Faculté de Médecine de Mostaganem

Cours des techniques immunologiques

3 année de médecine

Techniques
d’immunoagglutination

Dr Messatfa moussa
m_immuno@yahoo.fr
 T I Agglutination

I) Définition 

Réaction d’agglutination : Formation d’agglutinats en

présence :
 
-D’un antigène sur un état figuré (Globule rouge, Particule
de Latex, Bactérie…

- Anticorps spécifique agglutinant.

 T I Agglutination

I) Définition 

Réaction d’agglutination :

-Utilisé pour identifier un antigène dans les liquides

biologiques, coupe tissulaire ou suspension cellulaires.

-Utiliser aussi pour le dosage des anticorps en solution.

 T I Agglutination

I) Définition 

Réaction d’agglutination :

La notion d’anticorps agglutinant ou non est relative, elle

dépend de :

-La structure moléculaire de l’anticorps( IgM est la classe

avec le meilleur pouvoir agglutinant)

-La densité d’expression d’antigènes.

- Le milieu ou se déroule la réaction d’agglutination.

 
 T I Agglutination

II) Applications :
 
Deux grands types d’application :

- Détection et/ou dosage d’un antigène.

- Détection et /ou dosage d’un anticorps vis à sis d’un

mélange d’antigènes ou d’un antigène donné.
 
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

a) Réaction d’agglutination directe ou active.

b) Réaction d’agglutination indirecte ou passive.

c) Réaction d’inhibition de l’agglutination.

 
 
 
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

a) Réaction d’agglutination directe ou active

a-1) Conditions :
L’antigène est naturellement présent sur la particule exp :
Globule rouge.

La fixation directe de l’anticorps agglutinant sur l’antigène

exprimée naturellement sur la surface de la particule se
traduit par un phénomène d’agglutination 
 
 
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination directe ou active

a-2) Applications : nombreuses

- Détermination du groupage ABO.

 
  Anticorps IgM
Globules rouges
 
: Antigène exprimé naturellement sur le globule rouge.
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination directe ou active

a-2) Applications : nombreuses

- Sérodiagnostic de la typhoïde (Widal)

Anticorps + Salmonella Thyphi Agglutination

 
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
a-1) Conditions :

Utilisation de support figuré inerte (Globule rouge, particule

de latex) sur lequel on fixe notre antigène pour permetter
l’agglutination.

C’est donc une réaction indirecte par le recours à une étape

additionnelle de sensibilisation ou coating (=fixation) de
l’antigène sur un support figuré.
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
a-2) Support utilisés :

-Globules rouges de moutons ou autres.

-Billes de latex.

- Cristaux de cholestérol.
 
 +

Particule Ag Ac

Résultat :

- Agglutination indirecte.

- Si la particule est un GR = on parle donc

d’Hémagglutination indirecte
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
 
a-3) Applications : nombreuses
 
Détection et titrage du Facteur rhumatoïde (FR) : Auto
anticorps de classe IgM (moins souvent IgG ou IgA) diriger
contre la partie constante Fc de l’IgG (Donc un
autoanticorps IgM anti-IgG). Il est souvent rencontré dans
la polyarthrite Rhumatoïde.
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
  La recherche du FR se fait en routine par deux méthodes
d’utilisation courante

1) La technique de Latex :
 
Partie Fc d’IgG humaine  

+ Sérum du patient Agglutination

Latex

Interprétation : Le FR est présent dans le sérum du patient.

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III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
2) La technique de Waler-Rose :

Partie Fc d’IgG de lapin

  + Sérum du patient Hémmagglutination
GR de mouton O Rhésus négatif
sensibilisés avec des IgG de lapin
 
En comparant les deux techniques ; la première
  offre une meilleur sensibilité, alors que la
technique de WR est plus spécifique.
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
 - Recherche d’anticorps sur les Hématies :
 
Test de Coombs direct

+ Hemmaglutination

GR du patient Anti-Ig humaines

Recouverts d’Ac (Antiglobuline IgM ou IgG)

Ce test peut être utilisé pour la recherche d’une incompatibilité fœto-maternelle

en faisant réagir des GR du fœtus recouvertes d’anticorps maternelles anti-D
Puis l’hémagglutination est obtenue par addition d’antiglobulines.
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

Réaction d’agglutination indirecte ou passive

 
 - Recherche d’anticorps sur les Hématies :

Test de Coombs indirect

+ Sérum du patient + Antiglobuline Hemmaglutination

GR test

Ce test peut être utilisé pour la recherche d’une incompatibilité f

œto-maternelle en faisant réagir des GR tests Rhésus positif
(Antigène D) + le sérum de la mère sensé contenir des anticorps de
classe IgG anti-D + l’antiglobuline.
T I Agglutination
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

c) Réactions d’inhibition de l’agglutination

 
c-1) Principe :
 
Ce type de réaction permet de rechercher un antigène dans
les liquides biologiques.
 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

c) Réactions d’inhibition de l’agglutination

c-2) Procédure :
Le même antigène à rechercher est fixé sur des particules
tests. La première étape consiste à incuber les anticorps
spécifiques de l’antigène présent dans un liquide, puis on
rajoute les particules recouvertes avec le même antigène :
L’apparition d’une agglutination signifie que le liquide
biologique ne contient pas l’Ag recherché.
L’absence d’une agglutination signifie que le liquide
biologique contient l’Ag recherché (l’anticorps est adsorbé
par l’antigène libre en solution, il ne peut donc venir
agglutiner les particules recouvertes d’antigènes). 
 T I Agglutination
III) Différents types de réactions d’agglutination :

c) Réactions d’inhibition de l’agglutination