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Biomaghreb

PRIX
QUALITE
& SERVICES

Biomaghreb

SOMMAIRE

PAGES

INDEX ALPHABETIQUE
BIOCHIMIE / ELECTROLYTES

8 - 13

BIOCHIMIE / ENZYMES

16 - 23

BIOCHIMIE / SUBSTRATS

26 - 39

HEMATOLOGIE / HEMOSTASE

42 - 47

IMMUNOHEMATOLOGIE / HEMATOLOGIE

50 - 54

SEROLOGIE ET TESTS RAPIDES

56 - 63

Biomaghreb

INDEX
ALPHABETIQUE
DESIGNATION

Rf

ACIDE URIQUE
ALBUMINE
ALPHA-AMYLASE
ANTICORPS MONOCLONAL anti-A
ANTICORPS MONOCLONAL anti-AB
ANTICORPS MONOCLONAL anti-B
ANTICORPS MONOCLONAL anti- D
ANTIGLOBULINE POLYVALENTE
ASO LATEX
AUTO FIBRI 1
AUTO FIBRI 2

20031
30111
30131
30121
30141
30181
40037
30033
30034

26
27
16
50
51
52
53
54
56
42
43

BILIRUBINE DIRECTE
BILIRUBINE TOTALE
BILIRUBINE TOTALE ET DIRECTE

20102
20103
20101

28
29
30

CALCIUM
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
CAPACITE TOTALE DE FIXATION
DU FER

20051

201010

31

20062

20091

Page

Biomaghreb
DESIGNATION

Rf

Page

CEPHALINE KAOLIN
CHLORURE DE CALCIUM
CHOLESTEROL
CHOLESTEROL-HDL
CREATININE
CREATINE KINASE
CRP LATEX

30021
30051
20111
20113
20151
20006
40034

44
44
32
33
34
17
57

FACTEURS RHUMATOIDES LATEX


FER FERROZINE
FIBRINOGENE

40036
20061
30031

58
10
45

HEMOGLOBINE

30041

46

GAMMA GT
GLUCOSE
GOT- ASAT
GPT-ALAT

20021
20121
20042
20046

18
35
19
20

LDH

20011

21

MAGNESIUM

20071

11

Biomaghreb

DESIGNATION

Rf

Page

PHOSPHATASE ALCALINE DGKC


PHOSPHORE COLOR
PHOSPHORE UV
PROTEINES TOTALES

20015
20181
20083
20161

22
12
13
36

STREPTOLYSINE ETALONNEE

40022

59

THROMBOPLASTINE
TPHA
TRANSAMINASES COLOR
TRIGLYCERIDES

30011
40011
20041
20131

47
61
23
37

UCG
UREE COLOR
UREE UV

40032
20141
20142

62
38
39

Biomaghreb

BIOCHIMIE
ELECTROLYTES
Page
CALCIUM
Rf. 20051
Rf. 20054

2 x 160 ml
2 x 125 ml

CAPACITE TOTALE DE FIXATION DU FER


Rf. 20062
Rf. 20063

50 ractions
100 ractions

FER FERROZINE
Rf. 20061
Rf. 20064

2 x 100 ml
5 x 100 ml

10

Rf. 20071
Rf. 20074

2 x 160 ml
2 x 125 ml

11

MAGNESIUM

PHOSPHORE METHODE COLORIMETRIQUE


Rf. 20081
Rf. 20082
Rf. 20084

100 tests
200 tests
250 tests

12

Rf. 20083

320 tests

13

PHOSPHORE UV

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20051, (320 Tests)
R1 : 2 x 80ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 4 ml

CALCIUM

Rf. 20054, (250 Tests)


R1 : 1 x 125 ml
R2 : 1 x 125 ml
R3 : 1 x 3 ml

Mthode colorimtrique
CALCUL

PRINCIPE
Le calcium forme avec le complexant crsolphtaline en
milieu alcalin un compos color en violet dont lintensit
est proportionnelle la concentration en calcium.

D.O. Echantillon
xn

REACTIFS
Ractif 1

Tampon Alcalin

n = Valeur du standard

D.O. Standard
mg/l
mg/dl
mmol/l

500 mmol/l

n = 100
n = 10
n = 2,5

Solution tampon 2-Amino-2-methyl


1 -Propanol
Ractif 2
Solution
chromogne

Complexant crsolphtaline 0.62 mmol/ll


Hydroxy 8 quinoline

69 mmol/l

Rsctif 3
Standard

Standard calcium

10mg/dl
100 mg/l
2.5 mmol/l

LINEARITE
La mthode est linaire jusqua 150 mg/l (3,75 mmol/l).
si la concentration est leve, diluer lchantillon
au 1/2 dans une solution de NaCI 9 g/l. Multiplier le
rsultat par 2.
VALEURS USUELLES
Srum

Nouveau-ns

PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de ractif
R2.
Stabilit :
4 heures 20 - 25C
20 heures 2-8C

Enfants

10.0 -11 mg/dl


2.50 - 2.87 mmol/l

Adultes

9.0 - 10.6 mg/dl


2,25 - 2,65 mmol/l

ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine.
Urine dilue au 1/3 avec de leau distille, acidifie
pH : 3,4 avec HCI dilu.

Urine

Nouveau-ns

MODE OPERATOIRE
570 nm (550-590)
Longueur donde :
Temprature :
20 - 25C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Blanc

Standard

--

20 l

--

Echantillon

--

--

20 l

1 ml

1 ml

1 ml

Dc 2007

Enfants

2-6 mg/kg/24h
0,05-0,150mmol/kg/24h

Adultes

150 - 300 mg/24h


3,5 - 7,5 mmol/24h

NOTES
Utiliser du matriel plastique usage unique pour
toutes les manipulations. La prsence dans certains
dtergents de chelateurs tel que lEDTA peut empcher
dans certains cas la formation du complexe color.
BIBLIOGRAPHIE
Stern J., Lewis W.H.P., Clin. Chim. Acta 2, 576 (1957)

Mlanger et Incuber 5 minutes temprature


ambiante, Lire les densits optiques.
La coloration est stable 1 heure.

FT Fr 01

1-8 mg/kg/24h
0,025-0,2mmol/kg/24h

Echantillon

Standard

Mlange ractif

7.5 - 12 mg/dl
1,87 - 3 mmol/l

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20062, (50 Tests)
R1 : 1 x 100 ml
R2 : 2 x 5 g

CAPACITE TOTALE
DE FIXATION DU FER

Rf. 20063, (100 Tests)


R1 : 2 x 100 ml
R2 : 2 x 10 g

Kit Complmentaire
Rf : 20061
Rf : 20063

Fer Ferrozine
Fer SFBC

PRINCIPE
La capacit totale de fixation du fer est value aprs
saturation de la transferrine par une solution de fer et
adsorption de lexcs sur hydroxycarbonate de
magnsium. La dtermination du fer est ensuite
ralise laide du coffret fer ferrozine (Rf. 20061) ou
Fer SFBC (Rf 20063).

MODE OPERATOIRE
Echantillon

1 ml

Ractif 1

2 ml

Mlanger, incuber 5 minutes puis ajouter:

REACTIFS

Ractif 2

Ractif 1
Solution saturante de fer

Fer

Ractif 2
Adsorbant

Hydroxycarbonate
de magnsium

5 mg/l
89,5 mol/l

2 mesures pleines
environ 200 mg.

Attendre 20 minutes en agitant plusieurs fois.


centrifuger 10 minutes environ 3000 tr/mn.

Determination de la C.T.F.
Doser le fer dans le surnageant en utilisant les kits
suivants :
- fer ferrozine
Rf : 20061
- fer SFBC
Rf : 20063

PREPARATION ET STABILITE
Les ractifs sont prts lemploi et stables jusqu la
date de premption indique sur ltiquette.

En cas de dosage du fer et de la capacit totale de


fixation, il est souhaitable de commencer par la
saturation de la transferine et ensuite de mener
paralllement le dosage du fer srique et de la capacit
totale de fixation.
Tenir compte de la dilution 1/3 pour le calcul.

ECHANTILLONS
Srum non hmolys. Le prlevement peut tre
conserv 7 jours entre 2 et 8C ou plusieurs semaines
congel - 20C.

VALEURS USUELLES
44,5 - 73,5 mol/l
249 - 412 g/dl

NOTE
La contamination par le fer tant une des causes
principales derreur, lusage de pipettes et de cuves en
matire plastique et usage unique est recommand.

FT Fr 02

Dc 2007

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20061, (100 Tests)

Rf. 20064, (250 Tests)

R1
R2
R3
R4

R1
R2
R3
R4

:
:
:
:

2
1
1
1

x
x
x
x

100ml
2,5g
5 ml
10 ml

:
:
:
:

5
1
1
2

x
x
x
x

FER FERROZINE

100ml
5g
12 ml
10 ml

(Mthode colorimtrique)

PRINCIPE
A pH 4,8 le fer Ferrique (Fe +++) est libr
instantanment de la transferrine. Lacide ascorbique le
rduit en fer ferreux (Fe++). La ferrozine forme avec le
fer ferreux, un complexe color soluble, mesurable de
560 580 nm.
La prsence de thioure permet dliminer linterfrence
des ions cuivreux.

Eau distille
Standard R4
Echantillon
Ractif A
Ractif B

Guanidine, HCI
Tampon actate pH 5

Standard

200 l
1 ml

200 l
1 ml

Blanc
chantillon
chantillon
200 l
1 ml
-

200 l
1 ml

Mlanger attendre 10 minutes puis lire les densit optiques.


Stabilit de la coloration : 30 minutes

REACTIFS
Ractif 1

Blanc
Ractif

4,5 mmol/l

CALCUL
(DO Echant. - DO blanc Echant.)
Fer srique =

Ractif 2

Acide ascorbique

Ractif 3

Ferrozine

40 mmol/l

Ractif 4

Standard

1 mg/l
17,9 mol/l

xn
DO Standard

mg/l
mol / l

:n=1
: n = 17.9

LINARIT
jusqu 1000 g/dl (179,7 mol/l)

PREPARATION ET STABILITE

VALEURS USUELLES

Dissoudre le contenu dune cuillre dacide ascorbique


(environ 250 mg) dans 50 ml de ractif 1 (ractif A).
Ajouter 40 I de ferrozine dans 1 ml de ractif A (ractif B)
Le ractif B est prpar extemporanment.
Conservs + 4C, les ractifs sont stables jusqu la
date de premption indique sur les flacons.
Aprs prparation, le ractif B est stable:
3 jours 20 - 25C
2 semaines 2 - 8C

Hommes
Femmes

NOTES : Lutilisation de matriel en verre ncessite un


trempage de plusieurs heures dans de lacide
chlorhydrique 2N puis un rinage soigneux leau
distille.Il est prferable dutiliser du matriel plastique
usage unique.
les doses leve danticoagulant (Hparine) peuvent
provoquer des troubles dans le mlange ractionnel.
Les volumes suggrs peuvent tre modifis
proportionnellement sans aucune interfrence dans le
calculs.

ECHANTILLON
Srum, plasma hparin non hmolys

MODE OPERATOIRE
562 nm (530-590)
Longueur donde :
20 - 25C
Temprature :
Cuve :
1 cm dpaisseur
Zro de lappareil :
- Ractif A pour les Blancs Echantillons
- Blanc Ractif pour le standard et les chantillons

FT Fr 03

Dc 2007

69-158g/dl
12,5-28,3 mol/l
59-145 g/dl
10,7-26,0 mol/l

BIBLIOGRAPHIE
Persijn et al Clin. Chem. Acta 35,91 (1971)
Stoockey L. Anal. Chem. 42,779 (1970)
Williams et al. Clin. Chem. 23,237(1977)

10

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20071, (320 Tests)
R1 : 2 x 80 ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 5 ml

Rf. 20074, (250 Tests)


R1 :1 x 125 ml
R2 : 1 x 125 ml
R3 : 1 x 3 ml

MAGNESIUM

CALCUL

PRINCIPE
Le magnsium forme un complexe color avec la
calmagite en milieu alcalin. La prsence dEGTA rend la
raction spcifique.
Lintensit de la coloration produite est proportionnel la
concentration en magnsium.

D.O Echantillon
magnesium
mg/dl
mg/l
mmol/I
Urine

REACTIFS

:
:
:
:

D.O Standard

n=2
n = 20
n = 0,824
multiplier le rsultat par le facteur de dilution

Ractif 1 Tampon Amino-Mthyl propanol


1 mmol/l
EGTA
0,20 mmol/l

LINEARITE

Ractif 2 Calmagite

VALEURS USUELLES

Jusqu 50 mg/l (5 mg/dl - 2,06 mmol/l)

0,30 mmol/l

Ractif 3 Standard magnsium

xn

2 mg/dl
20 mg/l
0,824 mmol/l

Srum, Plasma

1,6 - 2,5 mg/dl


16 - 25 mg/l
0,65-1,05 mmol/l

Urine

PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de
ractif R2.
Stabilit du ractif de travail : 24 heures 20-25C
4 jours 2-8C

0,65 - 12,5
mmol/24h

NOTES
Utiliser uniquement du matriel plastique usage unique.

ECHANTILLONS

BIBLIOGRAPHIE

Srum, plasma recueilli sur hparine


Urine dilue au 1/10 avec de leau distille, acidifie
pH 3,4 avec de lHCI dilu.

Gindier E. Clin. Chem. 17, 662, (1971).

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :...................520 nm (500 - 550)
Temprature :............................20-25C
Cuve :........................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.

Blanc

Standard

Echantillon

Standard

10 l

Echantillon

10 l

1 ml

1 ml

1 ml

Ractif de travail

Mlanger, lire les DO aprs une incubation de


5 minutes. Stabilit de la coloration : 1 heure.

11

FT Fr 04

Juin 2008

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20081, (100 Tests)
R1: 1 x 100 ml
R2: 1 x 100 ml
R3: 1 x 4 ml
R4: 1 x 70 ml

Rf 20082, (200 Tests)


R1: 2 x 100 ml
R2: 2 x 100 ml
R3: 1 x 10 ml
R4: 1 x 120 ml

Rf 20084, (250 Tests)


R1: 2 x 125 ml
R2: 2 x 125 ml
R3: 1 x 10 ml
R4: 1 x 125 ml

PHOSPHORE
Mthode colorimtrique

PRINCIPE

CALCUL

En milieu alcalin, le complexe phospho-molybdate est


rduit en complexe phosphomolybdique de couleur bleu
et dont lintensit est proportionnelle la concentration
en phosphore.

DO Echantillon
xn
DO Etalon
mg/l
n = 50
mmol/l
n = 1.61
Urines : multiplier par 5 le rsultat obtenu.

REACTIFS
R1

R2
R3
R4

Ractif rducteur :
Chlorydrate dhydroxylamine
Polyvinilpyrrolidone
Acide sulfurique

0.14 mmol/l
10 g/l
89.63 mmol/l

LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 150 mg/l (4,8mmol/l).
Si la concentration est plus leve, diluer lchantillon
et refaire le test.

Sel de molybdate dammonium 6.07 mmol/l


Etalon
50 mg/l
1.61 mmol/l
Solution de soude 2 N

VALEURS USUELLES
Srum

PREPARATION ET STABILITE
Mlanger 1 volume de ractif R1 avec 1 volume de R2
Stabilit : 4 heures 20-25C
1semaine + 4C

Enfants
Adultes

ECHANTILLONS

Urine

- Srum ou plasma recueilli sur hparine.


- Urine dilue au 1/5 dans leau distille.

1,10 - 2,10 mmol/l


43 - 65 mg/l
0.90 - 1,45 mmol/l
28 - 45 mg/l
12 - 42 mmol/24 h
0.272- 1.3 g/24 h

MODE OPERATOIRE

NOTES

Longueur donde :...................................680 nm


Temprature :..........................................T laboratoire
Cuve .......................................................1 cm
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.

Utiliser du matriel plastique usage unique pour


toutes les manipulations.

BIBLIOGRAPHIE
Clin. Chim. Acta. 15, 155 (1967).

Eau distille
R3 Etalon
Srum ou
urine 1/5
Mlange
ractionnel

Blanc Ractif

Etalon

Echantillon

50 I

--

--

--

50 I

--

--

-50 I

2 ml

2 ml

2 ml

Bien mlanger, laisser 2 minutes la temprature


du Laboratoire (prsence dun trouble pour lchantillon).
R4

0,5 ml

0,5 ml

0,5 ml

Mlanger (le trouble disparait). Laisser 15 minutes


temprature du laboratoire, lire 680 nm.
La coloration est stable 1 heure temprature du
laboratoire.
FT Fr 06

Dc 2007

12

Biomaghreb
PRESENTATION

PHOSPHORE

Rf. 20083, (320 Tests)


R1 : 4 x 80 ml
R2 : 1 x 10 ml

Mthode U.V.

PRINCIPE

CALCUL

Le phosphore inorganique est dos selon la raction


suivante:

Phosphore =

D.O. Echantillon

mg/dl
mg/l
mmol/l
Urine

Labsorption de ce complexe 340 nm est proportionnelle


la concentration en phosphore.

Ractif 2
Standard

:
:
:
:

n=5
n = 50
n = 1,61
multiplier le rsultat par 10

LINEARITE

REACTIFS
Ractif 1

xn
D.O. Standard

Phosphore
Molybdate dAmmonium + Acide Sulfurique
Complexe
phospho-molybdique

Jusqu 200 mg/l (20 mg/dl - 6,46mmol/l).


Acide sulfurique
Molybdate dammonium
Dtergent
Standard phosphore

200 mmol/l
0,40 mmol/l
O.S

VALEURS USUELLES

5 mg/dl
50 mg/l
1.61 mmol/l

Adultes

2,5-5,0 mg/dl
25-50 mg/l
0,81-1,61 mmol/l

Enfants

4,0 - 7,0 mg/dl


40 - 70 mg/l
1,29 - 2,26 mmol/l

Urines

6,5-48,5 mmol/24h
0,5-1,5g/24

STABI LITE
La stabilit des ractifs est indique sur chaque
conditionnement.

ECHANTILLONS

NOTES

Srum, plasma (non hmolyss)


Urine dilue 1/10 avec de leau distille.

Si lechantillon est lipmique faire un blanc en


mlangeant 10 l dchantillon avec 1 ml de solution de
NaCI 9g/l et lire la densit optique 340 nm.

MODE OPERATOIRE

BIBLIOGRAPHIE

Longueur donde :...................................340 nm


Temprature :..........................................20-25C
Cuve......................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Blanc
Standard

--

Echantillon

--

Ractif de travail

1 ml

Etalon
10 l

Daly J.A, Ertingshaussen G., Clin. Chem., 18, 263 (1972).


NB: Le standard est une solution aqueuse. Il est
prfrable dutiliser des talons dorigine srique en
particulier, pour des raisons de viscosit sur les
analyseurs automatiques.

Echantillon
--

--

10 l

1 ml

1 ml

Mlanger et lire les DO aprs une incubation de 5


minutes.
La coloration est stable 30 minutes.

13

FT Fr 07

Dc 2007

Biomaghreb

BIOCHIMIE
ENZYMES
Page

AMYLASE

16
Rf. 20031
Rf. 20032
Rf. 20033

20 x 3 ml
30 x12 ml
10 x 10 ml

CREATINE KINASE LS

17

Rf. 200063
Rf. 200071
Rf. 200072

60Tests
150Tests
100Tests

GAMMA GT

18
Rf. 20021
Rf. 20022
Rf. 200222

20 x 3 ml
10 x10 ml
13 x10 ml

GOT-ASAT

19
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.

20042
20043
20050
200492

20 x 3
10 x10
9 x 50
2 x 110

ml
ml
ml
ml

GPT - ALAT

20
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.

20046
20047
20040
200462

20 x 3
10 x 10
9 x 50
2 x 110

ml
ml
ml
ml

LDH

21
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.

20011
20012
200123
200125
200126

PHOSPHATASES ALCALINES
PAL DGKC
Rf. 20015
Rf. 20016
Rf. 20017
Rf. 20018

20 x 3
10 x 10
9 x 50
15 x 10
2 x 55

ml
ml
ml
ml
ml
22

20 x 3
10 x 10
4 x 30
5 x 50

ml
ml
ml
ml

TRANSAMINASES METHODE COLORIMETRIQUE


Rf.
Rf.
Rf.
Rf.
15

20039
20041
20048
20049

200
100
100
100

tests
tests
tests
tests

23

Biomaghreb
PRESENTATION

ALPHA AMYLASE

Rf. 20031, (60 Tests) 20 flacons x 3 ml : Ractif prt lemploi


Rf 20032, (360 Tests) 30 flacons x 12 ml : Ractif prt lemploi
Rf 20033, (100 Tests) 10 flacons x 10 ml : Ractif prt lemploi

Dtermination Cintique
Colorimtique Directe
CNPG3

PRINCIPE
Dtermination cintique en colorimtrie de lactivit
amylase du srum, plasma ou urine selon la raction :

MODE OPERATOIRE

5 CNPG3 -amylase 3 CNP + 2 CNPG2 + 2 G3 + 2 Glucose

Temperature.......................................................37C

Longueur donde............................................405 nm
Cuve...................................................1 cm paisseur

L-amylase hydrolyse le 2-chloro-4-nitrophenyl-Dmaltotrioside (CNPG3) pour librer le 2-chloronitrophenol


et former le 2-chloro-4- nitrolphenyl--D-maltoside
(CNPG2), le maltriose (G3) et le glucose (G). La vitesse
de formation du 2-chloro-nitrophenol mesure par la
variation de la densit optique 405 nm par minute est
proportionnelle lactivit -amylase dans lchantillon.

Ajuster le Zro du spectrophotomtre sur lair ou leau


distille.
Dans un tube introduire
Ractif -amylase
Equilibrer 37C

1000 l
Srum 25 l
ou Urine 10 l

Echantillon

REACTIFS
Ractif CNPG3 prt lemploi renferme:
2-chloro-4-nitrophenyl-Dmaltotrioside (CNPG3)
Tampon MES pH = 6
NaCL
Ca (CH3 COO)2
KSCN
Azide Sodium

Mlanger-Attendre 1 minute Mesurer laugmentation


moyenne de DO par minute pendant 1 3 min.

2.5 mmol/l
50 mmol/l
250 mmo/l
4.5 mmol/l
375 mmol/l
152 mmol/l

CALCUL
amylase (U/L) Srum = D.O / min / x 3178
amylase (U/L) Urine = D.O / min / x 7829

LINEARITE
La raction est linaire jusqu 2000 U/L.
Si la DO par min est > 0.630 refaire la determination
en diluant lchantillon au 1/10 avec NaCL 0.9 g/l.

PREPARATION ET STABILITE
- Le ractif fourni est prt lemploi.
- Le ractif est stable 2-8 jusqu la date dexpiration,
et il est stable 30 jours temprature (20-25C).
- Ne pas utiliser le ractif si la DO du blanc ractif est
suprieure 0.500 405 nm

VALEUR USUELLES
37C
Srum, plasma

< 100 U/l

Urine

< 380 U/l

ECHANTILLON
- Srum ou plasma recueilli sur hparine ou iodo-actate
(EDTA ou citrate ne doivent pas tre utiliss).
- Hmolyse gnante
- Urine

BIBLIOGRAPHIE
Kaufman RA. Tietz NW-Clin Chem. 26: 8461 (1980)
Ranson JHC.Curr Prob Surg, 16:1 ( 1979)
Young DS. et al, v. clin chem, 21 (1975).

REMARQUES
Le ractif doit tre conserv entre 15 - 25C avant son
utilisation. NE PAS PIPETER PAR LA BOUCHE afin
dviter la contamination par lamylase salivaire.

FT Fr 08

Dc 2007

16

Biomaghreb
PRESENTATION

CREATINE KINASE LS

Rf. 200063, (60 Tests)


R1: 2 x 24 ml

Rf 200071, (150 Tests)


R1: 5 x 24 ml

Rf 200072, (100 Tests)


R1: 6 x 24 ml

R2: 2 x 6 ml

R2 : 5 x 6 ml

R2 : 6 x 6 ml

CK-Nac activ, IFCC mthode


MODE OPERATOIRE
1- Dclenchement de la raction par le serum

PRINCIPE
Dtermination cintique de la cratine kinase ractive
par la N.acetylcystene selon les ractions suivantes:
CK
Cratine phosphate + ADP
cratine + ATP
D- Glucose + ATP

HK

Longueur donde :
Temprature
cuvette
Zero de lappareil

D-Glucose- 6 P + ADP

D-Glucose-6-phosphate- NADP

G-6PDH

Semi-Micro
1000l
40l

Micro
500l
20l

mlanger et incuber 2 minutes , mesurer la variation de labsorbance


par minutes pendant 1 3 min

CK = cratine kinase
HK= Hexokinase
G-6-PDH=Glucose-6-phosphate deshydrogenase.
Lactivit catalytique de la CK est determine en mesurant la vitesse dapparition du NADPH+H+ 340 nm.

Calcul
Macro
4130
4207
7429

340nm A/min.x
Hg 334nm A/min.x
Hg 365nm A/min.x

Semi-Micro
4130
4207
7429

Micro
4130
4207
7429

2- Dclenchement de la raction par le substrat (R2)

REACTIFS

Ractif 2 : Substrat
N-Acetyl cysteine
Cratine phosphate
ADP
AMP
NADP
Diadenosine pentaphosphate
Hexokinase
Glucose-6-phosphate deshydrogenase

Macro
2500l
100l

Ractif de travail
chantillon

D-Gluconate-6-P+
NADPH+H

Ractif 1
Tampon imidazole Acetate pH : 6.7
Glucose

340nm.Hg 334 ou Hg 365 nm)


+25 / +30 / +37C
1 cm de trajet optique
air ou eau distille

Longueur donde :
Temprature
cuvette
Zero de lappareil

100 mmol/l
20 mmol/l

340nm.Hg 334 ou Hg 365 nm)


+25 / +30 / +37C
1 cm light path
air ou eau distille
Macro
2000l
100l
500l

R1
chantillon
R2

20 mmol/l
30 mmol/l
5 mmol/l
5 mmol/l
2 mmol/l
10 mol/l
2500 Ul/l
1500 Ul/l

Semi-Micro
800l
40l
200l

Micro
400l
20l
100l

mlanger et incuber 2 minutes , mesurer la variation de labsorbance


par minutes pendant 1 3 min.

Calcul
340nm A/min.x
Hg 334nm A/min.x
Hg 365nm A/min.x

PRELEVEMENT
Serum ou plasma prlev sur hparine non hmolys ou
sur EDTA
- lchantillon est stable :
7 jours : 2 - 8C
2 jours : 20 - 25C

Macro
3965
4039
7132

Semi-Micro
3965
4039
7132

Micro
3965
4039
7132

LINEARIT
Jusquau 900 U/l 37 C si la /min est suprieure 0,200 (340 ou 334 nm)
recommencer la mesure sur une dilution du serum dans une solution de chlorure
de sodium 9 g/l. Multiplier le rsulat par le facteur de dilution appliqu.

VALEURS USUELLES

PREPARATION ET STABILIT DU REACTIF DU


TRAVAIL
1- Dclenchement de la raction par le srum

Hommes
Femmes

mlanger 4 volumes de R1 avec un volume de R2


cette solution est stable :
10 jours 2 - 8C
1 jour 20 - 25C

25C
10-80 U/l
10-70 U/l

30C
15-130 U/l
15-110 U/l

37C
25-195 U/l
25-170 U/l

Dans tous les cas chaque laboratoire doit tablir ses propres valeurs
de rfrence.

BIBLIOGRAPHIE
Bablok W. et al. A genral Regression Procedure for Method
1- transformation

Non entamm, le ractif est stable jusqu la date de


Premption, conserv 2 - 8C.

JClin Chem Clin Biochem 1988 ; 26 : 78-790


Black H.R. Quallich H gareleck CB. Racial diffrences in serum
2- Creatine kinase levels Am J Med 7986 ; 81 : 479-487
GLick M.R, Ryder KW, Jackson SA. Graphital Comparisons of
3- Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem
1986 ; 32 ; 470-474. Passing
H. Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of
Measurements from Two Different Analytical Methods. J Clin Chem
Clin Biochem 1983 ; 21 : 707-720.
Guder W. G., Narayanan S., Wisser H., Zawta B. List of Analytes Preanalytical
4- Variables, Brochure in Samples : From The Patient to the Laboratory.
Darnstadt GIT Veriag 1996

2- Declenchement de la raction par le substrat (R2)


R1 : Prt lemploi
R2 : Prt lemploi
Une fois ouvert , la stabilit est de :
R1 : 21 jours
R2 : 21 jours
temprature du laboratoire
17

FT Fr 47

Oct 2008

Biomaghreb
GAMMA GT

PRESENTATION
Rf. 20021, (60 Tests)
R1 : 1 x 65 ml
R2 : 20 x 3 ml (Iyoph)

Rf. 20022, (100 Tests)


R1 : 1 x 110 ml
R2 : 10 x 10 ml (Iyoph)

Mthode colorimtrique cintique


(IFCC)

Rf. 200222, (125 Tests)


R1 : 1 x 140 ml
R2 : 13 x 10 ml (Iyoph)

CALCUL

PRINCIPE
Dtermination cintique de la Gamma Glutamyl
transfrase selon la raction suivante:

405 nm : Ul/l = DO/mn x 1190


410 nm : Ul/l = DO/mn x 1339

GGT
Glupa Carboxy + glycylglycine -> T L- Y Glutamylglycylglycine
+ 5 amino 2 nitrobenzoate

LINARIT
La mthode est linaire jusqu 500 U/l 37C.
Si lactivit est suprieure, rpter le test en diluant le
srum au 1/10 avec une solution de NaCI 9 g/l.
Multiplier le rsultat par 10.

REACTIFS
Ractif 1 Tampon Glycylglycine
Solution tampon pH 7,9 30 C
Ractif 2
Substrat

150mmol/l

VALEURS USUELLES
25C

Glupa Carboxy

6 mmol/l

PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le subtrat R2 par 3 ml (rf 20021) ou 10 ml
(Rf 20022 et 200222) de tampon R1.
Le ractif de travail est stable
7 jours 20-25C
1 mois +4C

30C

37C

Hommes

6 - 28 U/l

8 - 38 U/l

11 - 50

Femmes

4 - 18 U/l

5 - 25 U/l

7 - 32

NOTES
Plasmas contenant des Citrates, Oxalates ou de lEDTA
ne peuvent pas tre utiliss dans ce test.

ECHANTILLON
Srum non hmolys

BIBLIOGRAPHIE

MODE OPERATOIRE

Lum G. and Gabino S.R. Clin. Chem. 18, 358 (1972)


Szasz G., Clin. Chem., 15, 124 (1969)

Longueur donde :405 nm (410)


Temprature :25, 30 ou 37 C
Cuve :................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.

Solution de travail

1 ml

3 ml

Princuber la temprature choisie (25, 30 ou 37)


Echantillon

100 l

300 l

Mlanger et Incuber 1 minute.


Mesurer laugmentation de la densit optique par
minute pendant 1 3 minutes.

FT Fr 10

Dc 2007

18

Biomaghreb
PRESENTATION

GOT-ASAT

Rf.20042,(60 Tests)

Rf 20043,(100 Tests)

Rf. 20050, (450 tests)

Rf. 200492, (220 tests)

R1: 1 x 65 ml

R1: 1 x 110 ml

R1 : 9 x 50ml

R1 : 2 x 110 ml

R2: 20 x 3 ml (Iyoph)

R2: 10 x 10 ml (Iyoph)

R2 : 9 x 50 ml (Iyoph)

R2 : 2 x 110 ml (Iyoph)

Mthode cintique IFCC


sans phosphate de pyridoxal
CALCUL

PRINCIPE

DO/min x 1750 = U/l

340 nm

Dtermination cintique de lactivit aspartate


aminotransfrase.
La raction est initie par addition de lchantillon du
patient au ractif. Le schma ractionnel est le suivant:

LINEARITE

2 oxoglutarate + L-Aspartate GOT Glutamate + oxaloacetate

Si la DO/min 340 nm est suprieure 0.15, rpter le


test en diluant lchantillon au 1/10 avec une solution de
NaCI 9 g/l. Multiplier le rsultat par 10.

Oxalocetate + NADH + H+ MDH Malate + NAD+

VALEURS USUELLES

Le taux de diminution de la concentration en NADH


est directement proportionnel lactivit aspartate amino
transferase dans lchantillon.
GOT: Transaminase flutanique oxaloactique
MDH: Malate Dehydrogenase

25C

REACTIFS

30C

37C

Femmes

jusqu 16 Ul/l

Jusqu 22 Ul/l

Jusqu 31UI/I

Hommes

jusqu 19UI/I

Jusqu 26 Ul/l

Jusqu 38UI/I

REMARQUE

Ractif 1
SolutionTampon

Tampon Tris PH 7.8 30C 80 mmol/l


L- aspartate
200 mmol/l

Ractif 2
Substrat

NADH
LDH
MDH
Oxoglutarate

Lhmolyse peut interfrer.

BIBLIOGRAPHIE

0.18 mmo/l
800 U/l
600 U/l
12 mmol/l

Bergmeyer H; Bower and Cols. Clin. Chim Acta 70,


(1976)
Bergmeyer H et Wahiegeld Clin. Chem 24, 58 (1978).
minutes.

PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le substrat R2 par 3 ml Rf (20042) ou10 ml
Rf (20043) de Tampon R1. Pour les Rf (20050)
et (200492) reconstituer chaque R2 par un flacon R1.
cette solution de travail est stable : 7 jours 2-8C.
: 24 heures 20-25C.

ECHANTILLON
Srum ou plasma hparin sans hmolyse.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde..............................................340 nm
Temprature................................................25-30-37C
Cuve....................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Solution de travail

1 ml

3 ml

Princuber la temprature choisie (25, 30 ou 37C)


Echantillon

100 l

300 l

Mlanger et incuber 1 minute.


Mesurer la diminution de la densit optique par
minute pendant 1 3 minutes.
19

FT Fr 11

Dc 2007

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20046, (60 Tests) Rf 20047, (100 Tests)

Rf. 20040, (450 Tests)

Rf. 200462, (220 Tests)

R1: 1 x 65 ml

R1: 1 x 110 ml

R1: 9 x 50 ml

R1: 2 x 110 ml

R2: 20 x 3 ml (Iyoph)

R2: 10 x 10 ml (Iyoph)

R2: 9 x 50 ml (Iyoph)

R2: 2 x 110 ml (Iyoph)

GPT-ALAT
Mthode cintique (IFCC)
sans phosphate de pyridoxal

PRINCIPE

solution de travail

Dtermination cintique de lactivit Alanine amino


transfrase
La raction est initie par addition de lchantillon du
patient au ractif. Le schma ractionnel est le suivant:

Pyruvate + NADH + H LDH

CALCUL
DO/min x 1750 = UI/I

340 nm

LINEARITE
Si la DO/min 340 nm est suprieure 0,15 rpter

REACTIFS
Ractif 1
Tampon Tris PH 7.5 30C 100 mmol/l
SolutionTampon Alanine
500 mmol/l

le test en diluant lchantillon au 1/10 avec une solution


de NaCI 9 g/l. Multiplier le resultat par 10.

0.18 mmo/l
1200 Ull
15 mmol/l

VALEURS USUELLES
25C
Femmes

PREPARATION ET STABILITE
Reprendre le substrat R2 par 3 ml Rf (20046) ou 10 ml
Rf (20047) de Tampon R1. Pour les Rf (20040) et (200462)
reconstituer chaque R2 par 1 flacon R1.
Cette solution de travail est stable 7 jours 2-8C.
24 heures 20-25C.

37C

jusqu 16 U/l

Jusqu 22 U/I Jusqu 31U/I

Hommes jusqu 22U/I

Jusqu 29 U/l Jusqu 40U/I

Lhmolyse peut interfrer.

Srum ou plasma hparin sans hmolyse.

BIBLIOGRAPHIE
Bergmeyer H. Schaibe and Walefeld. Clin. Chem. 24
58 - 73 (1978).
Bergmeyer and Horder Clin. Chem. Acta 105 147 F
(1980).

MODE OPERATOIRE
Longueur donde..................................................340 nm
Temprature ................................................ 25-30-37C
Cuve......................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.

Dc 2007

30C

REMARQUE

ECHANTILLON

FT Fr 12

300 l

Mlanger et incuber 1 minute. Mesurer la diminution


de la densit optique par minute pendant 1
3 minutes.

Lactate + NAD

NADH
LDH
Oxoglutarate

100 l

Echantillon

Le taux de diminution de la concentration en NADH


est directement proportionnel lactivit alanine trans
ferase dans lchantillon.
GPT: Transaminase Glutanique pyruvique
LDH: Lactate Dehydrogenase

Ractif 2
Substrat

3 ml

Princuber la temperature choisie (25,30 ou 37 C)

2-oxoglutarate + L-Alanine GPT Glutamate +Pyruvate


+

1 ml

20

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20011, (60 Tests)
R1: 1 x 65 ml
R2: 20 x 3 ml (Iyoph)

Rf. 20012, (100 Tests)


R1: 1 x 110 ml
R2 :10 x 10 ml (Iyoph)

Rf. 200123, (450 Tests)


R1: 9 x 50 ml
R2: 9 x 50 ml (Iyoph)

Rf. 200125, (150 Tests)


R1: 1 x 160 ml
R2: 15 x 10 ml

LDH

Rf. 200126, (110 Tests)


R1: 2 x 55 ml
R2 : 2 x 55 ml (Iyoph)

Mthode cintique SFBC

PRINCIPE

CALCUL

Dtermination
cintique
de
lactivit
lactate
dehydrognase. Selon les recommandations de la
Socit Franaise de Biologie Clinique. (SFBC)
La raction est initie par addition de lchantillon du
patient au ractif. Le schma ractionnel est le suivant:
Pyruvate + NADH + H+

340nm

DO/min x 8095 = U/l

LINEARITE
Si la DO/min 340 nm est suprieure 0.160
Rpter le test en diluant lchantillon au 1/10 ave une
solution de NaCI 9 g/l. Multiplier le rsultat par 10.

LDH
L- Lactale + NAD+

VALEURS USUELLES

Le taux de diminution de la concentration en NADH est


directement
proportionnel

lactivit
lactate
deshydrogenase dans lchantillon.

30C
Adultes

140 280 U/l

37C
230 430 U/l

REACTIFS
Ractif 1
Solution Tampon
Ractif 2
Goenzyme

Enfants
de 0 6 mois

Tampon Tris pH 7.2


80 mmol/l
Pyruvate
1.6 mmol/l
NaCl
200 mmol/l
NADH
0.2 mmo/l

415 690 U/l

565 940 U/l

REMARQUE
Lhmolyse peut interfrer.

PREPARATION ET STABILITE

BIBLIOGRAPHIE

Reprendre le substrat R2 par 3 ml (Ref 20011) ou 10 ml


(Ref 20012 / 200125) de Tampon R1
Pour les rf (200126) et (200123), reconstituer chaque
flaon R2 par 1 flaon de R1.
Cette solution de travail est stable 15 jours 2-8C ou 24
heures 20-25C.

Bergmeyer, H.U., J. Clin. Chem. Clin. Biochem.


13,507 (1975).
Howell B.F. and coll. Clin. Chem. 25, 269 (1979).
Commission Enzymologie - SFBC - Inform. Sci - Biol 1981,5.

ECHANTI LLON
Srum ou plasma hparin sans hmolyse.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde................................................340 nm
Temprature......................................................30-37C
Cuve....................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.
Solution de travail

1 ml

3 ml

Princuber la temprature choisie (30 ou 37C)


Echantillon

20 l

60 l

Mlanger et incuber 1 minute.


Mesurer la diminution de la densit optique par minute
pendant 1 3 minutes.

21

FT Fr 13

Dc 2007

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20015, (60 Tests)
R1 : 20 x 3 ml
R2 : 1 x 7 ml

Rf. 20016, (100 Tests)


R1 : 10 x 10 ml
R2 : 1 x 11 ml

Rf. 20017, (120 Tests)


R1 : 4 x 30 ml
R2 : 2 x 7 ml

Rf. 20018, (250 Tests)


R1 : 5 x 50 ml
R2 : 2 x 14 ml

PHOSPHATASE ALCALINE
Dtermination Cintique
Mthode DGKC
attendre 1 minute puis mesurer laugmentation moyenne
de la D.O par minute pendant 1 3 minutes.

PRINCIPE

CALCUL

Dtermination cintique de lactivit phosphatase


alcaline (PAL) selon la mthode recommandee par la
socit allemande de chimie clinique (DGKG)
PAL

405 nm ...............PAL (U/L) = D.O/min x 2750


410 nm ...............PAL (U/L) = D.O/min x 2910

nitro-4 phnylphosphate H2O -------> nitro 4 phnol+ phosphate.

LINEARITE
Si la variation moyenne de D.O/min > 0,250 refaire le
test en diluant lchantillon au 1/5 dans une solution de
NaCl 9g /l et multiplier le rsultat par 5.

REACTIFS
R1 : Ractif tampon
Tampon diethanolamine (pH 9.8)
Chlorure de magnsium

1 mol/l
0.5 mmol/l

VALEURS USUELLES
25C

R2 : substrat
Nitro 4 phnylphosphate

10 mmol/l

PREPARATION

30C

37C

Enfants

Jusqu 400 U/l

Jusqu 500 U/l

Jusqu 650 U/l

Adultes

40-190 U/l

50-230 U/l

70-300 U/l

Ractif de travail :
Rf. : 20015
R1..................................... 3 ml
R2....................................0,3 ml

BIBLIOGRAPHIE

Rf. : 20016

Haussamen T.U. et al. Clin. Chim. Acta. 35, 271-273


(1977).

R1....................................10 ml
R2......................................1 ml

REMARQUE
Rf. : 20017

R1....................................30 ml
R2......................................3 ml

Rf. : 20018

R1....................................50 ml
R2......................................5 ml

La mesure de lactivit enzymatique est meilleure dans


les quatre heures qui suivent le prlvement.

STABILITE
Stabilit du ractif de travail:
- 15 - 25C ................5 jours
- 2 - 8C...................15 jours

PRELEVEMENT
Srum, plasma recueilli sur hparine, non hmolys.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde:
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:

405 nm (Hg 400-Hg 420)


25, 30 ou 37C
1 cm dpaisseur
air ou eau distille

Dans un tube hmolyse introduire :


Solution de travail
Equilibrer 25, 30 ou 37C

1 ml
20 l

Echantillon

Mlanger et introduire dans une cuve thermostate,


FT Fr 14

Dc 2007

22

Biomaghreb
PRESENTATION
R.f 20041(50 Tests
Rf. 20039
(200 Tests TGO) TGO + 50 Tests TGP)
R1: 2 x 100 ml
R1 : 1 x 50ml
R3: 2 x 100 ml
R2 : 1 x 50 ml
R3 : 1 x 100 ml
R4: 1 x 14 ml
R4: 1 x 9ml

Rf. 20048
(100 Tests TGP)
R2: 2 x 50ml
R3: 2 x 50 ml
R4: 1 x 9ml

TRANSAMINASES

Rf. 20049
(100 Tests TGO)
R1: 2 x 50ml
R3: 2 x 50ml
R4: 1 x 9ml

Mthode colorimtrique
Etablissement de la courbe dtalonnage sur papier
millimtr:
- en abscisse: nombre dunits/ml
- en ordonne: densits optiques

PRINCIPE
Dtermination colorimtrique de lactivit TGO ou TGP
selon les ractions suivantes :

2- Dosage
Pour chaque srum, prparer les tubes suivants:

TGO: Aspartate + ctoglutarate TGO oxaloacetate+ glutamate


TGP: Alanine + ctoglutarate TGP pyruvate + glutamate

Le pyruvate ou loxaloactate forms sont doss sous


forme de leurs drivs 2,4 dinitrophnylhydrazones.

Ractif 1
Ractif 2

REACTIFS

TGO
1 ml
-

TGP
1 ml

0,2 ml

0,2 ml

Incuber 5 min 37C


Ractif 1
Substrat TGO

Tampon phosphate pH 7,5


aspartate
ctoglutarate

85 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/l

tampon phosphate pH 7,5


alanine.
ctoglutarate.

95 mmol/l
200 mmol/l
2 mmol/I

Ractif 3
Ractif de coloration 2,4 dinitrophnylhydrazine

1 mmol/l

Ractif 2
Substrat TGP

Ractif 4

Srum
Mlanger et
mettre 37C

exactement
1 heure

Ractif 3

1 ml

exactement
30 min
1 ml

Mlanger. Laisser 20 min temprature ambiante.


Soude 0,4 N

10 ml

10 ml

Mlanger. Attendre 5 min. Photomtrer dans les mmes


conditions que la courbe dtalonnage.

talon pyruvate

STABILITE

3- Stabilit de la coloration :...................1 heure

Les ractifs sont stables plusieurs annes 2-8C.


Le ractif 3 est conserver labri de la lumire
Ractif auxiliaire : Soude 0,4 N

ECHANTILLONS

4- RSULTATS
Dterminer partir de la courbe dtalonnage le
nombre dunits TGO et TGP par ml de srum.

Srum
Hmolyse gnante

LINEARITE
Pour une activit TGO > 150 units/ml, et TGP > 125
units/ml, refaire la dtermination en diluant lchantillon au
1/10me dans une solution de chlorure de sodium 9 g/l.
Multiplier alors le chiffre lu sur la courbe par 10.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
505 nm (490 520 nm)
Zro de lappareil :
eau distille
1- Courbe dtalonnage
Dans des tubes essai rpartir (en ml) :
N des tubes
Eau distille
Ractif 1
Ractif 4
Ractif 3

1
0,2
1
1

2
0,2
0,9
0,1
1

3
0,2
0,8
0,2
1

4
0,2
0,7
0,3
1

VALEURS USUELLES
TGO : < 40 units/ml
TGP : < 45 units/ml

5
0,2
0,6
0,4
1

BIBLIOGRAPHIE
REiTMANS; FRANKELS.
Am. d. Clin. Path. 28,56 (1957).

Mlanger. Laisser 20 min temprature ambiante.


Soude 0,4 N

10

10

10

10

10

Mlanger. Attendre 5 min. Photomtrer


UnitsTGO/ml
Units TGP/ml

0
0

22
25

55
50

95 150
83 126
23

FT Fr 15

Dc 2007

Biomaghreb

BIOCHIMIE
SUBSTRATS
Page
ACIDE URIQUE

26
Rf.
Rf.
Rf.
Rf.

20091
20092
20095
20096

3 x 125
4 x 30
2 x 120
5 x 120

ml
ml
ml
ml

ALBUMINE

27

Rf. 20094
BILIRUBINE DIRECTE
Rf. 20102
BILIRUBINE TOTALE
Rf. 20103
BILIRUBINE TOTALE ET DIRECTE
Rf. 20101
Rf. 20105
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
Rf. 201010
CHOLESTEROL
Rf. 20111
Rf. 20112
Rf. 20115
Rf. 20118
CHOLESTERROL-HDL
Rf. 20113
Rf. 200113
Rf. 200112
CREATININE
Rf. 20151
Rf. 20152
Rf. 20153
GLUCOSE
Rf. 20121
Rf. 20126
Rf. 20124
Rf. 20127
Rf. 20122
PROTEINES TOTALES
Rf. 20161
Rf. 20162
TRIGLYCERIDES
Rf. 20131
Rf. 20132
Rf. 20138
UREE COLOR
Rf. 20141
Rf. 20146
Rf. 20148
UREE UV
Rf. 20143
Rf. 20147
25

4 x 250 ml
28
2 x 160 ml
29
2 x 160 ml
30
2 x 160 ml
2 x 250 ml
31
10 x 3 ml
32
3 x 120
4 x 30
6 x 100
5 x 120

ml
ml
ml
ml
33

5 x 5 ml
10 x 10 ml
1x 5m
34
2 x 160 ml
3 x 1000 ml
2 x 500 ml
35
2 x 500
5 x 200
6 x 500
4 x 100
3 x 1000

ml
ml
ml
ml
ml
36

450 ml
1000 ml
37
2 x 120 ml
4 x 30 ml
5 x 120 ml
38
2 x 200 ml
1 x 500 ml
2 x 500 ml
39
4 x 50 ml
9 x 50 ml

Biomaghreb
PRESENTATION
Ref. 20091, (375 Tests)
R1 : 3 x 125 ml
R : 3 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 6 ml

Rf 20095, (240 Tests)


R1 : 2 x 120 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 5ml

Rf 20092, (120 Tests)


Rl : 4 x 30 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 4 ml

Rf 20096, (600 Tests)


Rl : 5 x 120 ml
R2 : 5 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 6 ml

ACIDE URIQUE
Test colorimtrique
Uricase-PAP
CALCUL

PRINCIPE
Lacide urique est dos selon les ractions suivantes:

D.O. Echantillon
Acide urique =

Uricase
Acide urique + 2H2O + O2 > Allantone + CO2 + H2O2

2H202 + Amino-4-antipyrine

mg/dl n = 6
mg/l
n = 60
mol/l n = 357

Proxydase

+ Dichloro 2- 4 Phnolsulfonate -> Quinone rose + 4H2O

REACTIFS

Urine

Ractif 1
Solution tampon

Tampon phosphate pH 7.4


Dichloro 2-4 Phnolsulfonate

50mmol/l
4 mmol/l

Ractif 2
Enzymes

Uricase
Peroxydase
Amino-4-Antipyrine

70 U/l
660 U/l
1 mmol/l

Ractif 3
Standard

Acide urique

xn
D.O. Standard

multiplier le rsultat par 10.

LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 250 mg/l
(25 mg/dl = 1487,5 mol/l). Si la concentration en acide
urique est suprieure 250 mg/l, recommencer le test
sur un chantillon dilu au 1/2 avec une solution de NaCI
9 g/l. Multiplier le rsultat par 2.

6 mg/dl
60 mg/l
357 mol/l

VALEURS USUELLES

PREPARATION ET STABILITE

Srum ou plasma

Dissoudre le Iyophilisat R2 avec le contenu dun flacon


Tampon R1 Rf (20091), (20092), (20095), (20096).

Femmes

2.5 - 6.0 mg/dl


25 - 60 mg/l
148 - 357 mol/l

Le ractif de travail est stable : 7 jours 20-25C


3 semaines 2-8C

Hommes

3.4 - 7.0 mg/dl


34 - 70 mg/l
200 - 416 mol/l

ECHANTILLONS

Urine

250 - 750 mg/24 h

Srum, plasma recueilli sur hparine


Urine dilue au 1/10 dans leau distille.
Si les urines sont troubles, les chauffer 60C pendant
10 mn afin de dissoudre lacide urique.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :.........................510 nm (490-550)
Temprature :................................20-25C ou 37C
Cuve :............................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.

Blanc

Barham et Trinder, Analyst 97, 142 (1972)


Fossati et Principe, Clin. Chem. 28, 227 (1980)

Standard Echantillon

Standard

--

20 l

--

Echantillon

--

--

20 l

1 ml

1 ml

1 ml

Ractif de travail

BIBLIOGRAPHIE

Mlanger, lire les DO aprs une incubation de 5 min.


37 C ou de 10 min. 20 - 25C. La coloration est
stable 30 minutes.

FT Fr 16

Dc 2007

26

Biomaghreb
PRESENTATION

ALBUMINE

Rf : 20094; (500 Tests)


R1 : 4 x 250 ml
R2 : 2 x 3 ml

Test colorimtrique
Mthode BCG

PRINCIPE

CALCUL

Dosage colorimtrique de lalbumine srique avec le vert


de bromo-crsol.

D.O chantillon
D.O Etalon

xn

REACTIFS
Ractif R1:
Ractif de
coloration

Vert de Bromo-crsol
Tampon succinate
Brij

Ractif R2:
Etalon

Albumine bovine

g/I
: n = 50
mol/l : n = 724,5

0,14 g/l
75 mmo/l
7 ml /l

NOTES
Les ractifs doivent tre ramens la temprature
ambiante avant leur utilisation.

50 g / l
724 mol/l

LINEARITE
STABILITE

La mthode est linaire jusqu 1000 mol/l (69g/l).

Conserver les ractifs entre 2-8C jusqu la date de


premption indique sur le coffret.

VALEURS USUELLES
Srum

ECHANTILLONS
Plasmas, srums, recueillis sur hparine.

MODE OPERATOIRE

BIBLIOGRAPHIE

Longueur donde ..........................................628 nm


Tmprature ................................................. 20-25C
Cuve..................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc
ractif.
Blanc
ractif

Etalon

550-780 mol/l
38-54g/I

Doumas B et al. Clin. Chim Acta 31, 87 (1971).


Drupt, F. Pharm. Biol 9,777 (1974).

Echantillon

Echantillon

10 l

Etalon (R2)

10 l

Ractif (R1)

2 ml

2 ml

2 ml

Mlanger. Lire les DO aprs une incubation de 5 mn


20-25C.
La coloration est stable 30 mn.

27

FT Fr 17

Dc 2007

Biomaghreb
BILIRUBINE DIRECTE

PRESENTATION
Rf. 20102, (160 Tests)
R2 : 4 x 80 ml
R3 : 1 x 15 ml
R4 : 1 x 3 ml (Lyoph)

Etalon
Blanc Dosage
Etalon R4

PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En labsence de
dimethyl sulfoxyde seule la bilirubine directe se couple
avec lacide sulfanique diazot pour donner lazobilirubine.

Acide sulfanilique
Acide Chlorhydrique

30 mmol/I
150 mmol/l

Ractif 3

Nitrite de sodium

20 mmol/l

Ractif 4

50 l
50 l

Echantillon
Ractif R2

1 ml

1 ml

CALCUL (B.D)
[Bilirubine Directe]=

Etalon Voir prparation de ltalon

Asb(A)chantillon
x [Conc.talon]
Asb(A) talon

[Bilirubine Directe] = Abs (A) chantillon x F

Srum ou plasma recueilli sur EDTA hparine, citrate


ou florure et conserv labri de la lumire.
LHmolyse est gnante.

NOTE
mol / l

Prparation de lEtalon (R4)


Reconstituer le Iyophilisat R4 avec exactement 3ml
deau distille. Attendre 15 minutes. Complter la
dissolution du Iyophilisat par retournements successifs
du flacon. La stabilit lobscurit aprs reconstitution
est de:
- 2 Jours 20-25C
- 4 Jours 2-8C
- 6 semaines -20C

LINEARIT
10 mg/dl ; 100 mg/l (170 mol/l).

VALEURS USUELLES
0,0 - 0.2 mg/dl; 0,0-2 mg/l (0,0-3,4 mol/l)

BIBLIOGRAPHIE
Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem.15, 231 (1970).

Il est indispensable dtablir un facteur de calibration


dans les conditions du laboratoire ds la reconstitution
de ltalon R4.
(Conc. Bilirubine Direct) talon
Abs (talon) - Abs (Blanc talon)
555 nm (546 Hg)
37C
1 cm dpaisseur
Blanc talon ou Blanc chantillon

Solution de travail (B.D)


Mlanger 20 vol R2 avec 1 vol. R3
Stabilit lobscurit
6H 20 - 25C / 2 Jours 2-8C
FT Fr 18

Dc 2007

0,585 mg/l
1,710

MODE OPERATOIRE

LECTURE
Longueur donde :
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:

1 ml

Mlanger et incuber exactement 5 minutes 37C lire


Iabsorbance (A) de ltalon et lchantillon contre leurs
blancs.

ECHANTILLON

F=

50 l

1 ml

Solution de
travail (B.D)

REACTIFS
Rsctif 2

50 l

Echantillon
Blanc
Dosage

28

Biomaghreb
PRESENTATION

BILIRUBINE TOTALE

Rf. 20103, (160 Tests)


R1 : 4 x 80 ml
R3 : 1 x 15 ml
R4 : 1 x 3 ml (Lyoph)

PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En prsence de
dimthyl sulfoxyde (DMSO), la bilirubine totale se couple
avec lacide sulfanilique diazot pour donner
lazobilirubine.

Etalon
Echantillon
Blanc Dosage Blanc
Dosage
Etalon R4

Acide sulfanilique
Acide Chlorhydrique
Dimthylsulfoxyde

Ractif R1

30 mmol/I
150 mmol/l
7 mmol/l

Ractif 3

Nitrite de sodium

Ractif 4

Etalon Voir prparation de ltalon

50 l
1 ml

Solution de
travail (B.T)

50 l

1 ml

1 ml

1 ml

Mlanger et incuber exactement 5 minutes 37C lire


Iabsorbance (A) de ltalon et lchantillon contre leurs
blancs.

20 mmol/l

N.B : Diluer les chantillons de nouveau-ns ou trs

ECHANTILLON

ictriques au 1/5 dans une solution de Nacl 9g/l

Srum ou plasma recueilli sur EDTA hparine, citrate


ou florure et conserv labri de la lumire.

CALCUL (B.T)

MODE OPERATOIRE

[BilirubineTotale]=

Prparation de lEtalon (R4)


Reconstituer le Iyophilisat R4 avec exactement 3ml
deau distille. Attendre 15 minutes. Complter la
dissolution du Iyophilisat par retournements successifs
du flacon. Les concentrations exacts sont indiqus sur
chaque flacon La stabilit lobscurit aprs
reconstitution est de :
- 2 Jours 20-25C
- 4 Jours 2-8C
- 6 semaines -20C

Abs (A)chantillon
x [Conc.talon]
Abs (A) talon

[Bilirubine Totale] = Abs (A) chantillon x F

NOTE
mol / l

0,585 mg/l
1,710

LINEARIT
20 mg/dl ; 200 mg/l ( 340 mol).

Il est indispensable dtablir un facteur de calibration


dans les conditions du laboratoire ds la reconstitution
de ltalon R4.
F=

50 l

Echantillon

REACTIFS
Rsctif 1

50 l

VALEURS USUELLES
0,2 - 1.0 mg/dl ; 2 - 10 mg / I (3.4 -17 mol/l)

(Conc. Bilirubine Total) talon

BIBLIOGRAPHIE

Abs (talon) - Abs (Blanc talon)

Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem.15, 231 (1970).

LECTURE
Longueur donde :
Temprature :
Cuve :
Zro de lappareil :

555 mn (546 Hg)


37C
1 cm dpaisseur
Blanc talon ou Blanc chantillon

Solution de travail (B.T)


Mlanger 20 vol R1 avec 1 vol. R3
Stabilit lobscurit
6H 20 - 25C / 2 Jours 2-8C
29

FT Fr 19

Juin 2008

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20101, (160 Test)
R1 : 2x 80 ml
R2 : 2 x 80 ml
R3 : 1 x 15 ml
R4 : 1 x 3 ml (Lyoph)

BILIRUBINE TOTALE
ET DIRECTE

Rf 20105, (250 Tests)


R1 : 2 x 125 ml
R2 : 2 x 125 ml
R3 : 1 x 20 ml
R4 : 2 x 3 ml (Lyoph)

Etalon
Blanc Dosage

PRINCIPE
Lacide sulfanilique ragit avec le nitrite de sodium pour
donner de lacide sulfanilique diazot. En prsence de
dimthyl sulfoxyde (DMSO), la bilirubine totale se couple
avec lacide sulfanique diazot pour donner
lazobilirubine. Le dosage de la bilirubine directe se fait
en labsence de DMSO.

Etalon R4

Ractif 2
Ractif 3
Ractif 4

Ractif R1
Solution de
travail (B.T)

1 ml
1 ml

1 ml

BILIRUBINE DIRECTE

Solution de travail (B.D)


Mlanger 20 vol R2 avec 1 vol R3,
Stabilit lobscurit
6 H 20 - 25 / 2 Jours 2 - 8C
Etalon

Srum ou plasma recueilli sur EDTA hparine, citrate


ou florure et conserv labri de la lumire. Hmolyse
gnante pour la Bilirubine.

Blanc Dosage
Etalon R4

MODE OPERATOIRE

50 I

Echantillon
Blanc

Ractif R2
Solution de
travail (B.D)

Dosage

50 I
50 I

Echantillon

Prparation de ltalon (R4)


Reconstituer le Iyophilisat R4 avec exactement 3 ml
deau distille. Attendre 15 minutes. Complter la
dissolution du Iyophilisat par retournement successifs du
flacon. Les concentrations exacts sont indiqus sur
chaque flacon. La stabilit lobscurit aprs
reconstitution est de:
- 2 jours 20 - 25C
- 4 jours 2 - 8C
- 6 semaines - 20C
Il est indispensable dtablir un facteur de calibration
dans les conditions du laboratoire ds la reconstitution de
ltalon R4.

1 ml

50 l

1 ml
1 ml

1 ml

Mlanger et incuber exactement 5 minutes 37C lire


Iabsorbance (A) de ltalon et lchantillon contre
leurs blancs.

CALCUL (B.T et B.D.)


[Bil. Tot. ou Dir.] = Abs (A) chtantillon x [Conc. talon]
Abs (A) talon
[Bil.Tot. ou Dir.] = Abs (A) chantillon x F

NOTE

F = (Conc. Bilirubine Totale ou Directe) talon

mol / I

Abs (talon) - Abs (BIanc talon)

LECTURE

LINEARITE

555 nm (546 Hg)


37C
1 cm dpaisseur
Blanc talon ou blanc chantillon

0.585 mg/l
1.710

BT : 20 mg/dl-200 mg/l (340 mol/l)


BD : 10 mg/dl-100 mg/l (170 mol/l)

VALEURS USUELLES
Bilirubine totale
0.2-1.0 mg/dl; 2-10 mg/l (3.4 - 17mol/l)
Bilirubine Directe
0.0 - 0.2 mg /dl ; 0.0 - 2 mg/l (0.0 - 3.4 mol/l)

BILIRUBINE TOTALE
Solution de travail (BT)
(Mlanger 20 Vol R1 avec 1 vol R3

BIBLIOGRAPHIE

Stabilit lobscurit
6H 20 -25C /2 Jours 2-8C
Juin 2008

1 ml

50 l

N.B : Diluer les chantillons de nouveau-ns ou trs


ictriques au 1/5 dans une solution de NaCl 9g/l

ECHANTILLON

FT Fr 20

50 I

Mlanger et incuber exactement 5 minutes 37C lire


Iabsorbance (A) de ltalon et lchantillon contre
leurs blancs.

Acide sulfanilique
30 mmol/I
Acide Chlorhydrique
150 mmol/l
Dimthylsulfoxyde
7 mmol/l
Acide sulfanilique
30 mmol/l
Acide chlorhydrique
150 mmol/l
Nitrite de sodium
20 mmol/l
Etalon Voir prparation de ltalon

Longueur donde :
Temprature:
Cuve:
Zro de lappareil:

50 I

Echantillon

REACTIFS
Ractif 1

50 I

Echantillon
Blanc Dosage

Hijmans Van den Bergh A.A., Muller P., Biochem, 77, 90 (1916).
Walters M.l., Gerarde R.W., Microchem 15, 231 (1970).

30

Biomaghreb
CALIBRATEUR BILIRUBINE
TOTALE ET DIRECTE
CALIBRATOR FOR TOTAL
AND DIRECT BILIRUBIN

PRESENTATION
Ref. 201010
10 x 3 ml (Iypoph)

PRESENTATION

Le calibrateur est constitu de bilirubine conjugue et de


bilirubine non conjugue dans une matrice dalbumine
bovine.
Les concentrations exactes sont indique sur chaque
flacon.

Ref. 201010
10 x 3 ml (Iypoph)

The calibrator containing conjugated and unconjugated


bilirubin in a matrix of bovin albumin.
The exact concentrations are given on each vial.

UTILISATION
Calibrage du dosage de la bilirubine totale et directe pour
les techniques
- Bilirubine totale (Rf: 20 103)
- Bilirubine directe (Rf: 20102)
- Bilirubine totale et directe (Rf: 20101)

USE
Calibrator of the determination of total and direct biliru
bin of the following technique:
- Total Bilirubin (Ref: 20103)
- Direct Bilirubin (Ref : 20102)
- Total and direct Bilirubin (Ref: 20 101)

Reconstitution
Ouvrir avec prcaution un flacon sans perte de
Iyophilisat, le reprendre exactement par 3 ml deau
distille. Attendre 15 minutes, completer la dissolution
par retournement successifs de flacon (ne pas agiter).

Reconstitution
Open a vial carefully, avoinding any loss of the
Iypophilized material. Reconstitute with exactly 3 ml of
distilled water. Let stand for 15 minutes and then dissolve
the contents completely by gently inverting the vial (do
not shake).

PRECAUTION DUTILISATION
Aucune des mthodes danalyse actuellement connues
ne peut garantir de faon absolue que les produits ne
contiennent aucun agent pathogne transmissible.ll est
recommand de les manipuler avec les prcautions
dusage relatives au produit potentiellement infectieux.

PRECAUTIONS
No known analysis method can totally guarantee the
absence of transmissible pathogenic agents.
It is therefore recommended that these products be
treated as potentially infections, and handied observing
the usual safety precaution.

STABILITE
Forme Iyophilise
Ce produit est stable 2-8c jusqu la date de
premptions indique sur chaque conditionnement.

STABI LITY
Lyophilized form
Stable at 2-8c until expiration date given on the
packaging.

Aprs reconstitution lobscurit


- 2 jours 20-25C
- 4 jours 2-8C
- 6 semaines - 20C

After reconstitution, in the dark:


- 2 days at 20-25C
- 4 days at 2-8C
- 6 weeks at -20C

31

FT Fr 21

Dc 2007

Biomaghreb
CHOLESTEROL

PRESENTATION
Rl. 20111, (360 Tests)
R1: 3 x 120 ml
R2: 3 flacons (Iyoph)
R3: 1 x 5 ml

Ref. 20115,(600 Tests)


R1 : 6 x100 ml
R2 : 6 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 5 ml

Rf. 20112 (120 Tests)


R1 : 4 x 30 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1x 4ml

Rf. 20118 (600 Tests)


R1 : 5 x 120 ml
R2 : 5 flacons (Iyoph)
R3 : 2x 5ml

Test enzymatic colorimetrique


(CHOD- PAP)

PRINCIPE
Le cholesterol est mesur aprs hydrolyse enzymatique
puis oxydation. Lindicateur quinoneimine est form
partir du peroxyde dhydrogne et du amino 4 antipyrine
en prsence de phenol et de peroxydase.
Dtermination
suivantes :

enzymatique

selon

les

Blanc
Standard
Echantillon
Ractif de travail

Standard

--1 ml

10 l
-1 ml

Echantillon
-10 l
1 ml

ractions
Mlanger, lire les densits optiques aprs une incu
bation de 5 min. 37 C.
La coloration est stable 30 minutes.

Cholestrol estrase
Esters de cholestrol + H2O >Cholestrol+Acides gras
Cholestrol oxydase

CALCUL

Cholestrol + O2 ->Cholestne- 4-one - 3 + H2O2

D.O. Echantillon

Proxydase

Cholesterol =

H2O2 + Phnol + Amino- 4 - antipyrine> Quinoneimine rose

xn
D.O. Standard

mg/dl :
g/l :
mmol/l :

La quantit de quinoneimine forme est proprotionnelle


la concentration de cholesterol.

n = 200
n=2
n = 5,17

REACTIFS
LINARIT
Ractif 1
Solution tampon

Pipes pH 6.9
Phenol

90 mmol/l
26 mmol/l

Ractif 2

Cholesterol oxydase
Peroxydase
Cholesterol esterase
Amino-4-antipyrine

300 U/l
1250 U/l
300 U/l
0.4 mmol/l

Ractif 3
Standard

La mthode est linaire jusqu 6 g/l (600 mg/dl - 15.4 mmol/l).


Si la concentration en cholesterol est suprieure 6 g/l,
diluer lchantillon au 1/2 avec une solution de NaCI
9 g/l et refaire le test. Multiplier le rsultat par 2.

VALEURS USUELLES
Srum, plasma

200 mg/dl
2 g/l
5.1 7 mmol/l

3,6 5,7 mmol/l


1,4 2,2 g/l
140 220 mg/dl

PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le contenu dun flacon de R2 avec un flacon
de tampon R1.
Le ractif de travail est stable : 1 mois 20 - 25C
4 mois 2 - 8C

BIBLIOGRAPHIE
Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)
Richmond, Clin. Chem. 19, 1350 (1973)
Fasce C.F., Clin. Chem. 18901 (1982)

ECHANTILLONS
Srum
Plasma recueilli sur hparine

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :....................505 nm (500 - 550)
Temprature :...........................37C
Cuve :.......................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.

FT Fr 22

Dc 2007

32

Biomaghreb
PRESENTATION

CHOLESTEROL HDL

Rf. 20113, Kit pour 500 Tests, 5 x 5 ml


Rf. 200112, Kit pour 100 Tests, 1 x 5 ml
Rf. 200113, Kit pour 2000 Tests, 10 x 10 ml
Kit complmentaire
Rf :
Rf :
Rf :

Blanc ractif

20111
20112
20115

Eau distille
Etalon
Cholestrol 2g/l
Surnageant
Ractif Cholestrol
enzymatique

PRINCIPE
Les chylomicrons et les lipoproteines de trs faible
densit (VLDL) et de faible densit (LDL) contenus dans
lhantillon sont prcipits par addition dacide
phosphotungstique en prsence dions magnsium.
Le surnagent obtenu aprs centrifugation contient les
lipoproteines de haute densit (HDL) dont le cholestrol
est dos par le ractif cholestrol enzymatique
(Ref: 20111 ou 20112).

Dosage

10l

1 ml

10 l
1 ml

10 l
1 ml

Mlanger, incuber 5 min 37C photometrer.


Stabilit de la coloration..............30 min

Calcul
DO dosage
[HDL-Cholestrol] =

REACTIFS
Ractif
prcipitant

Etalon

xn
DO talon

Acide phosphotungstique 13,9 mmol/l


MgCl2 6H2O
490mmol/l
pH 6,2

n = 5,17 mmol/l
n = 2 g/l
Multiplier le rsultat obtenu par 1. 1 pour tenir compte de
la dilution effectue lors de la prcipitation : on obtient
la concentration du cholestrol li aux HDL.

STABILITE
Conservation 2-8C
La date limite dutilisation est indique sur chaque
conditionnement.
Si le ractif est trouble ou color, il doit tre rejet.

N.B : Une fois le flacon du ractif HDL est entam il ya


possibilit de formation des cristaux brillants au fond du
flacon qui nont pas dinfluence sur la qualit du produit

ECHANTILLONS

Interprtation (rf 2,3)

Srum ou plasma recueilli sur EDTA.

La Socit Europenne dAthrosclrose a tabli la


relation entre lincidence des maladies coronariennes et
la cholestrolmie.

MODE OPERATOIRE
Prcipitation
Diluer, dans une solution de NaCI 9 g/l, les srums dont
le taux est suprieur 3,5 mmol/l de triglycrides.

Cholestrolmie
< 2g/l
< 5,2 mmol/l

Srum....................................................500 l
Ractif prcipitant ...................................50 l
Bien mlanger, attendre 10 min.
Centrifuger 15 min 5000 t/min

Dosage du cholestrol HDL


Reconstituer le ractif << cholestrol enzymatique>> selon
la notice jointe au coffret. Rf. 20111ou 20112.
Longueur donde.........................500 nm (492 550 nm)
Temprature.............................................................37C
Cuve......................................................1 cm dpaisseur
Zro de lappareil .........................................Blanc ractif

Evaluation du risque
Risque faible

2,0 2,5 g/l


5,2 6,5 mmol/l

Risque modr si

> 2,5 g/I


> 6,5 mmol/l

Risque lev,
en particulier si :

HDL cholestrol
< 0,35 g/I
< 0,9 mmol/l

BIBLIOGRAPHIE
1. BURSTEIN M. et al. Lipid Res.11. 583.(1970)
2. Study Group, European Atherosclerosis
Society, European Heart Journal,, 9, 571 (1988)
3- ARCOL, ISB, 1989, 15, 121 -124.

33

FT Fr 23

Janvier 2008

Biomaghreb
PRESENTATION

CREATININE

Rf. 20151, (320Tests) Rf. 20152, (3000Tests) Rf. 20153, (1000Tests)


R1 : 1 x 500 ml
R1: 2 x 80 ml
R1 : 3 x 500 ml
R2 : 2 x 80 ml
R2 : 3 x 500 ml
R2 : 1 x 500 ml
R3 : 3 x 50 ml
R2 : 2 x 25 ml
R3 : 1 x 15 ml

Mthode cintique colorimtrique


sans dproteinisation
CALCUL

PRINCIPE

Calculer DO = DO2 - DO1 pour le standard et les


chantillons.
D O Echantillon
Cratinine =
xn
D O Standard

La cratinine forme en milieu alcalin un complexe color


avec lacide picrique. La vitesse de formation de ce
complexe est proportionnelle la concentration de
cratinine.
Ractif 1

Hydroxyde de sodium

Ractif 2

Acide picrique

17.5 mmol/l

mg/dl:
mg/l:
mol/l:

Ractif 3
Standard

cratinine

2 mg/dl
20 mg/l
176,8 mol/l

LINEARITE

1.6 mol/l

La mthode est linaire jusqu 150 mg/l (15 mg/dl 1326 mol/l).
Si la concentration en cratinine est suprieure 150
mg/l, diluer lchantillon au 1/2 avec une solution de
NaCI 9 g/l et recommencer le test. Multiplier le rsultat
par 2.

PREPARATION ET STABILITE
Les ractifs sont prts lemploi, stables temprature
ambiante jusqu la date indique sur ltiquette.
Ractif de travail: mlanger parts gales R1 et R2
Stabilit : 1 mois 20-25C.

VALEURS USUELLES

ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine
Urine dilue au 1/20 dans leau distille (tenir compte de
la dilution pour le calcul).

MODE OPERATOIRE
Longueur donde: .............................492 nm (490 - 510)
Temprature:.....................................25 - 30 ou 37 C
Cuve:.................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.

Standard
Echantillon
Ractif de travail

Standard

Echantillon

100 l

--

--

100 l

1 ml

1 ml

Dc 2007

Srum

0.7 - 1.4 mg/dl


7-14 mg/l
61.8 -132.6 mol/l

Urine

15-25 mg/kg/24h

BIBLIOGRAPHIE
Henry J.B., Clinical Diagnosis and management 17th
dition, Sauders Publisher 1984.
Larsen K., Clin. Chim. Acta 66, 209 (1972).

Mlanger et lire les densits optiques DO1 aprs 30


sec.
Lire ensuite DO2 exactement 1 minute aprs.

FT Fr 24

n=2
n = 20
n = 176.8

34

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20121, (1000 Tests )
R1 : 2 x 500 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 6 ml

Rf 20124, (3000 Tests)


R1 : 6 x 500 m
R2 : 6 flacons (Iyoph)
R3 : 3 x 11 ml

Rf 20122, (3000 Tests)


R1 : 3 x 1000 ml
R2 : 3 flacons (Iyoph)
R3 : 3 x 11 ml

Rf 20126, (1000 Tests)


R1 : 5 x 200 ml
R2 : 5 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 6 ml

GLUCOSE

Rf 20127, (400 Tests)


R1 : 4 x 100 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 5 ml

Mthode enzymatique (GOD - PAP)

CALCUL
D.O Echantillon
Glucose =

PRINCIPE
Dtermination enzymatique du glucose selon les
ractions suivantes :

mg/dl
g/l
mmol/

Glucose oxydase

Glucose + O2 +H2O

Acide gluconique + H2 O2
Proxydase

2 H2O2+Phnol+4-Amino-antipyrine

La mthode est linaire jusqu 5 g/l (500 mg/dl27,8 mmol/l).


Si la concentration en glucose est suprieure 5 g/l,
recommencer le dosage sur lchantillon dilu au 1/2
avec une solution de NaCI 9 g/l. Multiplier le rsultat
par 2.

REACTIFS
Tampon Tris pH= 7
Phnol

100 mmol/l
0,3 mmol/l

Ractif 2
Enzymes

Glucose oxydase
Proxydase
Amino 4 -Antipyrine

10 000 U/l
1000 U/l
2,6 mmol/l

Ractif 3
Standard

Glucose

VALEURS USUELLES

100 mg/dl
1g/I
5,56 mmol/l

PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le Iyophilisat R2 dans le tampon R1.
Protger de la lumire.
Stabilit du ractif de travail
- 8 semaines 20 - 25C
- 8 mois 2 - 8C

Srum, plasma

70 - 105 mg/dl
0,70 - 1,05 g/l
3,89 - 5,84 mmol/l

Liquide cphalo rachidien

50 - 70 mg/dl
0,50 - 0,70 g/l
2,78 - 3,89 mmol/l

NOTES
Les substances suivantes ninterfrent pas :
Hmoglobine (jusqu 4 g/l), Bilirubine (jusqu 200
mg/l), cratinine (jusqu 100 mg/l), Galactose
(jusqu 1 g/l) et EDTA (jusqu 2 g/l).

ECHANTILLONS
Srum (non hmolys)
Plasma recueilli sur fluorure-hparine ou hparine-iodactate (non hmolys)
Liquide Cphalo-rachidien.

BIBLIOGRAPHIE
Dingeon B., Ann. Biol. Clin. 33,3 (1975)
Lott J.A. Clin. Chem. 21. 1754 (1975)
Trinder P.n Ann. Clin. Biochem 6,24 (1969)

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
505 nm (492-550)
Temprature :
37 C (20-25C)
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.
Echantillon

Blanc

Standard

Standard

--

10 I

--

Echantillon

--

--

10 l

1 ml

1 ml

1 ml

Ractif de travail

n = 100
n=1
n = 5,56

LINARIT

Quinoneimine rose + 4H2O

Ractif 1
Solution tampon

x n
D.O Standard

Mlanger, lire les DO aprs une incubation de 10


minutes 37 C ou 30 mn 20-25 C.
La coloration est stable 30 minutes.
35

FT Fr 25

Juin 2008

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 20161, 450 Tests
R1 : 3 x 147ml
R2 : 1 x 11 ml
R3 : 1 x 4,5 ml

PROTEINES TOTALES

Rf. 20162, 1000 Tests


R1 : 4 x 245 ml
R2 : 1 x 25 ml

Mthode colorimtrique au Biuret

R3 : 2 x 4 ml

PRINCIPE
Les protines sriques forment un complexe bleu-violet
avec les sels de cuivre en milieu alcalin.
(raction du type BIURET).

LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 150 g/l

CALCUL

REACTIFS

D.O. Echantillon

Ractif 1

Tartrate de Sodium Potassium

Ractif
alcalin

Hydroxyde de sodium
lodure de potassium

Ractif 2
Ractif de
coloration

Sulfate de cuivre NOCIF

Ractif 3
Etalon

Albumine bovine

Protines totales =

31.9 mmo/l

xn
D.O. Etalon

n = 50 g/l
n = 5 g/dl

0.6 mol/l
30 mmol/l
0.6 mol/l

VALEURS USUELLES
Nouveaux-ns

52-91 g/l
5.2 - 9.1 g/dl

PREPARATION ET STABILITE

Enfants

Ractif de travail
Ajouter 3 ml de R2 1 flacon R1 Rf. 20161
Ajouter 5 ml de R2 1 flacon R1: Rf 20162
Stabilit de ractif de travail: 6 mois 2-8C.

54 - 87 g/l
5.4 - 8.7 g/dl

Adultes

67 - 87 g/l
6.7 - 8.7 g/dl

50 g/l
5g/dl

ECHANTILLONS
Srum ou plasma heparin.

BIBLIOGRAPHIE
- A. Gornall et al- J. Biol-Chem 177,751 (1949)
- Henry R.J., Annal. Chem. 92, 1491 (1957)
- Peter T.J. Clin. Chem. 14, 1147 (1968)
- T.E. Weichselbaum: Am. J. Clin. Pathol. 16
Sect. 10-40 (1946).

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
Temprature :
Cuve :

546 nm
T laboratoire
1 cm dpaisseur

Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc


ractif.
Blanc
ractif

Standard
Etalon

Echantillon

Echantillon

20 l

R3 : Etalon

20 l

Ractif de
travail

1 ml

1 ml

1 ml

Mlanger et lire les densits optiques aprs


une incubation de 5 minutes temprature ambiante.

La stabilit de la coloration est de 30 minutes.

FT Fr 26

Dc 2007

36

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf 201 31, (240 Tests)
R1 : 2 x 120 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 :1 x 4 ml

TRIGLYCERIDES

Rf 20132, (120 Tests)


R1 : 4 x 30 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 3 ml

Mthode colorimtrique enzymatique


(GPO- PAP)

Rf : 20138, (600 Tests)


R1 : 5 x 120 ml
R2 : 5 flacons (lyoph)
R3 : 2 x 5 ml

BLanc

Standard

Echantillon

Standard

10 l

Echantillon

10 l

1 ml

1 ml

1ml

PRINCIPE
Les triglycrides sont dtermins selon les ractions
suivantes :
Lipoprotine lipase
Triglycrides

Ractif de travail

> Glycrol + Acides gras

Glycrokinase, Mg ++
Gylcrol + ATP
> Glycrol -3-P + ADP

Mlanger et lire les DO aprs incubation de 5 min


37C ou de 10 min 20-25C. La coloration est
stable 30 minutes.

Glycrol-3- Phosphate oxydase


> H2O2+ Dihydroxyactone-P
Glycrol-3-Phosphate + O2

CALCUL

Proxydase
H2O2 + Amino-4-Antipyrine + chloro-4-phnol > Quinone rose +H2O

D.O. Echantillon
Triglycrides =

REACTIFS
Ractif 1
Tampon pipes pH 7,2
Solution tampon Chloro-4-phnol
Ractif 2
enzymes

Ractif 3
Standard

xn
D.O. Standard

mg/dl : n = 200
g/l :
n=2
mmol/l : n = 2,28

50 mmol/l
2 mmol/l

Lipoproteine lipase
Glycrokinase
Glycrol 3-P-Oxydase
Proxydase
Amino-4-antipyrine
ATP

150000 U/l
800 U/l
4000 U/l
440 U/l
0,7 mmo/l
0,3 mmol/l

Standard glycrol
(en trioline)

200 mg/dl
2 g/l
2,28 mmol/l

LINARIT
La mthode est linaire jusqu 10 g/l (1000 mg/dl -11,4
mmol/l). Si la concentration est plus importante, diluer
Ichantillon au 1/10 avec une solution de NaCI 9 g/l
et refaire le dosage. Multiplier le rsultat par 10.

VALEURS USUELLES
Femmes

40 - 140 mg/dl
0,40 - 1,40 g/l
0,46 - 1,60 mmol/l

Hommes

60 - 165 mg/dl
0,60 - 1,65 g/l
0,68 - 1,88 mmol/l

PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre le Iyophilisat R2 avec un flacon de tampon R1.
Stabilit du ractif de travail : 1 semaine 20-25C
4 semaines 2-8C.

ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine.

NOTE
MODE OPERATOIRE
Longueur donde :.............................505 nm (490-550)
Temprature :....................................37C
Cuve :................................................1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc
ractif.

Les triglycrides sont stables dans le srum 3 jours


2 - 8C

BIBLIOGRAPHIE
Fossati P., Prencipe I., Clin. Chem. 28, 2077 (1982)
Young D., Pestaner L., Clin. Chem., 21,5 (1975)

37

FT Fr 27

Juin 2008

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 201 41, (200 Tests)
R1 : 2 x 100 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 4ml
R4 : 2 x 10 ml (10 x conc)

Rf. 20146, (500 Tests)


R1 : 1 x 500 ml
R2 : 1 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 5 ml
R4 : 1 x 50 ml (10 x conc)

Rf. 20148, (1000 Tests)


R1 : 2 x 500 ml
R2 : 2 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 5 ml
R4 : 2 x 50 ml (10 x conc)

UREE COLOR
Mthode Berthelot modifie

PRINCIPE
Lure est dose en cintique selon la raction suivante :
Urase
>

Ure + H2O

2NH3 + CO2

Les ions ammonium, en prsence de salicylate et dhypochlorite de sodium ragissent en formant un compos
de couleur verte (Dicarboxylindophenol) dont lintensit
est proportionnelle la concentration en ure.

Blanc

Etalon

Echantillon

Etalon

10 l

Echantillon

Ractif de
travail A

1 ml

10 l

1 ml

1 ml

Mlanger, incuber 5 min. 37 C ou 10 min. 20-25C.


Ajouter ensuite.

REACTIFS

1 ml

Ractif 4

1 ml

1 ml

Ractif 1 Tampon
Ractif 2

EDTA
Salicylate de sodium
Nitroprussiate de sodium
Urase
Phosphate pH 6,7

Mlanger, incuber 5 min, 37C ou 10 min. 20 - 25C.


Lire contre le blanc.
Stabilit de la coloration 2 heures labri de la lumire

2 mmol/l
60 mmol/l
32 mmol/l
30000 U/l
60 mmol/l

CALCUL
D.O. Echantillon

Ractif 3 Etalon ure

Ractif 4
10 x [ ]

Hypochlorite de sodium
Hydroxyde de sodium

0,50 g/l
8,325 mmol/l

Ure =

40 mmol/l
150 mmol/l

g/l :
mmol/l :

PREPARATION ET STABILITE

La mthode est linaire jusqu 4 g/l (66,6 mmol/l)


Dans les urines, la mthode est linaire jusqu 100 g/l .

VALEURS USUELLES

ECHANTILLONS

Srum, plasma

Srum, plasma recueilli sur hparine.


Urine dilue au 1/50 avec de leau distille.

Urine

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
590 nm (578 Hg)
Temprature :
25-30-37C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur le blanc ractif.

Juin 2008

n = 0,50
n = 8,325

LINEARITE

Le ractif 4 est complter avec 90 ml deau distille :


Rf. 20141, 450 ml deau distille Rf. 20146 ou Rf.
20148
Dissoudre le flacon R2 dans le tampon R1 : ractif A.
Les ractifs de travail sont stables : 6 mois 2-8C,
14 Jours 20-25C

FT Fr 28

xn
D.O. Etalon

15 - 40 mg /dl
0,15 - 0,40 g/l
2,49 - 6,66 mmol/l
20-35 g/24h

BIBLIOGRAPHIE
Balleter, W.G., Bushaman, C.S., Tidwell, P.W., Anal.
Chim. 33,59
Berthelot, M.P.E., Report Chim. Appl. 284 (1859)
Mac Key, E.M., Rackeyll, J. Clin. Invest, J. Clin.Invest. 4,
295 (1927)

38

Biomaghreb
UREE UV

PRESENTATION
Rf 20143, (200 tests)
R1 : 4 x 50 ml
R2 : 4 flacons (Iyoph)
R3 : 1 x 4 ml

Mthode cintique

Rf. 20147, (450 Tests)


R1 : 9 x 50 ml
R2 : 9 flacons (Iyoph)
R3 : 2 x 5 ml

CALCUL
. D.O. Echantillon

PRINCIPE
Lure est dose en cintique selon les ractions suivantes:

. D.O. Standard

Urase
Ure + H2O - > 2NH3 + CO2

mg/dl : n = 50
g/l
: n = 0,50
mmol/l : n = 8,325

GLDH
2NH4+ + Oxo-2-glutarate+NADH ~> L-Glutamate
+ NAD+ + 2H2O

LINEARITE
La mthode est linaire jusqu 2 g/l (200 mg/dl-33.3
mmol/l).

GLDH: Glutamate deshydrognase

REACTIFS

VALEURS USUELLES

Ractif 1
Tampon

Tampon Tris pH 8,0

Ractif 2
Enzymes

Urase
GLDH
NADH
oxo-2 glutarate

> 10 000 U/L


16 000 U/L
0,30 mmo/l
15 mmol/l

Standard ure

50 mg/dl
8,325 mmol/l

Ractif 3
Standard

xn

Ure =

80 mmol/l
Srum, plasma

15 - 40 mg/dl
0,15 - 0,40 g/l
2,49 - 7,47 mmo/l

Urine

20-35 g/24 h

NOTES
Ne pas utiliser danticoagulant contenant des ions
fluorures ou ammonium.

PREPARATION ET STABILITE
Dissoudre un flacon de R2 dans un flacon de R1.
Le ractif de travail est stable: 5 jours 20-25C
3 semaines 2-8C

BIBLIOGRAPHIE
Chaney, A. Clin. 8, 130 (1962)
Fawcett J.K., J. Clin. Path.13, 15 (1960)

ECHANTILLONS
Srum, plasma recueilli sur hparine
Urine dilue au 1/100 avec de leau distille.

MODE OPERATOIRE
Longueur donde :
340 nm
Temprature :
25-30-37C
Cuve :
1 cm dpaisseur
Ajuster le zro du spectrophotomtre sur lair ou leau
distille.

Solution de travail

Etalon

Dosage

1 ml

1 ml

Princuber la temprature choisie (25, 30 ou 37C)


Ractif 3 (Etalon)
Echantillon

10 I
10 l

Mlanger, mesurer la diminution de DO entre :


t = 20 secondes et t = 80 secondes.

39

FT Fr 29

Dc 2007

Biomaghreb

HEMATOLOGIE
HEMOSTASES
Page

AUTO FIBRI 1

42
Rf. 30033

10 x 4 ml

AUTO FIBRI 2

43
Rf. 30034

10 x 4 ml

CEPHALINE-KAOLIN
Rf. 30021
Rf. 30051

44
6 x 3 ml
8 x 2 ml

CHLORURE DE CALCIUM
Rf. 30051

44
5 x 20 ml

FIBRINOGENE

45
Rf. 30031
Rf. 30032
Rf. 30035

10 x 2 ml
10 x 4 ml
5 x 10 ml

HEMOGLOBINE

46
Rf. 30041
Rf. 30042
Rf. 30043

50 ml
100 ml
500 ml

THROMBOPLASTINE CALCIQUE
Rf. 30011
Rf. 30012

41

47
12 x 4 ml
8 x 4 ml

Biomaghreb
AUTO FIBRI 1

PRESENTATION

Dtermination du fibrinogne
par les automates dtection
lectro-magntique

Rf. 30033, (400 Tests)


R1 : 10 x 4 ml (Iyoph)
R2 : 1 x 150 ml

PRINCIPE

Technique automatique
Diluer le plasma dans le tampon R2

Adaptation de la dtermination du fibrinogne au mode


de dtection des appareils automatiques. En prsence
dun excs de thrombine, le temps de coagulation dun
plasma pralablement dilu est inversement proportionnel
la quantit de fibrinogne plasmatique.

Fibrnimie
Faible
Normale
Eleve

REACTIFS
Ractif 1
Ractif 2

Thrombine bovine
Tampon veronal pH = 7,35

0.1
0.1
0.1

Ractif R2
0.4
0.9
1.9

Plasma dilu
200 l
Incuber 2 min 37C
R1 non incub
100 l
Noter le temps de coagulation
Faire une double dtermination par dosage

Reprendre le flacon R1 par le volume deau distille de

prfrence strile indique sur le flacon. Laisser la


solution se stabiliser 20 minutes temprature
ambiante.
Stabilit aprs reconstitution : 8 h 20 - 25C
48h 2 - 8C
1 mois - 20C
(Congeler par petite fraction en tube plastique).

RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au
tableau joint dans le kit, la concentration de fibrinogne
correspondante au temps de coagulation doit tre
corrige comme suit:
- Hmatocrite normal : (50 %) multiplier par 1,2 le
rsultat obtenu sur le tableau pour tenir compte de la
dilution de lanticoagulation liquide, cette majoration
de 20 % est compatible avec la prcision de la
mthode.
- Hmatocrite anormale: Le taux de fibrinogne est
obtenu en multipliant le rsulat trouv sur le tableau
par :
10 - (9 Hte*)
* Hte = Hmatocrite
9 - (9 Hte)

PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur
citrate trisodique liquide 0,11 molaires. (1 volume de
citrate pour 9 volumes du sang).
Centrifuger 10 min 2500 g (4000 tr/mn) ou laisser sdimenter.

Raliser le test de prfrence dans les 6h qui suivent le


prlvement.

MODE OPERATOIRE
Technique manuelle
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette
dilution permet dobtenir habituellement un temps de
coagulation compris entre 8 et 25 secondes.(fibrinmie
comprise entre 1,5 et 4g/l)
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes
rpter le teste sur une dilution au 1/20 ou
ventuellement au 1/30. Dans ces derniers cas le
rsultat obtenu sera multipli par 2 ou 3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test
sur une dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans
ces derniers cas les rsultats obtenus sont diviss par
2 ou 5 respectivement.
Toute dtermination doit tre faite en double
Dans un tube hmolyse introduire :

VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l

BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa : Acta Haematol 17, 137 (1957)
2- Caen J. Larrieu M.J. Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris 1975.
3- Andrew M. et al.
Blood 70, 165 (1987).

Plasma dilu
200 l
Incuber 2 mn 37C
200 l
R1 incub 37 C
Dclencher simultanment le chronomtre, plonger
rgulirement le crochet au milieu du tube jusqu apparition
dun mince filament de fibrine et noter le temps de coagulation.
Dc 2007

1: 5
1: 10
1: 20

Plasma (ml)

Dans la cuve de lappareil distribuer

RECONSTITUTION ET STABILITE

FT Fr 30

Dilutions

42

Biomaghreb
AUTO FIBRI 2

PRESENTATION

Dtermination du fibrinogne par les


automates dtection optique

Rf. 30034, (200 - 400 Tests)


R1 : 10 x 4 ml (lyoph)
R2 : 1 x 150 ml

Dclencher simultanment le chronomtre, plonger


rgulirement le crochet au milieu du tube jusqu
apparition dun mince filament de fibrine et noter le temps
de coagulation.

PRINCIPE
Adaptation de la dtermination du fibrinogne au mode
de dtection des appareils automatiques. En prsence
dun excs de thrombine, le temps de coagulation dun
plasma pralablement dilu est inversement
proportionnel la quantit de fibrinogne plasmatique.

Technique automatique
Diluer le plasma dans le tampon R2
Fibrnimie

Dilutions

Plasma(ml)

Ractif R2

1 : 10
1 : 20
1 : 40

0,1
0,05
0,05

0,9
0,95
1,95

REACTIFS
Ractif 1
Thrombines
Ractif 2
Diluent

Faible
Normale
Eleve

Thrombine bovine + Kaolin


Tampon veronal pH = 7,35

Dans la cuve de lappareil distribuer

RECONSTITUTION ET STABILITE
Reprendre le flacon R1 par le volume deau distille de
prfrence strile indique sur le flacon. Laisser la
solution se stabilise 20 minutes temprature ambiante.
Stabilit aprs reconstitution:
8 h 20 - 25C
48h 2 - 8C
1 mois -20C
(Congeler par petite fraction en tube plastique).

200 l

Incuber 2 min 37C


R1 non incub

100 l

Noter le temps de coagulation


Faire une double dtermination par dosage

RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au
tableau joint dans le kit, la concentration de fibrinogne
correspondante au temps de coagulation doit tre
corrige comme suit:
- Hmatocrite normal: (50 %) multiplier par 1,2 le rsultat
obtenu sur le tableau pour tenir compte de la dilution
de lanticoagulation liquide, cette majoration de 20 %
est compatible avec la prcision de la mthode.
- Hmatocrite anormale: Le taux de fibrinogne est
obtenu en multipliant le rsulat trouv sur le tableau
par:
10- (9 Hte*)
* Hte = Hmatocrite
9 - (9 Hte)

PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur
citrate trisodique liquide 0,11 M. (1 volume de citrate
pour 9 volumes du sang).
Centrifuger (10 minutes 2500 g (4000 tr/mn) ou laisser
sdimenter.
Raliser le test de prfrence dans les 6h qui suivent le
prlvement.

MODE OPERATOIRE
Technique manuelle
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette
dilution permet dobtenir habituellement un temps de
coagulation compris entre 8 et 25 secondes. (Fibrinmie
comprise entre 1,5 et 4 g/l).
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes
rpter le test sur une dilution au 1/20 ou ventuellement
au 1/30. Dans ces derniers cas le rsultat obtenu sera
multipli par 2 ou 3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test
sur une dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans
ces derniers cas les rsultats obtenus sont diviss par 2
ou 5 respectivement.
Dans un tube hmolyse introduire:
Plasma dilu
Incuber 2 mn 37C
R1 incub 37 C

Plasma dilu

VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l

BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa: Acta Haematol 17, 137 (1957)
2- Caenj. Larrieu M.J, Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris (1975).
3- Andrew M. et al.
Blood 70, 165 (1987).

200 l
200 l

43

FT Fr 31

Dc 2007

Biomaghreb
CEPHALINE - KAOLIN

PRESENTATION
Rf. 30021, (180 Tests)
6 flacons (Lyoph)

Temps de Cphaline active

Ractif complmentaire
Rf 30051, (1000 Tests)
5 flacons de 20 ml CaCI2 0,025 M prt lemploi

RESULTATS
Noter les temps de coagulation du tmoin et des
plasmas tests.
Le temps normal est compris entre 30 et 40 secondes.
Une augmentation suprieure 8 secondes par rapport
aux tmoins doit inciter procder une exploration
approfondie.
Lors dun examen pr-opratoire, une atteinte vasculaire
ou plaquettaire, un temps de Cphaline Kaolin normal
semble mettre labri dun saignement incontrolable.
La zone thrapeutique du temps de Cphaline-Kaolin
sous hparine se situe gnralement entre 1,5 et 2 fois
le temps du tmoin.

PRINCIPE
La Cphaline, extrait de lipides crbraux, utilise
comme substitut des facteurs plaquettaires, permet de
mesurer globalement les dficits en facteurs plasmatiques
de la thromboplastino-formation endogne.
Le Kaolin est employ comme activateur des facteurs de
la phase contact.

REACTIFS
Cphaline Kaolin: Reprendre le flacon par 3 ml deau distille.
Laisser 15 minutes la temprature ambiante (20-25C).
Agiter frquemment avant toute utilisation.
Chlorure de Calcium 0,025 M (Rf. 30051) ; prt
lemploi.

CONSERVATION
- Lyophilis: 3 ans + 4C.
- Reconstitu: 4 semaines + 4C.

PRELEVEMENT

REACTIF AUXILIAIRE

Prlever le sang sur citrate de sodium: 9 volumes de


sang pour 1 volume danticoagulant (solution 3,8 %
de citrate de sodium cristallis 5,5 H2O), centrifuger
4000 tours/minute (2500g) pendant 20 mn au moins.
Le test devra tre effectu dans un dlai nexcdant pas
4 heures aprs le prlvement. On prlvera,
galement dans le mme temps, deux tubes de
sang tmoins qui seront traits comme celui du malade.

CHLORURE DE CALCIUM
0.025 M

MODE OPERATOIRE
Toute dtermination doit tre faite en double
Dans un tube plac au bain marie 37C mettre
successivement.
Plasma du malade ou plasma tmoin
Cphaline-Kaolin

0,1 ml
0,1 ml

Aprs incubation de 3 mn, ajouter en


dclanchant simultanment le chronomtre.
Ca Cl2 0.025 M pr-incub 37C

0,1 ml

Solution prte lemploi.

Noter le temps de coagulation.

FT Fr 32

Juin 2008

44

Biomaghreb
FIBRINOGENE

PRESENTATION
Rf 30031, (100-200 Tests) Rf 30032, (200-400 Tests)

Rf 30035, (250-500Tests)

R1: 10 x 2 ml (Iyoph)

R1: 10 x 4 ml (Lyoph)

R1: 5 x 10 ml (Iyoph)

R2 : 1 x 100 ml

R2 :1 x 150 ml

R2 :1 x 150 ml

3-TECHNIQUE AUTOMATIQUE :
detection electro-magntique
Diluer le plasma dans le tampon R2

PRINCIPE
En prsence dun excs de thrombine, le temps de coagulation
dun plasma pralablement dilu est inversement proportionnel
la quantit de fibrinogne plasmatique.

REACTIFS
Ractif 1
Thrombine

Thrombine bovine

Ractif 2
Diluent

Tampon veronal pH = 7,35

Fibrnimie

Dilutions

Plasma (ml)

Ractif R2

Faible
Normale
Eleve

1: 5
1:10
1: 20

0.1
0.1
0.1

0.4
0.9
1.9

Plasma dilu
Incuber1 min 37C
R1 non incub
Noter le temps de coagulation
Faire une double dtermination par dosage

Reprendre le flacon R1 par le volume deau distille de prfrence


strile indique sur ltiquette. Laisser la solution se stabiliser 20 min
temprature ambiante (20-25C).
Stabilit aprs reconstitution : 8 h 20 - 25C / 48 h 2 - 8C
1 mois - 20C

100l
50l

4-TECHNIQUE AUTOMATIQUE : Automate


dtectin optique

(congeler par petite fraction en tube plastique)

Diluer le plasma dans le tampon R2

PRELEVEMENT
Le sang est prlev par ponction veineuse franche sur citrate
trisodique liquide 0,11 M (1 volume de citrate pour 9 volumes
de sang).
Centrifuger pendant 10 minutes 4000 tr/min (2500g) ou
laisser sdimenter.
Raliser le test de prfrence dans les 6h qui suivent le
prlvement.

Fibrnimie

Dilutions

Plasma (ml)

Ractif R2

Faible
Normale
Eleve

1:10
1: 20
1: 40

0.1
0.05
0.05

0.9
0.95
1.95

Dans la cuve de lappareil distribuer


Plasma dilu
Incuber1 min 37C
R1 non incub
Noter le temps de coagulation
Faire une double dtermination par dosage

MODE OPERATOIRE
Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette dilution
permet dobtenir habituellement un temps de coagulation
compris entre 8 et 25 secondes.
(fibrinmie comprise entre 1,5 et 4 g/l).
Si le temps de coagulation est infrieur 8 secondes rpter
le test sur une dilution au 1/20 ou ventuellement au 1/30.
Dans ces derniers cas le rsultat obtenu sera multipli par 2 ou
3 respectivement.
Si le temps est suprieur 25 secondes refaire le test sur une
dilution au 1/5 ou ventuellement au 1/2. Dans ces derniers
cas les rsultats obtenus sont diviss par 2 ou 5
respectivement.

100ul
50ul

N.B : Pour amliorer la dtection optique de la coagulation il


faut utiliser le kaolin 10% (rprendre le flaon de lyophilisat
par 2 ml deau distill (pour la rf 30031) et ajouter 10 ul de
solution de Kaolin 10% dans ce flacon : cest le ractif de
travail)
* Le Kaolin est fournit la demande.

RESULTAT
Pour chaque temps de coagulation se reporter au tableau joint
dans le kit, la concentration de fibrinogne correspondant au
temps de coagulation doit tre corrige comme suit :
- Hmatocrite normal : (50%) multiplier par 1,2 le
rsultat obtenu sur le tableau pour tenir compte de la dilution
de lanticoagulant liquide ; cette majoration de 20 % est
compatible avec la prcision de la mthode.
Hmatocrite anormal : Le taux de fibrinogne est obtenu
en multipliant le rsultat trouv sur le tableau

1- TECHNIQUE MANUELLE
Dans un tube hmolyse introduire :
200 l
200 l

Dclencher simultanment le chronomtre, plonger


rgulirement le crochet au milieu du tube jusqu apparition
dun mince filament de fibrine et noter le temps de coagulation.

par : 10 -(9 Hte*)


9 -(9 Hte)

2-TECHNIQUE UTILISANT LE FIBROMETRE :


BRAS 0,4 ml
Dans la cuve de lappareil introduire :
Plasma dilu
Incuber 2 mn 37C
R1 non incub 37C
Noter le temps de coagulation

dans la cuve de lappareil distribuer

RECONSTITUTION ET STABILITE

Plasma dilu
Incuber 2 mn 37C
R1 pr-incub 37C

Automate

* Hte = Hmatocrite

VALEURS USUELLES
Entre 2,5 et 4 g/l

200 l

BIBLIOGRAPHIE
1- Claussa : Acta Haematol 17,137 (1957)
2- Caenj. Larrieu M.j. Sammama M.
Lexpansion scientifique Paris 1975
3- Andrew M.et al.
Blood 70, 165 (1987)

200 l

45

FT Fr 33

Fvrier 2009

Biomaghreb
PRESENTATION

HEMOGLOBINE

Rf. 30041 (500 tests)

Rf. 30042 (1000 tests)

Rf. 30043 (5000 tests)

R1 : 1 x 50 ml

R1 : 1 x 100 ml

R1 : 4 x 125 ml

Mthode colorimtrique
Stabilit de la coloration :
1 heure
(viter dexposer le milieu ractionnel une lumire
trop vive).

PRINCIPE
Dosage de lhmoglobine par transformation en
cyanmthmoglobine sous laction du ferricyanure de
potassium et de cyanure de potassium.

CALCUL
[Hemoglobine] g/l = DO

chantillon

x 376

REACTIFS
Ractif 1
de Drabkin
50 fois
concentr

Ferricyanure de potassium 30 mmol/l


Cyanure de potassium
38 mmol/l
phosphore
monopotassique
50 mmol/l
Strox
25 ml/l

VALEURS USUELLES
(Biochemists Handbook 1961)
Nouveaux-ns :
Enfants de 1 an :
Enfants de 10 ans :
Hommes :
Femmes :

REACTIF TOXIQUE : Utiliser une pipette automatique.

ECHANTILLON

BIBLIOGRAPHIE

Sang total recueilli sur EDTA

Drabkin D.L. et al. - J. Biol. Chem. 1932, 98, 719.


Zijlstra N.C - Clin. Chim. Acta 1960, 5, 719.
INTERNATIONALCOMMITTEE FOR STANDARDI
SATION HEMATOLOGY.
Brit. J. Haemat. 1967, 13,71.

MODE OPERATOIRE
Solution de travail:
Ractif concentr de Drabkin R1.....................1 volume
Eau distille................................................. 49 volumes
Stabilit
1 mois 20-25 (ne pas placer au rfrigrateur).
Longueur donde :
Zro de lappareil :

540nm (Hg 546)


Solution de travail
Dosage

Echantillon
Solution de travail
de Drabkin

20 l
5 ml

Homogniser et photomtrer.

FT Fr 34

Dc 2007

195 50 g/l (12 mmol/l)


112 g/l (6,95 mmol/l)
129 g/l (8 mmol/l)
160 20 g/l (9,9 mmol/l)
140 20 g/l (8,7 mmol/l)

46

Biomaghreb
THROMBOPLASTINE
CALCIQUE

PRESENTATION
Rf. 30011, (240 Tests); 12 x 4 ml (Lyoph)

Dtermination du taux
de prothrombine (TP)

Rf. 30012, (160 Tests); 8 x 4 ml (Lyoph)

PRINCIPE
Le temps de Quick est un test global qui explore la
coagulation extrinsque (facteurs II, Vll, V et X).
Il consiste comparer les temps de coagulation dun
plasma tudier par rapport un tmoin normal servant
de rfrence en prsence dun excs de thromboplastine
tissulaire et de calcium.

REMARQUE
Un papier spcial est fourni avec chaque kit cette fin.
EXECUTION DU TEST
Toute dtermination doit tre faite en double.
Porter pralablement la thromboplastine 37 C.
Dans un tube hmolyse en verre mettre :

REACTIF
Plasma
100 l
Maintenir 2 mn 37
Thrombaplastine princub 37C 200 I

- Reprendre chaque flacon de Iyophilisat par le solvant,


agiter dlicatement jusqu obtention dune suspension
homogne.
- Incuber 30 minutes 37 C avant utilisation

- Dclencher simultanment le chronomtre


- Agiter en remuant le tube
- Noter le temps de coagulation
- A laide de la droite de THIVOLLE convertir les temps
obtenus en taux de prothrombine.
- Dans le cas du traitement aux anticoagulants oraux
(AVK), les rsultats peuvent tre exprims en INR
(International Normalized Ratio) ainsi dfini:

Conservation et stabilit:
* Lyophilis: entre 2-8C, jusqu la date limite indique
sur le coffret.
* Reconstitu : 30 jours + 4C
8h 37C

PRELEVEMENT
- Prlvement par ponction veineuse franche
- Eviter la stase veineuse et le prlvement la seringue.
- Prlvement sur citrate trisodique : un volume danticoagulant pour 9 volumes de sang.
- Centrifuger pendant 15 minutes 4000 tr/min (2500 g)
ou laisser sdimenter (indiffremment PRP ou PPP)
- Lexamen sera pratiqu 6h au plus tard aprs le
prlvement.

INR =

1/2

1/3

1/4

1/8

PLASMA (ml)

0,5

0,5

0,5

0,5

TAMPON (ml)

0,5

1,5

3,5

ACTIVITE %

100

50

33

25

12,5

Temps du tmoin

LISI est dtermin pour chaque lot de Thromboplastine


calcique et il est indiqu sur le tableau de correspondance
joint chaque coffret.

Cest la conversion du temps de Quick en secondes en


taux de prothrombine exprim en % par rapport la
normale (Droite de THIVOLLE).
Un pool de plasmas humains normaux est dilu au 1/2,
1/3, 1/4, 1/8 dans le tampon de MICHAELIS.

1/1

Temps du malade ISI

ISI : Index de Sensibilit International, dtermin vis-vis de la thromboplastine de rfrence de lOMS

ETALONNAGE

DILUTIONS

VALEURS USUELLES
- Chez un sujet normal : 70 100 %
- Les taux suprieurs 100 % nont pas de
signification pathologique.
- Chez un sujet trait par les AVK la zone thrapeutique
recherche est entre 20 % et 30 %.

Tracer la droite de THIOVOLLE sur papier din-verses.


Temps en secondes fonction de linverse des dilutions.

47

FT Fr 35

Juin 2008

Biomaghreb

HEMATOLOGIE
IMMUNOHEMATOLOGIE
Page

ANTICORPS MONOCLONAL anti-A


Rf. 30111
Rf. 30112

50
10 ml
10 x 10 ml

ANTICORPS MONOCLONAL anti-AB


Rf. 30131
Rf. 30132

51
10 ml
10 x 10 ml

ANTICORPS MONOCLONAL anti-B


Rf. 30121
Rf. 30122

52
10 ml
10 x 10 ml

ANTICORPS MONOCLONAL
anti-D (IgM + IgG)
Rf. 30141
Rf. 30142

53
10 ml
10 x 10 ml

ANTIGLOBULINE POLYVALENTE
Rf. 30181
Rf. 30182

49

54
10 ml
5 ml

Biomaghreb
PRESENTATION

ANTICORPS MONOCLONAL
anti-A

Rf. 30111, flacons compte goutte (100 - 400 tests)


Rf. 30112, flacons compte goutte (1000 - 4000 tests)

REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine murine.
physiologique.
- Dposer dans un puit de la microplaque 25 I du
ractif et 25 I de la suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la plaque sur un agitateur adapt
pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minutes + 20C.
- Centrifuger 1 minute 200 - 300 g.
- Agiter la plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif (25 l de ractif
remplacs par 25 l deau physiologique).
- Lire loeil nu.

CONSERVATION
A + 4C Jusqu la date de premption indique. Agent
conservateur : Azide de Sodium 1 Strictement rserv
lusage in vitro.

PRELEVEMENT
Prlever le sang de prfrence sur anticoagulant. Sur
tube sec, bien dissocier le caillot.
Conserver + 4C le sang qui ne peut tre examin
rapidement (aucune hmolyse ne doit tre observe).

TECHNIQUES DUTILISATION
En tubes.

Sur plaque non chauffe ( + 20C)


* Sang total non lav
- Dposer cte cte 2 gouttes de ractif et 1 goutte de
sang non lav.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange.
Lire lil nu au bout de 3 minutes.
* Hmaties non laves en suspension 10% en eau
physiologique
- Dposer cte cte 2 gouttes du ractif et 2 gouttes
de la suspension dhmaties (non laves) 10% en
eau physiologique.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.

- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique


- Prparer une suspension des hmaties 5% en eau
physiologique
- Mlanger dans un tube, 2 gouttes du ractif et 2
gouttes de la suspension dhmaties
- Centrifuger 1 minute 500 g.
- Dcoller les hmaties par agitation douce des tubes
- Lire lil nu

EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-A agglutine de faon visible les globules
rouges A3.

En microplaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
- Prparer une suspension des hmaties 5% en eau

FT Fr 36

Dc 2007

50

Biomaghreb
PRESENTATION

ANTICORPS MONOCLONAL
anti-AB

Rf. 30131, flacons compte goutte (100 - 400 tests)


Rf. 30132, flacons compte goutte (1000 - 4000 tests)

REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine murine.

- Prparer une suspension des hmaties 5 % en eau


physiologique.
- Dposer dans un puit de la micro plaque 25 l de la
suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la plaque sur un agitateur adapt
pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minute + 20C.
- Centrifuger 1 minute 200 - 300 g.
- Agiter la plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif (25 l de ractif
remplacs par 25 l deau physiologique).
- Lire lil nu.

CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur tiquette.
Agent conservateur: Azide de sodium 1.
Strictement rserv lusage in vitro.
PRELEVEMENT
Prlever le sang de prfrence sur anticoagulant. Sur
tube sec, bien dissocier le caillot. Conserver + 4 C le
sang qui ne peut tre examin rapidement (aucune
hmolyse ne doit tre observe).

TECHNIQUES DUTILISATION

En tube

Sur plaque non chauffe ( + 20C)


*Sang total non lav
- Dposer cte cte 2 gouttes de ractif et 1 goutte de
sang total non lav.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.
*Hmaties non laves en suspension 10 % en eau
physiologique:
- Dposer cte cte 2 gouttes du ractif et 2 gouttes
de la suspension dhmaties (non laves)
10 % en eau physiologique.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.

- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.


- prparer une suspension des hmaties 5% en eau
physiologique.
- Mlanger dans un tube, 2 gouttes du ractif et 2
gouttes de la suspension dhmaties.
- Centrifuger 1 minute 500 g.
- Dcoller les hmaties par agitation douce des tubes.
- Lire lil nu.
EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-A agglutine de faon visible les globules
rouges Ax.

En micro plaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.

51

FT Fr 37

Dc 2007

Biomaghreb
PRESENTATION

ANTICORPS MONOCLONAL
anti-B

Rf. 30121, flacons compte goutte (100 - 400 tests)


Rf. 30122, flacons compte goutte (1000 - 4000 tests)

REACTIF
- Prparer une suspension des hmaties 5 % en eau
physiologique.
- Dposer dans un puit de la micro plaque 25 l de la

Anticorps monoclonal dorigine murine.

CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
ltiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1.
Strictement rserv lusage in vitro.

Prlever le sang de prfrence sur anticoagulant. Sur


tube sec, bien dissocier le caillot. Conserver + 4 C le
sang qui ne peut tre examin rapidement ( aucune
hmolyse ne doit tre observe).

suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la plaque sur un agitateur adapt
pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minute + 20C.
- Centrifuger 1 minute 200 - 300 g.
- Agiter la plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif (25 l de ractif
remplacs par 25 l deau physiologique).
- Lire loeil nu.

TECHNIQUES DUTILISATION

En tube

Sur plaque non chauffe ( + 20C)


*Sang total non lav
- Dposer cte cte 2 gouttes de ractif et 1 goutte de
sang total non lav.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.
* Hmaties non laves en suspension 10 % en eau
physiologique :
- Dposer cte cte 2 gouttes du ractif et 2 gouttes
de la suspension dhmaties (non laves)
10 % en eau physiologique.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm de diamtre.
- Basculer plusieurs fois la plaque pour homogniser
le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.

- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.


- prparer une suspension des hmaties 5% en eau
physiologique.
- Mlanger dans un tube, 2 gouttes du ractif et 2
gouttes de la suspension dhmaties.
- Centrifuger 1 minute 500 g.
- Dcoller les hmaties par agitation douce des tubes.
- Lire lil nu.

PRELEVEMENT

EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-B agglutine de faon visible les globules
rouges B3.

En micro plaque
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.

FT Fr 38

Dc 2007

52

Biomaghreb
PRESENTATION

ANTICORPS MONOCLONAL
anti-D (IgM + IgG)

Rf. 30141, flacons compte goutte (100 - 400 tests)


Rf. 30142, flacons compte goutte (1000 - 4000 tests)

REACTIF
Anticorps monoclonal dorigine humaine en milieu
albumineux.

Test de Coombs Indirect Standard ou Basse Force


lonique ( BFI ) :
- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
- Prparer une suspension des hmaties 3-5% en eau
physiologique (Standard) ou en milieu solution Basse
Force Ionique (BFI).
- Mlanger dans un tube, 2 gouttes du ractif et 2
gouttes de la suspension dhmaties.
- Incuber + 37C : 45 minutes (Standard) ou 15
minutes (BFI).
- Laver 3 fois en eau physiologique (bien essorer aprs
le dernier lavage).
- Ajouter 1 goutte dantiglobuline polyvalente ou anti-lgG.
(suivre le mode dutilisation de chaque antiglobuline)
- Centrifuger 1 minute 500 g.
- Dcoller les hmaties par agitation douce des tubes.
- Lire iil nu.

CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
tiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1 .
Strictement rserv lusage in vitro.

PRELEVEMENT
Prlever le sang sur anticoagulant.
Conserver + 4C le sang qui ne peut tre examin
rapidement (aucune hmolyse ne doit tre observe).

TECHNIQUES DUTILISATION
Sur plaque chauffante + 40C ( Rhsuscope ):
- Dposer cte cte 1 goutte de ractif et 1 goutte de
sang total non lav.
- Mlanger laide dun agitateur par un mouvement
spiral centrifuge pour former une raction circulaire de
2 cm diamtre.
- Basculer plusieurs fois le rhsuscope pour
homogniser le mlange.
- Lire lil nu au bout de 3 minutes.

EXIGENCES PARTICULIERES
Le ractif anti-D monoclonal albumineux est capable
dagglutiner les chantillons D faibles en technique de
Coombs indirect (Standard ou Basse Force Ionique).
Pour chaque chantillon, il convient dutiliser
en
parallle un tmoin ngatif albumineux pour ractifs
monoclonaux albumineux anti-Rhsus. Labsence
dagglutination avec le tmoin permet daffirmer la
spcificit dune raction positive avec lanti-D.

Sur microplaque + 37C :


- Laver 3 fois les hmaties en eau physiologique.
- Prparer une suspension des hmaties 3% en eau
physiologique.
- Dposer dans un puit de la micro plaque 25 I de la
suspension dhmaties.
- Agiter lgrement la micro plaque sur un agitateur
adapt pour homogniser le mlange.
- Incuber 10 minutes + 37C (en prenant soin de
recouvrir la plaque par un couvercle pour viter toute
vaporation).
- Centrifuger 1 minute 200 - 300g.
- Agiter la micro plaque sur lagitateur jusqu remise en
suspension complte du tmoin ngatif.
- Lire lil nu.

PRECAUTIONS SPECIALES DEMPLOI


Les produits dorigine humaine ont subi un dpistage
ngatif concernant linfection VIH 1 et 2, IHpatite B,
IHpatite C, mais doivent cependant tre manipuls
comme des produits potentiellement infectieux.

53

FT Fr 39

Dc 2007

Biomaghreb
PRESENTATION

ANTIGLOBULINE
POLYVALENTE

Rt. 30181, flacons compte goutte (100 Tests)

Ractif pour Test de Coombs

Rf. 30182, flacons compte goutte (50 Tests)

REACTIF

Pour le Coombs Indirect

Srum dorigine animale.

Tmoin autologue : hmaties du patient et srum du


patient.

CONSERVATION
A + 4C jusqu la date de premption indique sur
ltiquette.
Agent conservateur : Azide de sodium 1
Strictement rserv lusage in vitro.

Pour le Coombs direct


Tmoin ngatif salin : antiglobuline remplace par de
leau physiologique.
Tmoin ngatif srum AB : antiglobuline remplace par
du srum AB.

TECHNIQUES DUTILISATION

Tmoin positif : hmaties sensibilises avec un


anticorps connu, dilu ou faible.
Une raction positive nest interprtable que si les
tmoins ngatifs ou autologues sont ngatifs.
Une raction ngative nest interprtable que si le
tmoin positif est positif (permettant daffirmer la bonne
ractivit de lantiglobuline).

- Test de Coombs indirect standard


. Prparer une suspension 5% en eau physiologique
des hmaties pralablement laves 3 fois en eau
physiologique.
. Mlanger dans un tube 2 gouttes de srum ou de
ractif et 2 gouttes de la suspension dhmaties 5%.
. Incuber 45 mn + 37C.
. Laver 3 fois en eau physiologique (bien essorer aprs
le dernier lavage).
. Ajouter une goutte dantiglobuline polyvalente.
. Centrifuger 1 mn 500 g.
. Lire lagglutination macroscopiquement aprs une
lgre agitation ou au microscope (x100) aprs
talement sur lame.
- Test de Coombs Indirect en Basse Force
lonique (Tampon LISS)
Technique identique mais en utilisant des hmaties
laves et remises en suspension 3% en milieu BFI.
Incuber 15 mn + 37C.
- Test de Coombs direct
Technique identique en supprimant ltape
sensibilisation des hmaties.

de

INTERPRETATION
Il est recommand de raliser les tmoins suivants :

FT Fr 40

Dc 2007

54

Biomaghreb

SEROLOGIE ET
TESTS RAPIDES
Page

ASO LATEX

56
Rf. 40037
Rf. 40023

50 tests
100 tests

CRP LATEX

57
Rf. 40034
Rf. 40043

50 tests
100 tests

FACTEURS RHUMATOIDES LATEX


Rf. 40036
Rf. 40024

58
50 tests
100 tests

STREPTOLYSINE ETALONNE
Rf. 40021
Rf. 40022

59
6 X 3 doses
10 x 3 doses

TPHA

61
Rf. 40011
Rf. 40012

100 test
300 test

UCG 25

62
Rf. 40032
Rf. 40033
Rf. 40034

55

20 bandelettes
100 bandelettes
40 bandelettes

Biomaghreb
ASO LATEX

PRESENTATION

Dtection srologique sur particules de


latex danticorps antistreptolysine

Rf. 40037 (50 tests)


Rf. 40023 (100 tests)

LECTURE

PRINCIPE

Raction positive (agglutination) : prsence danticorps


antistreptolysine O un taux suprieur 200 Ul/ml (seuil
pathologique).
Raction ngative (suspension homogne) :
absence danticorps antistreptolysine O ou prsence
un taux infrieur 200 Ul/ml.

Mise en vidence des anticorps antistreptolysine O


(ASO) par raction dagglutination sur carte de particules
de latex sensibilises par de la streptolysine O
stabilise. Le ractif est standardis par rapport ltalon
de lO.M.S.

REACTIFS
Latex ASO

Homogniser soigneusement
avant utilisation

Contrle positif

Flacon compte-gouttes
Prt lemploi

Contrle ngatif

Flacon compte-gouttes
Prt lemploi

Cartes

Cartes pour ralisation du test

Agitateurs

Agitateurs usage unique pour


mlange ractifs-chantillons

TEST SEMI QUANTITATIF


Prparer une srie de dilutions du srum tester en
solution de NaCI 8,5 g/l. Rpter le test pour chaque
dilution de la mme manire que pour le test qualitatif et
rechercher la dernire dilution donnant encore une
agglutination. La concentration du srum test en ASO
est estime en multipliant le titre obtenu par le seuil de
sensibilit du test 200 Ul/ml.

INTERPRETATION

Conserver 2 - 8C. La date limite dutilisation


indique sur ce coffret.

Les infections dues aux streptocoques du groupe A


peuvent tre suivies de nombreuses et svres
complications dont le rhumatisme articulaire aigu et la
glomrulonphrite aigu. Le diagnostic biologique
dune streptococcie rcente ou en cours est
essentiellement dordre immunologique, notamment au
moment o le germe responsable ne peut tre retrouv
bactriologiquement. Les antistreptolysines O sont les
anticorps les plus couramment recherchs. Dans 80 %
des infections streptococciques, le taux en ASO slve
au-del de 200 Ul/ml, valeur dfinie comme limite
pathologique. Il est recommand de confirmer le
diagnostic en rptant les tests sur un srum prlev 15
jours plus tard.

et

ECHANTILLONS
Srums frais ou conservs -20C , prsentant
une coagulation complte.
Rejeter tout srum lipmique ou contamin.
Ne pas utiliser de plasma.

MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (18-25C).

TEST QUALITATIF

BIBLIOGRAPHIE

Dpose successivement sur la carte :


-1 goutte du contrle positif
-1 goutte du contrle ngatif
-1 goutte des srums tester
- A ct de chaque dpt, ajouter, laide du compte
gouttes tenu verticalement 1 goutte de ractif latex ASO
bien homognis.
- Mlanger laide dun agitateur.
- Imprimer la carte un lent mouvement de rotation.
Noter lapparition dune agglutination en 3 minutes
exactement.
FT Fr 41

Dc 2007

Alouf, J.E. and Raymond, M. Biochimie, 56 (1973).


Bach, G. Wiatr, R.A., Anderson, T.O. and Chealte,
E.: Amer, J.Clin. Path., 52 (1969).
Halbert, S.P.: Ann. N.Y. Acad. Sci. 103 (1963)
Klein. G.C, Baker C.N. and Jones. W.L. Appl.
Microblol., 21, 999 (1979).
Klein, G.C, Manual of Clin. Immunology, Ame, Soc.
Microbiol, p. 264 (1976)
Schimidt, K., Mueller-Eckardt, Ch. and Beckmann,
A : Rheumatol, 29 (1970).

56

Biomaghreb
CRP LATEX

PRESENTATION

Dtection srologique sur particules de


Latex de la protene C Ractive

Rf. 40034 (50 Tests)


Rf. 40043 (100 Tests)

PRINCIPE

LECTURE

Le CRP LATEX est un test rapide au latex pour la


recherche de la Protine C Ractive (CRP). Les
particules de latex, sensibilises avec des anticorps
spcifiques de la CRP humaine, sont agglutines en
prsence de srum de patient contenant la CRP.

Raction ngative : La suspension reste homogne


Raction positive : agglutination nette en 2 minutes.
La sensibilit du test CRP LATEX tant de 6 mg/l. Les
srums donnant une raction positive ont une
concentration suprieure 6mg/l de CRP.

REACTIFS

TEST SEMI QUANTITATIF

Latex anti-CRP

Suspension aqueuse de
particules de latex sensibilises
Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)
Homogneiser avant utilisation

Contrle positif

Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)

Contrle ngatif

Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 l)

Cartes

Cartes pour ralisation du test

Agitateurs

Agitateurs usage unique pour


mlange ractifs-chantillons

Prparer une srie de dilutions du srum tester en


solution de NaCI 8,5 g/l. Rpter le test pour chaque
dilution de la mme manire que pour le test qualitatif et
rechercher la dernire dilution donnant encore une
agglutination. La concentration du srum test en CRP
est estime en multipliant le titre obtenu par le seuil de
sensibilit du test 6mg/l.

INTERPRETATION
Taux normal adulte 6 mg/l
La concentration en CRP augmente en cas de maladies
inflammatoires aigus et de tumeurs malignes.
Le suivi continu des patients prsentant une
concentration leve en CRP donne une bonne
indication de la rponse thrapeutique de ces malades.

BIBLIOGRAPHIE
Hind. C.R.K. and M.B. Pepys
nt. Med. 5-151 (1984).
Singer, J.M. et al.
Amer. J. Clin. Path. 28.611 (1957)

Conservation 2-8 C. La date limite dutilisation est


indique sur le coffret.

ECHANTILLONS
Srums frais ou conservs -20C depuis au moins un
mois, prsentant une coagulation complte.
Eliminer les srums fortement lipmiques.

MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (1 8-25C).

TEST QUALITATIF
Dposer successivement sur la carte:
-1 goutte du contrle positif
-1 goutte du contrle ngatif
-1 goutte (50 I) de srum tester.
- Placer ct de chaque dpt 1 goutte de Latex antiCRP bien homognis.
- Mlanger les 2 gouttes laide dun agitateur et les
taler.
- Imprimer la carte un mouvement de rotation et
observer lapparition ventuelle dune agglutination en 3
minutes.

57

FT Fr 42

Dc 2007

Biomaghreb
FACTEURS RHUMATOIDES
LATEX

PRESENTATION
Rf. 40036 (50 Tests)
Rf. 40024 (100 Tests)

Test srologique sur particules de latex


pour la dtection des facteurs
Rhumatodes

PRINCIPE

LECTURE

Raction dagglutination sur carte, des particules de


latex sensibilises par des gamma globulines
humaines, en prsence de facteurs rhumatodes

Raction positive (agglutination) : prsence de facteurs


rhumatodes dont la concentration peut tre estime
grce la technique semi-quantitative.
Raction ngative (suspension homogne) : absence
de facteurs rhumatodes ou prsence un taux infrieur
la limite de dtection (environ 6 Ul/ml).

REACTIFS
Ractif latex

Suspension aqueuse de particules

de latex sensibilises
Flacon compte-gouttes
(1 goutte 50 I). Bien agiter
avant utilisation.

TEST SEMI-QUANTITATIF

Contrle positif

Flacon compte-gouttes
(1 goutte = 50 I)

Contrle ngatif

Flacon compte gouttes


(1 goutte = 50 I)

En cas de raction positive, titrer le srum par une srie


de dilutions de raison 2 en solution saline 9 g/I.
Tester chaque dilution selon le protocole dcrit
prcdemment.
Le titre du srum en facteurs rhumatodes, exprim en
Ul/ml est obtenu en multipliant linverse de la dernire
dilution donnant une raction faiblement positive, par le
seuil de sensibilit de la technique (6UI/ml).

Cartes

Cartes pour ralisation du test

INTERPRETATION

Agitateurs

Agitateurs usage unique

Dans le cas de polyarthrite rhumatode suspecte


cliniquement, les facteurs rhumatodes sont dtects
dans 80% des srums de patients. Les formes
sropositives sont gnralement plus graves que les
formes srongatives.
En cas de positivit du test du latex, il est conseill de
confirmer le rsultat par une raction de type Waaler
Rose.
En dehors de la polyarthrite rhumatode, des facteurs
rhumatodes peuvent tre retrouvs chez 4 % des sujets
atteints de lupus rythmateux dissmin, dhpatite, de
cirrhose du foie, de syphilis. Dans ces cas, le taux de
facteurs rhumatodes est en gnral plus faible que dans
une polyarthrite rhumatode.

Pour mlange ractifs chantillons

Conservation 2-8C jusqu la date dexpiration


indique sur le coffret.

ECHANTILLON
Srum frais ou conservs -20C, prsentant une
coagulation complte.
Rejeter tout srum lipmique ou contamin.

MODE OPERATOIRE
Ramener les ractifs et les srums tester
temprature ambiante (18-25C).

BIBLIOGRAPHIE
Ball, J. and Lawrence, J.S.: Ann. Rheum. Dis. 22,311
(1963) Jones, W.L. and Wiggins, G.L.: Amer. J. Clin. Path.
60, 603 (1973)
Singer, J.M. and Plotz, G.M.: Am. J. Med. 21, 888, (1956)
Singer, J.M. and Plotz, G.M.: JAMA, 168, 180 (1958)
Waaler, S.G. Bentzon, M.W., Houba, V. and Krag,
P.: Bull. Wld. Hth. Org. 42, 311 (1970).

TEST QUALITATIF
Dposer successivement sur la carte :
- 1 goutte du contrle positif
- 1 goutte du contrle ngatif
- 1 goutte (50 I) des srums tester
A ct de chaque dpt, ajouter 1 goutte de ractif
Latex bien homognis.
Mlanger laide dun agitateur.
Imprimer la carte un lent mouvement de rotation.
Noter lapparition dune agglutination en 2 minutes.

FT Fr 43

Dc 2007

58

Biomaghreb
STREPTOLYSINE
ETALONNEE

PRESENTATION
Rf. 40021
Rf. 40022

6 x 3 doses
10 x 3 doses

Dosage des antistresptolysines


CONSERVATION

PRINCIPE

- Lyophilise : notre streptolysine se conserve environ 3


ans + 4 C.
- Reconstitue: elle doit tre utilise dans les 5 heures.

Les streptocoques hmolytiques des groupes A, C, G


secrtent une enzyme: la streptolysine O prsentant
une activit hmolytique sous sa forme rduite. Cette
streptolysine O provoque la formation dans lorganisme
danticorps ASO rvls par une raction de
neutralisation de lactivit hmolytique de cette enzyme
vis--vis de globules rouges de lapin.

MACROMETHODE
ECHANTILLONS
- Les srums examiner ne doivent pas prsenter
dhmolyse. Ils doivent tre inactivs par chauffage
56C pendant 30 minutes (Dans le cas o lon utilise des
srums inactivs depuis plus de 24 heures, il est
recommand de les placer nouveau au bain-marie
56C pendant 10 minutes.

REACTIFS
- Lyophilisat de streptolysine
- Tampon streptolysine sous forme 10 fois concentr :
Il est diluer pour lemploi : 1 partie de tampon pour 9
parties deau distille, en cas de cristallisation, rechauffer
37C pour remettre les cristaux en solution.
- On utilise classiquement une suspension dhmatie de
lapin 1 % dans le tampon streptolysine 1x. Toutefois le
titre lev de la Streptolysine utilise permet dobtenir
des rsultats identiques avec des hmaties humaines du
groupe O trs soigneusement laves : 3 lavages en eau
physiologique. Le dernier culot est repris dans le
tampon streptolysine 1x.
- Reconstitution de la Streptolysine titre : enfoncer une
aiguille creuse travers le bouchon de caoutchouc de
manire remplir dair le flacon sans risquer de perdre
une partie de Iyophilisat.
Dcapsuler et dboucher le flacon pour y introduire
exactement 8 ml de solution isotonique tamponne.
Reboucher et favoriser la mise en solution par une
agitation modre. La Streptolysine est alors sous sa
forme active.
Tubes n
Dilutions

10

1/5

1/10

1/20

1/40

1/80

1/160

1/15

1/30

1/60

1/120

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25
0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

Solution isotonique
tampon
Dilution A
(srum 1/5)

MODE OPERATOIRE (voir Tableau)


Dilutions-mres :
Dans 2 tubes hmolyse A et B, introduire 2 ml de
solution isotonique tamponne, Ajouter 0,5 ml de srum
tudier dans le tube A (dilution ralise 1/5).
Mlanger et reporter 1 ml du tube A dans le tube B
(dilution ralise 1/15).
Prparation des dilutions de titrage des srums
examiner.
Pour chaque srum, prparer 2 sries de tubes
numrots 1-2-4-6-8-10 pour la dilution-mre A de srum
(au 1/5) et 3-5-7-9 pour la dilution-mre B de srum (au
1/15) et deux tubes 11 et 12 pour les tmoins hmaties
et streptolysine.
Procder suivant le tableau en progression gomtrique.
Rpartir les volumes indiqus en ml.

0,25

Dilution B
(srum 1/15)

0,25

Strepto reconstitue

0,25

0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
0,25
Agiter et laisser 10 mn la temprature du laboratoire

Suspension
dhmatites 1%

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

11

12

0,5

0,25

0,25

0,25

0,25

laisser 10 mn la temprature du laboratoire puis 20 mn au B.M 37C, centrifuger 3 mn 1500 tr/mn


Taux dAslo en fonction du dernier tube
non hmolys

50

100

200

400

800

1600

150

300

600

1200

Pas
Hmolyse
de lyse
totale

Les taux normaux obtenus sont infrieurs 200 U.A.S. Un chiffre de 200 units ou au-dessus doit tre considr comme pathologique

59

FT Fr 44

Fv 2009

Biomaghreb

MICROMETHODE

- Dilution 1/5 : 0,1 ml de srum + 0,4 ml de tampon


- Dilution 1/15 : 0,1 ml de srum + 1,4 ml de tampon
Rpartir sur microplaque (en ml)

Prparer les dilutions des srums tester

1re RANGE
N DES CUPULES

Dillution de srum

1/5

Solution Isotonique
tamponne
Dilution du srum 1/5

2me RANGE
5

Tmoins

1/10 1/20 1/40 1/80 1/60 1/15 1/30 1/60 1/120 1/240 Hmatie Strepto
0,05 0,05 0,05 0,05 0,05

0,05 0,05 0,05 0,05

0,10

0,05

0,05 0,05

Dilution du srum 1/15

0,05

Mlange prcdent
Streptolysine
reconstitue

-->

0,05

0,05

0,05- > 0,05- > 0,05- > 0,05- >

0,05

0,05

0,05

0,05
-->

0,05 0,05

0,05

0,05-> 0,05- > 0,05- >

0,05

0,05 0,05

0,05

Bien agiter et laisser 20 minutes la temprature du laboratoire


Suspension dhmatie 1%
Introduire de droite gauche 0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

0,05

Laisser 10 minutes la temprature du laboratoire puis 20 minutes 37C


Centrifuger la plaque 2 minutes 500 g ou laisser sdimenter 18-25
Taux dantistreptolysine du
srum tudi en fonction du
dernier tube non hmolys

50

100

200

400

800

1600 150

300

600

1200 2400

Les taux normaux obtenus sont infrieurs 100 UAS. Un chiffre de 200 units ou au dessus doit tre
considr comme pathologique.

60

Biomaghreb
TPHA

PRESENTATION
Rf. 40011
Rf. 40012

Test dhmagglutination de la syphilis

(100 Tests)
(300 Tests)

PRINCIPE
Des hmaties aviaires fixes sont sensibilises par un extrait de
treponema pallidum (S. Nichols).
Si lchantillon tester contient des anticorps spcifiques ceux-ci
forment un agglutinat avec les rythrocytes sensibilises.
Les chantillons ngatifs donnent un bouton dhmaties bien dfini
au fond de la cupule.
Les ractions non spcifiques sont dpistes par les cellules de
contrles (hmaties non sensibilises).

4+ : Voile homogne de cellules couvrant la totalit


du puits, quelquefois avec des bords replis.

REACTIFS

1+ : Voile de cellules entour par un cercle plus


pais de cellules

3+ : Voile homogne de cellules couvrant partiellement le fond du puits


2+: Voile de cellules entour par un cercle de cellules

- Cellules-test : hmaties de poules sensibilises


avec lantigne trponmique 1 flacon de 7,5 ml
- Cellules de contrle : hmaties de
poule non sensibilises 1 flacon de 7,5 ml
- Tampon : pour diluer le srum 1 flacon de 20 ml
- Srum positif : pr-dilu au 1/20 1 flacon de 1 ml
- Srum ngatif : pr-dilue au 1/20 1 flacon de 1 ml
- Microplaques U en polystyrne 3 plaques fournies

Bouton de cellules avec une petite ouverture centrale

-: Bouton de cellules avec, ou sans, une trs petite


ouverture centrale

*Srum :
Srum frais, le serum peut tre conserv 2 - 8C pendant 5 jours,
pour des priodes plus longues, les srums doivent tre congels
(-20 C)
*Plasma :
Des chantillons de plasma EDTA peuvent tre utilis pour
screening dans les banques de sang.

Positif : de (4+) (1+)


Douteux :
Ngatif : -

MODE OPERATOIRE
TEST QUALITATIF:
- Cupule n 1 : ajouter 10 I de srum tester 190 I de tampon
on obtient une dilution au 1/20.
- Mlanger soigneusement : distribuer 25 I de cette dilution dans
les cupules 2 et 3.
- Cupule n 2 : ajouter 75 I de cellules de contrle
- Cupule n 3 : ajouter 75 I de cellules test.
- Mlanger, couvrir la plaque, attendre 45 mn temprature ambiante,
labri de toute source de chaleur et de toute vibration.
Attention : Les srums de contrle positif et ngatif, qui doivent
tre introduits dans chaque srie, sont prdilus au 1/20 : ne faire que
les cupules 2 et 3.

TEST QUANTITATIF
Cupule

Tampon

25

25

25

25

25

25

25

Srum au 1/20

25

25

25

25

25

25

25

provenant de la
cupule 1 (l)

25

25

Cellules test (l)

75

75

Dilution 1/N

80

160

75

75

75

75

75

Pour linterprtation des rsultats il est imperatif de les comparer avec les
agglutinats des srums de contrle.
Une agglutination dans la cupule 2 du test de dpistage indique la
prsence dagglutination non spcifique.
Dans ce cas traiter le srum de la faon suivante :
100 l de srum ajouter 400 l de cellules de contrle, agiter, et
attendre 1h la temprature du laboratoire, centrifuger 5 mn 1000
trs/mn ; recommencer le test avec le surnageant, sans oublier que le
srum se trouve dilu au 1/5 par ce traitement (le rediluer au 1/4 pour
obtenir lquivalent de la cupule 1).
Le contrle ngatif doit donner un rsultat ngatif
Le contrle positif doit donner un rsultat positif dans le test qualitatif et
raction positive jusqu le titre indiqu sur ltiquette du faon une
double dilution, dans le test quantitatif
Test qualitatif :
Un rsultat positif indique la prsence danticorps anti T pallidum
rsultant dune infection passe ou prsente.
Un rsultat ngatif indique labsence danticorps anti-T pallidum (voir
limites de la mthode). Un rsultat douteux dans le test qualitatif peut
correspondre a un taux bas danticorps dans les stades prcoces de syhilis
ou un taux rsiduel danticorps dans les syphilis traites. Dans ce cas,
une nouvelle chantillon supplmentaire pourra tre test pour dmontrer
une possible augmentation du titre des anticorps.
Test quantitatif :
Le titre approximatif correspondra la dernire dilution donnant une
raction.

Limites du test

75

*Bien que le srum est lchantillon type pour tous les tests de syphilis, des
chantillons de plasma EDTA peuvent tre utiliss pour screening dans les
banques de sang. Cependant, certaines ractions peuvent savrer
faussement positives. Dans ce cas, on devra renouveller lexprience avec
du srum sur tous les tests initialement positifs ou douteux.
*Les anticorps spcifiques peuvent persister pendant une longue priode,
mme aprs un traitemenl russi de la maladie. Afin destimer la rponse au
traitement, Iemploi dun test ragine (RPR reditest) est recommand. *La
technique TPHA peut donner des ractions croises avec dautres formes
dinfections a trponmes et des ractions faussement positives avec des
chantillons de patients atteints de la mononuclose infectieuse, de la lpre,
toxicomanes ou de maladies autoimmunes
Occasionnellement, dans certains cas de syphilis primaires prcoces, les
anticoprs spcifiques ne pourront pas tre dtects par la technique
TPHA.

320 640 1280 2560 5120 10240

* Homognise, couvrir la plaque, et attendre 45 minutes minimum


temprature ambiante labri de toutes sources de chaleur et de
toutes vibrations.

LECTURES ET INTERPRETATION DES RESULTATS


- Procder la lecture des rsultats aprs 45 mn.
- Les rsultats sont stables 24h.
- Les images ci-dessous correspondent des ractions ralises
dans des microplaques U.

61

FT Fr 45

Juin 2008

Biomaghreb
PRESENTATION
Rf. 40032
Rf. 40033
Rf. 40034

UCG 25
(20 Tests)
(100 Tests)
(40 Tests)

BANDELETTES
- Lchantillon urinaire peut se conserver 2 jours 4C.
Dans ce cas ramener lurine la temprature du
laboratoire avant essai.
- Si lessai doit tre diffr plus de 24 h lchantillon doit
tre congel. Avant lessai ramener lchantillon la
temprature du laboratoire.

Cest un test rapide par chromatographie en une seule


tape pour la recherche de lhormone chorionique
gonadotrophine dans le srum et lurine.

PRINCIPE
La technique de ce test utilise la mthodologie CICA
(concured Immunochromatography Assay). Elle combine
dune part un anticorps monoclonal anti HCG li des
particules colores contenu dans du papier absorbant
fix sur la bandelette (Phase mobile). Dautre part un
anticorps polyclonal anti HCG fix sur une membrane
(phase stationnaire) elle mme fixe sur la bandelette.
Aprs que la bandelette ait t trempe dans lchantillon,

MODE OPERATOIRE ( voir shma au verso )


- Sortir autant de bandelettes que dchantillons tester
et refermer la boite.
- Plonger la bandelette dans le tube chantilion. Le
niveau du srum ou de lurine ne doit pas dpasser la
bande rouge sur la bandelette.
- Maintenir la bandelette plonge pendant une dizaine de
secondes.
- Retirer la bandelette et la placer sur une surface plane.

1- Prsence dHCG
LHCG prsente se lie au anticorps monoclonal anti HCG
et migre sur la membrane. Le complexe AntigneAnticorps se fixe alors sur lanticorps polyclonal anti HCG
greff sur la membrane de la phase stationnaire pour
former un trait de couleur rose-violet dans la zone de
raction. Le mlange ractionnel continuant de migrer,
teinte alors une bande rose-violet dans la zone de contrle
assurant que la raction sest droule correctement.

- Lire aprs 5 10 min.

LECTURE
1- Test ngatif
Seule la bande colore correspondant au contrle
apparat dans la partie haute de la membrane montrant
que lessai sest bien droul.
2- Test positif
En plus de la bande contrle une 2me bande apparat
dans la partie basse de la membrane.
3- Test douteux
Un test sera douteux si aucune bande colore napparait.
ll est donc recommand de repter le test ou de le
renouveler sur un chantillon frais.

2- En absence dHCG
Seule la bande suprieure de la zone de contrle apparait
montrant que la raction sest droule correctement.

SENSIBILITE
UCG 25 dtecte en 5 minutes des concentrations de 25
U/ml de HCG (OMS 3me STANDARD).
Des chantillons contenant des concentrations de
200 000 mU/ml ont t tests et ont toujours donn des
rsultats positifs.

Caractristiques du test
Les concentrations suivantes dhormones ne gnrent
aucune raction croise :
h ISH
1 00 mUI/ml
500 mU/ml
h LH
1 000 mU/ml
h FSH

STOCKAGE ET STABILITE
UCG 25 bandelette doit tre conserv la temprature
du laboratoire : 20 25 C. l'abri de l'humidit.
Ne pas congeler.

BIBLIOGRAPHIE

ECHANTILLON : SERUM OU URINE

1. Braunstein, G.D., Rasor J., Adler, D., Danzer H, and Wade


M.E. Am. J. Obstet. Gynecol., 126, 678681 11976).
2. Braunstein, G.D., waitukaitis, J.L., Carbone, P.P., and
Ross G.T., Ann. Inter. Med., 78, 39-45. (1973).
3. Morgan, F.J., Canfield, R.E., Vaitukaitis, J.L., and Ross,
G.T. Endocrinology,94, 1601-1606 (1974).
4.Kohler, G. and Milstein, C., Nature, 256, 495- 497 (1975).
5.Tompson, R.J., Jackson, A.P., and langlois, N., Clin
Chem., 32, 476-481 (1986).
6. Engvall, E., Methods in Enzymology, 70, 419-439 (1980).
7. Rasor, J.L., and Braunstein, G.D.
Obstet. Gynecol., 50, 553-558 (1977).
8.Lenton, E.A. Neal, L.M., and Sulaiman R., Fertility and
Sterility, 37, 773-778 (1982).

1- SERUM
- viter lhmolyse
- si le test doit tre effectu dans les 48h, le srum doit
tre conserv 2 - 8C.
- si le test doit tre effectu aprs 48h, lchantillon doit
tre congel (- 20 C).
Dans les deux cas lchantillon doit tre ramen
temprature ambiante et bien homognis avant le test.
2- URINE
- Le diagnostic de la grossesse se pratique de prfrence
sur les urines de la 1re miction du matin contenant une
forte concentration dHCG.
- Les chantillons durine doivent tre recueillis dans une
verrerie propre (absence de dtergent) et sans conservateurs.
FT Fr 46

Oct 2008

Distribu par BIOMAGHREB


62

Biomaghreb

CONTROLE
5 minutes

SERUM OU
URINE

NEGATIVE

Plonger la bandelette pendant


environ 10 secondes comme
indiqu ci-dessus
puis la dposer sur la paillasse

63

POSITIVE

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