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Fermenteurs
IV.1. Gnralits
Bien avant que Pasteur ait dmontr que la fermentation tait provoque par des
cellules vivantes, les microorganismes taient dj exploits par lhomme. Ainsi 7 000 ans
avant Jsus-Christ, les Sumriens utilisaient la plus ancienne fermentation connue, la
conversion du sucre en alcool, pour fabriquer de la bire. 4000 ans avant J C, les Egyptiens
employaient la levure pour faire lever la pate pain.
Le terme de fermentation est apparu au XVIme sicle, il vient du latin fervere : bouillir
(dgagement de CO2 dans un mout de vinification)
Pasteur la dfini comme la vie en absence doxygne .
Les premiers procds industriels de fermentation ont t les versions extrapoles de
ces recettes domestiques. Pour satisfaire les besoins de plus en plus importants, de nouvelles
dimensions se sont dveloppes partir de la capacit des microorganismes produire en
quantit importante, des mtabolites primaires ou secondaires dintrt industriel, intressant
la plupart des grands secteurs de lactivit conomique : chimie, pharmacie, nergie,
alimentation, agriculture et environnement.
Les ractions de fermentations est un processus qui fait appel des microorganismes
qui se dveloppent en consommant une partie dun ractif appel substrat et en transformant
lautre en divers produit. Les cuves ou le procd de prparation et de transformations est
mise en uvre, que a soit de dimension laboratoire (1 15 litres), lchelle pilote (1 5 m3)
ou industrielle (jusqu 300 parfois 500 m3), est appel Fermenteurs. Leur mode de
fonctionnement, comme pour les racteurs enzymatique est soit en discontinu (batch) , semi-
continu (fed- batch) ou en continu.
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Chapitre IV
43
Chapitre IV
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Chapitre IV
IV.2.1.Taux de croissances
IV.2.2.Temps de doublement t d
Ln 2
td
IV.2.4.Nombre de gnrations
IV.2.4.Rendements
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Chapitre IV
rX r
rS P
YX / S YP / S
IV.2.5.Coefficient mtabolique q
Le coefficient mtabolique q mesure la vitesse de consommation du substrat par la biomasse
un instant t de la fermentation.
1 dS
q
X dt
Si on considre que, pour une priode courte, lenvironnement et la biomasse sont constant,
on a :
X
dS dt
YX / S
dS X
q
dt YX / S YX / S
Selon les conditions de culture, il se peut quun substrat soit limitant, cest--dire quune
augmentation de la concentration en ce substrat entrane un accroissement de la vitesse de
croissance :
En culture discontinue anarobie, il peut sagir du substrat carbon ou de la source
azote, lorsquen fin de culture ces substrats sont puiss ;
En culture arobie, cest en gnral loxygne, faiblement soluble dans les milieux de
fermentation et apport en continu qui est le substrat limitant.
La relation cintique la plus connue, traduisant leffet de la concentration en substrat
limitant sur la vitesse de croissance dun micro-organisme, est la relation de Monod :
rX max S
=
X =
K M S
avec
(s-1) taux de croissance,
max (s-1) taux de croissance maximal,
KM (kg/m3) constante de Monod.
Cette relation est parfois justifie en disant que la croissance cellulaire repose sur un grand
nombre de ractions enzymatiques et quil est donc logique que la forme de la relation de
Monod soit identique celle de Michaelis et Menten .
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Chapitre IV
Cuves multiagitateurs
Pour augmenter le temps de sjour du gaz dans le racteur, on utilise parfois des cuves non
standard dont la hauteur est gale plusieurs fois leur diamtre. Dans ces conditions, pour
assurer une dispersion convenable du gaz, plusieurs agitateurs sont placs sur le mme axe.
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Chapitre IV
La distance entre agitateurs la plus utilise est dc ; on peut alors considrer quil ny a pas
dinteraction entre les agitateurs.
Pour n agitateurs, la puissance mcanique requise est gale n fois la puissance consomme
par une cuve standard.
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Chapitre IV
Le mlange de la phase liquide est ralis par lascension des bulles de gaz, qui entranent
dans leur sillage du liquide, et par les mouvements ascendants et descendants de la phase
liquide, qui gnrent des boucles de recirculation.
Compte tenu des faibles vitesses des bioractions et du transfert de loxygne dans la phase
liquide, celle-ci peut tre valablement suppose parfaitement mlange.
Cest un appareil driv de la colonne bulles et est utilise pour les seules cultures arobies.
Un racteur airlift est une colonne bulle comportant soit un tube concentrique interne plac
au-dessus du distributeur de gaz, soit un tube de recirculation externe. Laddition de ces
dispositifs modifie considrablement la circulation de la phase liquide.
Le mouvement de la phase liquide est ici induit par la diffrence entre les masses volumiques
apparentes de la dispersion gaz-liquide situe dans la partie centrale du racteur et de la phase
liquide situe dans lautre partie.
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Chapitre IV
d a2 Nl
Re
avec da (m) diamtre de lagitateur,
N (tr/s) vitesse de rotation,
(kg/m3) masse volumique du liquide,
(Pa.s) viscosit du liquide.
En rgime laminaire, le produit Np*Re est constant ; en rgime turbulent, cest le nombre de
puissance qui est constant : Np = 6 pour la turbine et 0,4 pour lhlice marine. Lhlice marine
consomme donc moins de puissance que la turbine.
le nombre de Froude qui exprime le rapport des forces dinerties aux forces
de gravit caractrisant le phnomne de vortex:
N 2 da
Fr
g
avec
G (m3/s) : dbit volumique du gaz,
g : acclration de la pesanteur. g = 9,81 m/s2
Pour viter la formation du vortex, les cuves sont quipes de contre-pales (chicanes)
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Chapitre IV
Le rgime de dispersion est, bien entendu, le plus efficace et cest celui que lon choisira. Il
correspond, si le liquide est de leau, des nombres daration Na exprims par la relation :
0,5
d
N a 0,2 a Fr0,5
dc
Dans ce rgime la dispersion du gaz est assure par la formation de cavits larrire des
pales de la turbine. La meilleure efficacit est obtenue lorsque les cavits adhrent sur toute la
surface des pales, situation observe pour Na > 0,1.
Dans le domaine du gnie biochimique, laration est souvent caractrise par le taux
daration qui sexprime en volume de gaz introduit par minute par volume de liquide [VVM
ou VVH (Volume de gaz par Volume de liquide et par Minute ou par Heure)]
IV.4.4. Puissance mcanique en milieu ar
La puissance mcanique Pg (W) consomme par une cuve are est infrieure la
puissance P consomme par une cuve non are de mme configuration, agite la mme
vitesse et renfermant le mme liquide. Ce phnomne sexplique par la prsence des cavits
de gaz qui diminuent la trane des pales dans le liquide.
Pg
Le rapport diminue rgulirement avec le nombre daration et devient constant pour Na
P
> 0,1 ; il vaut alors :
Pg 0,022
0,27
P Fr
La relation empirique de Michel et Miller est couramment utilise dans les industries
de fermentation pour calculer Pg
0.45
P 2 N d a3
Pg = 0,34 nP
G 0.56
avec np nombre de pales de la turbine.
G (m3/s) dbit volumique de gaz
P= H C
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Chapitre IV
Avec
P= Pression partielle de la phase gaz au dessus du liquide en atm
C = concentration de gaz dissout en mol/l
H= Constante de Henry l.atm/mol
Le transfert de matire gaz-liquide dun gaz peu soluble, comme loxygne, est caractris par
le produit du coefficient de transfert de matire K L (m/s) cot liquide (coefficient de transfert
de film liquide) par laire spcifique dchange par unit de volume de liquide a (m-1) . Ce
produit est par dfinition le coefficient volumique de transfert de matire gaz-liquide, not
K L a (s) et qui est en grande partie fonction du type de mobile de lagitation et de la
puissance dissipe .
En cuve mcaniquement agite are, le coefficient volumique de transfert est un paramtre
essentiel, car sa valeur doit tre suffisante pour que les besoins en oxygne du micro-
organisme soient satisfaits.
Pg
KL a k U g
VL
k : coefficient empirique qui dpend du systme
P/V : puissance volumique dissipe dans le milieu par lagitateur (kilowatt par unit de
volume)
Ug vitesse spcifique du gaz (m/s)
et dpendent du milieu coalescent ou non
0, 4
Pg
pour leau (milieu coalescent) : K L a 2,6 10 2
U g0,5
VL
Avec VL (m3) volume du liquide
Ug : vitesse superficielle du gaz
G
Ug (m/s)
A
A (m2) aire de section droite de la cuve
0, 7
Pg
pour les solutions salines (milieux non coalescents) : K L a 2,0 10 3
U g0, 2
VL
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Chapitre IV
Lobjectif est de satisfaire les besoins des cultures au niveau des changes gazeux. Les
microorganismes utilisent loxygne dissout et rejettent le CO2 en quilibre avec la phase
gazeuse.
Deux notions essentielles apparaissent :
La capacit de transfert du racteur OTR
La demande en oxygne de la culture
Elle est dfinie par la relation suivante qui exprime la quantit doxygne transfre
par unit de temps OTR (oxygen Transfer Rate) ou vitesse de transfert (rO2) exprime en
moles de O2/l h:
dC L
OTR K L a (C * C L )
dt
Avec
CL : concentration en oxygne dans la phase liquide (mole/l)
C* : concentration en oxygne saturation (mole/l)
KL a (s-1) coefficient volumtrique de transfert,
Notons que (C* - CL) ne dpend pas de lagitation, mais de la nature du milieu, de la
temprature et de la pression partielle du constituant dissoudre.
La capacit de transfert des racteurs va dpendre de plusieurs variables :
La puissance dagitation et lefficacit du systme dagitation (la dispersion)
La solubilit du gaz dpendant de la pression, du dbit, de la composition, de la
temprature et de la composition du milieu liquide
Plusieurs critres sont aussi dfinir :
Le volume dexpansion du liquide li au gaz
Le dbit gazeux qui peut tre exprim sous plusieurs formes :
VL : volume dair (m3) par heures dans les CNTP
VVM : volume dair par volume de liquide par minute
VVH : volume dair par volume de liquide et par heure
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Chapitre IV
Elle mesure les besoins en consommation doxygne de la culture OUR (Oxygen Uptake
Rate) et sexprime en mole/l h
X max O2
OUR
YX / O 2 K O 2 O2
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Chapitre IV
d V S
QE S 0 rS V QS S
dt
d V X
QE X 0 rX V QS X
dt
d V P
QE P0 rP V QS P
dt
Avec
V : volume du liquide
Q : dbit volumique
S0, X0 et P0 concentration initiale respectives du substrat de la biomasse et du produit.
S, X et P concentration respectives linstant t du substrat de la biomasse et du produit
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Chapitre IV
d X
rX
dt
Bilan sur le produit
d P
rP
dt
La souche microbienne doit possder un comportement cintique connu, pendant la
fermentation on introduit aucun milieu de culture sauf pour les ractifs de neutralisation, ou
pour lantimousse introduit en quantit trs faible. De mme faon, on ne soutire pas de la
culture tant quelle nest pas termine. Le volume dans la cuve de fermentation est donc
constant. La concentration en biomasse (X) augmente inversement par rapport celle du
substrat (S) qui lui est consomm. Le produit recherch (P) apparait et sa concentration
augmente.
Le temps ncessaire pour passer de la concentration en substrat S0 la concentration S, aprs
consommation par le processus de fermentation est donn par la formule suivante :
S
dS
t
S0
r S
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Chapitre IV
dS
constante dans le fermenteur 0 et corresponde une tape de la phase logarithmique de
dt
croissance cellulaire. Le fermenteur est aliment sans soutirage.
Bilan massique par rapport au substrat
d V S
QE S 0 rS V
dt
rX d V S SdV
Q S0 V
YX / S dt dt
Bilan massique par rapport la biomasse
d V X
rX V
dt
Bilan massique par rapport au produit
d V P
rP V
dt
Laugmentation du volume du liquide dans la cuve est donne par lexpression
suivante :
dV Q dt
Dans ces conditions, le volume de milieu en fermentation augment ainsi que celui de la
biomasse (XV), selon lexpression :
d X V dX dV
rX V X V V X
dt dt dt
d X V
dt
XV
X V X o Vo e t
t
2- V V0 Qdt
0
X 0 V0 t
e
t
3- V V0
Yx / s S o S
dt
0
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Chapitre IV
58
Chapitre IV
Q X 0 rX V Q X
le taux de dilution D X X 0 rX X
Q
Soit D
V
Le temps de sjour moyen pour que le taux de dilution soit gal au taux de croissance est :
1 X
Avec X0 = 0
D rX
Le concept du racteur piston peut tre appliqu la fermentation. Cest un racteur tubulaire
dans lequel le milieu de culture ensemenc (X0) se dplace en mme temps que la
fermentation se droule. La concentration en biomasse et produit augmente progressivement
le long du racteur alors que la concentration en substrat diminue.
Bilan sur la biomasse
Q X rX dV Q X dX rX dV Q dX
Le temps ncessaire pour passer dune concentration X0 biomasse une concentration X est
donn par lexpression:
X
V dX
t
Q
r
X0 X
Le fermenteur parfaitement mlang est limit dans son fonctionnement par un taux de
dilution maximal : Dmax
SO
Dmax m
K S S0
Bilan massique par rapport la biomasse sur le racteur continu avec recyclage
Bilan
d V X
QE X 0 rX V QS X QR X R
dt
La variation de la quantit de biomasse dans la cuve :
V X Q X 0 QR X R X Q QR
VdX
dt
Le taux de recyclage est li deux paramtres :
QR
le rapport des dbits
Q
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Chapitre IV
XR
le rapport de concentrations cellulaire :
X
En remplaant on obtient :
X D X 1 D X
dX
dt
En posant 1 on obtient :
D X
dX
dt
On voit que pour que la biomasse soit constante dans la cuve, la condition est que D
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Chapitre IV
Srie de TD N4
Exercice 1
Exercice 2
Dans un bioracteur en opration dont KLa est de 300 h-1, la concentration en oxygne
dissous dans la culture est de 44,1 %. Si la concentration saturation dans le milieu la
temprature de fermentation est de 6,8 mg/L, quel est le taux (vitesse) de transfert doxygne
dans le racteur ce moment?
Exercice 3
Un fermenteur de 20.000 litres est utilis pour la production de levures. Les caractristiques
gomtriques sont les suivantes : diamtre de la cuve : 3 m; diamtre de l'agitateur : 1 m ;
hauteur de liquide : 2,83 m ; 1 agitateur turbine 6 pales ; vitesse d'agitation 85 tr/min ; dbit
d'aration 600 m3/h. Le milieu de fermentation a les caractristiques suivantes : milieu
newtonien, masse volumique = 1200 kg/m3,
1) Calculer la puissance d'agitation Po aux diffrentes vitesses d'agitation
2) Calculer la puissance d'agitation Pg (CV/m3) par la corrlation de Michel et Miller
Exercice 4
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Chapitre IV
Exercice 5
Exercice 6
Exercice 7
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Chapitre IV
Exercice 8
Exercice 9
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Chapitre IV
Problme 1
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Chapitre IV
Problme 2
VL
Avec V : volume du fermenteur, np = 3 et une vitesse superficielle du gaz Vg = 0,025 m/s
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Chapitre IV
Problme 3
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Chapitre IV
Le dbit dalimentation en substrat Q (m3/s) est une fonction du temps et gale dVL/dt . Si
on considre que [S] est constant et est trs petit devant [ So], reformuler lquation du bilan
sur le substrat en exprimant Q en fonction uniquement de rX , de YX/S, de [So] et de VL .
Soit ([X]VL)o la quantit de biomasse initiale gale 0,6 kg de la phase de croissance
exponentielle
(puisque Vo vaut 0,6 m3 et [X]o 1 kg/m3) . Reformuler lquation du bilan sur la biomasse,
intgrer la relation et montrer que le dbit dalimentation en substrat Q varie de manire
exponentielle avec le temps.
Exprimer la relation donnant la variation du volume VL par rapport au temps, avec VLo le
volume de remplissage initial du racteur (0,6 m3).
La phase exponentielle de croissance sarrtera lorsque la vitesse rX deviendra gale la
vitesse de limitation par loxygne. Calculer cette vitesse rX , pour une concentration O2* =
7,5 10-3 kg/m3, un taux de croissance maximal de 0,3 h-1 et un rendement YX/O2 de 1 kg/kg.
Dduire la concentration en biomasse [XL].
Si cette valeur [XL] est atteinte aprs un temps t, exprimer sa valeur en fonction de V L0, de
YX/S, de S0, du produit (X VL)0 et de expmaxt .
avec YX/S gale 0,5 kg de levure par kg de sucre (mtabolisme respiratoire)
Dduire la valeur de t (h). Que reprsente t-elle ?
Si le taux de dilution est constant et est de la forme Di = Q/VL calculer Di.
Montrer que la relation du bilan sur la biomasse crite prcdemment peut scrire, aprs son
intgration entre le dbut de la phase et t, sous la forme :
Log
r X Di X t
Di t 6.5
rX Di X 6,5
Calculer le temps t (h) et que reprsente t-il ?
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