Toxicologie générale

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Tiaret
Etudes de Toxicité

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 Études de toxicité génétique ou
mutagenèse
La mutagenèse regroupe les processus de transformations du patrimoine génétique transmissible à la
descendance cellulaire.

Les possibilités du potentiel mutagène sont recherchées, par des techniques in vitro et in vivo:

Chez des bactéries (effet de mutations génétiques);

Dans des cellules de mammifères cultivées in vitro pour apprécier les dommages chromosomiques;
Sur des animaux d'au moins deux espèces différentes, choisies généralement chez les rongeurs parce
que leur temps de génération est court.

Lorsqu'il y a des dommages sur l'ADN ou une stimulation imprévue de synthèse d'ADN,
responsables d'apparition de métabolites actifs ou de transformation cellulaire, la substance
étudiée est considérée comme potentiellement cancérogène

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 Études de cancérogenèse
La cancérogenèse est un processus de mutagenèse auquel s'ajoute un pouvoir de
malignité. Une cellule maligne possède les caractéristiques suivantes :

• - Elle est devenue immortelle

• - Elle n'obéit plus aux facteurs de régulation tissulaire
• - Elle est capable d'aller coloniser d'autres tissus (métastases).

Les études de cancérogenèse ont pour but de mettre en évidence le processus par
lequel les cellules se divisent à une fréquence accrue. Cette prolifération cellulaire
excessive ou hyperplasie constitue un des stades précoces de la cancérisation. Ce
processus peut conduire à l'apparition de tumeurs malignes qui envahissent les tissus
voisins et qui peuvent migrer donnant des métastases.

Une substance cancérogène peut induire, seule ou en association avec un autre

produit:
• - Des tumeurs;
• - L'augmentation de la fréquence de certains types de tumeurs;
• - La diminution du temps deHOCINE L._Ibn khaldoun University of
latence deTiaret
tumeurs spontanées. 4
On classe les cancérogènes en trois catégories:
• - Les cancérogènes complets qui, par leur seule action, induisent des tumeurs;
• - Les cancérogènes incomplets pour lesquels deux agents sont nécessaires, un
initiateur et un promoteur. L'initiateur crée des lésions du matériel génétique dans
des cellules qui deviennent alors "initiées". Ces lésions non décelables, peuvent se
révéler au contact, surtout répétitif, d'un agent promoteur. L'effet cancérogène va
alors se développer;
• - Les co-cancérogènes qui ont un effet additif ou amplificateur en association avec
une autre substance cancérogène.

De plus un cancérogène sera dit génotoxique si l'on met en évidence que son pouvoir
de malignité est lié à une altération de génome.

Les études de cancérogenèse se font à long terme, dix-huit mois au moins, sur des
animaux des deux sexes pour prendre en compte les différences imputables aux
hormones sexuelles.

L'extrapolation à l'homme nécessite l'utilisation comparée de tous les résultats

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 Tératogenèse
La tératogenèse est l'aptitude à provoquer des
malformations de l'embryon ou du fœtus.
Ces études fournissent des informations sur
l'augmentation possible, au cours des générations, de la
sensibilité de l'organisme à la substance étudiée.

Un agent tératogène cause des dommages structurels et

fonctionnels permanents au cours de l'embryogenèse,
après les premiers clivages de l'embryon implanté. Deux
espèces animales, choisies parmi souris, rat, lapin,
hamster ou cobaye doivent servir à la détection de la
tératogenèse.
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Études de la fonction de reproduction

Trois grands types d'études sont menés :

• Les études de fertilité : accouplement,

fécondation et blastogenèse
• les effets sur le développement (prénatal et
postnatal);et
• les effets durant la lactation.

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• La toxicité sur le développement peut apparaître à la suite d’une
exposition, avant, pendant ou après la conception et peut prendre
diverses formes. Les malformations congénitales représentent les
effets qui sont les plus publicisés et qui apparaissent comme étant
les plus dramatiques, et souvent les plus visibles. Cependant, il peut
également y avoir d’autres atteintes in utero, telles que des retards
de développement et des troubles fonctionnels de l’embryon et du
fœtus. Ils peuvent alors être regroupés sous les termes
d’embryotoxique ou foetotoxique et d’effet postnatal en fonction
du stade de développement (embryon ou fœtus) selon qu’ils se
produisent avant la naissance (prénatale) ou après la naissance
(postnatale). Par exemple, l’exposition au monoxyde de carbone,
présent dans les gaz d’échappement des moteurs à combustion
interne et dans les gaz d’émission s’il y a combustion incomplète
des matières combustibles, peut produire des effets
embryotoxiques ou foetotoxiques ainsi que de la toxicité
postnatale.

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 les effets sur le développement
(prénatal et postnatal);
Elles ont pour but de déterminer si une substance administrée à des femelles
lors de la gestation et/ou de la lactation peut perturber la croissance du
fœtus, la parturition, la lactation et le développement du nouveau-né.

La lactation est une étape importante durant la période postnatale. En effet,

l’allaitement maternel présente un avantage nutritionnel important pour le
bébé, puisque le lait maternel est un aliment naturel qui contient les
nutriments essentiels à son développement (acides gras, vitamines,
minéraux, etc.). Il est donc important que ce soit un aliment sain. Bien qu’il
existe plusieurs données relativement aux effets des médicaments sur le lait
et l’allaitement, il y a cependant peu d’études relatives à la contamination du
lait maternel par des substances chimiques présentes en milieu de travail.
Plusieurs substances sont excrétées dans le lait (ex. : aldrine (insecticide),
perchloroéthylène, plomb, toluène), mais les conséquences sur le bébé allaité
et sur l’allaitement sont encore très peu documentées.

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 Études de fertilité
Les mâles sont traités lors de la
spermatogenèse, puis accouplés avec des
femelles non traitées. Le traitement des femelles
est réalisé de l'ovogenèse à la nidation et
l'accouplement a lieu avec des mâles non
traités. On réalise aussi des accouplements
entre mâles et femelles traités

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• La substance à tester est administrée à différents niveaux de
dose à plusieurs groupes de mâles et de femelles. Les mâles
doivent recevoir les doses au cours de leur croissance et
pendant une durée correspondant au minimum à un cycle
spermatogénèse complet (environ 56 jours chez la souris et
70 jours chez le rat) afin de mettre en lumière tous les effets
nocifs de la substance à tester sur la spermatogénèse.

• Les femelles de la génération parentale (génération P) doivent

recevoir les doses pendant une période correspondant au
moins à deux cycles œstraux complets afin de découvrir tous
les effets nocifs de la substance à tester sur l‘oestrus. Les
animaux sont alors accouplés. La substance à tester est
administrée aux animaux des deux sexes durant la période
d'accouplement et ensuite seulement aux femelles pendant la
gestation et tout au long de la période d'allaitement.
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• On doit employer des animaux sains, qui n'ont pas été soumis à des
expériences antérieures.
• Pour les animaux d'expérience on doit définir l'espèce, la souche, le sexe,
le poids et/ou l'âge.
• Chacun des groupes d'essai ou de contrôle doit contenir un nombre
suffisant d'animaux afin de fournir environ 20 femelles gravides à leur
terme ou presque
• Le but est d'obtenir suffisamment de gestations et de petits pour
permettre une évaluation sérieuse de l'action de la substance étudiée sur
la fertilité, la gestation et le comportement maternel des animaux de la
génération P, et sur la période d'allaitement , la croissance et le
développement de la descendance F1, depuis la conception jusqu'au
sevrage.

• Dans cette étude, on peut utiliser soit des accouplements 1:1 (un mâle
pour une femelle), soit des accouplements 1:2 (un mâle pour deux
femelles). Pour l'accouplement 1:1, une femelle doit être gardée avec le
même mâle jusqu'à ce qu'il y ait gestation ou durant une période de trois
semaines HOCINE L._Ibn khaldoun University of
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• On doit examiner les couples où il n'y a pas
d'accouplement afin de déterminer la cause
de leur stérilité apparente

• Autopsie générale
• Histopathologie (Les ovaires, l'utérus, le cervix, le vagin,
les testicules, les épididymes, les vésicules séminales, la
prostate, la glande coagulante, l'hypophyse et le ou les
organes cibles de tous les animaux de la génération P doivent
être conservés en vue de leur examen microscopique, si
nécessaire).

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 Neurotoxicité
• La substance à tester est administrée par voie orale à différents niveaux de dose à
plusieurs groupes de rongeurs. Il est généralement fait appel à des doses répétées
sur une période qui peut être de 28 jours, de 90 jours (étude sub-chronique) ou
d’une année ou plus (étude chronique) les animaux de chaque groupe peuvent
servir dans les examens du comportement et les examens névro-pathologiques,
neurochimiques ou électrophysiologiques qui permettent de compléter les
données recueillies dans les observations de base

Choix des espèces animales

Le rat est l’espèce préférée, bien que d’autres espèces de rongeurs peuvent être
utilisées moyennant une justification du choix. Il faut recourir à des souches
généralement utilisées en laboratoire. Les animaux doivent être adultes, jeunes et
sains. Les femelles doivent être nullipares et non gravides. L’administration des doses
doit débuter aussitôt après le sevrage et, de préférence avant que les animaux
n’atteignent six semaines d’âge et en tout cas avant que les animaux n’atteignent
neuf semaines.
Des animaux jeunes et sains sont choisis au hasard pour être répartis entre les
groupes de contrôle et de traitement
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• La substance à tester peut être administrée par gavage ou en capsules ou
incorporée dans la nourriture ou l’eau de boisson. D’autres voies, comme
la voie dermique ou l’inhalation, peuvent être utilisées
• Lorsqu’il s’agit d’une étude indépendante, il faut utiliser au moins vingt
animaux (dix femelles et dix mâles) dans chaque groupe de traitement et
de contrôle pour les observations cliniques et fonctionnelles. A la fin de
l’étude, au moins cinq mâles et cinq femelles sont prélevés parmi les dix
mâles et dix femelles pour être perfusés in situ et soumis à des examens
névro- et histopathologiques.

• La dose la plus élevée devrait être choisie avec le but de provoquer des
effets neurotoxiques ou des effets de toxicité systémique manifeste. A
partir de là, les niveaux de dose iront en ordre décroissant de façon à
mettre en évidence toute relation entre dose et effet et l’absence
d’effets nocifs observables au niveau de la dose la plus faible.
• La substance à tester est administrée aux animaux quotidiennement,
sept jours par semaine, sur une période de 28 jours.

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 L’allergie (la sensibilisation)
• L’allergie est une réaction indésirable de l’organisme à des agents
chimiques, physiques ou biologiques généralement inoffensifs pour
la plupart des gens. La réaction allergique survient lorsque le
système immunitaire de l’individu reconnaît par méprise une
substance comme étrangère, appelée alors allergène. L’organisme la
reconnaît et fabrique des substances pour la neutraliser et
l’éliminer, ce sont des anticorps.
• Le système de défense peut toutefois se dérégler et en venir à
fabriquer des anticorps contre des substances inoffensives.
Les allergènes peuvent emprunter plusieurs voies :
• la voie aérienne, la voie cutanée, l’ingestion et l’injection. Les deux
premières sont les plus fréquentes
• Les allergènes ingérés (aliments et leurs constituants, tels que les
œufs et les arachides) peuvent être la cause d’éruptions et d’une
manifestation allergique violente (telle qu’un choc anaphylactique).
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