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La paroi cellulaire est l’une des particularités de la cellule végétale. Cette paroi leurs permet
d’acquérir une certaine rigidité essentielle au maintien d’une forte pression osmotique
intracellulaire.
Chez les plantes terrestres, la paroi végétale est essentiellement composée de polymères
glucidiques, cellulose (C) hémicellulose (HC) et pectine (P) et d’autres composées phénoliques
(lignine et subérine). De plus les parois renferment des produits azotés (protéines pariétales),
lipides (cutine) et minéraux (silice SiO2).
La paroi pecto-cellulosique est composée de 03 parties:
La lamelle moyenne est une membrane primitive pectique mitoyenne entre deux cellules,
développement des cellules végétales. Très hydrophile, elle est constituée de 25 à 30% de
cellulose, 30 à 65 % d’hémicellulose, 5 à 35 % de pectines et 0,5 à 5 % de protéines. Les
molécules de cellulose forment un réseau de micro-fibrilles enrobées dans une pâte faite
d’hémicelluloses liées à la protéine.
La paroi secondaire est située entre la membrane cytoplasmique et la paroi primaire. Elle
est de même composition que la paroi primaire, mais avec un réseau moins hydraté, moins
de substance matricielle et plus de cellulose. Elle est absente au niveau des ponctuations.
2. La cellulose
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La cellulose est un polymère du cellobiose qui n’est autre que le dimère du β-D-glucopyranose
liés en β-(1→4) dont la masse moléculaire varie entre 50 kDa et 2,5 10 6 Da soit de 300 à 15000
résidus de glucose.
Les macromolécules de cellulose associées forment des microfibrilles, qui elles-mêmes associées
en couches, forment les parois des fibres végétales. Il s'établit des liaisons hydrogène entre les
molécules de glucose des différentes chaînes. Le degré de polymérisation diffère énormément
selon l'origine de la cellulose.
Propriétés physiques :
o résistance mécanique identique à celle d’un fil de cuivre de même diamètre,
o déformable ce qui confère une certaine souplesse et élasticité à la membrane,
o perméabilité au gaz et à l’eau.
Propriétés chimiques :
o totalement insoluble dans la plupart des solvants, insoluble dans l'eau mais la
présence des fonctions hydroxylées lui donne un caractère hydrophile ce qui lui
permet de fixer les molécules d'eau et entraîne le gonflement de la cellulose.
o molécule hygrophile qui absorbe de l’eau sans être soluble,
o résistance aux attaques chimiques et enzymatique,
o biodégradation liée à la cellulase.
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La cellulose et ses dérivés sont utilisés dans l'industrie agroalimentaire. En tant qu'additifs
alimentaires, ils portent les codes de E460 à E466. La cellulose est aussi une importante matière
première industrielle. Elle sert :
modal… Ces fibres de cellulose artificielles sont de plus des précurseurs pour la
fabrication de fibres de carbone thermiquement isolantes utilisées comme renfort des
matériaux de protection thermique de l'industrie aérospatiale ;
o de produits divers : acétate de cellulose, cellophane, celluloïd, rhodoïd, collodion… ;
La séparation de la cellulose des autres constituants végétaux est une étape préalable dans la
préparation des pates cellulosiques industrielles. Lors de son extraction, la cellulose réagit
différemment à certaines actions chimiques. Il s’en suit que l’on obtient différents types de
cellulose suivant les procédés d’extraction mis en œuvre. On distingue trois types de cellulose ;
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HPC hydroxy- soluble dans l'eau Elle servira essentiellement à stabiliser les émulsions en
propylcellulose froide mais diminuant la tension superficielle
commence à
précipiter dès 40°C
MC méthyl solubles dans l'eau Ces éthers sont utilisés comme emballages solubles et
cellulose chaude et gélifient à comestibles et aussi comme emballage protecteur vis-à-
MHPCméthyl- partir de 60°C vis de l'eau (cacahuètes) et de l'oxygène (matière
hydroxy grasse).
propyl cellul
Le nitrate de Esters(R-O-NO2) La fabrication des explosifs et de verre des pare-brises des
cellulose voitures, des vernis et des textiles synthétiques. C'est aussi
un composé thermoplastique (modelable à chaud) utilisé
par exemple en remplacement de l'ivoire d'éléphant dans la
fabrication d'objets de luxe.
AC acétate de dans la fabrication des pellicules photographiques et des
cellulose. films.
3. Hémicelluloses
L’hémicellulose se trouve surtout dans l’enveloppe des graines (son de blé, d’orge ou de maïs)
dans les pailles des céréales, les rafles de mais, la peau des tubercules de betteraves et de pommes
de terre.
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Les hémicelluloses sont facilement hydrolysées par les acides, les bases diluées et l’eau
bouillante, mais insoluble dans les solvants organiques et la liqueur de schweitzer.
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4. Les pectines
Les substances pectiques sont présentes dans tous les végétaux, localisées dans la lamelle
moyenne et la paroi primaire des cellules où elles jouent le rôle de ciment intercellulaire. En
effet, il existe différentes natures chimiques de pectines dans la paroi cellulaire végétale :
Les protopectines : insolubles car liée aux autres composants.
Les acides pectiniques (pectines) : ce sont des acides polygalacturoniques, partiellement ou
entièrement estérifiés.
Les acides pectiques : qui sont essentiellement des acides polygalacturoniques non estérifiés.
Chimiquement, les pectines sont des polysaccharides anioniques ramifiés, se composant d’une
chaîne linéaire de molécules d’acide galacturonique liées les unes aux autres. Les pectines varient
selon l’origine botanique, un homogalacturonane composés essentiellement de chaînes d’acides
D - galacturonique liés en α (1 4), tandis qu’un rhamnogalacturonane (RG) représente la liaison
entre l’acide galacturonique et le rhamnose, ce dernier est suivi de chaînes d’arabinane et
d’arabinogalactane. Les xylogalacturonanes : sont des résidus de xyloses liés à l’acide
galacturonique.
En outre, ce sont essentiellement les propriétés gélifiantes des pectines qui sont à la base de leur
classification en deux catégories selon leur degré de méthylation:
Les pectines hautement méthylées H.M (High Methoxyl) : ce sont les pectines dont plus de
50% des groupements carboxyles sont estérifiés avec le méthanol.
Les pectines faiblement méthylées L.M (Low Methoxyl) : ce sont les pectines dont moins de
50% de groupements carboxyles sont estérifiés. Ce sont caractérisées par une gélification lente
qui nécessite la présence du calcium qui joue le rôle d’un agent de pontage
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En présence d’eau, les pectines augmentent de volume et prennent la consistance d’une gelée
ayant des propriétés laxatives et émollientes (ramollissant et relâchant les tissus).
Leur extraction par hydrolyse chimique conduit à l’apparition des fragments inégaux, chez les
fruits murs, la protopectine peut être convertie en acide pectiques, elle peut être aussi être
convertie par l’eau bouillante acidulée. La pectine est précipitée par les sels de fer et de plomb.
Elle est mise en évidence par le rouge de ruthénium en microscope photonique, en microscope
électronique après traitement par l’hydroxylamine et le chlorure ferrique.
-les zestes de fruits de divers Citrus (Rutacea) : citron, orange, pamplomousse ; les pectines
constituent alors les sous-produits de la fabrication des jus de fruits.
-les fruits de diverses Rosacées, en particulier du pommier (Pyrus malus) ; les pectines sont
extraites des marcs de pomme provenant de la fabrication du cidre.
Les autres sources ; les poires, les cerises, les groseilles et les coings, les graines de tournesol, la
carotte, l’écorce de betterave..
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Le procédé d’extraction est basé sur l’hydrolyse en milieu acide et chaud de la protopectine qui
se transforme en acide pectinique. Le jus obtenu est traité par de l’isopropanol, afin de précipiter
la pectine. Le coagulum, à l’aspect fibreux, est lavé, pressé, séché sous vide, puis broyé pour
obtenir une poudre fine . Les différentes étapes de la fabrication des pectines sont représentées
sur la figure.
En industrie agroalimentaire ; Les pectines ont été intégrées en industrie agroalimentaire comme
des additifs alimentaires ayant des propriétés gélifiantes, stabilisantes de boissons lactées ou
épaississantes…etc (Confitures, gelées, fourrages pâtissiers, gels de fruits pour bonbons, gomme
à mâcher…) et dans diverses d’autres domaine (colles, encre..)
En raison de leur capacité à absorber les toxines et de leur activité bactériostatique, elles sont
utilisées comme agent protecteur de la muqueuse digestive en cas d’affections gastro-intestinales,
de gastrites ou de diarrhées. Les pectines sont aussi utilisées pour freiner l’élimination trop rapide
de substances médicamenteuses (ex ; pénicilline retard, insuline retard) ou comme gélifiant dans
la préparation de certaines pommades.
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Elle est extraite des différents Astragalus. C'est un stabilisant des suspensions et émulsionnant.
C’est un hydrocolloide utilisé comme additif pour sa viscosité aux environs de la neutralité,dans
des produitS alimentaires comme les souces de types mayonnaise,des crèmes et desserts
glacées,,etc
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C. Le psyllium
Plantago psyllium ou Plantago arenaria. C'est une plante herbacée de la région méditerranéenne.
Partie utilisée : les graines, petites, ovales brunes et luisantes. Aspect de puce.
Mode d'emploi : une cuillère à soupe dans un demi-verre d'eau froide. Laisser gonfler pendant
une demi-heure mais de préférence plusieurs heures avant d'avaler le tout.
D. L'ispaghul
Plantago ovale. C'est une plante herbacée d'Inde et d'Egypte.
Partie utilisée : les graines, ovales
Mode d'emploi : à avaler après ou avant le repas avec de l'eau. L'ispaghul agit surtout comme
coupe faim.
Les mucilages trouvent leurs applications dans les produits de beauté (lotion pour les mains et les
cheveux) , en médecine (laxatifs et diuritéques) en pharmacie (émulsifiants)
et en industrie (épaississants, stabilisateurs d’émulsions, liants,,
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6. La lignine :
6.1. Structure : La lignine est une macromolécule de haut Poids Moléculaire, étroitement
associée aux polyosides pariétaux, se déposant dans la paroi secondaire de certaines cellules
végétales, conférant à celles-ci une résistance mécanique mais limitant leur élasticité. Elle est
formée par la copolymérisation (polymérisation oxidative) d’un ou de trois phényl-
propanoïdes (monolignols) qui proviennent eux-mêmes des acides aminés aromatiques:
phénylalanine et tyrosine. Les trois cycles aromatiques le plus souvent rencontrés sont les
monolignols suivants: alcools coniférylique, coumarylique et sinapirylique (ou sinapylique).
La lignification des tissus renforce la solidité de la paroi des végétaux et représente à cet effet
une forme de résistance contre les agressions (enzymatiques) par les insectes et les
nématodes. De plus, la lignine possède un pouvoir d’imperméabilisation des cellules, du fait
de son hydrophobicité.
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Remarque: La vanilline extraite de la gousse de vanille revient à plus de 20 fois plus que le
prix de ce même produit préparé artificiellement.
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7.3. La subérine
La subérine imprègne la paroi des cellules, la rendant imperméable.
La subérine rentre dans la constitution du suber qui présente lui-même une structure
lamellaire, additionnant une couche amorce de triglycéride et de cutine, avec une couche
monomoléculaire de cires.
La subérine est une molécule polymérique hydrophobe, imperméable aux gaz et étant un très
bon isolant thermique.
Les cellules imprégnées de subérine sont des cellules mortes, échanges au niveau de
perforations.
Les protéines contenues dans les feuilles sont localisées dans le cytoplasme, le stroma et les
thylacoïdes du chloroplaste où s'effectue la photosynthèse.
La teneur en protéines foliaires des végétaux est très variable. La méthode la plus appropriée,
pour le dosage de ces protéines est celle de Kjeldahl.
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Dans l'extrait protéique foliaire, il y a deux protéines majeures qui forment ensemble près de
la moitié des protéines totales:
Extraction artisanale
Les feuilles sont broyées puis pressées et le jus vert obtenu est chauffé à ébullition. Sous
l'effet de la chaleur les protéines coagulent : le produit pâteux obtenu se conserve mal, aussi
doit-il être consommé immédiatement. Le résidu fibreux est utilisable pour l'alimentation
animale. NB: Il peut y avoir des problèmes d’allergies si le chauffage est insuffisant.
Il faut veiller à ne pas intégrer des plantes toxiques.
Extraction industrielle
La production industrielle actuelle est uniquement appliquée à l’exploitation de la luzerne.
La luzerne est
1) Fauchée, hachée et chargée sur le champ. Elle est transportée à l'usine pour traitement
immédiat de façon à éviter la protéolyse enzymatique.
2) Elle est broyée et pressée: on recueille un jus vert qui contient environ 30 % de protéines.
3) Le jus est chauffé à 90°c par injection de vapeur pour précipiter les protéines.
4) Le coagulum, recueilli par centrifugation, est séché en lit fluidisé puis compacté en
granulés.
La luzerne représente, avec les tourteaux oléagineux et les graines de légumineuses, la source
végétale la plus utilisée pour l'obtention industrielle de protéines.
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Les saponines constituent un vaste groupe d’hétérosides très fréquents chez les végétaux. Ils
sont caractérisés par leurs propriétés tensioactives car ils se dissolvent dans l’eau en formant
des solutions moussantes.
La plante produit ces saponines pour se protéger contre les insectes et les maladies (bactéries,
champignons). Toutes les saponines sont fortement moussantes et constituent d'excellents
émulsifiants. Elles ont une autre propriété caractéristique : celle de libérer l'hémoglobine des
globules rouges, ce qui explique l'effet toxique de certaines d'entre elles, qui les rend
inconsommables. Elles peuvent également inhiber de nombreuses activités enzymatiques
(cholinéstérase, trypsine, …); Elles ont un effet sur le goût des aliments et la réduction de la
croissance par réduction de prise volontaire des aliments. De ce fait, elles présentent un risque
potentiel important d'effet antinutritionnel et doivent être supprimées des protéines foliaires.
A côté de leur utilisation traditionnelle dans les lessives et shampooings, certaines, telles la
diosgénine et l'hécogénine ont acquis une importance commerciale considérable, car elles sont
transformables par hémi-synthèse en hormones stéroïdes. Ces composés sont également
connus pour leur pouvoir hémolytique: ce qui justifie l'utilisation des saponosides du
Gypsophile (Gypsophila paniculata) dans les laboratoires d'analyse hématologique comme
réactif cytolytique pour les examens de numération (formule sanguine).
Parmi les nombreuses activités des saponosides, celles suscitant un intérêt en thérapeutique
concernent les activités cytotoxique, antitumorale (saponaire, lierre terrestre), antifongique et
immunomodulatrice. Depuis peu, les saponines de Quillaja saponaria (Rosaceae) sont
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utilisées comme adjuvants dans les vaccins à usage vétérinaire et comme constituants des
complexes immunostimulants.
Par ailleurs, en raison de leur ichtyotoxicité (toxicité vis-à-vis des animaux à sang froid), les
saponines sont depuis quelques années, utilisées pour leur effet molluscicide dans la
schistosomiase par traitement de l'eau infestée dans certains pays d'Afrique.
La plupart des alcaloïdes ont un gout amer, ce gout repousse tous les animaux y compris les
insectes. Leur toxicité aussi sert à la défense exemple : la nicotine du tabac qui est un poison
violent pour les insectes est utilisée comme un insecticide. Cependant, certains alcaloïdes sont
des antibiotiques qui agissent contre les infections microbiennes.
Les deux groupes de loin les plus importants sont représentés par les alcaloïdes
isoquinoléiques (plus de 1 500) et indoliques (plus de 700). Dans quelques cas, il s'agit
simplement de l'incorporation d'une molécule d'ammoniac (NH3) ou d'une amine simple (HO
- (CH2)2 - N (CH3)2) dans une architecture stéroïde ou terpénique. Parfois, il s'agit de
composées apparentés aux bases puriques des acides nucléiques (exemple: caféine,
théophylline). Mais dans la plupart des cas, il s'agit de produits de condensation des amines
provenant de la décarboxylation des acides aminés naturels (exemple: cocaïne, atropine,
nicotine, papavérine, colchicine). Quelques fois ces amines sont condensées avec un fragment
terpénique (exemple: réserpine, ajmaline, quinine).
Solubilité : leur solubilité dans les différents solvants varie en fonction du pH : sous forme
de bases, ils sont insolubles dans l'eau, mais solubles dans les solvants organiques non
polaires (benzène, chloroforme…) et polaires (alcools). Quant aux sels d'alcaloïdes, ils sont
solubles dans l'eau et les solvants organiques polaires mais insolubles dans les solvants
organiques apolaires.
Précipitation : ils précipitent en milieu aqueux légèrement acide dans les réactifs suivants :
solution neutre de mercuriiodure de potassium (précipité blanc jaunâtre), solution acide
d'iodobismuthite de potassium (précipité rouge orangé), solution d'iodure de potassium iodé
(précipité brun). Les alcaloïdes précipitent également avec les tanins, avec certains acides
(acide picrique) et avec les sels de métaux lourds (platine, tungstène…).
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– Alcaloïdes volatils entraînables par la vapeur d’eau: ils sont déplacés de leurs combinaisons
naturelles par une base fixe, directement à partir de la plante, puis entraînés par la vapeur
d’eau. Après condensation, ils se séparent de la partie aqueuse du distillat à laquelle ils ne
sont pas miscibles. Sont obtenues de la sorte la nicotine du tabac ou la spartéine du genêt.
– Alcaloïdes fixes: la plante est traitée par de l’eau ou un alcool en présence d’acide qui
entraîne les alcaloïdes sous forme de sels solubles. La solution extractive est séparée,
éventuellement concentrée, et alcalinisée par de la soude ou de l’ammoniaque qui libère les
alcaloïdes. Ceux-ci sont alors repris par un solvant organique non miscible à l’eau.
Les produits obtenus lors des extractions sont des mélanges qu’il importe de fractionner pour
obtenir les alcaloïdes à l’état pur. On opère par cristallisation progressive dans des solvants
adéquats, par extractions successives en milieu acide à l’aide de solutions de pH décroissant,
en pratiquant une séparation par contre-courant d’un solvant non miscible, et surtout par
chromatographie.
Les méthodes chromatographiques consistent à séparer les divers constituants d’un mélange
en fonction de leur affinité pour un adsorbant au sein d’un solvant choisi. On fait appel ici à la
chromatographie d’adsorption sur colonne (silice, alumine) avec sa variante, la
chromatographie liquide à haute performance (C.L.H.P.), aux diverses modalités de
chromatographie en couche mince (C.C.M.), à la chromatographie d’échange d’ions. Les
méthodes chromatographiques sont surtout du domaine du laboratoire et, en raison de leur
coût, assez peu utilisées dans l’industrie, qui préfère la cristallisation fractionnée.
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Les alcaloïdes sont doués à la fois de propriétés toxiques (même à très faibles doses 1 mg) et
médicamenteuses, isolés à partir des plantes ont souvent été utilisés comme précurseurs d’une
série de molécules d’intérêt pharmaceutique développés par modification chimique de la
molécule de base.
La nicotine est un des insecticides plus efficaces. Sa synthèse est stimulée par les blessures
induites par les herbivores.
La caféine, présente dans les graines de cacao, café, cola, thé et maté tue presque la totalité
des larves de Sphinx (Manduca sexta) en 24 heures. Son effet inhibiteur sur la
phosphodiesterase, un enzyme impliqué dans la signalisation par le cAMP.
Les alcaloïdes sont utilisés aussi comme antalgiques majeurs (morphine), des hypertenseurs
(caféine), ou anti-hypertenseurs (réserpine), antipaludéen (quinine), pour combattre l'excès
d'acide urique (colchicine), comme substance paralysante/stimulante (curare, caféine), comme
poisons (strychnine, nicotine), comme stupéfiants (cocaïne, mescaline), comme cholinergique
(pilocarpine) ou comme anticancéreux (vinblastine, vincristine)…
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La synthèse de ces molécules n'est pas exclusivement végétale: le squalène, par exemple, est
un terpène abondant chez le requin, le cholestérol est un terpénoïde caractéristique des
animaux et qui est retrouvé chez certaines algues.
Les terpènes commencent à s’évaporer lorsqu’ils entrent en contact avec l’air, en particulier
lorsqu’ils sont exposés au soleil et à des températures élevées. Pour cette raison, les plantes
sont plus aromatiques en début de journée que le soir.
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La transfusion sanguine:
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- L'utilisation du sang total dans le traitement des hémorragies date du début du XXème
siècle. L'application des techniques physico-chimiques d'isolement et de purification permet
de préparer des dérivés sanguins spécifiques adaptés à chaque situation. Les produits sanguins
labiles (PSL) sont les globules rouges, le plasma frais congelé, les plaquettes et rarement, les
globules blancs. Ces produits proviennent du don de sang de donneurs bénévoles. Ils sont
rigoureusement contrôlés et répondent à des normes obligatoires de sécurité et de qualité.
- La colle biologique, obtenue par concentration des facteurs de l'hémostase coagulable par la
thrombine. Son usage est réservé à des applications en chirurgie (plastique, dentaire,
osseuse..).
- Du fait de sa richesse en protéines, certains pays considère le sang comme une viande
liquide qu'ils valorisent conditionné dans des boudins noirs qui sont vendus cuits.
- L'albumine sérique bovine (ou SAB), est très employée dans le domaine de la recherche en
tant que témoin ou calibre dont le PM et /ou la concentration sont connue.
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Les immunoglobulines (polygamma) injectables par voie intraveineuse sont utilisées dans
les rares agammaglobulinémies congénitales et surtout dans le traitement des affections auto-
immunes (telles les thrombopénies idiopathiques).
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2. Le lactosérum
Selon le type de fromage ou de caséine produit et donc la coagulation employée acide, présure
ou mixte, on distingue deux types de lactosérum
a) Les protéines : elles représentent 17 % du total des matières azotées du lait. Elles ont une
meilleure valeur nutritionnelle, surtout liée à leur teneur en acides aminés essentiels, soufrés
et en lysine, en glutamine et en acides aminés à chaîne ramifiée (leucine, isoleucine et valine)
qui jouent plusieurs rôles dans le métabolisme musculaire.
La proportion des différentes protéines solubles dans le lactosérum est la suivante:
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- L' α-lactoglobuline : (20-25%) des protéines sériques de lait bovin et 40% du lait humain),
c’est pourquoi elle entre dans des formulations de diététique spécifiques comme le lait
maternisé, ou des formules pour les adultes et les sportifs, elle entre dans les préparations
spéciales régulatrices du sommeil et de l’appétit ainsi que dans les formulations destinées aux
personnes allergiques à la B-Lg du lait de vache, de masse moléculaire voisine de 14174 Da,
elle représente le facteur de régulation du système enzymatique de la lactose-synthétase, cette
protéine est riche en tryptophane et acides aminées soufrés et présente la capacité de fixer le
calcium de façon particulière, le Zn et autres ions métalliques.
- Les immunoglobulines (12 %) contiennent des IgG (80℅), IgA, IgM, IgE. Elles ont pour
principale rôle d’assurer la transmission de l’immunité passive de la mère au nouveau-né
- La sérumalbumine (7 %); Joue un rôle de transporteur de diverses molécules et ions, elle est
douée de propriétés anti oxydantes et immunostimulantes du fait de sa richesse en groupes
glutamylcystéines; activation de glutathion (rares dans les protéines alimentaires).
- La lactoferrine présente dans la lait de vache environ 0.3 g/L et 2à 4g/L dans la lait de
femme, très proche de la transferrine de sang, capable de fixer 2 fer, ce qui lui confère une
activité bactériostatique, de plus elle a des propriétés immunostimulante, anti thrombotique,
anti-inflammatoire, bifidogène et joue un rôle contre l’oxydation, elle est le plus souvent
obtenue avec le lacto-péroxydase et le couple est utilisé dans des produit de soins
buccodentaires.
- Les lysozymes permet d’hydrolyser les polysaccharides des parois des bactéries réagissant
positivement à la coloration de Gram comme Clostridium butyricum qui peut contaminer le
lait, son action est plus nette sur les bactéries réagissant négativement à la réaction de gram.
Utilisé dans la formulation de lait maternisé ainsi que dans l’industrie pharmaceutique comme
principe actif de traitement contre les infections de la cavité buccale et de système
respiratoire, ou encore, comme conservateur naturel.
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De façon générale, le lactosérum est utilisé, pour l'alimentation animale: où utilisé sous sa
forme liquide, il peut remplacer la totalité de l'eau de boisson et utilisé en poudre, il représente
un facteur d'appétence chez le jeune veau, l'incorporation exagérée présente un déséquilibre
nutritionnel ainsi que certains troubles digestifs: diarrhées, acidose, météorisation…etc.
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Couleur foncée ;
Goût et odeur désagréables.
Apres avoir terminé la production, les POU obtenus sont très diluées. Plusieurs techniques ont
été employées pour concentrer le produit ; la filtration ou la centrifugation. Apres avoir été
concentré, le produit est séché afin d'obtenir une poudre exempte de toute cellule vivante.
Différents traitements existent pour rendre les POU plus comestibles. Ces traitements
permettent de briser la paroi cellulaire, de façon à rendre les protéines cytoplasmiques plus
disponibles, ou alors favorisent l'extraction de ces protéines. Des traitements à la chaleur, aux
produits chimiques, aux enzymes ou simplement mécaniques sont utilisés.
Le contenu en acides nucléiques, qui est un grave problème en alimentation humaine,
augmente en fonction du taux de croissance, il est impératif de réduire leur taux trop élevé
par diverses techniques : enzymatiques (ribonucléases) chimiques (urée ou de soude
concentrées), les moyens physico-chimiques (choc thermique (70°c durant 80s) inactive les
protéases microbiennes et permet à la RNAase endogènes d’hydrolyser l’ARN), modification
des conditions de culture qui affecte la synthèse de l’ARN.
1.7. Applications :
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Les principales applications des POU sont dans l’alimentation animale et humaine, les POU
ont une application:
dans l'alimentation animale en tant que: l'engraissement des veaux, volailles, porcs et
poissons panure ;
dans le domaine des denrées alimentaires comme: transporteurs d'arômes, porteuses de
vitamines, émulsifiants et pour améliorer la valeur nutritive des produits de boulangerie,
dans les soupes, en prêt-à-servir des repas, dans les recettes de l'alimentation ;
dans le domaine technique en tant que: traitement du papier, traitement du cuir et comme
stabilisants de mousse.
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L'enzyme souhaitée produite peut être excrétée dans le milieu de culture (enzymes
extracellulaires) ou peut être présente dans les cellules (enzymes intracellulaires). Selon
l'exigence, l'enzyme commerciale peut être brute ou très purifiée. En outre, il peut être sous
forme solide ou liquide. Les étapes impliquées dans le traitement en aval, c'est-à-dire que les
étapes de récupération et de purification utilisées dépendront de la nature de l'enzyme et du
degré de pureté souhaité.
6.7.1. Extraction
Extraction désigne l’action de séparer une enzyme du composé dont elle fait partie. Cette
méthode consiste à libérer l’enzyme de la cellule par éclatement de la paroi ou de la
membrane cellulaire par des procédés physique ou chimique.
En général, le rétablissement d'une enzyme extracellulaire présente dans le bouillon est
relativement plus simple par rapport à une enzyme intracellulaire. Pour la libération
d'enzymes intracellulaires, des techniques spéciales sont nécessaires pour la perturbation
cellulaire. Les cellules microbiennes peuvent être décomposées par des moyens physiques
(sonication, haute pression, perles de verre) ou chimiques (solvants organiques). Les parois
cellulaires des bactéries peuvent être lysées par l'enzyme lysozyme. Pour les levures, on
utilise l'enzyme β-glucanase. Cependant, les méthodes enzymatiques coûtent cher.
6.7.2. La purification
La purification est un ensemble d’opérations visant à enlever toutes les impuretés d’un extrait
brut contenant l’enzyme d’intérêt. En principe, n'importe quelle méthode destinée au
fractionnement de protéines peut être employée pour la purification d'enzymes.
Les étapes de récupération et de purification seront les mêmes pour les enzymes
intracellulaires et extracellulaires, une fois que les cellules sont perturbées et que les enzymes
intracellulaires sont libérées. La considération la plus importante est de minimiser la perte de
l'activité enzymatique souhaitée.
Enlèvement des débris cellulaires: La filtration ou la centrifugation peuvent être utilisées
pour éliminer les débris cellulaires.
Enlèvement des acides nucléiques: Les acides nucléiques interfèrent avec la récupération et
la purification des enzymes. Ils peuvent être précipités et éliminés en ajoutant des substances
spécifiques comme les polyamines et la polyéthylèneimine.
Précipitation enzymatique: Les enzymes peuvent être précipitées en utilisant des sels
(sulfate d'ammonium) ou solvants organiques (isopropanol, éthanol et acétone). La
précipitation est avantageuse puisque l'enzyme précipitée peut être dissoute dans un volume
minimal pour concentrer l'enzyme.
Séparation par chromatographie: Il existe plusieurs techniques chromatographiques pour la
séparation et la purification des enzymes. Ceux-ci comprennent l'échange d'ions, l'exclusion
de taille, l'affinité et l'interaction hydrophobe. Parmi ceux-ci, la chromatographie d'échange
d'ions est la plus couramment utilisée pour la purification enzymatique.
6.7.3. Conservation
La forme concentrée de l'enzyme peut être obtenue par séchage. Cela peut se faire par des
évaporateurs ou des lyophilisateurs. L'enzyme séchée peut être emballée et commercialisée.
Pour certaines enzymes, la stabilité peut être obtenue en les gardant dans des suspensions de
sulfate d'ammonium.
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Toutes les enzymes utilisées dans les aliments ou les traitements médicaux doivent être de
pureté élevée. Ces enzymes doivent être totalement exemptes de substances toxiques, de
microorganismes nuisibles et ne doivent pas provoquer de réactions allergiques.
Exemple :
L'invertase [β-fructofuranosidases (EC.3.2.1.26)] est une enzyme largement utilisé dans
l'industrie des aliments et des boissons pour produire des bonbons, des chocolats, de l'acide
lactique et du glycérol, etc. L'invertase est produite par différentes souches
demicroorganismes, Saccharomyces cerevisiae est la souche primaire utilisée pour la
production d'Invertase commercialement.
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- Autres: Les vitamines peuvent aussi être adjointes aux milieux de culture dans les
fermenteurs, ou servir dans la fabrication des kits de réactifs de dosage enzymatique
nécessitant l'intervention de coenzymes.
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paroi par inhibition de la transpeptidase ce qui inhibe la synthèse de la paroi. Ceci empêche la
formation de nouvelles bactéries et peut entraîner la destruction de celles déjà existantes.
4.2.2. Déstabilisation de la membrane cellulaire
Les classes d'antibiotiques qui endommagent les membranes cellulaires des bactéries sont
spécifiques dans chaque groupe microbien en fonction des différents types de lipides dans
leurs membranes cellulaires. Par exemple Les polymyxines provoquent la désintégration de la
membrane cellulaire bactérienne en se liant efficacement à la couche lipidique.
4.2.3. Inhibition de la synthèse des acides nucléiques
L’inhibition de la synthèse des acides nucléiques est contraire à la survie des cellules
bactériennes. Les antibiotiques interfèrent avec la synthèse des acides nucléiques en bloquant
la réplication ou l'arrêt de la transcription. Le groupe des antibiotiques de quinolones, par
exemple empêche le processus de réplication de l'ADN chez les bactéries sensibles. La
perturbation d’activités enzymatique de l'ARN polymérase, empêche la synthèse de l'ARN.
4.2.4. Inhibition de la synthèse des protéines
Les protéines sont responsables de la composition structurale, des processus métaboliques et
physiologiques, et de la réponse à des conditions défavorables, entre autres rôles. Les
antibiotiques inhibent la synthèse de protéines en inhibant la phase d'allongement de la
traduction. Les inhibiteurs de ribosome 30S fonctionnent principalement en bloquant l'accès
des aminoacyl-tRNA au ribosome. Des exemples d'antibiotiques qui fonctionnent de cette
manière comprennent la tétracycline, la streptomycine, la spectinomycine, etc.
4.2.5. Blocage des voies métaboliques clés
Certains antibiotiques comme les sulfamides ont montré qu'ils limitent un substrat nécessaire
au métabolisme cellulaire des bactéries par entraînants des enzymes bactériennes à s'attacher à
l'antibiotique plutôt qu'au substrat normal. En particulier, les sulfamides agissent par
inhibition compétitive de dihydrofolatesynthase qui est nécessaire pour la synthèse de l'acide
folique dans les cellules bactériennes. L'acide folique est vital dans le métabolisme de l'acide
nucléique et des acides aminés.
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• L’ammonium est la meilleure source d’azote pour assurer une croissance rapide. On ajoute
des sels d’ammonium pour favoriser cette phase tout en surveillant la concentration pour
éviter la baisse de production liée à une concentration trop élevée. Si l’on choisit de
poursuivre l’alimentation par des sels d’ammonium, ils seront apportés en mode semi-continu,
généralement l’azote pour la production (3ème phase) sera apporté sous forme de sources
complexes ; exemple : farines de soja ou d’arachide riches en protéines ; l’addition de ces
éléments s’accompagne du contrôle de l’oxygénation.
Remarque
Les sources complexes remplissent de multiples fonctions. Ex: si les farines de soja servent de
source d’azote, elles apportent en même temps des acides nucléiques, des vitamines, des
oligo-éléments, des lipides, du soufre et du phosphore.
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