Les enterobacteriaceae :

- sont des bacilles à Gram négatif,

- le plus souvent courts (1 à 6 μ m),

-droits,

- immobiles ou mobiles par une ciliature péritriche,

-de culture aisée,

- aéro-anaérobies facultatifs,

- fermentaires,

-oxydase négative,

-catalase positive,

- nitrate réductase positive (rares exceptions). (P. Bidet , E. Bingen)

Pouvoir pathogène :

Les entérobactéries sont responsables de deux grands types de manifestations

pathologiques : une pathologie spécifique telle la typhoïde avec Salmonella Typhi, ou une
pathologie opportuniste, notamment dans le cadre d'infections nosocomiale.

II-Enterobacteriaceae:

Elle représente une vaste famille de bactéries (plus de 30 genres,et 140 espèces) Présente
dans le tube digestif de l'homme et des animaux Elle possède 07 caractères bactériologiques
communs :

-BGN

- Oxydase –

- Pousse sur milieux ordinaires

- Aéro-anaérobie facultatif (AAF)

-Réduction des NO 3- en NO2-

- Fermentation du glucose

- Souvent mobiles (ciliature péritriche) sauf Klebsiella et Shigella

e.coli :

-Escherichia coli est l'espèce la plus fréquemment isolée dans le laboratoire de bactériologie.

- C'est un commensal de l'intestin de l'homme et des animaux représentant l'espèce aérobie

quantitativement la plus importante de la flore digestive (10 6 –10 9 bactéries par gramme
de selles). -Mais c'est aussi le premier germe responsable d'infections communautaires et
nosocomiales.

- Les infections à E. coli sont de deux types :

- infections intestinales à type de diarrhées

- infections extra-intestinales (article BGN) (F. Denis , M.-C. Ploy)

 Règne : Bacteria
 Embranchement :Proteobacteria
 Classe :Gamma Proteobacteria
 Ordre :Enterobacteriales
 Famille :Enterobacteriaceae
 Genre :Escherichia

A-Principaux caractères bactériologiques :

 Elle est mobile

 indole (+)
 lactose (+)
 citrate (-)

Il existe differents sérotypes selon : -Ag somatique O et flagellaire H (ex: E. coli O157:H7) -Ag
capsulaire K (ex: E. coli K1)

Principaux caractères Culturaux :

Bacille aérobie, à Gram négatif, oxydase négatif, nitrate positif et qui fermente le glucose.
Pouvoir pathogène :

En plus d'être un membre important de la microflore intestinale normale des humains et des
autres mammifères, l'espèce Escherichia coli contient de nombreux pathotypes qui
provoquent diverses maladies. Au moins six pathotypes différents provoquent des maladies
entériques, telles que la diarrhée ou la dysenterie, et d'autres pathotypes provoquent des
infections extra-intestinales, y compris des infections des voies urinaires et une méningite.

2. Facteurs de virulence associés aux infections extra- intestinales :

La virulence des E. coli extra- intestinaux semble résulter de la combinaison de plusieurs

facteurs agissant à différents niveaux du processus physiopathologique. On peut classer ces
facteurs en cinq catégories :

- les adhésines : qui permettent d’adhérer aux épithéliums humains

- les invasines

-les toxines qui favoriseraient la traversée des barrières digestive ou urinaire vers la
circulation sanguine puis du sang vers le LCR (barrière hémato- méningée)

-les systèmes de capture du fer

-les facteurs de protection contre le système immunitaire (complément, phagocytose)

parfois dénommés « protectines » (P. Bidet*, S. Bonarcorsi, E. Bingen)

k.p :

Klebsiella pneumoniae a été décrite pour la première fois par Carl Friedlander dans 1882
comme une bactérie isolée des poumons des patients qui était mort d'une pneumonie
(Friedlander 1882).
ce n'est qu'en 1886 que la bactérie a obtenu le nom de Klebsiella.

Klebsiella pneumoniae est une bactérie Gram négatif, encapsulée et non mobile (John V.
Ashurst; Adam Dawson.).

Habitat :
Espèce Klebsiella sont omniprésents dans la nature, y compris l'eau, le sol et les animaux, et
ils peuvent coloniser les dispositifs médicaux et l'environnement de soins de santé. (k.b
difinition)

Pouvoir pathogène :

Les espèces de Klebsiella provoquent un large éventail de maladies, notamment la

pneumonie, les infections des voies urinaires (IVU), la circulation sanguine infections et
septicémie. Ces infections sont particulièrement problématiques chez les nouveau-nés, les
personnes âgées et les personnes immunodéprimées personnes. Klebsiella est également
responsable d'un nombre important d'infections d'origine communautaire. (k.b definition)

Position taxonomique :

 -Domaine : Bactéria ;
 -Phylum: Proteobacteria;
 -Classe: Gammaproteobacteria;
 -Ordre: Entérobactériale;
 -Famille : Enterobacteriaceae;
 -Genre :Klebsiella pneumoniae

Principaux caractères biochimiques :

 Fermentation des sucres : glucose+

 Métabolisme du tryptophane en indole : indole-
 -ONPG +
 -Production du gaz (+)
 Mobilité(-)
 -VP(+)
 -TDA-
 -H2S(-)
 ODC(-)
  -ADH(-)
 -LDC(+)
 -Citrate (+) (Joly et Reynaud, 2002).

Facteur de pathogénicité : (clinical microbio)

-capsule : klebsiella développent généralement une capsule proéminente composée de

polysaccharides complexes, Le matériau capsulaire forme d'épais faisceaux de structures fi
brillantes couvrant la surface bactérienne en couches massives
-Pili (Fimbriae) : En tant que première étape critique du processus infectieux, les micro-
organismes doivent s'approcher le plus possible des surfaces muqueuses et maintenir cette
proximité en se fixant à la cellule hôte (adhérence). Ce sont des projections non flagellaires
et filamenteuses sur la surface bactérienne.
-Type1 : Impliqué dans la formation des intracellulaires communautés bactériennes
-Type3 : Important pour la formation de biofilms sur les biotiques et surfaces abiotiques,
rôle dans la formation du biofilm sur les cathéters urinaires in vivo reste à être élucidé (clegg
2016 les 2 type)

-Sidérophores: La croissance des bactéries dans le tissu hôte est limitée non seulement par
les mécanismes de défense de l'hôte mais également par son apport en fer disponible. Le fer
est un facteur essentiel de la croissance bactérienne, fonctionnant principalement comme
catalyseur redox dans les protéines participant aux processus de transport de l'oxygène et
des électrons (93)
Ou : Récupérer le fer essentiel à la survie,des phénotypes hypermucovisceux ont été
lié à l'augmentation de l'activité de liaison au fer. (clegg 2016)

-Lipopolysaccharide : Le lipopolysaccharide est considéré comme un facteur de virulence à

cause de la présence de l’antigène O sur sa partie la plus externe. Chez Klebsiella
pneumoniae, 9 antigènes O ont été identifiés dans le LPS et parmi eux, O1 est le plus
fréquemment retrouvé (80)
Urease :
-Rôle limité dans la précipitation des sels inorganiques conduisant à l'incrustation du
cathéter
-facilite la formation de biofilms sur biotiques ou abiotiques surfaces qui peuvent elles-
mêmes inhiber un traitement efficace par des antibiotiques.
Utilisation massive d'antibiotiques dans la pratique clinique a entraîné une résistance des
bactéries aux antimicrobiens agents. Les bactéries utilisent une résistance innée et acquise
mécanismes pour se protéger. (ss lok)
Perméabilité membranaire et porines :
La membrane externe des bactriens & Gram négatif est constitué de phospholipides, de
lipopolysaccharide (LPS) et de protéines [33]. (Rr chez GN)
-La membrane externe est la première ligne de défense Bactéries à Gram négatif contre les
composés toxiques (9).
Cette barrière comprend une bicouche lipidique qui est imperméable aux grosses molécules
chargées. L'afflux est largement contrôlé par porines, qui sont des canaux ouverts remplis
d'eau qui s'étendent la membrane externe et permettre la pénétration passive de molécules
hydrophiles (9–11). Différents types de porines ont été caractérisés chez des bactéries à
Gram négatif et classés en fonction de :
-leur activité (non spécifique ou canal spécifique ou pore sélectif).
-leur fonction structure (monomère ou trimérique).
- leur régulation et expression (porine 1)
-Trois classes principales de protéines intervenant dans la perméabilité de la membrane
externe ont été identifiées [4]:
- les porines non spécifiques, telles que OmpF, OmpC, PhoE, OmpD et Omp36.
- les porines sélectives impliquées dans la diffusion de sucres ou de métaux, comme LamB ou
FhuA.
-les protéines, telles que OmpA et TolC, formant des canaux pour diverses molécules.
(porines pdf)
La perméabilité membranaire intervient dans le contrôle de la concentration de différentes
classes d’antibiotiques comme les β-lactamines(1) ou les quinolones (2) via l’expression des
porines ou des transporteurs-pompes [1-3]. Plusieurs résultats ont montré la relation
existant entre la porine et la sensibilité aux β-lactamines et aux fluoroquinolones.
Les analyses d’isolats résistants aux antibiotiques (Klebsiella, Enterobacter, Proteus,
Pseudomonas ou Serratia) ont établi que la disparition des porines, associée à la production
d’enzymes bactériennes détruisant le cycle β-lactame (β-lactamases, céphalosporinases), est
un élément clé dans la résistance aux β-lactamines. (porines pdf)
- plusieurs études cliniques ont rapporté une modification de le profil de porine dans les
isolats résistants aux antibiotiques : résistant Les entérobactéries peuvent présenter un
changement dans le type de porine ils expriment, une réduction du niveau d'expression de la
porine ou la présence d'une porine mutée. (por)
- un phénotype de porine altéré est également couramment associé à l'expression de
dégradations des enzymes, telles que les β-lactamases et les céphalosporinases,
qui confèrent efficacement un haut niveau de résistance aux β-lactamines(14,21).(por)

Pompes à efflux :
Les bactéries à Gram négatif ont de nombreuses pompes à efflux dans leurs membranes ;
ceux-ci transportent une grande variété de molécules hors de la cellule bactérienne.
Certaines de ces pompes peuvent transporter des antibiotiques. Pomper les antibiotiques
hors du bactérie diminue la concentration de médicament à l'intérieur de la cellule,
permettant aux bactéries de survivre à un niveau plus élevé concentrations externes de
médicament antimicrobien, conduisant à la survie et à la résistance. (b 2014)
-Les pompes d'efflux les plus importantes sur le plan clinique chez les bactéries à Gram
négatif appartiennent à la famille RND (resistance nodulation division). Ces efflux les
systèmes confèrent une résistance intrinsèque en exportant plusieurs classes
d'antibiotiques.
-La surexpression des systèmes d'efflux dans les agents pathogènes bactériens peut conduire
à une MDR cliniquement pertinente. (b 2014)

Réduction de l'absorption de médicaments dans la cellule :

Il existe plusieurs moyens par lesquels l'absorption d'un médicament dans une cellule peut
être réduite:
-changements dans la structure de la cellule membrane.
-perte ou mutations de porines dans les membranes cellulaires.
-et efflux actif du médicament de la cellule.( langton2005)
Modification du médicament :
Un autre mécanisme de résistance chez les uropathogènes à Gram négatif est la
modification du site cible de l'antibiotique, de sorte que l'antibiotique est incapable de se lier
correctement. La famille la plus diversifiée de les enzymes résistantes sont le groupe des
transférases.
Il existe trois enzymes principales qui inactivent les antibiotiques:
- les β-lactamases
- les enzymes modifiant les aminosides
- les chloramphénicol acétyltransférases
Modification des antibiotiques par hydrolyse : Les β-Lactamase sont des enzymes largement
répandues qui sont classifiées à l'aide de deux principaux systèmes de classification: Ambler
et Bush-Jacoby-Medeiros (5). Il est connu 300 β-lactamases différentes. Les plus importantes
sur le plan clinique sont produites par des bactéries à Gram négatif (22) et sont codés sur
des chromosomes et des plasmides. Les gènes qui codent pour les β-lactamases sont
transférées par transposons mais elles peuvent également se retrouver dans la composition
d'intégrons (23)
Les β-lactamases hydrolysent presque tous les β-lactames qui ont une liaison ester et amide
(source : ss lok)