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: 2020-2021
QUESTIONNAIRE
Exercice 1 (Q.1-2) Une culture d'E.coli sauvage a Boîte 4 ( MM sans His + 10 g/ml de N + S9 mix) :
été traitée avec un agent alkylant. 3 colonies (C1, 205 UFC/ml
C2, C3) ont été ensuite repiquées sur milieu Boîte 5 (MM sans His + 10 g/ml de N, sans S9
minimum MM supplémenté de thréonine (Thr), mix) : 12 UFC/ml
cystéine (Cys), leucine (Leu) et Phénylalanine Q.3/ Indiquer les propositions exactes :
(Phe). Des boites répliques ont été ensuite réalisées A. Salmonella typhimurium His+ est la souche
sur MM supplémenté avec les acides aminés utilisée dans le test.
indiqués. Le résultat après 24h d’incubation à 37°C B. S9 mix est un extrait du rein du rat.
est le suivant C. Le test mesure la réversion de la souche
(+= croissance, - = pas de croissance) : vers la prototrophie (His+).
D. La quantité de bactéries ensemencée
Milieu C1 C2 C3 (inoculum) n’est pas la même pour toutes
MM+Thr + + - les boîtes.
MM+Cys + - + Q.4/ Indiquer les propositions exactes :
MM+Leu + - - A. Le taux de mutation (réversion) spontanée
MM+Phe + - - est 10-6.
MM+Thr+Leu + + - B. La nitrosoguanidine n’est pas un
MM+Cys+Phe + - + mutagène.
MM+Thr+Phe+Leu + + - C. La nitrosoguanidine est un mutagène sous
MM+Cys+Phe+Leu + - + sa forme primaire (n’a pas besoin d’une
activation métabolique).
Q.1/ Les phénotypes des colonies vis-à-vis des 4 D. Ce sont les métabolites secondaires de la
acides aminés sont : nitosoguanidine qui sont mutagènes.
A. C1 : Thr – Cys + Leu + Phe +.
B. C2 : Thr – Cys + Leu + Phe +. Exercice 3 (Q.5-6) On a transformé une souche d’E.
C. C3 : Thr + Cys – Leu + Phe +. coli de phénotype Lac – (lacZ-) avec un mélange de
D. C3 : Thr + Cys + Leu + Phe -. 2 plasmides : pBR322 portant la résistance à
Q.2/ Indiquer les propositions exactes : l’Ampicilline (ApR) et pX portant le gène lacZ. On a
A. L’agent alkylant permet d’augmenter le étalé 1 ml de la culture sur le milieu de sélection
taux des mutations. approprié pour sélectionner les transformants avec
B. Une mutation induite n’est pas stable. les deux plasmides (doubles transformants). Le
C. C1 ne pousse pas sur MM. résultat de la transformation est le suivant :
D. La méthode des répliques permet de Souche transformée avec pBR322 et pX
repérer et isoler des mutants 10-2 :200 colonies blanches+100 colonies bleues.
d’auxotrophie.
Exercice 2 (Q3-4) Le test d’Ames a été réalisé pour Q.5/ Le milieu de sélection qui a permis d’avoir le
la nitrosoguanidine (N). Le résultat du test après résultat observé et le nombre/ml (N) des
48h d’incubation à 37°C est le suivant : transformants recherchés sont :
Boîte 1 (MM+His) : 108 UFC/ml A. MC+X-Gal+Ap, N= 1x104 transformants/ml.
Boîte 2 (MM sans His) : 10 UFC/ml B. MC+X-Gal+Ap, N= 2x104 transformants/ml.
Boîte 3 ( MM sans His + 5 g/ml de N + S9 mix) : C. MC+Ap, N= 1x104 transformants/ml.
100 UFC/ml D. MM + Lactose (unique source de C) + Ap,
N= 2 x 104 transformants/ml.
Q.6/ Indiquer les propositions exactes :
Q. 17 La capsule bactérienne :
A. est de nature polysaccharidique
B. favorise la migration des macrophages
C. stimule le complément
D. Aucune réponse.