Les prélèvements

Réalisé par Dr:Larbi Nassima

 Plan du cours:
I. Introduction
II. Définition
III. Phases de prélèvement:
a-pré analytique
b-analytique
c-post analytique
IV. Types de prélèvements:
a -sanguin
b-urinaire
c -LCR
d -liquide d’épanchement
e -autres types de prélèvements
I. Introduction:

• L'examen biologique est un ensemble

complexe d'étapes qui s’étend entre la
prescription (ordonnance) et le compte rendu
final (résultats).

dépista diagnostiqu pronost thérapeutiq

ge e ic ue
 I. Introduction:

•Prescription

•Prélèvement

Phase pré analytique

Phase post analytique

•Identification
•Réception
•Analyse

•Validation

•Édition
•Unité de soins

Phase analytique
II.Définition:
• L'analyse biologique consiste en l'étude de
prélèvements de fluides biologiques : sang, urine,
selles... Elle est pratiquée en laboratoire d'analyses
médicales.
• Un prélèvement en médecine est un échantillon
destiné à être analysé.
Il peut s’agir de:
A. Sang.
B. Urines.
C. Liquide céphalo-rachidien
D. liquide de ponction
E. autres types de prélèvements(tissus,pus…etc)
III. Phases de prélèvement:
1. Pré-analytique:

•Préscription
•Demande d’analyse: Ordonnance
•Prélèvement
•Précautions et conditions
•information
•Matériels nécessaires pour le recueil
•Identification
•Identification du patient(nom,prénom,sexe….
•Identification du prélèvement
•Réception
•Prétraitement, transport et conservation de l’échantillon
III. Phases de prélèvement:

• 2.Analytique: est l'étape technique proprement

dite avec tous les éléments du traitement de
l'échantillon
• 3.post-analytique: elle consiste à valider les
résultats bruts, à les analyser dans leur
cohérence et à les présenter dans une forme
permettant une bonne interprétation par le
prescripteur
Validation Édition Unité de soins
Prélèvement sanguin
prescription
Fiche de demande d’analyses - Ordonnance :

La fiche ou l’ordonnance doit obligatoirement comporter :

- Identification du patient (nom, avec mention du nom de jeune fille, prénoms,
date de naissance(PAL, TSH), sexe(: Créat, Ac urique)),
- Nature du ou des prélèvements,
- Analyses demandées,
- Renseignements cliniques, antécédents sanitaires, prise de
médicaments…etc.,
- Nom et prénom du médecin prescripteur + cachet.
- Date et signature du prescripteur.
- Cachet du service demandeur. Dans le cadre:
• Renseignements cliniques et traitements : urgence, hospitalisation, intérêt du
- la raison du prélèvement, bilan (Dc, Pc , suivi, dépistage ,
- le contexte clinique, épidémio, médico-légale, recherche )
- le traitement suivi, …….
- le poids, dans le cas de certains dosages comme la créatinine.
1- la prescription médicale
Exemple type de fiche de suivi
• Dans tous les cas, si le prélèvement n'est pas
effectué par le laboratoire, il est conseillé de
noter le maximum d'information, concernant
les paramètres précédents, sur le bon de
demande et de l'identifier soigneusement
(ces erreurs étant malheureusement
les plus courantes et les plus difficiles
à rectifier)
• information

Préparation du patient
•Informer le patient sur les raisons et les
modalités du prélèvement et répondre à ses
interrogations en bien expliquant les
conditions de prélèvement (standardiser la
nature des échantillons)
prélèvement
Prélèvement:
A. PRECAUTIONS A PRENDRE AVANT
PRELEVEMENT :
1.Heures de prélèvement :
Les prélèvements sanguins peuvent être pratiqués à
toute heure de la journée au lit du malade.
Sauf cas particulier, les prélèvements ont lieu la
matinée entre 7h et 10h en viellant à respecter
certaines conditions quand c’est nécessaire.
Des horaires de prélèvement sont à respecter pour
certaines analyses
♦ rythme circadien:

paramètre Maximum Minimum

(heure du jour) (heure du jour)
ACTH 6-10 0-4
CORTISOL 5-8 21-3
TESTOSTERONE 2-4 20-24
TSH 20-2 7-13
T4 8-12 23-3
HEMOGLOBINE 6-18 22-24
FER SERIQUE 14-18 2-4
POTASSIUM 14-16 23-1
PHOSPHATE 2-4 8-12
prélèvement
Prélèvement:
2. Le jeûne :
Le jeûne assure une meilleure qualité des sérums et des plasmas.

Bien que le jeûne est à respecter pour certains paramètres il reste

quand même judicieux de l’imposer la veille de chaque
prélèvement car les analyses portent généralement sur différents
paramètres.

• Remarque :*Si un jeûne de 12 heures est impératif pour un bilan

lipidique, la glycémie et la phosphatémie.
• un jeûne de 3 heures est suffisant pour la majorité des autres
paramètres. tels que l’albumine, l’acide urique, le fer, les
transaminases, l’amylase, la créatinine, l’urée.
•Régime restrictif:
Exp: VMA proscrire les aliments aromatisés
•Alcool
1. aigu: lactates, ac urique; Tg.
2. chronique : du chol –HDL, GGT; ac urique.
• Tabac: carboxyHb et Hb
Jeune strict Jeun relatif
*Bilan lipidique : *Marqueurs tumoraux :
Apo A-Apo B- Cholestérol total-HDL-LDL-TG- ACE- AFP- CA 125-CA 15-3 -CA 19-9
HCG -PSA
*Electrolytes :
-Calcitonine-Thyroglobuline
Ca ionisé- Ca total-Cl-Na-Fe-P-Zc

*Enzymes : *Fertilité/Grossesse :
ASAT/ALAT- Amylase -γGT –LDH-Lipase-PAL Progestérone-Testostérone
–Oestradiol-FSH -LH -HCG -
*Métabolites :
Bilirubine totale- Bilirubine conjuguée-Créatinine *Thyroïde :
Glucose -HbA1c-Lactate-Acide urique-Urée TSH
T4
*Protéines :
Albumine-Alpha-1-antitrypsine-Transferrine -Ferritine T3
CRP- Electrophorèse des protéines-Haptoglobine
Procalcitonine

*Muscle/Coeur :
CK-( CK-MB)-Troponine-BNP

*Hormone :
Cortisol-Insuline-PTH-Prolactine
B. Conditions de prélèvement
• Position:
Prélever en position de repos, éviter le stress, faire asseoir ou coucher le patient.
• La pose du garrot:
Ne doit jamais dépasser 1min, car elle provoque une hémoconcentration locale qui peut
modifier la concentration de certains paramètres.
• Certains états physiologiques:
*la grossesse, le cycle menstruel: augmentation normale de certaines hormones
*Les émotions, le froid, Stress et anxiété: provoquent une légère hyperglycémie
d'origine adrénalinique. cortisol, hormones thyroïdiennes…
*Exercice musculaire: attendre 12 h (augmente les lactates, CPK, LDH…)

*La prise d'alcool avant le prélèvement peut entraîner une augmentation de la glycémie
de 20 à 50 %, la prise de cigarette de 10 %.
• Prise médicamenteuse:
*Contraception orale, médicaments…etc.
Facteurs de variabilité des prélèvements.
prélèvement
Prélèvement:
B.MATRIEL DE PRELEVEMENT:
*Choix des tubes et des anticoagulants : Tube sec ; citrate de sodium
; héparinate de sodium; EDTA ; Fluorure.

*Garrot.

*Seringues : Aiguilles ou système à ailettes.

*Portoir.
*Gants.

*Coton, pansements ou ruban adhésif.

*Désinfectant : Alcool à 70°, Solution de Dakin.

*Boîte de déchets pour aiguilles, poubelle pour DASRI

(Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux) et
poubelle pour déchets non-contaminés (déchets de ville).
Remarque:
• Un mauvais échantillon, même passé sur un
bon analyseur, donnera de mauvais
résultats »
Les tubes de prélèvement sanguin
tubes paramètres
Sec BIOCHIMIE : HORMONOLOGIE :
sans additif Protéine C réactive (CRP) ß-HCG
Electrophorèse des protéines Cortisol
Il permet sériques FSH/LH
l’obtention du Ferritine OEstradiol
Sérum après Protéines totales Progestérone
coagulation Transferrine Prolactine
Troponine Testostérone
Vitamines (D, B12, B9, folates…) Thyroglobuline
TSH
MARQUEURS TUMORAUX: T4, T3
ACE Cortisol
AFP
CA 15-3
CA 19-9
CA 125
(avec gel PSA
séparateur Calcitonine
tubes paramètres
Héparinate Acide urique Fer sérique
de sodium Amylase Gamma-glutamyl-transférase (GGT)
ASAT / ALAT Lactate déshydrogénase (LDH)
Bicarbonates Lipase
Bilirubine totale/conjuguée Magnésium
Calcium Phosphore
Chlorures Phosphatase alcaline (PAL)
Cholestérol total/ HDL/ LDL Potassium
Créatinine Protéines totales
Créatine Phospho-Kinase (CPK) Sodium
Protéine C réactive (CRP) Triglycérides
Electrophorèse de Urée
l’hémoglobine Procalcitonine (PCT)
 Tubes paramètres
Citrate de sodium D-Dimères
anticoagulant réversible Fibrinogène
(chélateur de Ca++) Activité anti-Xa
Il entraîne une Antithrombine III (AT III)
décalcification du plasma Héparinémie
(la recalcification est Protéine C, Protéine S
effectuée au moment des TCK
analyses) Facteurs de la Coagulation : Dosage facteur II, V, VIII, ...

Ce tube est le SEUL MILIEU UTILISABLE POUR LES BILANS

D’HEMOSTASE (= COAGULATION)
 Tubes paramètres
Hémoglobine glyquée
EDTA
Troponine
• NFS - Plaquettes - VS
• Réticulocytes
• Coombs direct
• Hb A1C (Hb glyquée)
• Electrophorèse de
l'hémoglobine
• BNP,Troponine, Myoglobine
•Groupe sanguin, RAI
(recherche d'agglutinines
irrégulières) (+ 1 tube gel)
Parathormone (PTH)
• Phénotypage des
lymphocytes CD4, CD8
• Charge virale HIV
• DNA viral de l'hépatite B
• RNA viral de l'hépatite C
• Immunosuppresseurs :
Ciclosporine, Tacrolimus.
• Recherche de Mutations :
Hémochromatose, Mutation
du Fact V Leiden, du Fact II
 tubes paramètres
Fluorure de Glycémie isolée
sodium
Pour une conservation prolongée (> 2h00)
Il inhibe la
consommation Glucose et épreuves (test de O’sullivan, HGPS,
du sucre par HGPO, …)
blocage
enzymatique

Lorsque l'échantillon doit attendre plus d'une heure, entre le prélèvement et

l'analyse, le sang doit être recueilli sur un inhibiteur de la glycolyse (fluorure de sodium qui est
un antiglycolytique par formation d'un complexe fluorophosphomagnésien éliminant du
milieu le magnésium indispensable à l'action de l'énolase)
 Identification du prélèvement:
• le n° de lot et la date de péremption sont inscrits sur
chaque boîte, chaque tube et chaque aiguille
(Traçabilité) .
• Elle permet de suivre la demande d'examens depuis la
prescription jusqu'à la remise des résultats.
•Étiquetage des tubes :
non, prénom, âge, sexe, nature de l’échantillon, date et
heure de prélèvement, degré d’urgence……

•Fiche de renseignement (fiche de suivi)

 A. Prélèvements
1. Examens sanguins
sanguins
2. · Utiliser du matériel stérile à usage unique
3. · laisser revenir à température ambiante les tubes si conservés à des températures inférieures
à15°c avant de prélever pour éviter les chocs thermiques
4. · Se laver et se désinfecter les mains avant le prélèvement
5. · Vérifier la date de péremption des tubes avant utilisation
6. · Faire une désinfection large du site de ponction.
7. · Ne jamais palper le site après désinfection.
8. · Le garrot ne doit être utilisé que pour faire saillir la veine ;situé à ± 10 cm au-dessus du site
de prélèvement
9. .Dans le cas de l’ionogramme, le prélèvement se fait sans garrot.
10. · Le relâcher dès que le sang s’écoule dans le 1er tube. Ne pas serrer le garrot plus d’1 minute
11. · Choix du site de ponction : Ne jamais prélever sur le bras qui est perfusé. : éviter: cicatrice,
hématome fistule, œdème…
12. · Maintenir le tube en dessous du point de ponction.
13. · Lors du prélèvement positionner le tube, étiquette vers le bas pour pouvoir visualiser
l’arrivée du sang dans le tube.
14. · Ne pas transvaser le sang d’un tube dans un autre
15. · Respecter le volume de remplissage requis (impératif en hémostase)
16. · Agiter de façon douce les tubes juste après prélèvement
17. · Ne jamais remettre l’aiguille usagée nue dans la boîte de transport
18. ( risque majeur pour le personnel du Laboratoire )
A. Prélèvements sanguins

Corps de la pompe

Prélèvement sous-vide
Aiguilles normales
 système sous-vide
♦ Hygiène et sécurité
- Stérile: fonctionne en circuit fermé.
- Manipulation réduite.

♦ Confort du patient
- Absence de manipulation de l’aiguille
- Prélèvement plus court ( flux sg important)
♦ Fiabilité du prélèvement:
-Contact direct du sang avec l’anticoagulant
- Le vide calibré garantit un rapport constant
sg/additif, avec un remplissage normalisé et préci
A. Prélèvements sanguins
• Modes de prélèvement :
• Sang veineux;
• Sang capillaire;
• Sang artériel.
 A. Prélèvements sanguins
1 Prélèvement du sang
veineux:
Les dosages effectués sur du sang veineux
mesurent les différents produits de
métabolisme reflétant le fonctionnement
de tel ou tel organe.
A. Prélèvements sanguins
1 Prélèvement du sang veineux:

• * Nécessite habituellement la pose d’un

garrot;
• * Effectué le plus souvent au niveau du pli du
coude;
• L’aiguille doit être stérile, pour éviter les
contaminations.
A. Prélèvements sanguins
1 Prélèvement du sang veineux:

« Un mauvais prélèvement est pire qu’aucun prélèvement »

L’hémolyse invalide les résultats:

- Concentrations intra érythrocytaire des substances est plus importante
que dans le sérum (interférence biologique voir tableau)

- Coloration rougeâtre interfère dans la lecture colorimétrique

(interférence analytique).

La plupart des spécimens ne seront pas analysés avec un degré élevé

d’hémolyse.
constituants []
Éryth/sérum
Créat 1,60

K 25
Mg 2,7

LDH 160

Phosphatases acides 57

TGO 3

TGP 20
 Causes d’hémolyse

– Volume du 1er tube, souvent 10 ml .

– Prélèvement au cathéter ;
– Application prolongée ou serrée du garrot.
– Manipulation de l’aiguille pendant le flux .
– Temps de conservation et de transport non appropriée.
– Transport des échantillons (pneumatiques, vibrations, chocs)
– Absence de mélange .
– Prélèvement au niveau d’un hématome ;
– Présence d’alcool sur site de prélèvement.
 A. Prélèvements sanguins
2- Prélèvement de sang artériel:

• Au niveau de l’artère radiale ou fémorale.

• Réalisé dans le cadre de l’évaluation des gaz du sang. appelée
généralement « gazométrie» mesure le pH, la pCO2 la pO2
• ce qui permettra d'apprécier en particulier l'hématose (l'oxygénation du
sang).
• Le patient doit être au repos pour éviter les effets d'une hyperventilation
de stress
• Le prélèvement sera analysé sans délai, et en cas de force majeure, devra
être maintenu au réfrigérateur à + 4°C pendant un maximum d'une heure
• matériel utilisé :
-Aiguille (biseau court, paroi mince, petit diamètre)
-Anticoagulant: héparine lyophilisée (EDTA et citrate modifient le pH )
 A. Prélèvements sanguins
2- Prélèvement de sang artériel:

❖procédure:
-conditions respiratoires du malade stables avant et
pendant le prélèvement.
-Aspiration lente de l’échantillon par la seringue
(éviter la formation d’un vide dégazer l’échantillon)
-Chasser les bulles d’air avant toute agitation.
-mélanger immédiatement pour éviter les caillots.
-Indiquer la T°; le taux d’Hg du malade
(corrections selon effet Bohr)
A. Prélèvements sanguins
3- Prélèvement de sang
capillaire:

• Effectué par piqure au bout du doigt ou au

talon (nourrisson), il est moins traumatisant
et permet un gain de temps.
A. Prélèvements sanguins
• Ordre de remplissage :
• L’ordre de remplissage des tubes permet d’éviter des
interférences par transfert des additifs entre les tubes
via l’aiguille ou le bouchon.
• Remplir les tubes selon l'ordre préconisé : Tube sec ;
citrate de sodium ; héparinate de sodium ; EDTA ;
Fluorure.
• Il est très important de respecter l’ordre des tubes
défini ci-dessus et d’homogénéiser, par retournement
du tube, le sang avec les anti-coagulants.
A. Prélèvements sanguins
On utilise pour l’analyse soit:
• Sang total → avec anticoagulant.
Exp: formule de numération sanguine FNS.
• Plasma → avec anticoagulant +
centrifugation
Exp: la plupart des paramètres de biochimie.
• Sérum → sans anticoagulant +
centrifugation
Exp: les hormones, les marqueurs tumoraux.
A. Prélèvements sanguins

plasma sérum
 Choix des tubes : Plasma ou Sérum?
Sg - anticoag= serum sg+ anticoag=
plasma
Économie de tps temps de rétraction du caillot +
+
Hyper ka et phos relargage / Plaq / coagulation thrombocytes intacts

Prot totales consommation de fibrinogène Taux plus élevé

EPP + Fibrinogène migre au niveau

des gammaglobulines.
Interférence due à aucune + Interférences des cations.
l’A-Coagulant (Lithium, Ammonium,
Sodium)
Ammoniémie en excès(désamination des Aa)

vitamine B12 En excès(héparine a une

+
affinité pour B12)
A. Prélèvements sanguins
• Les anticoagulants
• Respecter le niveau de remplissage:
• - Respecter ratio sang/anticoagulant.
• - S’assurer que le volume est suffisant.

• Homogénéiser les tubes max 2min après

prélèvement, par une 10aine de retournements
lents .
 Prétraitement de l’échantillon
PRE
1.
TRAITEMENT centrifugation

-Au max 1 h après le prélèvement.

- Respecter le temps de rétraction du caillot pour le

sérum: 15min à tp ambiante ( postcoagulation ).

-Adapter les conditions de centrifugation aux

paramètres, au méthodes de dosage et au type d’
échantillon.

-Equilibrer la centrifugeuse.
 Prétraitement de l’échantillon
centrifugation
♦ Force de centrifugation: vitesse, durée
-condition habituelles: FRC 1300-1500 g pendant 10
min.
( OMS: sérum 1500 g mini et plasma2500 g)

-FRC <1300 g si tubes en verre.

 Prétraitement de l’échantillon
centrifugation
♦ La température de centrifugation:
- <30°C (activation de la coagulation par le froid et la
chaleur).

- 4° à 18°C pour les paramètres dénaturés par la chaleur.

(centrifugeuse thermostatée, aérée, voir réfrigérée)
Réception TRANSPORT ET CONSERVATION DU
PRELEVEMENT :
A. Conditions de transport et délais d’analyse :
*la plage standard de température de transport des échantillons,
acceptable par le laboratoire pour la plupart des analyses, s’
étend de 4°C à 25°C (une température ambiante).

*Un délai de temps doit également être respecté entre le

moment du prélèvement et l’analyse.
 Transport
Δmetabolique:la Résultats trop tard =
ctate15min échantillon Perdue
Glycemie 2h

Eviter le choc
Protéger le
transporteur 4 °C à23 °C
Glace Carboglace,
Azote liquide
B.Conservation après analyse :
• Au laboratoire, les échantillons analysés sont
conservés pour une durée déterminée
permettant, selon les paramètres et les délais de
conservation un recontrôle d'identité, un contrôle
de résultat ou le rajout d'une analyse
complémentaire.
• D’une manière générale, les prélèvements
urinaires se conservent pendant 24h entre 2°C et
8°C et les prélèvements sanguins se conservent
pendant 7 jours entre 2°C et 8°C.
 Conservation des échantillons

Analyser le plus rapidement possible après réception

Si non il faut respecter les conditions spécifiques de conservation

- Protection de la lumière par une feuille de papieraluminium.

(bili, vitC, la Ck et les folates).

- Boucher les flacons pour éviter l’évaporation ou contamination.

-Stocker toujours les récipients contenant du sang verticalement ;

le processus de coagulation est accéléré.
 Automatisation de la phase préanalytique
-centraliser la réception: traitement commun de tout les échantillons
-L'informatisation de l’identification: échantillons munis d'un code-barre
-Automate munis d' une unité d'entrée, une centrifugeuse, un déboucheur
et une unité de sortie .

Les avantages:
-Meilleure qualité de l’échantillon
-volume de travail et productivité
plus élevés (17 %).
-Coût plus bas.
travail presté a diminué de 5 %
Au total:
• II faut éviter une dégradation du constituant à
doser soit en utilisant un agent conservateur,
soit en respectant la chaîne du froid.
• Un point particulier doit être noté pour les
prélèvement sanguins : l'hémolyse est liée à
un mauvais prélèvement, elle pose des
problèmes pour la majorité des analyses
 ELIMINATION DES MATERIELS DE PRELEVEMENT :

• A. Classification des déchets :

Dès la production des déchets, un tri doit être effectué pour des raisons d’hygiène de
sécurité et de protection de l’environnement. Les déchets produits sont d’une
manière générale de 3 types :
- Les matériels piquants ou coupants (en particulier les aiguilles) doivent être
obligatoirement recueillis dans des récipients conformes.
Ne pas recapuchonner les aiguilles.
Vérifier régulièrement le niveau maximal de remplissage des conteneurs à déchets.
- Les autres matériels qui constituent des Déchets d’Activités de Soins à Risque
Infectieux (DASRI) comme le coton souillé, doivent être éliminés.
- Déchet assimilé aux ordures ménagères : papiers, emballages, coton non souillé. Ces
déchets sont à éliminer dans les poubelles de ville.
Remarque :
Pour chaque type de déchet des poubelles conformes doivent être réservées et aucun
mélange ne peut être toléré afin de palier à tout risque infectieux pour le personnel
hospitalier et pour l’environnement.
Prélèvement urinaires
 On collecte les urines pendant 24 h.
Procédure:
1. Vider la vessie le matin au lever.
2. Jeter ces urines et noter la date et l'heure.
3. À partir de ce moment-là, dans un récipient propre fourni
par le laboratoire, collecter les urines de chaque miction,
tout au long de la journée.
4. Faites le dernier recueil, le jour suivant, au lever, à la
même heure que la veille.
5. Apporter le récipient au laboratoire le plus vite possible..
6. Identification du flacon au minimum par le nom, prénom
et le numéro du patient.
• Conserver les urines à 4°C afin de limiter la
multiplication bactérienne.
• Noter le volume final, acheminer le
prélèvement le plus rapidement rapide au
laboratoire.
• Une fois l’analyse conduite les résultats
seront exprimés en grammes/24 heures.
• Les récipients

- Des récipients gradués et propres; préparés

et remis par
le laboratoire

- A défaut: Bouteilles d'eau minéral vidées

(non rincées par l'eau du robinet)
♦ Nécessité de récipients particuliers:

- Décalcifiés par EDTA, citrate ou HCL calciurie

- Acidifiée dérivés méthoxylés, porphyrines

- Avec conservateur (Ac Borique) Aa

urinaires
Liquide de ponction
• Il s’agit principalement des liquides obtenus
par ponction: LCR, liquide d’ascite, pleural…
1. Ponction lombaire:
- Condition vigoureuses d’asepsie.
- Ponction lombaire(PL) au niveau de l’espace
L4-L5 ou L5-S1
- Ponction transfontanellaire chez le nné.
- Recueil dans trois tubes stérile:
-cytologie
-chimie
-bactériologie

- Centrifugation si liquide hématique

3 tubes:
-cytologie
-chimie
-bactériologie
2.Ponction pleural:
3.Ponction d’ascite:
Autres types de prélèvements
• Recueil simple pour les selles, salive, crachat:
indolore, non invasif, attention les contaminations!
• Prélèvement urétral, vaginal, ou le
prélèvement de gorge recueilli à l’aide d’un
écouvillon.
• Sondage d’un canal excréteur.
• Ponction au travers de la peau grâce à une
aiguille ou un trocart: biopsie de MO.
Merci pour votre attention