmment non-toxique, sr et propre. Les deux co-solvants ont un caractre polaire, ce qui permettra de raliser lextraction grce un solvant polaire [68].
III.3.2.1. Co-solvant thanol Les tudes avec lthanol ont t effectues en deux sries : basse pression (120 bar) et haute pression (280 bar). Les expriences ont t menes dans la cellule originelle de lextracteur en utilisant la fraction de particules de taille moyenne 0,94 mm. La Figure III.12 montre linfluence de la fraction massique en co-solvant dans
SC 120 bar. lalimentation sur le Rendement de lextrait total supercritique YEX
6 Rendement de l'extriat total supercritique, %
0 1 2 3 4 5
SC Figure III.12. Rendement de lextrait total supercritique YEX en fonction de la fraction de co-
solvant thanol dans lalimentation. P = 120 bar, T = 40 C, dbit du CO2 = 6,4 g/min : 1 Sans co-solvant, dure 15 h ; 2 Sans co-solvant, dure 4 h 3 5 % co-solvant, dure 4 h ; 4 10 % co-solvant, dure 4 h ; 5 15 % co-solvant, dure 4 h
- 78 -
A basse pression (120 bar) le Rendement de lextrait total supercritique est nettement plus grand dans le cas de lutilisation dthanol et augmente avec la fraction massique de celui-ci. Il apparait bien nettement que lajout dthanol amliore le pouvoir solvant du CO2. En comparant les processus sans (2) et avec co-solvant (3-5) pour la mme dure dextraction, on voit un rendement beaucoup plus lev en cas de co-solvant. Pour comparaison, le mme rendement sans co-solvant (1) est atteint en 4 fois plus de temps quavec 10% de co-solvant (4). Cependant, lutilisation dthanol en tant que co-solvant va modifier la fois la quantit et la composition de lextrait. La quantit dacide rosmarinique (AR) extraite est
SC (eq III.2). La Figure caractrise par le paramtre Rendement de lacide rosmarinique YAR
III.13 montre la variation de ce paramtre en fonction de la quantit de co-solvant utilise dans lalimentation.
0,045
Rendemnet de l'acide rosamrinique, %
0,03
0,015
0 1 2 3 4
SC Figure III.13. Rendement de lacide rosmarinique YAR en fonction de la quantit du co-
solvant thanol, P = 120 bar, T = 40 C, dbit du CO2 = 6,4 g/min. 1 Sans co-solvant, dure 15 h ; 2 5 % co-solvant, dure 4 h; 3 10 % co-solvant, dure 4 h ; 4 15 % cosolvant, dure 4 h
Ces rsultats indiquent que sans co-solvant, pour une dure dextraction ~ 4 fois plus longue que pour lextraction avec co-solvant, la quantit dAR extraite est ~ 4-5 fois plus faible. En augmentant la quantit de co-solvant, on constate que la quantit dacide rosmarinique extraite augmente aussi. Logiquement, la solubilit de lAR dans le solvant
- 79 -
devient plus importante lorsque celui-ci est plus polaire. Cependant, il faut noter que le Rendement de lacide rosmarinique ne dpasse pas 0,041 % (alors que le contenu de lAR dans la mlisse varie de 4 7,66 % selon le lot) tandis que le rendement de lextrait total est de lordre de 5 %, ce qui signifie que la majorit de la matire extraite reprsente des composs non-dsirs. Sur la Figure III.14, nous avons mis en vidence linfluence de la fraction de co-solvant sur la Concentration en AR dans lextrait C AR . On observe que cette concentration diminue avec laugmentation de la quantit de co-solvant mme si le Rendement de lacide rosmarinique augmente. On peut donc tirer la conclusion quen augmentant la quantit dthanol, on augmente de faon majoritaire le pouvoir solvant par rapport des composs non-dsirs, cest--dire autres que lacide rosmarinique.
Concentration en acide rosmarinique dans l'extrait, %
1,2
0,8
0,6
0,4
0,2
0 1 2 3 4
Figure III.14. Concentration en acide rosmarinique dans lextrait C AR en fonction de la
quantit du co-solvant thanol, P = 120 bar, T = 40 C, dbit du CO2 = 6,4 g/min. 1 Sans cosolvant, dure 15 h ; 2 5 % co-solvant, dure 4 h ; 3 10 % co-solvant, dure 4 h ; 4 15 % co-solvant, dure 4 h.
Daprs ces rsultats, il apparait que lextraction supercritique basse pression avec du co-solvant thanol, peut-tre une mthode de pr-traitement intressante, permettant dliminer des composs non-dsirs avant lextraction conventionnelle de lAR. Lextraction supercritique directe ne constitue pas un moyen efficace de rcupration de lacide rosmarinique.
- 80 -
SC Les Rendements de lextrait total supercritique YEX obtenus 280 bar, sans et avec
co-solvant thanol sont prsents sur la Figure III.15.

7 Rendement de l'extrait total supercritique, %
0 1 2
SC Figure III.15. Rendement de lextrait total supercritique YEX , P = 280 bar, T = 60 C, dbit
de CO2 = 5 g/min, dure 5 h. 1 Sans co-solvant, 2 15 % co-solvant thanol Ces rsultats indiquent que, comme dans le cas de la basse pression, lintroduction de co-solvant augmente la capacit dextraction du solvant, en raison de sa plus grande polarit. En consquence, certains produits insolubles en absence du co-solvant, deviennent solubles. On remarque une lgre augmentation du Rendement de lextrait total supercritique par rapport aux essais raliss basse pression, le meilleur rsultat basse pression tant 5,08 % contre 6,56 % haute pression (comp. Fig. 32 et 35).
- 81 -
0,06
Rendement de l'acide rosmarinique, %
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
0 1 2
SC Figure III.16. Rendement de lacide rosmarinique YAR , P = 280 bar, T = 60 C, dbit du
CO2 = 5 g/min, dure 5 h. 1 Sans co-solvant ; 2 15 % co-solvant thanol De plus, la prsence du co-solvant augmente le Rendement de lacide rosmarinique denviron 30 fois, comme le montre la fig. 36. Cependant, le rendement nest que de 0,06 %, cest--dire trs lgrement plus lev qu basse pression (~ 0,04 %). La Concentration en acide rosmarinique C AR dans lextrait est prsente sur la Figure III.17.
1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 1 2
Figure III.17. Concentration en acide rosmarinique dans lextrait C AR P = 280 bar, T = 60
C, dbit du CO2 = 5 g/min, dure 5 h. 1 Sans co-solvant ; 2 15 % co-solvant thanol
- 82 -
Avec du co-solvant la Concentration en acide rosmarinique dans lextrait devient environ 8 fois plus leve, mais cependant elle reste faible (< 0,9 %). En comparaison avec les rsultats basse pression, il ny a quune petite influence positive de la pression (augmentation de 0,8 0,86 % pour 15 % du co-solvant). Par contre, le contenu en AR dans lextrait diminue en augmentant la quantit du co-solvant (Figure III.17.). On peut alors conclure que le rapport matire non-dsire/acide rosmarinique dans lextrait supercritique augmente avec la quantit de co-solvant et avec la pression. De manire gnrale, daprs les rsultats, on peut dire que lutilisation de lthanol comme co-solvant peut-tre envisage dans une tape de lavage prliminaire de la matire premire, avec lobjectif dliminer une quantit importante de composs non-dsirs avant ltape dextraction conventionnelle de lAR partir de la mlisse. Daprs les rsultats, qui sont similaires basse et haute pression, il semble plus raisonnable de prfrer un fonctionnement basse pression.
III.3.2.2. Co-solvant eau Nous avons galement test lextraction de mlisse en utilisant de leau comme cosolvant. Les conditions opratoires suivantes ont t ralises : P = 280 bar, T = 60 C, dbit de CO2 = 20 g/min. Le dbit deau a t choisi de telle sorte que la concentration en eau dans le CO2 soit gale 80 % de sa solubilit dans le CO2 ces conditions. La solubilit de leau dans le CO2 a t dtermine laide de lquation de Chrastil (1982) qui permet de calculer la solubilit (en g/L de CO2) en fonction de la temprature et de la pression du solvant :
a +b k T
s= e
(III.4.)
Pour leau, les paramtres de cette quation prennent les valeurs spcifiques k = 1,549 ; a = -2826,4 et b = -0,807 [Chrastil (1982)]. La variataion de la masse volumique du CO2 () en fonction de la pression P pour diverses tempratures T a t obtenue par la base de donnes standard NIST (http://webbook.nist.gov/chemistry/)
La solubilit de leau dans le CO2 280 bar et 60 C, dtermine par cette quation, est s = 2,98 g/L. Nous avons donc travaill 80 % de cette valeur soit s = 2,384 g/L.
- 83 -
La solubilit de leau dans le CO2 tant faible, le dbit deau utiliser pour travailler s avec un dbit de CO2 gal 5 g/min tait trop faible par rapport aux capacits de la pompe de co-solvant. En consquence, nous avons t amens augmenter le dbit de CO2 20 g/min. Le dbit deau correspondant s est alors gal 0,066 g/min, ce qui correspond 0,33 % du dbit total. Trois isothermes de solubilit de leau dans le CO2 obtenus grce la corrlation de Chrastil et la concentration en eau opratoire pour cette tude sont prsentes sur la Figure III.18.
3,5
Solubilite de l'eau dans le CO2, g/l
3 2,5
1,5
1 0,5
0 0 50 100 150 200 250 300 350 400
Pression, bar
Figure III.18. Isothermes de solubilit de leau dans le CO2 modliss par lquation de
Chrastil : 60 C ; 50 C ; 45 C. concentration opratoire du co-solvant eau dans le CO2 pour cette tude (280 bar, 60C)
- 84 -
9 Rendement de l'extrait total supercritique, % 8 7 6 5 4 3 2 1 0 1 2 3
SC Figure III.19. Rendement de lextrait total supercritique YEX en fonction du type de co-
solvant utilis. P =280 bar, T = 60 C, dure 5 h : 1 Sans co-solvant, dbit de CO2 5 g/min ; 2 0,33 % co-solvant eau, dbit de CO2 20 g/min; 3 15 % co-solvant thanol, dbit du CO2 5 g/min
La fig. III.19. prsente une comparaison des rendements obtenus sans co-solvant et avec de leau et de lthanol comme co-solvants. Avec leau, le Rendement de lextrait total supercritique diminue par rapport au rendement obtenu sans co-solvant, et ce alors que le dbit de solvant est 4 fois plus lev. De manire gnrale, leau, qui est peu soluble dans le CO2, a tendance masquer certains composs dans la matrice vgtale, qui de ce fait ne peuvent plus tre facilement extraits par le CO2 [49]. Un autre effet ngatif que leau peut causer est la formation dagrgats de particules, ce qui conduit une extraction irrgulire dans le lit [60] En effet, mme en travaillant sous la concentration de saturation, il est tout fait envisageable que la matire vgtale r-adsorbe de leau sur certaines zones, favorisant la formation dagrgats. Cependant, lorsquon sintresse la slectivit de lextraction, on observe que le
SC (voir figure III.20.) devient plus important lorsque Rendement de lacide rosmarinique YAR
leau est employe en tant que co-solvant. Ceci provient du fait que la polarit du mlange CO2+eau est plus importante que celle du CO2 seul, ce qui en fait un meilleur solvant pour lAR.
- 85 -
0,06
Rendement de l'acide rosmarinique, %
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
0 1 2 3
SC Figure III.20. Rendement de lacide rosmarinique YAR en fonction du type de co-solvant
utilis P =280 bar, T = 60 C, 1 Sans co-solvant, dbit du CO2 5 g/min ; 2 0,33 % cosolvant eau, dbit du CO2 20 g/min; 3 15 % co-solvant thanol, dbit du CO2 5 g/min
En ce qui concerne la Concentration en acide rosmarinique dans lextrait C AR (voir figure III.21.), on voit la mme tendance denrichissement de lextrait en AR, plus fortement marque en cas du co-solvant thanol.
Concentration en acide rosmarinique dans l'extrait, % 1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 1 2 3
Figure III.21. Concentration en acide rosmarinique dans lextrait C AR en fonction du type de
co-solvant utilis, P =280 bar, T = 60 C, 1 Sans co-solvant, dbit du CO2 5 g/min ; 2 0,33 % co-solvant eau, dbit du CO2 20 g/min; 3 15 % co-solvant thanol, dbit du CO2 5 g/min - 86 -
En comparant les rsultats des expriences conduites avec ces deux co-solvants, il apparait vident, que lthanol est un co-solvant plus appropri pour liminer des substances non-dsires lors du pr-traitement supercritique de la matire vgtale.
III.3.2.3. Cintique dextraction supercritique avec du co-solvant thanol La cintique dextraction supercritique sans co-solvant, prsente prcdemment, a t tudie par une technique indirecte, consistant suivre la perte de masse de la matire premire au cours du temps. Cette approche est techniquement difficile mettre en uvre dans le cas de lutilisation dun co-solvant, puisquil faudrait pouvoir scher la matire vgtale pour liminer le co-solvant chaque point de mesure. En consquence, la cintique dextraction avec du co-solvant a t dtermine en suivant la masse dextrait rcupre au cours du temps. Cependant, il faut noter que cette technique est relativement imprcise en raison de certaines pertes dextrait, car celui-ci peut-tre retenu dans linstallation, sur les parois des tuyaux par exemple. Afin damliorer la prcision des rsultats, nous avons appliqu lapproche suivante : lextrait a t priodiquement collect pour obtenir linformation approximative sur lvolution du processus. En fin dextraction, nous avons compar la quantit dextrait accumul avec la perte de masse dans lextracteur. La diffrence entre ces deux quantits a t prise comme mesure de la quantit retenue dans les tuyaux (nous avons nglig les autres pertes.). Ensuite, toutes les mesures prcdentes ont t corriges en tenant compte de la masse dextrait retenue. La comparaison des cintiques du processus sans et avec co-solvant est illustre sur la figure III.22.
- 87 -
250
200 g extraits / kg mat. prem.
150
100
50
0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 kg CO2 / kg mat. prem
Figure III.22. Linfluence de la prsence de co-solvant thanol sur la cintique dextraction.
P = 280 bar, T = 60 C, dbit total = 5 g/min : avec du 15 % co-solvant; sans cosolvant
Concernant le dbut de lvolution de ces courbes, il serait hasardeux de tirer de conclusions, parce que les mthodes dvaluation de lextrait sont diffrentes et les courbes trop proches. Par contre, la fin des courbes dextraction est sensiblement diffrente, et dans le cas dextraction sans co-solvants, on observe le commencement dun plateau vers 107 kg CO2 / kg de matire premire, ce qui signifie que lextraction sarrte. Lorsquon travaille avec du co-solvant, le plateau nest toujours pas rsent vers 455 kg CO2 / kg mat. premire, signifie que lextraction continue. Cela met bien en vidence que le co-solvant modifie trs significativement la capacit dextractiont du CO2. Le changement de la polarit d lalcool ajout est la raison de lextraction dautres catgories des substances (polaires), devenant solubles dans ces conditions.
III.3.3. Influence de la gomtrie de la cellule dextraction
Afin dtudier linfluence de la configuration gomtrique de la cellule dextraction sur le processus dextraction, nous avons examin linfluence des dimensions gomtriques de la cellule sur le rendement. Nous avons test quatre configurations diffrentes :
- 88 -
1) La cellule originelle de hauteur 152 mm, diamtre intrieur 32 mm donc de volume 122 mL. 2) La cellule de mme hauteur (152 mm), mais de diamtre intrieur rduit. Pour cela, une pice annulaire de hauteur 152 mm et diamtre intrieur 16 mm est plac dans la cellule originale. Dans cette configuration, le volume de la cellule est gal 30,5 mL 3) La cellule de diamtre de la cellule originelle (32 mm) mais de hauteur rduite 38 mm. Le volume de la cellule est donc le mme que dans le cas 2 (30,5 mL). Afin de raliser cette rduction de volume, la cellule originelle a t partiellement remplie laide de billes de verre, sur lesquelles un support en inox perfor a t pos et au-dessus duquel la matire premire a t charge. 4) Une cartouche type Soxhlet (papier filtre, hauteur 52 mm, diamtre extrieur 32 mm, diamtre intrieure 28 mm, volume 32 mL) a t place dans la cellule dextraction sur le support inox perfor, et remplie avec la matire premire puis bouche avec un couvercle du mme matriau que la cartouche elle-mme. Les quatre cellules ont t remplies de diffrentes quantits de matire selon les volumes, mais de telle manire que la masse volumique du lit dans chaque cas soit la mme. Toutes les expriences ont t menes dans les conditions limites de pression et de temprature de linstallation, soit 280 bar et 60 C. Ces conditions ont t choisies pour maximiser le pouvoir solvant du CO2 qui, dans le cas gnral, augmente avec la pression. Le dbit de CO2 est gal 5 g/min, la dure dextraction 330 min et la taille moyenne des particules est de 0,94 mm. Toutes les expriences ont t ralises en circuit ouvert. Les
SC sont prsents sur la rsultats, exprims en Rendement de lextrait total supercritique YEX
figure III.23.
- 89 -
Figure III.23. Rendement de lextrait total supercritique en fonction de la gomtrie de la
cellule. P = 280 bar, T = 60 g C ; Dbit de CO2 = 5 g/min, dure dextraction 330 min, Taille des particules 0,94 mm
Un premier rsultat surprenant est la diffrence significative entre lextraction du mme volume (30.5 mL et 32 mL) pour des configurations gomtriques diffrentes. Plusieurs explications peuvent tre donnes ces comportements. Pour mieux comprendre la situation, nous utiliserons un modle mathmatique de lopration dextraction et les conclusions seront prsentes dans. III.3.4.5.
III.3.4. Modlisation
De nombreux modles mathmatiques dcrivant lextraction avec des fluides supercritiques sont rapports dans la littrature [60, 67, 79-81, 89]. En gnral, trois types dapproches sont appliques (1) empirique ; (2) base sur lanalogie transfert de matirechaleur ; (3) intgration du bilan diffrentiel de transfert de masse dans un lit fixe [60]. La plupart des modles considrent des particules de gomtrie sphrique [79, 67, 80, 81, 90]. Cependant, certains modles tiennent compte de la gomtrie relle des particules vgtales (feuilles et tiges) [81, 89]
- 90 -
Pour dcrire nos expriences, nous avons appliqu 5 modles diffrents : le modle tn [39], le Single Sphere Model [90], le Single Plate Model [81], le modle de Reverchon [89] et le modle de del Valle [80]. A cause de leurs approches et hypothses spcifiques, ils refltent de manire diffrente le contact solide-fluide, ainsi que le transfert de masse. Notre objectif a t de dterminer des modles donnant des rsultats proches de la ralit, la slection tant base sur la meilleure correspondance avec les donnes exprimentales. Dans toutes les applications, nous avons considr le solut comme un pseudocomposant unique. III.3.4.1. Modle tn [39] Cest un modle empirique simple prsentant lextraction contrle par la diffusion interne. Il est bas sur lhypothse que lisotherme dextraction a une forme semi-sigmodale.
III.3.4.1.1. Equation gnrale
Le modle est dcrit par lquation suivante :

k '.t n E (% ) = 1 exp n' x100
(III.5.)
o E (%) reprsentant la masse extraite ds le dbut jusquau moment t par rapport la masse totale extraite la fin du processus, t (min) est le temps courant du processus, n est une constante relie lordre de la courbe, k (min-n) a la signification dun coefficient de transfert qui englobe tous les phnomnes de transport ayant lieu lors du procd. Linconvnient de ce modle est tout dabord la supposition que le procd dextraction prend la forme dune fonction mathmatique arbitraire.
- 91 -
III.3.4.1.2. Rsultats du modle compars avec lexprience Les valeurs de k et n donnant une erreur minimale entre la courbe mathmatique et les rsultats exprimentaux pour des divers rgimes opratoires sont prsentes dans le tableau III.1.
Tableau III.1. Valeurs des constants k et n calcules pour le modle
P, bar
T, C
Taille des particules, mm
k, min-n
200 250 280 200 250 280 250 280
40 40 40 60 60 60 60 60
0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 0,94 1,33 1,33
0,021 0,025 0,029 0,044 0,047 0,036 0,049 0,018
0,94 0,84 0,84 0,86 0,81 0,84 0,74 1,13
La figure III.24. prsente des exemples du bon accord entre nos rsultats exprimentaux (points) et le modle (courbes).
100 90 80 70 60 E, % 50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 temps, min Modle Eprience
a) - 92 -
100 90 80 70 60 E, % 50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 temps, min Modle Exprience
b)
Figure III.24. Evolution de la masse extraite par rapport la masse totale extraite E au
cours du temps P = 250 bar, taille des particules 0,94 mm : a) T = 40 C; b) T = 60 C
Malgr le bon accord, il faut bien noter que, vu sa simplicit et le fait quil est bas sur le choix arbitraire dune fonction mathmatique, ce modle donne peu dinformation utile car les paramtres k et n obtenus ont trs peu de signification physique. Cependant, il peut servir pour lisser les courbes des donnes exprimentales.
- 93 -
III.3.4.2. Single Sphere Model [90] Ce modle admet que le solut est uniformment distribu dans une particule de forme sphrique et le transfert interne est limitant. La prsentation mathmatique est simplifie en prenant en compte uniquement le bilan de matire dans la phase solide.
III.3.4.2.1. Hypothses gnrales du modle
- On ne tient compte que du transfert de matire interne ; - Le solut est extrait dun lit compos des sphres inertes poreuses ; - Initialement, le solut est uniformment distribu dans les particules sphriques ; - La concentration dans la phase fluide est ngligeable par rapport celle dans la phase solide. En consquence, la masse extraite du lit est gale celle extraite des particules. - Toutes les particules chaque moment donn sont la mme tape dextraction;
La dernire hypothse considre donc quil ny a pas que les gradients de concentration suivant la hauteur du lit fixe, que ce soit dans le solide ou le fluide, sont ngligeables.
La forme mathmatique exprime le bilan de masse en termes de taux dextraction
E (t ) 6 =1 2 Einf
n 2 . 2 .De .t 1 exp 2 r2 n =1 n
(III.6.)
o E(t) et Einf (%) sont les taux dextraction au temps t (min) et aprs le temps infinie, De (m2/s) est la diffusivit effective dans la matrice vgtale, r (m) est le rayon des particules, n est une variable mathmatique muette
- 94 -
IV.3.4.2.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux Ce modle prsente lvolution du taux dextraction au cours du temps. Certains de ses paramtres peuvent tre pralablement quantifis exprimentalement afin de diminuer le nombre des paramtres inconnus et faciliter la solution: La valeur du taux dextraction au temps infini Einf a t dtermine par la partie asymptote de lisotherme dextraction value 330 min. Le rayon des particules a t valu partir de la taille moyenne des fractions obtenues par tamisage de la matire vgtale moulue. Le seul paramtre ajuster est alors la diffusivit effective du pseudo compos au travers du solide De. Figure III.25. a) et b) prsente les meilleurs solutions du modle deux tempratures diffrentes.
100 90 80 70 60 E, % 50 40 30 Exprience 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 Temps, min Modle
a) 40C
- 95 -
100 90 80 70 60 E, % 50 40 Exprience 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 Temps, min Modle
b) 60C Figure III.25. Evolution du taux dextraction E au cours du temps P = 250 bar, taille
diamtre des particules 0,94 mm. a) T = 40 C b) T = 60 C
On voit bien qu 40 C la solution du modle ne reproduit pas correctement les rsultats exprimentaux de la priode initiale. Ce dsaccord peut tre attribu au fait que le modle ne peut pas tenir compte dune phase prliminaire de limitation par la solubilit. Comme nous avons montr (III.3.1.), basse temprature cette limitation est significative et sa non-prise en compte ne correspond pas la ralit. Nous prsentons dans le tableau III.2. les valeurs de la diffusivit effective De dtermines partir de ce modle. La valeur de De est dun ordre de grandeur cohrent avec les phnomnes de diffusion dans les solides. On peut constater quelle est surtout dpendante de la temprature (peu de la pression et de la taille) ce qui est aussi cohrent avec le phnomne physique, mais cependant la dispersion des rsultats rend ce modle peu convainquant.
- 96 -
Tableau III.2. Valeurs de la diffusivit effective De dtermines par le modle Single Sphere
dp, mm 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0.94 0.94 0.94 0.94 0.94 0.94 1.3 1.3 1.3 1.7
T, C 40 40 40 60 60 60 60 60 60 60
P, bar 200 250 280 200 250 280 200 250 280 280
Dex1012, m2/s 4,7 3,15 4,0 7,6 7,4 5.5 12 15 4,7 3,15
III.3.4.3. Single Plate Model [81]. Malgr laccord entre les rsultats du modle prcdent pour les expriences plus haute temprature (fig. III.26.b), lorsque la limitation par la solubilit est faible, ce modle ne concerne que les particules sphriques. Cela nous a men chercher dautres modles prenant mieux en compte la gomtrie relle des particules que nous utilisons Ce modle est similaire au dernier dcrit ci-dessus, sauf quici il sagit de particules plates, ce qui correspond la forme dominante de la matire vgtale utilise qui est constitu essentiellement de feuilles broyes.
III.3.4.3.1. Hypothses gnrales du modle Cest toujours un modle simplifi bas sur le bilan de matire dans la phase solide et exprim en termes de taux dextraction. - On ne tient compte que du transfert de matire interne - Initialement, le solut est uniformment distribu dans les particules plates - Toutes les particules chaque moment du temps sont la mme tape dextraction ; - Le transfert interne est dcrit par la diffusion par lpaisseur de la particule - La rsistance du transfert de masse du film stagnant proche du solide est ngligeable - Le contenu de solut dans la phase fluide est ngligeable par rapport ce dans la phase solide. En consquence, la masse extraite du lit est gale celle extraite de la particule.
- 97 -

(2n + 1)2 . 2 .De .t E (t ) 4 = 1 exp 2 2 Einf n =1 (2n + 1)
(III.7.)
o E(t) et Einf, (%) sont les taux dextraction au temps t (min) et aprs le temps infini, De (m2/s) est la diffusivit effective dans la matrice vgtale, (m) est lpaisseur des particules plates,.
III.3.4.3.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux Comme le modle prcdent, lquation (III.7.) exprime lvolution du taux dextraction au cours du temps. Les valeurs des paramtres suivants ont t dtermines partir des rsultats exprimentaux : La valeur du taux dextraction temps infini Einf a t dtermine par la partie asymptote de la courbe dextraction isotherme, 330 min. Lpaisseur moyenne des feuilles a t dtermine par la microscopie lectronique balayage MEB (ou SEM abrviation pour Scanning Electron Microscopy) et estime une valeur moyenne de 30 m (voir II.1.). Il en reste un paramtre ajustable - la diffusivit effective De. La figure. III.26. prsente la comparaison des solutions du modle (courbes) avec des rsultats exprimentaux (points) pour lextraction de la mlisse aux diverses tempratures.
- 98 -
100 90 80 70 60 E, % 50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 temps, mm Modle Exprience
a) 40 C
100 90 80 70 60 E, % 50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 Temps, min Modle Exprience
b) 60 C Figure III.26. Evolution du Taux dextraction E au cours du temps P = 250 bar, taille des
particules 0,94 mm. a) T =40 C ; b) 60 C
- 99 -
Comme dans le cas prcdent, le modle dcrit plus prcisment le processus 60 C (fig.III.26. b). Cela peut tre toujours attribu au fait que le modle ne tient pas compte dune probable limitation initiale par la solubilit. Elle est plus faible 60 C ce qui rsulte en meilleur accord entre le modle et les rsultats exprimentaux. Cependant, comme il tait montr exprimentalement (voir III.3), 40 C la limitation de solubilit est plus importante (fig. III. 26 a) et, par consquence, le modle dcrit moins correctement la priode initiale, devenant plus prcis dans la phase o la rsistance interne prdomine. Les valeurs de la diffusivit effective De, identifies par ce modle, sont prsentes dans le Tableau III.3.
Tableau III.3. Valeurs de la diffusivit effective De dtermines par le modle Single Plate
dp, mm 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0.94 0.94 0.94 0.94 0.94 0.94 1.3 1.3 1.3 1.7
T, C 40 40 40 60 60 60 60 60 60 60
P, bar 200 250 280 200 250 280 200 250 280 280
Dex1015, m2/s 1.6 1.65 1.9 2.5 2.5 2.1 1.7 2.0 2.6 2.2
On constate que la valeur de la diffusivit effective est trs infrieure (3 ordres de grandeurs) celle obtenue avec le modle sphrique. Cela est trs probablement une consquence mathmatique directe de la diminution de la longueur caractristique de transfert (de 500 m 15 m) soit un facteur 30. Si lon rappelle que ce type de modle est dpendant de la longueur caractristique au carr, nous pouvons y retrouver lexplication de la diminution de la valeur de la diffusivit effective. Comme la ralit physique de notre matriel vgtal est probablement mieux dcrite par ce modle, ce type de modle nest capable de dcrire que le cas particulier du transfert contrl par la diffusion interne. Nous avons vu que les priodes initiales des extractions sont visiblement limites par la solubilit
- 100 -
du compos dans le fluide. Ce semble donc inapplicable la description du processus de transfert sur lensemble de la courbe dextraction. De plus il ne peut pas rendre compte de leffet de la gomtrie du lit fixe dextraction.
III.3.4.4. Modle dextraction en lit fixe [89] Ce modle, bas sur lintgration du bilan diffrentiel de masse au long du lit, tient compte la gomtrie des particules et du processus de percolation dans un lit fixe.
III.3.4.4.1. Hypothses gnrales - Lextrait est considr comme une seule substance - La masse volumique du solvant et son dbit sont constants le long du lit - La dispersion axiale est nglige - Le procd est contrl par la diffusion interne.
III.3.4.4.2. Equations gnrales Le bilan de masse sur un lment dh de la hauteur dextracteur est exprim par:
c c c =0 + (1 )V + V uV t t h
(III.8)
Le flux de transfert de matire partir des particules solides peut tre exprim comme :
_ _ (1 )V c = k s a p c c* t _
(III.9)
Conditions initiales : Au dbut, la phase fluide ne contient pas de solut, c..d. tout le solut se trouve dans la phase solide :

t = 0, c = 0 and c = c 0
(III.10)
- 101 -
Conditions aux limites : La concentration en solut dans la phase fluide entrant dans lextracteur est gale zro :
h = 0, c(h, t) = 0
(III.11)
Dans les quations (III.8 - III.11) u (m/s) est la vitesse superficielle du solvant, V (m3) est le volume de la cellule dextracteur, c (kg/m3) et c (kg/m3) sont les concentrations en
solut dans la phase fluide et solide, respectivement. c0 (kg/m3) est la concentration initiale
dans la phase solide, c* (kg/m3) est la concentration en solut la surface solide-fluide (selon
le modle de la rsistance interne limitante, elle est suppose en quilibre avec la phase fluide), h (m) est la cordonne gomtrique au long du lit, est la porosit du lit, t (s) est le temps, ks (m/s) est le coefficient de transfert de masse interne, a (m2) est la surface totale des particules. Pour lquation (III.9), Reverchon [89] a propos de dfinir un temps de diffusion interne ti (s) caractrisant le procd contrl par diffusion interne et dpendant de la gomtrie des particules (surface a et volume V)
ti =
(1 )V
ks a p
(III.12)
Lquation (III.9.) devient alors : 1 _ _ c = c c* ti t

_
(III.13)
Villermaux (1987) a propos une relation entre le temps de diffusion interne et la diffusion interne De : l2 ti = ' De (III.14)
est un coefficient gomtrique (gale 3/5 pour des particules sphriques, pour des particules cylindriques et 1/3 pour des particules plates), l = Vp/ap est une dimension caractristique linaire.
- 102 -
En gnral, une relation dquilibre linaire est utilise pour rsoudre les quations (III.8) et (III.9) dans le cas de lESC.
c = K pc *
(III.15)
Kp est le coefficient de distribution volumtrique du solut entre la phase solide et fluide en quilibre. Spiro and Kandiah (1990) [97] ont propos une relation empirique pour dterminer ce coefficient dans le cas de la matire vgtale et du CO2 supercritique. K p = Km
(III.16)
o et s (kg/m3) reprsentent la masse volumique du fluide et du solide respectivement, Km est un facteur de partition. Beaucoup dauteurs proposent des valeurs de Km dans lintervalle 0,2 0,3 [89, 97]. Pour nos calculs, nous avons utilis une valeur similaire celle propose par Spiro [97].
III.3.4.4.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux La solution de ce modle prsente lvolution du taux dextraction au cours du temps en sortie de lextracteur. . Les quations du modle ont t rsolues en utilisant un programme numrique bas sur la mthode dintgration de Runge-Kutta Fehlberg [96]. Ce modle a t rsolu pour particules de trois formes: sphriques, plates et cylindriques, ainsi que pour un mlange de particules plates et cylindriques. Trois fractions de particules ont t utilises : 0,94, 1,33 et 1,7 mm. Les conditions opratoires ont t toujours les mmes : P = 280 bar, T = 60 C et dbit du CO2 = 5 g/min. Les paramtres pralablement dtermins exprimentalement sont lpaisseur moyenne des feuilles (plates), le diamtre moyen des tiges (cylindres) (les deux par SEM, voir II.1.), la taille moyenne des particules (par tamisage, voir II.1.), la rpartition quantitative des diffrentes formes des particules (dtermine par observation visuelle gale 9/1,en nombre (plates/cylindres)). et la porosit du lit. Ce dernier a t calcul par la formule suivante :
=1
lit s
(III.17)
o la masse volumique du lit (lit, kg/m3) a t calcule en divisant la masse de la matire premire par le volume du lit. La masse volumique de la mlisse est s = 799 kg/m3 (voir II.1.). Le seul paramtre ajuster est alors la diffusivit interne De.
- 103 -
En postulant la forme sphrique des particules, nous avons identifi la valeur de De = 6.10-12 m2/s avec les particules de 0,94 mm. La plus petite fraction de particules a t choisie pour deux raisons : la dimension caractristique est plus similaire et moins dpendante de la forme lorsque la taille des particules est plus petite ; avec cette fraction nous avons obtenu le rendement dextraction le plus lev.
Cette valeur identifie de De (selon le modle elle ne doit pas dpendre pas de la taille des particules) a t utilise pour obtenir des solutions du modle pour les autres fractions (1,33 et 1,77 mm). Le rsultat (prsent sur la figure III.27.) nest pas satisfaisant, probablement cause de lutilisation dune gomtrie sphrique non-relle et la limitation de solubilit nglige.
15
10
Yex, % 5 Modle 0.94 mm Exp. 1.33 mm Exp. 1.7 mm Exp. 0 0 50 100 150 200 Temps, min 250 300 350 400
Figure III.27. Application du modle de Reverchon pour la gomtrie sphrique.
P=280 bar, T = 60 C, dbit du CO2 = 5 g/min
- 104 -
De mme, ce modle a t rsolu pour des formes cylindriques et plates. Avec la fraction de 0,94 mm nous avons obtenu les valeurs de la diffusivit interne De = 1.5.10-11 et 3.10-14 m2/s respectivement. La correspondance modle exprience est meilleure dans le cas de forme plate (fig. III.28.b) que pour des cylindres (fig. III.28. a). Cela peut tre considr comme un rsultat logique parce que la plupart des particules dans le lot soumis extraction ont la forme plate (feuilles). Dans la plupart des cas, la dernire priode de rsistance interne est bien dcrite par le modle.
15
10
Yex, % 5 Modle 0.94 mm Exp. 1.33 mm Exp. 1.7 mm Exp. 0 0 50 100 150 200 temps, min 250 300 350 400
(a)
- 105 -
15
10
Yex, % 5 Modle 0.94 mm Exp. 1.33 mm Exp. 1.7 mm Exp. 0 0 50 100 150 200 Temps, min 250 300 350 400
(b)
Figure III.28. Solution du modle de Reverchon pour P=280 bar, T = 60 C, dbit du CO2 =
5 g/min. a) gomtrie cylindre ; b) gomtrie plate.
Afin dtre le plus proche de la situation relle, nous avons dtermin par observation visuelle la rpartition quantitative des diffrentes formes et nous lavons trouv gale 9/1 en nombre (plates/cylindres). Ensuite le modle a t rsolu pour le mlange des particules dans cette proportion et une valeur de la diffusivit interne De = 2.10-12 m2/s a t identifie Dans ce cas nous avons obtenu la meilleure correspondance entre le modle et les points exprimentaux, justifi par les rsultats de lcart type (voir tableau III.4.). Cette valeur est sensiblement diffrente de celle obtenue par le modle single plate , alors que la forte proportion de particules plates (9/1, en nombre) pourrait laisser penser que les phnomnes sont assez similaires. Cependant, si lon recalcule la proportion en masse des particules cylindriques, on obtient alors une priorit lgre pour les particules cylindriques, 5,6/4,4 par rapport aux particules plates.
- 106 -
Tableau III.4.Ecart type entre les rsultats thoriques et exprimentaux pour le rendement
dextrait. Forme particules Sphres des Taille particules, mm 1,33 1,70 Cylindres 1,33 1,70 Plates 1,33 1,70 Plates + Cylindres 1,33 1,70 1,57 2,26 1,19 0,80 0,43 0,47 0,37 0,34 des Ecart type
On peut conclure que ce modle reprsente relativement bien la dernire priode dextraction contrle par la diffusion interne. Certaines inconsistances sont manifestes pendant la priode initiale dextraction rapide, du fait de la non-prise en compte de la limitation de solubilit. Les rsultats ont pu tre amliors en introduisant la gomtrie relle des particules.
III.3.4.5. Modle de J. M. del Valle [80] Ce modle est bas sur le concept du modle de Sovova [83], selon lequel on peut distinguer deux types de cellules vgtales- casses et intactes - au sein des particules. Les cellules casses par le prtraitement mcanique sont localises prs de la surface des particules, tandis que le noyau des particules contient des cellules indemnes. En consquence, on peut postuler lexistence de deux tapes: au dbut - une extraction relativement rapide partir des cellules casses, suivie par une extraction plus lente partir des cellules indemnes, essentiellement contrle par le transfert de masse dans la phase solide. Le modle, dvelopp originalement pour des particules sphriques, tient compte de la rsistance du transfert de masse interne, ainsi que de la rsistance de solubilit et du transfert externe
- 107 -
III.3.4.5.1. Hypothses gnrales du modle
- La vitesse superficielle du fluide est constante
- Les proprits physiques du fluide sont constantes - Perte de charge et gradient de temprature dans le lit ngligeables - Force motrice linaire pour le transfert de masse interne - Les concentrations du solut dans le fluide Y (g/kg) et dans la phase solide X (g/kg matire premire) ne dpendent que de la position axiale au long du lit h et du temps dextraction t.
III.3.4.5.2. Equations gnrales Le bilan diffrentiel de matire dans la phase fluide et solide est prsent par les quations :
Le bilan phase fluide : Y u Y + =J t h
(III.18)
Le bilan phase solide :
s (1 )
X = J t
(III.19)
Les conditions initiales et aux limites sont :
t = 0, X = X0 and Y= Y* h = 0, Y(h, t) = 0 h=H, Y / h = 0
(III.20)
(III.21.)
(III.22)
o : X0 (g/kg matire premire) est la concentration initiale dans la phase solide, H (m) est la hauteur totale du lit, J (g/(m3.s) est la quantit du solut transfre du solide au fluide par unit de volume du lit, Y* (g/kg CO2) est la solubilit du solut dans le CO2 supercritique.
- 108 -
Deux expressions pour le flux de transfert J sont proposes [49] - pour la priode du contrle par le transfert externe o X Xf (Xf reprsente la quantit de solut dans les cellules indemnes) J = k f As (Y * Y )
(III.23)
- pour la priode contrle par la diffusion interne o X Xf. Y J = k s As s X 1 Y * (III.24)
Ici kf (m/s) et ks (m/s) sont les coefficients de transfert de masse dans la phase fluide et solide, As (1/m) est la surface spcifique du lit de particules Afin de reflter linfluence de la forme relle non-sphrique des particules, nous avons remplac le terme As (originalement dfini pour une forme sphrique des particules) par des termes modifis correspondant la gomtrie plate ou cylindrique. Nous les avons obtenus en prenant le rapport de la surface et du volume des particules : - Pour les plates lexpression prend la forme :
A= 4 + 2d p d p (III.25)
- Pour les cylindres elle devient :

4 + d p 2 A= d p
(III.26.)
avec (m) - lpaisseur moyenne des plates ou le diamtre moyen des cylindres, dp (m) - la taille des particules mesure par tamisage.
III.3.4.5.3. Comparaison avec les rsultats exprimentaux Les rsultats sont prsents en termes de la masse extraite par unit de masse de matire premire trace en fonction du temps. . Les quations du modle ont t rsolues en utilisant un programme numrique bas sur la mthode dintgration de Runge-Kutta Fehlberg [96]. Comme expliqu ci-dessus, le modle a t rsolu avec des expressions
- 109 -
modifies de la surface spcifique (III.25, III.26) correspondant la forme relle des particules. Nous avons dabord appliqu le modle pour la gomtrie plate, ensuite nous avons appliqu le modle pour un mlange de particules plates et cylindriques dans sa proportion value 9/1, en nombre. Le coefficient de transfert de masse dans la phase fluide (kf) a t calcul par la relation de Tan et al.[80] : Sh = 0.38 Re 0.83 Sc 0.33
(III.27) Re =
Sh =
kf dp D12 (III.28)
ud p
(III.29)
Sc =
D12
(III.30)
Dans ces quations, le coefficient de diffusion binaire D12 est gal 3,09.10-8 m2/s. Il a t dtermin par la relation propose par Catchpole and King [91]
D12 = 5,152DcTr(r-2/3 0,4510)R/X, 1 < r < 2,5
(III.31)
(D12 calcul pour le pseudo composant suppos proche du citral. ) Les valeurs de la diffusivit critique du solvant (Dc), et les coefficients Tr et r sont donns dans cette mme publication [91];
Le coefficient correctif R a t calcul par : R = X0,17
2 < X < 10
(III.32)
Le paramtre identifiant le rapport taille/masse X t calcul gale 6,16 par lquation suivante [91] : X = (A + (Vc2/Vc1)1/3)2/(1 + M1/M2)
(III.33)
Ou M1 et M2 (g/mol) sont les masses molaires du solvant et du solut respectivement. La valeur critique du solvant a t prise du tableau dans [91] et le volume critique du solut a t calcul par lquation de Marrero et Gani (2001) [92] :
- 110 -
Vc2 = NiVci + Vc0
(III.34)
o NiVci est la somme des volumes critiques des groupes fonctionnelles du solut et Vc0 est paramtre ajustable additionnel dont la valeur gal 7,95 cm3/mol a t publie dans [92] Dans ce modle, il reste alors deux paramtres ajuster : le coefficient de transfert pour la phase solide ks et la quantit de solut dans les cellules indemnes Xf. Pour chaque exprience, la concentration initiale dans la phase solide X0 a t dtermine partir de la quantit extraite aprs 330 min. Y* a t dtermine par la partie initiale linaire de la courbe cintique qui correspond lhypothse de contrle de la solubilit. Pour des particules plates, nous avons commenc nos calculs avec des valeurs de ks obtenues partir des valeurs respectives de la diffusivit interne De du modle de Reverchon : dans les quations (III.12.) et (III.14), en liminant ti, les valeurs de ks ont t calcules. Ces valeurs ont t ensuite soumises optimisation avec les valeurs de Xf, en minimisant lcart type. Un exemple des rsultats de cette optimisation est prsent sur la figure III.29.
Ecart type 2,4-3 1,8-2,4 1,2-1,8 0,6-1,2 0-0,6 100 92 85 77 69 62 54 46 38 Xf/X0, % 31 23 15 9,50E-10 2,50E-10 4,00E-10 6,50E-10
,m ks /s
Figure III.29. Optimisation des valeurs de ks et Xf pour des particules plates, P = 280, T =
60 C, taille des particules = 0,94 mm.
- 111 -
Les solutions du modle de del Valle appliques pour des cintiques dextraction des particules plates de taille diffrente sont illustres sur la figure III.30.
15
10
Yex, % 5 Modle 0,94 mm Exp. 1,33 mm Exp. 1,77 mm Exp. 0 0 50 100 150 200 Temps, min 250 300 350 400
Figure III.30. Rsultats des simulations (courbes) pour des particules plates compares aux
rsultats exprimentaux (points), P = 280 bar, T = 60 C, dbit du CO2 = 5 g/min
Les valeurs de ks identifies par les deux modles et Xf identifis par le modle de del
Valle sont rapportes dans le tableau III.5.
Tableau III.5. Valeurs de ks et Xf calcules par des modles diffrentes (particules plates)
dp, mm 0.94 1.33 1.7
ks.1010, m/s ks.1010,
m/s Xf/X0, % (del Valle) 69 71 73
(Reverchon) (del Valle) 7,01 6,89 6,83 4 6,5 8,5
- 112 -
La relativement faible diffrence entre les valeurs de ks issues des deux modles peut tre attribue au fait que le modle de Reverchon ne tient compte que de la diffusion interne.
Selon del Valle [80], le coefficient ks dpend uniquement de la structure de la matrice vgtale, cest--dire, du prtraitement de la matire premire et de la taille des particules, mais ks reste indpendant de la temprature et la pression. Il est possible donc dutiliser les valeurs identifies de ks et Xf pour rsoudre le modle pour les autres conditions de la temprature et la pression. On voit sur la figure III.31. une bonne correspondance des simulations et des points exprimentaux, lorsque les conditions de pression et de la temprature ont chang. Cela peut tre considr comme preuve que le coefficient de transfert de masse interne ks est effectivement indpendant de la pression et la temprature du procd.
10
Yex, % 5
Modle Exprience
0 0 50 100 150 200 250 300 350 Temps, min
a)
- 113 -
10
Yex, % 5
Modle Exprience
0 0 50 100 150 200 250 300 350 Temps, min
b) Figure. III.31. Modle de del Valle compar aux rsultats exprimentaux.
Particules plates avec dp = 0.94 mm, T = 40 C, dbit de CO2 = 5 g/min, a) P = 200 bar ; b) P = 250 bar
En ce qui concerne le modle adapt pour correspondre la proportion relle des particules plates et des cylindriques (9/1, en nombre), nous avons rpt la procdure dj dcrite. Pour les deux cas (plates et plates+cylindres) nous avons obtenu quasiment le mme cart type. Les valeurs identifies de ks et Xf sont prsentes dans le tableau III.6.
Tableau III.6. Valeurs de ks et Xf calcules par des modles diffrentes (plates+cylindres)
dp, mm 0.94 1.33 1.7
ks.1010, m/s
Xf/X0, %
5 6,5 10
69 71 73
- 114 -
En comparant les rsultats pour ks et Xf entres les deux cas, on voit que Xf ne change pas, ce qui signifie que la quantit du solut dans les cellules intactes reste la mme. Au niveau de ks, on ne voit quun changement lger entre les deux cas, ce qui peut tre expliqu par la quantit relativement faible des particules cylindriques par rapport aux plates dans le cas du mlange plates+cylindres. Contrairement aux autres modles tests, dans ce cas nous avons obtenu des simulations proches la ralit mme pour des conditions opratoires caractrises par une la prsence dune limitation par la solubilit (temprature 40 C). Evidemment, cela est d au fait que ce modle tient compte de cette rsistance prpondrante pendant la priode initiale. Par consquence, le modle de del Valle prsente plus prcisment le procd rel et on peut recommander son utilisation dans futures applications.
III.3.4.5.4. Application du modle de del Valle pour diverses configurations gomtriques
Afin de mieux analyser le comportement du systme lorsquon change la gomtrie et le volume de la cellule dextraction (cf. III.3.3.), nous avons simul lextraction laide du modle de del Valle. Mme si nous navons pas assez de points exprimentaux pour dcrire les cintiques dextraction, les solutions du modle nous seront utiles pour comparer les rendements la fin du processus. Nous rappelons la Figure III.32 qui prsente le rendement de lextrait total pour les quatre proportions gomtriques testes.
Figure III.32. Rendement de lextrait total supercritique en fonction de la gomtrie de la
cellule. P = 280 bar, T = 60 g C ; Dbit de CO2 = 5 g/min, dure dextraction 330 min, taille des particules 0,94 mm - rsultats exprimentaux ; - Valeurs obtenues par le modle.
- 115 -
Sur cette figure, la configuration IV (volume de la cellule 32 mL) correspond la gomtrie qui nous a servi ajuster les paramtres du modle, ce qui est la raison vidente de la concordance modle-exprimentation. Ce choix arbitraire nous a paru le plus adquat car le rendement, compar aux deux expriences mme volume, tait le plus lev). Les solutions du modle sont marques avec sur la figure III.33. Donc, pour les autres configurations, nous avons gard les valeurs de ks et Xf obtenues pour la classe des particules de taille 0,94 mm (proportion feuilles/tiges 9/1, en nombre). Les configurations III,II et IV correspondent un mme volume de matire premire sous diffrents diamtres de cellule, ce qui influe sur la vitesse superficielle du CO2. Le modle prvoit des rendements assez similaires mme si la vitesse est quatre fois plus leve dans le cas du diamtre le plus petit (configuration II). Cela signifie que, thoriquement, le transfert de matire externe ne limite pas le processus sous ces conditions opratoires, ce qui est tout fait en accord avec les discussions des rsultats de la partie III.3.1. Cependant le modle donne des rsultats surestims par rapport aux valeurs exprimentales. On peut alors suspecter une hydrodynamique relle bien diffrente (et dfavorable) de celle considre dans le modle, qui est un coulement piston parfait. Par exemple on peut penser la formation de passages prfrentiels ( channelling ), o le solvant quitte le lit en ayant eu trs peu de contact avec le vgtal), ou de zones non percoles (ou volumes morts ) qui rendent une grande partie de la matire vgtale inaccessible au solvant. Par exemple, le rsultat exprimental du rendement dans le cas du diamtre 32 mm par rapport 16 mm pourrait tre expliqu par une meilleure distribution du CO2. Rappelons que dans ce cas, afin de rduire le volume de la cellule, nous avions mis des billes en verre au dessous de la matire premire. Le meilleur rendement est obtenu avec la cartouche (configuration IV). Dans ce cas, il ny avait pas des billes mais, probablement la cartouche elle-mme distribue bien le solvant. Une autre explication possible est lie la forme ovale du fond de la cartouche qui pourrait galement amliorer la distribution du solvant. Selon la simulation numrique, sous ces conditions, le rendement samliore lorsque le volume est plus important. Notons que ce nest l encore pas le cas pour les rsultats exprimentaux et on constate quel point la distribution du solvant joue un rle important. Il faut donc chercher des solutions technologiques pour amliorer ce paramtre (gomtrie des diffuseurs dentre, homognit de lempilement) , surtout si on applique le processus lchelle industrielle o priori des problmes de passages prfrentiels et zones mortes sont beaucoup plus probables.
- 116 -
III.4. Extraction de lhuile essentielle de la mlisse par ESC

Dans cette partie, nous prsentons les rsultats concernant lutilisation du CO2-SC dans lobjectif disoler lhuile essentielle de la mlisse. Parmi les nombreux constituants prsents dans lhuile essentielle de mlisse, nous avons choisi comme composs cibles deux composants majeurs de cette huile, le citral (prsent sous forme de deux stro-isomres le granial et le nral) et le caryophyllne [1, 15, 24, 34, 35 - 38] qui reprsentent plus de 90 % de lhuile essentielle de la mlisse obtenue par extraction supercritique, selon [38]. Les rsultats de cette tude sont prsents sur le tableau III.7.
Tableau III.7. Composition de lhuile essentielle de mlisse obtenue par ESC sous diverses
conditions de pression et de temprature [38]
Le problme gnral de lextraction supercritique dhuile essentielle est la coextraction des cires (composs protecteurs hydrophobes prsents sur la surface des plantes) [1, 54, 60, 89]. Afin datteindre notre objectif, nous avons effectu trois actions : 1) Extraction des deux composs prsents sous forme pure mais mlangs avec de la matire inerte (des billes en verre). Lobjectif de cette tude est dvaluer la capacit de linstallation rcuprer ces composs cibles; 2) Extraction des composs cibles partir de la matire vgtale la mlisse 3) Sparation de lhuile essentielle et des cires co-extraites par ajustement des conditions opratoires dans lextracteur et dans les sparateurs.
Tous les chantillons ont t analyss par chromatographie en phase gazeuse afin de dterminer la quantit extraite des composs cibles. Lexemple dun chromatogramme est prsent sur la figure III.3.3.
- 117 -
Figure III.33 Exemple didentification des composs cibles dans lextrait supercritique par
chromatographie en phase gazeuse. 1 neral ; 2 geranial ; 3 caryophyllne
III.4.1 Estimation de la capacit de linstallation rcuprer le citral et le caryophyllne
Afin de vrifier la capacit de linstallation extraire les composs cibles, nous avons effectu une extraction de ces deux composs purs distribus dans une matire inerte. Les expriences ont t menes de manire suivante : la cellule originelle a t remplie avec des billes en verre et 0,02 g de chacun des deux composs purs y a t ajoute. La cellule a ensuite t ferme et secoue pour bien homogniser les produits dans lenceinte. Lextraction a t effectue dans les conditions opratoires suivantes : - extracteur : P = 90 bar et T = 50 C (CO2-SC) ; - sparateurs : S1 - P = 50 bar, T= 50 C (CO2 gaz) ; S2 P = 30 bar, T = 50 C (CO2 gaz); S3 P = 15 bar ; T = 20 C (CO2 gaz) - dbit du CO2 = 30 g/min. Ces conditions ont t choisies daprs les rsultats prcdents, qui ont montr quelles permettent dextraire lhuile essentielle sans toutefois extraire lacide rosmarinique ou dautres composs lourds.
- 118 -
Au bout de 15 min le processus a t arrt et la cellule a t pese. En calculant la perte de masse, nous avons estim que lextraction ntait pas encore termine (97 % de la masse initiale avait t extraite). Lextrait des sparateurs a t rcupr en y introduisant de lthanol (car tant trs dense il collait sur les parois de linstallation) et ensuite analys par CPG. Aprs 30 min, toujours en se basant sur la quantit de matire perdue, nous avons observ que 100 % des composs ajouts avaient t extraits. Nous avons de nouveau rcupr et analys lextrait. La figure III.34. prsente les rsultats danalyse de lextrait ces deux moments. .
100 90 Pourcentage des composs rcupers 80 70 60 50 40 30 20 10 0 15 Temps, min 30
Figure III.34. Evolution de lextraction des composs purs mlangs dans la matire inerte
(billes en verre) au cours du temps, min. citral (geranial + neral) ; caryophyllne
On observe quaprs la fin de lextraction (100 % de la quantit de matire initiale a disparu), le caryophyllne est rcupr 100 % dans les sparateurs S1-S3, tandis que seulement 76% du citral extrait est rcupr dans les sparateurs S1-S3. Il y a donc une perte de citral, probablement due sa volatilit plus leve (point dbullition du citral 229C contre 261 C pour le caryophyllne). La solubilit du citral dans le CO2 90 bar et 50 C est gale 96.10-5 g/g, [95]. Cela signifie quavec ce dbit, aprs 41 secondes dextraction, thoriquement, en cas de limitation par la solubilit uniquement. Daprs ces rsultats, il semble que linstallation soit utilisable pour lextraction du citral et du caryophyllne avec du CO2.
- 119 -
III.4.2. Extraction de la mlisse
Pour lextraction des huiles essentielles contenues dans la mlisse nous avons utilis le mme protocole et les mmes conditions opratoires que prcdemment. Afin de suivre le processus au cours de temps, trois expriences de dure 15, 30 et 45 min (correspondant respectivement aux quantits de CO2 14, 32 et 55 kg/kg mat. premire) ont t ralises. Les extraits des trois sparateurs ont t collects dans les sparateurs puis mlangs pour tre
SC analyss. La Figure III.35. prsente le Rendement de lextrait supercritique total YEX ces
diffrents instants.
4 Rendement de lextrait supercritique total, %
0 14 32 kg CO2 / kg mat. premire 55
Figure III.35. Evolution du Rendement de lextrait supercritique total en fonction de la
quantit de CO2 par kg de matire premire (kg CO2/kg matire premire)
Les rsultats montrent logiquement quavec lavancement du processus le Rendement

de lextrait supercritique total augmente, en raison de la plus grande quantit de CO2 en
contact avec la matire premire. Puisque nous cherchons extraire nos composs cibles en tat plus concentr, le paramtre plus intressant pour nous est leur Concentration dans
lextrait supercritique Ci. Les rsultats sont prsents sur la figure III.36.
- 120 -
2 Concentration dans lextrait supercritique, %
0 14 32 kg CO2 / kg mat. premire 55
Figure III.36. Evolution de la concentration dans lextrait supercritique en fonction de la
quantit de CO2 par kg de matire premire (kg CO2/kg matire premire)
citral (geranial + neral) ; caryophyllne
La concentration des deux composs cibles dans lextrait supercritique est presque identique pour les expriences effectues avec 14 et 32 kg CO2/kg mat. premire. Lorsque 55 kg CO2/kg mat. premire ont t utiliss, les concentrations en composs cibles diminuent brusquement - ~ trois fois pour le citral et ~ deux fois pour le caryophyllne. Ce comportement peut tre expliqu par lextraction parallle des cires se trouvant la surface des particules, qui est contrle par leur solubilit et laugmentation de la quantit du CO2 augmente donc leur quantit dans lextrait. Dautre part, lextraction de lhuile essentielle (prsente lintrieur des particules) est contrle pralablement par la diffusion dans la matrice vgtale, cette dernire tant indpendante de la quantit de CO2 utilis [54, 60, 89]. La diminution de la concentration plus importante pour le citral par rapport au caryophyllne peut tre explique par sa volatilit plus leve
La proportion des isomres du citral (neral : geranial) dans les trois extraits varie de 34:66 43:57 %. En premire observation, on peut conclure quil semble prfrable darrter lextraction au bout de 30 min pour un dbit de CO2 gal 30 g/min.(ce qui correspond 32 kg CO2/kg matire premire) si lon souhaite obtenir un extrait plus concentr en citral et
- 121 -
caryophyllne. En ralit, la quantit cumulative dhuile essentielle augmente au cours du temps, mais lextraction des cires devient plus importante, ce qui diminue la concentration de lhuile dans lextrait. Pour cette raison, si lobjectif est dextraire plus dhuile essentielle, il est prfrable de mener le processus assez longtemps et de sparer ensuite lhuile et les cires.
Lobjectif principal et initial de ce travail de doctorat tait surtout lextraction de lacide rosmariniqiue. Pour cette raison ltude de lextraction des huiles essentielles de Mlisse nest pas aussi approfondie. En particulier, nous navons pas valu la quantit totale dhuile essentielle contenue dans la mlisse (ce qui reste comme perspective dun futur travail). Pourtant, selon linformation rapport dans la littrature, ce contenu varie entre 0,02 0,32% du poids sec de la mlisse [1, 13, 24] dont le citral reprsente ~85 % et le caryophyllne ~7,4 % daprs [38]. Selon cette information et en tenant compte de la solubilit du citral daprs [95], dans le cas limite aprs 2 minutes et 46 secondes, il ny aurait plus de limitation de solubilit pour lextraction du citral. La quantit de citral extraite dans les trois cas est respectivement 0,018 ; 0,02 et 0,037 % de la masse de matire premire, tandis que celle de caryophyllne est 0,0036 ; 0,0057 et 0,006 % Il est vident quon se trouve entre les deux concentrations limites rapportes dans la littrature et il faut une tude supplmentaire pour dterminer la quantit totale dhuile essentielle dans les chantillons de mlisse soumis lextraction supercritique. Ces expriences supplmentaires nous permettraient ainsi dtablir le temps ncessaire pour extraire la quantit totale de ces deux composs prsents dans la matire premire.
Il est galement envisageable de raliser un fractionnement de lextrait grce aux sparateurs prsents en sortie de lextracteur, et ainsi sparer une partie des cires afin daugmenter la concentration en huile dans lextrait. Selon les informations de la littrature [54, 60, 89], une temprature comprise entre -12 et 6 C et une pression de lordre de 90 bar (le CO2 est liquide sous ces conditions), on peut raliser une prcipitation des cires puisque elles deviennent alors pratiquement insolubles dans le CO2. En consquence, nous avons ajust les conditions opratoires des sparateurs de manire se trouver dans les conditions de prcipitation des cires : - Extracteur P = 100 bar et T = 50 C (CO2-SC); - Sparateurs : S1 - P = 90 bar, T= 2,6 C (CO2 liquide) ; S2 P = 40 bar, T = 28 C (CO2 gaz), S3 P = 20 bar ; T = 35 C (CO2 gaz);
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- Dure dextraction 10 min ; dbit du CO2 = 15 g/min. Ce dbit rduit a t choisi en raison de limitations techniques car il ntait pas possible de maintenir le rgime de basse temprature dans le sparateur S1 dbit de CO2 plus lev car les capacits de transfert thermique du sparateur (double enveloppe) sont limites..
SC Dans ces conditions, le Rendement de lextrait supercritique total YEX a t gal
environ 1 % dont 0,38 % dans le sparateur S1 et 0,62 % dans sparateurs S2 + S3. La deuxime fraction contenait aussi des cires (la sparation des cires na donc pas t parfaitement ralise), mais la fraction de S1 tait incolore tandis que la fraction de S2+S3 tait jauntre (ce qui est une indication de la prsence dhuile essentielle). Lanalyse chromatographique de lextrait de S1 na pas fait apparatre de citral ni de caryophyllne. La
Concentration dans lextrait supercritique Ci base sur la quantit collecte dans S2 + S3 est
prsente sur la figure.37.

2
Concentration dans lextrait supercritique, %
Figure III.37. Concentration du citral () et du caryophyllne () dans lextrait obtenu dans
S2 et S3. Quantit de CO2 utilise 6,2 kg/kg mat .premire. Dans lextracteur P = 100 bar et T = 50 C (CO2-SC); Dans les sparateurs : S1 - P = 90 bar, T= 2,6 C (CO2 liquide) ; S2 P = 40 bar, T = 28 C (CO2 gaz) ; S3 P = 20 bar ; T = 35 C (CO2 gaz); Dure dextraction 10 min ; dbit du CO2 = 15 g/min
Ces rsultats, compars avec la fig. III.37. montrent quil est possible dobtenir un produit de mme concentration en citral et ~3 fois plus concentr en caryophyllne. Cela peut provenir de deux phnomnes : 1) La quantit de CO2 est ici deux fois plus faible, ce qui a
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limit lextraction des cires et 2) On a spar une partie des cires dans le sparateur S1. Mme si la concentration de ces deux composs reste relativement faible, le fait davoir prcipit dans le sparateur S1 une partie des cires sans huile essentielle est trs encourageant. Cela reprsente une bonne approche pour la sparation des cires, ouvrant des perspectives pour une future tude consistant prciser linfluence des conditions de pression et de temprature dans lextracteur et le sparateur S1, le dbit et la dure dextraction etc.
Lisolement de lhuile essentielle reprsente un avantage supplmentaire en faveur du couplage des tapes dextraction supercritique et extraction conventionnelle. Pendant le prtraitement supercritique, en travaillant avec des conditions opratoires appropries, il est non seulement possible dliminer des composs non-dsirs de la matrice vgtale, mais aussi dextraire des composs de haute valeur ajoute tels que le citral et le caryophyllne. Dans ltape suivante, la plante est soumise aux tapes couples dextraction afin dextraire le compos cible, lacide rosmarinique.
III.5. Conclusions
Nous avons appliqu lESC surtout pour le prtraitement de la matire vgtale avant lextraction conventionnelle de lacide rosmarinique (peu soluble dans le CO2 supercritique) partir de la mlisse. Par traitement avec du CO2 pur nous avons nettoy la matrice solide des composs non-dsirs, ce qui a facilit lextraction du compos cible pendant ltape suivante. Le traitement en prsence de co-solvants dans le CO2 a t galement effectu. En gnral, les co-solvants augmentent la capacit solvante du CO2 et de cette faon on extrait plus de matire non-dsire mais aussi plus dacide rosmarinique. Pourtant, sous certaines conditions, leur utilisation peut amliorer le prtraitement de la matire vgtale. Les conditions de lESC permettant dextraire des composs de haute valeur ajoute se trouvant dans lhuile essentielle de la mlisse ont t aussi tudies. Une premire approche vers la sparation dhuile essentielle et des cires se contenant dans lextrait supercritique a t effectue. Cela nous a ouvert des perspectives consistant de prciser les conditions, les tudes des conditions dans lextracteur et les sparateurs. Les tudes exprimentales de linfluence des paramtres opratoires principaux (temprature, pression, granulomtrie, dbit du CO2, la prsence du co-solvant) sur la
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cintique du processus dextraction supercritique nous ont permis de dfinir les conditions opratoires favorisant une meilleure extraction. Les processus tudis exprimentalement ont t ensuite modliss
mathmatiquement. Parmi les 5 modles tests, les simulations avec le modle de del Valle sont les plus proches la ralit, produisant des rsultats fidles dans toute la gamme des conditions opratoires. Cela est d au fait que, contrairement aux autres modles, celui-ci tient compte des deux types de rsistance au transfert de masse existants externe et interne. Daprs nous, le modle de del Valle reprsente avec une prcision suffisante les processus rels et on peut recommander son utilisation, dautant plus quaprs les modifications appliques, ce modle tient aussi compte de lexistence de particules de gomtries diffrentes (plates et cylindres).
- 125 -
- 126 -
Chapitre IV
Extractions pression atmosphrique et nanofiltration
Chapitre IV. Extractions pression atmosphrique et nanofiltration
IV. Extractions pression atmosphrique et nanofiltration

IV.1. Introduction
Dans le chapitre prcdent nous avons prsent lextraction avec CO2 supercritique. Nous avons utilis cette technique surtout dans un but de prtraitement de la matire vgtale avant lextraction solide-liquide conventionnelle. Dans le chapitre prsent, des techniques dextraction et de sparation pression atmosphrique ont t tudies en vue de leur application lextraction de la mlisse et de la concentration des extraits. Elles vont tre dabord tudies sparment pour estimer la plage de leurs paramtres opratoires optimiss. Des modles mathmatiques dcrivant les procds sont appliqus. Ils donnent accs aux paramtres ncessaires la caractrisation des processus et la prvision des rsultats lors des futures applications. Ensuite, des couplages avec lextraction supercritique et parmi elles-mmes sont proposs avec lobjectif dobtenir des schmas intgrs assurant un meilleur rendement ou un produit de concentration leve.
IV.2. Extraction Soxhlet

Lextracteur de Soxhlet est une pice de verrerie permettant deffectuer une extraction solide-liquide avec une grande efficacit. Lappareil porte le nom de son inventeur : Franz von Soxhlet. Lextraction par lappareil Soxhlet (nous allons lappeler simplement Soxhlet) est une mthode simple et convenable nous permettant de rpter infiniment le cycle dextraction avec du solvant frais jusqu' puisement complet du solut dans la matire premire, d'o vient son efficacit leve. Cependant, le Soxhlet possde quelques dsavantages comme, par exemple, le temps dextraction relativement long, la possibilit de dgradation des composs cause dune surchauffe locale, le choix limit du solvant, les difficults dutilisation de mlanges de solvants, etc. Dans cette tude lextraction solide-liquide par Soxhlet a t utilise pour valuer linfluence du prtraitement supercritique de la matire premire vgtale sur lextraction conventionnelle de lacide rosmarinique partir de la mlisse.
- 129 -
IV.2.1. Exprimentations
La matire extraire est pese et ensuite mise dans la cartouche du Soxhlet. Le solvant est introduit dans le ballon puis chauff pour dmarrer lextraction. Lextraction est arrte lorsque le liquide entourant la cartouche devient clair, cette couleur indiquant que le solvant nextrait plus rien du solide. Le temps de traitement est diffrent selon le solvant, souvent plus de 30 heures. Le contenu du ballon (solvant plus matires solubilises) est ensuite trait laide du Rotavapor pour liminer le solvant et le rsidu est pes pour quantifier la masse dextrait total sec mEX. Une partie de lextrait est ensuite prise, mesure et dissoute dans 25 mL dthanol. La solution est ensuite filtre et analyse par HPLC pour dterminer la masse dAR extraite mAR. A partir de ces quantits on dfinit la Concentration en acide
rosmarinique dans lextrait CAR :
C AR (%) =
mAR x100 mEX
(IV.1)
Ce paramtre a t utilis dans ltude de linfluence du prtraitement supercritique sur le processus dextraction conventionnelle. Il sagit de la comparaison des valeurs CAR obtenues par le traitement Soxhlet des rsidus solides de lextraction supercritique et de la matire premire non-prtraite. Pour interprter certains rsultats, nous avons utilis le paramtre Rendement de
lextrait total, dfini comme: YEX (% ) = m EX mmat . prem x100
(IV.2)
o : mmat. prem est la masse initiale de la mlisse.
IV.2.2. Rsultats
IV.2.2.1. Extraction Soxhlet de la mlisse avec divers solvants Afin de choisir le solvant le plus appropri lextraction par Soxhlet de lacide rosmarinique partir de la mlisse, nous avons fait des tests avec trois solvants classiques : lhexane, lactone et lthanol. Lhexane est un solvant non-polaire, avec un comportement similaire celui du CO2 supercritique. Lactone est un solvant classique, largement utilis dans plusieurs domaines. Lthanol est connu comme tant un bon solvant de lacide rosmarinique. En suivant la procdure dcrite ci-dessus, nous avons dtermin la quantit maximale
- 130 -
extractible mEX pour lchantillon avec les diffrents solvants, ensuite nous avons analys lextrait pour dterminer mAR et finalement nous avons calcul CAR par quation (). Le rsultat de la comparaison des trois solvants est montr sur la figure IV.1.
20
18 16 14 12 10 8 6 4 2 0
1 2 3
Figure IV.1. Concentration en lacide rosmarinique dans lextrait Soxhlet obtenue
avec divers solvants. 1 thanol ; 2 actone ; 3 hexane.
On voit bien que lthanol est de loin le plus efficace parmi ces trois solvants et produit un extrait Soxhlet nettement plus riche en acide rosmarinique. Il est aussi intressant de regarder les valeurs dun autre paramtre le rendement total de lextrait (voir figure IV.2.)
- 131 -
25
Rendement de lextrait total, %
20
15
10
0 1 2 3
Figure IV.2. Rendement total de lextrait Soxhlet avec diffrents solvants. 1
thanol ; 2 actone ; 3 hexane.
On constate que lhexane, qui nextrait quasiment pas lacide rosmarinique, extrait cependant une quantit non-ngligeable (~7 %) dautres composs inertes. Il est donc intressant dappliquer lextraction Soxhlet avec de lhexane comme une tape de prtraitement pour llimination des produits inertes (lavage prliminaire de la matrice vgtale). A ce niveau lobjectif dobtenir un extrait plus riche en acide rosmarinique peut tre atteint avec un schma de traitement commenant par lextraction Soxhlet lhexane suivie par lextraction Soxhlet du rsidu avec de lthanol. Les rsultats de cette double extraction Soxhlet sont prsents ci-dessous.
IV.2.2.2. Double extraction Soxhlet Linfluence du prtraitement avec un Soxhlet lhexane sur lextraction Soxhlet lthanol est illustre par la figure IV.3., exprimant la concentration en acide rosmarinique dans des extraits diffrents.
- 132 -
25 Concentration en acide rosmarinique dans l'extrait, %
20
15
10
0 1 2
Figure IV.3. Influence du prtraitement avec du Soxhlet (solvant hexane) sur la concentration
en acide rosmarinique dans lextrait Soxhlet (solvant thanol). 1 Sans prtraitement ; 2

avec prtraitement
Il est vident que le prtraitement de la mlisse avec de lhexane augmente la concentration de lacide rosmarinique dans lextrait. Cependant lhexane est un solvant toxique. Pour cette raison il doit tre totalement limin du produit dextraction, ce qui demande un traitement supplmentaire, ainsi crant des difficults de point de vue application pratique et acceptabilt du produit final. Pour cette raison il nous a paru convenable de chercher une alternative de ce solvant. Daprs nous, une telle alternative est lutilisation du CO2 supercritique. IV.2.2.3. Prtraitement avec lESC Nous avons fait un prtraitement de la matire premire avec le CO2 supercritique des conditions opratoires diffrentes en faisant varier la temprature et la pression pour un dbit de CO2 = 30 g/min (cellule originelle, volume = 122 mL). Le tableau IV.1. contient une description de ces rgimes.
- 133 -
Tableau. IV.1. Rgimes opratoires pour le prtraitement supercritique
No 1 2 3 4 5 6 7 8 9
P, bar 280 250 200 100 280 250 200 100 80
T, C 60 60 60 60 40 40 40 40 40
Ensuite, nous avons ralis des extractions Soxhlet lthanol des rsidus solides aprs le traitement supercritique. Les rsultats sont prsents sur la figure IV.4. en parallle avec des rsultats sans prtraitement et ceux obtenus aprs prtraitement Soxhlet lhexane.
30
25
20
15
10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Figure IV.4. Influence du prtraitement sur la concentration en acide rosmarinique de
lextrait Soxhlet (solvant thanol) : 1 9 - prtraitements supercritiques indiqus dans le tableau IV.1. ; 10 - prtraitement avec Soxhlet (solvant hexane) ; 11 - sans prtraitement
- 134 -
Comme on pouvait le prvoir partir des rsultats du prtraitement lhexane, le prtraitement supercritique amliore lextraction Soxhlet lthanol par rapport lextraction sans prtraitement (rgime 11), en augmentant la concentration en acide rosmarinique de lextrait. Ce rsultat est d lextraction de composs inertes pendant ltape de prtraitement, ce qui conduit extraire moins de ces composs pendant lextraction Soxhlet lthanol, et finalement obtenir un produit plus riche en acide rosmarinique.
Bien que parfois laugmentation de la concentration du produit est comparable avec celle obtenue avec prtraitement en hexane (rgime 10), il y a des rgimes de prtraitement supercritique donnant des rsultats nettement meilleurs (1, 2, 3, 5, 6, 7). Certes, il y a dautres raisons pour prfrer le prtraitement supercritique devant le prtraitement avec lhexane : le CO2 nest pas toxique et cest un solvant vert qui peut tre limin du produit trs facilement par simple baisse de la pression, o il se transforme en gaz et svacue du produit sans laisser aucune trace problmatique. Le prtraitement supercritique est encore plus intressant dans les cas o lextrait du prtraitement supercritique contient des composs dintrt tels que le citral, caryophyllne etc. dans le cas de la mlisse.
IV.2.3. Conclusions
Lextraction Soxhlet est une mthode commode et efficace qui nous a servi quantifier lacide rosmarinique prsent dans la mlisse et aussi dtudier linfluence dun prtraitement de la matire premire sur les qualits de lextrait final lthenol. Elle peut tre utilise pour lextraction elle-mme, pour le prtraitement de la matire premire ou pour les deux. Le prtraitement avec lhexane augmente le contenu de lacide rosmarinique dans lextrait Soxhlet lthanol). Cependant lhexane est trop toxique et son limination du produit final est difficile et coteuse. Pour cette raison, il est prfrable et mme plus efficace deffectuer le prtraitement de la mlisse par le CO2 supercritique. Ce procd devient encore plus intressant puisque par le traitement supercritique on peut ventuellement obtenir des substances dintrt autre que lacide rosmarinique.
- 135 -
IV.3. Extraction en mode batch (chelle laboratoire)

IV.3.1.Dtermination de la teneur totale en acide rosmarinique dans la matire premire
Pour dterminer la teneur totale en acide rosmarinique dans la matire premire, la procdure suivante a t applique: Dans une fiole on place 0,100 g dherbe et 80 ml dthanol (50 % V/V). Cette concentration a t choisie en se basant sur des essais prliminaires montrant une meilleure solubilit de lAR. On fait bouillir le mlange dans un bain-marie reflux pendant 30 min, donne suffisante pour atteindre un taux dextraction maximum. Ensuite, lchantillon est refroidi et filtr. Le filtre est rinc avec 10 mL dthanol (50 % V/V). Le filtrat et le liquide de rinage sont rcuprs dans une fiole jauge, puis dilus jusqu 100 mL avec de lthanol (50 % V/V). Un chantillon est analys par HPLC Nous considrons que la quantit dacide rosmarinique extraite par cette mthode reprsente la Quantit Maximale dAcide Rosmarinique Extractible (QMARE), dont la masse est note mARmax. Cette analyse t applique a chaque lot de matire premire, parce que le contenu dacide rosmarinique dans les divers lots est variable (de 4 7,66 %). Les rsultats obtenus par cette mthode sont en accord avec les rsultats obtenus avec le Soxhlet.
IV.3.2. Rsultats et discussion
Les rsultats sont prsents en termes de Taux dextraction, dfini comme le rapport de la masse de lAR extraite (mAR) et de la masse maximale de lAR extractible mARmax pour un lot donn:
E (% ) = m AR x100 m AR max
(IV.3)
En parallle du taux dextraction, on utilise le paramtre Concentration en acide

rosmarinique dans lextrait. Il reprsente le rapport entre la masse de lAR extraite (mAR) et la
masse de lextrait total sec (mEX).

C AR (% ) = m AR x100 m EX
(IV.1)
- 136 -
Ce paramtre caractrise la teneur en AR dans un produit sec.
Le choix prliminaire du solvant repose sur un petit nombre de solvants agrs pour lutilisation dans la production de produits de consommation. Deux solvants diffrents, largement utiliss, ont t tests afin de dterminer leur capacit extraire lAR : le mthanol et lthanol. Ces solvants ont des proprits similaires vis--vis de lAR en se montrant efficaces en tant que solvants de lAR. En consquence, ces alcools ont t choisis comme solvants dans les expriences dcrites ci-dessous.
IV.3.2.1. Influence de la concentration des solvants Nous avons tudi la capacit de divers mlanges mthanol-eau et thanol-eau extraire lAR. Les expriences ont t menes 50C avec une granulomtrie moyenne de 0,94 mm. Afin dviter la limitation ventuelle due la saturation du solvant, la proportion choisie t 1 g de mlisse dans 100 mL de solvant (hydromodule R = 100mL/1g = 100 mL/g).
100 90 80 70 Taux d'extraction, % 60 50 40 30 20 10 0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Proportion du mlange alcool-eau, %
Figure IV.5. Influence de la composition des solvants sur le Taux dextraction. T = 50 oC.
thanol ; mthanol dure de lextraction batch 2h, hydromodule = 100 ml/g
Les rsultats de la figure IV.5. montrent que, en diluant les solvants avec de leau, le taux dextraction de lAR augmente pour atteindre son maximum 50 % deau. Ce comportement peut tre expliqu par le fait que la prsence de leau (ayant un moment - 137 -
dipolaire plus fort que celui des alcools) dstabilise les parois cellulaires. En consquence, en pntrant plus profondment dans la matrice vgtale, le solvant peut entrer au contact avec une quantit plus grande de solut, favorisant ainsi lextraction. Dautre part, la diminution du taux dextraction concentrations plus leves que 50 % deau peut tre attribue la diminution de la capacit du solvant, devenant de plus en plus pauvre en alcool. Il est noter aussi que leau pure est meilleur solvant que les alcools purs. En tat pur le mthanol est lgrement meilleur que lthanol, mais les mlanges thanol-eau extraient plus significativement lAR que des mlanges analogues base de mthanol. La variation de la concentration dAR dans lextrait sec, CAR, en fonction de la concentration dthanol dans le mlange solvant est prsente sur la figure IV.6.
30
25
20
15
10
0 0 20 50 80 100 Pourcentage de l'thanol dans le solvant
Figure. IV.6. Concentration en acide rosmarinique dans lextrait diffrentes compositions
du solvant (mlange thanol-eau)
Evidement, le comportement est identique celui du taux dextraction, passant par un maximum 50 % deau o une valeur maximale de 24% est atteinte.
IV.3.2.2. Influence de la temprature Linfluence de la temprature sur le taux dextraction t tudie en ralisant des extractions avec les deux mlanges solvants leur concentration optimale deau (50%) quatre tempratures diffrentes : 25 ; 40 ; 50 et 60 C. Cette plage de variation de la - 138 -
temprature englobe des valeurs de la temprature ambiante jusqu la limite dbullition du solvant.
100 90 80
Taux d'extraction, %
70 60 50 40 30 10 20 30 40
Temprature, C
50
60
70
Figure IV.7. Influence de la temprature sur le Taux dextraction. Taille moyenne des
particules 0,94 mm. 50 % thanol ; 50 % mthanol
On voit (fig. IV.7.) que le taux dextraction augmente avec la temprature, restant toujours plus lev pour lthanol. En ce qui concerne lthanol, le taux dextraction ne diffre gure entre 50 et 60 C. Il est donc prfrable de travailler 50 C, car le maintien de cette temprature est plus conomique de point de vue consommation de lnergie. Dautre part, mener un processus la temprature plus basse dfavorise la dgradation thermique ventuelle des composants de lextrait.
IV.3.2.3. Cintique gnrale du processus La cintique gnrale du processus dextraction de lAR avec les deux mlanges solvants concentration optimale (50 % deau) est illustre sur la figure IV.8.
- 139 -
100 90 80
70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60
Temps, min
80
100
120
Figure IV.8. Courbes cintiques de lvolution du processus dans le temps. Taille des
particules 0,94 mm. T = 25 C. 50 % thanol ; 50 % mthanol
Dans le cas de lthanol le plateau final est plus lev et sa valeur, correspondant au taux dextraction maximale, est dj atteinte. La cintique dextraction avec le mthanol est lgrement plus rapide au dbut du processus, mais ralentit nettement par la suite et il semble que lextraction continue (la courbe ne cesse pas monter) pour des dures pour lesquelles lextraction avec lthanol est termne. La conclusion ici est que lextraction avec le mthanol est plus lente, demandant plus de temps pour finir le processus et extraire le maximum possible. En plus, le rendement est plus faible.
IV.3.2.4. Choix du solvant appropri En comparant les rsultats obtenus avec les deux solvants, il est vident que lthanol montre un pouvoir dextraction par rapport lAR plus favorable que celui du mthanol. Ce dernier tant beaucoup plus nocif, il nous reste constater que dans les limites de la gamme considre des solvants, le choix prfrer est le mlange thanoleau, en proportion volmique (1:1).
IV.3.2.5. Cintique de lextraction avec le mlange thanol-eau Les tudes cintiques ont t menes deux tempratures : la temprature ambiante 25C et la temprature considre comme optimale 50C. - 140 -
100 90 80 70 Taux d'extraction, % 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 Temps, min 80 100 120
Figure IV.9. Influence de la temprature sur la cintique dextraction. Solvant thanol-eau
1:1 en proportion volumique. Taille moyenne des particules 0,94 mm. 50 C ; 25 C
Une comparaison des cintiques 25 et 50 C est prsente sur la figure IV.9. On voit clairement que le procd est nettement plus efficace 50C. Pour cette raison, les tudes cintiques plus approfondies ont t menes cette temprature. Nous avons suivi la cintique dextraction avec diffrentes concentrations du solvant thanol dans le mlange eau-thanol dans lintervalle 0 100 %. Les rsultats (figure IV.10.) font apparatre deux rgimes cintiques.
- 141 -
100 90 80 70 Taux d'extraction, % 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 Temps, min 80 100 120
Figure IV.10. Influence de la concentration du solvant thanol sur la cintique dextraction.
Solvant thanol. T = 50 oC. Taille moyenne des particules 0,94 mm. 0 % thanol ; 15 % thanol ; 50 % thanol ; 80 % thanol ; 100 % thanol
Dabord, pendant la premire tape, les courbes montent rapidement, ce qui correspond lextraction rapide de lAR se trouvant dans des pores superficiels de la matrice vgtale. Pendant la seconde tape la courbe cintique change de pente pour prendre une position quasi-horizontale, correspondant lpuisement de lAR dans des pores superficiels et la transition vers un processus plus lent dextraction partir des pores intrieurs. Cette tape sachve avec un plateau correspondant au taux dextraction maximal pour les conditions opratoires donnes. Dans tous le cas, le plateau est atteint peu prs au mme temps lexception de la concentration 80 %. Le retard du plateau dans ce cas peut tre expliqu par le transfert interne plus difficile d la faible quantit deau dans le mlange solvant (rappelons que la prsence deau est suppose dstabiliser les parois cellulaire et faciliter le transfert interne dans la matrice vgtale). Dautre part le pouvoir solvant cette concentration est plus important que celui de leau pure et la courbe 80%, initialement sous la courbe de leau pure (0%), la dpasse finalement au plateau. Le meilleur rsultat, correspondant au plateau le plus lev, est obtenu avec 50 % dthanol. Comme nous lavions constat, cette concentration correspond la meilleure synergie entre leffet dstabilisant de leau sur les parois et le pouvoir solvant de lthanol.
- 142 -
IV.3.2.6. Hydromodule Les expriences prsentes ci-dessus ont t mene avec un hydromodule gal 100 (mL solvant/g solide) afin dviter la limitation ventuelle due la solubilit. Dans la pratique il est prfrable dconomiser le solvant et de travailler donc avec un hydromodule moins important. Pour cette raison nous avons investigu linfluence de lhydromodule sur la cintique de lextraction de lAR partir de la mlisse. Deux hydromodules largement diffrents ont t choisis pour comparaison : R = 100 mL/g et R = 10 mL/g. Les tests ont t faits avec 80 % dthanol. Ce choix est justifi par les raisons suivantes : - Au niveau de la cintique, cest le cas le plus lent et donc limitant. Il est donc souhaitable de lvaluer afin de mieux connatre les tapes limitantes. - Pour certains dispositifs qui seront prsents dans la phase de purification de lextrait, nanofiltres par exemple (voir.IV.4. ), la prsence dune grande quantit deau dans le systme nest pas recommande, car leau endommage la membrane filtrante.
100 90 80 70 Taux d'extracion, % 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Temps, min
Figure IV.11. Influence de lhydromodule sur la cintique dextraction. T = 50 oC. Taille
moyenne des particules 0,94 mm. R = 100 mL/g; R = 10 mL/g
Les rsultats prsents sur la figure IV.11. montrent quune variation importante (facteur 10) de lhydromodule naffecte pas la cintique du processus. Cela signifie quil ny a pas de limitation cause de la solubilit et que toute la rsistance est due au transfert interne du solut.
- 143 -
IV.3.2.7. Influence de la granulomtrie Pour prparer des chantillons de matire premire ayant des particules dune certaine taille moyenne, la matire vgtale a t dabord broye, ensuite tamise et divise en cinq fractions de dimension moyenne de particules de 0,7 mm ; 0,94 mm ; 1,5 mm ; 2,5 mm et 5 mm.
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0,7 0,94 1,5 2,5 Taille moyenne des particules, mm >3
Figure. IV.12. Influence de la granulomtrie sur le Taux dextraction. T = 50 C.
Solvant 50 % thanol.
Les rsultats (figure IV.12.) suivent la tendance logique - le taux dextraction devient meilleur dans le cas des particules plus petites. Ceci peut tre expliqu par une surface de contact plus grande avec la diminution de la taille de particules, et aussi par un plus grand nombre de pores ouverts facilitant le contact avec le solvant ainsi que les phnomnes de diffusion interne Il est noter qu lchelle industrielle, de trop petites particules peuvent gner le fonctionnement des appareils en augmentant leur rsistance (la perte de charge hydraulique leve), en favorisant la cration de zones sches prives de laccs du solvant (pntration difficile du solvant cause de la densit locale leve), en crant des cavits solvant sans circulation de solvant (zones stagnantes), etc. De tels effets diminuent lefficacit des appareils et rduisent le rendement. Pour cette raison, il est toujours ncessaire de chercher le compromis entre la taille des particules, les limitations technologiques des installations relles et leur efficacit. - 144 -
IV.3.2.8. Triple extraction Certains schmas technologiques pour sparer le solvant de lextrait aprs lextraction (les membranes de nanofiltration notamment, voir IV.4.) exigent lutilisation de solvants ne contenant que de faibles quantits deau. Cela nous amene considrer des solvants contenant moins deau, comme par exemple 80 % thanol. Malheureusement, le taux dextraction dun seul contact de ce solvant avec la plante nest que de 68 % de la QMARE. Afin damliorer ce taux dextraction, nous avons considr une extraction en trois tapes (triple extraction): aprs le premier contact lextrait liquide est spar du rsidu solide par filtration conventionnelle. Le rsidu solide de la premire tape est mis en contact avec du solvant frais de quantit gale de celle de ltape prcdente. La troisime tape rpte la procdure avec le rsidu de la deuxime tape. Le Taux dextraction E (%) de la triple extraction de lAR est montr sur la figure IV.13. Ici on voit que le taux dextraction cumulatif des trois tapes tend vers 100 %. La performance relativement plus faible de la premire tape (par rapport lthanol 50 %) est compense par lapport des deux tapes suivantes.
80 70 60 Taux d'extraction, % 50 40 30 20 10 0 I II Etape de l'extarction III
Figure IV.13. Taux dextraction de lAR pour les trois tapes de la triple extraction. Solvant :
80 % thanol.
Cette opration nous permet dextraire une quantit maximise dAR en utilisant un solvant contenant moins deau. Cela est important en vue de lutilisation conscutive de nanofiltration pour la concentration de lAR.
- 145 -
Le couplage de la triple extraction avec le procd de nanofiltration est prsent en dtails dans chapitre IV. 4.
IV.3.2.9. Couplage avec lESC Afin damliorer le processus dextraction solide-liquide conventionnelle en mode batch, la matire premire a t soumise au prtraitement avec du CO2 supercritique pur ou mlang avec du co-solvant thanol (voir chapitre III). Lide (similaire au cas du couplage de lESC avec lextraction Soxhlet tudi dans IV.1.) est dextraire des composs non-dsirs de la matrice vgtale (cires, composants de masse molculaire leve) et dobtenir des rsidus solides avec une concentration en AR plus leve. Ces derniers sont soumis lextraction conventionnelle en mode batch, ralisant ainsi un schma deux tapes : prtraitement supercritique coupl avec lextraction conventionnelle.
IV.3.2.9.1. Prtraitement supercritique sans co-solvant
Afin dassurer une quantit plus grande de matire solide pour lextraction batch, pendante ltape de prtraitement supercritique nous avons toujours utilis la cellule originelle (volume = 122 mL) pendant ltape de lextraction supercritique. Le prtraitement de la matire premire a t fait en deux sries : - basse pression (90 et 120 bar) on extrait surtout les huiles essentielles et les cires ; - haute pression (280 bar) le pouvoir solvant du CO2 augmente, mais la slectivit diminue. On extrait davantage de substances de masses molculaires leves. Les tendances gnrales de linfluence du prtraitement supercritique basse pression (120 bar et 40 C) sur le Taux dextraction de lacide rosmarinique (extraction conventionnelle du rsidu supercritique solide en batch) avec diverses proportions du mlange thanol-eau (de 0 100 %) est illustre sur la figure IV.14.
- 146 -
100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 50 80 100
Pourcentage de l'thanol dans le solvant
Figure IV.14. Influence du prtraitement supercritique (P = 120 bar ; T = 40C ; dbit de
CO2 = 6,4 g/min ; dure 15h) sur le Taux dextraction en mode batch (solvant : diverses proportions thanol-eau). sans prtraitement ; avec prtraitement
Les rsultats indiquent que ce prtraitement supercritique amliore le Taux

dextraction pour toutes les proportions thanol-eau, la raison tant llimination dune partie
de la matire solide (composants non-dsirs) pendant le prtraitement supercritique. Nous allons tudier plus en dtails le solvant 80 % thanol en vue de son utilisation dans le procd de purification par nanofiltration. Une comparaison entre linfluence du prtraitement haute et basse pression sur le
Taux dextraction est prsente sur la figure IV.15.
- 147 -
100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4
Figure IV.15. Influence du prtraitement supercritique basse et haute pression sur le Taux
dextraction de lacide rosmarinique avec 80 % thanol. 1 P = 90 bar, T = 50 C, dbit de

CO2=15 g/min, dure 45 min,; 2 P = 120 bar, T = 40 C , dbit de CO2 = 6,4 g/min, dure 15 h ; 3 P = 280 bar, T = 60 C dbit de CO2 = 5 g/min, dure 5 h ; 4 Sans prtraitement supercritique
En sachant qu haute pression on enlve une quantit plus grande de matire inerte sans affecter lAR (voir rsultats dans III.3.1.2, figure. III.4), il est attendre, que le cas 3 va donner de meilleurs rsultats. On voit clairement que pour tous les rgimes de prtraitement le
Taux dextraction augmente par rapport celui obtenu partir de la plante non-prtraite (cas
4). Il est rappeler quen augmentant la pression on augmente le pouvoir solvant du CO2, mais on diminue sa slectivit. Le prtraitement basse pression peut tre aussi intressant puisque la slectivit est sensible aux faibles variations des conditions opratoires et on peut raliser deux effets positifs : dune part, diriger ltape de prtraitement vers lextraction supercritique de composes de haute valeur ajoute (le cas 1 notamment, voir III.3.5.) et dautre part - amliorer le taux dextraction de lAR dans ltape suivante dextraction classique.
- 148 -
IV.3.2.9.2. Influence de la prsence du co-solvant thanol dans ltape supercritique
Comme nous lavons dj discut, les co-solvants changent la polarit et la slectivit du solvant supercritique. Nous avons tudi linfluence du prtraitement supercritique avec CO2 et co-solvant thanol basse (120 bar) et haute (280 bar) pression sur les rsultats de lextraction conventionnelle ralise ensuite en mode batch en utilisant comme solvant 80 % thanol. Les rsultats de lextraction de la matire solide prtraite basse pression sont prsents sur la figure IV.16.
100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 5
Figure IV.16. Influence de la quantit du co-solvant dans le CO2 supercritique (prtraitement
basse pression P = 120 bar, T = 40 C, dbit du CO2 = 6,4 g/min) sur le Taux dextraction conventionnelle de lAR avec solvant 80 % thanol : 1 Sans prtraitement supercritique ; 2 prtraitement sans co-solvant, dure 15 h ; 3 5 % co-solvant, dure 4 h ; 4 10 % cosolvant, dure 4 h ; 5 15 % co-solvant, dure 4 h
A basse pression, le prtraitement avec du co-solvant (cas 3, 4 et 5) fournit un Taux

dextraction plus lev que le cas du prtraitement avec du CO2 pur (2) et sans prtraitement
supercritique (cas 1). De manire gnrale, la prsence du co-solvant rend le CO2 supercritique plus polaire et ce dernier devient meilleur solvant de lAR par rapport au CO2 pur. Cela signifie que avec du co-solvant on va extraire plus dAR, ce qui nest pas souhait dans un tel pr-traitement. Cependant, le mlange [CO2 + co-solvant] extrait de prfrence la matire non-dsire et peu dAR (confirm par nos rsultats exprimentaux III.3.2.5.1). - 149 -
Llimination de la matire non-dsire ouvre laccs du solvant au travers du solide et facilite ltape suivante dextraction conventionnelle de lAR. Cet effet est montr clairement sur la figure IV.17. reprsentant la Concentration en
acide rosmarinique CAR dans lextrait conventionnel.
Concentration en acide rosmarinique dans l'extrait, % 35
30
25
20
15
10
0 1 2 3 4 5
Figure IV.17. Influence de la quantit du co-solvant (prtraitement supercritique P = 120
bar, T = 40 C, dbit du CO2 = 6,4 g/min) sur la Concentration en acide rosmarinique dans lextrait conventionnel avec solvant 80 % thanol : 1 Sans prtraitement SC ; 2 prtraitement sans co-solvant, dure 15 h ; 3 5 % co-solvant, dure 4 h ; 4 10 % cosolvant, dure 4 h ; 5 15 % co-solvant, dure 4 h
On voit bien quaprs le prtraitement avec CO2-co-solvant (cas 3 - 5) la

Concentration en acide rosmarinique dans lextrait conventionnel est plus grande que celle
sans prtraitement (cas 1) ou aprs le prtraitement sans co-solvant (cas 2). Le fait que les valeurs de ce paramtre dans les trois cas du prtraitement avec du co-solvant (3 5) sont trs proches lune lautre, nous indique quon peut conomiser du co-solvant en lutilisant en faible proportion 5 % quantit suffisante pour amliorer la Concentration de lextrait en
acide rosmarinique.
Linfluence du prtraitement supercritique haute pression (280 bar) sur le Taux

dextraction conventionnelle est illustre par la figure IV.18.
- 150 -
100 90 80 70 Taux d'extraction, % 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3
Figure IV.18. Influence du prtraitement supercritique haute pression (P =280 bar, T =40
C, dbit du CO2 = 5 g/min) sur le Taux dextraction conventionnelle de lAR avec solvant 80 % thanol : 1 Sans prtraitement SC ; 2 prtraitement sans co-solvant, dure dESC = 5,5 h; 3 15 % co-solvant, dure dESC = 7,5 h
Les rsultats indiquent qu haute pression le prtraitement supercritique avec du cosolvant (cas 3) joue un rle ngatif sur le Taux dextraction de lAR compar celui obtenu sans prtraitement (cas 1) ou aprs le prtraitement sans co-solvant (cas 2). Ce comportement peut tre attribu au fait qu cette pression le pouvoir solvant augmente et le prtraitement avec du co-solvant enlve une grande quantit des substances non-dsires mais surtout une quantit dAR beaucoup plus leve (cf. III.3.2.5.1). Linfluence du prtraitement supercritique sur la concentration en acide rosmarinique dans lextrait conventionnelle est prsente sur la figure IV.19. Les valeurs dans les cas du prtraitement avec du co-solvant thanol (cas 3) et sans prtraitement de la matire premire (cas 1) sont proches. Dautre part, la concentration est plus leve dans le cas avec prtraitement sans du co-solvant (cas.2) que dans le cas avec le prtraitement avec co-solvant (cas 3). Cela peut sexpliquer toujours par le fait, que, pendant le prtraitement avec du cosolvant, on limine la fois de la matire non-dsire, mais aussi du produit-cible lacide rosmarinique.
- 151 -
30
25
20
15
10
0 1 2 3
Figure IV.19. Influence du prtraitement supercritique haute pression (P =280 bar, T = 40
C, dbit de CO2 = 5 g/min) sur la Concentration en acide rosmarinique CAR dans lextrait avec solvant 80 % thanol : 1 Sans prtraitement SC ; 2 prtraitement sans co-solvant, dure 5,5 h ; 3 15 % co-solvant, dure 7,5 h
Vu les rsultats discuts ci-dessus, on peut conclure, quau niveau du prtraitement supercritique en prsence du co-solvant thanol, il est prfrable de travailler basse pression (120 bar) parce que, tels rgimes, le Taux dextraction et la Concentration en acide
rosmarinique de lextrait du procd conventionnel augmentent. De plus, la consommation
dnergie pour le cycle du fluide est rduite. Concernant la concentration dAR dans lextrait final, elle est similaire en cas de prtraitement avec beaucoup ou peu de co-solvant. Il vaut mieux alors travailler en basse proportion, autour de 5 %.
- 152 -
IV.3.2.9.3. Influence du pr-traitement supercritique sur la cintique de lextraction conventionnelle
Figure IV.20. reprsente les courbes cintiques du processus dextraction conventionnelle pour des rgimes diffrents de prtraitement de la matire premire.
100
80
60
40
20
0 0 20 40 60 Temps, min 80 100 120
Figure IV.20. Influence du prtraitement supercritique sur la cintique dextraction
conventionnelle en mode batch. Solvant 80 % thanol. Sans co-solvant, P = 280 bar, T = 60 C, dbit de CO2 = 5 g/min, dure 5,5 h ; Sans co-solvant, P = 90 bar, T = 50 C, dbit de CO2=15 g/min, dure 45 min, Sans prtraitement supercritique ; 15 % co-solvant, P = 280 bar, T = 60 C, dbit de CO2 = 5 g/min, dure 7,5 h
On constate une amlioration de la cintique du processus dextraction aprs prtraitement supercritique sans co-solvant (cas et sur la figure IV.20.) par rapport lextraction sans pr-traitement (), dans la zone de rsistance interne prdominante. La raison probable est le changement de la structure de la matrice vgtale suite au prtraitement (enlvement des substances non-dsires, ouverture de cellules) facilitant laccs du solvant lacide rosmarinique se trouvant plus profondment dans le solide. Bien videmment, le processus dextraction conventionnelle dans le cas du prtraitement avec du co-solvant thanol () est le plus dfavoris cause de lenlvement dune partie importante de lacide rosmarinique par le solvant supercritique polaire [mlange CO2+thanol].
- 153 -
IV.3.2.10. Modlisation Dans cette partie, nous allons dcrire le processus dextraction en mode batch, dans les conditions opratoires les plus intressantes de point de vue pratique, par un modle mathmatique, en cherchant identifier des paramtres caractrisant le transfert de masse [93]. Le modle utilis est bas sur lanalogie entre le transfert de chaleur et de masse Dans notre cas, nous lavons utilis pour dcrire le transfert de lacide rosmarinique de lintrieur de la particule jusqu linterface des phases et de linterface au sein de la phase liquide. Notre matire solide (mlisse broye) contient des particules de deux formes diffrentes tiges et feuilles, assimils respectivement des cylindres et des plaques peu paisses. Dans le lot soumis aux expriences, nous avons dtermin la proportion des tiges et des feuilles qui est gale 3:7. Nous avons introduit cette proportion dans le modle. Le logiciel 20 SIM a t utilis pour la rsolution des quations du modle. Cest un simulateur dynamique qui permet des rsoudre des quations diffrentielles.
IV.3.2.10.1. Hypothses de modlisation
- La diffusion du solut est essentiellement dans la direction transversale (pour les feuilles) ou radiale (pour les tiges); - Chaque particule est symtrique et homogne; - La diffusivit du solut dans la phase solide est constante; - La phase liquide (solvant) est parfaitement mlange; - A linterface, la concentration dans les pores du solide est gale celle dans la couche limite de la phase liquide.
IV.3.2.10.2. Equations gnrales
Le modle de diffusion gnrale de lextraction solide liquide est reprsent par lquation gnrale suivante :
1 1 C (t , x) C (t , x ) = D 1 x t x x x
(IV.4)
o : D (m/s) est la diffusivit du solut dans la phase solide, - facteur gomtrique caractrisant la forme (=1 pour les plans et =2 pour les cylindres), C - concentration dans la phase solide (kg/kg).
- 154 -
Alors, pour les feuilles (indice 1) la forme correspondante est :

2C1 (t , x) C1 (t , x ) =D x 2 t
(IV.5)
et pour les tiges (indice 2) :
1 C 2 (t , x) 2 C 2 (t , x) C 2 (t , x ) = D + 2 x x t x
Pour la phase liquide nous avons :
(IV.6)
Vsys
dC L = C p x = e C L .a p .N dt
(IV.7)
o : Vsys (m3) est le volume du systme (solvant + la phase solide) ; t (s) est le temps ;
p x=e
(kg/m3) - concentration linterface des phases ; CL (kg/m3) - concentration au sein
du liquide ; (m/s) - coefficient de transfert de masse ; = (1 Vsolide / Vsys ) - porosit du solide (gale ` la partie de la phase liquide), Vsolide (m3) - volume de la phase solide; ap (m) surface de la particule, N - nombre des particules gale au rapport du volume du solide Vsolide
(m3) et le volume de la particule Vp (m3) : N= Vsolide Vsys (1 ) = Vp Vp

(IV.8)
On peut alors introduire le paramtre S englobant le volume et la porosit du systme, la surface et le nombre des particules. Ce paramtre est gal : Pour les feuilles :
Vsys (1 ) d 1
2
S1 =
a p .N Vsys .
= 2d p
1 Vsys .
2(1 )
(IV.9)
Pour les tiges :
S2 =
a p .N Vsys .
= 4 . 2 .d p
Vsys (1 )
2
. 2 .d Vsys .
4(1 ) 2 .
(IV.10)
o 1(m) est lpaisseur des feuilles, 2 (m) - diamtre des tiges, dp (m) - taille des particules.
- 155 -
Conditions initiales (t=0)
- Pour la phase liquide : concentration initiale du solvant CL = 0 (solvant pur) - Pour la phase disperse C1=C1, 0 et C2=C2, 0 (IV.11)
Conditions aux limites
- sur le plan central de la plaque (x=0)
C (t , x ) =0 x x =0
- sur laxe du cylindre (r = 0)
pour t
(IV.12)
C (t , r ) =0 r r =0
-
pour t
(IV.13)
A linterface(x=/2=e) les deux flux sont gaux
.S . C p
C (t , x ) C L = D x =e x x =e
(IV.14)
IV.3.2.10.3. Comparaison aux rsultats exprimentaux

Les rsultats des simulations avec ce modle sont prsents en termes du Taux
dextraction de lacide rosmarinique au cours de temps. Nous avons dtermin

exprimentalement les paramtres suivants : Lpaisseur moyenne des feuilles (plates) 1 et le diamtre moyen des tiges (cylindres) 2 par microscopie lectronique balayage (cf. II.1.); la taille moyenne des particules dp par tamisage. Les deux paramtres ajustables sont la diffusivit D et le coefficient de transfert de masse . Nous avons appliqu ce modle pour deux tempratures diffrentes (25 et 50 C) et trois compositions du solvant (15, 50 et 80 % thanol). La modlisation de lextraction ces conditions particulires nous intresse pour les raisons suivantes : le solvant 15 % thanol (50 C), tant moins concentr et moins inflammable, correspond aux exigences opratoires des extracteurs conventionnels avec des solvants moins inflammables (comme, par exemple,
- 156 -
lextracteur rotatif prsent dans IV.5.) ; 80 % dthanol (50 C) ne contient quun peu deau, ce qui le rend intressant pour certaines techniques (notamment la nano-filtration, prsente dans IV.4.). La cintique dextraction avec le solvant donnant le meilleur Taux dextraction, 50 % dthanol, a t modlise la temprature 50 C ( laquelle on arrive au Taux
dextraction le plus lev) et 25 C (intressante de point de vue dapplication pratique plus de scurit, moins de risques dinflammation et de dgradation thermique). Les figures IV.21 et IV.22. prsentent des exemples de rsultats de simulation compars aux rsultats exprimentaux. On y voit un accord trs satisfaisant.
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 Temps, min 80 100 120
Figure IV.21. Application du modle sur la cintique dextraction solide-liquide avec
solvant 15 % thanol et temprature 50 C. Taille des particules 0,94 mm. points exprimentaux ; courbe calcule par le modle
- 157 -
100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 Temps, min 80 100 120
Figure IV.22. Application du modle sur la cintique dextraction solide-liquide avec
solvant 50 % thanol et temprature 50 C. Taille des particules 0,94 mm. points exprimentaux ; courbe calcule par le modle
Le tableau IV.2. prsente les valeurs de la diffusivit D et le coefficient de transfert de masse diverses conditions opratoires identifies par la mthode des moindres carrs.
Tableau IV.2. Valeurs de la diffusivit et du coefficient de transfert de masse obtenues avec le
modle Solvant
15 % thanol 50 % thanol 50 % thanol 80 % thanol
Temprature, C
50 25 50 50
D*1013, m/s
9,99 9,02 9,709 10,02
*107, m/s
3,45 3,31 9,02 4,11
Le coefficient de transfert de masse correspond au transfert linterface entre les phases solide et liquide. Il est sensiblement influenc par la temprature et la composition du solvant parce que ce coefficient reflte le transfert externe dpendant du coefficient de diffusion du solut, lui-mme favoris par une lvation de temprature. Dautre part, la diffusivit D (qui ne dcrit que le transfert interne dans la particule) nest pas trs influence par ces deux paramtres parce quelle reflte surtout les proprits de la matrice vgtale.
- 158 -
Laugmentation du de 25 50C correspond lamlioration de lextraction avec laugmentation de la temprature. A 50oC les valeurs de sont relativement proches pour les solvants 15 et 80 % thanol (ce qui correspond taux dextraction similaire voir fig.), tandis que pour 50 % thanol (50 C) est considrablement plus grand et correspond la cintique plus rapide et au Taux dextraction lev obtenu avec ce dernier solvant. En conclusion, ce modle est en bon accord avec les rsultats exprimentaux et on peut lutiliser pour identifier des paramtres caractrisants le transfert de masse. Il sera aussi intressant de lappliquer sur des dispositifs plus grande chelle comme, par exemple, lextracteur rotatif dcrit dans IV.5.
IV.3.3 Conclusions
Linfluence de divers paramtres opratoires (le type et la concentration du solvant, lhydromodule, la temprature, la granulomtrie, etc.) sur lextraction de lacide rosmarinique partir de la plante mlisse a t tudie. Cela nous a permis de choisir les conditions opratoires les plus appropries pour ce systme pour des applications ralistes. Ltude de la cintique dextraction solide-liquide nous a donn des informations sur lvolution du processus au cours du temps. Elle nous a permis de distinguer les priodes de contrle externe ou interne et aussi, de dterminer le temps ncessaire pour lachvement de lextraction. Le processus a t dcrit par un modle mathmatique. La bonne correspondance avec des rsultats exprimentaux nous permet dutiliser cet outil pour la simulation et la prvision des volutions des processus menes des conditions opratoires diffrentes. Le couplage avec un pr-traitement par extraction supercritique nous a permis dobtenir des produits enrichis en notre compos cible lacide rosmarinique.
- 159 -
IV.4. Nanofiltration
La mthode de nanofiltration permet de sparer des substances en fonction de leur masse molculaire respectivement taille de la molcule. Llment essentiel du procd de nanofiltration est une membrane poreuse, dont les pores sont comparables la taille des molcules. Cette membrane spare des substances en fonction de leur masse molculaire, en laissant passer des molcules plus petites que les pores et en retenant des molcules plus grandes. La force motrice est la diffrence de pression des deux cts de la membrane, cre par un gaz inerte (azote dans notre cas). La nanofiltration peut tre applique pour la concentration des solutions. Le liquide passant par la membrane est appel filtrat (en anglais
permeate), la solution concentre contenant le compos cible retenu est appel retentat (en
anglais retentate). De cette faon, il ny a pas dtape spciale de rgnration du solvant. Le filtrat reprsente un liquide sans solut pouvant tre directement utilis comme solvant recycl. Le retentat reprsente une solution concentre en produit cible. La nanofiltration possde les avantages principaux suivants : - En travaillant basse temprature on protge les qualits du produit et on vite la thermodestruction ventuelle des composs ; - La disparition de ltape dvaporation rend le procd plus conomique au niveau de consommation dnergie ; - On peut r-utiliser directement le filtrat comme solvant dans un schma avec recyclage. Dans nos tudes, nous avons utilis la nanofiltration pour concentrer des extraits liquides contenant l'acide rosmarinique.
IV.4.1. Paramtres de base
Les paramtres de base du procd de nanofiltration sont : - Le Rejet (en anglais Rejection ) reprsente le taux de rtention du compos cible - plus la membrane retient le compos cible, moins de ce compos est prsent dans le filtrat et plus le rejet devient proche de 1 (100 %)
RJ = 1
CF CR
(IV.15)
o : CF est la concentration du compos cible dans le filtrat et CR est sa concentration dans le retentat. - 160 -
- Le Flux du filtrat - reprsente le volume du filtrat (VF) pass par unit de surface (A) de la membrane par unit de temps :
JF =
VF (l.m-2.h-1) A.t
(IV.16)
Ces deux paramtres sont considrs plus en dtail dans Rsultats (IV.4.4.).
IV.4.2. Choix de la membrane
Le choix dune nano-membrane dpend de la masse molculaire du compos retenir. Chaque membrane est fournie avec sa propre caractristique appele Seuil de coupure (en anglais molecular weight cut off MWCO ). Cette valeur est dfinie laide dune solution doligomres de diverses masses molculaires connues soumise nano-filtration. Aprs la fin du procd, on estime la masse molculaire M de loligomre retenu 90 %, cest--dire son rejet Rj = 90 %. Tous les oligomres ayant une masse suprieure sont retenus plus de 90 %. Un exemple issu de la littrature [86] est prsent sur la figure IV.23
Figure IV.23. Exemple de dtermination de Seuil de coupure dune membrane[86]
- 161 -
Pour nos tudes nous avons choisi la membrane DuraMem 200 (assurant Rj = 90 % pour des composs avec masse molculaire M = 200 g/mol). La masse molculaire de notre compos cible lacide rosmarinique (M = 360,40 g/mol) est plus grande que le Seuil de
coupure de cette membrane, ce qui assure au moins un rejet de 90%. Le Rejet effectif de lAR
obtenu avec cette membrane est discut dans chapitre IV.4.4.2.
IV.4.3. Exprimentations
Dans nos tudes le procd de nanofiltration a t utilis pour concentrer des solutions obtenues par extraction solide-liquide en mode batch. Les solvants utiliss pour lextraction ont t 50 % et 80 % thanol. Le premier donne de meilleurs rsultats dextraction de lacide rosmarinique partir de la mlisse. Le deuxime correspond mieux aux recommandations du fournisseur de membranes dviter le traitement de solutions contenant beaucoup deau. Nous avons prfr travailler pralablement avec le solvant plus concentr en alcool pour prolonger la vie de la membrane. Afin de compenser son pouvoir solvant rduit, nous avons effectu des triples extractions (cf. IV.3.2.8.) dont les extraits ont t soumis nanofiltration. La matire vgtale soumise lextraction solide liquide a t de la mlisse broye, prtraite ou non avec du CO2 supercritique. A la fin de la premire extraction, lextrait liquide est spar du rsidu solide par filtration conventionnelle et ensuite soumis nano-filtration. Le rsidu solide passe par une seconde tape dextraction avec du solvant frais en mme quantit que dans ltape prcdente. De mme, lextrait obtenu est nano-filtr et le rsidu solide subit une troisime extraction, toujours avec la mme quantit de solvant. Afin dtudier le pouvoir solvant du filtrat issu de la triple extraction (1), nous lavons utilis comme solvant dans un schma conscutif de triple extraction (2). Le filtrat obtenu par nano-filtration de lextrait dune tape donne de la triple extraction (1-i) a t rutilis comme solvant dans la mme tape dun nouveau cycle de triple extraction (2-i) : Le filtrat obtenu par nano-filtration de lextrait de la premire tape de lextraction (1-I) devient solvant dans la premire tape de lextraction (2-I) dun nouvel chantillon de plante, le filtrat de la seconde extraction (1-II) est utilis comme solvant dans la seconde tape de lextraction (2-II) et le filtrat de la troisime extraction (1-III) devient solvant de la troisime tape dextraction (2-III).
- 162 -
Avant le dbut de nano-filtration des extraits, la membrane a t mise en fonction avec 300 ml dthanol 80 % 30 bar pour viter des effets ventuels de compression de la membrane et pour enlever les huiles mises par le fabricant pour protger sa couche active. Ensuite, une solution dAR pur dans 80 % thanol (4,6 g/l) a t filtre pour confirmer le haut rejet de la membrane DuramemTM 200 rapporte pralablement [94]. Le volume des extraits soumis nano-filtration a t de 45 ml. Les filtrats ont t collects dans un cylindre et le temps de collection dun volume donn a t mesur. A la fin, des chantillons du liquide sortant de la cellule ont t pris et analyss pour dterminer leurs concentrations en AR. Les concentrations moyennes du filtrat et rtentat ont galement t dtermines. Le procd a t arrt pour un volume de retentat tel que la concentration de lacide rosmarinique ne dpasse pas sa solubilit afin dviter la cristallisation et le colmatage de la membrane. En gnral, autour de 30 ml du volume initial de lextrait ont t spars, ce qui correspond une concentration triple dans le rtentat. Les extraits obtenus par les deux solvants (50 et 80 % dthanol) ont t soumis nano-filtration en utilisant la mme membrane. Entre les deux sries successives la membrane a t trempe dans le solvant de lextrait traiter prochainement.
- 163 -
IV.4.4. Rsultats
Figure IV.24. montre les concentrations en AR des extraits liquides dans les trois tapes dextraction des conditions diffrentes.
8 7 Concentration en AR dans l'extrait, g/l 6 5 4 3 2 1 0 I II Etape d'extraction III
Figure IV.24. Concentration en AR dans les extraits liquides de la premire, seconde et
troisime tape de la triple extraction : partir de la mlisse non-prtraite, solvant 50 % thanol ; partir de plante prtrait par CO2 supercritique (90 bar, 50 C, dbit de CO2 5 g/min), solvant 80 % thanol ; partir de la mlisse non-prtraite, solvant 80 % thanol
Lanalyse des rsultats de cette figure, base sur le bilan de matire sur lAR montre que leffet prdominant dans la seconde et troisime tape est le lavage. Cependant, surtout dans le cas du solvant 80 % thanol, une quantit supplmentaire est extraite pendant les tapes II et III, ce qui compense le taux dextraction infrieur dans la premire tape avec ce solvant. Enfin, le rendement total dAR partir de la matire vgtale sche aprs la triple extraction atteint approximativement la mme valeur avec les deux solvants. Dans ces circonstances, le solvant contenant 80 % thanol est plus intressant que celui 50 % thanol. En effet :
La solubilit de lacide rosmarinique dans 80 % thanol est plus grande et cela permet
dobtenir par nano-filtration un retentat plus concentr.
- 164 -
La dure de vie de la membrane est plus longue, selon les recommandations du
fabricant (MET Ltd).
IV.4.4.1. Bilan de matire de lacide rosmarinique Le bilan matire a t utilis pour valuer la validit de chaque exprience. Lerreur a t calcule par le rapport de la diffrence des deux termes de lquation de bilan
VAC A = VRCR + VF C F
(IV.17)
o : VA, VR et VF (L) sont, respectivement, les volumes dalimentation, du rtentat et du filtrat,
CA et CR (g/L) sont, respectivement, les concentrations en acide rosmarinique de lalimentation

et du rtentat, C F (g/L) est la concentration moyenne en AR dans le filtrat. La valeur moyenne de lerreur a t environ 3 %. Le terme de droite de lquation (IV.17) a t toujours infrieur celui de gauche cause des volumes non rcuprs immobiliss dans la membrane, dans les tubes et sur les parois de la cellule.
IV.4.4.2. Rejet du compos-cible Le rejet de lAR par la membrane a t calcul par trois relations :
CR lg C R3 = A (c) VA lg V R
R1 = 1
CF (a) ; CA
R2 = 1
CFf CR
(b) ;
(IV.18)
avec CFf (g/L) concentration en AR du filtrat la fin de la filtration. Les rsultats des quations (IV.19 a) et (IV.19 b) ont donn un trs bon accord (R2
R1 0,01). Dans la suite des calculs les valeurs moyennes arithmtiques de R1 et R2 ont t
appliques ainsi utilisant toutes les quatre valeurs exprimentales de la concentration. Lquation (IV.19 c), obtenue par intgration du bilan de masse diffrentiel, donne dans la plupart des cas des valeurs inferieures pour R1 (R3R1 0,02). Pourtant, toutes les valeurs du rejet ont t dtermines suprieures de 99 %, ce qui confirme la slectivit excellente de la membrane DuramemTM 200. Ces rsultats sont meilleurs que ceux obtenus avec dautres
- 165 -
membranes testes antrieurement [94] Duramem 500 et Duramem 300, qui ne dpassent pas des valeurs de lordre de 95 % (dans le cas de Duramem 300). Avec cette valeur leve du taux de rejet, lacide rosmarinique a pu tre concentr dun facteur suprieur 3 pour atteindre des valeurs de 15 19 g/L pour les premiers extraits de la plante. Ces valeurs sont proches de la solubilit de lAR (15g/L dans leau et 25 g/L dans lthanol 25C [12]). Quelques rsultats reprsentatifs sont exposs dans le tableau IV.3. On ne remarque pas dinfluence importante de la concentration en thanol du solvant ni du pr-traitement supercritique sur la valeur du rejet. Il est noter lgalit approximative des rejets de la solution modle de lAR et des extraits contenants dAR. Un tel effet a dj t rapport dans le cas de la nano-filtration dextraits dAR issus de romarin [94]
Tableau IV.3. Donnes reprsentatives pour lextraction et la nanofiltration de lacide
rosmarinique
Etape dextraction 1 1 1* Solution de lAR pure 2*
*
Solvant
CA
VA/VR
CR
CF
CFf
R1 + R2 2
0,997 0,992 0,997 0,994
Erreur du bilan de matire % -0,4 -1,5 -1,6 -0,5
% thanol 80 50 80 80
g/L 5,17 6,68 5,94 4,60
3 3 2,7 3
g/L 15,39 19,58 15,55 13,6
g/L 0,025 0,080 0,024 0,074
g/L 0,030 0,094 0,029 0,077
80
2,47
2.9
6,96
0,012
0,013
0,996
-2,7
avec prtraitement supercritique
IV.4.4.3. Dtermination du flux et modlisation Lvolution du volume du filtrat au cours du temps est prsente sur la figure IV.24. Toutes les courbes indiquent que le flux diminue de faon continue avec le temps et peuvent tre modlises par un polynme dordre 2 :
VF = at + bt 2 A
(IV.19)
o : A (m) est la surface de la membrane. - 166 -
Les valeurs des paramtres empiriques a et b ont t dtermines par confrontation aux rsultats exprimentaux utilisant la mthode des moindres carrs (coefficient de corrlation obtenu 0.997 0.999).
6 Volume de filtrat / Surface de membrane, l/m
0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Temps, min
Figure. IV.25. Volume du filtrat accumul par unit de surface de la membrane en fonction
du temps: Solvant 50 % thanol, tape III ; Solvant 80 % thanol, solution dAR pur ;
Solvant 50 % thanol, tape I ; Solvant 80 % thanol, tape III, Solvant 80 %
thanol, tape I ;
courbes calcules par quation (IV.19).
Le flux pour un temps donn a t calcul par lexpression (IV.19) obtenue par drivation de lquation (IV.20)
JF =
dVF = a + 2bt Adt
(IV.20)
Lvolution du flux de filtrat JF au cours du temps est prsente sur la figure IV.26. a) et b).
- 167 -
12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 0 20 40 Temps, min 60 80 100
Flux du filtrat, l/(mh)
a)
6 Flux du filtrat, l/(mh)
1 0 20 40 Temps, min 60 80 100
b) Figure IV.26. a) et b) Variation du flux du filtrat au cours du temps. Solvant 50 %
thanol, tape III ; Solvant 80 % thanol, solution de lAR pure ; Solvant 50 % thanol, tape II ; Solvant 50 % thanol, tape I ; Solvant 80 % thanol, tape I ; Solvant 80 % thanol, tape III ; Solvant 80 % thanol, tape III, prtraitement avec CO2 ; Solvant 80 % thanol, tape II, prtraitement avec CO2 ;
Solvant 80 % thanol, tape I, prtraitement avec CO2
- 168 -
Pour les extraits avec le solvant 50 % thanol (figure IV.26.a)), le flux augmente de ltape I ltape III. Cela peut tre attribu la concentration plus faible de lAR dans les extraits. Le mme comportement est valable pour le solvant 80 % thanol dans le cas de la plante prtraite avec du CO2 supercritique (figure IV. 26. b). Sur la figure IV.26. a), le flux de la solution contenant uniquement de lAR dans 80 % thanol est plus lev que les flux de lextrait (tape I et II) de la mlisse non-prtraite. Ce phnomne est sans doute d la prsence des autres composs extraits paralllement avec lAR qui empchent la filtration et diminuent le flux. Il faut noter que la pente des lignes des extraits sans pr-traitement et la solution modle est la mme. A des concentrations approximativement gales, les flux avec le solvant contenant 50 % thanol sont considrablement plus levs que les flux avec 80 % dthanol. Cela peut tre attribu la quantit leve deau dans ce solvant. Malheureusement, la prsence deau diminue la dure de vie de la membrane et il est donc prfrable de travailler avec le solvant contenant moins deau. Le pr-traitement avec du CO2 en tat supercritique fait apparatre un flux lgrement plus faible.
Linfluence de la Concentration en AR dans lextrait sur la rsistance due la pression osmotique et la couche de polarisation (le colmatage sur la membrane na pas t observ) sur les flux de filtrat et de solvant peut tre exprime par les quations et respectivement
JF =
P Rm + RO + RP
P Rm
(IV.21)
Js =
(IV.22)
o : Rm est la rsistance de la membrane, RO est la rsistance due la pression osmotique, RP est la rsistance due la couche de polarisation et P est la diffrence de pression applique. En combinant ces deux quations, la rsistance supplmentaire sexprime par la relation :
1 1 RO + RP = P J J s F
(IV.23)
- 169 -
A faible concentration dans le filtrat ( cause du rejet lev de la membrane), RO sera proportionnelle, chaque instant, la concentration courante du rtentat. Cette dernire peut tre calcule par l quation (IV.18c) en utilisant la valeur exprimentale du volume de filtrat collect cet instant. Le Flux du filtrat JF peut tre calcul par lquation (IV.20) et le Flux du
solvant JS peut tre dtermin pendant le conditionnement de la membrane avec le solvant

pur. A partir de ces considrations (RO + RP) a t dtermin et trac en fonction de la concentration courante du rtentat (CR) pour le solvant 80 % thanol (JS = 19 L/(mh)) (figure. IV.26.). En chelle double-logarithmique, des droites ont t obtenues, ce qui suggre une relation de la forme suivante :
Ro + Rp = kC n
(IV.24)
100 Resistance pression osmotique+Resistance polarisation
10
1 1 10 Concentration en acide rosmarinique dans le retentat, g/l 100
Figure. IV.27. Rsistance supplmentaire due la pression osmotique et la couche de
polarisation en fonction de la concentration courante du rtentat. Solvant 80 % thanol : Etape III, prtraitement avec CO2 ; Etape II, prtraitement avec CO2 ; Etape I, avec prtraitement CO2 ; Etape III, sans prtraitement ; Etape II, sans prtraitement ; Etape I, prtraitement ; solution de lAR pur; valeurs calcules
Les valeurs de k et n ont t identifies par la mthode des moindres carrs. Des valeurs similaires de n pour les extraits et la solution dAR pur ont t obtenues (ne = 0,68
- 170 -
1,19 et ns = 1,2). Toutes les valeurs de n sont voisines de 1, ce qui est en accord avec
lquation de Vant Hoff pour la pression osmotique, valable pour les faibles concentrations. Cependant, les valeurs de k sont diffrentes, peut-tre cause des la differenence des composs non-dsirs prsents dans lextraite. Les valeurs du n voisines de 1 indiquent donc que la rsistance supplmentaire est surtout due la pression osmotique (RO >> RP). Lorsque lagitation est arrte (fig. IV.27. - ), la valeur de la somme (RO+RP) commence augmenter plus rapidement cause de laugmentation de la couche de polarisation. On peut donc conclure que lagitateur de la cellule ralise 350 tr/min une bonne homognisation du liquide dans la cellule et limine linfluence de la couche de polarisation.
IV.4.4.4. Rutilisation du filtrat en tant que solvant Une valeur leve du rejet lev signifie que le filtrat est dbarrass du compos-cible. Ceci ouvre la possibilit de rutiliser le filtrat comme solvant dextraction. Pour confirmer cette option, nous avons men des expriences en remplaant le solvant frais par du filtrat. Comme nous lavons dj expliqu, nous avons utilis le filtrat de chaque tape de lextraction triple comme solvant de la mme tape dun nouveau cycle dextraction triple. Le solvant utilis a t 80 % thanol.
7 Concentration en AR dans l'extrait, g/l
0 I II Etape de l'extraction III
Figure IV.28. Concentration en AR dans lextrait avec du solvant frais () et du filtrat utilis
comme solvant ()
- 171 -
Selon les rsultats prsents sur la figure IV.28 Concentration en AR dans lextrait liquide obtenue avec le filtrat utilis comme solvant est mme lgrement plus leve que celle obtenue avec le solvant frais. La diffrence pourrait tre attribue la prsence invitable dacide rosmarinique dans le filtrat recycl, lvaporation partielle de lthanol pendant les manipulations avec le filtrat, les imprcisions occasionnelles lies la variation de la teneur en AR dans la matire premire etc. Ces rsultats sont encourageants puisquils prouvent que le filtrat peut tre recycl comme solvant. De cette faon il devient possible dorganiser des schmas de couplage des tapes du procd.
IV.4.4.5. Conclusions Les rsultats dtudes sur la nano-filtration montrent quelle reprsente une alternative attractive et raisonnable la concentration des solutions par vaporation, en proposant une consommation dnergie rduite. Les valeurs leves du Rejet de lAR (Rj > 99 %) ont t observes, indpendamment du prtraitement, de la concentration du solvant et de la concentration en AR dans les rtentats. Les valeurs des flux de filtrat obtenues sont compatibles avec une application industrielle. On na pas observ le colmatage sur la membrane jusqu des concentrations proches de la solubilit de lAR dans le mlange solvant. Lgalit de la valeur des rejets de la solution modle et de celles des extraits, et lgalit des pentes des courbes dvolution du flux font apparatre des avantages supplmentaires. Lutilisation des solutions modles des composs purs semble utile la prvision de lvolution du flux travers la membrane des concentrations diffrentes en compos cible dans le rtentat. En connaissant la pente de la courbe du flux pour la solution modle, on peut tracer la courbe pour le flux dextrait partir de quelques mesures seulement. Le mme processus est valable pour lestimation de la rsistance due la pression osmotique des soluts et la couche de polarisation en fonction de la concentration du rtentat. Daprs nous, la gnralisation de cette conclusion ncessiterait nanmoins des tudes complmentaires en considrant le comportement dautres systmes (membrane, plante, solvant, substances, etc.).
- 172 -
IV.5. Application semi-industrielle : extraction solide-liquide dans un extracteur rotatif

Dans la perspective dune application industrielle, il est ncessaire de raliser des tests plus grande chelle afin dobtenir des informations sur le procd dans des conditions plus proches dun procd rel industriel. Pour effectuer des tests nous avons choisi lappareil Phytex, construit lInstitut de Gnie Chimique de Sofia. Le principe de cet appareil est de crer des conditions favorables lintensification du processus de contact de la matire solide et du solvant, proches des celles ralises au laboratoire en mode batch.
IV.5.1. Exprimentations et rsultats
Nous avons donc tudi plus profondment le processus dextraction de lacide rosmarinique contenu dans la mlisse. Dautre part, afin de tester le fonctionnement de linstallation avec des matires premires diffrentes, lextraction de feuilles de ginkgo (Ginkgo biloba) a t aussi ralise. Bien que hors du cadre de cette tude, certains rsultats sur cette matire premire seront prsents titre de comparaison. Dans le cas de la mlisse, avant dtre charge dans lextracteur, la matire premire est dabord broye et, dans le cas de la mlisse, tamise et divise en deux fractions de taille moyenne 0,94 et 1,33 mm. Lextracteur est charg avec 4,8 kg de la matire vgtale, ensuite mise en contact avec 35 L du solvant (15 % thanol) 50C. Cette valeur de la concentration du solvant a t choisie en respectant les recommandations du constructeur de travailler avec des solutions alcooliques faible concentration afin dviter linflammation du solvant ainsi que laccumulation des vapeurs inflammables. La valeur de lhydromodule est autour de 7. Ce nest pas loin de la valeur 10, pour laquelle nous avons montr, quil ny a pas de limitation de solubilit (voir IV.3.2.6). Dans le cas du ginkgo, la matire est broye et directement charge dans lextracteur (sans fractionnement en fonction de la taille des particules). Lhydromodule est pris la valeur R = 6. Pendant lextraction, des chantillons de lextrait liquide sont pris priodiquement et manipules suivant le schma dj dcrit en IV.2.2. - vaporation et schage sous vide, suivi par analyse HPLC (dans le cas de la mlisse). Aprs la fin de lextraction, lextrait liquide est - 173 -
soumis distillation sous vide pour rcuprer lalcool et la solution aqueuse restante est sche par atomisation. Le produit final reprsente une poudre brune qui sera traite plus tard par le CO2 supercritique (voir IV.5.3.3.) afin dobtenir une purification supplmentaire de ce produit. Les rsultats sont prsents en utilisant les paramtres :
Taux dextraction E, % (dans le cas dextraction de lacide rosmarinique) :

E (% ) = m AR x100 , m AR max
(IV.3)
Rendement de lextrait total YEX, % (lorsquon compare la cintique de lextraction de la

mlisse et de ginkgo :
YEX (% ) =
m EX mmat . prem
x100
(IV.2)
Concentration en acide rosmarinique dans lextrait CAR, % (pour quantifier la purification du

produit aprs le traitement avec lESC) :
C AR (% ) = m AR x100 m EX
(IV.1)
IV.5.1.1. Influence de la granulomtrie sur lextraction de lacide rosmarinique

100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 0,94 Taille moyenne des partcicules, mm 1,33
Figure IV.29. Influence de la granulomtrie sur le Taux dextraction
- 174 -
La figure IV.29. prsente le taux dextraction de lacide rosmarinique en faisant varier la taille des particules de mlisse. Ici on confirme le rsultat dj obtenu en conditions laboratoires batch - le taux dextraction est plus lev pour les particules les plus petites.
IV.5.1.2. Cintique de lextraction Pour observer lvolution de lextraction au cours de temps, une tude de cintique du processus dans lextracteur a t faite. Lobjectif ici est double. Dun part, on peut estimer le temps de contact entre la matire vgtale et le solvant ncessaire lachvement du processus. Le deuxime objectif est de comparer lefficacit de cet appareil avec celle dune extraction laboratoire en batch mene dans des conditions dagitation parfaite. Les tests ont t raliss avec deux plantes mlisse et ginkgo - avec le mme solvant : 15 % thanol. Les rsultats sont prsents sur la figure IV.30. Yex reprsente la quantit de matire extraite par rapport la quantit initiale de matriel vgtal.
25
Rendement de lextrait total, %
20
15
10
0 0 20 40 60 80 100 120 Temps, min 140 160 180 200
Figure IV.30. Cintique dextraction : Mlisse, Ginkgo (Ginkgo biloba)
On voit que lquilibre (les plateaux des courbes) est atteint aprs 40 - 50 min. Cela nous permet de dfinir le temps de contact ncessaire lextraction des plantes dans cet appareil. On voit aussi que pour les deux plantes le rendement est approximativement le mme autour de 23%. - 175 -
La figure IV.31. prsente les rsultats de lextraction de lacide rosmarinique avec diffrentes granulomtries de la matire solide.
100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 120 Temps, min 140 160 180 200
Figure IV.31. Influence de la granulomtrie sur la cintique dextraction de lacide
rosmarinique partir de la mlisse. Taille moyenne 0,94 mm ; Taille moyenne 1,33 mm
Comme attendu, le taux dextraction maximal de lAR (le plateau) est moins lev dans le cas de particules plus grosses. Cest un rsultat tout fait logique pour les raisons expliques plus haut (voir IV.2.3.3 et IV.4.3.1). On constate galement ici, que le temps de contact ncessaire pour arriver lquilibre devient plus lev pour des fractions plus grosses. La figure IV.32. reprsente une illustration comparative des cintiques dextraction de lacide rosmarinique laboratoire en batch (agitation parfaite) et dans lappareil rotatif. Selon les rsultats, la cintique du processus dans lextracteur rotatif suit exactement celle dune extraction laboratoire. Do la conclusion que lextracteur rotatif assure des conditions de transfert intenses, similaires au rgime dagitation parfaite.
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100 90 80 Taux d'extraction, % 70 60 50 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 Temps, min 120 140 160 180 200
Figure IV.32. Cintique dextraction de lacide rosmarinique partir de la mlisse.
Dans lextracteur rotatif (90 tr/min) ; En mode batch (chelle laboratoire)
IV.5.1.3. Couplage avec lESC Afin daugmenter le contenu en acide rosmarinique dans lextrait sec issu de lextracteur rotatif, nous avons trait cet extrait (sous forme de poudre aprs le schage par atomisation) par lESC. Ensuite, le rsidu supercritique est analys par HPLC. Le mode opratoire lors de lextraction supercritique tait le suivant : pression dans lextracteur 200 bar, temprature de lextracteur 40 C, dure de lextraction 5 heures. Deux dbits diffrents de CO2 ont t appliqus : Q = 5 et 20 g/min.
- 177 -
20
15
10
0 1 2 3
Figure IV.33. Concentration en acide rosmarinique dans lextrait. 1 Sans traitement
supercritique ; 2 traitement supercritique, dbit de CO2 = 5 g/min ; 3 traitement supercritique, dbit de CO2 = 20 g/min
Les rsultats (figure IV.33.) montrent une augmentation de la concentration dacide rosmarinique dans lextrait, plus leve dans le cas du dbit de CO2 le plus lev Cette amlioration du produit final est plus importante quand on travaille avec un dbit plus lev cause de la plus grande quantit de CO2 en contact avec la matire premire. Cela signifie que dans le cas du plus faible dbit, lESC nest pas encore termine au bout de 5 h.
IV.5.1.4. Modlisation Le modle utilis pour simuler lextraction solide-liquide en condition batch lchelle laboratoire (cf. IV.3.2.10.) a t appliqu lextraction de lacide rosmarinique partir de la mlisse, effectue dans lextracteur rotatif semi-industrielle. La proportion des tiges et des feuilles a t toujours estime est gale 3:7.Les solutions du modle, dans le cas dextraction de diffrentes tailles de particules sont prsentes sur les figures IV.34. et IV. 35.
- 178 -
Figure IV.34 Application du modle sur la cintique dextraction solide-liquide dans
lextracteur rotatif. Taille des particules 0,94 mm. points exprimentaux ; courbe de simulation
Figure IV.35. Application du modle sur la cintique dextraction solide-liquide dans
lextracteur rotatif. Taille des particules 1,33 mm. points exprimentaux ; courbe de simulation
De mme que pour les simulations lchelle laboratoire, les solutions du modle sont en bon accord avec les rsultats exprimentaux lchelle semi-industrielle. Une comparaison
- 179 -
entre les paramtres ajustables obtenus avec ces deux modes dextraction en utilisant le mme solvant (15 % thanol) est prsente dans le tableau IV.4.
Tableau IV.4. Valeurs de la diffusivit D et du coefficient de transfert de masse obtenues
avec le modle (15% thanol) Type extracteur Taille des particules, D*1013, m/s mm
Batch Extracteur rotatif Extracteur rotatif 0,94 0,94 1,33 9,99 9,997 10 3,45 3,44 3,46
*107, m/s
Les valeurs obtenues sont trs proches. Cela correspond parfaitement au rsultat illustr sur la figure IV.32, montrant la cintique trs similaire du processus en batch et dans lextracteur rotatif. Les valeurs similaires de D pour des tailles des particules diffrentes signifient que la diffusivit dans le solide est indpendante de la taille des particules et dpend surtout de la structure de la matrice vgtale. Les rsultats ci-dessus signifient que le modle est applicable pour dcrire le procd lchelle semi-industrielle. Les valeurs similaires des paramtres ajustables deux chelles ouvrent la perspective dutiliser les paramtres dtermines lchelle laboratoire pour dcrire le procd chelle industrielle.
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Chapitre V
Couplages des diffrentes techniques
Chapitre V. Couplages des diffrentes techniques
V. Couplages des diffrentes techniques

Dans notre travail, nous avons utilis dabord sparment les mthodes dextraction. Suivante
- Lextraction Soxhlet a t utilise pour estimer la teneur totale en acide rosmarinique dans les divers lots de mlisse et pour dterminer lefficacit des divers solvants. - Lextraction batch nous a permis de dterminer les conditions optimales dextraction comme le type et la concentration du solvant, la temprature, la taille des particules solides et la valeur de lhydromodule sur la cintique dextraction dacide rosmarinique de mlisse. La cintique du processus nous a servi dterminer le temps ncessaire pour lextraction complte. - Afin dobtenir des informations sur le procd dans des conditions plus proches dun procd rel industriel, nous avons mis en uvre cette extraction conventionnelle batch dans un extracteur rotatif semi-industriel. La comparaison avec lextraction laboratoire en mode batch a montr que lextracteur rotatif assure des conditions opratoires similaires au rgime dagitation parfaite. - Nous avons ensuite utilis la nanofiltration pour concentrer les extraits liquides. Cette technique nous a permis de protger les qualits du produit en travaillant basse temprature et dviter ltape dvaporation, ce qui rend de plus les procds plus conomiques au niveau de la consommation dnergie ; - Lextraction supercritique a t utilise comme procd pour extraire lhuile essentielle de mlisse. Cest une technique trs performante pour lextraction dhuiles essentielles mais nous avons nanmoins constat la co-extraction de composs non-dsirs, tels que les cires. Nous avons tent de sparer les cires de lhuile essentielle en jouant sur les conditions de temprature et de pression de lextracteur et du premier sparateur. Nous avons russi isoler une partie des cires du produit final et cela reprsente une approche prometteuse. Cependant, des tudes complmentaires dans ce domaine restent ncessaires.
Nous avons ensuite tests plusieurs schmas de couplages de ces techniques
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V.1. Couplage de deux extracteurs Soxhlet

Il sagit dun couplage de deux extractions Soxhlet avec solvants hexane et thanol respectivement (figure V.1.).
Figure V.1. Schma de couplage de deux extractions Soxhlet.
La concentration en acide rosmarinique du produit final a augment de 6 % par rapport au produit obtenu avec le simple Soxhlet lthanol. Cependant, lhexane est un solvant toxique et doit tre totalement limin du produit par des traitements supplmentaires, ce qui pose des difficults du point de vue de lapplication pratique du produit final.
V.2. Couplage de lextraction supercritique avec lextraction Soxhlet

Nous avons donc choisi comme alternative lutilisation du CO2 supercritique. De plus, lextraction avec du CO2 permet dajuster la slectivit et le pouvoir solvant selon les paramtres opratoires. Le schma prsent sur la figure V.2. a t appliqu.
- 184 -
Figure V.2. Schma de couplage de lextraction supercritique avec lextraction
Soxhlet
Les concentrations des produits obtenus avec ce schma sont comprises entre 1 et 12,1% selon les conditions. De plus, le CO2 nest pas toxique, ne laisse pas de traces et est facile tre liminer, tout simplement, en diminuant la pression. On peut donc conclure que le couplage de ces deux techniques a beaucoup plus davantages par rapport au couplage prsent auparavant.
- 185 -
V.3. Couplage de lextraction supercritique avec lextraction batch

Nous avons ensuite remplac le Soxhlet de ce schma par une extraction en mode batch (figure V.3.).
Figure V.3. Schma de couplage de lextraction supercritique avec lextraction batch.
Nous avons test ce schma sous diverses conditions pour les deux tapes. On a observ que dans tous les cas, lorsque lon nutilise pas de co-solvants et dans certains cas de prtraitement supercritique avec co-solvant, lextraction a t amliore et le produit final tait plus riche en acide rosmarinique par rapport au procd batch simple. Si on ajoute que lextraction en mode batch permet dajuster plus de paramtres (la concentration du solvant, la temprature dextraction, lhydromodule etc.) que le Soxhlet et quelle requiert beaucoup moins de temps pour atteindre une extraction complte, on peut conclure que ce schma de couplage est beaucoup plus intressant que le schma prcdent.
- 186 -
V.4. Couplage de lextraction batch avec la nanofiltration

Le couplage de lextraction batch avec la nanofiltration comme traitement de lextrait liquide a ensuite t ralis. En plus de lintrt de fonctionner basse temprature de filtration et dviter une tape dvaporation couteuse, ce couplage permet galement de rutiliser directement le filtrat comme solvant. Le schma est prsent sur la figure V.4.
Figure V.4. Schma de couplage de lextraction batch avec la nanofiltration.
Les rsultats nous ont montr quun tel procd tait une alternative attractive la concentration des extraits par vaporation. Les valeurs leves du Rejet de lAR (Rj > 99 %) indiquent une efficacit importante. De plus, nous navons pas observ de colmatage sur la membrane jusqu des concentrations proches de la solubilit de lAR dans le mlange solvant. La rutilisation du solvant a amlior lextraction en mode batch ce qui est encore une preuve de la fiabilit du schma.
- 187 -
V.5. Couplage de lextraction supercritique, de lextraction batch et de la nanofiltration

Nous avons galement test une solution hybride des deux derniers couplages qui est prsente sur la figure V.5.
Figure V.5. Schma de couplage de lextraction supercritique, de lextraction batch
et de la nanofiltration
- 188 -
En comparant les 2 derniers schmas (V-4 et V-5), les valeurs Rejet de lAR semblent indpendantes du prtraitement supercritique, de la concentration du solvant et de la concentration en AR dans les rtentats. Les valeurs des flux de filtrat obtenues sont compatibles avec une application industrielle et le colmatage sur la membrane jusqu des concentrations proches de la solubilit de lAR dans le mlange solvant na pas t observ.
V.6. Couplage de lextracteur rotatif avec lextraction supercritique

-Le prochain schma dcrit le couplage de lextracteur rotatif avec lESC.
Figure V.6. Schma de couplage de lextracteur rotatif avec lextraction supercritique
Avec ce schma nous avons nettoy le produit et sa concentration en acide rosmarinique a augment de presque 4 %. Les rsultats montent que lESC peut tre utilise en couplage non seulement comme tape de prtraitement mais aussi comme tape postrieure lextraction dacide rosmarinique.
- 189 -
On voit donc que plusieurs procds, couplant les diffrentes techniques, ont donn des rsultats intressants et le choix pour leur application industrielle dpendra de lanalyse de leur extrapolation
V.7. Conclusion
Nous avons test plusieurs schmas de couplages entre les diffrentes techniques, ce qui nous ouvre plusieurs perspectives. Ainsi, une perspective pourrait consister travailler sur le choix des conditions opratoires de telle faon quon puisse isoler les produits cibles dans les extraits et dans les rsidus des diverses tapes, ce qui donne la possibilit de jouer avec la place de ltape dans le schma technologique. Par exemple, utiliser lESC basse pression pour extraire lhuile essentielle et ensuite lESC haute pression pour liminer les composs non-dsirs avant lextraction conventionnelle dont lextrait pourrait tre concentr par nanofiltration (figure V.8)
Figures V.7. Perspectives de schmas coupls
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Chapitre VI
Conclusion gnrales et perspectives
Chapitre VI. Conclusion gnrales et perspectives
VI. Conclusion gnrales et perspectives

Lobjectif de ce travail visait la mise au point dun procd dextraction dantioxydants partir dune source naturelle par diverses techniques extractives haute et basse pressions, sparment ou couples.
Dans un premier temps, nous avons effectu une recherche bibliographique qui porte sur quelques axes principaux :
- Les antioxydants en gnral et le besoin de remplacer les antioxydants synthtiques par des produits dorigine naturelle : nous avons donc choisi un compos cible lacide rosmarinique, ayant une activit biologique importante, mais qui est surtout un antioxydant trs fort. La mlisse tant trs riche en ce compos, ce vgtal a t choisi comme source naturelle. De plus, lhuile essentielle de mlisse est de haute valeur ajoute et est utilise dans la pharmacie, la cosmtique et lindustrie alimentaire. Cela nous a conduit choisir les composs majeurs de cette huile, le citral et le caryophyllne, comme composs cibles secondaires aprs lacide rosmarinique.
- Les techniques dextraction : la suite de la recherche bibliographique concerne les diffrentes techniques dextraction utilises. Une tude comparative a t faite et trois techniques ont t choisies pour nos tudes : nous avons utilis deux techniques conventionnelle, lextraction en mode batch et lextraction Soxhlet, choisies pour leur simplicit de mise en uvre et leur efficacit. Ce sont des techniques classiques mais, pourtant, linfluence de ces paramtres opratoires sur lextraction dacide rosmarinique de mlisse navait pas t systmatiquement tudie. Une nouvelle technique a t galement choisie, lextraction supercritique, qui a lavantage dtre considre comme une technologie verte et performante et qui permet de varier facilement sa slectivit et sa capacit solvant. Cette technique a t utilise pour le prtraitement de la matire vgtale et lextraction de lhuile essentielle. Pour cette technique, linfluence de la variation des paramtres opratoires de prtraitement et dextraction de mlisse a galement d tre tudie. En plus de ces techniques extractives, une technique de concentration dextrait basse temprature a t galement considre , la nanofiltration. Nous avons ensuite orient ltude bibliographique vers le couplage des techniques extractives.
- 193 -
- La modlisation mathmatique des procds dextraction a galement t prise en compte dans cette recherche bibliographique car cest une approche rationnelle ouvrant la possibilit danalyser les rsultats exprimentaux, dobtenir par simulation des indications pour des systmes diffrents des systmes utiliss et qui fournit les lments et les rgles dextrapolation pour le passage de lchelle laboratoire lchelle pilote ou industrielle.
Dans notre travail, nous avons utilis dabord sparment ces mthodes dextraction. Ensuite, le couplage des diffrentes techniques a t test en plusieurs schmas:
On voit donc que plusieurs procds, couplant les diffrentes techniques, ont donn des rsultats intressants et le choix pour leur application industrielle dpendra de lanalyse de leur extrapolation.
Un des outils cls pour raliser une telle analyse rside dans la mise au point de modle mathmatiques pour simuler les cintiques dextraction de ces processus..
Le processus de lextraction batch a t modlis mathmatiquement. La bonne correspondance avec les rsultats exprimentaux nous permet dutiliser cet outil pour la simulation et la prvision des volutions des processus menes des conditions opratoires diffrentes. Le mme modle mathmatique a t ensuite utilis pour simuler la cintique dextraction dans lextracteur rotatif et les rsultats ont montr que le modle est applicable pour dcrire le procd lchelle semi-industrielle. Les valeurs similaires des paramtres ajustables ces deux chelles ouvrent la perspective dutiliser les paramtres dtermins lchelle laboratoire pour dcrire le procd chelle industrielle
Les cintiques dextraction supercritique tudies exprimentalement ont galement t modlises mathmatiquement. Cinq modles diffrents ont t tests, les simulations avec le modle de del Valle sont les plus proches la ralit, produisant des rsultats fidles dans toute la gamme des conditions opratoires. Cela est d au fait que, contrairement aux autres modles, celui-ci tient compte des deux types de rsistance au transfert de matire existants, externe et interne. Daprs nous, le modle de del Valle reprsente avec une prcision suffisante les processus rels et on peut recommander son utilisation, dautant plus
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quaprs les modifications appliques, ce modle tient aussi compte de lexistence de particules de gomtries diffrentes (plates et cylindriques).
Les tudes effectues dans le cadre de cette thse ont abord plusieurs domaines : lextraction conventionnelle, lextraction supercritique, la nanofiltration, le couplage de ces techniques selon divers schmas afin damliorer lextraction dun antioxydant puissant, lacide rosmarinique, ainsi que des sous-produits activit biologique, le citral et le caryophyllne. Ces rsultats ouvrent plusieurs perspectives pour complter notre travail dont certaines sont prsentes ci-dessous :
En ce qui concerne lESC, il nous parait intressant damliorer la sparation de lhuile essentielle des cires, cest--dire dtudier plus en dtails les conditions dans lextracteur et le sparateur.
En ce qui concerne lextraction conventionnelle, le passage de lchelle semiindustrielle lchelle industrielle pourrait faire lobjet dune tude.
Concernant les couplages, une tude supplmentaire serait ncessaire pour valuer : lefficacit dun couplage de lESC directe et la nanofiltration Une perspective pourrait consister travailler sur le choix des conditions opratoires de telle faon quon puisse isoler les produits cibles dans les extraits et dans les rsidus des diverses tapes, ce qui donne la possibilit de jouer avec la place de ltape dans le schma technologique.
Notons galement que le savoir-faire acquis ici permettrait de considrer dautres systmes (plante, solvant, composs cibles, etc.) qui pourraient tre tests avec ces schmas et cette approche.
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Nomenclature
Nomenclature
NOMENCLATURE
a As ap A b c C
paramtres dquations III.4 et IV.20

(1/m) (m2) (m2) surface spcifique surface de la particule surface de la nanomembrane
paramtres dquations III.4 et IV.21

(kg/m3) (kg/kg) (kg/m3) (kg/m3) (kg/m3) (g/L) (%) (g/L) concentrations en solut dans la phase fluide concentration dans la phase solide concentrations en solut dans la phase solide concentration en solut la surface solide-fluide concentration initiale dans la phase solide concentration en acide rosmarinique dalimentation concentration en acide rosmarinique dans lextrait concentration moyenne en acide rosmarinique dans le filtrat concentration en acide rosmarinique du filtrat la fin de la filtration. concentration en compos i dans lextrait supercritique concentration au sein du liquide concentration linterface des phases concentration en acide rosmarinique du rtentat diffusivit du solut dans la phase solide coefficient de diffusion binaire diffusivit critique du solvant diffusivit effective dans la matrice vgtale
c*
c0
CA CAR
CF
CFf Ci CL
C
p
(g/L)
(%) (kg/m3) (kg/m3) (g/L) (m/s) (m/s) (m2/s) (m2/s)
CR D D12 Dc De
- 199 -
Nomenclature
dp E h H J JF Js k k' kf Km Kp ks l M1 M2
(mm) (%) (m) (m) (g/(m3.s)) (L/(mh) (L/(mh))
taille des particules Taux dextraction cordonne gomtrique au long du lit hauteur totale du lit flux de transfert flux de filtrat flux de solvant paramtre dquations III.4 et IV.24
(min-n) (m/s)
coefficient de transfert coefficient de transfert de masse dans la phase fluide acteur de partition coefficient de distribution volumtrique du solut entre la phase solide et fluide en quilibre
(m/s) (m) (g/mol) (g/mol)
coefficient de transfert de masse dans la phase dimension caractristique (quation III.14) masse molaire du solvant masse molaire du solut la masse extraite de lacide rosmarinique masse dextrait total sec la masse extraite du compos i. masse initiale de la mlisse variable mathmatique muette (quation III.6 et III.7) constante relie lordre de la courbe (quation III.5) nombre des particules
mARmax (g) mEX mi (g)

(g)
mMat. prem (g) n n N P

(bar)
pression
- 200 -
Nomenclature
r R R1 R2 R3 Re Rm RO RP s S
(m) (ml/g)
rayon de la particule hydromodule rejet de lacide rosmarinique (quation IV.18a) rejet de lacide rosmarinique (quation IV.18b) rejet de lacide rosmarinique (quation IV.18c) nombre de Reynolds rsistance de la membrane rsistance due la pression osmotique (quation IV.21) rsistance due la couche de polarisation (quation IV.21)
(g/L) (1/m)
solubilit de leau dans le CO2 (quation III.4) paramtre qui englobe le volume et la porosit du systme, la surface et le nombre des particules (quation IV.9 et IV.10) nombre de Schmidt nombre de Sherwood
Sc Sh T t ti Tr u V VA Vsys Vc1 Vc2 VF Vp

(m3) (m/s) (m3) (m3) (cm3) (C) (s, min, h) (s)
temprature temps temps de diffusion interne coefficient de lquation III.31 vitesse superficielle de fluide supercritique volume de la cellule dextracteur volume dalimentation volume du systme volume critique du solvant volume critique du solut volume du filtrat volume de la particule
- 201 -
Nomenclature
VR
(m3)
volume de retentat volume de la phase solide paramtre identifiant le rapport taille/masse de lquation III.31
Vsolide (m3) X' X X0 Xf Y Y*

SC Y AR
(g/kg) (g/kg) (g/kg) (g/kg) (g/kg) (%) (%) (%) (m/s) (m)
concentration dans la phase solide concentration initiale dans la phase solide quantit de solut dans les cellules indemnes concentrations du solut dans le fluide solubilit du solut dans le CO2 supercritique rendement en acide rosmarinique rendement de lextrait total rendement total de lextrait supercritique: coefficient de transfert de masse paisseur moyenne des plates ou le diamtre moyen des cylindres, poriosit
YEX
SC YEX
lit r
s
(kg/m3) (kg/m3)
masse volumique du CO2 masse volumique du lit coefficient de lquation III.31
(kg/m3) (Pa.s)
masse volumique de la mlisse viscosit du CO2 coefficient gomtrique de lquation III.14 facteur gomtrique caractrisant la forme (quation IV.4)
'
- 202 -
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Rfrences
- 216 -
Annexes
Annexes
Annexe 1
PHYTEX R Technical data

Extraction scheme applied: Cross-currant or counter-current extraction, percolation Additional operations: - Separation of phases with preliminary filtration - Rinsing of exhausted vegetable mass with complete solvent used Production capacity for liquid extract: Power consumption (with no solvent heating): Cooling water consumption ( when applied): Operational temperature: Recommended solvent: Over-all dimensions (L/W/H): Weight (not loaded): 5 to 15 l/h 0.6 kw 0.3 m3/h 20-60 0C water/ethanol (0-20 %) mixture 1100/900/2600 mm 140 kg removal of
- 219 -
Annexes
Annexe 2
Distribution granulomtrique de lextrait obtenu par lextracteur rotatif PHYTEX R
- 220 -
Annexes
Annexe 3
Evolution dquation IV.18 c)
d (V R .C R ) = J . A.C F dt C R3 = 1 F CR
d (V R .C R ) = J . A.C F dt
d (VR C R ) =
J . A.dt V AC F VA
VF (t ) 1 dVF , dN = VA VA
Mais
J . A..dt = dVF et N =
dN =
J . A.dt VA
d (V R .C R ) = dN .C F .V A V R .dC R + C R .dVR = (1 R )C R .V A .dN dV R = V A .dN V .dC R = R.C RV A dN dC R dC R dN dN = R.V A = R.V A CR VR CR V A N .V A

CR N dC R d ( N 1) = R (N 1) CR 0 0
VR (t ) V (t ) = 1 F = 1 N VA VA N 1 = VR (t ) VA
- 221 -
Annexes
CR
R dC R dVR R = CR VR 0 0
VR CR ln = R ln V C A A
CR ln C R= A VA ln V R
- 222 -
Annexes
Annexe 4
Photographies de la plante mlisse (Melissa offcinalis L.) obtenues par microscopie lectronique balayage diffrents agrandissements
- 223 -
Annexes
Annexe 5
- 224 -
Annexes
Annexe 6
- 225 -
Annexes
Annexe 7
- 226 -
Annexes
Annexe 8 Schma de lextracteur rotatif PHYTEX R
- 227 -
Annexes
Annexe 9 Courbes de calibration de CPG : Caryophylne
Citral
- 228 -
Annexes
Annexe 10 Courbes de calibration de HPLC : Acide rosmarinique
- 229 -

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THSE

DOCTORAT DE LUNIVERSIT DE TOULOUSE

Je remercie Sverine de mavoir aid au niveau de la science.

Jadresse mes remerciements galement Alec et Jean-Luis pour le support technique.

Je noublie pas le support de mes parents et mes amis.

Merci vous tous ! !

II. Matriel et mthodes

II.2.5. Application semi-industrielle de lextraction solide-liquide dans un extracteur rotatif 54

II.3. Techniques analytiques

III. Extractions par le CO2 supercritique

83 87 88 90 91 91 92 94 94 94 95 97 97 98 98 101 101 101 103 107 108 108 109

III.4. Extraction de lhuile essentielle de la mlisse par ESC

IV. Extractions pression atmosphrique et nanofiltration

IV.2. Extraction Soxhlet

IV.3. Extraction en mode batch (chelle laboratoire)

164 165 165 166 171 172

IV.5. Application semi-industrielle : extraction solide-liquide dans un extracteur rotatif

V. Couplages des diffrentes techniques

VI. Conclusions gnrales et perspectives Nomenclature Rfrences Annexes

193 199 205 218

I.2. Les antioxydants

I.3. Lacide rosmarinique

Figure I.1. Structure de lacide rosmarinique

I.4. La mlisse (Melissa Officinalis L.)

Figure I.3. La mlisse.

I.5. Citral et Caryophyllne

Figure I.4. Structure des isomres du citral : a) Nral ; b) Gneral

Figure I.5. Structure du caryophyllne

I.6. Techniques extractives

I.7. Les fluides supercritiques

Figure I.11. Diagramme schmatique du processus dextraction supercritique [49]

I.7.2.11. Conclusion En ce qui concerne lutilisation de lextraction au CO2 supercritique, trois

I.9. Schmas de couplage de diverses techniques dextraction, de prtraitement et de sparation

Chapitre II. Matriels et mthodes

II. Matriels et mthodes

Chapitre II. Matriels et mthodes

II.2. Techniques dextraction, purification et concentration utilises

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.2. a) Linstallation dextraction Separex

Figure II.2. b) Schma de linstallation dextraction supercritique

Chapitre II. Matriels et mthodes

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.3. Schma de lextracteur Soxhlet

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.4. Photo de lappareil Rotavapor

Figure II.5. Photographie de lagitateur secoueur utilis pour lextraction batch

Chapitre II. Matriels et mthodes

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.6 a) Schma de lappareillage de nanofiltration

Figure II.6. b) Photo de la cellule avec le rgulateur de la pression

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.7. a) Photo de lextracteur rotatif (tableau de commande et rservoirs)

Figure II.7. b) Schma principal de lextracteur rotatif

Chapitre II. Matriels et mthodes

II.3. Techniques analytiques

Chapitre II. Matriels et mthodes

Chapitre II. Matriels et mthodes

Chapitre II. Matriels et mthodes

Figure II.9. Schma simplifi de la chromatographie en phase gazeuse

Chapitre II. Matriels et mthodes

Chapitre III. Extractions par le CO2 supercritique

III. Extractions par le CO2 supercritique

III.2. Les exprimentations