LIGNEE

THROMBOCYTAIRE
 I-INTRODUCTION
1. DEFINITION

THROMBOPOIÈSE:

production et la mise en circulation des

plaquettes sanguine ou thrombocytes à
partir des précurseurs medullaires:
mégacaryocte

Elle se localise au niveau de la moelle

osseuse (MO )
 I-INTRODUCTION
1. DEFINITION:

 Les mégacaryocytes sont les cellules nuclés les

plus grandes ( 10 – 65 µm de diamétre), et les
plus rares de la moelle osseuse.( 0,5 % );

 Les plaquettes sont des cellules nucléés :

Rôle important dans les phénomènes

d’hémostase
 I-INTRODUCTION
2. ASPECTS DE LA LIGNÉE:

 PROGENITEURS
 PRECURSEURS
 LIBERATION DES PLAQUETTES
 REGULATION
 EXPLORATION ET DESORDRES
 II-Etape de différentiation de
la lignée mégacaryocytaire

les cellules de lignée mégacaryocytaire

proviennent de la cellule souche pluripotente:

CFU – S
 II-Etape de différentiation de
la lignée mégacaryocytaire

• La maturation des mégacaryocytes se fait

par endomitose : dédoublement succéssif
de l’ADN sans division cytoplasmique

Formation des cellules géantes

polyploïdes de 4 à 64 N Chromosomes avec
un moyenne de 16 N.
 II-Etape de différentiation de
la lignée mégacaryocytaire

Au cours de la maturation , on assiste à une

lobulation et à une condensation progresse du
noyau .

Parallèlement à cette ploïdie, se fait la

maturation du cytoplasme du mégacaryocyte qui:
 II-Etape de différentiation de
la lignée mégacaryocytaire
- Augmentation de la taille
- Passe de la basophilie à l’acidophilie
- Formation des granules denses, granules alpha,
lysosomes, système tubulaire dense
- Apparition des GP de surface de la membrane
GP IIb, GP IIIa
- Synthèse de la PPO, à partir du stade de
mégacaryocyte
 III-PROGENITEURS
1. BFU-MK ( Burst forming unit
Megakaryocyte)
 Génère en 21 jours de culture des colonies de
plus 50 MK

 80 % en phase G 0,

 Potentiel prolifératif important

 CD 34 +, HLA DR +
 III-PROGENITEURS
2. CFU-MK ( Colony forming unit
Megakaryocyte)
 Génère en 7 jours de culture des colonies de 4 à 32 MK

 Plus de 70 % en phase G 0,

 Potentiel prolifératif restreint

 CD 34 +, HLA DR +

 10 à 20 / 10 5 cellules médullaires
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
sont:

 le promégacaryoblaste et

les cellules morphologiquement

reconnaissables
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
1. Promégacaryoblaste:
cellule non reconnu morphologiquement sur le
myélogramme.
 15 à 18 µm
 Rapport N/C élevé
 Noyau sphérique, nucléolé
 Perte quasi totale du pouvoir prolifératif
 Début de l’endomitose ( polyploidisation): 2 à 8 N
 CD 34 +, HLA DR+, peroxydase plaquettaire (PPO) +
 CD 41-, ( GP IIb/ IIIa) +-
 20 à 30 / 10 5 cellules médullaires
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
2. cellules reconnaisables morphologiquement

. 4 stades de maturation nucléocytopasmique sans

division:

 Mégacaryoblaste
 Mégacaryocyte basophile
 Mégacaryocyte granuleux
 Mégacaryocyte plaquettogène

. 0,5 % des élements médullaires

 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES

. Marqueurs:

 PPO
 CD 41
 CD 42 ( GP Ib)
 CD 36 ( GP IV)
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
a) Mégacaryoblaste: 20 % de la lignée
Frottis médullaire :MGG; Microscopie optique

 25 à 30 µm
 Rapport N/C élevé
 Noyau non segmenté
 Chromatine à trame grossière; 1 à 2 nucléoles
 Cytoplasme basophile
 Absence de granulations
 CD 34 -, HLA DR faible
 Mégacaryocyte de ploïdie variable: 2N à 64 N
2/3 à 16 N , ¼ à 32 N

-Chacun de ces stades subira une maturation cytoplasmique

Aspect général :
taille 25 à 30 µm
forme irrégulière

Noyau :
taille : N/P >> 1
forme : ovalaire parfois déjà binucléé
aspect de la chromatine : légère,
nucléolée, grossière et filamenteuse

Cytoplasme :
affinité basophile
sans granulations

Mégacaryoblaste
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
b) Mégacaryocyte basophile: 25 % de la lignée

 30 à 40 µm
 Rapport N/C moins élevé
 Noyau non segmenté
 Chromatine grossière; pas de nucléoles visible
 Cytoplasme plus abondant et moins basophile
 Granulations azurophiles ( futures granulations
plaquettaires)
Aspect général :
taille 50 µm
forme irrégulière

Noyau :
taille : N/P > 1
forme : polynucléé (noyaux ovalaires)
aspect de la chromatine : moyennement
condensée, grossière et filamenteuse

Cytoplasme :
affinité basophile
rares granulations azurophiles près du
noyau

Mégacaryocyte basophile
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
• c) Mégacaryocyte granuleux: 55 % de la
lignée

 40 à 60 µm
 Rapport N/C faible
 Noyau polylobé
 Chromatine dense et irrégulière
 Cytoplasme acidophile
 nombreuses granulations azurophiles ; à localisation plus
centrale.
- Nombreuses membranes de démarcation délimitant les
futures membranes plaquettaires avec les granules
Aspect général :
taille 50 à 80 µm
forme irrégulière

Noyau :
taille : N/P inf à 1
forme : multinucléé
aspect de la chromatine : condensée en gros
filaments

Cytoplasme :
affinité acidophile
très nombreuses granulations dispersées

Mégacaryocyte granuleux
 IV-PRECURSEURS
MEGACARYOCYTAIRES
• d) Mégacaryocyte plaquettogène: 5 % de
la lignée

 40 à 60 µm
 Noyau polylobé, picnotique
 Cytoplasme très acidophile avec processus de
fragmentation ( émission des pseudopodes)
 Granulations azurophiles groupées en amas
( 10 à 12 / amas)
Aspect général :
taille allant jusqu'à 100 ou 150 µm
forme irrégulière

Noyau :
taille : N/P < 1
forme : multinucléée
aspect de la chromatine : très
condensée, picnotique

Cytoplasme :
affinité acidophile clair
cloisonnement des granulations formant
les futures plaquettes (surtout en amas
organisés à la périphérie de la cellule)

Mégacaryocyte
thrombocytogéne
 e) Plaquettes: Eléments circulants
Frottis coloré au MGG: MO

Cellule anucléé , discoïde

Zone centrale: Granulomère

Zone périphérique: Hyalomère
Aspect général :

taille 1 à 3 µm (plus grosses sur anticoagulant)

forme irrégulière

Cytoplasme :

affinité basophile clair

granulations nombreuses, moyennes, dispersées et azurophiles
e) Plaquettes: Microscopie électronique

1. Membrane plaquettaire:

- Phospholipide
- GP membranaires: Rôle
important dans l’hémostase:
GP IB, GP IIb-IIIa, GP V
2. constituants internes:

a)- Actomyosine
b)- Microtibules et filaments
c)- Système membranaires:
SCO: Système caniculaire ouvert
STD: Système tubulaire dense
 d) les granules:

*les granules denses:

ATP, Adrénaline et sérotonine

*Les granules alpha:

Facteurs de la coagulation: Fibrinogène, V , VIII
Facteurs spécifiques de la plaquette:
PF3, PF4, TGF B, PDG F, Fact plaquettaire
mitogène
*Les granules lysosomiaux:

Très riche en enzyme:

Hydrolase acide
collagénase
Phosphatase acide
aryl sulfatase
Protéase….
 Microscopie Electronique

Noyau : Maturation

- Lobulation
- Condensation de la chromatine
- Augmentation de la ploïdie
 Microscopie Electronique
- RE
- Appareil de Golgi
- Apparition progressive des membranes de
démarcation:
Cytoplasme

- Granules alpha et granules denses

- lysosomes
- Péroxysomes
- GP membranaires: GP II b; GP III a
 V- FORMATION DES
PLAQUETTES
1. Site de libération des plaquettes:

- Projections des pseudopodes mégacaryocytaires au

travers de la monocouche endothéliale du sinus médullaire
et libération des proplaquettes puis des plaquettes sous
l’action des forces de cisaillement ( +++ ).

- Fragmentation au niveau de la microcirculation pulmonaire

( 10 à 15 % )

- Rupture médullaire des mégacaryocytes.

 V- FORMATION DES
PLAQUETTES
2. Cinétique:

• La durée du transit médullaire entre mégacaryoblaste et

PLT est de 8 à 12 jours ( Thymidine tritiée)

• 1 mégacaryocyte produit 2 000 à 3 000 Plaquettes

• leur durée est de 8 J

( Chrome 51, Indium 111)

• 30 % des PLT sont dans la rate.

 V- FORMATION DES
PLAQUETTES

Deux propriétés majeurs des plaquettes:

Adhésion et agrégation

 Hémostase
 Augmentation de la réaction inflammatoire
 Activation de complexes immuns
 Dissémination métastatiques
 VI- RÉGULATION
1. Régulation positive:
a)Thrombopoiètine: TPO

 Structure:
• Gène : 3q26-27,
• Protéine hydrophobe de PM: 35 – 38 Kd
• Protéine mature:(332aa) en 2 domaines:

 Domaine actif, homologie avec l’EPO

 Domaine glycosylé, indispensable à la sécrétion de la
TPO
 VI- RÉGULATION
• Synthèse:

- Foie +++,
- Cellules stromales, rein, muscles, testicules et
cerveau
- Production : inversement proportionnelle à

*la masse plaquettaire circulante et

*la richesse mégacaryocytaire
 VI- RÉGULATION
TPO:

 Prolifération des progéniteurs mégacaryocytaires

( BFU-MK, CFU- MK)

 Croissance et différentiation des mégacaryocytes

 Augmentation de la production des plaquettes.

 VI- RÉGULATION
b) IL 3, IL 6, GM-CSF, EPO:

Favorisent :

 la prolifération et
 la maturation des mégacaryocytes
 VI- RÉGULATION
2. Régulation négative:

 TGFb1: Transforming growth factor: effet direct important sur

les Progéniteurs MK

 PF4 : ( Chimiokine): effet inhibiteur des CFU-MK

 thrombine: effet inhibiteur sur la formation des proplaquettes.

 IFNa: rôle mineur

Inhibent la prolifération et la maturation des progéniteurs MK

Inhibent la maturation des mégacaryocytes

 VI- RÉGULATION

3. Rôle du microenvironnement et des

facteurs de transcription:
 VII- EXPLORATION
Numération des PLT:
Manuelle ou sur un automate:

 toujours suivie d’un contrôle sur frottis sanguin pour

éliminer les fausses thrombopénies

 Liée à la présence d’amas plaquettaire

 Au besoin refaire la numération sur tube citraté

 Élimine les fausses thrombopénies par agglutination des

PLT in vitro.
 VII- EXPLORATION
1. Hémogramme et morphologie
a)Taux de PLT: 150 à 400 giga/l
b) La coloration MGG permet d’apprecier:

- la morphologie (taille, et dégranulations des PLT)

- De contrôler les fausses thrombopénies

c) thrombopénies induites par l’héparine

d) Satellitisme plaquettaire (assez rare,
1/10 000),avec formation des « rosettes » plaquettaires
autour d’un PNN, visible sur frottis.
 VII- EXPLORATION
2. Myélogramme:

Réalisé en cas de thrombopénie réelle

L’étude cytologique de la moelle osseuse ( MO )

permet:
 VII- EXPLORATION
1. Apprécier la richesse de la MO en MK:
*Si MO riche: Thrombopénie périphérique
*Si MO pauvre: Thrombopénie centrale
( aplasie ou envahissement)

2. Etude qualitative des mégacaryocytes pour

apprécier leur maturation:

- Présence ou non de mégacaryocytes

thrombocytogéne
 VII- EXPLORATION
3. Biopsie de la moelle osseuse: BOM

Donne une estimation plus précise sur la présence

d’amas MK.

4. Ultrastructure en microscopie électronique:

- PPO
- Granules
- Membranes
- Cytoplasme
 VII- EXPLORATION
5. Etude in vitro des fonctions plaquettaires
a)Rôle dans l’hémostase primaire:

- Adhésion plaquettaire
- changement de forme
- Réaction de libération
- Agrégation plaquettaire
- Rétraction du caillot
 VII- EXPLORATION
b) Rôle dans la coagulation:

Action procoagulante par le PF3 qui

constitue le support phospholipidique:

Activation des facteurs de la coagulation

 VII- EXPLORATION
c) Rôle dans la réaction inflammatoire:

- Dégranulations des plaquettes en présence des :

bactéries
Complexes immuns
virus
- Libération de leur contenu granulaire

d) Rôle majeur dans la thrombose artérielle et

dans l’instalation de l’athérôme
 VII- EXPLORATION

6. Recherche des Ac héparine- PF4

7. Culture des progéniteurs

8. Cytométrie en flux en hématologie

moléculaire
 VIII- Désordres
Valeurs normales:
150 000 - 400 000 / MM 3

- Toute diminution : Thrombopénie

- Toute augmentation: Thrombocytose