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3. Etude biochimique des protéines, des acides aminés, des enzymes sériques et
des immunoglobulines:
-Etude des protéines dans le sang, les urines et le L.C.R.
-Etude des protéines spécifiques sériques.
-Etude des immunoglobulines
-Etude des acides aminés
9. Le Syndrome néphrotique.
10. Le Foie :
-Les hépatites aigues et chroniques.
-La cytolyse hépatique
-La cirrhose
-L'insuffisance hépato cellulaire
- L’ictère.
Biochimie clinique (5)
11. Le syndrome coronarien aigue (SCA).
Attente Laverie
Salle de tri des
Salle de prélèvement échantillons
Sanitaire Echantillothèque
Stock réactifs Salles techniques
et consommables d’analyses
Salle pour
Compte rendus déchets
Secrétariat
Compte rendu
Elimination
Informatique
Biologistes Responsable
Archives
Biologiste
Chef du laboratoire
Biologistes Major
Résidants Responsable Gestion du Personnel
Qualité
Internes Gestion du stock
Techniciens
Préleveurs
Secrétaires
Coursiers
Agents de surface
Introduction à la Biochimie Clinique
Plan
Définition (HAS)
Caractéristique objectivement mesurée et évaluée comme un
Définition
Composé présent dans les liquides
biologiques dont les teneurs chez un
ensemble homogène de malades, sont
statistiquement suffisamment
éloignées de celles d’un ensemble de
sujets sains donnant un caractère
discriminant à sa mesure.
Exemples:
-Enzymes: baisse, augmentation,
absence de l’activité enzymatique
-Métabolites: glucose, créatinine,
bilirubine…
-Marqueur tumoral
-Hormone
-Récepteur membranaire…
Marqueur Biochimique (2)
Marqueur
biochimique
Dépistage Pronostic
Dépistage Diagnostic
Screening
Introduction à la Biochimie Clinique
Plan
Tube Sec Rouge Biochimie : Acide urique, Albumine, Bilirubine, Calcium, Cholestérol, Cholestérol HDL, Créatinine, CPK, Fer sérique, GGT, Glycémie,
Electrolytes (Na, K, Cl,), LDH, Lipase, Magnésium sérique, PAL, Protides, Phosphore, Transaminases (ALAT, ASAT), Triglycérides,
Urée,…..
Ou Toxicologie : Acide valproïque (Dépakine), Carbamazépine, (Tégrétol) Digoxine, Lithium, Vancomycine, Amikacine, Gentamicine
Tube sec avec gel Hormonologie : Cortisol, FSH, LH, BHCG, Oestradiol, Progestérone, Testostérone, Prolactine, T3, T4, TSH,…
séparateur Jaune Marqueurs Cardiaques : Troponine, CK
Marqueurs Tumoraux : AFP, ACE, CA15-3, CA19-9, CA125, PSA, β2 Microglobuline….
Protéines spécifiques : Apo A1, Apo B, Haptoglobine, Immunoglobulines, Orosomucoïde, CRP, Transferrine, Pré albumine, Electrophorèse
des protéines, Immuno électrophorèse …
Sérologies: Hépatites, HIV, Toxo, Rubéole….
Divers : Folates, Vitamines B12, Ferritine, Fructosamine, CTX sérique, C3, C4, Facteurs Rhumatoïdes, Vitamines D, Insuline
Autoimmunité: Anticorps antinucléaires, Anticorps antithyroïdiens…
Allergie : IgE, IgE spécifiques…
Urines
Urines de 24h
• Au lever :Vider la totalité de la vessie dans les
toilettes (temps 0).
• Pendant 24 heures :Recueillir la totalité des urines
dans le flacon jusqu’à l’heure 24 (Recueillir donc les
urines du lever à J+1).
• Analyse de cretains paramètres de biochimie
urinaire (Protéinurie de 24h, créatinine urinaire…)
• Les résultats sont exprimés par 24h
Echantillon urinaire:
Biochimie urinaire ponctuelle (à un moment donné)
NB: on utilise souvent les urines de 24h car la diurèse
est variable au cours de la journée (résultats
imprécis).
Les milieux biologiques (4)
LCR: Liquide céphalorachidien
• Récupéré par ponction lombaire (PL)
dans un flacon stérile sans
anticoagulant
• Courber le dos en repliant les genoux
vers la poitrine
• Ponction entre L3 et L4
• La quantité totale de LCR est de l'ordre
de 150 ml. Il est intégralement renouvelé
toutes les 6 à 8 heures+++.
• Diagnostic: méningite aiguë, méningo-
encéphalites, abcès cérébraux,
myélites...
• Réalisé en urgence pour:
-Analyse cytobactériologique
-Analyse biochimique : dosage du
glucose, des protéines, des ions
chlorure, enzymes…
Les milieux biologiques (5)
Epanchement et liquides:
• Liquide pleural (plèvre): pleurésies
• Liquide d’ascite (cavité péritonéale): infection
• Liquide synovial (cartilage): inflammation
• Liquide intestinal (duodénal)
Autres milieux:
• Sang artériel: gaz du sang
• Sang capillaire:
-Abord veineux difficile: nouveau né et nourrisson
-Protection d'un capital veineux périphérique dans le cas de prélèvements
répétés.
• selles
• calculs
• salive, sueur, ...
Erreurs d’échantillonnage
Technique de prélèvement
-Hémolyse: le potassium est faussement augmenté
-Stase veineuse: concentration de l’échantillon (les protéines sont faussement
augmentées)
-Quantité insuffisante
Erreur de temps (urines temps<< 24h)
Récipient inadéquat (ex: dosage du calcium dans un tube citraté: citrate de
Ca)
Site de prélèvement inadapté (ex: glycémie au niveau du bras perfusé par le
glucosé)
Conservation ou transport incorrect (ex: gaz du sang→ transport à
température ambiante)
Causes d’altérations des prélèvements :
-Evaporation de composants volatils (ex: NH3).
-Lumière (ex: dégradation de la bilirubine).
-Froid.
-Hémolyse (ions érythrocytaires prédominants: K+, P).
-Contaminations microbiologiques (glycorrachie et méningite bactérienne).
Demande urgente
• Toutes les opérations doivent être respectées mais traités avec
urgence
• Acheminement des prélèvements en urgence
-Système pneumatique (cartouches ou télétubes)
-Coursiers (en urgence)
• Numéro de Tél ou fax du médecin demandeur pour communiquer
le résultat le plus vite possible
• Informatisation des services (intranet)
Echantillons dangereux
• VIH, hépatite B..
• Étiquette jaune « échantillon dangereux »
• Système abandonné
• Règle d’or: Tous les échantillons doivent
toujours être considérés comme
potentiellement dangereux.
Examens inutiles
• Pas de règle absolue pour la demande d’un
examen de laboratoire
• Compétence
• Conscience professionnelle
• Organisation et gestion (répétition inutile da la
demande)
• Eviter tout travail inutile sans bénéfice réel pour
le patient
• Parcimonie (réactifs souvent très chers)
Traitement de l’échantillon
• Réception de l’échantillon
• Triage et identification
(numéro, code-barres)
• Prétraitement, aliquotage,
conservation
• Flux: de qlqs
dizaines→plusieurs
milliers/jour
• Contrôle qualité pour toutes
les procédures analytiques
Analyse proprement dite (2)
Performances analytiques :
• Incertitude de mesure: Le résultat
d’une analyse ne peut pas être parfait:
Il est nécessaire de la quantifier pour
une bonne interprétation d’un résultat.
-Précision ou fidélité:
reproductibilité d’une méthode analytique
-Exactitude ou justesse:
définit à quel point la valeur mesurée est
proche de la valeur réelle
-Sensibilité:
la plus petite quantité détectable
-Spécificité:
capacité de discrimination entre la
substance à doser est ses
interférences.
Analyse proprement dite (1)
Principe de dosage:
Dizaines de techniques selon l’élément à doser, le milieu biologique, les
circonstances, équipement….
Matériels :
Appareil, réactifs, étalons primaires, spécimens de contrôle, calibrateurs…
Mode opératoire :
-Préparation de l’appareil, des spécimens, des réactifs, des calibrateurs,
conditions opératoires du dosage
-Mode du dosage: manuel, semi automatique, automatique+++.
Contrôle :
Valeurs cibles, limites d'acceptabilité, limites de rejet, limites d'alerte.
Résultats et Interprétation
Validation
Analyse, traitement, stockage et impression des données
(informatique+++)
Expression des résultats:
-1 chiffre après la virgule (ex: 14→14,1)
- Ou 2 chiffres après la virgule (ex: 14→14,00 et 14,1→14,10)
-Différentes unités:
Ex: g/l (glycémie)
mg/l (calcémie)
g/24h (protéinurie)
% (protéinogramme)
mEq/l ou mmol/l (électrolytes)
Valeurs usuelles : en fonction de l'âge, du sexe, des conditions
physiologiques.
Valeur séméiologique ou pathologique: Diagnostic, dépistage, pronostic,
traitement.
Echantillothèque/ Sérothèque: (stockage des prélèvements précieux)
NB: Une bonne communication et une bonne
coordination entre le prescripteur et le
biologiste permettraient de:
-Supprimer les éventuelles anomalies
résiduelles
- Parfaire l'interprétation
- Optimiser les éventuelles prescriptions
complémentaires
Introduction à la Biochimie Clinique
Plan
Non conforme
Assurance qualité (2)
Contrôle qualité:
-CIQ, CIE et EEQ : Contrôle des performances analytiques
-Audit interne: Demande de l’audit formulée par le laboratoire
-Audit externe: Demande formulée par un organisme externe : inter-laboratoires,
associations habilitées (National ou international)
Certification: C'est l'existence d'un SMQ (système de management qualité),
répondant aux normes internationales (ex: normes ISO 9000, ISO 9001…)
Accréditation: Reconnaissance de la compétence et de la maîtrise du processus
qualité mis en place, l'accréditation peut être alors délivrée par des organismes
habilités (Maroc: SEMAC, France le COFRAC).
Référentiels:
-ISO 15189 version 2012 : Accréditation des laboratoires de biologie médicale
-ISO 22870 : Accréditation de la Biologie délocalisée
-MAROC: Le GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses: Septembre 2010)
est opposable à la différence de des référentiels d’accréditation (ISO 15189 et
ISO 22870) qui ne sont pas opposables
GBEA Marocain (: Septembre 2010)
• INTRODUCTION
• CHAPITRE I : ORGANISATION DU LABORATOIRE
– LOCAUX
– INSTRUMENTATION
– CONSOMMABLES
– DMDIV (Dispositifs médicaux de diagnostic in vitro)
– PERSONNEL
• CHAPITRE II : FONCTIONNEMENT DU LABORATOIRE ET REALISATION
DES ANALYSES DE BIOLOGIE MEDICALE
– PRELEVEMENT-IDENTITOVIGILANCE-IDENTIFICATION-CONSERVATION
– PROCEDURES ET MODES OPERATOIRES
– COMPTE RENDU DES ANALYSES
– TRANSMISSION DES RESULTATS
– TRANSMISSION DE PRELEVEMENT ENTRE LABORATOIRES
– MAINTENANCES DES APPAREILS
• CHAPITRE III : ASSURANCE QUALITE
– CQI: contrôle qualité interne
– EEQ: évaluation externe de la qualité
• CHAPITRE IV : SECURITE ET HYGIENE
NF EN ISO 15189:2012
Cartographie des processus
Schéma du SMQ : Roue de Deming
Roue de
Deming
Schéma du SMQ : Roue de Deming
Méthode 5M ou
7M:
Matière
Matériel
Roue de Milieu
Deming Méthode
Mains d’œuvre
Moyens
financiers,
Management
Introduction à la Biochimie Clinique
Plan
Communication externe
Prescriptions Exploitation des données Télémédecine, réseaux..
Centralisation et regroupement
Automatisation
Informatisation
Qualité