La chromatographie est une technique permettant de séparer plusieurs constituants

d'un mélange en les faisant migrer, sur une phase immobile, par une phase liquide ou
gazeuse. Cet article présente les principaux types de chromatographie, avec leur
principe de séparation et leurs principales indications. Il propose, en dernière partie,
une comparaison de ces différentes techniques.
La chromatographie est une technique séparative analytique et/ou préparative. Elle
consiste à faire migrer les constituants à séparer sur une phase stationnaire immobile,
à l’aide d’une phase mobile, liquide ou gazeuse, de nature différente. Chaque molécule
sera plus ou moins rapidement entraînée selon son affinité pour, respectivement, la
phase stationnaire et la phase mobile, permettant la séparation des différents
constituants présents.

À partir de ce principe très général, il existe de très nombreux types de

chromatographie en fonction de la nature de la phase stationnaire, de la nature de la
phase mobile, et de la nature des interactions entre ces phases et les molécules à
purifier. En effet, selon les cas, les facteurs physico-chimiques qui interviennent
comme critère de séparation sont totalement différents : ce peut être la masse
moléculaire, la charge, l’hydrophilie/hydrophobicité, la structure tridimensionnelle,
etc. Évidemment, le choix est effectué au cas par cas en fonction des besoins. Il n’est
d’ailleurs pas rare d’utiliser successivement plusieurs types de chromatographies
différentes au cours d’une même purification.
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  A l’aide d’une pipette pasteur, déposer une microgoutte ( inutile d’en mettre
trop) les produits à analyser. Faire attention à laisser suffisamment d’espace
entre les différents produits déposés.

 Verser l’éluant dans la cuve.

 Tremper verticalement le papier dans l’éluant, en faisant bien attention à ce que

la ligne de dépôt soit au-dessus du niveau de l’éluant.

 Fermer la cuve et ne pas la déplacer.

 Observer attentivement.

 Quand l’éluant a fini de migrer, sortir le papier de la cuve et repérer le niveau

atteint par ce dernier (appelé front de l’éluant) à l'aide d'un crayon puis laissez
sécher le papier.

Expression des résultats :

1. Une chromatographie sert a la séparation et la purification des constitutions
2. La difference de migration est du a la polarisation des solvants tel que le solvant
qui passede h le plus important (hv1) est le plus elué donc il et le plus polaire
3. H=7cm
hv1=6,8cm
hv2=5,5cm
hB=5,6cm
hT= 6,9cm
4. On calcule, pour chaque constituant, sa « vitesse de déplacement » ou « rapport
frontal Rf »
5. d’après la relation suivante : Rf=h\H
• Rf1=hv1\H= 6,9\7=0,98
• Rf3=hv2\H=5,5\7=0,78
• Rf2=hB\H= 5,6\7=0,8
• Rf4=hT\H=6,9\7=0,98

6. Oui Rf depend de l’eluant plus le h est importante plus l’effet de solvant est
important plus Rf est grande
 Conclusion

Nous avons vu que la technique de CCM est une technique fiable et

rapide. Ceci explique son emploi très fréquent dans les laboratoires.
Notons cependant qu'il est parfois indispensable d'utiliser d'autres
méthodes de révélation.

Quels sont donc les autres techniques ?

I.