Les antibiotiques

PLAN : 04
METHODES

CMI et CMB 03

LES ANTIBIOTIQUES 02
LES SUBSTANCES
NATURELLES

01
C’est une substance chimique d'origine naturelle ou semi-synthétique
qui inhibe ou tue les bactéries (pathogènes et non pathogènes) à faible
concentration (dose) et possède une toxicité sélective

Ce terme s'est élargi dans l'usage courant pour inclure également des
agents antibactériens d'origine purement synthétique
 Substance naturelle

Un produit naturel est un composé produit

par un organisme vivant, se trouve dans la
nature.

Produit semi-synthétique

la préparation de molécules à partir de molécules

naturelles possédant déjà une partie de la molécule
visée.

Produit synthétique

la préparation de molécules synthétiques à

partir de molécules simples et habituellement
sans recourir à des processus biologiques.
 En chimie organique
Se sont des composés organiques purifiés et isolés
de sources naturelles qui sont produites par les
voies du métabolisme primaire et secondaire

Métabolites secondaires
Métabolites primaires
Plus spécifiques aux plantes, assurent la
protection contre les herbivores et les
Indispensable et assurent la croissance, le
agents microbiens et l’attraction des
développement d'un organisme.
pollinisateurs, ces fonctions écologiques
affectent énormément la survie de la plante.
Exemples: les acides aminés, les lipides, les
Se divisent en 3 groupes :
glucides et les acides nucléiques.
Composés terpéniques , Alcaloïdes et
Dérivés phénoliques.
 Bactériostatique Bactéricide

Une substance qui Une substance ayant la

inhibe la multiplication capacité de tuer des
des bactéries sans les bactéries
tuer
Les bêta-lactamines

Les quinolones

Les tétracyclines

Les macrolides

Les aminosides

Les oxazolidinones

Les glycopéptides et lipoglycopéptides

 Les bêta-lactamines

Pénicillines Céphalosporines Carbapénèmes

Bactéricide :
Détruit la paroi bactérienne en inhibant sa
synthèse
1: Structure des pénicillines
2: Structure des céphalosporines

NB: Le cycle bêta-lactame est en rouge

Les quinolones

Bactéricide :
Détruit la bactérie en inhibant la
synthèse de l’ADN bactérien en
détruisant l’activité de la ADN gyrase
bactérienne.

Spectre d’activité :
Initialement limité aux bactéries à
Gram négatif aérobies, s’est étendu
successivement aux bactéries à Gram
positif et aux anaérobies.
 Les tétracyclines

Bactériostatique :
Arrête la prolifération bactérienne en se liant
au ribosome bactérien et en inhibant la
synthèse des protéines.
 Les macrolides

Bactériostatique : Arrête la
Bactéricide : Détruit la bactérie
prolifération bactérienne en se
en se liant au ribosome
liant au ribosome bactérien et
bactérien et en inhibant la
perturbent la synthèse des
synthèse des protéines.
protéines.

Noyau central des aminosides,

composé de 2-désoxytreptamine (droite)
glucosamine (à gauche).
Ce noyau central correspond à l'antibiotique néamine.
 Bactériostatique : Perturbe la synthèse protéique de la bactérie.
Son spectre se limite aux bactéries Gram positives.

1,2-oxazolidine-3-one, 1,2-oxazolidine-4-one, 1,2-oxazolidine-5-one, 1,3-oxazolidine-2-one, 1,3-oxazolidine-4-one, 1,3-oxazolidine-5-one

 Glycopeptides et Lipoglycopeptides

Bactéricide: Sont des inhibiteurs de

la synthèse de la paroi bactérienne.
Leur spectre d'action est étroit,
dirigé contre les bactéries à Gram
positif.
 le ribosome bactérien est la cible de
nombreux antibiotiques, provoquant
l’arrêt de la synthèse protéique.
Induisant la lyse de la cellule Paroi
bactérienne
bactérienne

Ribosome

Inhibition de l’ARN-polymérase
Génome
Inhibition de l’ADN-gyrase bactérien
Inhibition de la synthèse des En dénaturant les
purines et des pyrimidines Membrane phospholipides de la
cytoplasmique membrane cytoplasmique, ce
qui provoque la fuite de
composés intracellulaires par
rupture de la perméabilité
cellulaire.
Concentration Minimale Inhibitrice

Concentration Minimale Bactéricide


Plus faible concentration
d’antibiotique inhibant la
croissance bactérienne
Index de sensibilité bactérienne
Etudiée par des méthodes de
diffusion en milieu solide
Plus faible concentration d’antibiotique qui,
agissant sur un inoculum initial, ne laisse
qu’un faible pourcentage de bactéries
survivantes (0.1% ou 0.01% selon le cas,
après 18 à 24 heures de contact)
Index de puissance antibiotique
S’évalue de manière dynamique au
moyen des courbes de bactéricidie qui
décrivent la décroissance de l’inoculum
dans le temps en fonction de
différentes concentrations de
l’antibiotique
Principe

Il s'agit de mettre un inoculum bactérien en contact avec des concentrations

décroissantes d'antibiotiques afin de déterminer, après un temps de contact à 37°C,
la plus faible concentration d'antibiotique capable d’inhiber la croissance
bactérienne.
Macrodilution Microdilution
 - La macrodilution :

Consiste à préparer dans le même milieu de

culture liquide une gamme de concentrations de
l'antibiotique à tester de: (0,5 mg/l ,1, 2, 4, 8, 16)
Et un tube témoin de croissance de la souche à
tester.

On ajoute la même quantité de

germes dans chaque tube (inoculum).
Les tubes ainsi préparée seront
incubés à 37°C pendant 18 heures.

Enfin ils seront examinés à l'oeil nu

et dans l'exemple ci-dessous,
la CMI de l'antibiotique à tester est
de 2 mg/l.
- La microdilution :

Des microplaques à fond en U Dans les cupules d’une même ligne,

(plaque à microtitration) sont les dilutions de l’antibiotique et la
utilisables pour la détermination souche sont introduit à l’aide d’une
des CMI. pipette automatique.

Incuber 24 h à la température
optimale de la souche.
Rechercher dans chaque cupule la
présence d'un trouble (+).
La CMI correspond a la concentration
de la cupule ne présentant pas de
croissance.
 Des disques de papier buvard pré
Elle consiste à ensemencer en
imprégnés d’une dose connue
surface d'un milieu solide par
d’antibiotique sont déposés à la
inondation de la souche à tester.
surface de la gélose.
L’antibiotique diffuse à partir du
disque en créant un gradient de
concentration

La boite ainsi préparée est mise à

La zone d'inhibition circulaire est
incuber pendant une nuit à 37°C. Il
mesurée par le diamètre en mm,
est possible de voir la croissance
puis il sera possible de calculer la
bactérienne (au milieu de la boite)
CMI de l'antibiotique pour la souche
ainsi que des zones d'inhibition de
examinée en reportant ce diamètre
la croissance circulaires à proximité
sur une courbe de concordance
de chaque disque.
Le système disque-milieu de culture est étalonné avec un grand nombre de souches de
références de CMI connues, déterminées par les méthodes de références.
On trace ainsi la droite de régression ou "courbe de concordance", donnant la
correspondance entre les CMI et les diamètres des zones d'inhibition.
Après, on mesure les diamètres des zones d'inhibition et on Les reporte sur le graphique
pour déduire les CMI. Les résultats sont exprimés en souche sensible, intermédiaire ou
résistante
 L'ensemencement par épuisement ou par la
technique des quadrants a pour objectif d'isoler
Une souche pure
des bactéries et d'obtenir des colonies
bactériennes distinctes.
Une colonie est un amas de bactéries visibles à
l'œil nu, constitué de milliards de microorganismes
tous issus d'une seule cellule bactérienne.
La forme, la couleur et la texture des colonies sont
des caractéristiques des espèces bactériennes que
nous pouvons étudier après avoir utilisé cette
technique.