Lymphocyte

Lymphopoïèse
DR MIHOUBI
M A I T R E A S S I S TAN T E E N
H É M O BI O LO G I E T R A N S F U S I O N
SANGUINE
EHS BEN AKKNOUN

Introduction :
Immunité innée naturelle Immunité spécifique acquise

1. Rapide
1. Lente
2. Non spécifique
2. Spécifique d’un AG
3. Dirigée contre Ag du non
3. Distinction soi/non Soi
soi (no self)
(self/no self)
4. Non adaptative : invariante
4. Adaptative : renforce après
5. Pas de mémoire
un nouveau contact Ag
immunitaire
5. Mémoire immunitaire
6. Peau, muqueuses,
6. Lymphocytes
granulocytes,
compléments, Lym NK
 Définitions :

Les lymphocytes sont des leucocytes mononucléaires, tirant leur nom

de leur importance dans la lymphe. Ils sont mêlés aux cellules myéloïdes
dans le sang et la moelle.

Dans le sang, ces Cellules représentent environ 25% - 40 % des globules

blancs.

Définitions :

70% – 80% 07% – 18% 05% – 15%

Lym T Lym B Lym NK

▪ Thymus ▪ Cellule tueuse =
Natural Killer
▪ Amplifier ou de ▪ Bone marrow
freiner la réponse ▪ Cytotoxicité
▪ Immunité humorale
immune. naturelle
(production d’ Ac)
antitumorale et
▪ Immunité cellulaire antivirale
 Définitions :
La lymphopoïèse est l’ensemble des mécanismes qui concourent à la production des différents lymphocytes.

Lieu :

La Lymphopoïèse T débute dans la moelle osseuse et se termine dans le thymus.

Définitions :
La lymphopoïèse est l’ensemble des mécanismes qui concourent à la production des différents lymphocytes.

Lieu :

La lymphopoïèse B et NK a lieu dans le foie au cours de la vie fœtale, et dans la moelle osseuse tout au long de la vie adulte.
 Etude statique de la lymphopoïèse :
Thymus
CSH

Lym T LMPP

LMPP

CLP MO

Lymphoblaste Lym B

NK

Etude statique de la lymphopoïèse :

➢ Les Cellules souches hématopoïétiques :
Capacité d’autorenouvellement,
Ne sont pas différenciables morphologiquement,
Très faible représentation médullaire.

➢ Les progéniteurs :

Cellules engagées dans la différenciation vers une ou deux lignées cellulaires,

Faible représentation médullaire,
Non différenciable morphologiquement,
Acquisition des marqueurs membranaires CD spécifiques d’une lignée,
Progéniteurs de la ligné lymphoïde : LMPP : Progéniteur multipotent lymphoïde marqué et CLP : Progéniteur
lymphoïde commun.
 Etude statique de la lymphopoïèse :
Les Précurseurs :

Cellules engagées dans la différenciation vers une lignée cellulaire

Identifiables morphologiquement
Perte de la capacité d’auto- renouvellement

Etude statique de la lymphopoïèse :

Lymphoblaste :

▪ Cellule de 15 – 20 µm de diamètre
avec noyau central arrondi parfois
ovalaire, chromatine fine avec
présence de 1 ou 2 nucléole.
▪ Rapport nucléo-cytoplasmique
élevé
▪ Cytoplasme basophile réduit à une
bande périnucléaire.
 Etude statique de la lymphopoïèse :
Les petits Lym :

▪ Cellule de 7 à 9 µm de diamètre, ayant un 75% des lym du sang

noyau arrondi ou ovalaire, parfois
réniforme.
▪ La chromatine est dense, de couleur violet
foncé, composée de masses
chromatiniennes sombres plus ou moins
nettes.
▪ Le cytoplasme est peu étendu, il est le plus
souvent d’un seul coté du noyau, il est
clair ou légèrement basophile.

Etude statique de la lymphopoïèse :

Les grands Lym :

▪ Cellule de 9 à 15 µm de diamètre, noyau central ou 25% des lym du sang

légèrement excentré de couleur violet foncé avec
des masses chromatiniennes disposées en blocs
compacts entrecoupés de zones claires ,
▪ Cytoplasme est plus étendu que celui des petits
lym, il entoure complétement le noyau, il est clair,
ou légèrement basophile.
▪ Un petit nombre d’entre eux ont des grains
intracytoplasmiques azurophiles.
 Etude cinétique de la lymphopoïèse :
✓ Pro B : CD 19 – CD 22 – CD79,
✓ Pré B : CD 10
✓ B Immature : µ
intracytoplasmique
✓ B mature : Ig M de surface et Ig D

Etude cinétique de la lymphopoïèse :

➢ La sélection négative : les lym B Immatures produits entrent en contact avec les Ag du self :
ceux qui réagissent avec ces Ag sont inactivés (tolérance immune) = éliminer les lym B ayant
une réactivité contre les antigènes du soi.

➢ La moelle osseuse est donc à la fois le lieu de naissance et le cimetière de nombreux

lymphocytes B, non fonctionnels ou auto-réactifs !

➢ Les lymphocytes matures naïfs possèdent une IgM et une IgD de surface : ils sont
appelés naïfs car ils n’ont jamais rencontré l’Ag complémentaire de leur Ig de surface.

➢ Ces lymphocytes naïfs quittent la moelle osseuse vers la circulation sanguine puis
lymphatique à la recherche de leur Ag complémentaire.
 Etude cinétique de la lymphopoïèse :
Lym T = CD 3
Expression du TCR
Traduction du signal

Etude cinétique de la lymphopoïèse :

➢Un processus de maturation des thymocytes s’effectue qui implique une double sélection :

La sélection positive (éducation thymique) est un processus qui veille à ce que seules les cellules T dont les TCR possèdent
une affinité modérée pour les molécules HLA puissent continuer leur maturation .

Les cellules DP reconnaissant une molécule du CMH de classe I vont devenir simple positives (SP) CD8+ et constitueront la
population de lymphocyte T cytotoxiques.

Les cellules DP reconnaissant une molécule du CMH de classe II deviennent des SP CD4+, qui constitueront la population de
lymphocyte T auxiliaires.

La sélection négative les cellules qui possèdent une très forte ou très faible affinité pour les molécules HLA mourront par
apoptose.

➢Environ 2% des cellules T seulement survivront à cette double sélection,

➢Les lym matures CD4+ ou CD8+ qui sortent du thymus pour circuler dans le système périphérique (sang, organes
lymphoïdes).
 Etude cinétique de la lymphopoïèse :
Régulation:
➢Lymphopoïèse B :

Microenvironnement médullaire

L’engagement dans la lignée B est contrôlé par les facteurs de transcription E2A, Ebf et Pax5.

SCF et IL-3 .

l’IL-7 joue un rôle crucial dans la différenciation des cellules B.

Lymphopoïèse T :

Micro environnement thymique

CSF, thymuline, thymopoïetine, thymosine α1 et β4

Etude cinétique de la lymphopoïèse :

Moelle osseuse : 10% - 15% des lymphocytes : 10 % Lym B et 3 % lym T.

Rate : 70% – 90% des Lymphocytes : 40 % Lym B et 50 % Lym T.

Sang 20% – 40% des Lymphocytes : 18 % Lym B et 80 % Lym T.

 Etude physiologique : Rôles des lym
Lym T CD 4 +

Immunité des infection intracellulaire/ virales

Hypersensibilité

Infection extracellulaire,Antiparasite
activation des lym B

Recrutement des PN Immunité bactérienne

extracellulaires Antifongique

Freiner la réponse immune / auto immune

Etude physiologique : Rôles des lym

Lym T CD 8 +

Cytotoxicité directe sur les

cellules tumorales / infectées
Etude physiologique : Rôles des lym

Etude physiologique : Rôles des lym

 Exploration :
1-NFS
L’examen le plus simple permettant de quantifier les lymphocytes est la numération formule sanguine.
VR :
Adulte = 1.5 – 4 G/l. Lymphocytose Lymphopénie
Nouveau-né = 2 – 15 G/l.Leucémie lymphoïde chronique (adulte) SIDA

Enfant = 1.5 – 6.5 G/l. Infections Virales : mononucléose infectieuse, Lymphomes hodgkiniens
cytomégalovirus, hépatite, rubéole, primo-infection Poliomyélite
VIH,
Certaines tumeurs
Infections parasitaires : toxoplasmose
Maladies autoimmunes (lupus)
Infection Bactérienne : coqueluche (enfant)
Médicaments (cytotoxique).
Réactions immunitaires post infectieuses non
spécifiques

Exploration :
2 Le phénotypage lymphocytaire
Les différents lymphocytes peuvent être analysés de manière qualitative et quantitative par
cytométrie en flux.
Cette technique utilise des anticorps couplés à des fluorochromes qui reconnaissent les CD
exprimés à la membrane des lymphocytes.
Le fluorochrome excité par un laser émet une fluorescence.
Différents fluorochromes émettant des couleurs fluorescentes différentes sont utilisés pour
analyser 3 à 4 marqueurs membranaires.
L’exemple de l’infection par le VIH
Cette technique est largement utilisée chez les patients atteints du virus d’immunodéficience
acquise (VIH). Dans cette maladie, il existe une hyperlymphocytose portant sur les CD8 et
une déplétion en CD4 avec un rapport CD4 / CD8 inférieur à 1.
 Exploration :

3 Réponse vaccinale
La fonction des lymphocytes B peut être évaluée en déterminant
l’apparition des anticorps spécifiques résultant d’une immunisation
vaccinale, comme les anticorps contre le poliovirus, le
pneumocoque, l’Haemophilus, les toxines tétaniques et
diphtériques, ou des micro-organismes ubiquitaires comme Candida.

Exploration :

4 Différenciation et prolifération in vitro

✓ Les lym B peuvent être cultivés en présence de stimulants de la prolifération et
de la production des Ig. La réponse des lymphocytes B est analysée par le
dosage des Ig dans le surnageant de culture ou par la mesure de la prolifération
lymphocytaire.
✓ Pour analyser la coopération lymphocytaire T-B, on peut effectuer des co-
cultures T/B et analyser le dosage des Ig dans les surnageant,
 Exploration :
5 Les tests lymphocytaires fonctionnels :
Des tests fonctionnels sont actuellement disponibles pour évaluer dans le sang
périphérique des patients la présence de lymphocytes T spécifiques d’un
antigène.
Par exemple : dosage la production d‘interféron gamma par les lymphocytes T
extraits du sang périphérique d’une personne précédemment exposée à la
tuberculose, lorsqu’ils sont mis en contact avec des antigènes de Mycobacterium
tuberculosis.

Exploration :

6 Etude des Ig sérique :

✓ L’électrophorèse des protéines sériques ou urinaires (EPP)
✓ L’immunofixation (IFIX) des protéines sériques ou urinaires permet de
caractériser de manière rapide
la nature d’une immunoglobuline monoclonale détectée par EPP
✓ Le dosage des immunoglobulines sériques
Merci pour votre attention