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PRIX
QUALITE
& SERVICES
Biomaghreb
SOMMAIRE
PAGES
INDEX ALPHABETIQUE
BIOCHIMIE / ELECTROLYTES
8 - 13
BIOCHIMIE / ENZYMES
16 - 23
BIOCHIMIE / SUBSTRATS
26 - 39
HEMATOLOGIE / HEMOSTASE
42 - 47
IMMUNOHEMATOLOGIE / HEMATOLOGIE
50 - 54
56 - 63
Biomaghreb
INDEX
ALPHABETIQUE
DESIGNATION
Rf
ACIDE URIQUE
ALBUMINE
ALPHA-AMYLASE
ANTICORPS MONOCLONAL anti-A
ANTICORPS MONOCLONAL anti-AB
ANTICORPS MONOCLONAL anti-B
ANTICORPS MONOCLONAL anti- D
ANTIGLOBULINE POLYVALENTE
ASO LATEX
AUTO FIBRI 1
AUTO FIBRI 2
20031
30111
30131
30121
30141
30181
40037
30033
30034
26
27
16
50
51
52
53
54
56
42
43
BILIRUBINE DIRECTE
BILIRUBINE TOTALE
BILIRUBINE TOTALE ET DIRECTE
20102
20103
20101
28
29
30
CALCIUM
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
CAPACITE TOTALE DE FIXATION
DU FER
20051
201010
31
20062
20091
Page
Biomaghreb
DESIGNATION
Rf
Page
CEPHALINE KAOLIN
CHLORURE DE CALCIUM
CHOLESTEROL
CHOLESTEROL-HDL
CREATININE
CREATINE KINASE
CRP LATEX
30021
30051
20111
20113
20151
20006
40034
44
44
32
33
34
17
57
40036
20061
30031
58
10
45
HEMOGLOBINE
30041
46
GAMMA GT
GLUCOSE
GOT- ASAT
GPT-ALAT
20021
20121
20042
20046
18
35
19
20
LDH
20011
21
MAGNESIUM
20071
11
Biomaghreb
DESIGNATION
Rf
Page
20015
20181
20083
20161
22
12
13
36
STREPTOLYSINE ETALONNEE
40022
59
THROMBOPLASTINE
TPHA
TRANSAMINASES COLOR
TRIGLYCERIDES
30011
40011
20041
20131
47
61
23
37
UCG
UREE COLOR
UREE UV
40032
20141
20142
62
38
39
Biomaghreb
BIOCHIMIE
ELECTROLYTES
Page
CALCIUM
Rf. 20051
Rf. 20054
2 x 160 ml
2 x 125 ml
50 ractions
100 ractions
FER FERROZINE
Rf. 20061
Rf. 20064
2 x 100 ml
5 x 100 ml
10
Rf. 20071
Rf. 20074
2 x 160 ml
2 x 125 ml
11
MAGNESIUM
100 tests
200 tests
250 tests
12
Rf. 20083
320 tests
13
PHOSPHORE UV
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20051, (320 Tests)
R1 : 2 x 80ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 4 ml
CALCIUM
Mthode colorimtrique
CALCUL
PRINCIPE
Le calcium forme avec le complexant crsolphtaline en
milieu alcalin un compos color en violet dont lintensit
est proportionnelle la concentration en calcium.
D.O. Echantillon
xn
REACTIFS
Ractif 1
Tampon Alcalin
n = Valeur du standard
D.O. Standard
mg/l
mg/dl
mmol/l
500 mmol/l
n = 100
n = 10
n = 2,5
69 mmol/l
Rsctif 3
Standard
Standard calcium
10mg/dl
100 mg/l
2.5 mmol/l
LINEARITE
La mthode est linaire jusqua 150 mg/l (3,75 mmol/l).
si la concentration est leve, diluer lchantillon
au 1/2 dans une solution de NaCI 9 g/l. Multiplier le
rsultat par 2.
VALEURS USUELLES
Srum
Nouveau-ns
PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de ractif
R2.
Stabilit :
4 heures 20 - 25C
20 heures 2-8C
Enfants
Adultes
ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine.
Urine dilue au 1/3 avec de leau distille, acidifie
pH : 3,4 avec HCI dilu.
Urine
Nouveau-ns
MODE OPERATOIRE
570 nm (550-590)
Longueur donde :
Temprature :
20 - 25C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Blanc
Standard
--
20 l
--
Echantillon
--
--
20 l
1 ml
1 ml
1 ml
Dc 2007
Enfants
2-6 mg/kg/24h
0,05-0,150mmol/kg/24h
Adultes
NOTES
Utiliser du matriel plastique usage unique pour
toutes les manipulations. La prsence dans certains
dtergents de chelateurs tel que lEDTA peut empcher
dans certains cas la formation du complexe color.
BIBLIOGRAPHIE
Stern J., Lewis W.H.P., Clin. Chim. Acta 2, 576 (1957)
FT Fr 01
1-8 mg/kg/24h
0,025-0,2mmol/kg/24h
Echantillon
Standard
Mlange ractif
7.5 - 12 mg/dl
1,87 - 3 mmol/l
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20062, (50 Tests)
R1 : 1 x 100 ml
R2 : 2 x 5 g
CAPACITE TOTALE
DE FIXATION DU FER
Kit Complmentaire
Rf : 20061
Rf : 20063
Fer Ferrozine
Fer SFBC
PRINCIPE
La capacit totale de fixation du fer est value aprs
saturation de la transferrine par une solution de fer et
adsorption de lexcs sur hydroxycarbonate de
magnsium. La dtermination du fer est ensuite
ralise laide du coffret fer ferrozine (Rf. 20061) ou
Fer SFBC (Rf 20063).
MODE OPERATOIRE
Echantillon
1 ml
Ractif 1
2 ml
REACTIFS
Ractif 2
Ractif 1
Solution saturante de fer
Fer
Ractif 2
Adsorbant
Hydroxycarbonate
de magnsium
5 mg/l
89,5 mol/l
2 mesures pleines
environ 200 mg.
Determination de la C.T.F.
Doser le fer dans le surnageant en utilisant les kits
suivants :
- fer ferrozine
Rf : 20061
- fer SFBC
Rf : 20063
PREPARATION ET STABILITE
Les ractifs sont prts lemploi et stables jusqu la
date de premption indique sur ltiquette.
ECHANTILLONS
Srum non hmolys. Le prlevement peut tre
conserv 7 jours entre 2 et 8C ou plusieurs semaines
congel - 20C.
VALEURS USUELLES
44,5 - 73,5 mol/l
249 - 412 g/dl
NOTE
La contamination par le fer tant une des causes
principales derreur, lusage de pipettes et de cuves en
matire plastique et usage unique est recommand.
FT Fr 02
Dc 2007
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20061, (100 Tests)
R1
R2
R3
R4
R1
R2
R3
R4
:
:
:
:
2
1
1
1
x
x
x
x
100ml
2,5g
5 ml
10 ml
:
:
:
:
5
1
1
2
x
x
x
x
FER FERROZINE
100ml
5g
12 ml
10 ml
(Mthode colorimtrique)
PRINCIPE
A pH 4,8 le fer Ferrique (Fe +++) est libr
instantanment de la transferrine. Lacide ascorbique le
rduit en fer ferreux (Fe++). La ferrozine forme avec le
fer ferreux, un complexe color soluble, mesurable de
560 580 nm.
La prsence de thioure permet dliminer linterfrence
des ions cuivreux.
Eau distille
Standard R4
Echantillon
Ractif A
Ractif B
Guanidine, HCI
Tampon actate pH 5
Standard
200 l
1 ml
200 l
1 ml
Blanc
chantillon
chantillon
200 l
1 ml
-
200 l
1 ml
REACTIFS
Ractif 1
Blanc
Ractif
4,5 mmol/l
CALCUL
(DO Echant. - DO blanc Echant.)
Fer srique =
Ractif 2
Acide ascorbique
Ractif 3
Ferrozine
40 mmol/l
Ractif 4
Standard
1 mg/l
17,9 mol/l
xn
DO Standard
mg/l
mol / l
:n=1
: n = 17.9
LINARIT
jusqu 1000 g/dl (179,7 mol/l)
PREPARATION ET STABILITE
VALEURS USUELLES
Hommes
Femmes
ECHANTILLON
Srum, plasma hparin non hmolys
MODE OPERATOIRE
562 nm (530-590)
Longueur donde :
20 - 25C
Temprature :
Cuve :
1 cm dpaisseur
Zro de lappareil :
- Ractif A pour les Blancs Echantillons
- Blanc Ractif pour le standard et les chantillons
FT Fr 03
Dc 2007
69-158g/dl
12,5-28,3 mol/l
59-145 g/dl
10,7-26,0 mol/l
BIBLIOGRAPHIE
Persijn et al Clin. Chem. Acta 35,91 (1971)
Stoockey L. Anal. Chem. 42,779 (1970)
Williams et al. Clin. Chem. 23,237(1977)
10
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20071, (320 Tests)
R1 : 2 x 80 ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 5 ml
MAGNESIUM
CALCUL
PRINCIPE
Le magnsium forme un complexe color avec la
calmagite en milieu alcalin. La prsence dEGTA rend la
raction spcifique.
Lintensit de la coloration produite est proportionnel la
concentration en magnsium.
D.O Echantillon
magnesium
mg/dl
mg/l
mmol/I
Urine
REACTIFS
:
:
:
:
D.O Standard
n=2
n = 20
n = 0,824
multiplier le rsultat par le facteur de dilution
LINEARITE
Ractif 2 Calmagite
VALEURS USUELLES
0,30 mmol/l
xn
2 mg/dl
20 mg/l
0,824 mmol/l
Srum, Plasma
Urine
PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de
ractif R2.
Stabilit du ractif de travail : 24 heures 20-25C
4 jours 2-8C
0,65 - 12,5
mmol/24h
NOTES
Utiliser uniquement du matriel plastique usage unique.
ECHANTILLONS
BIBLIOGRAPHIE
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :...................520 nm (500 - 550)
Temprature :............................20-25C
Cuve :........................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Blanc
Standard
Echantillon
Standard
10 l
Echantillon
10 l
1 ml
1 ml
1 ml
Ractif de travail
11
FT Fr 04
Juin 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20081, (100 Tests)
R1: 1 x 100 ml
R2: 1 x 100 ml
R3: 1 x 4 ml
R4: 1 x 70 ml
PHOSPHORE
Mthode colorimtrique
PRINCIPE
CALCUL
DO Echantillon
xn
DO Etalon
mg/l
n = 50
mmol/l
n = 1.61
Urines : multiplier par 5 le rsultat obtenu.
REACTIFS
R1
R2
R3
R4
Ractif rducteur :
Chlorydrate dhydroxylamine
Polyvinilpyrrolidone
Acide sulfurique
0.14 mmol/l
10 g/l
89.63 mmol/l
LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 150 mg/l (4,8mmol/l).
Si la concentration est plus leve, diluer lchantillon
et refaire le test.
VALEURS USUELLES
Srum
PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de R2
Stabilit : 4 heures 20-25C
1semaine + 4C
Enfants
Adultes
ECHANTILLONS
Urine
MODE OPERATOIRE
NOTES
BIBLIOGRAPHIE
Clin. Chim. Acta. 15, 155 (1967).
Eau distille
R3 Etalon
Srum ou
urine 1/5
Mlange
ractionnel
Blanc Ractif
Etalon
Echantillon
50 I
--
--
--
50 I
--
--
-50 I
2 ml
2 ml
2 ml
0,5 ml
0,5 ml
0,5 ml
Dc 2007
12
Biomaghreb
PRESENTATION
PHOSPHORE
Mthode U.V.
PRINCIPE
CALCUL
Phosphore =
D.O. Echantillon
mg/dl
mg/l
mmol/l
Urine
Ractif 2
Standard
:
:
:
:
n=5
n = 50
n = 1,61
multiplier le rsultat par 10
LINEARITE
REACTIFS
Ractif 1
xn
D.O. Standard
Phosphore
Molybdate dAmmonium + Acide Sulfurique
Complexe
phospho-molybdique
200 mmol/l
0,40 mmol/l
O.S
VALEURS USUELLES
5 mg/dl
50 mg/l
1.61 mmol/l
Adultes
2,5-5,0 mg/dl
25-50 mg/l
0,81-1,61 mmol/l
Enfants
Urines
6,5-48,5 mmol/24h
0,5-1,5g/24
STABI LITE
La stabilit des ractifs est indique sur chaque
conditionnement.
ECHANTILLONS
NOTES
MODE OPERATOIRE
BIBLIOGRAPHIE
--
Echantillon
--
Ractif de travail
1 ml
Etalon
10 l
Echantillon
--
--
10 l
1 ml
1 ml
13
FT Fr 07
Dc 2007
Biomaghreb
BIOCHIMIE
ENZYMES
Page
AMYLASE
16
Rf. 20031
Rf. 20032
Rf. 20033
20 x 3 ml
30 x12 ml
10 x 10 ml
CREATINE KINASE LS
17
Rf. 200063
Rf. 200071
Rf. 200072
60Tests
150Tests
100Tests
GAMMA GT
18
Rf. 20021
Rf. 20022
Rf. 200222
20 x 3 ml
10 x10 ml
13 x10 ml
GOT-ASAT
19
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
20042
20043
20050
200492
20 x 3
10 x10
9 x 50
2 x 110
ml
ml
ml
ml
GPT - ALAT
20
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
20046
20047
20040
200462
20 x 3
10 x 10
9 x 50
2 x 110
ml
ml
ml
ml
LDH
21
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
20011
20012
200123
200125
200126
PHOSPHATASES ALCALINES
PAL DGKC
Rf. 20015
Rf. 20016
Rf. 20017
Rf. 20018
20 x 3
10 x 10
9 x 50
15 x 10
2 x 55
ml
ml
ml
ml
ml
22
20 x 3
10 x 10
4 x 30
5 x 50
ml
ml
ml
ml
20039
20041
20048
20049
200
100
100
100
tests
tests
tests
tests
23
Biomaghreb
PRESENTATION
ALPHA AMYLASE
Dtermination Cintique
Colorimtique Directe
CNPG3
PRINCIPE
Dtermination cintique en colorimtrie de lactivit
amylase du srum, plasma ou urine selon la raction :
MODE OPERATOIRE
Temperature.......................................................37C
Longueur donde............................................405 nm
Cuve...................................................1 cm paisseur
1000 l
Srum 25 l
ou Urine 10 l
Echantillon
REACTIFS
Ractif CNPG3 prt lemploi renferme:
2-chloro-4-nitrophenyl-Dmaltotrioside (CNPG3)
Tampon MES pH = 6
NaCL
Ca (CH3 COO)2
KSCN
Azide Sodium
2.5 mmol/l
50 mmol/l
250 mmo/l
4.5 mmol/l
375 mmol/l
152 mmol/l
CALCUL
amylase (U/L) Srum = D.O / min / x 3178
amylase (U/L) Urine = D.O / min / x 7829
LINEARITE
La raction est linaire jusqu 2000 U/L.
Si la DO par min est > 0.630 refaire la determination
en diluant lchantillon au 1/10 avec NaCL 0.9 g/l.
PREPARATION ET STABILITE
- Le ractif fourni est prt lemploi.
- Le ractif est stable 2-8 jusqu la date dexpiration,
et il est stable 30 jours temprature (20-25C).
- Ne pas utiliser le ractif si la DO du blanc ractif est
suprieure 0.500 405 nm
VALEUR USUELLES
37C
Srum, plasma
Urine
ECHANTILLON
- Srum ou plasma recueilli sur hparine ou iodo-actate
(EDTA ou citrate ne doivent pas tre utiliss).
- Hmolyse gnante
- Urine
BIBLIOGRAPHIE
Kaufman RA. Tietz NW-Clin Chem. 26: 8461 (1980)
Ranson JHC.Curr Prob Surg, 16:1 ( 1979)
Young DS. et al, v. clin chem, 21 (1975).
REMARQUES
Le ractif doit tre conserv entre 15 - 25C avant son
utilisation. NE PAS PIPETER PAR LA BOUCHE afin
dviter la contamination par lamylase salivaire.
FT Fr 08
Dc 2007
16
Biomaghreb
PRESENTATION
CREATINE KINASE LS
R2: 2 x 6 ml
R2 : 5 x 6 ml
R2 : 6 x 6 ml
PRINCIPE
Dtermination cintique de la cratine kinase ractive
par la N.acetylcystene selon les ractions suivantes:
CK
Cratine phosphate + ADP
cratine + ATP
D- Glucose + ATP
HK
Longueur donde :
Temprature
cuvette
Zero de lappareil
D-Glucose- 6 P + ADP
D-Glucose-6-phosphate- NADP
G-6PDH
Semi-Micro
1000l
40l
Micro
500l
20l
CK = cratine kinase
HK= Hexokinase
G-6-PDH=Glucose-6-phosphate deshydrogenase.
Lactivit catalytique de la CK est determine en mesurant la vitesse dapparition du NADPH+H+ 340 nm.
Calcul
Macro
4130
4207
7429
340nm A/min.x
Hg 334nm A/min.x
Hg 365nm A/min.x
Semi-Micro
4130
4207
7429
Micro
4130
4207
7429
REACTIFS
Ractif 2 : Substrat
N-Acetyl cysteine
Cratine phosphate
ADP
AMP
NADP
Diadenosine pentaphosphate
Hexokinase
Glucose-6-phosphate deshydrogenase
Macro
2500l
100l
Ractif de travail
chantillon
D-Gluconate-6-P+
NADPH+H
Ractif 1
Tampon imidazole Acetate pH : 6.7
Glucose
Longueur donde :
Temprature
cuvette
Zero de lappareil
100 mmol/l
20 mmol/l
R1
chantillon
R2
20 mmol/l
30 mmol/l
5 mmol/l
5 mmol/l
2 mmol/l
10 mol/l
2500 Ul/l
1500 Ul/l
Semi-Micro
800l
40l
200l
Micro
400l
20l
100l
Calcul
340nm A/min.x
Hg 334nm A/min.x
Hg 365nm A/min.x
PRELEVEMENT
Serum ou plasma prlev sur hparine non hmolys ou
sur EDTA
- lchantillon est stable :
7 jours : 2 - 8C
2 jours : 20 - 25C
Macro
3965
4039
7132
Semi-Micro
3965
4039
7132
Micro
3965
4039
7132
LINEARIT
Jusquau 900 U/l 37 C si la /min est suprieure 0,200 (340 ou 334 nm)
recommencer la mesure sur une dilution du serum dans une solution de chlorure
de sodium 9 g/l. Multiplier le rsulat par le facteur de dilution appliqu.
VALEURS USUELLES
Hommes
Femmes
25C
10-80 U/l
10-70 U/l
30C
15-130 U/l
15-110 U/l
37C
25-195 U/l
25-170 U/l
Dans tous les cas chaque laboratoire doit tablir ses propres valeurs
de rfrence.
BIBLIOGRAPHIE
Bablok W. et al. A genral Regression Procedure for Method
1- transformation
FT Fr 47
Oct 2008
Biomaghreb
GAMMA GT
PRESENTATION
Rf. 20021, (60 Tests)
R1 : 1 x 65 ml
R2 : 20 x 3 ml (Iyoph)
CALCUL
PRINCIPE
Dtermination cintique de la Gamma Glutamyl
transfrase selon la raction suivante:
GGT
Glupa Carboxy + glycylglycine -> T L- Y Glutamylglycylglycine
+ 5 amino 2 nitrobenzoate
LINARIT
La mthode est linaire jusqu 500 U/l 37C.
Si lactivit est suprieure, rpter le test en diluant le
srum au 1/10 avec une solution de NaCI 9 g/l.
Multiplier le rsultat par 10.
REACTIFS
Ractif 1 Tampon Glycylglycine
Solution tampon pH 7,9 30 C
Ractif 2
Substrat
150mmol/l
VALEURS USUELLES
25C
Glupa Carboxy
6 mmol/l
PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le subtrat R2 par 3 ml (rf 20021) ou 10 ml
(Rf 20022 et 200222) de tampon R1.
Le ractif de travail est stable
7 jours 20-25C
1 mois +4C
30C
37C
Hommes
6 - 28 U/l
8 - 38 U/l
11 - 50
Femmes
4 - 18 U/l
5 - 25 U/l
7 - 32
NOTES
Plasmas contenant des Citrates, Oxalates ou de lEDTA
ne peuvent pas tre utiliss dans ce test.
ECHANTILLON
Srum non hmolys
BIBLIOGRAPHIE
MODE OPERATOIRE
Solution de travail
1 ml
3 ml
100 l
300 l
FT Fr 10
Dc 2007
18
Biomaghreb
PRESENTATION
GOT-ASAT
Rf.20042,(60 Tests)
Rf 20043,(100 Tests)
R1: 1 x 65 ml
R1: 1 x 110 ml
R1 : 9 x 50ml
R1 : 2 x 110 ml
R2: 20 x 3 ml (Iyoph)
R2: 10 x 10 ml (Iyoph)
R2 : 9 x 50 ml (Iyoph)
R2 : 2 x 110 ml (Iyoph)
PRINCIPE
340 nm
LINEARITE
VALEURS USUELLES
25C
REACTIFS
30C
37C
Femmes
jusqu 16 Ul/l
Jusqu 22 Ul/l
Jusqu 31UI/I
Hommes
jusqu 19UI/I
Jusqu 26 Ul/l
Jusqu 38UI/I
REMARQUE
Ractif 1
SolutionTampon
Ractif 2
Substrat
NADH
LDH
MDH
Oxoglutarate
BIBLIOGRAPHIE
0.18 mmo/l
800 U/l
600 U/l
12 mmol/l
PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le substrat R2 par 3 ml Rf (20042) ou10 ml
Rf (20043) de Tampon R1. Pour les Rf (20050)
et (200492) reconstituer chaque R2 par un flacon R1.
cette solution de travail est stable : 7 jours 2-8C.
: 24 heures 20-25C.
ECHANTILLON
Srum ou plasma hparin sans hmolyse.
MODE OPERATOIRE
Longueur donde..............................................340 nm
Temprature................................................25-30-37C
Cuve....................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Solution de travail
1 ml
3 ml
100 l
300 l
FT Fr 11
Dc 2007
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20046, (60 Tests) Rf 20047, (100 Tests)
R1: 1 x 65 ml
R1: 1 x 110 ml
R1: 9 x 50 ml
R1: 2 x 110 ml
R2: 20 x 3 ml (Iyoph)
R2: 10 x 10 ml (Iyoph)
R2: 9 x 50 ml (Iyoph)
GPT-ALAT
Mthode cintique (IFCC)
sans phosphate de pyridoxal
PRINCIPE
solution de travail
CALCUL
DO/min x 1750 = UI/I
340 nm
LINEARITE
Si la DO/min 340 nm est suprieure 0,15 rpter
REACTIFS
Ractif 1
Tampon Tris PH 7.5 30C 100 mmol/l
SolutionTampon Alanine
500 mmol/l
0.18 mmo/l
1200 Ull
15 mmol/l
VALEURS USUELLES
25C
Femmes
PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le substrat R2 par 3 ml Rf (20046) ou 10 ml
Rf (20047) de Tampon R1. Pour les Rf (20040) et (200462)
reconstituer chaque R2 par 1 flacon R1.
Cette solution de travail est stable 7 jours 2-8C.
24 heures 20-25C.
37C
jusqu 16 U/l
BIBLIOGRAPHIE
Bergmeyer H. Schaibe and Walefeld. Clin. Chem. 24
58 - 73 (1978).
Bergmeyer and Horder Clin. Chem. Acta 105 147 F
(1980).
MODE OPERATOIRE
Longueur donde..................................................340 nm
Temprature ................................................ 25-30-37C
Cuve......................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Dc 2007
30C
REMARQUE
ECHANTILLON
FT Fr 12
300 l
Lactate + NAD
NADH
LDH
Oxoglutarate
100 l
Echantillon
Ractif 2
Substrat
3 ml
1 ml
20
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20011, (60 Tests)
R1: 1 x 65 ml
R2: 20 x 3 ml (Iyoph)
LDH
PRINCIPE
CALCUL
Dtermination
cintique
de
lactivit
lactate
dehydrognase. Selon les recommandations de la
Socit Franaise de Biologie Clinique. (SFBC)
La raction est initie par addition de lchantillon du
patient au ractif. Le schma ractionnel est le suivant:
Pyruvate + NADH + H+
340nm
LINEARITE
Si la DO/min 340 nm est suprieure 0.160
Rpter le test en diluant lchantillon au 1/10 ave une
solution de NaCI 9 g/l. Multiplier le rsultat par 10.
LDH
L- Lactale + NAD+
VALEURS USUELLES
lactivit
lactate
deshydrogenase dans lchantillon.
30C
Adultes
37C
230 430 U/l
REACTIFS
Ractif 1
Solution Tampon
Ractif 2
Goenzyme
Enfants
de 0 6 mois
REMARQUE
Lhmolyse peut interfrer.
PREPARATION ET STABILITE
BIBLIOGRAPHIE
ECHANTI LLON
Srum ou plasma hparin sans hmolyse.
MODE OPERATOIRE
Longueur donde................................................340 nm
Temprature......................................................30-37C
Cuve....................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Solution de travail
1 ml
3 ml
20 l
60 l
21
FT Fr 13
Dc 2007
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20015, (60 Tests)
R1 : 20 x 3 ml
R2 : 1 x 7 ml
PHOSPHATASE ALCALINE
Dtermination Cintique
Mthode DGKC
attendre 1 minute puis mesurer laugmentation moyenne
de la D.O par minute pendant 1 3 minutes.
PRINCIPE
CALCUL
LINEARITE
Si la variation moyenne de D.O/min > 0,250 refaire le
test en diluant lchantillon au 1/5 dans une solution de
NaCl 9g /l et multiplier le rsultat par 5.
REACTIFS
R1 : Ractif tampon
Tampon diethanolamine (pH 9.8)
Chlorure de magnsium
1 mol/l
0.5 mmol/l
VALEURS USUELLES
25C
R2 : substrat
Nitro 4 phnylphosphate
10 mmol/l
PREPARATION
30C
37C
Enfants
Adultes
40-190 U/l
50-230 U/l
70-300 U/l
Ractif de travail :
Rf. : 20015
R1..................................... 3 ml
R2....................................0,3 ml
BIBLIOGRAPHIE
Rf. : 20016
R1....................................10 ml
R2......................................1 ml
REMARQUE
Rf. : 20017
R1....................................30 ml
R2......................................3 ml
Rf. : 20018
R1....................................50 ml
R2......................................5 ml
STABILITE
Stabilit du ractif de travail:
- 15 - 25C ................5 jours
- 2 - 8C...................15 jours
PRELEVEMENT
Srum, plasma recueilli sur hparine, non hmolys.
MODE OPERATOIRE
Longueur donde:
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:
1 ml
20 l
Echantillon
Dc 2007
22
Biomaghreb
PRESENTATION
R.f 20041(50 Tests
Rf. 20039
(200 Tests TGO) TGO + 50 Tests TGP)
R1: 2 x 100 ml
R1 : 1 x 50ml
R3: 2 x 100 ml
R2 : 1 x 50 ml
R3 : 1 x 100 ml
R4: 1 x 14 ml
R4: 1 x 9ml
Rf. 20048
(100 Tests TGP)
R2: 2 x 50ml
R3: 2 x 50 ml
R4: 1 x 9ml
TRANSAMINASES
Rf. 20049
(100 Tests TGO)
R1: 2 x 50ml
R3: 2 x 50ml
R4: 1 x 9ml
Mthode colorimtrique
Etablissement de la courbe dtalonnage sur papier
millimtr:
- en abscisse: nombre dunits/ml
- en ordonne: densits optiques
PRINCIPE
Dtermination colorimtrique de lactivit TGO ou TGP
selon les ractions suivantes :
2- Dosage
Pour chaque srum, prparer les tubes suivants:
Ractif 1
Ractif 2
REACTIFS
TGO
1 ml
-
TGP
1 ml
0,2 ml
0,2 ml
85 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/l
95 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/I
Ractif 3
Ractif de coloration 2,4 dinitrophnylhydrazine
1 mmol/l
Ractif 2
Substrat TGP
Ractif 4
Srum
Mlanger et
mettre 37C
exactement
1 heure
Ractif 3
1 ml
exactement
30 min
1 ml
10 ml
10 ml
talon pyruvate
STABILITE
ECHANTILLONS
4- RSULTATS
Dterminer partir de la courbe dtalonnage le
nombre dunits TGO et TGP par ml de srum.
Srum
Hmolyse gnante
LINEARITE
Pour une activit TGO > 150 units/ml, et TGP > 125
units/ml, refaire la dtermination en diluant lchantillon au
1/10me dans une solution de chlorure de sodium 9 g/l.
Multiplier alors le chiffre lu sur la courbe par 10.
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
505 nm (490 520 nm)
Zro de lappareil :
eau distille
1- Courbe dtalonnage
Dans des tubes essai rpartir (en ml) :
N des tubes
Eau distille
Ractif 1
Ractif 4
Ractif 3
1
0,2
1
1
2
0,2
0,9
0,1
1
3
0,2
0,8
0,2
1
4
0,2
0,7
0,3
1
VALEURS USUELLES
TGO : < 40 units/ml
TGP : < 45 units/ml
5
0,2
0,6
0,4
1
BIBLIOGRAPHIE
REiTMANS; FRANKELS.
Am. d. Clin. Path. 28,56 (1957).
10
10
10
10
10
0
0
22
25
55
50
95 150
83 126
23
FT Fr 15
Dc 2007
Biomaghreb
BIOCHIMIE
SUBSTRATS
Page
ACIDE URIQUE
26
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
20091
20092
20095
20096
3 x 125
4 x 30
2 x 120
5 x 120
ml
ml
ml
ml
ALBUMINE
27
Rf. 20094
BILIRUBINE DIRECTE
Rf. 20102
BILIRUBINE TOTALE
Rf. 20103
BILIRUBINE TOTALE ET DIRECTE
Rf. 20101
Rf. 20105
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
Rf. 201010
CHOLESTEROL
Rf. 20111
Rf. 20112
Rf. 20115
Rf. 20118
CHOLESTERROL-HDL
Rf. 20113
Rf. 200113
Rf. 200112
CREATININE
Rf. 20151
Rf. 20152
Rf. 20153
GLUCOSE
Rf. 20121
Rf. 20126
Rf. 20124
Rf. 20127
Rf. 20122
PROTEINES TOTALES
Rf. 20161
Rf. 20162
TRIGLYCERIDES
Rf. 20131
Rf. 20132
Rf. 20138
UREE COLOR
Rf. 20141
Rf. 20146
Rf. 20148
UREE UV
Rf. 20143
Rf. 20147
25
4 x 250 ml
28
2 x 160 ml
29
2 x 160 ml
30
2 x 160 ml
2 x 250 ml
31
10 x 3 ml
32
3 x 120
4 x 30
6 x 100
5 x 120
ml
ml
ml
ml
33
5 x 5 ml
10 x 10 ml
1x 5m
34
2 x 160 ml
3 x 1000 ml
2 x 500 ml
35
2 x 500
5 x 200
6 x 500
4 x 100
3 x 1000
ml
ml
ml
ml
ml
36
450 ml
1000 ml
37
2 x 120 ml
4 x 30 ml
5 x 120 ml
38
2 x 200 ml
1 x 500 ml
2 x 500 ml
39
4 x 50 ml
9 x 50 ml
Biomaghreb
PRESENTATION
Ref. 20091, (375 Tests)
R1 : 3 x 125 ml
R : 3 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 6 ml
ACIDE URIQUE
Test colorimtrique
Uricase-PAP
CALCUL
PRINCIPE
Lacide urique est dos selon les ractions suivantes:
D.O. Echantillon
Acide urique =
Uricase
Acide urique + 2H2O + O2 > Allantone + CO2 + H2O2
2H202 + Amino-4-antipyrine
mg/dl n = 6
mg/l
n = 60
mol/l n = 357
Proxydase
REACTIFS
Urine
Ractif 1
Solution tampon
50mmol/l
4 mmol/l
Ractif 2
Enzymes
Uricase
Peroxydase
Amino-4-Antipyrine
70 U/l
660 U/l
1 mmol/l
Ractif 3
Standard
Acide urique
xn
D.O. Standard
LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 250 mg/l
(25 mg/dl = 1487,5 mol/l). Si la concentration en acide
urique est suprieure 250 mg/l, recommencer le test
sur un chantillon dilu au 1/2 avec une solution de NaCI
9 g/l. Multiplier le rsultat par 2.
6 mg/dl
60 mg/l
357 mol/l
VALEURS USUELLES
PREPARATION ET STABILITE
Srum ou plasma
Femmes
Hommes
ECHANTILLONS
Urine
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :.........................510 nm (490-550)
Temprature :................................20-25C ou 37C
Cuve :............................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Blanc
Standard Echantillon
Standard
--
20 l
--
Echantillon
--
--
20 l
1 ml
1 ml
1 ml
Ractif de travail
BIBLIOGRAPHIE
FT Fr 16
Dc 2007
26
Biomaghreb
PRESENTATION
ALBUMINE
Test colorimtrique
Mthode BCG
PRINCIPE
CALCUL
D.O chantillon
D.O Etalon
xn
REACTIFS
Ractif R1:
Ractif de
coloration
Vert de Bromo-crsol
Tampon succinate
Brij
Ractif R2:
Etalon
Albumine bovine
g/I
: n = 50
mol/l : n = 724,5
0,14 g/l
75 mmo/l
7 ml /l
NOTES
Les ractifs doivent tre ramens la temprature
ambiante avant leur utilisation.
50 g / l
724 mol/l
LINEARITE
STABILITE
VALEURS USUELLES
Srum
ECHANTILLONS
Plasmas, srums, recueillis sur hparine.
MODE OPERATOIRE
BIBLIOGRAPHIE
Etalon
550-780 mol/l
38-54g/I
Echantillon
Echantillon
10 l
Etalon (R2)
10 l
Ractif (R1)
2 ml
2 ml
2 ml
27
FT Fr 17
Dc 2007
Biomaghreb
BILIRUBINE DIRECTE
PRESENTATION
Rf. 20102, (160 Tests)
R2 : 4 x 80 ml
R3 : 1 x 15 ml
R4 : 1 x 3 ml (Lyoph)
Etalon
Blanc Dosage
Etalon R4
PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En labsence de
dimethyl sulfoxyde seule la bilirubine directe se couple
avec lacide sulfanique diazot pour donner lazobilirubine.
Acide sulfanilique
Acide Chlorhydrique
30 mmol/I
150 mmol/l
Ractif 3
Nitrite de sodium
20 mmol/l
Ractif 4
50 l
50 l
Echantillon
Ractif R2
1 ml
1 ml
CALCUL (B.D)
[Bilirubine Directe]=
Asb(A)chantillon
x [Conc.talon]
Asb(A) talon
NOTE
mol / l
LINEARIT
10 mg/dl ; 100 mg/l (170 mol/l).
VALEURS USUELLES
0,0 - 0.2 mg/dl; 0,0-2 mg/l (0,0-3,4 mol/l)
BIBLIOGRAPHIE
Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem.15, 231 (1970).
Dc 2007
0,585 mg/l
1,710
MODE OPERATOIRE
LECTURE
Longueur donde :
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:
1 ml
ECHANTILLON
F=
50 l
1 ml
Solution de
travail (B.D)
REACTIFS
Rsctif 2
50 l
Echantillon
Blanc
Dosage
28
Biomaghreb
PRESENTATION
BILIRUBINE TOTALE
PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En prsence de
dimthyl sulfoxyde (DMSO), la bilirubine totale se couple
avec lacide sulfanilique diazot pour donner
lazobilirubine.
Etalon
Echantillon
Blanc Dosage Blanc
Dosage
Etalon R4
Acide sulfanilique
Acide Chlorhydrique
Dimthylsulfoxyde
Ractif R1
30 mmol/I
150 mmol/l
7 mmol/l
Ractif 3
Nitrite de sodium
Ractif 4
50 l
1 ml
Solution de
travail (B.T)
50 l
1 ml
1 ml
1 ml
20 mmol/l
ECHANTILLON
CALCUL (B.T)
MODE OPERATOIRE
[BilirubineTotale]=
Abs (A)chantillon
x [Conc.talon]
Abs (A) talon
NOTE
mol / l
0,585 mg/l
1,710
LINEARIT
20 mg/dl ; 200 mg/l ( 340 mol).
50 l
Echantillon
REACTIFS
Rsctif 1
50 l
VALEURS USUELLES
0,2 - 1.0 mg/dl ; 2 - 10 mg / I (3.4 -17 mol/l)
BIBLIOGRAPHIE
Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem.15, 231 (1970).
LECTURE
Longueur donde :
Temprature :
Cuve :
Zro de lappareil :
FT Fr 19
Juin 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20101, (160 Test)
R1 : 2x 80 ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 15 ml
R4 : 1 x 3 ml (Lyoph)
BILIRUBINE TOTALE
ET DIRECTE
Etalon
Blanc Dosage
PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En prsence de
dimthyl sulfoxyde (DMSO), la bilirubine totale se couple
avec lacide sulfanique diazot pour donner
lazobilirubine. Le dosage de la bilirubine directe se fait
en labsence de DMSO.
Etalon R4
Ractif 2
Ractif 3
Ractif 4
Ractif R1
Solution de
travail (B.T)
1 ml
1 ml
1 ml
BILIRUBINE DIRECTE
Blanc Dosage
Etalon R4
MODE OPERATOIRE
50 I
Echantillon
Blanc
Ractif R2
Solution de
travail (B.D)
Dosage
50 I
50 I
Echantillon
1 ml
50 l
1 ml
1 ml
1 ml
NOTE
mol / I
LECTURE
LINEARITE
0.585 mg/l
1.710
VALEURS USUELLES
Bilirubine totale
0.2-1.0 mg/dl; 2-10 mg/l (3.4 - 17mol/l)
Bilirubine Directe
0.0 - 0.2 mg /dl ; 0.0 - 2 mg/l (0.0 - 3.4 mol/l)
BILIRUBINE TOTALE
Solution de travail (BT)
(Mlanger 20 Vol R1 avec 1 vol R3
BIBLIOGRAPHIE
Stabilit lobscurit
6H 20 -25C /2 Jours 2-8C
Juin 2008
1 ml
50 l
ECHANTILLON
FT Fr 20
50 I
Acide sulfanilique
30 mmol/I
Acide Chlorhydrique
150 mmol/l
Dimthylsulfoxyde
7 mmol/l
Acide sulfanilique
30 mmol/l
Acide chlorhydrique
150 mmol/l
Nitrite de sodium
20 mmol/l
Etalon Voir prparation de ltalon
Longueur donde :
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:
50 I
Echantillon
REACTIFS
Ractif 1
50 I
Echantillon
Blanc Dosage
Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem 15, 231 (1970).
30
Biomaghreb
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
CALIBRATOR FOR TOTAL
AND DIRECT BILIRUBIN
PRESENTATION
Ref. 201010
10 x 3 ml (Iypoph)
PRESENTATION
Ref. 201010
10 x 3 ml (Iypoph)
UTILISATION
Calibrage du dosage de la bilirubine totale et directe pour
les techniques
- Bilirubine totale (Rf: 20 103)
- Bilirubine directe (Rf: 20102)
- Bilirubine totale et directe (Rf: 20101)
USE
Calibrator of the determination of total and direct biliru
bin of the following technique:
- Total Bilirubin (Ref: 20103)
- Direct Bilirubin (Ref : 20102)
- Total and direct Bilirubin (Ref: 20 101)
Reconstitution
Ouvrir avec prcaution un flacon sans perte de
Iyophilisat, le reprendre exactement par 3 ml deau
distille. Attendre 15 minutes, completer la dissolution
par retournement successifs de flacon (ne pas agiter).
Reconstitution
Open a vial carefully, avoinding any loss of the
Iypophilized material. Reconstitute with exactly 3 ml of
distilled water. Let stand for 15 minutes and then dissolve
the contents completely by gently inverting the vial (do
not shake).
PRECAUTION DUTILISATION
Aucune des mthodes danalyse actuellement connues
ne peut garantir de faon absolue que les produits ne
contiennent aucun agent pathogne transmissible.ll est
recommand de les manipuler avec les prcautions
dusage relatives au produit potentiellement infectieux.
PRECAUTIONS
No known analysis method can totally guarantee the
absence of transmissible pathogenic agents.
It is therefore recommended that these products be
treated as potentially infections, and handied observing
the usual safety precaution.
STABILITE
Forme Iyophilise
Ce produit est stable 2-8c jusqu la date de
premptions indique sur chaque conditionnement.
STABI LITY
Lyophilized form
Stable at 2-8c until expiration date given on the
packaging.
31
FT Fr 21
Dc 2007
Biomaghreb
CHOLESTEROL
PRESENTATION
Rl. 20111, (360 Tests)
R1: 3 x 120 ml
R2: 3 flacons (Iyoph)
R3: 1 x 5 ml
PRINCIPE
Le cholesterol est mesur aprs hydrolyse enzymatique
puis oxydation. Lindicateur quinoneimine est form
partir du peroxyde dhydrogne et du amino 4 antipyrine
en prsence de phenol et de peroxydase.
Dtermination
suivantes :
enzymatique
selon
les
Blanc
Standard
Echantillon
Ractif de travail
Standard
--1 ml
10 l
-1 ml
Echantillon
-10 l
1 ml
ractions
Mlanger, lire les densits optiques aprs une incu
bation de 5 min. 37 C.
La coloration est stable 30 minutes.
Cholestrol estrase
Esters de cholestrol + H2O >Cholestrol+Acides gras
Cholestrol oxydase
CALCUL
D.O. Echantillon
Proxydase
Cholesterol =
xn
D.O. Standard
mg/dl :
g/l :
mmol/l :
n = 200
n=2
n = 5,17
REACTIFS
LINARIT
Ractif 1
Solution tampon
Pipes pH 6.9
Phenol
90 mmol/l
26 mmol/l
Ractif 2
Cholesterol oxydase
Peroxydase
Cholesterol esterase
Amino-4-antipyrine
300 U/l
1250 U/l
300 U/l
0.4 mmol/l
Ractif 3
Standard
VALEURS USUELLES
Srum, plasma
200 mg/dl
2 g/l
5.1 7 mmol/l
PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le contenu dun flacon de R2 avec un flacon
de tampon R1.
Le ractif de travail est stable : 1 mois 20 - 25C
4 mois 2 - 8C
BIBLIOGRAPHIE
Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Richmond, Clin. Chem. 19, 1350 (1973)
Fasce C.F., Clin. Chem. 18901 (1982)
ECHANTILLONS
Srum
Plasma recueilli sur hparine
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :....................505 nm (500 - 550)
Temprature :...........................37C
Cuve :.......................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
FT Fr 22
Dc 2007
32
Biomaghreb
PRESENTATION
CHOLESTEROL HDL
Blanc ractif
20111
20112
20115
Eau distille
Etalon
Cholestrol 2g/l
Surnageant
Ractif Cholestrol
enzymatique
PRINCIPE
Les chylomicrons et les lipoproteines de trs faible
densit (VLDL) et de faible densit (LDL) contenus dans
lhantillon sont prcipits par addition dacide
phosphotungstique en prsence dions magnsium.
Le surnagent obtenu aprs centrifugation contient les
lipoproteines de haute densit (HDL) dont le cholestrol
est dos par le ractif cholestrol enzymatique
(Ref: 20111 ou 20112).
Dosage
10l
1 ml
10 l
1 ml
10 l
1 ml
Calcul
DO dosage
[HDL-Cholestrol] =
REACTIFS
Ractif
prcipitant
Etalon
xn
DO talon
n = 5,17 mmol/l
n = 2 g/l
Multiplier le rsultat obtenu par 1. 1 pour tenir compte de
la dilution effectue lors de la prcipitation : on obtient
la concentration du cholestrol li aux HDL.
STABILITE
Conservation 2-8C
La date limite dutilisation est indique sur chaque
conditionnement.
Si le ractif est trouble ou color, il doit tre rejet.
ECHANTILLONS
MODE OPERATOIRE
Prcipitation
Diluer, dans une solution de NaCI 9 g/l, les srums dont
le taux est suprieur 3,5 mmol/l de triglycrides.
Cholestrolmie
< 2g/l
< 5,2 mmol/l
Srum....................................................500 l
Ractif prcipitant ...................................50 l
Bien mlanger, attendre 10 min.
Centrifuger 15 min 5000 t/min
Evaluation du risque
Risque faible
Risque modr si
Risque lev,
en particulier si :
HDL cholestrol
< 0,35 g/I
< 0,9 mmol/l
BIBLIOGRAPHIE
1. BURSTEIN M. et al. Lipid Res.11. 583.(1970)
2. Study Group, European Atherosclerosis
Society, European Heart Journal,, 9, 571 (1988)
3- ARCOL, ISB, 1989, 15, 121 -124.
33
FT Fr 23
Janvier 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
CREATININE
PRINCIPE
Hydroxyde de sodium
Ractif 2
Acide picrique
17.5 mmol/l
mg/dl:
mg/l:
mol/l:
Ractif 3
Standard
cratinine
2 mg/dl
20 mg/l
176,8 mol/l
LINEARITE
1.6 mol/l
La mthode est linaire jusqu 150 mg/l (15 mg/dl 1326 mol/l).
Si la concentration en cratinine est suprieure 150
mg/l, diluer lchantillon au 1/2 avec une solution de
NaCI 9 g/l et recommencer le test. Multiplier le rsultat
par 2.
PREPARATION ET STABILITE
Les ractifs sont prts lemploi, stables temprature
ambiante jusqu la date indique sur ltiquette.
Ractif de travail: mlanger parts gales R1 et R2
Stabilit : 1 mois 20-25C.
VALEURS USUELLES
ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine
Urine dilue au 1/20 dans leau distille (tenir compte de
la dilution pour le calcul).
MODE OPERATOIRE
Longueur donde: .............................492 nm (490 - 510)
Temprature:.....................................25 - 30 ou 37 C
Cuve:.................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Standard
Echantillon
Ractif de travail
Standard
Echantillon
100 l
--
--
100 l
1 ml
1 ml
Dc 2007
Srum
Urine
15-25 mg/kg/24h
BIBLIOGRAPHIE
Henry J.B., Clinical Diagnosis and management 17th
dition, Sauders Publisher 1984.
Larsen K., Clin. Chim. Acta 66, 209 (1972).
FT Fr 24
n=2
n = 20
n = 176.8
34
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20121, (1000 Tests )
R1 : 2 x 500 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 6 ml
GLUCOSE
CALCUL
D.O Echantillon
Glucose =
PRINCIPE
Dtermination enzymatique du glucose selon les
ractions suivantes :
mg/dl
g/l
mmol/
Glucose oxydase
Glucose + O2 +H2O
Acide gluconique + H2 O2
Proxydase
2 H2O2+Phnol+4-Amino-antipyrine
REACTIFS
Tampon Tris pH= 7
Phnol
100 mmol/l
0,3 mmol/l
Ractif 2
Enzymes
Glucose oxydase
Proxydase
Amino 4 -Antipyrine
10 000 U/l
1000 U/l
2,6 mmol/l
Ractif 3
Standard
Glucose
VALEURS USUELLES
100 mg/dl
1g/I
5,56 mmol/l
PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le Iyophilisat R2 dans le tampon R1.
Protger de la lumire.
Stabilit du ractif de travail
- 8 semaines 20 - 25C
- 8 mois 2 - 8C
Srum, plasma
70 - 105 mg/dl
0,70 - 1,05 g/l
3,89 - 5,84 mmol/l
50 - 70 mg/dl
0,50 - 0,70 g/l
2,78 - 3,89 mmol/l
NOTES
Les substances suivantes ninterfrent pas :
Hmoglobine (jusqu 4 g/l), Bilirubine (jusqu 200
mg/l), cratinine (jusqu 100 mg/l), Galactose
(jusqu 1 g/l) et EDTA (jusqu 2 g/l).
ECHANTILLONS
Srum (non hmolys)
Plasma recueilli sur fluorure-hparine ou hparine-iodactate (non hmolys)
Liquide Cphalo-rachidien.
BIBLIOGRAPHIE
Dingeon B., Ann. Biol. Clin. 33,3 (1975)
Lott J.A. Clin. Chem. 21. 1754 (1975)
Trinder P.n Ann. Clin. Biochem 6,24 (1969)
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
505 nm (492-550)
Temprature :
37 C (20-25C)
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Echantillon
Blanc
Standard
Standard
--
10 I
--
Echantillon
--
--
10 l
1 ml
1 ml
1 ml
Ractif de travail
n = 100
n=1
n = 5,56
LINARIT
Ractif 1
Solution tampon
x n
D.O Standard
FT Fr 25
Juin 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20161, 450 Tests
R1 : 3 x 147ml
R2 : 1 x 11 ml
R3 : 1 x 4,5 ml
PROTEINES TOTALES
R3 : 2 x 4 ml
PRINCIPE
Les protines sriques forment un complexe bleu-violet
avec les sels de cuivre en milieu alcalin.
(raction du type BIURET).
LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 150 g/l
CALCUL
REACTIFS
D.O. Echantillon
Ractif 1
Ractif
alcalin
Hydroxyde de sodium
lodure de potassium
Ractif 2
Ractif de
coloration
Ractif 3
Etalon
Albumine bovine
Protines totales =
31.9 mmo/l
xn
D.O. Etalon
n = 50 g/l
n = 5 g/dl
0.6 mol/l
30 mmol/l
0.6 mol/l
VALEURS USUELLES
Nouveaux-ns
52-91 g/l
5.2 - 9.1 g/dl
PREPARATION ET STABILITE
Enfants
Ractif de travail
Ajouter 3 ml de R2 1 flacon R1 Rf. 20161
Ajouter 5 ml de R2 1 flacon R1: Rf 20162
Stabilit de ractif de travail: 6 mois 2-8C.
54 - 87 g/l
5.4 - 8.7 g/dl
Adultes
67 - 87 g/l
6.7 - 8.7 g/dl
50 g/l
5g/dl
ECHANTILLONS
Srum ou plasma heparin.
BIBLIOGRAPHIE
- A. Gornall et al- J. Biol-Chem 177,751 (1949)
- Henry R.J., Annal. Chem. 92, 1491 (1957)
- Peter T.J. Clin. Chem. 14, 1147 (1968)
- T.E. Weichselbaum: Am. J. Clin. Pathol. 16
Sect. 10-40 (1946).
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
Temprature :
Cuve :
546 nm
T laboratoire
1 cm dpaisseur
Standard
Etalon
Echantillon
Echantillon
20 l
R3 : Etalon
20 l
Ractif de
travail
1 ml
1 ml
1 ml
FT Fr 26
Dc 2007
36
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf 201 31, (240 Tests)
R1 : 2 x 120 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 :1 x 4 ml
TRIGLYCERIDES
BLanc
Standard
Echantillon
Standard
10 l
Echantillon
10 l
1 ml
1 ml
1ml
PRINCIPE
Les triglycrides sont dtermins selon les ractions
suivantes :
Lipoprotine lipase
Triglycrides
Ractif de travail
Glycrokinase, Mg ++
Gylcrol + ATP
> Glycrol -3-P + ADP
CALCUL
Proxydase
H2O2 + Amino-4-Antipyrine + chloro-4-phnol > Quinone rose +H2O
D.O. Echantillon
Triglycrides =
REACTIFS
Ractif 1
Tampon pipes pH 7,2
Solution tampon Chloro-4-phnol
Ractif 2
enzymes
Ractif 3
Standard
xn
D.O. Standard
mg/dl : n = 200
g/l :
n=2
mmol/l : n = 2,28
50 mmol/l
2 mmol/l
Lipoproteine lipase
Glycrokinase
Glycrol 3-P-Oxydase
Proxydase
Amino-4-antipyrine
ATP
150000 U/l
800 U/l
4000 U/l
440 U/l
0,7 mmo/l
0,3 mmol/l
Standard glycrol
(en trioline)
200 mg/dl
2 g/l
2,28 mmol/l
LINARIT
La mthode est linaire jusqu 10 g/l (1000 mg/dl -11,4
mmol/l). Si la concentration est plus importante, diluer
Ichantillon au 1/10 avec une solution de NaCI 9 g/l
et refaire le dosage. Multiplier le rsultat par 10.
VALEURS USUELLES
Femmes
40 - 140 mg/dl
0,40 - 1,40 g/l
0,46 - 1,60 mmol/l
Hommes
60 - 165 mg/dl
0,60 - 1,65 g/l
0,68 - 1,88 mmol/l
PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le Iyophilisat R2 avec un flacon de tampon R1.
Stabilit du ractif de travail : 1 semaine 20-25C
4 semaines 2-8C.
ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine.
NOTE
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :.............................505 nm (490-550)
Temprature :....................................37C
Cuve :................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc
ractif.
BIBLIOGRAPHIE
Fossati P., Prencipe I., Clin. Chem. 28, 2077 (1982)
Young D., Pestaner L., Clin. Chem., 21,5 (1975)
37
FT Fr 27
Juin 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 201 41, (200 Tests)
R1 : 2 x 100 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 4ml
R4 : 2 x 10 ml (10 x conc)
UREE COLOR
Mthode Berthelot modifie
PRINCIPE
Lure est dose en cintique selon la raction suivante :
Urase
>
Ure + H2O
2NH3 + CO2
Les ions ammonium, en prsence de salicylate et dhypochlorite de sodium ragissent en formant un compos
de couleur verte (Dicarboxylindophenol) dont lintensit
est proportionnelle la concentration en ure.
Blanc
Etalon
Echantillon
Etalon
10 l
Echantillon
Ractif de
travail A
1 ml
10 l
1 ml
1 ml
REACTIFS
1 ml
Ractif 4
1 ml
1 ml
Ractif 1 Tampon
Ractif 2
EDTA
Salicylate de sodium
Nitroprussiate de sodium
Urase
Phosphate pH 6,7
2 mmol/l
60 mmol/l
32 mmol/l
30000 U/l
60 mmol/l
CALCUL
D.O. Echantillon
Ractif 4
10 x [ ]
Hypochlorite de sodium
Hydroxyde de sodium
0,50 g/l
8,325 mmol/l
Ure =
40 mmol/l
150 mmol/l
g/l :
mmol/l :
PREPARATION ET STABILITE
VALEURS USUELLES
ECHANTILLONS
Srum, plasma
Urine
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
590 nm (578 Hg)
Temprature :
25-30-37C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Juin 2008
n = 0,50
n = 8,325
LINEARITE
FT Fr 28
xn
D.O. Etalon
15 - 40 mg /dl
0,15 - 0,40 g/l
2,49 - 6,66 mmol/l
20-35 g/24h
BIBLIOGRAPHIE
Balleter, W.G., Bushaman, C.S., Tidwell, P.W., Anal.
Chim. 33,59
Berthelot, M.P.E., Report Chim. Appl. 284 (1859)
Mac Key, E.M., Rackeyll, J. Clin. Invest, J. Clin.Invest. 4,
295 (1927)
38
Biomaghreb
UREE UV
PRESENTATION
Rf 20143, (200 tests)
R1 : 4 x 50 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 4 ml
Mthode cintique
CALCUL
. D.O. Echantillon
PRINCIPE
Lure est dose en cintique selon les ractions suivantes:
. D.O. Standard
Urase
Ure + H2O - > 2NH3 + CO2
mg/dl : n = 50
g/l
: n = 0,50
mmol/l : n = 8,325
GLDH
2NH4+ + Oxo-2-glutarate+NADH ~> L-Glutamate
+ NAD+ + 2H2O
LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 2 g/l (200 mg/dl-33.3
mmol/l).
REACTIFS
VALEURS USUELLES
Ractif 1
Tampon
Ractif 2
Enzymes
Urase
GLDH
NADH
oxo-2 glutarate
Standard ure
50 mg/dl
8,325 mmol/l
Ractif 3
Standard
xn
Ure =
80 mmol/l
Srum, plasma
15 - 40 mg/dl
0,15 - 0,40 g/l
2,49 - 7,47 mmo/l
Urine
20-35 g/24 h
NOTES
Ne pas utiliser danticoagulant contenant des ions
fluorures ou ammonium.
PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre un flacon de R2 dans un flacon de R1.
Le ractif de travail est stable: 5 jours 20-25C
3 semaines 2-8C
BIBLIOGRAPHIE
Chaney, A. Clin. 8, 130 (1962)
Fawcett J.K., J. Clin. Path.13, 15 (1960)
ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine
Urine dilue au 1/100 avec de leau distille.
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
340 nm
Temprature :
25-30-37C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Solution de travail
Etalon
Dosage
1 ml
1 ml
10 I
10 l
39
FT Fr 29
Dc 2007
Biomaghreb
HEMATOLOGIE
HEMOSTASES
Page
AUTO FIBRI 1
42
Rf. 30033
10 x 4 ml
AUTO FIBRI 2
43
Rf. 30034
10 x 4 ml
CEPHALINE-KAOLIN
Rf. 30021
Rf. 30051
44
6 x 3 ml
8 x 2 ml
CHLORURE DE CALCIUM
Rf. 30051
44
5 x 20 ml
FIBRINOGENE
45
Rf. 30031
Rf. 30032
Rf. 30035
10 x 2 ml
10 x 4 ml
5 x 10 ml
HEMOGLOBINE
46
Rf. 30041
Rf. 30042
Rf. 30043
50 ml
100 ml
500 ml
THROMBOPLASTINE CALCIQUE
Rf. 30011
Rf. 30012
41
47
12 x 4 ml
8 x 4 ml
Biomaghreb
AUTO FIBRI 1
PRESENTATION
Dtermination du fibrinogne
par les automates dtection
lectro-magntique
PRINCIPE
Technique automatique
Diluer le plasma dans le tampon R2
Fibrnimie
Faible
Normale
Eleve
REACTIFS
Ractif 1
Ractif 2
Thrombine bovine
Tampon veronal pH = 7,35
0.1
0.1
0.1
Ractif R2
0.4
0.9
1.9
Plasma dilu
200 l
Incuber 2 min 37C
R1 non incub
100 l
Noter le temps de coagulation
Faire une double dtermination par dosage
RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au
tableau joint dans le kit, la concentration de fibrinogne
correspondante au temps de coagulation doit tre
corrige comme suit:
- Hmatocrite normal : (50 %) multiplier par 1,2 le
rsultat obtenu sur le tableau pour tenir compte de la
dilution de lanticoagulation liquide, cette majoration
de 20 % est compatible avec la prcision de la
mthode.
- Hmatocrite anormale: Le taux de fibrinogne est
obtenu en multipliant le rsulat trouv sur le tableau
par :
10 - (9 Hte*)
* Hte = Hmatocrite
9 - (9 Hte)
PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur
citrate trisodique liquide 0,11 molaires. (1 volume de
citrate pour 9 volumes du sang).
Centrifuger 10 min 2500 g (4000 tr/mn) ou laisser sdimenter.
MODE OPERATOIRE
Technique manuelle
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette
dilution permet dobtenir habituellement un temps de
coagulation compris entre 8 et 25 secondes.(fibrinmie
comprise entre 1,5 et 4g/l)
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes
rpter le teste sur une dilution au 1/20 ou
ventuellement au 1/30. Dans ces derniers cas le
rsultat obtenu sera multipli par 2 ou 3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test
sur une dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans
ces derniers cas les rsultats obtenus sont diviss par
2 ou 5 respectivement.
Toute dtermination doit tre faite en double
Dans un tube hmolyse introduire :
VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l
BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa : Acta Haematol 17, 137 (1957)
2- Caen J. Larrieu M.J. Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris 1975.
3- Andrew M. et al.
Blood 70, 165 (1987).
Plasma dilu
200 l
Incuber 2 mn 37C
200 l
R1 incub 37 C
Dclencher simultanment le chronomtre, plonger
rgulirement le crochet au milieu du tube jusqu apparition
dun mince filament de fibrine et noter le temps de coagulation.
Dc 2007
1: 5
1: 10
1: 20
Plasma (ml)
RECONSTITUTION ET STABILITE
FT Fr 30
Dilutions
42
Biomaghreb
AUTO FIBRI 2
PRESENTATION
PRINCIPE
Adaptation de la dtermination du fibrinogne au mode
de dtection des appareils automatiques. En prsence
dun excs de thrombine, le temps de coagulation dun
plasma pralablement dilu est inversement
proportionnel la quantit de fibrinogne plasmatique.
Technique automatique
Diluer le plasma dans le tampon R2
Fibrnimie
Dilutions
Plasma(ml)
Ractif R2
1 : 10
1 : 20
1 : 40
0,1
0,05
0,05
0,9
0,95
1,95
REACTIFS
Ractif 1
Thrombines
Ractif 2
Diluent
Faible
Normale
Eleve
RECONSTITUTION ET STABILITE
Reprendre le flacon R1 par le volume deau distille de
prfrence strile indique sur le flacon. Laisser la
solution se stabilise 20 minutes temprature ambiante.
Stabilit aprs reconstitution:
8 h 20 - 25C
48h 2 - 8C
1 mois -20C
(Congeler par petite fraction en tube plastique).
200 l
100 l
RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au
tableau joint dans le kit, la concentration de fibrinogne
correspondante au temps de coagulation doit tre
corrige comme suit:
- Hmatocrite normal: (50 %) multiplier par 1,2 le rsultat
obtenu sur le tableau pour tenir compte de la dilution
de lanticoagulation liquide, cette majoration de 20 %
est compatible avec la prcision de la mthode.
- Hmatocrite anormale: Le taux de fibrinogne est
obtenu en multipliant le rsulat trouv sur le tableau
par:
10- (9 Hte*)
* Hte = Hmatocrite
9 - (9 Hte)
PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur
citrate trisodique liquide 0,11 M. (1 volume de citrate
pour 9 volumes du sang).
Centrifuger (10 minutes 2500 g (4000 tr/mn) ou laisser
sdimenter.
Raliser le test de prfrence dans les 6h qui suivent le
prlvement.
MODE OPERATOIRE
Technique manuelle
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette
dilution permet dobtenir habituellement un temps de
coagulation compris entre 8 et 25 secondes. (Fibrinmie
comprise entre 1,5 et 4 g/l).
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes
rpter le test sur une dilution au 1/20 ou ventuellement
au 1/30. Dans ces derniers cas le rsultat obtenu sera
multipli par 2 ou 3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test
sur une dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans
ces derniers cas les rsultats obtenus sont diviss par 2
ou 5 respectivement.
Dans un tube hmolyse introduire:
Plasma dilu
Incuber 2 mn 37C
R1 incub 37 C
Plasma dilu
VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l
BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa: Acta Haematol 17, 137 (1957)
2- Caenj. Larrieu M.J, Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris (1975).
3- Andrew M. et al.
Blood 70, 165 (1987).
200 l
200 l
43
FT Fr 31
Dc 2007
Biomaghreb
CEPHALINE - KAOLIN
PRESENTATION
Rf. 30021, (180 Tests)
6 flacons (Lyoph)
Ractif complmentaire
Rf 30051, (1000 Tests)
5 flacons de 20 ml CaCI2 0,025 M prt lemploi
RESULTATS
Noter les temps de coagulation du tmoin et des
plasmas tests.
Le temps normal est compris entre 30 et 40 secondes.
Une augmentation suprieure 8 secondes par rapport
aux tmoins doit inciter procder une exploration
approfondie.
Lors dun examen pr-opratoire, une atteinte vasculaire
ou plaquettaire, un temps de Cphaline Kaolin normal
semble mettre labri dun saignement incontrolable.
La zone thrapeutique du temps de Cphaline-Kaolin
sous hparine se situe gnralement entre 1,5 et 2 fois
le temps du tmoin.
PRINCIPE
La Cphaline, extrait de lipides crbraux, utilise
comme substitut des facteurs plaquettaires, permet de
mesurer globalement les dficits en facteurs plasmatiques
de la thromboplastino-formation endogne.
Le Kaolin est employ comme activateur des facteurs de
la phase contact.
REACTIFS
Cphaline Kaolin: Reprendre le flacon par 3 ml deau distille.
Laisser 15 minutes la temprature ambiante (20-25C).
Agiter frquemment avant toute utilisation.
Chlorure de Calcium 0,025 M (Rf. 30051) ; prt
lemploi.
CONSERVATION
- Lyophilis: 3 ans + 4C.
- Reconstitu: 4 semaines + 4C.
PRELEVEMENT
REACTIF AUXILIAIRE
CHLORURE DE CALCIUM
0.025 M
MODE OPERATOIRE
Toute dtermination doit tre faite en double
Dans un tube plac au bain marie 37C mettre
successivement.
Plasma du malade ou plasma tmoin
Cphaline-Kaolin
0,1 ml
0,1 ml
0,1 ml
FT Fr 32
Juin 2008
44
Biomaghreb
FIBRINOGENE
PRESENTATION
Rf 30031, (100-200 Tests) Rf 30032, (200-400 Tests)
Rf 30035, (250-500Tests)
R1: 10 x 2 ml (Iyoph)
R1: 10 x 4 ml (Lyoph)
R1: 5 x 10 ml (Iyoph)
R2 : 1 x 100 ml
R2 :1 x 150 ml
R2 :1 x 150 ml
3-TECHNIQUE AUTOMATIQUE :
detection electro-magntique
Diluer le plasma dans le tampon R2
PRINCIPE
En prsence dun excs de thrombine, le temps de coagulation
dun plasma pralablement dilu est inversement proportionnel
la quantit de fibrinogne plasmatique.
REACTIFS
Ractif 1
Thrombine
Thrombine bovine
Ractif 2
Diluent
Fibrnimie
Dilutions
Plasma (ml)
Ractif R2
Faible
Normale
Eleve
1: 5
1:10
1: 20
0.1
0.1
0.1
0.4
0.9
1.9
Plasma dilu
Incuber1 min 37C
R1 non incub
Noter le temps de coagulation
Faire une double dtermination par dosage
100l
50l
PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur citrate
trisodique liquide 0,11 M (1 volume de citrate pour 9 volumes
de sang).
Centrifuger pendant 10 minutes 4000 tr/min (2500g) ou
laisser sdimenter.
Raliser le test de prfrence dans les 6h qui suivent le
prlvement.
Fibrnimie
Dilutions
Plasma (ml)
Ractif R2
Faible
Normale
Eleve
1:10
1: 20
1: 40
0.1
0.05
0.05
0.9
0.95
1.95
MODE OPERATOIRE
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette dilution
permet dobtenir habituellement un temps de coagulation
compris entre 8 et 25 secondes.
(fibrinmie comprise entre 1,5 et 4 g/l).
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes rpter
le test sur une dilution au 1/20 ou ventuellement au 1/30.
Dans ces derniers cas le rsultat obtenu sera multipli par 2 ou
3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test sur une
dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans ces derniers
cas les rsultats obtenus sont diviss par 2 ou 5
respectivement.
100ul
50ul
RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au tableau joint
dans le kit, la concentration de fibrinogne correspondant au
temps de coagulation doit tre corrige comme suit :
- Hmatocrite normal : (50%) multiplier par 1,2 le
rsultat obtenu sur le tableau pour tenir compte de la dilution
de lanticoagulant liquide ; cette majoration de 20 % est
compatible avec la prcision de la mthode.
Hmatocrite anormal : Le taux de fibrinogne est obtenu
en multipliant le rsultat trouv sur le tableau
1- TECHNIQUE MANUELLE
Dans un tube hmolyse introduire :
200 l
200 l
RECONSTITUTION ET STABILITE
Plasma dilu
Incuber 2 mn 37C
R1 pr-incub 37C
Automate
* Hte = Hmatocrite
VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l
200 l
BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa : Acta Haematol 17,137 (1957)
2- Caenj. Larrieu M.j. Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris 1975
3- Andrew M.et al.
Blood 70, 165 (1987)
200 l
45
FT Fr 33
Fvrier 2009
Biomaghreb
PRESENTATION
HEMOGLOBINE
R1 : 1 x 50 ml
R1 : 1 x 100 ml
R1 : 4 x 125 ml
Mthode colorimtrique
Stabilit de la coloration :
1 heure
(viter dexposer le milieu ractionnel une lumire
trop vive).
PRINCIPE
Dosage de lhmoglobine par transformation en
cyanmthmoglobine sous laction du ferricyanure de
potassium et de cyanure de potassium.
CALCUL
[Hemoglobine] g/l = DO
chantillon
x 376
REACTIFS
Ractif 1
de Drabkin
50 fois
concentr
VALEURS USUELLES
(Biochemists Handbook 1961)
Nouveaux-ns :
Enfants de 1 an :
Enfants de 10 ans :
Hommes :
Femmes :
ECHANTILLON
BIBLIOGRAPHIE
MODE OPERATOIRE
Solution de travail:
Ractif concentr de Drabkin R1.....................1 volume
Eau distille................................................. 49 volumes
Stabilit
1 mois 20-25 (ne pas placer au rfrigrateur).
Longueur donde :
Zro de lappareil :
Echantillon
Solution de travail
de Drabkin
20 l
5 ml
Homogniser et photomtrer.
FT Fr 34
Dc 2007
46
Biomaghreb
THROMBOPLASTINE
CALCIQUE
PRESENTATION
Rf. 30011, (240 Tests); 12 x 4 ml (Lyoph)
Dtermination du taux
de prothrombine (TP)
PRINCIPE
Le temps de Quick est un test global qui explore la
coagulation extrinsque (facteurs II, Vll, V et X).
Il consiste comparer les temps de coagulation dun
plasma tudier par rapport un tmoin normal servant
de rfrence en prsence dun excs de thromboplastine
tissulaire et de calcium.
REMARQUE
Un papier spcial est fourni avec chaque kit cette fin.
EXECUTION DU TEST
Toute dtermination doit tre faite en double.
Porter pralablement la thromboplastine 37 C.
Dans un tube hmolyse en verre mettre :
REACTIF
Plasma
100 l
Maintenir 2 mn 37
Thrombaplastine princub 37C 200 I
Conservation et stabilit:
* Lyophilis: entre 2-8C, jusqu la date limite indique
sur le coffret.
* Reconstitu : 30 jours + 4C
8h 37C
PRELEVEMENT
- Prlvement par ponction veineuse franche
- Eviter la stase veineuse et le prlvement la seringue.
- Prlvement sur citrate trisodique : un volume danticoagulant pour 9 volumes de sang.
- Centrifuger pendant 15 minutes 4000 tr/min (2500 g)
ou laisser sdimenter (indiffremment PRP ou PPP)
- Lexamen sera pratiqu 6h au plus tard aprs le
prlvement.
INR =
1/2
1/3
1/4
1/8
PLASMA (ml)
0,5
0,5
0,5
0,5
TAMPON (ml)
0,5
1,5
3,5
ACTIVITE %
100
50
33
25
12,5
Temps du tmoin
1/1
ETALONNAGE
DILUTIONS
VALEURS USUELLES
- Chez un sujet normal : 70 100 %
- Les taux suprieurs 100 % nont pas de
signification pathologique.
- Chez un sujet trait par les AVK la zone thrapeutique
recherche est entre 20 % et 30 %.
47
FT Fr 35
Juin 2008
Biomaghreb
HEMATOLOGIE
IMMUNOHEMATOLOGIE
Page
50
10 ml
10 x 10 ml
51
10 ml
10 x 10 ml
52
10 ml
10 x 10 ml
ANTICORPS MONOCLONAL
anti-D (IgM + IgG)
Rf. 30141
Rf. 30142
53
10 ml
10 x 10 ml
ANTIGLOBULINE POLYVALENTE
Rf. 30181
Rf. 30182
49
54
10 ml
5 ml
Biomaghreb
PRESENTATION
ANTICORPS MONOCLONAL
anti-A
REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine murine.
physiologique.
- Dposer dans un puit de la microplaque 25 I du
ractif et 25 I de la suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la plaque sur un agitateur adapt
pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minutes + 20C.
- Centrifuger 1 minute 200 - 300 g.
- Agiter la plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif (25 l de ractif
remplacs par 25 l deau physiologique).
- Lire loeil nu.
CONSERVATION
A + 4C Jusqu la date de premption indique. Agent
conservateur : Azide de Sodium 1 Strictement rserv
lusage in vitro.
PRELEVEMENT
Prlever le sang de prfrence sur anticoagulant. Sur
tube sec, bien dissocier le caillot.
Conserver + 4C le sang qui ne peut tre examin
rapidement (aucune hmolyse ne doit tre observe).
TECHNIQUES DUTILISATION
En tubes.
EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-A agglutine de faon visible les globules
rouges A3.
En microplaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
- Prparer une suspension des hmaties 5% en eau
FT Fr 36
Dc 2007
50
Biomaghreb
PRESENTATION
ANTICORPS MONOCLONAL
anti-AB
REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine murine.
CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur tiquette.
Agent conservateur: Azide de sodium 1.
Strictement rserv lusage in vitro.
PRELEVEMENT
Prlever le sang de prfrence sur anticoagulant. Sur
tube sec, bien dissocier le caillot. Conserver + 4 C le
sang qui ne peut tre examin rapidement (aucune
hmolyse ne doit tre observe).
TECHNIQUES DUTILISATION
En tube
En micro plaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
51
FT Fr 37
Dc 2007
Biomaghreb
PRESENTATION
ANTICORPS MONOCLONAL
anti-B
REACTIF
- Prparer une suspension des hmaties 5 % en eau
physiologique.
- Dposer dans un puit de la micro plaque 25 l de la
CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
ltiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1.
Strictement rserv lusage in vitro.
suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la plaque sur un agitateur adapt
pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minute + 20C.
- Centrifuger 1 minute 200 - 300 g.
- Agiter la plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif (25 l de ractif
remplacs par 25 l deau physiologique).
- Lire loeil nu.
TECHNIQUES DUTILISATION
En tube
PRELEVEMENT
EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-B agglutine de faon visible les globules
rouges B3.
En micro plaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
FT Fr 38
Dc 2007
52
Biomaghreb
PRESENTATION
ANTICORPS MONOCLONAL
anti-D (IgM + IgG)
REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine humaine en milieu
albumineux.
CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
tiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1 .
Strictement rserv lusage in vitro.
PRELEVEMENT
Prlever le sang sur anticoagulant.
Conserver + 4C le sang qui ne peut tre examin
rapidement (aucune hmolyse ne doit tre observe).
TECHNIQUES DUTILISATION
Sur plaque chauffante + 40C ( Rhsuscope ):
- Dposer cte cte 1 goutte de ractif et 1 goutte de
sang total non lav.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm diamtre.
- Basculer plusieurs fois le rhsuscope pour
homogniser le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.
EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-D monoclonal albumineux est capable
dagglutiner les chantillons D faibles en technique de
Coombs indirect (Standard ou Basse Force Ionique).
Pour chaque chantillon, il convient dutiliser
en
parallle un tmoin ngatif albumineux pour ractifs
monoclonaux albumineux anti-Rhsus. Labsence
dagglutination avec le tmoin permet daffirmer la
spcificit dune raction positive avec lanti-D.
53
FT Fr 39
Dc 2007
Biomaghreb
PRESENTATION
ANTIGLOBULINE
POLYVALENTE
REACTIF
CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
ltiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1
Strictement rserv lusage in vitro.
TECHNIQUES DUTILISATION
de
INTERPRETATION
Il est recommand de raliser les tmoins suivants :
FT Fr 40
Dc 2007
54
Biomaghreb
SEROLOGIE ET
TESTS RAPIDES
Page
ASO LATEX
56
Rf. 40037
Rf. 40023
50 tests
100 tests
CRP LATEX
57
Rf. 40034
Rf. 40043
50 tests
100 tests
58
50 tests
100 tests
STREPTOLYSINE ETALONNE
Rf. 40021
Rf. 40022
59
6 X 3 doses
10 x 3 doses
TPHA
61
Rf. 40011
Rf. 40012
100 test
300 test
UCG 25
62
Rf. 40032
Rf. 40033
Rf. 40034
55
20 bandelettes
100 bandelettes
40 bandelettes
Biomaghreb
ASO LATEX
PRESENTATION
LECTURE
PRINCIPE
REACTIFS
Latex ASO
Homogniser soigneusement
avant utilisation
Contrle positif
Flacon compte-gouttes
Prt lemploi
Contrle ngatif
Flacon compte-gouttes
Prt lemploi
Cartes
Agitateurs
INTERPRETATION
et
ECHANTILLONS
Srums frais ou conservs -20C , prsentant
une coagulation complte.
Rejeter tout srum lipmique ou contamin.
Ne pas utiliser de plasma.
MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (18-25C).
TEST QUALITATIF
BIBLIOGRAPHIE
Dc 2007
56
Biomaghreb
CRP LATEX
PRESENTATION
PRINCIPE
LECTURE
REACTIFS
Latex anti-CRP
Suspension aqueuse de
particules de latex sensibilises
Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)
Homogneiser avant utilisation
Contrle positif
Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)
Contrle ngatif
Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)
Cartes
Agitateurs
INTERPRETATION
Taux normal adulte 6 mg/l
La concentration en CRP augmente en cas de maladies
inflammatoires aigus et de tumeurs malignes.
Le suivi continu des patients prsentant une
concentration leve en CRP donne une bonne
indication de la rponse thrapeutique de ces malades.
BIBLIOGRAPHIE
Hind. C.R.K. and M.B. Pepys
nt. Med. 5-151 (1984).
Singer, J.M. et al.
Amer. J. Clin. Path. 28.611 (1957)
ECHANTILLONS
Srums frais ou conservs -20C depuis au moins un
mois, prsentant une coagulation complte.
Eliminer les srums fortement lipmiques.
MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (1 8-25C).
TEST QUALITATIF
Dposer successivement sur la carte:
-1 goutte du contrle positif
-1 goutte du contrle ngatif
-1 goutte (50 I) de srum tester.
- Placer ct de chaque dpt 1 goutte de Latex antiCRP bien homognis.
- Mlanger les 2 gouttes laide dun agitateur et les
taler.
- Imprimer la carte un mouvement de rotation et
observer lapparition ventuelle dune agglutination en 3
minutes.
57
FT Fr 42
Dc 2007
Biomaghreb
FACTEURS RHUMATOIDES
LATEX
PRESENTATION
Rf. 40036 (50 Tests)
Rf. 40024 (100 Tests)
PRINCIPE
LECTURE
REACTIFS
Ractif latex
de latex sensibilises
Flacon compte-gouttes
(1 goutte 50 I). Bien agiter
avant utilisation.
TEST SEMI-QUANTITATIF
Contrle positif
Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 I)
Contrle ngatif
Cartes
INTERPRETATION
Agitateurs
ECHANTILLON
Srum frais ou conservs -20C, prsentant une
coagulation complte.
Rejeter tout srum lipmique ou contamin.
MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (18-25C).
BIBLIOGRAPHIE
Ball, J. and Lawrence, J.S.: Ann. Rheum. Dis. 22,311
(1963) Jones, W.L. and Wiggins, G.L.: Amer. J. Clin. Path.
60, 603 (1973)
Singer, J.M. and Plotz, G.M.: Am. J. Med. 21, 888, (1956)
Singer, J.M. and Plotz, G.M.: JAMA, 168, 180 (1958)
Waaler, S.G. Bentzon, M.W., Houba, V. and Krag,
P.: Bull. Wld. Hth. Org. 42, 311 (1970).
TEST QUALITATIF
Dposer successivement sur la carte :
- 1 goutte du contrle positif
- 1 goutte du contrle ngatif
- 1 goutte (50 I) des srums tester
A ct de chaque dpt, ajouter 1 goutte de ractif
Latex bien homognis.
Mlanger laide dun agitateur.
Imprimer la carte un lent mouvement de rotation.
Noter lapparition dune agglutination en 2 minutes.
FT Fr 43
Dc 2007
58
Biomaghreb
STREPTOLYSINE
ETALONNEE
PRESENTATION
Rf. 40021
Rf. 40022
6 x 3 doses
10 x 3 doses
PRINCIPE
MACROMETHODE
ECHANTILLONS
- Les srums examiner ne doivent pas prsenter
dhmolyse. Ils doivent tre inactivs par chauffage
56C pendant 30 minutes (Dans le cas o lon utilise des
srums inactivs depuis plus de 24 heures, il est
recommand de les placer nouveau au bain-marie
56C pendant 10 minutes.
REACTIFS
- Lyophilisat de streptolysine
- Tampon streptolysine sous forme 10 fois concentr :
Il est diluer pour lemploi : 1 partie de tampon pour 9
parties deau distille, en cas de cristallisation, rechauffer
37C pour remettre les cristaux en solution.
- On utilise classiquement une suspension dhmatie de
lapin 1 % dans le tampon streptolysine 1x. Toutefois le
titre lev de la Streptolysine utilise permet dobtenir
des rsultats identiques avec des hmaties humaines du
groupe O trs soigneusement laves : 3 lavages en eau
physiologique. Le dernier culot est repris dans le
tampon streptolysine 1x.
- Reconstitution de la Streptolysine titre : enfoncer une
aiguille creuse travers le bouchon de caoutchouc de
manire remplir dair le flacon sans risquer de perdre
une partie de Iyophilisat.
Dcapsuler et dboucher le flacon pour y introduire
exactement 8 ml de solution isotonique tamponne.
Reboucher et favoriser la mise en solution par une
agitation modre. La Streptolysine est alors sous sa
forme active.
Tubes n
Dilutions
10
1/5
1/10
1/20
1/40
1/80
1/160
1/15
1/30
1/60
1/120
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
Solution isotonique
tampon
Dilution A
(srum 1/5)
0,25
Dilution B
(srum 1/15)
0,25
Strepto reconstitue
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
Agiter et laisser 10 mn la temprature du laboratoire
Suspension
dhmatites 1%
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
11
12
0,5
0,25
0,25
0,25
0,25
50
100
200
400
800
1600
150
300
600
1200
Pas
Hmolyse
de lyse
totale
Les taux normaux obtenus sont infrieurs 200 U.A.S. Un chiffre de 200 units ou au-dessus doit tre considr comme pathologique
59
FT Fr 44
Fv 2009
Biomaghreb
MICROMETHODE
1re RANGE
N DES CUPULES
Dillution de srum
1/5
Solution Isotonique
tamponne
Dilution du srum 1/5
2me RANGE
5
Tmoins
1/10 1/20 1/40 1/80 1/60 1/15 1/30 1/60 1/120 1/240 Hmatie Strepto
0,05 0,05 0,05 0,05 0,05
0,10
0,05
0,05 0,05
0,05
Mlange prcdent
Streptolysine
reconstitue
-->
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
-->
0,05 0,05
0,05
0,05
0,05 0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
50
100
200
400
800
1600 150
300
600
1200 2400
Les taux normaux obtenus sont infrieurs 100 UAS. Un chiffre de 200 units ou au dessus doit tre
considr comme pathologique.
60
Biomaghreb
TPHA
PRESENTATION
Rf. 40011
Rf. 40012
(100 Tests)
(300 Tests)
PRINCIPE
Des hmaties aviaires fixes sont sensibilises par un extrait de
treponema pallidum (S. Nichols).
Si lchantillon tester contient des anticorps spcifiques ceux-ci
forment un agglutinat avec les rythrocytes sensibilises.
Les chantillons ngatifs donnent un bouton dhmaties bien dfini
au fond de la cupule.
Les ractions non spcifiques sont dpistes par les cellules de
contrles (hmaties non sensibilises).
REACTIFS
*Srum :
Srum frais, le serum peut tre conserv 2 - 8C pendant 5 jours,
pour des priodes plus longues, les srums doivent tre congels
(-20 C)
*Plasma :
Des chantillons de plasma EDTA peuvent tre utilis pour
screening dans les banques de sang.
MODE OPERATOIRE
TEST QUALITATIF:
- Cupule n 1 : ajouter 10 I de srum tester 190 I de tampon
on obtient une dilution au 1/20.
- Mlanger soigneusement : distribuer 25 I de cette dilution dans
les cupules 2 et 3.
- Cupule n 2 : ajouter 75 I de cellules de contrle
- Cupule n 3 : ajouter 75 I de cellules test.
- Mlanger, couvrir la plaque, attendre 45 mn temprature ambiante,
labri de toute source de chaleur et de toute vibration.
Attention : Les srums de contrle positif et ngatif, qui doivent
tre introduits dans chaque srie, sont prdilus au 1/20 : ne faire que
les cupules 2 et 3.
TEST QUANTITATIF
Cupule
Tampon
25
25
25
25
25
25
25
Srum au 1/20
25
25
25
25
25
25
25
provenant de la
cupule 1 (l)
25
25
75
75
Dilution 1/N
80
160
75
75
75
75
75
Pour linterprtation des rsultats il est imperatif de les comparer avec les
agglutinats des srums de contrle.
Une agglutination dans la cupule 2 du test de dpistage indique la
prsence dagglutination non spcifique.
Dans ce cas traiter le srum de la faon suivante :
100 l de srum ajouter 400 l de cellules de contrle, agiter, et
attendre 1h la temprature du laboratoire, centrifuger 5 mn 1000
trs/mn ; recommencer le test avec le surnageant, sans oublier que le
srum se trouve dilu au 1/5 par ce traitement (le rediluer au 1/4 pour
obtenir lquivalent de la cupule 1).
Le contrle ngatif doit donner un rsultat ngatif
Le contrle positif doit donner un rsultat positif dans le test qualitatif et
raction positive jusqu le titre indiqu sur ltiquette du faon une
double dilution, dans le test quantitatif
Test qualitatif :
Un rsultat positif indique la prsence danticorps anti T pallidum
rsultant dune infection passe ou prsente.
Un rsultat ngatif indique labsence danticorps anti-T pallidum (voir
limites de la mthode). Un rsultat douteux dans le test qualitatif peut
correspondre a un taux bas danticorps dans les stades prcoces de syhilis
ou un taux rsiduel danticorps dans les syphilis traites. Dans ce cas,
une nouvelle chantillon supplmentaire pourra tre test pour dmontrer
une possible augmentation du titre des anticorps.
Test quantitatif :
Le titre approximatif correspondra la dernire dilution donnant une
raction.
Limites du test
75
*Bien que le srum est lchantillon type pour tous les tests de syphilis, des
chantillons de plasma EDTA peuvent tre utiliss pour screening dans les
banques de sang. Cependant, certaines ractions peuvent savrer
faussement positives. Dans ce cas, on devra renouveller lexprience avec
du srum sur tous les tests initialement positifs ou douteux.
*Les anticorps spcifiques peuvent persister pendant une longue priode,
mme aprs un traitemenl russi de la maladie. Afin destimer la rponse au
traitement, Iemploi dun test ragine (RPR reditest) est recommand. *La
technique TPHA peut donner des ractions croises avec dautres formes
dinfections a trponmes et des ractions faussement positives avec des
chantillons de patients atteints de la mononuclose infectieuse, de la lpre,
toxicomanes ou de maladies autoimmunes
Occasionnellement, dans certains cas de syphilis primaires prcoces, les
anticoprs spcifiques ne pourront pas tre dtects par la technique
TPHA.
61
FT Fr 45
Juin 2008
Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 40032
Rf. 40033
Rf. 40034
UCG 25
(20 Tests)
(100 Tests)
(40 Tests)
BANDELETTES
- Lchantillon urinaire peut se conserver 2 jours 4C.
Dans ce cas ramener lurine la temprature du
laboratoire avant essai.
- Si lessai doit tre diffr plus de 24 h lchantillon doit
tre congel. Avant lessai ramener lchantillon la
temprature du laboratoire.
PRINCIPE
La technique de ce test utilise la mthodologie CICA
(concured Immunochromatography Assay). Elle combine
dune part un anticorps monoclonal anti HCG li des
particules colores contenu dans du papier absorbant
fix sur la bandelette (Phase mobile). Dautre part un
anticorps polyclonal anti HCG fix sur une membrane
(phase stationnaire) elle mme fixe sur la bandelette.
Aprs que la bandelette ait t trempe dans lchantillon,
1- Prsence dHCG
LHCG prsente se lie au anticorps monoclonal anti HCG
et migre sur la membrane. Le complexe AntigneAnticorps se fixe alors sur lanticorps polyclonal anti HCG
greff sur la membrane de la phase stationnaire pour
former un trait de couleur rose-violet dans la zone de
raction. Le mlange ractionnel continuant de migrer,
teinte alors une bande rose-violet dans la zone de contrle
assurant que la raction sest droule correctement.
LECTURE
1- Test ngatif
Seule la bande colore correspondant au contrle
apparat dans la partie haute de la membrane montrant
que lessai sest bien droul.
2- Test positif
En plus de la bande contrle une 2me bande apparat
dans la partie basse de la membrane.
3- Test douteux
Un test sera douteux si aucune bande colore napparait.
ll est donc recommand de repter le test ou de le
renouveler sur un chantillon frais.
2- En absence dHCG
Seule la bande suprieure de la zone de contrle apparait
montrant que la raction sest droule correctement.
SENSIBILITE
UCG 25 dtecte en 5 minutes des concentrations de 25
U/ml de HCG (OMS 3me STANDARD).
Des chantillons contenant des concentrations de
200 000 mU/ml ont t tests et ont toujours donn des
rsultats positifs.
Caractristiques du test
Les concentrations suivantes dhormones ne gnrent
aucune raction croise :
h ISH
1 00 mUI/ml
500 mU/ml
h LH
1 000 mU/ml
h FSH
STOCKAGE ET STABILITE
UCG 25 bandelette doit tre conserv la temprature
du laboratoire : 20 25 C. l'abri de l'humidit.
Ne pas congeler.
BIBLIOGRAPHIE
1- SERUM
- viter lhmolyse
- si le test doit tre effectu dans les 48h, le srum doit
tre conserv 2 - 8C.
- si le test doit tre effectu aprs 48h, lchantillon doit
tre congel (- 20 C).
Dans les deux cas lchantillon doit tre ramen
temprature ambiante et bien homognis avant le test.
2- URINE
- Le diagnostic de la grossesse se pratique de prfrence
sur les urines de la 1re miction du matin contenant une
forte concentration dHCG.
- Les chantillons durine doivent tre recueillis dans une
verrerie propre (absence de dtergent) et sans conservateurs.
FT Fr 46
Oct 2008
Biomaghreb
CONTROLE
5 minutes
SERUM OU
URINE
NEGATIVE
63
POSITIVE