Thrombopoïèse et

sa régulation

Pr Agrégé Moussa Seck

Service d’Hématologie UCAD
 Objectifs
1. Décrire les différentes étapes de la thrombopoïèse

2. Décrire les aspects morphologiques des plaquettes

3. Enumérer les différentes fonctions des plaquettes

4. Citer les examens d’exploration des plaquettes

 Plan
• Introduction
I. Les étapes de la maturation des mégacaryocytes
II. Les marqueurs de la lignée mégacaryocytaire
III. La régulation
IV. Les plaquettes
V. Explorations
VI. Pathologies
• Conclusion
 Introduction
1 – Définition:
Ensemble des étapes de multiplication et de
maturation cellulaires conduisant de la cellule
souche multipotente au mégacaryoblaste puis au
thrombocyte (plaquette) qui sont les cellules les plus
petites du sang
 Introduction
2 – Intérêt
– Les mégacaryocytes = cellules les plus rares
(0,05%) et les plus volumineuses (30 à 60 µ) de la
moelle
– Les plaquettes dérivent de la maturation
cytoplasmique des mégacaryocytes
– Anomalies de la thrombopoïèse => anomalies des
plaquettes => anomalies de l’hémostase
– Endomitose = endoreduplication
– Un mégacaryocyte => 2000 à 5000 plaquettes
 I – Les étapes de la maturation
1 – Progéniteurs : CSH

CSM

Progéniteur bipotent BFUE/MK

Progéniteurs précoces BFU MK

Progéniteurs tardifs CFUMK

Caractéristiques : non morphologiquement
reconnaissables
mise en évidence par culture
 I – Les étapes de la maturation
2 – Précurseurs
• Promégacaryoblaste = 10% des MK
Cellule transitionnelle <= CFU-MK
Prolifération +
Maturation +++
Non morphologiquement reconnaissable
 I – Les étapes de la maturation
• Mégacaryoblaste:
– Ovalaire ou polygonale
– Diamètre : 20µ - 30µ
– Noyau irrégulier ovalaire ou trapézoïdal
– Chromatine violacée forme de grosses masses irrégulières
– 2 – 4 nucléoles
– Cytoplasme abondant très basophile
homogène gruméleux
 I – Les étapes de la maturation
• Mégacaryocyte basophile:
– Cellule irrégulière ou ovalaire
– Noyau assez volumineux irrégulier encoché
échancré replié sur lui-même
– Chromatine épaisse condensée en blocs violacés
– Pas de nucléoles
– Cytoplasme abondant basophile
grumeleux
– Granulations azurophiles
 I – Les étapes de la maturation
• Mégacaryocyte granuleux:
– Cellule ovalaire ou irrégulière
– 50µ - 100µ
– Noyaux assez volumineux
irrégulier avec des lobes de taille inégale
– Chromatine épaisse condensé en bloc violacé
– Cytoplasme abondant, zone périphérique incolore
– Grains azurophiles ou rouge violacés
 I – Les étapes de la maturation
• Mégacaryocyte plaquettogène ou
thrombocytogène
– Cellule ovalaire très irrégulière
– 50 – 120µ
– Noyau irrégulier picnotique
– Masse chromatinienne dense
– Cytoplasme abondant rose
– Granulation rouge violacées regroupées en amas
de 10 à 12 granulations
 II – Les marqueurs de la lignée
mégacaryocytaire

• BFU MK : CD34, CD 117

• CFU MK: HLA DR, CD33, CD34
• Mégacaryoblastes: peroxydase plaquettaire
CD41(Gp IIb IIIa)
• Mégacaryocytes: Gp IIb IIIa
Gp Ib IX V
 III – Les plaquettes
• Cellules anucléés discoïdes
– fragmentation cytoplasmique des
mégacaryocytes
– Taux normal (NFS) : 150 à 450 G/L
– 30% séquestré dans la rate
– Durée de vie = 7 à 10 jours
– Fonction majeure: Hémostase primaire
 1 - Morphologie des plaquettes

Microscopie optique:
- frottis coloré au MGG
- Cellules arrondies ou ovalaires
- 2 à 5µ de diamètre
- Zone centrale contient des granulations =
chromomère ou granulomère
- Zone périphérique hyaline homogène = Hyalomère
- VPM (volume moyen plaquettaire) : 7 – 12 fl
 1 - Morphologie des plaquettes
Microscopie en contraste de phase :
- Cellule discoïde émet des prolongements
Microscopie électronique :
• Le cytosquelette comporte:
– Des microtubules : forme discoïde à la plaquette
– Des microfilaments d’actine collés à la membrane et
pénétrant dans le cytoplasme => contraction,
dégranulation, rétraction, émission de pseudopodes
– Des filaments intermédiaires: vimentine
 1 - Morphologie des plaquettes

La membrane plaquettaire:

– structure trilaminaire classique :
• 2 feuillets lipidiques externe et interne de composition
différente
• une couche riche en glycoprotéines
– un système canaliculaire connecté à la surface
 1 - Morphologie des plaquettes
Les glycoprotéines (GP):
• Plus de 40 molécules protéiques ont été
identifiées à la surface plaquettaire
• GPIb-IX-V et GPIIb-IIIa les plus importantes.

Les allo antigènes spécifiquement plaquettaires :

HPA 1 à HPA 13:
• Les plus importants sont HPA 1a et 1b (PLA1 et
PLA2)
 1 - Morphologie des plaquettes
Les granules : plusieurs populations
distinctes
• Lors de l’activation plaquettaire ces
granulations vont s’unir à la membrane
externe
• ou celle du système connecté en surface
→ leur membrane s’unit à celle de la plaque e
et leur contenu se déverse à l’extérieur
 1 - Morphologie des plaquettes
Les granules α: prédominent et contiennent :
– β thromboglobuline
– facteur 4 plaquettaire
– Facteur Von Willebrand
– Fibrinogène
– Thrombospondine
Les granules denses: contiennent : ATP et ADP,
Ca++, sérotonine
 1 - Morphologie des plaquettes
Les Lysosomes:
• arrondies (0,2 μm de diamètre)
• Contenant des enzymes : microperoxysomes
 2 – Les Fonctions plaquettaires
• Hémostase primaire et coagulation: (cf cours)
• Inflammation:
– majore la réaction inflammatoire :
- par la sécrétion de facteurs de perméabilité
vasculaire
- leur aptitude à promouvoir le chimiotactisme des
polynucléaires neutrophiles (P-sélectine)
- la synthèse des prostaglandines
 IV - Régulation
IV-1 – Régulation positive:
• La thrombopoïétine (TPO):
– Facteur de croissance le plus important de la
lignée mais non exclusif de la mégacaryopoïèse.
– spécifique de la lignée mégacaryocyto-
plaquettaire
– Sites de production : foie++, rein++, stroma
médullaire +/-, les poumons +/-)
 La thrombopoïétine (TPO)
• Site d’action : elle agit à tous les niveaux de la
mégacaryopoïèse:
– différenciation des progéniteurs
pluripotents
– croissance des progéniteurs primitifs
– croissance et différenciation des MK,
– augmente la production des plaquettes in
vivo
 IV – Régulation
• Autres cytokines
– IL 11: action parallèle à la TPO
– IL3, GM CSF, LIF : stade précoce
– IL 6 : mégacaryocytes+++
– EPO +/-
 IV - Régulation
III.2 – Régulation négative:

– Non Spécifique : IFN, TNF

– Spécifique: PDGF, TGF, βTG, PF4,
thrombospondine
 V - Exploration
1 – Exploration des mégacaryocytes:
• Culture cellulaire
• Médullogramme
• Immunomarquage
 V - Exploration
2 – Exploration des plaquettes:
• Hémogramme, étude de la morphologie des
plaquettes au frottis sanguin
• Fonctions plaquettaires:
– Test d’adhésion plaquettaire
– Temps d’occlusion in vitro
– Techniques d’agrégation plaquettaire in vitro
• Exploration des glycoprotéines plaquettaires:
Cytométrie en flux
 VI - Pathologies
1 – Pathologie par excès:
– Thrombocytose réactionnelle
– Thrombocytose maligne (Thrombocytémie
essentielle)
2 – Pathologie par défaut:
– Thrombopénie périphérique
– Thrombopénie centrale