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REPUBLIQUE DEMOCRATIQUE DU CONGO

ENSEIGNEMENT SUPERIEURE ET UNIVERSITAIRE
« E.S.U »
UNIVERSITE CATHOLIQUE DU GRABEN
U.C.G/BUTEMBO

B.P 29 BUTEMBO
FACULTÉ DE SCIENCES PHARMACEUTIQUES

TRAVAIL PRATIQUE DE L’IRS

Réalisé par : KATEMBO KATUSELE Augustin

Promotion: L2 LMD

Titulaire du cours : PROF. SOLY KAMWIRA Alphonse

ANNEE ACADEMIQUE 2022-2023

INTRODUCTION
Après le cours d’ Initiation à la recherche scientifique, nous avons suivi le
Travail pratique, au laquelle il nous a été demandé de rédiger le projet de
recherche du sujet pour lequel nous comptons mener notre travail de fin de
cycle.
En effet, après un long moment de réflexion, nous avons décidé de travailler
sur : l’extraction, caractérisation des polysaccharides peptiques d’aloe vera
Mille milliards de tonnes de matière vivante se créent chaque année à la surface
de la terre. Une biomasse constituée en majeure partie de molécules ou de
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macromolécules glucidiques : ligno cellulose surtout, mais aussi amidon et

hémicelluloses. En dépit de cette domination, on a longtemps considéré les
sucres et leurs dérivés comme des molécules d’importance biologique
secondaire, les cantonnant à un rôle de structure (la cellulose par exemple) ou de
stockage de l’énergie (amidon ou saccharose).
Les phytopolysaccharides sont une classe de biomolécules dont certains
présentent des propriétés biologiques susceptibles d’être valorisées à une échelle
industrielle. Extraits majoritairement des végétaux, ces polymères hydrosolubles
établissent des interactions spécifiques avec l’eau et peuvent épaissir, stabiliser
ou gélifier une solution, même à faible concentration. L’intérêt des
polysaccharides ne se limite pas à leurs propriétés rhéologiques :
Le rôle biologique de certains d’entre eux les désigne comme des molécules à
activités pharmaceutique ou dermo cosmétologique.
Les peptides sont une classe complexe de phytopolysaccharides qui entrent dans
la composition des parois cellulaires végétales. Ces molécules sont très utilisées
par les industries agro-alimentaires et on estime à environ 5 grammes, la
quantité de peptides consommés chaque jour dans un régime alimentaire
occidental moyen. La consommation annuelle mondiale de peptides est estimée
à 45millions de kg avec un marché situé aux environs de 400 millions d’euros.
Les peptides sont considérés comme des additifs alimentaires.
Bien plus que de simples additifs alimentaires, les propriétés biologiques des
peptides tant dans le domaine thérapeutique en santé humaine que dans celui de
l’organisation et de l’évolution des structures pariétales en physiologie végétale,
font d’elles une classe de molécules remarquables. En effet elles sont utilisées
comme agents gélifiants, stabilisants, émulsifiants et épaississants. La relation
étroite entre leur structure et leur fonction motive nombreuses études et explique
le nombre considérable de références bibliographiques
(Brudieux, 2007).
Afin de bénéficier de cette biomasse riche en peptide, une bonne maitrise des
conditions d’extractions de cette macromolécule est nécessaire.

 PROBLEMATIQUE

La problématique de ce sujet de recherche est d’explorer et d’analyser les

polysaccharides peptiques : composés chimiques complexes formés par la
combinaison de sucre et des peptides) extrait de l’aloe vera.

 L’objectif de ce travail est :

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-D’extraire les polysaccharides hydrosolubles à partir des feuilles de l’Aloe

vera ;
-Caractérisation biochimique des polysaccharides peptiques (PP) ;
-Etude de leur bio activité anti-inflammatoire et antibactérienne et du
pouvoir réducteur afin de comprendre leur potentiel bio actif. L’Aloè vera est
une plante reconnue pour ses propriétés médicinales et ses multiples utilisations
dans le domaine de la santé et de la cosmétique. Les polysaccharides et les
peptides présents dans cette plante ont suscité un intérêt particulier en raison de
leurs potentiels effets bénéfiques pour la santé humaine. la recherche se
concentrera donc sur l’extraction des polysaccharides peptiques à part de l’aloe
vera et leur purification pour obtenir des échantillons purs. Ensuite une
caractérisation sera réalisée pour identifier et analyser la structure chimique de
ces composés. Enfin, le volet sur la bio activité vise à évaluer les effets
potentiels des polysaccharides d’aloe vera sur la santé humaine. Cela pourrait
inclure des études sur leurs propriétés anti oxydantes, anti inflammatoire,
immunomodulatrice ou encore leurs effets sur la cicatrisation des plaies.
L’étude sur l’aloe vera se déroule comme suit :

I .partie bibliographique : le premier chapitre sera consacré à une synthèse

bibliographique, rappelant des généralités sur l’Aloe vera incluant l’historique
de la matière végétale; sa répartition géographique, ses aspects botaniques, sa
composition chimique et ses activités thérapeutiques. Le second chapitre portera
essentiellement sur les polysaccharides végétaux et quelques exemples de
familles chimiques de polysaccharides ainsi qu’à leurs domaines d’application.

II. Partie expérimentale : elle sera consacrée à l’étude des polysaccharides

peptiques hydrosolubles extraits et leurs activités biologiques, suivie par les
principaux résultats et discussions. Elle sera subdivisée en quatre chapitres:

1) Extraction des polysaccharides peptiques : qui consiste à l’extraction des

polysaccharides peptiques à partir de l’Aloe vera en se basant sur l’extraction
conventionnelle solide-liquide et leur déproteination par la méthode de Sevag.
2) Caractérisation physico-chimique : dans cette partie, deux techniques
seront utilisées ; une chromatographie échangeuse d’anions à haute performance
dont le but est de déterminer les monosaccharides constitutifs du PP, et une
analyse FTIR qui vise à confirmer la nature de ces polysaccharides peptiques.
3) Dosages colorimétriques : partie qui sera consacrée pour la détermination
de la quantité en glucides totaux et la teneur en protéines des extraits
polysaccharides peptiques.
4) Etude de la bio-activité des polysaccharides peptiques: elle sera impliquée
dans l’étude du pouvoir réducteur, l’activité antibactérienne et anti
inflammatoire.
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 GENERALITE SUR L’ALOE VERA

 Historique

A travers les âges, l’Aloe vera a été vénérée par de nombreuses civilisations et
cultures. Tant et si bien qu’elle a acquis le nom de plante divine et symbolisait «
la beauté, la santé et le mieux-être ». A l’heure actuelle, personne ne peut
vraiment dire depuis quand datent les premières traces de son utilisation en tant
que plante médicinale, mais on retrouve des témoignages qui montrent que son
usage datait depuis plus de 5000 ans, dans des régions du monde aussi éloignées
les unes des autres, telles que le sud de l’Europe, l’Asie, le nord de
l’Afrique, l’Amérique et l’Extrême Orient .Symbole de l’immortalité, les
Egyptiens de l’antiquité étaient convaincus que l’Aloe vera possédait le pouvoir
de faciliter le passage des défunts dans l’autre monde, ils disposaient ainsi des
feuilles d’Aloe vera dans les tombeaux de leur pharaons défunts afin que leur
voyage se déroule sous les meilleurs auspices.
La première mention historique de l’usage de cette plante en tant que
cosmétique est probablement celle de la reine d’Egypte « Cléopâtre », utilisant
en secret le gel d’Aloe vera dans son bain comme soin de beauté et élixir de
jeunesse.
L’Aloe vera faisait déjà largement partie de la pharmacopée chinoise 4000 ans
avant Jésus-Christ, et avait été surnommée « la plante de l’harmonie » en vertu
de son action agissant sur tous le corps, elle était considérée comme la plante
spécifique du traitement des brûlures et des affections de la peau. Plus tard, vers
700-800 ans après J-C, les Chinois l’utilisèrent pour traiter les sinusites, la fièvre
et les convulsions chez les enfants, les maux d'estomac, ainsi que dans le
traitement de l'urticaire et autres affections cutanées. La médecine chinoise
actuelle utilise sa pulpe pour le traitement de l’artériosclérose
Galor 2011).
Les hindous appellent l’Aloe vera « le guérisseur silencieux », la médecine
ayurvédique de l'Inde tient l'Aloe vera en haute estime, en tant que plante
majeure de sa pharmacopée. Considérée comme plante sacrée, certaines de ses
espèces étaient rigoureusement protégées, son gel était utilisé comme guérisseur
en chirurgie (application du
Gel brute sur l’incision) pour favoriser une cicatrisation rapide, meilleur et
naturel.
Les Arabes connaissent depuis la plus haute antiquité les vertus de l’Aloès qu’ils
appellent « Lys du désert ». 600 ans avant J-C, la civilisation arabe fut l’une des
premières à décrire deux sucs différents et à développer un processus de
séparation du gel et de la sève : à l’aide de leurs pieds nus, les Arabes écrasaient
les feuilles d’Aloe vera et plaçaient la pâte ainsi obtenue dans des sacs en peau
de chèvre. Ensuite, ces sacs étaient placés en plein soleil pour que le contenu
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soit complètement desséché puis il était réduit en poudre. Ces extraits résineux,
qui servaient surtout de laxatif, mais aussi à bien d’autres usages internes et
externes, ont largement contribué à la diffusion de l’Aloès dans de nombreux
pays du Moyen-
Orient et d’Asie (Natacha Michayewicz, 2013).
Pour les Grecs, l'Aloe vera symbolisait la beauté, la patience, la fortune et la
santé.
Dioscoride, un médecin grec et botaniste de l’Antiquité a décrit les propriétés de
la plante dans son traité « De Materia Medica ». Elle était utilisée pour la
cicatrisation ; le traitement des furoncles, des irritations de la sphère ORL, des
peaux sèches et irritées, des ulcères génitaux, et pour l’arrêt des saignements.

 Distribution géographique

Le nom Aloe vient du mot Alloeh arabe signifiant une substance amère brillante.
Aloe vera est une plante de type cactus qui pousse facilement en climat chaud et
sec, et actuellement, en raison de la forte demande, est cultivée en grande
quantité. elle pousse principalement dans les régions sèches d’Asies, d’Afrique,
d’Amérique et d’Europe.
 Description botanique
Grindlay et Reynolds (1986) ont décrit 314 espèces d’Aloès dans ses
monographies classiques, actuellement ce genre répertorie plus de 420 espèces
(Haller Jr 1990) classées en deux groupes en fonction de leur utilisation, la plus
connue et la plus utilisée est l’Aloe vera
(Grindlay et Reynolds 1986) de son nom botanique Aloe vera Barbadensis
Miller, du mot « aloès », on la retrouve également sous la dénomination d’Aloe
vulgaris ou Aloevera. Elle a été introduite par la suite au nord de l’Afrique, dans
la péninsule arabique, la Chine, les pays méditerranéens (Haller Jr 1990).

 Taxonomie et nomenclature

Règne : Végétal
Division : Trachéophytes
Embranchement : Spermaphytes
Sous /Embranchement : Angiosperme
Classe : Monocotylédones

Ordre : Asparagées
Famille : Liliaceae
Sous-famille : Asphodelaceae
Genre : Aloe
Espèce : Aloe vera Barbadensis Miler
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 Anatomie et morphologie

Les botanistes précisent que l'Aloe vera est une plante :

. Tropical
. Vivace
Arborescente de 80 à 100 cm de haut
A fleurs, de la famille des Liliacées à laquelle appartiennent les
asphodèles, leLys, l'oignon, l'ail, l'asperge, le muguet, la tulipe…etc.
. Faisant partie également des plantes grasses, succulentes du latin succus
signifiant jus ou suc.
A l'état naturel, l'Aloe vera pousse sur des terrains sablonneux et calcaires de
régions semi désertiques au climat chaud et sec. Sa reproduction s'opère par
graines ou, plus aisément, par les rejets (stolons) qui poussent autour de son pied

 HYPOTHESE

On suppose que l’hypothèse de ce sujet de recherche (extraction ;

caractérisation et bio activité de polysaccharides peptiques) pourrait être que les
polysaccharides peptiques présents dans l’aloe vera ont des propriétés bio
actives bénéfiques pour la santé. Cette hypothèse suppose que les
polysaccharides peptiques extraits de l’aloe vera ont la capacité de jouer un rôle
dans divers processus biologiques tels que, l’activité anti microbienne, anti-
oxydantes ; …
Pour tester cette hypothèse, il faudrait procéder à l’extraction des
polysaccharides peptiques de l’aloe vera en utilisant des méthodes appropriées.
Ensuite, il serait nécessaire de caractériser ces polysaccharides c’est-à-dire
d’identifier et de quantifier leurs composants chimiques ; leurs
structures moléculaire ; leur poids moléculaire ; etc. une fois caractérisés, les
polysaccharides peptiques pourraient être évalués pour leurs activités
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biologiques ; par exemple en les testant sur des cellules in vitro ou en réalisant
des études animales pour évaluer leurs effets sur la santé.

 MATERIEL ET METHODOLOGIE DE RECHERCHE

Pour la recherche de ce sujet spécifique, l’extraction, caractérisation et bio

activité des polysaccharides peptiques d’aloe vera la méthodologie sera réalisée
en suivant les étapes suivantes :

 Collecte des échantillons :

Pour commencer, il sera nécessaire de collecter les échantillons d’aloe vera
pour l’étude. Cela peut inclure la récolte des feuilles de la plante et la
préparation des extraits.

 Extraction des polysaccharides peptiques :

La méthodologie optimale pour extraire efficacement les polysaccharides
peptiques doit être déterminée. Cela nécessite de prendre en compte différents
facteurs tels que la composition chimique de la plante, les conditions
d’extraction (température, pH, solvant), ainsi que les méthodes de purification et
de séparation appropriées.
Il existe différentes méthodes d’extraction possibles, telles que l’extraction à
l’eau chaude, l’extraction par des solvants organiques ou extraction
enzymatique. Pour ce, nous allons utiliser les instrument suivants : La balance,
les papiers filtre analytique de précision, l'Erlen Mayer en verre, les
éprouvettes graduées, la plaque chauffante, l'étuve,....
 Caractérisation des polysaccharides peptiques :
Une fois les polysaccharides extraits, il sera essentiel de les caractériser pour
déterminer leur composition, leur structure et leurs propriétés physico-
chimiques. Cela sera effectuée en utilisant différentes techniques analytiques
telles que la chromo graphie, la spectrométrie de masse, la spectroscopie
infrarouge, analyse élémentaire, etc.

 Evaluation de la bio-activité :
Une fois les polysaccharides caractérisés, il sera bon moment d’évaluer leur
bio-activité. Cela peut inclure des tests in vitro pour évaluer leur activité anti-
oxydante, anti-inflammatoire, immunostimulante et cicatrisante. Des modèles
expérimentaux appropries seront utilisés pour étudier les effets potentiels des
polysaccharides peptiques sur les cellules ou les organismes vivant. Il sera
important de déterminer le mécanisme d’action des polysaccharides peptiques,
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en étudiant leur interaction avec les récepteurs cellulaires et les voies de

signalisation.

 Analyse des données et interprétation des résultats :

Les résultats sur l’extraction, la caractérisation et la bio activité seront issus des
données d’analyse au laboratoire central de l’UCG se trouvant en RDC,
province du Nord-Kivu, ville de Butembo, commune Mususa à NGENGERE où
s'effectuera la partie expérimentale de notre travail.
Une fois les expériences terminées, les données collectées seront analysées de
manière appropriée. Des analyses statistiques seront effectuées pour déterminer
les différentes significatives entre les groupes expérimentaux. Les résultats
seront interprétés et discutés pour en tirer des résultats finals sur la bio-activité
des polysaccharides peptiques d’aloe vera. En suivant cette méthodologie de
recherche, il sera possible d’obtenir des informations précieuses sur les
polysaccharides peptiques d’aloe vera, leur composition, leurs propriétés et leur
potentiel bioactif. Ces connaissances pourraient contribuer à l’élaboration de
nouvelles applications thérapeutiques où à l’amélioration des produits à base
d’aloe vera.

 CONCLUSION ANTICIPEE

La conclusion anticipée de la recherche sur l’extraction, la caractérisation et la

bio-activité des polysaccharides peptiques de l’aloe vera est que cette plante
présente des propriétés potentiellement bénéfiques pour la santé.
Les polysaccharides peptiques extraits de l’aloe vera sont susceptibles de
présenter des activités biologiques telles que, des propriétés anti-
inflammatoires, anti oxydantes, immun modulatrices et cicatrisantes.
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De plus, la caractérisation approfondie de ces composées permettra de mieux

comprendre leurs structures chimiques, leur composition et leurs mécanismes
d’action. Ces informations peuvent être utilisées pour développer des produits à
base d’aloe vera ayant des applications thérapeutiques et cosmétiques.
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 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUE

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B7zcx1W8EZVD2lrEerSsMKKGw/nhdMIVmzeLc.