REPUBLIQUE TUNISIENNE

MINISTERE DE LA SANTE
UNIVERSITE DE MONASTIR

$-$

Projet de fin d’études

Licence Appliquée en Biologie médicale
N° d’ordre :

Evaluation des performances analytiques de

l’automate Sysmex XT2000i® dans la détection de
la monocytose sanguine

Présenté et soutenu le :
Par : Boussaid Zouhour
Jury :
Président :
Membres :

Directeur(s) : Khefacha Linda

Co-encadreur : Fakhfakh Amir

Année Universitaire : 2018/2019
Dédicace
 Dédicace
A mes parents
Mon père Faouzi et ma mère Habiba
A mes sœurs, Amany, Amel et Oumaïma
Pout tout l’amour et la confiance que vous ne cessez de m’offrir.
Nulle dédicace ne peut exprimer ce que je vous dois pour votre
soutien, votre
amour, vos efforts et vos sacrifices.
Pour m’avoir donné le courage de continuer malgré les obstacles,
Vous êtes ma source de force, de réussite et de bonheur.
J’espère un jour être digne de votre confiance

A mes amis Abir, Khouloud et Dhouha

Merci d'être toujours là (même loin) pour moi,
Pour les merveilleux moments inoubliables,
Pour ton soutien et ton amitié sans faille.

A tous mes amis de promo

Merci pour tous ces moments passés ensemble et pour votre grain de
folie,
Merci pour le bonheur que vous m’avez offert,
Et même si la distance va nous séparer mais je chérirai votre amitié au
plus profond de mon Cœur.
A mes chers Oncles, Tantes, Leurs Epoux et Epouses ; A mes
chers Cousins et Cousines
Veuillez trouver ce travail l’expression de mon respect le plus profond
et
mon affection la plus sincère.
Remerciement
 Remerciement
A ma directrice de mémoire 
Mme Khefacha Linda
Vous ne m’avez épargnée ni votre temps ni vos efforts pour me guider tout au
long de la réalisation de ce travail.
Votre gentillesse, et votre disponibilité permanente ont toujours suscité mon
admiration.
Veuillez bien madame recevoir mes remerciements pour le grand honneur que
vous m´ avez fait d’accepter l’encadrement de ce travail.
Sans vos conseils judicieux, ce travail n’avait pas pu être accompli.
Veillez trouver à travers ce travail l’expression de mon profond respect et de ma
très
grande estime.

A Monsieur le professeur Baba Hamouda, le chef de service

Je vous remercie pour m’avoir accueilli au sein du laboratoire d’hématologie et
pour la

liberté que vous m’a laissé tout ce temps.

A toute l’équipe du laboratoire d’hématologie de CMNM

Je suis profondément reconnaissante pour m’avoir acceptée parmi vous et pour
l’aide
que vous m’avez procuré.
En particulier
le résident Fakhfakh Amir
Je respecte en vous votre extrême gentillesse, votre compréhension, vos grandes
qualités humaines et votre haute compétence.
Veillez trouver dans ce travail l’expression de ma profonde gratitude et ma haute
considération.

Aux membres du jury

Messieurs les jurys, vous nous faites un grand honneur en acceptant de juger ce
travail.

Je tiens à remercier chaleureusement, tous mes proches et tous ceux

qui, de près ou de loin, m’ont apporté leurs sollicitudes pour
accomplir ce Travail.
 Sommaire
Introduction …………………………………………………………………………………..1

ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE

1 Généralités sur les monocytes...............................................................................2

2 La monocytopoïèse................................................................................................2
3 Les caractéristiques des monocytes......................................................................3

3.1 Les valeurs normales.........................................................................................3

3.2 Données morphologiques..................................................................................3

3.2.1 Le monoblaste ..........................................................................................4
3.2.2 Le promonocyte ........................................................................................4
3.2.3 Le monocyte immature .............................................................................4
3.2.4 Le monocyte mature .................................................................................5

3.3 Les données cytochimiques...............................................................................5

3.4 Les données phénotypiques .............................................................................5

4 La détection et la numération automatisée des monocytes par le Sysmex XT

2000i®............................................................................................................................6

4.1 Principe de détection du Sysmex XT 2000i®......................................................6

4.1.1 La numération de leucocytes....................................................................7

4.1.2 Analyse différentielle de leucocytes .........................................................7

4.2 Anomalies et erreurs de détermination de la formule leucocytaire....................8

4.2.1 Anomalies de la formule leucocytaire.......................................................8

4.2.2 Anomalies de la numération des monocytes............................................9

5 Monocytose............................................................................................................9

5.1 Monocytose réactive........................................................................................10

5.2 Monocytose néoplasique..................................................................................11

5.2.1 La leucémie myélomonocytaire chronique (LMMC)...............................11

5.2.1.1 Définition...........................................................................................11
 5.2.1.2 Epidémiologie...................................................................................11
5.2.1.3 Les signes cliniques..........................................................................12
5.2.1.4 Les critères de diagnostiques...........................................................12
5.2.1.5 Diagnostic biologique, pronostic et traitement..................................12

5.2.2 Leucémie myéloïde aiguë (LAM) avec différenciation monocytaire.......13

6 Monocytopénie.....................................................................................................15

PARTIE PRATIQUE

1 Objectif de travail..................................................................................................17
2 Matériels et méthodes..........................................................................................17

2.1 Matériels...........................................................................................................17

2.1.1 Patients....................................................................................................17
2.1.2 Réactifs utilisés.......................................................................................17
2.1.3 Instruments..............................................................................................17

2.2 Méthodes..........................................................................................................18

2.2.1 Hémogramme : Sysmex XT 2000i®.........................................................18

2.2.2 Examen cytologique sur frottis................................................................18
2.2.3 Analyses statistiques...............................................................................20

3 Résultats...............................................................................................................21

3.1 Etude de la population......................................................................................21

3.1.1 Moyenne d’âge........................................................................................21

3.1.2 Provenance.............................................................................................21

3.2 Etude de l’origine de la monocytose................................................................22

3.3 Etude de la corrélation entre les deux méthodes.............................................23
3.4 Etude de la concordance entre les deux méthodes.........................................25
3.5 Evaluation de fiabilité de la monocytose..........................................................26

4 Discussion............................................................................................................27

4.1 Origine de la monocytose.................................................................................27

4.2 Etude générale de la corrélation entre les deux méthodes de mesure...........27
4.3 Interférence avec les GJ et les LA...................................................................28
 4.4 Concordance entre les deux méthodes de numération...................................28
4.5 La fiabilité de la monocytose............................................................................28

Conclusion…………………………………………………………………………………..29
Références bibliographiques
 Liste des abréviations
AHC : automate d’hématologie cellulaire
AMC
FP
FSC : forward light scatter
GB : globules blancs
GJ : granulocytes jeunes
GR : globules rouges
LA : leucémies aigues
LAM : leucémie myéloïde aigues
LMMC : leucémie myélo-monocytaire chronique
MGG: May Grünwald Giemsa
MO
NFS: numération formule sanguine
SFL: side fluorescence light
SSC: side-scattered light
VAM : valeurs absolues de monocytes
VP
VPP
 Liste des figures

Figure 1: processus de la monocytopoïèse ................................................................3

Figure 2: exemples de sous-types de monocytes .......................................................4
Figure 3 : les sous-ensembles de monocytes .............................................................6
Figure 4 : histogramme de WBC/BASO.......................................................................8
Figure 5 : histogramme de DIFF..................................................................................8
Figure 6: Frottis sanguin au cours d’une LMMC .......................................................13
Figure 7: Sysmex XT 2000i®......................................................................................18
Figure 8: les étapes de confection d'un frottis sanguin .............................................19
Figure 9: classification selon les services..................................................................22
Figure 10: répartition de population d'étude selon l'origine de la monocytose..........22
Figure 11: étude de corrélation entre les monocytes détectés par le Sysmex ® et
calculés sur frottis........................................................................................................23
Figure 12: Etude de corrélation entre la VAM obtenue par le Sysmex et la VAM sur
frottis sanguin en présence de GJ..............................................................................24
Figure 13:Etude de corrélation entre la VAM obtenue par le Sysmex ® et la VAM sur
frottis en présence des LA..........................................................................................25
Figure 14: Etude de la concordance de la VAM entre le Sysmex ® et le frottis..........26
 Liste des tableaux

Tableau I: LAM4 et LAM5 selon de la classification Franco-Américano-Britannique

(FAB) ..........................................................................................................................14
Tableau II: description de la population d’étude selon l’âge......................................21
Tableau III: description statistique des monocytes par chacune de méthodes
utilisées........................................................................................................................23
Tableau IV: corrélation entre les valeurs des monocytes en présence des GJ.........24
Tableau V: corrélation entre les valeurs des monocytes en présence des LA..........25
Tableau VI: évaluation de fiabilité de la monocytose détectée sur le Sysmex..........26
Introduction
Introduction
 Introduction

B
ien que la performance globale des analyseurs d'hématologie cellulaire soit
considérablement améliorée ces dernières années, ils ont souvent donné
des résultats décevants en termes de comptage des monocytes et montre
une faible reproductibilité du décompte (1).
Ceci est liée au plusieurs paramètres comme la présence de cellules anormales de
taille comparable (neutrophiles des chimiothérapies, leucémies aiguës, lymphomes,
grands lymphocytes activés), l’activation des monocytes au cours des états
infectieux et la morphologie même de cette population qui est très diversifiés. De
plus le décompte des monocytes s’altère rapidement dans le temps
indépendamment de la température de conservation (2).
Mais, dans la nouvelle génération des automates d’hématologies cellulaire Sysmex ®
qui utilisent la technologie de cytométrie de flux avec marquage par la fluorescence
des acides nucléiques pour la mesure des leucocytes des nombreuses études ont
montrées une excellente reproductibilité et précision.
Dans notre étude nous souhaitons évaluer les performances analytiques de
l’automate Sysmex XT2000i® dans la détection de la monocytose sanguine.
Notre travail comprend deux volets : le premier volet consiste en une revue de la
littérature sur les monocytes, leur origine, leur caractéristiques (morphologique,
phénotypique et cytochimique) et quelques étiologies qui font variées le taux de
monocytes dans le sang. Et le deuxième volet consiste en une étude pratique
incluant 149 échantillons parvenues à notre laboratoire pour numération formule
sanguine.
Dans l’étude pratique, nous avons utilisés l’étude microscopique du frottis sanguin
comme méthode de référence.

1
 Etude
bibliographique

1 Généralités sur les monocytes

Les monocytes font partie du système des phagocytes mononucléés (3). Ce système
a été proposé pour la première fois par Van Furth en 1968 (4), il comprend trois
types cellulaires : les macrophages, des cellules dendritiques et les monocytes (5).
 Etude bibliographique
En effet, les monocytes proviennent de progéniteurs médullaires qui sont capables
de se différencier par la suite en macrophages, cellules dendritiques et ostéocytes
(3,6).
En situation physiologique, ces cellules représentent environ 10% des leucocytes
humains, soit 0,1 à 1 G/L et elles ont un rôle majeur au cours des réponses
inflammatoire et immunitaire innée, accompagnée par les polynucléaires
neutrophiles et les cellules natural killer. Elles participent également à l’homéostasie
cellulaire en détruisant les cellules apoptotiques et les composés toxiques. De par
ses différents rôles physiologiques, le monocyte est également responsable de
pathologies inflammatoires telles que l’athérosclérose et les arthrites (6,7).

2 La monocytopoïèse
La monocytopoïèse fait partie des processus de l’hématopoïèse et consiste à la
formation continue et régulée des monocytes.
Au niveau de la moelle osseuse (MO), la cellule souche hématopoïétique se
différencie en cellule souche myéloïde, correspondant au progéniteur commun CFU-
GEMM (Colony Forming Unit Granulocytaire, Erythroblastique, Mégacaryocytaire et
Monocytaire) sous l'influence de diverses cytokines (SCF, Flt3-L, GM-CSF, IL-3).
Ultérieurement, la stimulation par l'IL-3 et le GM-CSF (Granulocyte Monocyte - CSF)
oriente la différenciation du progéniteur commun myéloïde en progéniteur granulo-
monocytaire CFU-GM.

L’action du G-CSF stimule ensuite la différenciation en CFU-G (progéniteur de la

lignée neutrophile), alors que l’action combinée du G-CSF et du M-CSF oriente la
différenciation en progéniteur CFU-M puis en précurseur monocytaire (3).
Les précurseurs monocytaires qui proviennent des progéniteurs sont le monoblaste
et le promonocyte. Ce dernier se devise pour former le monocyte qui réside 1 jour
dans la MO et migre par la suite dans la circulation sanguine où ils restent 1 à 3 jours
(3,8).  Ensuite, ils quittent ce compartiment au hasard par un processus appelé
diapédèse et migrent vers les tissus et les cavités corporelles au bout de 20 à 40
heures où il se différencie en macrophage  (8,9) (Figure 1).

2
 Etude bibliographique

Figure 1: processus de la monocytopoïèse (10)

3 Les caractéristiques des monocytes

3.1 Les valeurs normales

Chez l'adulte et l'enfant en bonne santé, les monocytes représentent généralement
entre 1 et 9% du nombre total de leucocytes du sang périphérique, le nombre de
monocytes absolus (AMC) variant en fonction de l'âge. À 24 semaines de gestation,
les monocytes mesurent 0,7 G / L (fourchette de 0,1 à 2,5 G / L) et augmentent
progressivement jusqu'à la troisième semaine suivant la naissance, où ils atteignent
1,5 G / L (0,3 à 3,0 G / L). Au cours des prochains mois, l'AMC diminuera
progressivement jusqu'à moins de 1,0 G/ L, seuil qui définit la monocytose absolue
dans les critères de diagnostic de la 4e édition révisée de 2017 de la classification
des
néoplasies hématologiques de l'Organisation mondiale de la Santé (2017 OMS). La
variabilité du nombre de monocytes par race et par sexe est par contre minime (11).

3.2 Données morphologiques

pour différencier entre les monocytes et ses précurseurs un groupe de 5 experts ont
définissent des critères morphologiques pour identifier 4 sous-types : monoblaste,
promonocyte, monocyte immature et monocyte mature (12) (Figure 2)

3
 Etude bibliographique
Figure 2: exemples de sous-types de monocytes (12)

3.2.1 Le monoblaste 

En situation physiologique il se trouve au niveau de la MO.

 Grande taille : 20 - 30 µm
 Noyau : arrondi ou ovalaire, avec chromatine fine, souvent un volumineux
nucléole unique (subcentral)
 Cytoplasme : variablement basophile, parfois quelques granulations
azurophiles (3).
3.2.2 Le promonocyte 
Comme pour le monoblaste, cette cellule se trouve normalement au niveau de la
MO.

 Grande taille : 20 - 30 µm
 Noyau : convoluté, mais la chromatine est fine ; il existe un (ou deux) repli(s)
du noyau sur lui-même (convoluté/indenté)
 Cytoplasme : variablement basophile, parfois quelques granulations
azurophiles (3).

3.2.3 Le monocyte immature 

Habituellement peut se trouver dans le sang et la MO.

 Grande taille : ressemble au monocyte mature mais souvent un peu plus petit.
 Noyau "convoluté", formé de 2 ou 3 masses arrondies. Chromatine et texture
chromatinienne id. Monocyte mature ; pas de nucléole net (convoluté/indenté)
 Cytoplasme gris-bleu, parfois qq granulations azurophiles (3).

3.2.4 Le monocyte mature 

 Grande cellule de taille variable : de 20 à 40µm de diamètre

 Le noyau est arrondi ou ovalaire, le plus souvent réniforme ou franchement
irréguliers, la chromatine est peu dense, non mottée et de structure régulière

4
 Etude bibliographique

 le cytoplasme est étendu, gris bleuté, avec des fines granulations rosées
assez nombreuses qui se fondent souvent avec le fond cytoplasmique, il peut
contenir des vacuoles intracytoplasmiques (13).
3.3 Les données cytochimiques
Les monocytes sont alpha-naphthyl acétate estérase (qui est une estérase non
spécifique) et alpha-naphthyl butyrate estérase positives, cependant elles sont alpha-
naphtol AS-D chloroacétate estérase négatives. L’activité de l’alpha-naphthyl acétate
et de l’alpha-naphthyl butyrate estérase est inhibée par le fluorure (contrairement aux
granulocytes). Les monocytes ont aussi une certaine positivité pour le PAS et le noir
de Soudan, une légère positivité pour la myéloperoxydase (MPO) granulaire, une
forte coloration pour la phosphatase acide et un manque d'activité de la phosphatase
alcaline. Ces cellules contiennent également du lysozyme. Des proportions similaires
de promonocytes, monocytes médullaires et monocytes sanguins expriment des
récepteurs IgG-Fc, IgE-Fc et C3b (9).

3.4 Les données phénotypiques 

On retrouve les Ag suivants sur les monocytes :
 Antigène pan leucocytaire CD45
 Antigènes myéloïdes CD33 et CD13, ainsi que le CD11b - Récepteurs pour le Fc
des Ig G (CD64 = FC gamma RI, CD32 = Fc gamma RII, CD16 = Fc gamma RIII),
des IgE (CD23)
 Récepteurs de fractions du complément
 Autres molécules exprimées : HLA-DR, CD38, CD163, diverses molécules
d'adhésion dont le CD4
 CD36, coexprimé sur les plaquettes et les érythroblastes
 Antigène monocytaire : CD14, protéine à ancre GPI, et récepteur du
Lipopolysaccharide (LPS) (3). Cet antigène est l’antigène le plus spécifique des
monocytes (9).

En se basant sur l’expression différentielle des marqueurs antigéniques CD16 et

CD14 les monocytes du sang humain sont classés en 3 sous-ensembles (Figure
3) (14) :

5
 Etude bibliographique
- Les monocytes classiques présentent une expression élevée de CD14 mais pas de
CD16 (CD14 ++ CD16 -) : présentent 80% du total des monocytes, ont une
morphologie mature et une fonction phagocytaire avec peu ou pas de fonction dans
l’inflammation
- Les monocytes non classiques expriment un faible taux de CD14 ainsi qu'un taux
élevé de CD16 (CD14 + CD16 ++) : représentent environ 15% et jouent
essentiellement un rôle dans la réponse immunitaire avec peu ou pas de fonction
phagocytaire.
- Les monocytes intermédiaires présentent un taux élevé de CD14 associé à une
faible concentration de CD16 (CD14 ++ CD16 +) : représentent environ 5%, sont des
monocytes transitionnels entre les 2 précédents (ils ont les 2 fonctions) (3,14).

Figure 3 : les sous-ensembles de monocytes (14).

4 La détection et la numération automatisée des monocytes par

le Sysmex XT 2000i®
Actuellement, l’hémogramme est automatisé. Le Sysmex XT 2000i ® est parmi les
automates les plus utilisés.

4.1 Principe de détection du Sysmex XT 2000i®

Le XT 2000i® est un automate d’hématologie cellulaire qui analyse les échantillons

du sang avec une cadence élevée (environ quatre-vingt échantillons par heure) et
fournit généralement des résultats fiables. Il combine la technologie de la diffraction
optique et la variation de l’impédance (15,16).

6
 Etude bibliographique
En effet, l’automate considère les cellules du sang comme des particules dont ils
mesurent divers critères physiques, parmi lesquels la taille, la capacité à interrompre
le passage du courant électrique, la résistance à la traversée d’un courant de haute
fréquence, ou la dispersion ou l’absorption lumineuses. Qu’il s’agisse
d’hémogrammes normaux ou anormaux cet automate fournit rapidement des
résultats précis et exacts. Cependant, dans certaines circonstances, liées à des
particularités de l’échantillon sanguin, à une pathologie particulière du patient étudié,
à des modifications induites après le prélèvement, ou à la technologie utilisée pour la
mesure l’automate peut produire des résultats erronés pour un ou plusieurs des
paramètres de la numération globulaire et/ou de la formule leucocytaire (17).

4.1.1 La numération de leucocytes

Le Sysmex® est équipé d’un laser à semi-conducteur à 633nm qui traverse la

chambre de mesure et entre en contact avec la cellule présente et par la suite il est
diffracté en plusieurs directions. Il existe ainsi 3 récepteurs qui permettent la mesure
de la diffraction en avant (FSC) représentant la taille, la diffraction latérale (SSC)
relative à la structure de l’intérieur de la cellule et un récepteur qui récolte la
fluorescence (SFL) (18).

4.1.2 Analyse différentielle de leucocytes 

Les leucocytes sont analysés sur 2 canaux :

-le canal WBC/BASO : il y a « addition des agents de lyse drastiques qui détruisent
les globules rouges GR et les membranes leucocytaires tout en respectant les
noyaux leucocytaires, à l’exception des granulocytes basophiles qui restent intacts.
Ce canal de numération des leucocytes est encore appelé « canal basophiles », car
il fournit le nombre de noyaux leucocytaires et le nombre des polynucléaires
basophiles (l’ensemble correspondant à la numération leucocytaire totale) (2). Les
deux populations ainsi obtenues apparaissent sous forme de nuages de points au
sein d’histogramme bi-paramétriques qui combine la lumière dispersée en avant
(FSL) et celle dispersée latéralement (SSL) (Figure 4).

7
 Etude bibliographique

Figure 4 : histogramme de WBC/BASO

-le canal DIFF : où il y a traitement du sang par un réactif qui entraine la lyse des GR
et perméabilise les globules blancs GB, le fluorochrome peut ainsi marquer les
acides nucléiques des leucocytes. Les lymphocytes, monocytes, éosinophiles et
neutrophiles + basophiles sont ensuite classifiés et comptés dans l’histogramme de
DIFF selon leur SSL (16) (Figure 5).

Figure 5 : histogramme de DIFF

8
 Etude bibliographique

4.2 Anomalies et erreurs de détermination de la formule leucocytaire

4.2.1 Anomalies de la formule leucocytaire

Diverses situations qui perturbent les paramètres de la numération globulaire

altèrent secondairement la détermination et/ou la qualité de la formule leucocytaire.
Ces situations anormales correspondent notamment aux amas de plaquettes,
plaquettes géantes, érythroblastes, GR non lysés, ou particules diverses qui
apparaissent sur les histogrammes leucocytaires sous la forme de nuages de points,
pouvant se juxtaposer ou chevaucher les nuages leucocytaires habituels.
De même, la formule automatisée peut être perturbée par un problème
d’identification des cellules normales (modifications de nature réactionnelle) ou par la
présence de cellules anormales. Ainsi, Dans les situations pathologiques les valeurs
proposées par un AHC ne doivent être considérées qu’à titre indicatif (2).
Au final, malgré le perfectionnement des analyseurs automatisés d’hématologie
destinés à la réalisation des hémogrammes, l'examen du frottis sanguin au
microscope reste indispensable lorsque les données fournies par les appareils sont
qualitativement ou quantitativement anormales ou demandent une confirmation
(2,19).

4.2.2 Anomalies de la numération des monocytes

Les monocytes sanguins montrent une hétérogénéité dans la morphologie ce qui

explique pourquoi elle a une faible reproductibilité du décompte. En outre, on note
une fausse augmentation en cas de la présence de cellules anormales de taille
comparable (neutrophiles des chimiothérapies, leucémies aiguës, lymphomes,
grands lymphocytes activés). Ainsi l’activation des monocytes cours des états
infectieux peut rendre leur identification plus malaisée par l’automate. De plus le
décompte des monocytes s’altère rapidement dans le temps, avec une augmentation
ou une diminution dès 6-10 heures après le prélèvement, indépendamment de la
température de conservation (2).

9
 Etude bibliographique

5 Monocytose
La monocytose est définie par l’augmentation du nombre de monocytes sanguins au-
delà de 1 G/L. Cette monocytose en elle-même est très peu spécifique et, dans la
plupart des cas, elle s'avère être de nature secondaire (ou réactive). Des troubles
néoplasiques sous-jacents, notamment des hémopathies non hématologiques et
hématologiques, peuvent également provoquer une monocytose périphérique et,
dans certains cas, des phénomènes auto-immuns paranéoplasiques (par exemple
une thrombocytopénie ou une anémie à médiation immunitaire). Ainsi, lorsqu'un
nombre total de cellules sanguines (CBC) révèle une monocytose et que la cause en
est inconnue, un bilan minutieux et approfondi ainsi qu’un suivi clinique étroit sont
généralement nécessaires (11). Le Groupe Francophone d’Hématologie Cellulaire
(GFHC) préconise une revue du frottis sanguin devant une monocytose > 1,5 G/L
découverte sur un premier hémogramme, quel que soit l’âge du patient afin de
vérifier la réalité de cette monocytose. Elle permet également de rechercher des
anomalies morphologiques et/ou des cellules malignes pouvant orienter vers une
pathologie monocytaire aiguë ou chronique. Au cours du suivi, une monocytose > 1,5
G/L persistant plus de 30 jours fait recommander un nouvel examen du frottis,
particulièrement orienté vers la recherche d’anomalies en faveur d’une leucémie
myélo-monocytaire chronique (LMMC) ou d’une leucémie myélo-monocytaire
juvénile. Une monocytose apparaissant en cours d’hospitalisation est le plus souvent
réactionnelle et transitoire (dans un contexte chirurgical par exemple) ; elle justifie un
contrôle morphologique si elle est importante et dans ce cas la valeur seuil est à
définir par chaque laboratoire (19).

5.1 Monocytose réactive

Elle est généralement modérée, transitoire, dépassant rarement 2 G/L (peuvent
atteindre 5 G/L voire plus pendant quelques jours ou semaines). La situation clinique
est bruyante (infection sévère, inflammation importante) avec absence de blastes et
de dysgranulopoïèse (20).
Une variété des causes non néoplasiques a été décrite, notamment :

10
 Etude bibliographique
-l'athérosclérose et ses conséquences telles qu'une maladie coronarienne, une
maladie cérébrovasculaire ou une sténose de l'artère rénale, par exemple, en tant
que source de cellules spumeuses (21).
-après un infarctus aigu du myocarde (IAM) associée à un dysfonctionnement du
ventricule gauche, à un anévrisme du ventricule gauche et à d'autres événements
cardiaques (21).
-des troubles immunitaires / inflammatoires (par exemple, maladies vasculaires
au collagène, maladies inflammatoires de l'intestin, sarcoïdose et thrombocytopénie
immunitaire) (11).
-un AVC ischémique : les monocytes augmentent dans 0 à 16 jours après (22).
-les infections bactériennes, fongiques et parasitaires induisent des fonctions
effectrices de monocytes spécifiques des tissus et des agents pathogènes (23).
-une gamme de tumeurs malignes, notamment un carcinome, un lymphome et un
myélome à plasmocytes. 
-On peut également l'observer lors d'une neutropénie et d'une régénération de la
MO après une greffe de MO ou une chimiothérapie.
Et d’autres étiologies réactionnelles comme la drépanocytose et les autres anémies
hémolytiques, le stress chronique, en post-splénectomie, la dyscrasie cutanée des
cellules dendritiques myéloïdes, les causes iatrogènes (exemples : thérapie aux
cytokines, stéroïdes, ziprasidone et radiothérapie) (11) ou encore le tabagisme (21).

5.2 Monocytose néoplasique

Lorsqu'une monocytose prolongée est détectée et que les causes secondaires ont
été
complètement exclues, une hémopathie maligne primitive doit être envisagée, en
particulier chez les personnes âgées ou chez les patients présentant également une
ou plusieurs cytopénies inexpliquées. Le diagnostic différentiel comprend leucémie
aiguë myélo-monocytaire (LAM4) et leucémie aiguë monoblastique (LAM5) et les
néoplasmes myélodysplasiques / myéloprolifératifs (SMD / NMP) incluant la LMMC,
la LMMC juvénile, la LMMC atypique et la SMD / NMP non classable. Parmi les
entités incluses dans la classification 2016 de l'OMS, le principal critère de diagnostic
différentiel est probablement le néoplasme myélodysplasique / myéloprolifératif
(SMD / NMP), plus précisément la LMMC (11,24).

11
 Etude bibliographique

5.2.1 La leucémie myélomonocytaire chronique (LMMC)

5.2.1.1 Définition
C’est une maladie de cellules souches myéloïde caractérisé par une production et
une accumulation anormale de cellules monocytaires, souvent en association avec
d'autres signes de myéloprolifération, la dysplasie importante d'une ou plus lignées
de cellules hématopoïétiques, et un risque accru de transformation en la leucémie
myéloïde aiguë secondaire (25). Elle est classée par l’OMS comme une tumeur
maligne hématopoïétique clonale caractérisée par les caractéristiques d’un
néoplasme myéloprolifératif et d’un syndrome myélodysplasique(26).

5.2.1.2 Epidémiologie

LMMC représente 10% de tous les cas de syndromes myélodysplasiques et les

patients atteints sont diagnostiqués à un âge médian de 65-75 ans, avec une
prédominance masculine(26). 

5.2.1.3 Les signes cliniques

Les symptômes les plus courants de la LMMC sont le reflet de la cytopénie sous-
jacente, du syndrome hyper-catabolique, de la splénomégalie ou de l'infiltration
d'organes par des monocytes. La maladie présente des phénotypes cliniques
variables, le pronostic est généralement mauvais et les traitements efficaces sont
limités (26).

5.2.1.4 Les critères de diagnostiques

Les critères de diagnostic de LMMC, tels que définis par l'OMS en 2016 :

1. Monocytose persistante > 1 G/L, avec monocytes représentant au moins 10 %

des cellules de la formule
2. Absence de critère évoquant une leucémie myéloïde chronique BCR-ABL1
positive, un syndrome myéloïde chronique, une polyglobulie de vaquez ou une TE

12
 Etude bibliographique
3. Absence de réarrangements PDGFRA, PDGFRB, FGFR1, ou PCM1 - JAK2
(doivent être spécifiquement exclus les cas avec éosinophilie)
4. Moins de 20 % de blastes dans la moelle et le sang (blastes + myéloblastes +
monoblastes + promonocytes)
5. Au moins l'un des critères suivants :
         - dysplasie sur au moins une lignée ; si la dysplasie est absente ou minime il
faut que les autres critères soient présents et qu'une anomalie cytogénétique
clonale ou moléculaire soit présente dans les cellules hématopoïétiques
Ou :     
         - monocytose présente depuis au moins > 3 mois et absence d'autre cause
de monocytose (infection/inflammation/cancer) (27).

5.2.1.5 Diagnostic biologique, pronostic et traitement

Le frottis sanguin montre une hyperleucocytose avec des monocytes hyperlobulés ou
présentant des signes d’immaturité comme une basophilie plus prononcée du
cytoplasme ou des granulations cytoplasmiques de grande taille. Des promonocytes
peuvent également être présents. Une myélémie <10% est également observée avec
une blastose<20%. La lignée granuleuse qui présente des signes de dysplasies :
polynucléaires neutrophiles hyposegmentés, hypercondensation chromatinienne,
signes de pelgérisation, dégranulation. Les hématies peuvent également être
dystrophiques, avec des anomalies de formes et de taille. Il est ainsi possible de
retrouver une poïkylocytose chez les patients atteints de LMMC (28) (Figure 6).
-La leucocytose permet de distinguer la LMMC myéloproliférative quand les globules
blancs sont> 13 G/L de la LMMC myélodysplasique quand ils sont < 13G/L.
-La LMMC, bien que chronique, nécessite un diagnostic précis et une prise en
charge hématologique rapide
-L'hémogramme, la blastose médullaire et la génétique permettent d'apprécier le
pronostic de survie.
-L'allogreffe est la seule solution curative, mais a des indications assez limitées chez
les patients atteints de LMMC dont la moyenne d’âge lors du diagnostic est de 60 à
70 ans (29).

13
 Etude bibliographique

Figure 6: Frottis sanguin au cours d’une LMMC (11).

5.2.2 Leucémie myéloïde aiguë (LAM) avec différenciation

monocytaire
On définit une LAM lorsque le pourcentage de blastes et / ou de promonocytes est
de 20% ou plus dans le sang périphérique ou la MO. Le myélogramme est essentiel
dans les néoplasmes monocytaires car la MO a souvent un pourcentage plus élevé
de cellules immatures que le sang périphérique.
De nombreux cas de LAM avec différenciation monocytaire entrent dans la catégorie
générale des LAM. Cela inclut la leucémie aiguë myélomonocytaire (LAM4) et la
leucémie aiguë monoblastique (LAM5) avec /ou sans différenciation (11) (Tableau I).

Morphologie Définition

14
 Etude bibliographique

Leucémie MO :
aiguë -C’est une prolifération des lignées
myélo- granuleuses et monocytaire avec
monocytai une blastose > 20% (myéloblastes et
re (LAM4) monoblastes).
- La maturation granuleuse est >
10%
-La composante monocytaire
(monocytes et précurseurs
monocytaires) doit être > 20%.
Sang périphérique :
La monocytose sanguine est > 5
G/L.
Leucémie -C’est la forme indifférenciée
aiguë monoblastique caractérisée par une
monoblast infiltration médullaire de cellules
ique sans monocytaires (≥ 80%), composée de
différencia monoblastes. Une composante
tion granuleuse minoritaire peut être
(LAM5a) présente.

Leucémie C’est la forme différenciée

aiguë caractérisée par une prolifération de
monoblast cellules monocytaires (≥ 80%),
ique avec composée de monoblastes, de
différencia promonocytes et de monocytes.
tion
(LAM5b)
Tableau I: LAM4 et LAM5 selon de la classification Franco-Américano-Britannique
(FAB) (30)

15
 Etude bibliographique

6 Monocytopénie
La monocytopénie est définit par un taux de monocytes inférieur à 0,2 G/L.
Elle peut survenir :
-dans toute maladie des cellules souches hématopoïétiques associée à une
pancytopénie (par exemple, leucémie myéloïde) avec une diminution notable et
constante dans l'anémie aplastique dans le cadre de la diminution globale de la
production de cellules sanguines.
- au cours de la leucémie à tricholeucocytes.
- fréquemment chez les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde, de lupus
érythémateux disséminé et de d'infection par le virus de l'immunodéficience
humaine.
- par la prise des glucocorticoïdes (dans ce cas la monocytopénie est transitoire
environ 6 h après l'administration à l'homme) (31).

16
Partie pratique
 Partie pratique

18
 Partie pratique

1 Objectif de travail
Les automates d’hématologie cellulaire de dernière génération utilisent
conjointement plusieurs technologies (cytométrie en flux par diffraction laser,
fluorescence …) et leur perfectionnement ne cesse de progresser. Ils permettent
ainsi d’obtenir des résultats d’hémogramme de plus en plus précis avec une grande
fiabilité, et cela dans des délais assez courts. La formule leucocytaire, ainsi obtenue,
est plus élargie. Néanmoins, l’examen du frottis sanguin au microscope optique reste
indispensable en cas d’anomalies quantitatives ou qualitatives sur l’hémogramme.
Nous utilisons au sein du laboratoire du Centre de Maternité et de Néonatologie de
Monastir (CMNM) l’automate à numération le Sysmex XT 2000i ®.
Nous souhaitons à travers cette étude, évaluer la performance de cet automate dans
l’identification et la numération des monocytes. Nous avons donc comparé la valeur
des monocytes fournie par cet automate avec celle retrouvée par la méthode
manuelle qui consiste à l’examen du frottis sanguin au microscope optique.

2 Matériels et méthodes
2.1 Matériels

2.1.1 Patients

Notre étude a été faite sur tous les patients, hospitalisés ou venant en consultation
externe au CMNM, et qui ont bénéficié d’une NFS au sein du laboratoire.

2.1.2 Réactifs utilisés

 May Grünwald
 Giemsa
 Eau distillée
 Huile à immersion

2.1.3 Instruments

 Sysmex XT 2000i®

17
 Partie pratique

 Microscope optique

2.2 Méthodes

Les échantillons de sang de ces patients ont été obtenus par un prélèvement
veineux sur tubes EDTA-K3 (éthylène diamine tetra-acétique tripotassique)
accompagnés d’une demande d’analyse puis analysés.
Les échantillons sanguins ont été inclus prospectivement dans cette étude pendant
une période allant de 16/04/2019 au 04/05/2019. Le critère d’inclusion des
échantillons repose sur un nombre de monocyte absolue ≥ 1 G/L avec une alarme
« monocytose » fournie par l’automate. Un examen du frottis sanguin au microscope
optique a permis de vérifier ces résultats et de les comparer à la méthode manuelle.

2.2.1 Hémogramme : Sysmex XT 2000i®

La NFS a été réalisée par l’automate Sysmex XT 2000i ® et nous avons obtenu, pour
chaque échantillon, la numération et la formule sanguine complète selon les
principes de mesure décrits précédemment (Figure 7).

Figure 7: Sysmex XT 2000i® (32)

2.2.2 Examen cytologique sur frottis

Le frottis est réalisé à partir de l’échantillon de sang prélevé sur EDTA pour la
numération globulaire. Le frottis traditionnel manuel comporte plusieurs zones : le
début du frottis qui est une zone épaisse, le corps du frottis où se situe la zone de
lecture, et les franges où les éléments sont surétalés et déformés (13).

18
 Partie pratique

 Procédure de confection du frottis : (Figure 8)

 Homogénéiser l'échantillon de sang par des mouvements de retournement
doux et successifs pour éviter l'apparition de caillot.
 Déposer une goutte de sang sur une lame en verre dégraissée, à 1 cm
environ du bord lame à l’aide du bouchon du tube.
 Glisser le bord de la seconde lame rodée sur la lame jusqu'à ce qu'elle entre
au contact avec la goutte, en maintenant un angle de 45°.
 La goutte de sang se répartit régulièrement par capillarité en une couche
mince uniforme le long du bord de la seconde lame
 Faire glisser la seconde lame, jusqu'au bout, d'un mouvement assez lent et
régulier en maintenant le contact et la pression nécessaire pour que le sang
s'étale.
 Sécher immédiatement le frottis en agitant à l'air par des mouvements
d'éventails vifs. Temps de séchage minimum 5 minutes.
 Identifier le frottis.

Figure 8: les étapes de confection d'un frottis sanguin (33).

 Coloration au MGG :
Elle se repose sur l’action combinée de deux colorants neutres : le bleu de
méthylène (colorant basique) et l’éosine (colorant acide). Les structures

19
 Partie pratique
acidophiles de la cellule seront colorées en rose, rouge ou orangé, les
structures basophiles en bleu (bleu clair, bleu foncé, bleu violet, pourpre).
L’alcool utilisé pour dissoudre le colorant de May-Grünwald sert, en outre, de
fixateur (13).
 Lecture :
La lecture au microscope comporte une analyse de la morphologie des
différentes populations de cellules figurées de sang. La « formule sanguine »
consiste à établir un pourcentage des différents types de cellules sur 100
éléments comptés (13).

2.2.3 Analyses statistiques

 Les données ont été extraites des deux méthodes et converties au format
tableur pour des analyses statistiques ultérieures. La saisie des résultats est
faite sur le tableur Excel de Microsoft ® version 1811.
 La comparaison entre les méthodes des mesures est réalisée à l’aide de
l’étude de corrélation. Cette corrélation est très souvent réduite à la
corrélation linéaire entre variables quantitatives, c’est-à-dire l’ajustement d’une
variable par rapport à l’autre par une relation affine obtenue par régression
linéaire. Pour cela, on calcule un coefficient de corrélation linéaire de Pearson
que nous l'interprétons selon les balises de Cohen (1988) :

Autour de 0,01 Effet de petite taille  Corrélation faible

Autour de 0,03 Effet de taille moyenne  Corrélation moyenne

Plus de 0,50  Effet de grande taille  Corrélation forte

 L’évaluation de la concordance par la méthode de Bland et Altman qui

consiste à réaliser un graphe comportant en ordonnée la différence entre les
valeurs obtenues par les deux techniques A et B (soit A-B) et en abscisse la
moyenne des valeurs obtenues par ces deux techniques, soit (A + B) /2. Cette
moyenne représente une estimation acceptable au plan technique en
l'absence de connaissance préalable du biais existant entre les deux séries de
données (34)
 Le calcul de la validité prédictive :

20
 Partie pratique
- VP (vrais positifs) représente le nombre d’échantillon qui présente une
monocytose ≥ 1G/L par les deux méthodes.
- FP (faux positifs) représente le nombre d’échantillon ayant une valeur
absolue des monocytes (VAM) <1G/L par la méthode microscopique de
référence et une monocytose ≥ 1G/L par le Sysmex®.
- VPP (valeur prédictive positive) est la probabilité que la maladie soit
présente lorsque le test est positif elle est égale VP / VP+FP. Un test avec une
bonne valeur prédictive positive est fiable lorsque son résultat est positif.
Dans notre étude la VPP présente la probabilité que la monocytose soit vraie
lorsqu’elle est détectée par l’automate Sysmex XT 2000i ®.

3 Résultats
Nous avons obtenu 149 échantillons ayant montré une monocytose ≥ 1 G/L par le
Sysmex XT2000i® que nous avons comparés à l’examen cytologique sur frottis pour
évaluer sa sensibilité et sa spécificité à la numération des monocytes et la détection
de la monocytose.

3.1 Etude de la population

3.1.1 Moyenne d’âge

Le tableau II présente la moyenne d’âge de cette population.

Tableau II: description de la population d’étude selon l’âge

Total Nourrisson Enfant Adulte Personne âgée

Effectif (N) 149 23 3 119 4

Pourcentage 100% 15% 2% 80% 3%

Moyenne 28 ans 3 jours 5 ans 34 ans 77 ans

3.1.2 Provenance

La figure 9 montre la répartition des échantillons à titre externe et interne.

21
 Partie pratique

personne âgée nouris

3% son
15%
enfant
2%

ado-
lescent
adulte 22%
58%

Figure 9: classification selon les services

3.2 Etude de l’origine de la monocytose

La monocytose peut être réactionnelle ou liée à une hémopathie.

Le figure 10 montre la classification des différentes étiologies de la monocytose dans
ces deux classes.

monocytose hémopathique
6%

monocytose réactionnelle
94%

Figure 10: répartition de population d'étude selon l'origine de la monocytose

22
 Partie pratique
Dans la monocytose hémopathique on trouve : deux myélomes multiples (MM), deux
lymphomes hodgkiniens (LH), deux lymphomes non hodgkinien (LNH), un Purpura
thrombotique immune (PTI), une leucémie lymphoïde aiguë (LAL).

3.3 Etude de la corrélation entre les deux méthodes

3.3.1 Etude générale

Le tableau III présente les moyennes des VAM obtenues par le Sysmex ® et sur
frottis.

Tableau III: description statistique des monocytes par chacune de méthodes

utilisées
Min Max Moyenne Ecart type Nombre total R P
(G/L) des
échantillons
VAM 1.26 4.06 1,41 0,49 149 0.7 0.000
obtenues
par le
Sysmex®
VAM 0.35 4.15 1,27 0,62
obtenues
sur frottis
p représente le degré de signification.

Il existe un lien statistique linéaire positif fort entre les VAM par Sysmex ® et les VAM
par la méthode microscopique (Figure 11).

4.5

3.5
taux de monocytes par Sysmex

f(x) = 0.885032532735609 x + 0.0220231843072027

R² = 0.490371458874747
3

2.5

1.5

0.5

0
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
taux de monocytes par méthode microscopique

Figure 11: étude de corrélation entre les monocytes détectés par le Sysmex ® et
calculés sur frottis.

23
 Partie pratique
3.3.2 Etude de la corrélation entre les deux méthodes en présence des
granulocytes jeunes (GJ)

Au cours de contrôle de la monocytose détectée par le Sysmex ®, nous avons

constaté la présence des granulocytes jeunes dans 17 échantillons dont 13 montrent
une fausse monocytose.
Le tableau IV présente la moyenne des valeurs absolues des monocytes obtenues
par chacune des deux méthodes et montre le coefficient de corrélation qui lien les
deux méthodes de mesure utilisées.

Tableau IV: corrélation entre les valeurs des monocytes en présence des GJ

  Min Max Moyenne (G/L) Ecart type Nombre total des R P

échantillons
VAM 1.01 1.76 1,3 0,25 17 0,688 0,002
obtenues par
le sysmex

VAM 0.36 1.63 0,78 0,37

obtenues sur
frottis

En examinant la valeur du coefficient (r = 0.688), nous pouvons dire que la corrélation est
forte en présence des GJ (Figure 12).
1.8
1.6
1.4
1.2 f(x) = 1.01400915461388 x − 0.540589564212066
VAM par Sysmex

R² = 0.47324813552283
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0.9 1 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9
VAM par méthode microscopique

Figure 12: Etude de corrélation entre la VAM obtenue par le Sysmex ® et la VAM sur
frottis sanguin en présence de GJ
3.3.3 Etude de la corrélation entre les deux méthodes en présence des
lymphocytes activés (LA)

24
 Partie pratique
Parmi les 149 échantillons traités dans notre étude on a 14 échantillons qui
présentent des LA dont 9 qui montrent une fausse monocytose.
Dans le tableau V nous avons mentionnés les moyennes des valeurs des monocytes
obtenues par les deux méthodes en présence des LA et nous avons mentionnés la
valeur de coefficient de corrélation.

Tableau V: corrélation entre les valeurs des monocytes en présence des LA

  MIN MAX MOYENNE ECART NOMBRE R P

(G/L) TYPE TOTAL DES
ÉCHANTILLONS
VAM 1,0 3,05 1,62 0,59 14 0,658 0,01
OBTENUE 1
S PAR LE
SYSMEX®
VAM
OBTENUES 0,3 2,00 0,85 0,44
SUR 0
FROTTIS

La corrélation entre les deux méthodes pour les valeurs absolues des monocytes est
exprimée par l’équation suivante : Y= 0,4895 x+0,0574 avec un coefficient de
corrélation r = 0,658 (Figure 13).

2.50
VAM par méthode microscopique

2.00

1.50 f(x) = 0.489509785549569 x + 0.0574187273597371

R² = 0.433000225194375

1.00

0.50

0.00
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
VAM par Sysmex

Figure 13:Etude de corrélation entre la VAM obtenue par le Sysmex ® et la VAM sur
frottis en présence des LA

3.4 Etude de la concordance entre les deux méthodes

25
 Partie pratique
En se basant sur la méthode de Bland et Altman, nous avons calculés la moyenne
de différence entre les VAM obtenues par chacune de deux méthodes et nous avons
obtenus un résultat de l’ordre de -0,14 avec écart type qui est égal 0,45. Ainsi, nous
avons calculés les limites d’agréments et nous avons obtenus un intervalle entre -
1,22 et 0,74.
La concordance entre les deux méthodes est bonne. En effet, on a seulement 4
points en dehors des limites d’agréments (Figure 14).
2
la différence entre les valeurs obtenues des

1.5

0.5
monocytes

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5
-0.5

-1

-1.5

-2

-2.5
la moyenne des monocytes obtenues par les deux méthodes

Le trait noir correspond à la limite supérieur, le trait orangé correspond à la moyenne des différences
et le trait gris correspond à la limite inférieur.

Figure 14: Etude de la concordance de la VAM entre le Sysmex ® et le frottis

3.5 Evaluation de fiabilité de la monocytose

Dans le tableau IV nous avons comparé chaque monocytose détectée par le

Sysmex® à la méthode microscopique de référence.

Tableau VI: évaluation de fiabilité de la monocytose détectée sur le Sysmex

NOMBRE D’ÉCHANTILLON
VP 95
FP 54
VPP 0.64

4 Discussion

26
 Partie pratique
La nouvelle génération des automates d’hématologie cellulaires fait preuve d’une
grande précision. Mais, bien qu'il existe une bonne corrélation entre la plupart d'entre
elles, des divergences ont été observées dans la numération différentielle des
leucocytes et en particulier dans la numération des monocytes .Nous avons cherché
à évaluer les performances de comptage des monocytes de l’analyseur
d'hématologie, Sysmex XT 2000i ®, en comparant les résultats obtenus avec ceux de
l’examen microscopique de frottis sanguin, considéré dans ce cas comme la
méthode de référence (35).

4.1 Origine de la monocytose

La monocytose est une constatation courante qui est dans 94% des cas transitoire et
réactionnelle et seulement 6% des cas présentent une monocytose qui est liée à des
hémopathies comme le myélome multiple, le lymphome hodgkinien et non
hodgkinien, la leucémie lymphoïde aiguë, le purpura thrombopénique immunologique
et l’anémie hémolytique.

4.2 Etude générale de la corrélation entre les deux méthodes de

mesure

L’étude réalisée par Leers MPG et al (18), comparant les résultats monocytose
fournis par l’analyseur Sysmex® et l’examen microscopique des frottis sanguin et
portant sur 381 échantillons, a montré une forte corrélation entre le Sysmex XT
2000i® et l’examen microscopique dans la détection de la monocytose sanguine avec
un coefficient de corrélation de l’ordre de 0.817 (intervalle de confiance entre 0.780
et 0.848).
Une autre étude réalisée par Langford K et al (36) sur 114 échantillon a montré une
forte corrélation entre le XT-2000i et la méthode de référence manuelle différentielle
dans la détection de la monocytose avec un coefficient de corrélation (r) de l’ordre de
0,9 et une équation de la droite de la droite de régression linéaire X= 1,37 Y+1,89.
Notre étude, réalisée sur 149 échantillons, pour évaluer les performances
analytiques de l’automate Sysmex® a montré une forte corrélation entre l’automate et
la méthode microscopique de référence pour les monocytes (r était de l’ordre de 0,7).
La droite de régression linéaire montre un lien statistique linéaire positif fort entre les
VAM par le Sysmex® et les VAM par la méthode microscopique.

27
 Partie pratique
4.3 Interférence avec les GJ et les LA

Nous avons essayé d’évaluer les performances de l’automate à la numération des

monocytes en présence des GJ et des LA dans le sang périphérique. Et ceci dans le
but de voir si la différence, entre les résultats automatiques et celui lu sur frottis, est
significative ou non. L’analyse des coefficients de corrélation en présence des GJ et
des LA, qui sont respectivement de l’ordre de 0.688 et 0.658, a montré que la
corrélation diminue en présence des GJ et des LA. Ceci est en accord avec ce qui
est mentionnée par Geneviève F et al, (2) qui a trouvé que parmi les anomalies de
numération des monocytes par les automates d’hématologies cellulaires est la
présence de cellules anormales (comme les blastes, les granulocytes dysplasiques,
lymphocytes activés…).
La corrélation est moins importante en présence des LA.

4.4 Concordance entre les deux méthodes de numération

L’analyse de la concordance par la méthode de Bland-Altman montre que les deux

méthodes sont concordées. En effet, nous avons obtenu un biais négatif de -0,14
(±0,45), qui indique que le Sysmex® tende à produire des valeurs un peu plus
élevées que l’examen microscopique. Dans le graphe de Bland et Altman la plupart
des points se situe entre les limites d’agréments et quatre points seulement se
situent en dehors de ces limites.
Selon l’étude réalisé par Leers MPG et al (18) la méthode de Bland-Altman montre
un biais positif de 2.7 (-3.4 - 8.9) avec 7 points en dehors de limites d’agréments.

4.5 La fiabilité de la monocytose

La monocytose détectée sur le Sysmex® est peu fiable. En effet, il montre une VPP
de 0.64 qui signifie que quand l’automate montre une monocytose, il y’a une
probabilité a 64% que cette monocytose soit vraie

28
Conclusion
 Conclusion
La monocytose est une constatation courante causée par une grande variété de
pathologies néoplasiques et non néoplasiques . La plupart des cas de monocytose
sont de nature réactive. Une évaluation correcte est nécessaire pour exclure la
minorité des cas néoplasiques.

Lorsque la monocytose est reconnue, des mesures doivent être prises pour
déterminer la signification clinique et la nécessité d’un bilan clinique plus approfondi .
La première mesure à prendre est l’examen du frottis sanguin en portant une
attention particulière sur les lymphocytes atypiques et les GJ qui peuvent être
identifiés comme des monocytes par l’automate (11) comme nous avons démontrés
dans cette étude.

Notre étude permet de conclure que les résultats de monocytes rendus par le
Sysmex sont généralement fiables mais le Sysmex® tende à produire des valeurs un
peu plus élevées que l’examen microscopique. Donc la revue du frottis sanguin est
préconisée dans ce cas pour vérifier la réalité de la monocytose et rechercher des
anomalies morphologiques et/ou des cellules malignes pouvant orienter vers une
pathologie monocytaire aiguë ou chronique.

29
Références
 Les références bibliographiques
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Partie 2. Numération et formule leucocytaires. In: Annales de Biologie Clinique.
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 MINISTERE DE LA SANTE
UNIVERSITE DE MONASTIR

ECOLE SUPERIEURE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE LA SANTE DE Monastir

Année universitaire 2018/ 2019

Licence Appliquée en Biologie médicale

N° (réservé à l’administration)
Nom et Prénom : Boussaid Zouhour

Evaluation des performances analytiques de l’automate Sysmex

XT2000i® dans la détection de la monocytose

Résumé :
La monocytose est définie par un excès de monocytes circulants dans le sang (supérieur à 1G/L).
La majorité des monocytoses sont transitoires et réactionnelles, au cours des maladies
bactériennes, virales ou parasitaires. Elles sont aussi observées lors de régénération médullaire et
lors de syndrome inflammatoire. Une évaluation correcte est nécessaire pour exclure la minorité des
cas néoplasique.

Nous avons mené une étude prospective incluent 149 hémogrammes réalisée par l’automate de
Sysmex XT 2000i® dont les résultats incluent une valeur absolue de monocyte ≥ 1 G/L. nous avons
ensuite évaluer la fiabilité du pourcentage de monocytes rendu par l’automate en le comparant à
celui lu sur frottis préalablement coloré au MGG.

A traves cette étude nous avons conclu que les résultats de monocytes rendus par le Sysmex sont
Université de Monastir
généralement fiables mais le Sysmex® tende à produire des valeurs un peu plus élevées que
l’examen microscopique. Donc la revue du frottis sanguin est préconisée dans ce cas pour vérifier la
réalité de la monocytose et rechercher des anomalies morphologiques et/ou des cellules malignes
pouvant orienter vers une pathologie monocytaire aiguë ou chronique.

Mots-clés :
Monocytes, Monocytose, Sysmex XT2000i®, Frottis sanguin, hémogramme.