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POXVIRUS

Famille: Poxviridae
Genre: Orthopoxvirus
Sous-famille: Chordopoxvirinae: infecte lhomme,
animaux domestiques et sauvages;
Sous-famille: Entomopoxvirinae: infecte diffrents
insectes.

Gnralits des Poxviridae


8 genres ( tab. 1).
Taille: 300-350 x 200-270 nm
Gnome: ADN 2 brins, linaire.
Rplication dans le cytoplasme
Nuclocapside ou core: biconcave, entoure de 2 corps
latraux, de fonction inconnue.
2 enveloppes:
Externe, couverte de tubules
Interne, entourant la capside
Infection: gnralement cytolytique, rarement
transformante (yatapoxvirus).
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Morphologie des virus


Le virion a la forme dune petite brique ou dune petite
savonnette de 300-350 x 200-270 nm (fig. 3).
En microscopie lectronique (ME), par coloration
ngative, la surface apparat couverte dun rseau
entrecrois de tubules, mieux dfinis pour les
Parapoxvirus et les Molluscipoxvirus (fig.1) que pour les
Orthopoxvirus (fig.2).

Structure antignique
Le gnome: ADN linaire, bicatnaire, termin aux 2
extrmits par des boucles en pingles cheveux,
elles-mmes prcdes de squences rptes
inverses ou ITR (fig.4).
Le gnome des principaux poxvirus (variole majeure,
alastrim, vaccine, ectromlie, fowlpox) comporte
environ 200 gnes.
Les gnes essentiels la rplication sont localiss
dans la partie centrale du gnome, tandis que les
gnes non essentiels la rplication se trouvent aux
extrmits.

Ces derniers correspondent des gnes codant


des protines homologues de cytokines
(virokines) ou de rcepteurs de cytokines,
dinterfrons, dinterleukines, de chimiokines et
de facteurs de croissance .
Ces gnes sont probablement dorigine
cellulaire et ils auraient t capturs par les
poxvirus au cours de leur longue co-volution
avec leurs htes naturels.

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Au moins 10 enzymes sont prsentes dans le


virion; elles interviennent dans la synthse et la
rplication de lADN.
La structure antignique des poxvirus est trs
complexe. Les virus dun mme genre sont
apparents gntiquement et antigniquement,
ce qui permet de vacciner contre une maladie
au moyen dun virus antigniquement proche
(ex. variole/vaccine).

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Multiplication des virus


Animaux sensibles: la membrane chorioallantodienne (MCA) de loeuf de poule
embryonn ag de 12 jours est trs sensible
linoculation des Orthopoxvirus.
Ils y provoquent lapparition de vsicules (ou
pox) de taille, daspect et de couleur variables.
Les vsicules induites par le virus varioliques
sont petites, blanchtres, opaques, bombes,
visibles ds le 3 jour, alors que celles du virus
vaccinal sont trs larges, blanches, opaques, et
celles du monkey-pox, hmorragiques.
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Les cellules infectes contiennent des inclusions


intra-cytoplasmiques, les corps de Guarnieri.
De plus, la formation des vsicules sur la MCA
est limite par la temprature dincubation des
oeufs: 40.5o C (virus vaccinal), 39o C (virus du
monkeypox), 38.5o C (virus de lalastrim).
Le virus vaccinal, inocul par scarification sur la
corne du lapin (test de Paul), provoque une
kratite purulente en quelques jours, alors que
le virus de la variole en est incapable.

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Dune manire gnrale, le virus variolique est


moins virulent pour les animaux de laboratoire
(example: souriceau nouveau-n, singes) que le
virus vaccinal.
La mthode classique qui tait utilise pour
rcolter le vaccin antivariolique, consistait
racler les vsicules purulentes provoques par
le virus vaccinal sur le flanc dune gnisse.

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Cultures cellulaires: les Orthopoxvirus peuvent


tre cultivs dans une grande varit de
cellules: cellules primaires de rein humain, de
rein de singe, fibroblastes embryonnaires de
poulet et cellules de ligne HeLa, KB, Vero,
MRC-5, etc.
LECP se traduit par des foyers de ncrose plus
ou moins extensifs, apparaissant plus
tardivement pour le virus variolique (jusqu 5-6
jours) que pour le virus vaccinal (3 jours).

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En fibroblastes diplodes humains MRC-5, le


virus vaccinal induit des foyers dissmins de
ncrose cellulaire, sans caractre spcifique.
Si lon ajoute des globules rouges de poulet, on
met en vidence un phnomne
dhmadsorption (HAD) fig.5.
Lhmagglutinine responsable a la particularit
dtre libre, indpendante du virion.
Cycle rplicatif: voyons le cycle rplicatif du virus
vaccinal (fig.6).

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Figure 6. Cycle rplicatif du virus de la vaccine.

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Cycle rplicatif du virus de la vaccine


Le virion, qui contient lADN gnomique, des
enzymes et des facteurs de transcription,
sattache (1) aux cellules. Il fusionne avec la
membrane pricellulaire, librant le core dans le
cytoplasme (2). A lintrieur du core, sur lADN
gnomique sont transcrits des ARNm prcoces
traduits en une grande varit de protines : des
facteurs de croissance, des protines des
dfenses immunitaires, des enzymes, ainsi que
des facteurs ncessaires la rplication de
lADN et la transcription intermdiaire (3).

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La dcapsidation survient (4) et lADN est


rpliqu pour former des molcules
intermdiaires de PM lev (5).
Les gnes intermdiaires des ADN rpliqus
sont transcrits en ARNm, eux-mme traduits
pour constituer des facteurs de transcription
tardifs (6).
Les gnes tardifs sont transcrits en ARNm, euxmme traduits en protines structurales du
virion, en enzymes, et en facteurs tardifs de
transcription (7).

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Lassemblage commence avec la formation de


structures membranaires lches (8).
Les intermdiaires de lADN sont rduits en
unit gnomiques et celles-ci empaquetes
dans des virions immatures (9), lesquels
subissent ensuite une maturation (10).
Les virions matures sont envelopps par des
membranes modifies de lappareil de Golgi,
puis transports la priphrie de la cellule(11).
La fusion des virions envelopps avec la
membrane pricellulaire provoque la libration
des virions dans le milieu extracellulaire (12).
la rplication virale se droule entirement dans
le cytoplasme
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Pouvoir pathogne chez lhomme


Citer les infections provoques par les poxviridae: la variole,
la vaccine, monkeypox, cowpox, nodule du trayeur et orf,
infections Tanapoxvirus.
LA VARIOLE
Priode dincubation: 6 -16 jours;
Le dbut est brutal, avec les symptmes:
Temprature leve,
Malaise gnral,
Des cphales et des lombalgies.
Puis un exanthme apparat entre le 2 et 4 jour, et
volue en 7 10 jours:
Les macules initiales donnent des papules, puis des
vsicules et des pustules (fig.7).
Celles-ci se transforment enfin en crotes qui tombent en
2 3 semaines, laissant des cicatrices indlbiles.
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Les lsions suivent le mme stade volutif et


dbutent par la face, la paume des mains et la
plante des pieds, puis stendent de faon
centrifuge.

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Il existe plusieurs formes cliniques, dont


les formes fulminante et hmorragique,
sont plus graves. La surinfection
bactrienne des lsions cutanes est
habituelle et latteinte de la corne est
frquemment suivie de ccit.
Les malades qui survivent sont souvent
dfigurs vie par des cicatrices
disgracieuses.

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Il existe 2 formes pidmiologiques de la variole.


La variole majeure est mortelle par oedme aigu
du poumon.
Dans la variole mineure ou alastrim, la mortalit
ne dpasse pas 1%. Ces 2 aspects relvent
cependant des mmes mesures de prophylaxie.
Le malade reste contagieux depuis le 1er jour de
lruption jusqu la chute de la dernire crote.

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Diagnostic de laboratoire
Indications: elles sont diffrentes suivant quil sagit
des infections Orthopoxvirus, ou daffections
mineures, purement dermatologiques.
Techniques:
Infections Orthopoxvirus: les prlvements sont
essentiellement cutans. Au stade vsiculeux ou
pustuleux, le liquide pathologique servira
prparer des frottis pour immuno-fluorescence
(IF) ou des grilles pour la microscopie
lectronique.

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Au stade des crotes, celles-ci seront dtaches


la pince strile. Les ulcrations seront
couvillonnes.
On peut isoler le virus variolique dun culot
urinaire, de la salive ou des larmes.
Si lon souponne une variole, les prlvements
devront imprativement faire lobjet dun double
emballage, soigneusement tiquet et renseign,
avant son envoi un laboratoire. Le prlvement
na pas besoin de rfrigrateur.
La PCR en temps rel (RT-PCR) est utilise pour
confirmer la variole.
Le diagnostic molculaire permettra
lidentification du poxvirus en cause.

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Problmes dermatologiques mineurs: les virus du


nodule du trayeur et de lorf ncssitent pour leur
isolement des cellules cultives dorigine bovine.
LECP y apparat entre le 6 et le 12 jour. On utilise
la microscopie lectronique pour faire lidentification.
Le virus du molluscum contagiosum est trs difficile
isoler en cultures cellulaires et il ny a pas danimal de
laboratoire sensible. On utilise la microscopie lectronique
ou la PCR pour faire le diagnostic biologique.

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Traitement curatif
On utilise les antiviraux contre les Orthopoxvirus,
en particulier des composs du plomb et des
inhibiteurs des mthyltransfrases virales, les
nuclosides carbocycliques.
Le cidofovir ou Vistide, inhibe in vitro la
multiplication du virus variolique. Mais le
maniement nest pas ais et il est nphrotoxique.
Il doit tre prpar avant usage et administr en
perfusion vitesse constante, pendant une heure.
Il nest pas utilisable en prophylaxie de masse.

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La ribavirine (Virazole) par voie orale et active


in vitro (pour souris/cowpoxvirus), prsente les
mmes inconvnients.
Cependant, le cidofovir en gel dermique 1% ou
3% a t utilis dans le traitement du molluscum
contagiosum habituel. La voie i.v. doit tre
utilise chez des malades atteints du SIDA ou
dautres formes dimmunodpression svre.

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Prvention
dpistage rapide et isolement des malades,
revaccination autour (et dans) les nouveaux
foyers.
LOMS, Organisation Mondiale de la Sant,
encourage la prparation de nouveaux types de
vaccins vivant produit en cultures cellulaires et
administr au moyen dune aiguille bifurque.
Les poxvirus constituent un matriel de choix
pour construire des vecteurs exprimant des
protines dintrt mdical, notamment des
vaccins.
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