Du gène aux protéines

LA TRANSGENESE Souris OGM

Individu d’une espèce (= le donneur)
synthétisant
fabriquant une protéine intéressante
la GFP
(ici la GFP protéine fluorescente)
par expression d’un gène de l’espèce

Transfert du développement
gène d’intérêt
(=transgène)

Très jeune embryon

d’une autre espèce
= le receveur
Adulte qui
Méduse fabrique une
Aequoria victoriae nouvelle
protéine

Tous les êtres vivants synthétisent des protéines à partir des gènes,
le mécanisme est le même quel que soit l’être vivant.
 LES RECHERCHES DU
LABORATOIRE :

?
Gène=fragment d’ADN Protéine
=polymère de nucléotides A, T, G, C =polymère d’acides aminés

Comment un gène permet-il

à la synthèse d’une protéine ?
 MISSION : PARVENIR A EXPLIQUER
COMMENT LE GENE OXT S’EXPRIME
POUR DONNER L’OCYTOCINE
Ile
accagtcacg gaccctggac ccagcgcacc cgcaccatgg Tyr
ccggccccag cctcgcttgc
Gln
tgtctgctcg gcctcctggc gctgacctcc
gcctgctaca tccagaactg ccccctggga expression Cys
ggcaagaggg ccgcgccgga cctcgacgtg cgcaagtgcc
tcccctgcgg ccccgggggc
aaaggccgct gcttcgggcc caatatctgc tgcgcggaag Asn
agctgggctg cttcgtgggc Cys
accgccgaag cgctgcgctg ccaggaggag aactacctgc
cgtcgccctg ccagtccggc
cagaaggcgt gcgggagcgg gggccgctgc gcggtcttgg
gcctctgctg cagcccggac
Pro
ggctgccacg ccgaccctgc ctgcgacgcg gaagccacct
tctcccagcg ctgaaacttg
atggctccga acaccctcga agcgcgccac Leu
tcgcttcccc catagccacc ccagaaatgg
Gly
tgaaaataaa ataaagcagg tttttctcct ct

GENE PROTEINE
OXT OCYTOCINE
(brin codant)
Information
génétique

noyau
Acides aminés libres

cytosol
?
Protéine
fonctionnelle
cellule
 ETAPE 1 : TRANSCRIPTION
de l’ADN en nombreux pré ARNm
Coloration au vert de méthyl pyronine :

ADN

ARN

L’ADN reste dans le noyau, l’ARN existe dans toute la cellule.

En observant au microscope électronique à transmission
du noyau d’une cellule en interphase G1,
On observe le phénomène
de TRANSCRIPTION des gènes Début du
en préARNmessagers gène transcrit

préARNm
en cours de
synthèse

Fin du gène
transcrit ADN

On constate que de
nombreux préARNm se
forment par transcription
à partir d’un seul gène
Comparons ADN et ARN

L’ADN et l’ARN sont tous les deux des acides nucléiques

(=du noyau), des polymères voisins mais différents
L’ADN est une macromolécule de longue durée d’existence,
de taille immense
et formée de centaines de gènes séparés par des séquences non
codantes très longues et répétitives.
C’est une molécule formée de deux brins complémentaires en
double hélice.

L’ARN est une macromolécule de brève durée d’existence,

de taille courte
ne comportant les informations que d‘un seul gène.
C’est une molécule à brin simple.
Il existe des différences entre nucléotides d’ADN et ribonucléotides d’ARN
Groupements phosphates sucres Bases azotées
O
O H
H H
H O H O
O N N O C H
H H H O C H O P O
C N C O P O
H N C
H C C H C H N C O
P O C P O C O
O C O O
N O C
H N H C H C N
O C O C H C N H C
O O C
N N H H
H C C C C
H C C C
C C H C H C
N N H C H
C C N H
C C H C C H H O O H
H H O C H
N H H H
H H
O H
H O H H
H H
H
H

NUCLEOTIDES D’ADN
désoxyribose
THYMINE
ADENINE GUANINE URACILE CYTOSINE

H O
H
ribose
H
O N
H N H O
C H P O C H
O N O
H C H O C
P O C C H N
O C O
H N C H C O O
O C O P O C H C
H C N
O N H N C
C O
H C O C O C H H
O O P
N N H C C C
C C C H N C H C
H O H
C C H N N H
H O O
H C C N H O H
H H C C
O H C C
O N H H H
H
H O C C H C
H O H C
H
O O
H H O H

H H

RIBONUCLEOTIDES D’ARN
Il existe des différences entre nucléotides d’ADN et ribonucléotides d’ARN

NUCLEOTIDES D’ADN
désoxyribose

A G T C

A G U C

ribose
RIBONUCLEOTIDES D’ARN
Comment se forme le pré ARNmessager ? Comparons le gène et le préARNm

Le préARNm est une copie sans erreur du brin codant du gène

avec les ribonucléotides ACGU qui remplacent les (désoxyribo)nucléotides ACGT
Comment s’effectue la transcription ?

Adénine
Cytosine
Guanine
Thymine

Brin codant

Brin non codant

POUR OBTENIR UNE COPIE DU

BRIN CODANT,
ON COMPLEMENTE LE BRIN
NON CODANT AVEC DES
RIBONUCLEOTIDES
Comment s’effectue la transcription ?

Adénine
Cytosine Les brins d’ADN se
Guanine séparent, et des
ribonucléotides
Thymine
sont associés par
Uracile complémentarité
au brin non
Brin codant codant=brin
transcrit d’ADN, et
Brin non codant polymérisés à l’ARN
déjà formé grâce à
l’ARN polymérase.

pré ARN messager

Plusieurs ARN polymérases fonctionnent en même temps, ce qui permet de

transcrire le gèner de nombreuses fois
 ADN : 2 brins complémentaires :

ADN
A-T-G-C-C-T-C-… Brin codant
T-A-C-G-G-A-G-… Brin non codant

A-U-G-C-C-U-C-… pré ARNmessager

préARNm : 1 seul brin

complémentaire du brin d’ADN non codant,
et donc copie du brin codant
 TRANSCRIPTION
ARNpolymérase

brin non codant d’ADN Pré ARN

=brin transcrit Messager
Formé de Formé de
désoxyribonucléotides ribonucléotides
Par complémentarité

noyau

En phase G1 d’interphase
2ème étape : MATURATION :
des PréARNm en ARNm
Comparons le préARNm et l’ARNm
En vert les séquences identiques
Certaines séquences du gène transcrit en préARNm s’avèrent inutiles :
ces introns, sont découpés et éliminés.
Les exons restants sont soudés dans l’ordre d’origine pour former l’ARNmessager

prem 1 2 3 4 5

1 2 3 4 5
 MATURATION
Les introns sont éliminés

préARN ARN
messager messager

noyau
ETAPE 3 : Migration des ARNmessagers du
noyau au cytosol
L’enveloppe nucléaire est percée de nombreux pores
 MIGRATION

ARN ARN
messager messager

Pores nucléaires

noyau
cytosol
 ETAPE 4 : TRADUCTION
de l’ARNm en nombreuses préprotéines
UN ARNm SERT DE SUPPORT DE SYNTHESE A DE NOMBREUSES PRE PROTEINES
GRACE AUX RIBOSOMES NOMBREUX

ARNm
Ribosomes

Préprotéines
 Préprotéine RIBOSOME

Sous-unité de traduction

Acides ARN de transfert

aminés porteur du code
génétique
ARNmessager

Sous-unité de lecture
Codons de trois
ribonucléotides
LE CODE GENETIQUE DU VIVANT

A lire du centre vers

l’extérieur

Exemple ; pour le
codon
d’initiation AUG
on obtient l’acide
aminé
Méthionine
LE CODE GENETIQUE DU VIVANT

Est :
Univoque
À un codon est toujours associé le
même acide aminé

Universel
C’est le même dans chaque espèce
vivante

Redondant
Plusieurs codons codent pour le
même acide aminé : 64 codons
pour 20 acides aminés

Il existe trois codons non

sens : les codons stop UAA,
UAG et UGA
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (1/7)

Les deux sous unités du ribosome sont libres dans le cytosol et

s’assemblent sur le premier AUG d’un ARNmessager
é de
u nit on
o us ucti
S ad
tr

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
S ou
su
lec nité
tur de
e
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (2/7)

Ensuite il y a lecture du codon, (association du bon ARN de transfert), et

début de traduction

RIBOSOME COMPLET M
et

UA
C

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (3/7)

Ensuite il y a lecture du codon, (association du bon ARN de transfert), et

début de traduction

ARN de transfert
(hors programme)
Molécule présente dans Met
la cellule comportant un
anti-codon associé à un
acide aminé : c’est le
support du code UAC
génétique

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (4/7)
Puis le ribosome se déplace d’un codon (un nouvel ARN de transfert s’y
associe, portant un nouvel acide aminé), et les deux acides aminés
réagissent [caractère enzymatique du ribosome] et formation d’une
liaison peptidique

Met Leu

UAC GAC

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (5/7)

Puis le ribosome se déplace d’un codon et on recommence…

Me
t
Leu Pro

GAC GGA

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (6/7)

Mais quand le ribosome tombe sur un codon stop (UAA, UAG, UGA) …

Me
t
Le u
Pro

GGA AUC

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
MODALITES DE LA TRADUCTION DE l’ARNm en Préprotéine (7/7)

…les deux sous unités du ribosome se détachent, et la préprotéine

également.

Me
t
Le u
Pro

GGAUACGAUGCUGCCUUAG
L’ARNm est traduit à
nombreuses reprises
par plusieurs ribosomes jusqu’à
sa destruction
par une enzyme ARNase…
TRADUCTION DE L’ARNm du gène OXT (1/4)

Fixation du ribosome sur le 1er AUG (codon d’initiation) de l’ARNmessager

Traduction du AUG en M (Met)= acide aminé méthionine
TRADUCTION DE L’ARNm du gène OXT (2/4)

Décalage du ribosome sur le codon suivant, lecture et traduction en acide

aminé
Création de la liaison peptidique entre le nouvel acide aminé et le
précédent
(aspect enzymatique du ribosome)
TRADUCTION DE L’ARNm du gène OXT (3/4)

Décalage du ribosome sur le codon suivant, lecture et traduction en acide aminé

Création de la liaison peptidique entre le nouvel acide aminé et le précédent
(aspect enzymatique du ribosome)
Etc…
TRADUCTION DE L’ARNm du gène OXT (4/4)

STOP

jusqu’à ce que le ribosome rencontre un codon stop (UAA, UAG, UGA) :

le ribosome se détache de l’ARNmessager (même s’il n’a pas tout lu), la préprotéine est
terminée
 TRADUCTION
RIBOSOME

CODE
ARN GENETIQUE Pré-
messager PROTEINE

Chaque ARNm donne de nombreuses préprotéines avant d’être détruit

ETAPE 5 : MATURATION DE LA
PREPROTEINE EN PROTEINE
Comparons une préprotéine et la protéine finale (ici ocytocine)

Ile I
Tyr Y
Gln Q
Cys C

Asn N
Cys C

Pro P

Leu L G
Gly
Plusieurs phénomènes peuvent se dérouler dans cette maturation :
- Des découpages avec élimination d’une partie plus ou moins
conséquente des acides aminés
- Des repliements en présence d’acides aminés cystéines (Cys=C), en
créant des ponts disulfures

Exemple de
l’insuline
Création d’un pont disulfure entre deux cystéines
A la fin de la maturation, on obtient une protéine ayant sa forme fonctionnelle

Ile
Tyr
Gln
Cys

Asn
Cys

Pro

Leu Gly
 MATURATION

Pré- PROTEINE
PROTEINE FONCTIONNELLE

Durant la maturation :
- des fragments de la préprotéine sont supprimés
- La protéine se replie en partie grâce aux ponts disulfures entre cystéines
Elle obtient sa forme définitive et donc sa fonction
BILAN DE LA SYNTHESE DES PROTEINES
 UN GENE
(2 ALLELES)

1°. Transcription
(nombreux préARNm)
noyau
2°. Maturation

3°. Migration
cytosol (nombreux ARNm)

4°. Traduction
(très nombreuses préproteines)
5°. Maturation

NOMBREUSES PROTEINES
A priori FONCTIONNELLES
RIBOSOME

Met

Codon
d’initiation
Met Ile
Met Ile Ala

Codon
d’élongation
Met Ile Ala Met
Met Ile Ala Met

Codon stop
 Préprotéine complète

Met Ile Ala Met

 « ENZYMES »
MONOMERE nécessaires à la NOM DE LA SYNTHESE POLYMERE
synthèse

ADN
ADN
nucléotides polymérase
REPLICATION Acide désoxyribo
nucléique

ACIDES
ARN NUCLEIQUES
préARNm
ribonucléotides polymérase TRANSCRIPTION (=créés dans
ARN le noyau)
Acide
ribo nucléique
ARNm
ribonucléotides (hors programme) MATURATION ARN messager

Acides aminés Ribosome TRADUCTION Pré-protéine

Polypeptides

Acides aminés (hors programme) Protéine

MATURATION