Université de Technologie de Compiègne Laboratoire TIMR – équipe TAI

Mémoire de stage Projet de Fin d’Etudes intitulé :

Etude et optimisation des procédés d’électrofiltration et de

centrifugation pour la récolte des microalgues

Au sein du laboratoire :
Transformations Intégrées de la Matière Renouvelable UTC – équipe
Technologies Agro-Industrielles

Elaboré par :
Youssef SANOUSSI

Master Chimie
Procédés de Valorisation des Ressources Renouvelables

Responsable de stage :
Nabil GRIMI

Suiveurs de stage :
Eugène VOROBIEV
Nadia BOUSSETTA

Dates de stage :
10/02/2020 – 30/04/2020
02/06/2020 – 31/07/2020
01/09/2020 – 18/09/2020

Année universitaire :
2019/2020
 Remerciements

Au terme de ce travail, il m’est agréable d’exprimer ma reconnaissance auprès de toutes les personnes
m’ayant aidé de près ou de loin, et dont l’intervention au cours de ce projet, a favorisé son aboutissement.

Je tiens ainsi à remercier M. Nabil GRIMI, qui m’a fait l’honneur de m’encadrer tout au long de mon
stage de fin d’études et de m’avoir guidé dans mon projet. Je vous remercie pour votre disponibilité et
pour votre encadrement.

Je ne manque pas l’occasion de remercier chaleureusement tous les membres de l’équipe TAI, et plus
particulièrement Mlle Christa AOUDE, pour ses précieux conseils et pour son caractère accueillant qui
m’a offert une ambiance très motivante et encourageante au travail.

Mes remerciements vont aussi au personnel du laboratoire TIMR pour leur assistance, leur soutien et
leur sympathie.

Que messieurs les membres de jury, trouvent ici l’expression de mes reconnaissances pour avoir accepté
de juger ce présent travail. Veuillez trouver ici le témoignage de mon respect le plus profond.

J’adresse tout mon respect et mon estime au corps professoral du Master PV2R au sein de l’UTC pour
m’avoir permis de bénéficier de leur grand savoir tout au long de ma formation, pour leur pédagogie,
leurs compétences, et leur aide précieuse.

Merci à tous ceux qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de ce travail pour leurs conseils et
leurs encouragements.

Enfin, mes immenses remerciements vont à ma famille pour leur soutien, leur sacrifice et leur confiance
en moi.

Merci à tous  !
 Sommaire

Liste des figures....................................................................................................................................... 9

Liste des tableaux .................................................................................................................................. 10
Introduction générale............................................................................................................................... 7
Etude bibliographique sur les procédés de récolte des microalgues ....................................................... 8
I. Introduction ................................................................................................................................. 8
II. Production des microalgues ......................................................................................................... 8
1. Mode de croissance des microalgues ...................................................................................... 8
2. Mode de culture ....................................................................................................................... 8
III. Procédés de récolte et de concentration des microalgues ........................................................ 9
1. La sédimentation gravitaire ..................................................................................................... 9
2. Coagulation/Floculation ........................................................................................................ 10
3. Flottation ............................................................................................................................... 11
4. Centrifugation :...................................................................................................................... 12
5. Filtration par membrane : ...................................................................................................... 13
6. Comparaison des procédés de récolte des microalgues : ....................................................... 16
IV. Procédés de prétraitement et d’extraction des microalgues................................................... 17
1. Séchage.................................................................................................................................. 17
2. Prétraitement et extraction ..................................................................................................... 18
V. Applications et voies de valorisation des microalgues .............................................................. 19
1. Les applications actuelles : .................................................................................................... 19
2. Les perspectives de développement : .................................................................................... 19
3. Les applications émergentes :................................................................................................ 20
VI. Conclusion ............................................................................................................................. 20
Matériels et méthodes............................................................................................................................ 21
I. Electrofiltration ......................................................................................................................... 21
1. Etude d’électrofiltration......................................................................................................... 21
2. Etude de pigments : ............................................................................................................... 22
3. Etude de protéines : ............................................................................................................... 22
4. Bilan des pigments et des protéines....................................................................................... 23
5. Etude de consommation énergétique ..................................................................................... 23
II. Centrifugation............................................................................................................................ 24
1. Pilote de centrifugation et mode de fonctionnement : ........................................................... 24
2. Protocole expérimental : ........................................................................................................ 24
Résultats et analyse ............................................................................................................................... 25
 I. Electrofiltration ......................................................................................................................... 25
1. Etude d’électrofiltration......................................................................................................... 25
2. Etude de perte des pigments dans les filtrats ......................................................................... 28
3. Etude de perte des protéines dans les filtrats ......................................................................... 29
4. Etude de consommation énergétique ..................................................................................... 30
II. Centrifugation............................................................................................................................ 31
1. Absorbance des pigments ...................................................................................................... 31
2. Epaisseur de culot et vitesse de sédimentation ..................................................................... 32
3. Amélioration de centrifugation par ajustement de pH........................................................... 33
Conclusion et perspectives .................................................................................................................... 34
Références ............................................................................................................................................. 35

Liste des figures

Figure 1 : bioréacteur tubulaire ( à gauche), système de production ouvert de type Raceaway (à droite)
source [2]: ................................................................................................................................................ 9
Figure 2 : décanteur lamellaire + Flocuateur[3] .................................................................................... 10
Figure 3 : Structure de la double couche électrique d'ions chargés en solution entourant une cellule
microalgale chargée négativement et différence de potentiel entre la particule et le fluide en fonction
de la distance de la surface de la particule[4]. ....................................................................................... 11
Figure 4 : Une unité conventionnelle de flottation à air dissous [5]...................................................... 12
Figure 5: Exemples d'écoulement de fluide et/ou de particules à travers une membrane dans diverses
configurations[6] ................................................................................................................................... 13
Figure 6: Illustration des phénomènes électrocinétiques [12] ............................................................... 15
Figure 7 : étapes de consolidation du gâteau de filtration par électrofiltration [13].............................. 15
Figure 8 : représentation schématique de récolte des microalgues en 2étapes ...................................... 17
Figure 9 : mécanisme de cavitation par ultrasons [9] ............................................................................ 18
Figure 10 : dispositif d'électrofiltration ................................................................................................. 21
Figure 11 : spectre UV-visible de la longueur d'onde des pigments ..................................................... 22
Figure 12 : mode opératoire extraction par diffusion ............................................................................ 22
Figure 13 : courbe d'étalonnage............................................................................................................. 23
Figure 14:schéma du système de bilan ( source [14]) ........................................................................... 23
Figure 15 : Aspects théoriques de centrifugation [10] .......................................................................... 24
Figure 16 : méthodologie expérimentale ............................................................................................... 25
Figure 17 : :le digramme des effets du champ électrique et de la pression sur le volume de filtrat ...... 26
Figure 18 : volume des filtrats : effet d'électrophorèse (à gauche ) et de pression (à droite) ................ 26
Figure 19 : température des filtrats : effet de recirculation ................................................................... 27
Figure 20 : pH de filtrats: l'effet de mélange des filtrats ....................................................................... 27
Figure 21 : caractérisation du gâteau de filtration : effet des réactions d'oxydo-réduction au niveau des
électrodes ............................................................................................................................................... 27
Figure 22 : siccité du gâteau formé : effet de pression .......................................................................... 28
Figure 23 : détermination de ABS MAX .............................................................................................. 28
Figure 24 : taux d'extraction des pigments par électrofiltration par rapport à une extraction par
diffusion dans l'eau ................................................................................................................................ 29
Figure 25 : concentration des protéines en solution d'alimentation et en filtrats .................................. 29
Figure 26 : consommation énergétique spécifique instantanée au cours d'électrofiltration .................. 30
Figure 27 : pH et conductivité du surnageant ........................................................................................ 31
Figure 28 : absorbance des pigments..................................................................................................... 31
Figure 29 : épaisseur et vitesse de sédimentation .................................................................................. 32
Figure 30 : photo des tubes de centrifugation aux concentration 0.1, 1, 5 et 10% de droite à gauche .. 32
Figure 31 : épaisseur et vitesse de sédimentation .................................................................................. 33
Figure 32 : le potentiel Zeta en fonction de pH pour les microalgues Chlorella Vulgaris [11] ............ 33

Liste des tableaux

Tableau 1 : Comparaison des systèmes et des modes de culture des microalgues [2] ............................ 9
Tableau 2 : classes de filtration membranaire ....................................................................................... 14
Tableau 3 : types de matériaux membranaires ...................................................................................... 14
Tableau 4 : Avantages et inconvénients des méthodes de récolte ......................................................... 16
Tableau 5 : efficacité des procédés de récolte ....................................................................................... 17
Tableau 6 : classement des méthodes de récolte [6].............................................................................. 17
Tableau 7 : résultat du bilan des pigments ............................................................................................ 29
Tableau 8 : Composition des microalgues Chlorella Vulgaris [1] ........................................................ 30
 Résumé
L’électrofiltration et la centrifugation ont été étudiées dans une perspective d’améliorer leur efficacité
avec le maintien d’une bonne qualité des microalgues récoltés.

L’influence du champ électrique et de pression a été étudié lors de l’étude du procédé d’électrofiltration,
avec l’étude de la qualité du gâteau de microalgues et des filtrats (pH et conductivité). Cette étude a
montré l’importance de la mise en place d’un système de recirculation et de mélange de filtrats dans
l’amélioration de la qualité des filtrats et du gâteau de filtration. Des bilans matière et d’énergie ont
permis de quantifier les pertes des extraites d’intérêt (protéines, pigments) dans les filtrats, ainsi que la
consommation énergétique d’électrofiltration.

La combinaison d’un prétraitement physico-chimique à la centrifugation a permis d’améliorer

l’efficacité et le temps de récolte des microalgues.

Mots-Clés : Microalgues, procédés de récolte, électrofiltration, centrifugation, pigments,

protéines.

Projet de fin d’études 6 UTC 2019/2020

 Introduction générale

Dans un contexte mondiale marqué par des changements climatiques inquiétantes, l’intérêt pour les
sources d’énergie renouvelables est devenu de plus en plus important. A cet effet, les microalgues
constituent une ressource prometteuse pour la production de biocarburants en raison de leur importante
capacité à produire des lipides transformables en biodiésel. En outre, Les microalgues sont considérées
comme une source importante de plusieurs biomolécules à haute valeur ajoutée, telles que les protéines,
les lipides, les acides gras polyinsaturés, les caroténoïdes, les pigments précieux et les vitamines, elles
peuvent être utilisées dans l’industrie de l’alimentation humaine et animale, dans l’industrie cosmétique,
pharmaceutique et des biocarburants.
L’industrie des microalgues s’avère donc une industrie prometteuse, car elle est basée sur une matière
première en abondance dans la nature, renouvelable, durable, propre et alternatif aux ressources fossiles
dans le secteur de production d’énergie. Certaines types de microalgues représentent des voies de
valorisation à haute valeur ajoutée, à titre d’exemple, certains caroténoïdes issues des microalgues, telles
que l’asthaxantine vaut 7000 $US/ Kg, pour un cout de production des microalgues qui est estimé à
30$US/Kg [1], pour répondre aux besoins du marché et faire prospérer cette industrie prometteuse, les
industriels aspirent améliorer le process de production dans un objectif de diminuer davantage les coûts
de production qui sont associés à la main d’œuvre, les installations et l’approvisionnement en eau et en
produits chimiques, et plus particulièrement l’énergie consommée.

L’étape de récolte représente un point critique dans la chaine de production des biomolécules à partir
des microalgues, avec un coût de 20 à 30% du coût total de production [2], ainsi le rôle de la recherche
scientifique consiste à développer un procédé de récolte moins énergivore, efficace, rapide, applicable
à grande échelle et permettant de récupérer les microalgues avec une meilleure qualité.
Dans ce cadre, ce travail consiste à étudier et optimiser dans un premier lieu, le procédé de récolte par
microfiltration assistée par un champ électrique, puis une combinaison de traitement physico-chimique
avec la centrifugation.

Projet de fin d’études 7 UTC 2019/2020

 Etude bibliographique sur les procédés de récolte des microalgues

I. Introduction
À l’heure actuelle, l’utilisation des microalgues est limitée par l’absence d’une technique de récolte efficace. La récolte
consiste à séparer les microalgues de leur milieu de culture aqueux, où leur concentration est très faible tout en
conservant leur paroi intacte pour ne pas perdre leur production dans le milieu de culture. La récolte des microalgues
représente alors un défi pour l’industrie algale, d’une part à cause de son coût qui représente 20 à 30 % des coûts de
production de la biomasse algale [2], d’autre part à cause de l’importance de cette étape sur le conditionnement des
performances des procédés en aval : extraction, purification, recyclage. Par conséquent, cette étape ne doit pas être
toxique ni contaminer la biomasse algale. Dans cette étude bibliographique nous allons détailler les différentes étapes
de la chaine de production des biomolécules à partir des microalgues, tout en focalisant sur les procédés de récolte avec
une étude comparative de ces procédés.

II. Production des microalgues

1. Mode de croissance des microalgues
La croissance des microalgues peut être effectuée selon trois modes [2]:
a. Photo autotrophie : utilise le mécanisme de photosynthèse, par conversion du CO2 en chaines carbonées en utilisant
l’énergie fournit par la lumière.
b. Hétérotrophie : fonctionne sur une source de carbone organique, utilisant la fermentation comme mécanisme de
conversion du carbone en énergie.
c. Mixotrophie : est une combinaison des deux modes permettant une production plus importante par rapport à la
photo autotrophie avec possibilité de croissance en phase obscure.

2. Mode de culture
La culture des microalgues est effectuée dans des photobioréacteurs où les microalgues seront exposées à la lumières
et nourries avec du CO2 et des nutriments en produisant l’O2..
Les photobioréacteurs sont divisés en deux classes (Cf. Figure 1) :

a. Les systèmes ouverts : tels que les étangs, les lagunes et les bassins agités.
b. Les bioréacteurs clos : sous forme de tubes ou panneaux, adaptés pour les microalgues sensibles aux
contaminations.
Il est aussi possible de cultiver les microalgues hétérotrophiques dans des fermenteurs, dépourvu de la source de
lumière.

Projet de fin d’études 8 UTC 2019/2020

 Figure 1 : bioréacteur tubulaire ( à gauche), système de production ouvert de type Raceaway (à droite) source [2]:

Le tableau ci-dessous présente les avantages et les inconvénients des modes de culture et de croissance des microalgues :

Modes de croissance et Avantages Inconvénient

de culture des
microalgues
Systèmes  Température maintenue constante par  Faibles concentrations en matières sèches.
ouverts refroidissement par évaporation.  Difficile de garder une seule souche de
 Coûts d’investissements moins onéreux. culture.
 Culture sur des surfaces importantes (étangs).
Bioréacteurs  Moins de pertes d’eau. Maintien d’un taux  Coût élevé et procédés complexes.
clos de culture supérieur.  Peut demander un nettoyage régulier dû à la
 Rapport de surface sur volume plus formation de biofilm.
important.  Nécessite un maintien de la température
puisqu’il ne possède pas de refroidissement
par évaporation.
 Plus facile de maintenir les conditions de  Coût et disponibilité des matières premières
production optimales et la prévention de telles que les sucres.
contamination.  Rivalité des matières premières et des
 Possibilité d’utiliser pour la croissance des organismes avec d’autres technologies de
substrats tels que le glycérol ou des acides biocarburants (issus de levures ou de
organiques. bactéries).
 Atteint des concentrations élevées en
biomasse.
Tableau 1 : Comparaison des systèmes et des modes de culture des microalgues [2]

III. Procédés de récolte et de concentration des microalgues

Parmi les techniques de récolte des microalgues les plus courantes, on trouve :

1. La sédimentation gravitaire
La sédimentation gravitaire est une technique de séparation par différence de densité. La récolte par sédimentation
à la gravité naturelle peut se faire par l’intermédiaire de séparateurs à lamelles et de réservoirs de sédimentation (Cf. Fig
2). Les séparateurs à lamelles peuvent offrir une surface de sédimentation plus importante que les épaississeurs
conventionnels en raison de l’orientation des plaques[3]. La suspension de microalgues est pompée en continu, tandis
que le culot est retiré de manière discontinue. La principale forme d’énergie requise est celle nécessaire au pompage de
la boue. Des floculants peuvent être ajoutés afin d’augmenter la séparation des microalgues et la vitesse de
sédimentation. Les bassins de sédimentation ne sont pas très utilisés dans l’industrie mais constituent une méthode fiable
pour concentrer les suspensions de microalgues.

Projet de fin d’études 9 UTC 2019/2020

 Figure 2 : décanteur lamellaire + Flocuateur[3]

2. Coagulation/Floculation
2.1.Coagulation / floculation chimique
La floculation des suspensions de particules des microalgues peut souvent être attribuée à quatre mécanismes classiques,
qui peuvent agir seuls ou en combinaison [4] :
 Neutralisation de la charge (Cf. Fig 3) : phénomène qui se produit lorsque des ions, des polymères ou des colloïdes
chargés positivement absorbent fortement la charge négative de surface d'une particule, annulant finalement la
charge négative de surface. En conséquence, la répulsion électrostatique entre les particules disparaît et les particules
vont coaguler ou floculer.
 Mécanisme de patch électrostatique : phénomène par lequel un polymère chargé se lie à une particule avec une
charge opposée. Le polymère inverse localement la charge de la surface de la particule, ce qui entraîne la formation
de plaques de charge opposée à la surface de la particule. Les particules se lient les unes aux autres par des plaques
de charge opposée, provoquant la floculation de la suspension.
 Formation de pont de particules : les polymères ou les colloïdes chargés se lient simultanément à la surface de deux
particules différentes pour former un pont entre ces particules. Ce pont réunit les particules et provoque la
floculation.
 Floculation par balayage : les particules sont piégées dans une précipitation massive d'un minéral. Cela provoque la
floculation de ces particules.
La floculation peut être induite par plusieurs approches. Les sels métalliques tels que le sulfate d'aluminium et le chlorure
de fer sont des floculants ou des coagulants couramment utilisés. Ces sels métalliques se dissocient dans l'eau et les ions
métalliques peuvent provoquer une floculation par neutralisation de la charge. Les ions métalliques s'hydrolysent
facilement dans l'eau pour former des hydroxydes métalliques. Les hydroxydes métalliques peuvent précipiter même à
de faibles concentrations de métaux. Ces précipités d'hydroxydes métalliques sont souvent chargés positivement et
peuvent provoquer une floculation par neutralisation de la charge, formation de pont de particules ou floculation par
balayage. D'autres précipités tels que les phosphates de calcium ou les hydroxydes de magnésium qui peuvent être
formés à un pH élevé peuvent provoquer une floculation par les mêmes mécanismes que les précipités d'hydroxydes
métalliques. Une autre classe importante de floculants est celle des polymères.
Les polymères chargés peuvent se lier à la surface de différentes particules et peuvent provoquer une floculation par
pont de particules. Les polymères chargés peuvent également neutraliser ou même inverser la charge de surface des
particules pour provoquer la floculation par neutralisation de la charge ou agrégation de patchs électrostatiques.

Projet de fin d’études 10 UTC 2019/2020

 Figure 3 : Structure de la double couche électrique d'ions chargés en solution entourant une cellule microalgale chargée négativement et
différence de potentiel entre la particule et le fluide en fonction de la distance de la surface de la particule[4].

2.2.Autofloculation
L'autofloculation se produit souvent spontanément dans les cultures de microalgues lorsque le pH augmente au-dessus
de 9. Ce type de floculation se produit souvent spontanément dans les cultures de microalgues à la suite d'une
augmentation du pH due à l'épuisement du CO2 photosynthétique. L'autofloculation est associée à la formation de
précipités de calcium ou de magnésium. Selon les conditions, ces précipités portent des charges de surface positives et
peuvent induire une floculation par neutralisation des charges et/ou floculation par balayage.
Les précipités de phosphate de calcium sont chargés positivement lorsque les ions calcium sont en excès par rapport aux
ions phosphate et interagissent avec la charge de surface négative des cellules de microalgues. Des concentrations
élevées de phosphate sont nécessaires pour que ce type de floculation se produise [4].

2.3.Biofloculation
Dans les proliférations naturelles de microalgues présentes dans les lacs ou les rivières, la floculation se produit parfois
spontanément. Cette floculation spontanée est supposée être causée par des substances polymères extracellulaires dans
le milieu. La biofloculation est souvent utilisée avec succès pour récolter les microalgues dans les installations où les
microalgues sont utilisés dans le traitement des eaux usées. Par contre, le mécanisme est mal compris et mérite des
recherches plus approfondies car il peut conduire à une méthode gratuite de floculation des microalgues [4].
3. Flottation
La flottation est une méthode d'élimination des microalgues des solutions aqueuses qui peut être considérée comme
plus avantageuse et plus efficace que la sédimentation[5]. La flottation peut être décrite comme un type
physiochimique de séparation par gravité dans lequel l'air ou le gaz est mis en bulle à travers une suspension solide-
liquide et les molécules gazeuses sont attachées aux particules solides. Ces particules sont portées à la surface du
liquide et s'accumulent sous forme de flottants, qui peuvent être éliminés par raclage.

Les procédés de flottation sont classés selon la méthode de production de la taille des bulles comme suit : flottation à
l'air dissous, flottation à l'air dispersé, flottation électrolytique et flottation par ozonation-dispersion.

3.1.Flottation à l'air dissous

La flottation à l'air dissous est la technique de flottation la plus largement utilisée dans le traitement industriel. Le
processus de flottation à l'air dissous implique la réduction de la pression d'un courant d'eau qui est saturé d'air à des
pressions supérieures à la pression atmosphérique. Le liquide contenant l'air dissous est ensuite injecté à la pression
atmosphérique dans un réservoir de flottation par des buses ou des valves à aiguille. Cela génère des bulles qui montent
à travers le liquide et transportent les solides en suspension vers la surface, qui peuvent ensuite être récupérée. Une
partie du liquide clarifié est séparée et saturée d'air pour être recyclée dans la cuve de flottation. La taille des bulles
produites peut varier de 10 à 100 µm avec une moyenne d'environ 40 µm.

Projet de fin d’études 11 UTC 2019/2020

 La séparation des microalgues par flottation à l'air dissous a souvent été combinée avec une floculation chimique, Une
unité de flottation à air dissous classique est présentée à la figure 4. La culture de microalgues circule en continu dans
l'unité. Des floculants sont ajoutés et avec l'agitation induisent la floculation des microalgues. Les microalgues
floculées atteignent la cellule de flottation où un courant d'eau recyclé est utilisé pour introduire de l'air dissous dans
le système [4].

Figure 4 : Une unité conventionnelle de flottation à air dissous [5].

3.2.Flottation à l'air dispersé

Dans la flottation à air dispersé des bulles de taille 700 à 1500 µm sont produites par le passage continu de l'air à
travers un matériau poreux (diffuseurs ou barboteurs) ou à travers un agitateur mécanique à grande vitesse.

Ce système consomme moins d'énergie, mais nécessite un équipement coûteux et une forte perte de charge pour
générer les bulles[5].

3.3.Flottation électrolytique
L'électroflotation est un processus de flottation de cellules de microalgues à la surface de l'eau avec formation de
fines bulles d'hydrogène par électrolyse. L'hydrogène qui évolue à la cathode sépare la biomasse des microalgues du
milieu de croissance. Les bulles d'hydrogène adhèrent aux flocons de microalgues et les forcent à flotter à la surface.
Cette méthode ne nécessite pas de produits chimiques et n'est pas spécifique à une espèce particulière, alors que
l'encrassement des cathodes et les besoins élevés en énergie sont les principaux inconvénients de cette méthode [5].

3.4.Flottation par ozonation-dispersion

Dans cette technique, au lieu de l'air atmosphérique, l'ozone gazeux est utilisé pour produire des bulles chargées.
L'ozone étant un agent oxydant puissant, il oxyde les composés organiques solubles et les bulles chargées séparent les
microalgues ; ainsi, l'interaction de ces deux processus peut conduire à de meilleurs effets de traitement. Cependant,
les problèmes de contamination peuvent se produire lorsqu'ils sont utilisés à grande échelle [5].

4. Centrifugation :
La centrifugation est un procédé de séparation qui utilise les forces centrifuges pour séparer les solides et les
liquides. Cette séparation est basée sur la taille des particules et la différence de densité des composants du milieu. Le
comportement des plus petites particules dans le système a l'effet le plus important sur l'efficacité de la séparation.
Une étude a montré que la centrifugation à grande vitesse était une technique de récupération des microalgues efficace
et fiable[5]. Bien que la centrifugation soit une méthode efficace de récupération des microalgues, le principal
inconvénient est le coût élevé des investissements et des opérations nécessaires. Bien que la récupération par
centrifugation soit énergivore, elle est rapide et constitue une méthode privilégiée pour la récupération des cellules de

Projet de fin d’études 12 UTC 2019/2020

 microalgues. La centrifugation est une méthode d'assèchement efficace, l'exposition des cellules de microalgues à des
forces de cisaillement peuvent endommager la structure cellulaire.

5. Filtration par membrane :

Le procédé de filtration par membrane est celui qui permet de garantir la meilleure qualité de la biomasse récoltée
par rapport aux autres techniques de récolte, car les cellules sont moins perturbées et aucun produit chimique n'est
nécessaire pour la récolte. Ce procédé consiste à passer la culture d'algues à travers des filtres fonctionnant par gravité.
Le système peut être soit continu ou discontinue.

5.1. Configurations de filtration par membrane :

On distingue la filtration frontale de la filtration tangentielle ; la première consiste à faire passer la suspension à
filtrer perpendiculairement à la surface du filtre, cette technique est limitée par l’accumulation des particules à sa
surface, qui fait augmenter la résistance du gâteau et qui finissent peu à peu par entraver la perméabilité de la membrane
(phénomène de colmatage). Quant à la filtration tangentielle, elle consiste à faire passer la suspension à filtrer en
parallèle à la surface de filtre, les particules dans ce cas passent dans le flux de circulation tangentiel et le colmatage
s’effectue ainsi beaucoup moins vite. La filtration passive (par exemple, la dialyse et l'osmose inverse) repose sur le
mouvement d'un soluté ou d'un solvant à travers la membrane en raison des gradients de concentration. La filtration
passive, utilisée pour concentrer la biomasse ou les bioproduits, nécessite généralement moins d'énergie que la
filtration active.

Figure 5: Exemples d'écoulement de fluide et/ou de particules à travers une membrane dans diverses configurations[6]

5.2.Classes de filtration membranaire.

Les précédés de séparation membranaire peuvent être classifiés selon le diamètre des pores des membranes, en
microfiltration, ultrafiltration, nanofiltration et osmose inverse [6]:
Types de Pouvoir de Particules retenues
filtration séparation
membranaire (μm)
Microfiltration 0,1 La microfiltration est mise en œuvre en utilisant des pores de diamètre compris entre 0.1
(MF) et 10μm, ce qui permet la rétention des particules en suspension, des bactéries et
indirectement des colloïdes.
Ultrafiltration 0.01 Cette technique utilise des membranes microscopiques dont le diamètre des pores sont
(UF) compris entre 1 et 100 nm, les applications de cette technique sont multiples :
Concentration de solutions macromoléculaires (protéines, polysaccharides, polymères
variés), élimination de macrosolutés présents dans les effluents…)
Nanofiltration 0.001 Comme son nom l’indique la nanofiltration permet la rétention de composés ayant une
(NF) taille en solution voisine de 1 nm, les applications de ce type de filtration son nombreuse
: la déminéralisation sélective (adoucissement des eaux), concentration de composés
organiques de faible masse molaire (antibiotiques).

Projet de fin d’études 13 UTC 2019/2020

 Osmose 0.0001 Cette technique de séparation utilise des membranes denses qui laissent passer le solvant
inverse (OI) (souvent l’eau) et arrêtent à peu près tous les solutés (y compris les sels), cette technique
est utilisée pour la déminéralisation des eaux, ou pour la concentration des jus de fruits.
Tableau 2 : classes de filtration membranaire

5.3.Les matériaux membranaires :

Les membranes peuvent être fabriquées à partir de divers matériaux, qui peuvent être classés en deux grandes catégories:
organique ou inorganique.
En raison de leur coût relativement faible et de leur grande disponibilité, les membranes organiques sont prédominantes
pour les séparations de liquides. Les membranes inorganiques ont également été appliquées à la récolte des algues, mais
elles sont généralement utilisées pour des applications de niche nécessitant des températures élevées ou une grande
stabilité chimique. les membranes inorganiques ont aussi l’avantage de pouvoir résister à un nettoyage chimique plus
rigoureux et par contre-pression appliquée, sous forme d’impulsions à haute pression allant jusqu'à 10 bars et de courte
durée (1 s) [7].
Le matériau des membranes représente un facteur critique pour la récolte des microalgues, le choix du matériau dépend
non seulement de la granulométrie de la suspension algale et de sa concentration mais également de la configuration du
flux, des gammes de pH et de températures tolérées. Parmi les matériaux membranaires utilisés dans la récolte algale
(Cf. Tableau 3) ; on distingue polyfluorure de vinylidène (PVDF), polyéthersulfone (PES) et polysulfone (PS) pour la
Microfiltration/Ultrafiltration, l’acétate de cellulose (CA) pour la Nanofiltration/ Osmose inverse, Cellulose régénérée
(RC) pour la dialyse.
Type Matériau Tolérance chimique pH recommandé Température
recommandée (°C)
Organique Acétate de cellulose Sensibilité au chlore 4à8 0 à 40
(CA)
Cellulose régénérée Sensibilité au chlore 4à8 0 à 40
(RC)
Polysulfone (PS) Moyenne 1 à 12 0 à 80
Polysulfone sulfonée Moyenne 1 à 12 0 à 80
Polyethersulfone (PES) Moyenne 1 à 12 0 à 80
Polyfluorure de Moyenne 1 à 12 0 à 150
vinylidène (PVDF)
Inorganique Zircone de carbone Excellente résistance aux 0 à 14 0 à 200
(Céramique) solvants
Alumine Excellente résistance aux 0 à 14 0 à 200
solvants
Oxyde de titane sur Excellente résistance aux 0 à 14 0 à 200
alumine solvants
Tableau 3 : types de matériaux membranaires

5.4.Généralités sur le procédé d’électrofiltration :

L’application d’un champ électrique à travers une suspension chargée, permet l’interaction entre les charges de celle-
ci et le flux de charges portées par les ions, ainsi des phénomènes électrocinétiques liés à l’application du champ
électrique se manifestent (Cf. Figure 6), on en distingue : l’électrophorèse, l’électroosmose et l’électromigration :

Projet de fin d’études 14 UTC 2019/2020

 Figure 6: Illustration des phénomènes électrocinétiques [12]

• Electrophorèse : correspond au mouvement de matières chargées en suspension vers l’électrode de charge

opposée (souvent vers l’anode).
• Electromigraton : correspond au mouvement des ions vers l’électrode de charge opposée.
• Electroosmose : correspond au mouvement de l’eau liée induit par l’électromigration des ions.

L’électrofiltration permet une consolidation du gâteau de filtration selon 4 étapes Cf. Figure 4:

• Etape I : en appliquant un champ électrique suffisant (E=Ecritique), les particules de la suspension généralement
chargé négativement commence à migrer vers l’anode, et leur vitesse est égale celle du flux liquide.
• Etape II : l’épaisseur du gâteau croit à l’anode, tandis que la surface de filtration coté cathode ne contient que
peu de particules, ainsi la vitesse d’écoulement y est importante.
• Etape III : la chambre de filtration est remplie et le transport des particules par électrophorèse est alors réduit
et la vitesse de filtration et en diminution.
• Etape IV : l’eau migre du gâteau formé par consolidation et par électroosmose, un échauffement commence à
se produire dans les électrodes, par augmentation de la résistance électrique dans la cellule.

Figure 7 : étapes de consolidation du gâteau de filtration par électrofiltration [13]

Projet de fin d’études 15 UTC 2019/2020

6. Comparaison des procédés de récolte des microalgues :
Dans l’objectif d’établir une étude comparative entre les différents procédés de récolte des microalgues, nous procédons
à détailler les avantages et les inconvénients de chaque procédé [8], ainsi que l’efficacité des procédés de récolte [5]:
Procédés de Avantages Inconvénients
filtration
Sédimentation  Méthode simple  Consommatrice du temps
 La méthode la moins couteuse  Possibilité de détérioration de la biomasse
 Faible concentration de gâteau d'algues.
Coagulation  Une technique simple et rapide  Les produits chimiques (coagulent /floculent)
/floculation  Utilisé à grande échelle peuvent être couteux
Chimique  Moins de dommage des cellules  Dépend fortement du pH
 Appliquée à une vaste gamme d’espèces  Difficile de séparer le coagulant de la biomasse
 Moins de besoins énergétiques récoltée
 L’efficacité dépend du coagulent utilisé
 Le recyclage des milieux de culture est limité
 Possibilité de contamination minérale ou
microbienne
Auto et  Méthode peu coûteuse  Changements dans la composition cellulaire.
biofloculation  Permet le recyclage des milieux de  Possibilité de contamination microbiologique.
culture
 Non toxique pour la biomasse micro-
algale
Flottation  Méthode à faible coût.  A besoin d'agents surfactants (tensioactifs)
 Faible encombrement.  La flottation à l'ozone est coûteuse
 Convient pour les applications à grande  Exige généralement l'utilisation de floculants
échelle. chimiques.
 Durée de fonctionnement courte.  Ne convient pas à la récolte de microalgues
marines.

Centrifugation  Une technique rapide et efficace  Coût d'exploitation et de maintenance élevés

 Haute efficacité de récupération (>90)
 Préférence pour les petites entreprises et
les laboratoires
 Rendement de récupération élevé
 Approprié pour presque toutes les
espèces de microalgues
 Durée importante et trop cher pour une grande
échelle
 Risque de destruction des cellules
 Besoins énergétiques élevés
 Convient uniquement pour la récupération de
produits de grande valeur
 Possibilité d'endommager les cellules en raison de
forces de cisaillement élevées

Filtration  Haute efficacité de récupération  Procédé lent, nécessite de la pression ou du vide.

 Rentabilité
 Aucun produit chimique requis
 Faible consommation d'énergie (filtration
naturelle et à pressage)
 Recyclage de l'eau
 Permet la séparation des espèces
sensibles au cisaillement.
 Ne convient pas aux petites algues
 L'encrassement et le colmatage des membranes et
leur remplacement augmentent les coûts
d'exploitation et de maintenance
 Consommation d'énergie élevée (filtration à vide)

Tableau 4 : Avantages et inconvénients des méthodes de récolte

Procédé de récolte Taux de solide maximal

Floculation 22%
Centrifugation 12%

Projet de fin d’études 16 UTC 2019/2020

 Sédimentation gravitaire 1,5%
Filtration naturelle 6%
Filtration par pressage 27%
Tableau 5 : efficacité des procédés de récolte

La comparaison des avantages et des inconvénients des méthodes de récolte des microalgues indique qu’il n'existe
actuellement aucune méthode supérieure. Ainsi, il s’avère important de poser des critères spécifiques pour pouvoir
classer ces méthodes, ces critères sont :
La quantité de biomasse récoltée à grande échelle « Qn », la qualité de biomasse récoltée « Qu » i.e. la capacité de la
méthode à laisser les cellules intactes en fin de récolte, le cout d’exploitation « C », le temps opérationnel « t », la
dépendance de la méthode à une espèce spécifique « ES » et la toxicité générée par la méthode « T ». Un classement a
été effectuée à cet effet (Cf. table 6).
Classement Qn Qu C t ES T
1 Coagulation/ Filtration Coagulation Centrifugation Coagulation Filtration
floculation floculation floculation
2 Flottation Flottation Filtration Procédés à Procédés à Centrifugation
champ champ
électrique électrique
3 Filtration Coagulation Flottation Coagulation Centrifugation Coagulation
floculation floculation floculation
4 Procédés à Procédés à Procédés à Flottation Flottation Flottation
champ champ champ
électrique électrique électrique
5 Centrifugation Centrifugation Centrifugation Filtration Filtration Procédés à
champ
électrique
Tableau 6 : classement des méthodes de récolte [6]

Dans l’objectif d’améliorer l’efficacité et réduire les coûts des procédés de filtration et de centrifugation, ils sont
précédés généralement par une coagulation floculation, dans un procédé de deux étapes (Cf. fig8), la suspension d’algues
d’une concentration de 0,02 à 0,06% est concentrée en une boue d’algues à une concentration de 2 à 7%, puis dans la
deuxième étape la boue est déshydratée à 15-25%, avant de procéder à l’extraction.

Figure 8 : représentation schématique de récolte des microalgues en 2étapes

IV. Procédés de prétraitement et d’extraction des microalgues

Pour pouvoir extraire les molécules d’intérêt présentes à l’intérieur des cellules algales, il faut s’affranchir de la
barrière extérieure de celles-ci par une étape de broyage, et puisque la biomasse algale présente souvent un taux
d’humidité élevé, une étape de séchage en amont est souvent effectuée. Ils existent différents procédés d’extraction des
microalgues, le choix du procédé à utiliser dépend de la souche d’algue cultivée et de ses conditions de croissance, ainsi
que de la molécule d’intérêt qu’on vise à produire.
1. Séchage
L’étape de séchage permet de réduire les coûts de manutention, de stockage et de transport au sein l’industrie algale,
en diminuant le volume et le poids des cellules récoltées. Différents types de séchage peuvent être envisagés :

Projet de fin d’études 17 UTC 2019/2020

 1.1.Séchage solaire
Il consiste à exposer la suspension algale à l’air libre ou sous serre, en vue d’une évaporation de l’air sous l’effet de
rayonnement solaire.

1.2.Séchage par atomisation

Il consiste à déshydrater la suspension algale par pulvérisation en fines gouttelettes au contact d’un courant d’air chaud,
ensuite les cellules déshydratées sous forme de poudre sont séparées de l’air par cyclone ou par filtre à manche.

1.3.Séchage par lyophilisation

Il consiste à déshydrater la suspension algale, par surgélation puis une sublimation sous vide, permettant d’ôter l’eau
libre, qui sera capturée par un condenseur ou un piège à froid.

1.4.Séchage par DIC

La détente instantanée contrôlée, consiste à porter la biomasse algale à une haute température et une haute pression sur
une courte durée avec une chute brusque de pression vers le vide, provoquant une auto-vaporisation instantanée.

2. Prétraitement et extraction
Certaines algues nécessitent une étape de broyage avant extraction, permettant de faciliter la pénétration du solvant vers
la matrice renfermant les molécules d’intérêt, d’autres nécessitent une lyse de la paroi cellulaire, ainsi selon la force
agissante, on peut distinguer différents types de procédés de broyage/extraction ; physiques (ultrasons, champs
électriques pulsées), mécaniques (broyage à billes, homogénéisation), chimiques/biologiques (acide, base et enzyme).

2.1.US : Ultrasons “ultrasound”

Les ondes ultrasons traversant la suspension algale liquide font subir une série de compressions et de détentes (Cf.
Figure 9), ces détentes permettent de diminuer la pression et de transformer l’eau en vapeur, en formant des petites
bulles, ces dernières vont grossir jusqu’à ce qu’elles deviennent instables, ce qui induit l’implosion de celles-ci, ainsi
les cellules adjacentes à cette implosion vont être détruites.

Figure 9 : mécanisme de cavitation par ultrasons [9]

2.2.Champs électriques pulsées PEF : “pulsed electric field” :

Cette nouvelle technologie d’extraction des biomolécules, non thermique, consiste à la perméabilisation réversible ou
irréversible de la bicouche lipidique des cellules algales, par électro-compression (Cf. Fig 9). L’application d’un champ
électrique de courte durée au bord d’une cellule algale, engendre l’attraction des charges selon leurs signes vers les
électrodes, l’accumulation de ces charges de part et d’autre sur la surface de la membrane engendre une compression de
celle-ci, qui provoque l’apparition des pores après l’application d’une intensité électrique au-delà d’une valeur critique.
En appliquant une intensité des champs électriques plus grandes, ou encore pour de grande durée de traitement, la
perméabilisation de la membrane cellulaire devient irréversible.

Projet de fin d’études 18 UTC 2019/2020

 Figure 9 : mécanismes d'action des PEF a) et HVED b) [9]

2.3.Broyage à billes :
Cette méthode consiste à la destruction cellulaire par choc au moyen de billes d’acier, de zirconium ou de verre,
tournantes à grande vitesse.

2.4.L’homogénéisation à haute pression HPH : “high pressure homogenization” :

L’homogénéisation à haute pression est une méthode de destruction mécanique des cellules, dans laquelle les cellules
algales mises sous pression traversent une cavité cellulaire, ce qui provoque un cisaillement des cellules, une chute de
pression et une cavitation, qui ont pour effet d’homogénéiser l’échantillon. Cette méthode est considérée comme l’une
des méthodes les plus efficaces en vue d’une extraction des protéines à partir des cellules algales.

2.5.La décharge électrique à haute tension HVED : “high voltage electric discharge” :
La décharge électrique à haute tension, comme son nom l’indique consiste à appliquer une haute tension entre une
électrode en forme d’aiguille et une électrode plane, une accélération des électrons se produit, ce qui entraine l’excitation
des molécules d’eau et la création d’une avalanche d’électrons, ce phénomène est accéléré par les bulles d’air produites
par le chauffage local. Si l’intensité du champ électrique est suffisante, le jet de vapeur se propage de l’électrode positive
à l’électrode négative induisant une rupture électrique dans l’eau, accompagnée d’ondes de choc, de rayonnement
ultraviolet et de production des fragments (Cf. Fig 9).

2.6.Extraction par solvants organiques :

Consiste à extraire les lipides ou les caroténoïdes en utilisant des solvants organiques tels que l’hexane, le chloroforme,
l’éthanol, l’isopropanol, le butanol, les cétones, les esters, etc. le choix du solvant doit prendre en considération la
polarité et l’affinité du solvant avec les molécules d’intérêt à extraire.

V. Applications et voies de valorisation des microalgues

1. Les applications actuelles :
Les domaines d’utilisation actuelle des microalgues se limitent à la production des certaines molécules de haute valeur
ajoutée, telles que les caroténoïdes antioxydants utilisés en nutraceutique « β-Carotène, Astaxanthine, Lutéine», les
pigments « Phycocyanine », les polysaccharides algaux, les lipides « Oméga3 »[1].

2. Les perspectives de développement :

Les domaines de développement de l’industrie des microalgues sont la bioénergie, l’environnement ou la production
des co-produits.
Parmi les applications les plus pertinentes en énergie, la production de biocarburant de 3 ème génération « biodiesel,
bioéthanol, biohydrogène », puis la valorisation thermochimique par gazéification « Hydrogène » ou pyrolyse « Bio
huile combustible ».

Projet de fin d’études 19 UTC 2019/2020

 Les microalgues peuvent aussi rend service à l’environnement, par le biais de leurs capacités de bioremédiation de capter
le carbone, l’urée, les nitrates, les phosphates, ainsi que les métaux lourds.[1]

3. Les applications émergentes :

Les applications émergentes des micrologues concernent :
L’alimentation animale et humaine, par la production des huiles végétaux riches en acides gras polyinsaturés, des
produits de fourrage riches en protéines et nutriments, des produits de spécialités tels que les colorants, les vitamines et
les antioxydants.
La production de certaines produits biosourcés dans le cadre d’une chimie durable, nommée « chimie bleue » tels que
les bioplastiques, les bioengrais ou des résidus minéraux comme les biomatériaux.
Grace à leur activité métabolique, les microalgues peuvent aussi utilisées dans le domaine médicinal, par la synthèse
des anticorps « Ostreococcus », et des métabolites à activité antitumorale. [1]

VI. Conclusion
D’une manière générale, vu les avantages et les inconvénients que présente chaque procédé, aucune méthode de
récolte ne peut être supérieure. Cependant, sur la base des six critères prédéfinis, à savoir la quantité de biomasse, la
qualité de la biomasse, le coût, le temps de traitement, la spécificité aux espèces et la toxicité, la coagulation/floculation,
la centrifugation et la filtration sont les trois principales techniques de récolte recommandés. Ces techniques peuvent
être utilisées seules ou en combinaison pour augmenter l'efficacité de la récolte. Les combinaisons de plusieurs
techniques de récolte en fonction de l'espèce considérée, de la concentration souhaitée du produit final et de sa qualité
peuvent être utilisées pour la récolte des microalgues. Les combinaisons utilisant la floculation comme première étape
de récolte pour concentrer la biomasse algale du milieu de croissance conduisent à une récolte efficace.

Projet de fin d’études 20 UTC 2019/2020

 Matériels et méthodes

I. Electrofiltration
1. Etude d’électrofiltration
1.1.Pilote de l’électrofiltration
Le pilote d’électrofiltration (Cf. Fig 10) est constitué d’un réservoir d’alimentation, où la suspension des microalgues
à filtrer est accueillie, l’air comprimé y est aussi introduit pour appliquer la force de pression nécessaire à la filtration.
La cellule d’électrofiltration, est muni d’une entrée centrale et deux sorties de filtrats latérales, les deux électrodes
placés derrières les membranes filtrantes sont reliées à un générateur de courant. Une recirculation est effectuée à côté
de l’électrode reliée au pôle (+) Anode.
Une deuxième configuration consiste à récupérer les deux filtrats dans un seul bécher, tout en gardant la recirculation
du côté de l’anode.

1.2.Protocole expérimental
Pour pouvoir récolter des micro algues par électrofiltration, on utilise une membrane en Polyfluorure de vinylidène
(PVDF) à une porosité de 0,2 micromètres que l’on adapte à notre cellule, Avant d’être utilisée, celle-ci est activée par
immersion dans de l’eau distillée (déminéralisée) pendant 30 minutes.

Pour préparer la solution des micro algues à filtrer à une concentration de 5 % massique, on prend 25 g de micro algues
sec de type Chlorella Vulgaris, que l’on hydrate avec de l’eau distillée jusqu’à atteindre une masse de 500 g, puis la
solution des microalgues est mise en agitation pendant 20 minutes à peu près. Une pression de 1 à 4 bars est ensuite
appliquée au niveau de la cellule de filtration par air comprimé, puis un champ électrique d’une intensité de 60 A/m2
est appliqué aux bornes de notre cellule de filtration, avec lavage de l’anode par un volume d’eau distilée de 206 ml à
un débit de recirculation de 160 l/min.

Tout au long de l’essai d’électrofiltration de 6 heures, on prélève le volume, le pH et la conductivité des filtrats, la
température au niveau des électrodes, la tension et l’intensité du courant électrique. Enfin pour caractériser le gâteau
formé on prélève le pH et la conductivité aux extrémités et à l’intérieur du celui-ci, pour détermine le taux solide, on
place ce dernier dans l’étuve pendant 24 heures.

Figure 10 : dispositif d'électrofiltration

Projet de fin d’études 21 UTC 2019/2020

 2. Etude de pigments :
Pour déterminer la longueur d’onde des principaux pigments contenus dans les microalgues, à savoir les chlorophylles
et les carotènes, nous avons préparé dans un premier lieu une solution des microalgues à une concentration de 5%,
puis celle-ci est mis en centrifugation pendant 10 min à 13500 rpm, puis on procède à la mesure de l’absorbance en
changeant la longueur d’onde (Cf. Fig 11).

spectre UV-visible de longueur d'onde des pigments

extraits à 5%
λ = 400 nm; Amax = 16,023
18
16
14
absorbance

12
10
8
6
4
2
0
300 400 500 600 700
λ (nm)

Figure 11 : spectre UV-visible de la longueur d'onde des pigments

La longueur d’onde maximale des chlorophylles est égale à 400 nm, tandis que celle des carotènes est à 600 nm.
Pour pouvoir déterminer le taux de pigment contenus dans les filtrats d’électrofiltration, par rapport à une extraction par
diffusion. On commence par l’extraction des pigments par diffusion dans l’eau, pour ce faire, la solution des microalgues
est mise en agitation, un prélèvement est effectué au cours d’une durée de 300 min, les échantillons prélevés sont ensuite
centrifugés pendant 10 min à 13500 rpm, avant de procéder à la mesure de l’absorbance.

Figure 12 : mode opératoire extraction par diffusion

3. Etude de protéines :
Pour quantifier les protéines contenues dans les filtrats d’électrofiltration, on utilise la méthode de Bradford. Cette
méthode utilise la fixation non covalente d’un colorant sur la chaine polypeptidique, cette fixation s’accompagne d’une
modification du spectre d’absorption du colorant et peut être mesurée par spectrophotométrie.
Pour déterminer la courbe d’étalonnage, on prépare la gamme étalon suivante de la solution sérum albumine bovine
BSA : 0, 25, 50, 75, 100µg/l. et on mesure l’absorbance à la longueur d’onde 595 nm, ainsi on obtient la courbe
d’étalonnage suivante :

Projet de fin d’études 22 UTC 2019/2020

 Courbe étalon : méthode Bradford
0,14

0,12

0,10

Absorbance
y = 0,0012x + 0,0084
0,08 R² = 0,9821
0,06

0,04

0,02

0,00
0 20 40 60 80 100 120
Concentration en BSA (en g/mL)

Figure 13 : courbe d'étalonnage

Pour déterminer le contenu de protéines dans les filtrats d’électrofiltration, on prépare des tubes contenant 30 µl de
surnageant de la centrifugation, 770µg d’eau distillée et 200 µg de la solution de Bradford, ensuite on vortex les tubes
pendant 30 s, on les place à l’obscurité pendant 15 min, puis on mesure l’absorbance à 595 nm, à partir de cette valeur
et de la courbe d’étalonnage, on obtient la concentration des protéines dans les filtrats de microalgues.

4. Bilan des pigments et des protéines

Pour étudier les pertes des pigments et de protéines dans les filtrats, on procède à l’établissement des bilans sur la cellule
d’électrofiltration, l’équation de bilan est décrite comme suit :
ACCUMULATION + PERTES – SOURCE = ENTREE – SORTIE
Avec :

▪ ACCUMULATION : pigments/protéines retenus au niveau du gâteau de filtration ou

résiduels au niveau du bac d’alimentation
▪ PERTES : pigments/protéines perdus par fuite au niveau de la cellule de filtration.
▪ SOURCE : pigments/protéines extraits au niveau de la cellule de filtration.
▪ ENTREE : pigments/protéines de la solution d’alimentation (1)
▪ SORTIE : pigments/protéines des filtrats coté anode (2) et coté cathode (3)

Ainsi
ACCUMULATION + PERTES – SOURCE = n1 – n2 – n3
Figure 14:schéma du système de bilan (
𝑚 𝑚
Avec 𝑛 = .𝐶 = .𝐴 source [14])
𝜌 𝜌.𝑘
avec : n (mole) m : masse (g) 𝜌 : masse molaire (g /l)
A : absorbance k : constante de la loi de Beer Lambert
En faisant l’hypothèse que 𝜌, k soient constants nous pouvons les éliminer de part et d’autres de l’équation de bilan,
ainsi on obtient :
ACCUMULATION + PERTES – SOURCE = m1.A1 – m2.A2 – m2.A2

5. Etude de consommation énergétique

A partir des valeurs de tension U et de l’intensité I fourni par le générateur de courant, nous pouvons calculer la
consommation énergétique spécifique E instantanée dans un intervalle de temps Δt comme suit :

Projet de fin d’études 23 UTC 2019/2020

 𝑘𝐽 𝑈(𝑉). 𝐼(𝐴). 𝛥𝑡(𝑠)
𝐸( ) =
𝑘𝑔 𝑚 𝑓𝑖𝑙𝑡𝑟𝑎𝑡 (𝑔)

II. Centrifugation
1. Pilote de centrifugation et mode de fonctionnement :
La centrifugeuse utilisé «Dispresion Analyser LUMiSizer » est une centrifugeuse analytique, qui emploie la force
centrifuge sur 12 échantillons, avec une plage de température de 4 à 60°C et une vitesse de rotation, 200 à 4000rpm,
chaque tube est traversé par une source lumineuse NIR, permettant de déterminer le profil de transmission en fonction
de la longueur du tube dans chaque instant, ces données sont transmises au logiciel SEPView, qui permet de détecter la
position du front P (Cf. Fig 15) séparant le surnageant du culot dans chaque instant tout au long de la durée de
centrifugation. Ainsi le suivi du front permet de tracer le profil de la position en fonction du temps et ainsi déterminer
la vitesse de sédimentation, ainsi que l’épaisseur du culot en fin de centrifugation.

Figure 15 : Aspects théoriques de centrifugation [10]

2. Protocole expérimental :
Lors de cet essai de concentration des microalgues par centrifugation, on prépare trois échantillons de microalgues pour
chacune des concentrations suivantes : 0,1%, 1%, 5% et 10%, soit 12 échantillons au total. La centrifugation est
effectuée pour une durée de 120 min, avec des vitesses de rotation de 500, 1000, 2000, et 4000 rpm.
On prépare également trois tubes à pH 2 et 4, à une concentration de 5%, en ajoutant quelques gouttes de l’acide
chloridrique, et des tubes à pH 8 et 12 en ajoutant la soude, ces tubes sont centrifugés pendant 120 min à une vitesse de
2000 rpm.

Projet de fin d’études 24 UTC 2019/2020

 Figure 16 : méthodologie expérimentale

Enfin, on mesure de conductivité de pH de surnageant de la centrifugation, tandis que l’absorbance du surnageant à 400
nm et 600 nm sont effectué au moyen du spectrophotomètre « Thermo Spectronic Genesys 20 », tandis que l’épaisseur
du culot et la vitesse de sédimentation sont déterminés au moyen du logiciel SEPview.

Résultats et analyse

I. Electrofiltration
1. Etude d’électrofiltration
Pour étudier l’effet des deux facteurs F1 : champ électrique et F2 : pression, nous avons effectué des essais avec et sans
champ électrique, pour des pressions de 1, 2 et 4 bars, avec une répétition des essais trois fois, le tableau des essais de
notre plan d’expérience est comme suit :

F1 F2 réponse
1 1 13,9
1 2 24,68
1 3 64,74
2 1 141,75
2 2 187,3
2 3 278,3
Avec :
F1= champ électrique 1=0 A/m2 2= 60 A/m2
F2= Pression 1 = 1 bar 2=2 bars 3=4bars
Réponse = Volume de filtrat (g)
Le résultat obtenu au moyen du logiciel Minitab sont présenté comme suit :

Projet de fin d’études 25 UTC 2019/2020

 Figure 17 : :le digramme des effets du champ électrique et de la pression sur le volume de filtrat

Le diagramme des effets des deux facteurs indique que l’effet de du champ électrique est considérable par rapport à
l’effet de la pression.

1.1.Volume des filtrats

Volume de filtrat (P=1bar A=60A/m2) Volume total des filtrats mélangés (A=60A/m2 )
120 250
100
200
80
150
Vf (ml)

60
V (ml)

40 100

20 50

0
0
0 100 200 300 400
t (min)
0 100 200 300 400
t(min)

V anode V cath V P=2bars V P=1bar V P=4 bars

Figure 18 : volume des filtrats : effet d'électrophorèse (à gauche ) et de pression (à droite)

Le volume de filtrat coté cathode est plus important par rapport au volume recueilli dans le coté anode, à cause de la
migration des particules de microalgues chargés négativement vers l’anode à cet effet l’épaisseur du gâteau du côté de
l’anode est plus importante et l’écoulement à travers celui-ci est faible. L’augmentation de la pression permet
d’augmenter le volume total de filtrat.

Projet de fin d’études 26 UTC 2019/2020

 1.2.Température des électrodes

40 Température de filtrat

35

30
T (°C) T anode
25
T cath
20

15
0 100 200 300 400
t (min)

Figure 19 : température des filtrats : effet de recirculation

La recirculation du volume de filtrat dans le côté de l’anode permet de maintenir sa température presque constante.

1.3.pH des filtrats

14 pH filtrat pH filtrat
14
12 12
10 10
8 8
pH

pH

6 6
4 4
2 2
0 0
0 100 200 300 400 0 100 200 300 400
t (min) t (min)

pH a pH c pH a pH c pH

Figure 20 : pH de filtrats: l'effet de mélange des filtrats

Le pH de filtrat coté anode est acide à cause de la réaction de l’oxydation : 6 H2O  4 H3O+ + O2 + 4 e-.
Le pH de filtrat coté cathode est basique à cause de la réaction de la réduction :2 H2O + 2 e-  2 OH- + H2.
Le mélange des filtrats du côté anode et cathode permet d’obtenir un filtrat à un pH relativement neutre.

1.4. Caractérisation du gâteau formé

pH et conductivité du gâteau formé

6 7
5 6
5
σ (mS/cm)

4
4
3
pH

3 pH
2 2
σ(mS/cm)
1 1
0 0
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
Distance normalisée de l'anode à la cathode

Figure 21 : caractérisation du gâteau de filtration : effet des réactions d'oxydo-réduction au niveau des électrodes

Projet de fin d’études 27 UTC 2019/2020

 L’augmentation du pH en traversant le gâteau de filtration de l’anode vers la cathode est à cause des réactions
d’oxydoréduction au niveau des électrodes : 6 H2O  4 H3O+ + O2 + 4 e- et 2 H2O + 2 e-  2 OH- + H2 .
La diminution de la conductivité à l’intérieur du gâteau en passant de l’anode vers la cathode, est due à la formation
des sels par les réactions d’oxydoréduction : M(s)  n e- + Mn+ et ne- + Mn+  M(s), et par l’effet de
l’électromigration à l’intérieur du gâteau.

siccité en fonction de pression

21
20,5
20
Siccité en %

19,5
19
Siccité (% )
18,5
18
17,5
0 1 2 3 4 5
P (bars)

Figure 22 : siccité du gâteau formé : effet de pression

L’augmentation de la pression permet de 1 à 4 bars permet d’augmenter la siccité du gâteau formé.

2. Etude de perte des pigments dans les filtrats

2.1.Taux d’extraction des pigments
La mesure de l’absorbance maximale des pigments extraits par diffusion, permet de déterminer le taux d’extraction
des pigments par électrofiltration par rapport à l’extraction par diffusion indiqué comme suit :
Taux = ABS/ ABSmax
Avec : ABS : absorbance de filtrat à t=5 heures
ABS max : absorbance de la solution d’alimentation à t=5 heures

Absorbance de C. Vulgaris's Solution 5%

16
14
12
10
Absorbance

400 nm
8
600 nm
6
4 400 nm
2 600 nm
0
0 50 100 150 200 250 300 350
Temps (min)

Figure 23 : détermination de ABS MAX

L’absorbance maximale des Chlorophylles extraits obtenus est 14,826, tandis que celle des Carotènes extraits est
1,5645. Ainsi, on obtient le taux de pigments extraits dans les filtrats comme suit :

Projet de fin d’études 28 UTC 2019/2020

 Taux de pigments extrait dans les filtrats

50 43,63
40

A/Amax (%)
30 23,97
Chlorophylles
20
10,62 Carotènes
10
0,45
0
Anode Cathode

Figure 24 : taux d'extraction des pigments par électrofiltration par rapport à une extraction par diffusion dans l'eau

Le taux d’extraction des pigments dans les filtrats par électrofiltration des chlorophylles est supérieur à celui des
carotènes, cette extraction est intensifiée dans le coté de la cathode.

2.2.Bilan de matière des pigments

Tableau 7 : résultat du bilan des pigments

Données m×A %
m1 (g) 500,07
7414,04 100,00
A1 14,83
m2 (g) 59,19
93,22 1,26
A2 1,58
m3 (g) 219,12
1417,24 19,12
A3 6,47
(+)accumulation
(-) source 5903,59 79,63
(+) pertes
Le bilan des pigments confirme les résultats précédents avec une perte intensifiée dans le coté cathode de 19,12%
contre une perte de 1,26 % dans le coté anode, à cause du volume plus important du filtrat dans le coté cathode.

3. Etude de perte des protéines dans les filtrats

3.1.Dosage des protéines
Concentration de protéines dans les filtrat Concentration de protéines dans la solution
(g/100g) d'alimentation (g/100g)
20 59
Concentration (g/100g)

Concentration (g/100g)

15 58
57
10
56
5 55
0 54
10 20 30 60 120 180 240 300 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
Temps (min) Temps (min)

C anode (en g/100g) C cathode (en g/100g) C alimentation (en g/100g)

Figure 25 : concentration des protéines en solution d'alimentation et en filtrats

Projet de fin d’études 29 UTC 2019/2020

 La concentration des protéines extraits par électrofiltration dans les filtrats dépasse 16g/100g de matière sèche dans le
coté anode, celle-ci avoisine 6g/100 g de matière sèche dans le coté cathode, ces valeurs indiquent une extraction
importante des microalgues dans le procédé de récole par électrofiltration, comparées par à leur concentration dans la
solution d’alimentation de 58%, et/ou la composition de protéines des microalgues C.vulgaris [1]qui est de 51 à 58%
(Cf. Tab1).
Tableau 8 : Composition des microalgues Chlorella Vulgaris [1]

Composition %
Protéines 51 à 58
Carbohydrates 12 à 17
Lipides 14 à 22

3.2.Bilan de matière protéines

Données m×A %
m1 (g) 500,07
529,57 100,00
A1 1,06
m2 (g) 59,19
18,27 3,45
A2 0,31
m3 (g) 219,12
59,31 11,20
A3 0,27
(+)accumulation
(-) source 452,00 85,35
(+) pertes

Le bilan des pigments indique que la quantité des protéines extraits coté cathode est plus important, avec une
proportion de 11,2%, contre 3,45% dans le coté anode, malgré la concentration plus importante coté anode. Ceci est
dû à la quantité du volume de filtrat plus important récupéré dans le coté cathode.

4. Etude de consommation énergétique

Energie consomée (kJ/kg de filtrat)

300

250

200
E(kJ/kg de filtrat)

150

100

50

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360
Temps (min)

Figure 26 : consommation énergétique spécifique instantanée au cours d'électrofiltration

Projet de fin d’études 30 UTC 2019/2020

 La consommation énergétique instantanée par masse de volume filtré est faible au début de l’électrofiltration, celle-ci
augmente jusqu’à l’atteinte d’une valeur maximale. Cette augmentation est due à la dissipation d’énergie par effet de
joule en plus de la diminution de volume filtré pour la même consommation d’énergie.
Cette énergie est beaucoup moins importante que l’énergie thermique nécessaire pour un procédé de concentration par
évaporation, ΔH vap = 2257 kJ/kg évaporée. Cependant, une comparaison intégrale nécessite de prendre en
considération la consommation de l’ensemble des équipements utilisés (compresseur, pompe…).

II. Centrifugation

pH de surnageant Conductivité du surnageant

9
8
8
pH du surnageant

7
7
6 6

σ (mS/cm)
5 5
4 4
3 3
2 2
1 1
0 0
500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm 500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm
vitesse de rotation vitesse de rotation
0,1% 1% 5% 10%
0,1% 1% 5% 10%
Figure 27 : pH et conductivité du surnageant

On remarque que le pH du surnageant augmente légèrement en augmentant la concentration, le pH diminue légèrement

avec la vitesse de rotation.
On remarque que la conductivité de surnageant augmente d’une manière générale en passant de la concentration 0,1%
à 10%, tandis que celle-ci augmente en augmentant la vitesse de rotation jusqu’à 2000 rpm, où elle atteint sa valeur
maximale.

1. Absorbance des pigments

Absorbance des chlorophylles Absorbance des carotènes

25 15
20
10
15
10 5
5
0 0
500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm 500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm

0,10% 1% 5% 10% 0,10% 1% 5% 10%

Figure 28 : absorbance des pigments

L’absorbance des pigments augmente avec la concentration et diminue avec la vitesse de rotation.

Projet de fin d’études 31 UTC 2019/2020

 2. Epaisseur de culot et vitesse de sédimentation

épaisseur du culot Vitesse de sédimentation (%/s)

30 50
45
25
40

Vitesse de sédimentation (%/s)

20 35
épaisseur en (mm)

30
15 25
20
10 15
10
5
5
0 0
500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm 500 rpm 1000 rpm 2000 rpm 4000 rpm
Vitesse de rotation vitesse de rotation

0,10% 1% 5% 10% 0,10% 1% 5% 10%

Figure 29 : épaisseur et vitesse de sédimentation

Il est évident que l’épaisseur de culot de centrifugation augmente avec la concentration, à cause de la charge des tubes
concentrés en microalgues, la diminution de l’épaisseur avec la vitesse de rotation est due à la compression des
microalgues récupérées dans le culot, sous l’effet de la force centrifuge.
La vitesse de sédimentation augmente en fonction de la vitesse de rotation, celle-ci est optimale pour la concentration
de 1%, pour la concentration 0,1% la sédimentation des particules diluées en suspension devient difficile, également
une grande concentration entraine une sédimentation plus lente (Cf. Fig 29,30)

Figure 30 : photo des tubes de centrifugation aux concentration 0.1, 1, 5 et 10% de droite à gauche

Projet de fin d’études 32 UTC 2019/2020

 3. Amélioration de centrifugation par ajustement de pH
épaisseur de culot (mm) vitesse de sédimentation (%/h)
10 35
9
30
8
7 25
6
20
5
4 15

3 10
2
5
1
0 0
pH=2 (ajout pH=4 (ajout ph=6,26 pH=8 pH=12 pH=2 (ajout pH=4 (ajout ph=6,26 pH=8 pH=12
d'HCl) de NCl) (NaOH) (NaOH) d'HCl) de NCl) (NaOH) (NaOH)

Figure 31 : épaisseur et vitesse de sédimentation

Pour une même vitesse de rotation de 2000 rpm, la diminution de pH permet d’augmenter la vitesse de sédimentation,
ceci est expliqué par l’effet des protons H+ sur le potentiel zéta, ce dernier qui est considéré comme un indicateur de la
stabilité des particules chargé, mesure la différence de potentiel entre la surface de particule et le point de neutralité.
Ce potentiel négatif augmente en diminuant le pH (Cf. Fig 32), ce qui indique que les particules sont moins stables, ce
qui facilite leur sédimentation. Les particules sédimentées à faible pH sont alors bien épaissies par la force centrifuge,
ce qui explique la faible épaisseur de culot à des faibles valeurs de pH.

Figure 32 : le potentiel Zeta en fonction de pH pour les microalgues Chlorella Vulgaris [11]

Projet de fin d’études 33 UTC 2019/2020

 Conclusion et perspectives

Lors de l’essai d’électrofiltration, un plan d’expérience utilisant la variation de champ électrique et de pression a
permis de dévoiler l’importance de l’effet de traitement par champ électrique par rapport à la variation de pression.
L’augmentation de l’intensité du champ électrique induit une accélération de la cinétique de déshydratation et des
réactions électrochimiques au niveau des électrodes. Par contre, au-delà d’une valeur d’intensité de champ électrique
optimale, une perte énergétique du champ électrique par effet joule commence à se produire.
L’utilisation d’un système de recirculation par l’eau distillée déminéralisée au niveau de l’anode « système de lavage
des électrodes », a permis d’abaisser le colmatage -par contre-courant au flux de filtration- des pores surtout au
niveau de l’anode, le refroidissement des électrodes, ainsi que l’élimination des produits d’oxydoréduction générés
au niveau de l’anode. Le mélange des filtrats récupérés au niveau de la cathode et de la cathode a permis d’améliorer
la qualité de gâteau de micro algues récupérés ainsi que celle du filtrat -pour une éventuelle valorisation-.
Les bilans de matière des pigments et des protéines a permis de quantifier les pertes des extraits d’intérêt dans les
filtrats, ces pertes avoisine 20 % pour les pigments et 14,5% pour les protéines.
Le procédé d’électrofiltration demeure moins énergivore avec une consommation énergétique spécifique instantanée
de 230 kJ/kg par rapport à un procédé concentration par évaporation avec une consommation de 2257 kJ/kg.
Un prétraitement physico-chimique par ajustement de pH permet de stabiliser les particules de microalgues chargées
et faciliter leur sédimentation lors du procédé de récolte par centrifugation, ainsi le procédé devient plus efficace –
épaisseur du culot plus important- et plus rapide –vitesse de sédimentation plus importante- par rapport à une
centrifugation sans prétraitement.
Pour vérifier l’hypothèse de la capacité du champ électrique à agglomérer les particules des microalgues, cette
hypothèse provient de la remarque de l’obtention d’un volume de filtrat important coté anode par rapport à une
filtration sans champs électrique, malgré la consolidation du gâteau plus important dans le coté de l’anode lors de
l’application du champ électrique. Une utilisation d’une concentration plus importante de 15% avec et sans champ
électrique permettra alors de mettre en évidence la capacité du champ électrique et remédier au problème de
colmatage au niveau de la membrane.
Une éventuelle utilisation d’un courant continue avec une inversion de la polarité des électrodes, permettra
d’améliorer la siccité finale et de maintenir le pH constant au niveau du gâteau de filtration.

Projet de fin d’études 34 UTC 2019/2020

 Références

[1] J. Jenck, O. Lépine, J. Legrand, P. Dreno, D. Grizeau, et C. Dupré, « Valorisation industrielle des microalgues
photosynthétiques », p. 15, 2011.
[2] Julie PERSON, « LIVRE TURQUOISE Algues, filières du futur » .
[3] M. Létourneau, J. B. Sérodes, et J. de la Noue, « Récupération de microalgues à l’aide d’un décanteur lamellaire ».
[4] Vandamme D, Foubert I, et Muylaert K, « Flocculation as a low-cost method for harvesting microalgae for bulk
biomass production.Trends Biotechnol ». .
[5] N. Uduman, Y. Qi, M. K. Danquah, G. M. Forde, et A. Hoadley, « Dewatering of microalgal cultures: A major
bottleneck to algae-based fuels », J. Renew. Sustain. Energy, vol. 2, no 1, p. 012701, janv. 2010, doi:
10.1063/1.3294480.
[6] I. L. C. Drexler et D. H. Yeh, « Membrane applications for microalgae cultivation and harvesting: a review », Rev.
Environ. Sci. Biotechnol., vol. 13, no 4, p. 487‑504, déc. 2014, doi: 10.1007/s11157-014-9350-6.
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removal of electrolysis products. Chemical Engineering Science 61, 4732-4740. », 2006.
[8] G. Singh et S. K. Patidar, « Microalgae harvesting techniques: A review », J. Environ. Manage., vol. 217, p.
499‑508, juill. 2018, doi: 10.1016/j.jenvman.2018.04.010.
[9] R. G. Maroun et al., « Emerging technologies for the extraction of polyphenols from natural sources », in
Polyphenols: Properties, Recovery, and Applications, Elsevier, 2018, p. 265‑293.
[10] « www.lum-gmbh.com STEP-TECHNOLOGY ». Consulté le: sept. 02, 2020. [En ligne].
[11] C. Matho et al., « Bio-compatible flotation of Chlorella vulgaris: Study of zeta potential and flotation efficiency »,
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[12] Jennings, A.A., Mansharamani, P., 1999. Modeling electrokinetically-enhanced aggregate
remediation. Environ. Model. Softw. 14 (6), 625–634.
[13] Vorobiev, E., Jany, S., 1999. Etapes de filtration frontale assistée par champ électrique. Entropie 219, 23–28
[14] Jessica Desabres, Maksym Loginov & Eugene Vorobiev (2017) Model of electrofiltration in a filter press with
anode flushing, Drying Technology, 35:10, 1182-1194,

Projet de fin d’études 35 UTC 2019/2020