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Matricule : 18S189EN
Sous la direction de :
TATSADJIEU NGOUNE Léopold NGANOU DONKENG Nadège
DEDICACE
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
REMERCIEMENTS
Je rends grâce à Dieu, au seigneur Jésus-Christ qui m’ont accordé au long de ce
encadrement dans l’accomplissement de ce travail, pour leur rigueur, leur disponibilité, leurs
l’ENSAI de l’Université de Ngaoundéré pour toute l’attention que vous portez à notre
formation.
bien voulu m’accueillir dans son laboratoire pour le cadre de ce Master ainsi que pour ses
de Biotechnologie alimentaire de l’ENSAI qui n’a ménagé aucun effort pour mettre à ma
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
A vous mes enseignements du Département du Génie Alimentaire et Contrôle Qualité à savoir
les Professeurs TCHIEGANG, TATSADJIEU, MOHAMMADOU, MEZADJOU,
DESOBGO,
Mme GRE je vous dis de tout cœur merci pour vos nombreux conseils, pour toutes ces
connaissances, pour vos encouragements et surtout votre rigueur dans le travail à notre endroit
DJOUFFA, M. MOFFO, Mme. ESTHER, M. CALVIN recevez mes remerciements pour vos
A tous mes camarades de promotion (SAN, GP, CIE, IEAI) et amis, je vous dis
infiniment merci je préfère ne pas prendre le risque de citer tous ces nombreux noms de peur
d’en oublier car même les petits moments de sourire, de discussions que nous avons passés
A Sintia, Valère, Loïc, Ampère, Alex, Ghislaine, Cynthia, Leonel Obam je vous
remercie infiniment pour votre soutien moral qui m’a permis d’atteindre cet objectif tant
voulu.
Que tous ceux qui ont été impliqués de près ou de loin dans la réalisation de ce travail
trouvent ici l’expression de ma profonde gratitude : sans leur votre contribution, il m’aurait
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
REMERCIEMENTS................................................................................................................ii
Résume :....................................................................................................................................xi
Abstract:..................................................................................................................................xii
INTRODUCTION.....................................................................................................................1
1. Théorie......................................................................................................................7
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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1. Définition.......................................................................................................................12
a. Genre Penicillium.......................................................................................................18
b. Genre Aspergillus...................................................................................................21
c. Genre Fusarium..........................................................................................................23
a. Aflatoxine (AF)..............................................................................................................26
b. Citrinine.........................................................................................................................29
c. Ochratoxine A................................................................................................................29
I. Matériel.............................................................................................................................56
II. Méthodes...........................................................................................................................56
1. Echantillonnage..............................................................................................................56
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3. Analyses physico – chimiques..........................................................................................60
I. Analyse microbiologique.................................................................................................65
2. Isolement........................................................................................................................67
Conclusion...............................................................................................................................89
Références bibliographiques..................................................................................................91
Annexes.....................................................................................................................................A
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Tableau 25:Matrice de corrélation de Pearson présentant les corrélations des variables entre
elles...........................................................................................................................................88
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Résume :
Les produits de la pêche désignent l’ensemble des poissons, des mollusques et
crustacés provenant de l'activité de la pêche. Ils qui jouent un rôle important dans la sécurité
alimentaire car ils sont elle est l’une des sources de protéines et d’éléments nutritifs pour les
populations de nombreux pays. Pour les rendre disponible en toutes saisons, les poissons les
poissons sont généralement transformés pour pouvoir être conservés et stockés pendant de
longues périodes. Durant ces opérations, il peut y avoir contamination et développement des
moisissures capables d’altérer et conduire à l’accumulation des mycotoxines. Ceux-ci Ces
mycotoxines représentent un problème d’actualité et de santé publique au sein de la
communauté scientifique au vue de nombreux enjeux qui l’entourent. L’objectif de ce travail
est d’évaluer la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et Maga.
Les caractéristiques physico-chimiques, la fréquence de la contamination fongique, le
potentiel mycotoxinogènes des souches fongiques et les teneurs en mycotoxines (AFT, FB1,
CIT, OTA) ont été déterminés. Les résultats obtenus montrent de manière générale que les
paramètres physico-chimiques (activité de l’eau, couleur) varient significativement (P < 0,05)
lorsqu’on passe d’une ville à une autre. Au total, 143 moisissures potentiellement toxinogènes
ont été isolées et après identification, il ressort que 3 genres fongiques toxinogènes ont
contaminé les poissons fumés et séchés à savoir l’Aspergillus, le Fusarium et le Penicillium.
Les poissons transformés de la ville de Maga ont enregistré la plus forte contamination en
moisissures toxinogènes (23 isolats) suivi de Lagdo (22 isolats). Sur les 26 isolats
sélectionnés pour évaluer le potentiel mycotoxinogènes, à 25°C 4 souches de Maga à savoir
CfM5, CsM1, Mfm1, Msm1 et 4 souches de Lagdo parmi lesquels Syf1, CfL3, CsL2, TfL4
ont produit l’aflatoxine B1 tandis qu’a 30°C, 6 souches de Maga à savoir Sf1, Ss4, CfM5,
CsM1, Mfm1, Msm1 et 4 souches de Lagdo parmi lesquels Syf1, CfL3, CsL2, TfL4 et toutes
ces moisissures sont des Aspergillus flavus. Le dosage des mycotoxines par HPLC a révélé
une forte contamination en AFB1 Syf L 5,09µg/Kg à Lagdo et de Cf M 4,65µg/Kg à Maga.
De plus, on observe des teneurs élevés en OTA (Cf M 1,73µg/Kg) à Maga et en CIT (Cf M
1,09µg/Kg) toujours dans la ville de Maga. Les données obtenues après une analyse en
composante principale montrent que les paramètres physico-chimiques influencent fortement
les teneurs en mycotoxines de chaque ville.
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Abstract:
Fishery products refer to all the fish, molluscs and crustaceans from fishing activity that play
an important role in food security as it is one of the sources of protein and nutrients for fish.
Populations of many countries. To make fish available in all seasons. Fish are usually
processed so that they can be preserved and preserved for long periods of time. During these
operations there may be contamination and development of molds capable of altering and
leading to the accumulation of mycotoxins. These mycotoxins represent a current and public
health problem within the scientific community in view of the many issues surrounding it.
The objective of this work is to assess the mycotoxin contamination of dried and smoked fish
from Lagdo and Maga. The physicochemical characteristics, the frequency of fungal
contamination, the mycotoxinogenic potential of the fungal strains and the mycotoxin
contents (AFT, FB1, CIT, OTA) were determined. The results obtained generally show that
the physicochemical parameters (water activity, color) vary significantly (P <0.05) when
moving from one city to another. In total, 143 members were isolated and after identification
it appears that 3 fungal genera were contaminated by smoked and dried fish, namely
Aspergillus, Fusarium, Penicillium. Processed fish from the town of Maga recorded the
highest contamination with toxigenic molds (23 isolates) followed by Lagdo (22 isolates). Of
the 26 isolates selected to assess the mycotoxin potential, at 25 ° C 4 strains of Maga namely
CfM5, CsM1, Mfm1, Msm1 and 4 strains of Lagdo among which Syf1, CfL3, CsL2, TfL4
produced aflatoxin B1 while 'at 30 ° C, 6 strains of Maga namely Sf1, Ss4, CfM5, CsM1,
Mfm1, Msm1 and 4 strains of Lagdo among which Syf1, CfL3, CsL2, TfL4 and all its molds
are Aspergillus flavus. The mycotoxins assay by HPLC revealed a strong contamination of
AFB1 Syf L 5.09 μg / Kg at Lagdo and of Cf M 4.65 μg / Kg at Maga. In addition, high levels
of OTA (Cf M 1.73µg / Kg) are observed in Maga and CIT (Cf M 1.09µg / Kg) still in the
city of Maga. The data obtained after a principal component analysis show that the
physicochemical parameters strongly influence the mycotoxin contents of each city.
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Introduction
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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INTRODUCTION
La pêche et l'aquaculture constituent des sources de revenus et de moyens de
subsistance très importants dans le monde. Avec une production mondiale annuelle de 93,4
millions de tonnes pour la pêche et 73,8 millions de tonnes pour l'aquaculture, ces activités ils
contribuent à l’amélioration de la sécurité alimentaire et à une nutrition adéquate pour une
population mondiale qui devrait atteindre 9,7 milliards d’ici 2050 (Sokamte, 2019). La
consommation est passée de 123,8 millions de tonnes en 2009 à 146,3 millions de tonnes en
2014 (FAO, 2009 ; FAO, 2016). Cette augmentation est liée à l’expansion démographique,
l’augmentation des revenus, l’urbanisation et la réduction des pertes auparavant destinées aux
produits non alimentaires. En Afrique, la production est principalement constituée de poissons
et reste faible avec une valeur de 5,6 millions de tonnes représentant 6% à l’échelle mondiale.
Le poisson est une denrée alimentaire importante pour des millions de personnes et constitue
une source de protéines animales majeure et accessible aux ménages à faibles revenus et plus
précisément dans les pays en développement (Sokamte, 2019). Cette richesse nutritionnelle
ainsi que sa teneur en eau élevé fait de lui un aliment hautement périssable. La conservation
par le froid est la méthode la plus utilisée et valorisée, mais il se pose un problème d’accès au
réseau électrique pour toute la population sur tout l’étendue, de rupture intempestive de la
chaine de froid, un manque de moyen financier terme (FAO, 2009).
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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La production de mycotoxines varie avec plusieurs paramètres tant endogènes
(l’espèce ou la souche) qu’exogènes (humidité relative, température, pH, pression osmotique).
Par ailleurs, les études menées par ?? (Ndrianaivo, 2016) rapportent que le poisson
fumé/séché peut être stocké au moins pendant 2 mois sans subir de modifications notables,
qu’une humidité relative dépassant 70% favorise la prolifération des moisissures, ce qui s'est
produit pendant la saison des pluies. Les moisissures peuvent produire des mycotoxines
responsables d'intoxication alimentaire chez l'homme. L’Aspergillus spp est le plus fréquent
dans les poissons d’eau douce fumés-séchés du Nigéria (Ndrianaivo, 2016). D’autres espèces
comme le Fusarium spp, le Rhizopus spp et le Penicillium spp peuvent également infester les
poissons fumés. La présence d'un poisson moisi dans le lot peut affecter le lot tout entier. Les
spores des moisissures peuvent être apportées par les insectes infestant le poisson traité
(Ndrianaivo, 2016).
Au Cameroun la pêche est la 3ème activité rurale, après l'agriculture et l’élevage. Elle
représente un aspect culturel, socio-économique et entre dans les habitudes alimentaires des
populations des trois régions de la partie septentrionale Cameroun (Baba, 1985). La
consommation annuelle par habitant et l'apport protéique du poisson sont estimés à 13,6 kg et
35% respectivement. De même, des auteurs rapportent que les techniques de traitement du
poisson obtenues incluent entre autres le fumage et le séchage (Baba M, 1985). A la limite de
nos connaissances, la diversité fongique et la qualité sanitaire en ce qui concerne la teneur
mycotoxine des poissons fumés et séchés de cette partie du pays n’ont pas encore fait l’objet
d’étude. En plus, les données de la littérature décrites plus haut montrent que la flore fongique
ainsi que l’aptitude de production des mycotoxines varient significativement avec la
taxonomie microbienne, les facteurs biotiques, abiotiques et même le site géographique. D’où
l’objectif général de cette étude qui est d’évaluer la contamination en mycotoxine des
poissons séchés et fumés de quelques localités de de la partie septentrionale Cameroun. Plus
spécifiquement, il s’agira de :
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Hypothèse 2 : Les mycotoxines dans les poissons séchés et fumés du lac de Maga et de Lagdo
dépassent les normes admises dans les marchés internationaux.
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Revue de
Littérature
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Tableau 1: Production et utilisation des produits de pêche et de l’aquaculture dans le monde
Les macronutriments majeurs du muscle de poisson incluent les protéines et les lipides. Le
poisson est connu comme l’une des sources les plus importantes de protéines animales,
représentant environ 17 % au niveau mondial et dépassant les 50 % dans de nombreux pays
en voie de développement (FAO, 2016). En plus d’être une riche source de protéines, les
protéines du poisson sont faciles à digérer et sont dotées d’une grande valeur biologique, car
ils contiennent tous les acides aminés essentiels (FAO, 2016).
Les lipides constituent également des macronutriments clés dans la chair du poisson. Les
espèces de poisson d’importance commerciale ont été divisées en trois catégories en fonction
de leur teneur en lipides : espèces maigres, semi-grasses et grasses. Les espèces maigres ou à
faible teneur en matière grasse contiennent moins de 2 % de lipides, les poissons à teneur
moyenne ou modérée en lipides en contiennent (2-5 %), et les poissons gras en contiennent
plus
de 5 % et certaines en contiennent jusqu’à 15 %. Contrairement à la viande, les lipides des
produits de pêche ont une faible proportion en acide gras saturé, mais fournissent en grande
quantité des nutriments, tels que les acides gras polyinsaturés oméga-3 à longue chaîne,
comprenant l'acide α-linolénique (ALA ; 18:3 ω-3) et ses métabolites à chaîne plus longue:
l'acide eicosapentaénoïque (EPA ; 20:5 ω-3) et l'acide docosahexaénoïque (DHA; 22:6 ω-3).
Ces micronutriments offrent des avantages pour la santé humaine en matière de protection
contre les maladies cardiovasculaires (Mozaffarian, Micha, & Wallace, 2010). Ils favorisent
également le développement du cerveau et du système nerveux chez le fœtus et le nourrisson
(FAO, 2016).
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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II. Concepts d’altération
La détérioration d’un produit alimentaire est un terme utilisé pour décrire le fait que le
produit n’est plus comestible sur la base d’une évaluation sensorielle. La détérioration peut
survenir en raison d’un certain nombre de changements biochimiques ou microbiologiques.
Les réactions causées par les activités des enzymes endogènes du poisson et les activités
métaboliques des micro-organismes, contribuent également à l’altération (Ashie, Smith,
Simpson, & Haard, 1996).
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responsables de la saveur rance et du goût du poisson et des produits à base de poisson. De
plus, les acides gras libres et les produits de leur oxydation pourraient avoir un impact sur la
texture et la fonctionnalité des muscles en raison de leur capacité à interagir avec les protéines
myofibrillaires et à favoriser l’agrégation des protéines. La lipoxygénase et la peroxydase sont
des enzymes qui rendent disponible de l’oxygène au niveau des acides gras polyinsaturés et
les convertissent en hydroperoxydes chez les poissons, ce qui peut initier l’auto-oxydation des
acides gras.
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des systèmes alimentaires stériles (Chinivasagam, Bremner, Wood, & Nottingham, 1998 ;
Joffraud, Lerol, & Chevalier, 1998).
1. Théorie
Le fumage est une technique de transformation ancienne qui a longtemps été utilisée pour
conserver des aliments riches en protéines. De nos jours, le but principal du fumage a été
modifié principalement vers la qualité sensorielle des produits ainsi transformés, plutôt que
pour son effet conservateur (Sokamte, 2019). Le fumage est une opération peu coûteuse qui
augmente la variété ou la gamme de produits disponibles sur le marché, pour les
consommateurs et qui, pour les transformateurs, ajoute de la valeur aux aliments. Le fumage
est couramment appliqué au poisson et aux produits carnés, mais également à d’autres
catégories d’aliments, telles que le fromage et les champignons (Sokamte, 2019).
- Le fumage à froid, dans lequel le produit est aromatisé et coloré, mais pas cuit. Il est
généralement utilisé pour le saumon, les salamis, les harengs, les jambons et les fromages
spéciaux ;
- Le fumage à chaud des viandes et du poisson (hareng, anguille et certains types de saucisses,
par exemple) à une température allant de 60 à 80 °C, lequel permet de cuire les aliments et de
détruire de nombreux microorganismes contaminants. Pour les produits de la pêche fumés à
chaud, un processus thermique minimum de 30 min à 62,8 °C est requis par la FDA (2001).
Par conséquent, après avoir été fumés à chaud, les produits sont entièrement cuits et prêts à
être consommés. L’action conservatrice du fumage à chaud résulte d’un certain nombre de
facteurs, qui peuvent être résumés comme suit :
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- Déshydratation au cours de laquelle la teneur en eau est réduite et en conséquence, l’activité
de l’eau du produit se trouve également réduite ;
Le poisson est d’abord lavé avec de l’eau propre, puis écaillé, éviscéré et débarrassé
des parties impropres au fumage. Il est ensuite tranché ou fileté pour permettre une
pénétration uniforme de la chaleur et de la fumée dans chaque morceau. Avant le fumage, on
peut également faire mariner le poisson lavé, entier ou découpé, dans de la saumure. Il est
alors plongé dans une solution saturée à 70 – 80 % de sel (NaCl) pendant 15 à 30 minutes ou
dans une solution à 10 % maintenue à faible température (5 – 8 °C) durant une nuit (Werlich,
2001). Dans les régions où l’électricité fait défaut, la saumure peut être mélangée à de la glace
et conservée dans des boîtes isolantes ou en polystyrène. Il convient dans ce cas de préparer
une solution saturée à 20 % et, après dissolution complète du sel, d’y ajouter une quantité
égale de glace pilée. L’opération doit s’effectuer dans des conditions d’hygiène rigoureuses.
A cet effet, la glace doit être exempte de microorganismes et les boîtes doivent être nettoyées
quotidiennement. La saumure doit être changée pour chaque charge, et moins une fois par
jour. Le lendemain, le poisson est rincé et mis à l’ombre pendant une courte période, afin de
le sécher, et ensuite placé dans le four de fumage. Pendant toute la durée des opérations, le
poisson doit être protégé des insectes. En fonction de sa taille, il sera posé sur des claies ou
suspendu à des crochets ou à des broches. Le fumage du poisson ou de la viande est parfois
complété par des opérations de pré séchage ou de post séchage et/ou de salage. Les pays
tropicaux, notamment, on recourt à cette méthode pour prolonger la durée de conservation du
produit et lui une certaine saveur propre aux habitudes locales de consommation (Werlich,
2001).
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65 à 95 °C, est fumé en l’espace de 1 à 4 heures, voire plus, en fonction de sa taille, du type
de four et de la teneur finale en eau désirée. La température doit être élevée progressivement
pour permettre la formation d’une pellicule qui enveloppera le poisson en entier ou les
morceaux découpés. A défaut d’une telle précaution, le poisson se désintègre (s’il est posé sur
une claie) ou tombe dans le foyer (s’il est suspendu à des crochets). Le pré séchage du poisson
à l’ombre avant le fumage facilite la formation de cette pellicule. Le poisson peut ensuite être
placé dans le four de fumage préchauffé. La pellicule tend à accentuer l’aspect brillant obtenu
par le séjour dans la saumure. Au cœur des morceaux la température doit atteindre 65 °C
durant 30 minutes au moins afin de garantir la destruction des bactéries. Ce traitement
thermique provoque la coagulation des protéines et la cuisson du produit. Grâce à la réduction
de sa teneur en eau et à l’action antiseptiques des composantes de la fumée, le produit se
conserve de 6 à 8 jours s’il est stocké à une température de 5 °C environ.
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composés contenant du carbonyle sont impliqués dans les changements de texture dans les
aliments fumés causés par l’interaction avec les protéines et contribuent à la couleur dorée des
produits fumés dus à la réaction avec les acides aminés et à la formation de produits de la
réaction de Maillard (Varlet et al., 2007).
b. Valeur nutritionnelle
Le salage du produit avant le séchage n’est pas nécessaire, mais il est fortement
conseillé car il a de grands avantages (BREUIL, 1995). Le salage permet notamment de
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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freiner pendant le séchage le développement des microorganismes à la surface du produit et
d’éloigner les insectes et autres parasites (DICKO et al, 1990). Il ralentit donc la dégradation
du produit. Le sel donne un produit fini plus stable avec une durée de conservation plus
longue (BRIGITTE et al ,2005). En général, les petits poissons ne sont pas salés avant d’être
séchés. En revanche, les gros poissons doivent toujours être salés avant d’être séchés, sinon ils
s’altèrent avant la fin du processus de séchage. Le poisson doit être préparé de telle sorte que
le sel puisse pénétrer rapidement dans la chair et que l’eau puisse en sortir. Pour cela, on
amincit la chair et on agrandit la surface du produit le plus possible (KEITA, 2005).
Ecaillage : les poissons sont écaillés lorsqu’ils sont encore frais sur une natte au bord du
fleuve. On utilise pour cette opération des couteaux et des hachettes. Ces hachettes sont
surtout utilisées pour arracher les écailles des gros poissons.
Ouverture : cette opération est généralement menée comme pour le cas précédent sur une
vieille natte. Les petites espèces sont vidées par une incision faite au niveau de l’anus et Les
espèces de grande taille sont ouvertes par le dos au moyen d’une incision faite au couteau le
long de la colonne vertébrale et qui traverse la masse musculaire jusqu’à la paroi ventrale.
Etripage : l’étripage est réalisé à la main ou au couteau. Le péritoine et le sang extra versé le
long de la colonne vertébrale sont grattés au couteau ; les intestins sont recueillis suivant les
espèces dans une marmite.
Salage : pour le salage, Il faut que les poissons soient ouverts en deux. Si la chair est
épaisse, on pratique des incisions pour permettre au sel de bien pénétrer. Il faut 30 à 35 kg de
sel pour 100 kg de poisson nettoyé.
Séchage : le séchage se fait dans un endroit dégagé, le poisson est posé à plat et exposé
directement aux rayons solaires. Les aires de séchage varient d’un campement à l’autre. Le
poisson est déposé sur : - la litière de paille ; - la vieille natte ; - sur des toits
Les poissons sont déposés côté chair vers le haut pendant la journée. La nuit, les poissons
les plus gros sont retournés. La durée du stockage est fonction de la température extérieure, de
l’hygrométrie et de l’espèce de poisson. En saison chaude et sèche les espèces de petite et
moyenne taille sèchent au terme de cinq à huit jours. Le séchage des poissons de grande taille
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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peuvent aller jusqu’à deux semaines ou plus. Le poisson perd environ les trois quarts de son
poids (DIONE, 2003).
Cette méthode est utilisée au nord à cause des conditions atmosphériques favorables:
région chaude et ensoleillée et faible hygrométrie et en plus de ceci s’ajoute les mauvaises
conditions d'hygiène dans le processus de la transformation, ainsi que le degré insuffisant de
séchage et le fait que les commerçants essaient de vendre le poisson d'abord frais et de ne
fumer que les poissons invendus, exposent ces produits aux infestations par les insectes
(asticots de mouches, dermestes, etc.) (Sokamte, 2019).
1. Définition
Les micromycètes sont des champignons microscopiques regroupant les levures et les
champignons filamenteux ou moisissures. Ce sont des microorganismes eucaryotes
ubiquitaires et très répandus dans la nature, notamment au niveau des végétaux en
décomposition caractérisés par la présence d’une membrane nucléaire et de mitochondries
(LECELLIER, 2013).
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Les champignons filamenteux sont hétérotrophes, et plus particulièrement absorbotrophes
puisqu’ils absorbent les éléments, digérés de manière extracellulaire, au travers de leur
appareil végétatif présentant une perméabilité pariétale. Les champignons filamenteux ne
peuvent synthétiser de matière organique à par tir du gaz carbonique atmosphérique. En effet,
ils sont incapables d’assurer la photosynthèse. Une source de carbone organique est donc
nécessaire à leur développement. Ils synthétisent leurs propres nutriments à partir de l’eau et
des éléments nutritifs et minéraux qu’ils puisent dans leur environnement. Il joue un rôle
important dans le recyclage des matières organiques en puisant leur énergie à partir de ces
sources carbonées externes (LECELLIER, 2013).
Les moisissures sont composé d’un appareil végétatif appelé thalle. Il est composé de
filaments ou hyphes enchevêtrés les uns par rapport aux autres, et l’ensemble des hyphes
constituent un réseau appelé mycélium. Les hyphes ont un diamètre compris entre 2 et 15 µm
et sont plus ou moins ramifiés, ils sont diffus, tubulaires et fins. Les cloisons, appelées septa
possèdent des perforations assurant la communication entre les cellules. Les caractéristiques
morphologiques de ces microorganismes sont liées à leur substrat nutritif. La colonisation du
substrat est réalisée par extension et ramification des hyphes. (LECELLIER, 2013)
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
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Les moisissures possèdent une paroi constituée essentiellement de polysaccharides, de
glycoprotéines et de mannoprotéines. Les polysaccharides sont majoritairement la chitine,
polymère de molécules de N-acétylglucosamine liées entre elles par une liaison de type β-1,4,
et les glucanes, polymères de molécules de D-glucose liées entre elles par des liaisons β. Ces
deux polysaccharides assurent la protection des moisissures vis-à-vis des agressions du milieu
extérieur. La chitine joue un rôle dans la rigidité de la paroi cellulaire, les glycoprotéines
jouent un rôle dans l’adhérence et les mannoprotéines forment une matrice autour de la paroi
(lecellier, 2013)
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
produites en grande quantité par des structures spécialisées développées à partir du mycélium.
Leur diamètre varie de 2 à 250 µm. Il existe différentes formes de reproduction asexuée et
différents types de spores. Les spores peuvent être le résultat de la fragmentation. Dans ce cas,
un nouvel organisme se développe à partir d'un fragment parent de mycélium (arthrospores).
Les spores peuvent aussi être produites de manière endogène à l’intérieur du sporocyste
(sporocystiospores), ou de manière exogène en continu à l’extrémité des structures
spécialisées appelées phialides (conidiospores). Ensuite, les spores se détachent du mycélium
sous l’effet d’un petit choc mécanique, d’un frôlement ou d’un courant d’air. Il existe
différents modes de propagation des spores. Les spores appelées gloeiospores sont véhiculées
sur un nouveau substrat soit par contact, soit par des insectes ou soit par l’eau. Ces spores
présentent une paroi épaisse et humide leur permettant de rester collées entre elles par un
mucus et de former ainsi des amas difficilement transportables par l’air. Les spores appelées
xérospores sont dissociables et légères leur permettant d’être facilement dispersées par l’air.
Après propagation et lorsque les spores se sont déposées sur un nouveau substrat,
celles-ci peuvent rester inertes tant que l’environnement n’est pas favorable à leur
développement. Ce
n’est que lorsque les conditions environnementales deviennent favorables, qu’elles « germent
» comme des graines et émettent du mycélium.
Figure 3: Les différents modes de sporulation et les différents types de spores associées.
La reproduction sexuée se base sur la fusion de deux gamètes haploïdes (n) donnant un
zygote diploïde (2n). Une structure (+) à n chromosomes rencontre un autre structure (-) et la
fusion des cytoplasmes donne naissance à un nouveau mycélium à 2n chromosomes. Il existe
différents modes de fécondation en fonction des champignons: planogamie (fusion de gamètes
complémentaires et flagellés), oogamie-siphonogamie (fécondation des gamètes femelles dans
le sporocyste femelle par des gamètes flagellés provenant des gamétocystes mâles par
l’intermédiaire d’un siphon), siphonogamie (accolement du gamétocyste mâle non flagellé au
gamétocyste femelle puis émission d’un siphon, il n’y a pas de production de gamète flagellé
15
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
mâle), trichogamie (fusion des parois du gamète mâle non flagellé appelé spermatie et de
l’organe femelle appelé ascogone puis injection du noyau mâle), cystogamie (émission d’un
diverticule par deux mycélia compatibles, accolement des deux diverticules et production
d’une cloison appelée gamétocyste permettant le mélange des cytoplasmes) et la somatogamie
(fusion de deux mycélia compatibles).
- Analyse macroscopique
Lors de l’analyse macroscopique des colonies obtenues après culture des champignons
filamenteux, plusieurs aspects de l’appareil végétatif sont observés :
17
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
La présence d’un pigment diffusant dans la gélose ainsi que certains paramètres telle la
vitesse de la pousse des colonies ou la température de développement peuvent être de bons
indicateurs pour l’identification d’une moisissure.
- Analyse microscopique
- le thalle végétatif : septé (diamètre étroit et régulier de 2 à 5 µm) ou siphonné (filaments peu
ou pas ramifiés, diamètre large et irrégulier de 5 à 15 µm), paroi pigmentée (mélanisée) ou
non (hyaline).
- les organes de fructifications : présence ou non d’organes protecteurs des conidies, modes de
formation des conidies (issues directement du thalle, solitaires (aleuriospores) ou en chaines
(arthrospores), ou produites par bourgeonnement et regroupées soit en grappes, en masse, en
têtes ou en chaînes basipètes ou acropètes), modes d’implantation des cellules conidiogènes
[indifférenciée ou peu indifférenciée, différenciées (sur le filament végétatif, porté sur les
conidiophores dispersés ou groupés)].
a. Genre Penicillium
Le genre Penicillium comprend entre 150 et 300 espèces, réparties en quatre sous-genres
appartenant à la division des Deutéromycètes. Les formes téléomorphes de certaines
d’entre elles sont connues et appartiennent à l’embranchement des Ascomycètes dont les
genres les plus représentatifs sont Eupenicillium et Talaromyces (Gauthier, 2016)
Les colonies présentent un aspect duveteux voire poudreux, de couleur vert-de-gris et,
plus rarement, blanche. Morphologiquement, les individus du genre Penicillium se distinguent
18
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
par leur organisation en pinceau (Penicillius en latin). Le thalle cloisonné porte les
conidiophores, simples ou ramifiés, se terminant par un pénicille. Les conidiophores peuvent
être groupés en faisceaux lâches ou rassemblés en corémies (colonne de conidiophores). Les
phialides (cellules conidiogènes) sont disposées en verticilles à l’extrémité des conidiophores
(figure 5). Les phialides donnent naissance aux spores qui se positionnent alors en chaînes.
(Gauthier, 2016)
19
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Exemple : Penicillium funiculosum, Penicillium purpurogenum.
- Penicillium quadri verticillé : cette disposition est plutôt rare et se distingue par trois rangées
de métules insérées sur les conidiophores
Habitat
Intérêt
20
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Les espèces de Penicillium étant les moisissures les plus répandues dans le milieu
intérieur, de nombreuses pathologies leurs sont associées. Elles peuvent être causées par le
champignon lui-même ou par les toxines qu’il produit. Les infections sont habituellement
provoquées par l’inhalation de spores et se rapportent donc le plus souvent aux voies
respiratoires inférieures et supérieures.(Gauthier, 2016)
b. Genre Aspergillus
Le genre Aspergillus est classé dans la division des Deutéromycètes. De même que pour
les Penicillia, certaines formes sexuées d’Aspergillus spp sont connues et appartiennent à la
division des Ascomycètes, dont les genres les plus notables sont Eurotium et Emericella.
Environ 180 espèces, réparties en 18 groupes, composent le genre Aspergillus. Sur ces 180
espèces, une vingtaine est pathogène pour l’Homme et l’animal. (Gauthier, 2016)
21
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
tête aspergillaire » (figure 7). Les spores sont insérées en chaîne sur les phialides. Elles sont
unicellulaires, de forme globuleuse, ou elliptique, et de couleurs variables (Gauthier, 2016).
Habitat
Intérêt
De nombreuses espèces d’Aspergillus sont connues pour leur disposition à produire des
toxines fongiques responsables de pathologies chez l’Homme et l’animal :
22
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Fumitremorgine A et C, Gliotoxine
Aspergillus niger Malformine, Naftoquinone
Aspergillus ochraceus Acide kojique, Ochratoxines, Acide pénicillique,
Acide sécalonique A
Aspergillus oryzae Acide cyclopiazonique, Acide kojique
Aspergillus parasiticus Aflatoxines B1 et B2, G1 et G2, Acide aspergillique
Acide kojique
Aspergillus terreus Citrinine, Patuline, Territrem, Terréine, Terrétonine
Aspergillus versicolor Stérigmatocystine
Aspergillus sydowii Stérigmatocystine, Griséofulvine
Aspergillus candidus Candiduline
Quelques espèces d’Aspergillus sont responsables d’infections opportunistes, connues
sous le nom d’aspergilloses. Elles apparaissent préférentiellement chez les sujets fragiles
contractant par exemple des broncho-pneumopathies chroniques obstructives (BPCO), des
emphysèmes, des cancers broncho-pulmonaires… ou chez les patients soumis à des
traitements immunosuppresseurs (corticothérapie, chimiothérapie) (Gauthier, 2016).
c. Genre Fusarium
Les Fusaria sont des champignons filamenteux saprophytes appartenant aux
Deutéromycètes. Certaines formes sexuées (Gibberella, Nectria) sont connues et rattachées à
l’embranchement des Ascomycètes. C’est un genre qui comprend entre 50 et 100 espèces
23
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
anamorphes. Le genre Fusarium tire son nom du latin « fusus » qui signifie fuseau, en
référence à la forme des conidies (Gauthier, 2016).
Les microconidies : elles sont de petite taille et peuvent être uni- ou bicellulaires. Elles
sont de différentes formes : fusiformes, ovoïdes, cylindriques, solitaires ou groupées.
On peut citer en exemple Fusarium verticillioides .
Les Fusaria sont cosmopolites, on les retrouve dans toutes les régions du monde, des
régions tropicales et désertiques aux régions tempérées, leur température idéale de croissance
24
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
étant située entre 22 et 37°C. Du fait de l’existence de chlamydospores chez certaines espèces,
la conservation du mycélium dans le sol et sa dissémination sont facilitées.(Gauthier, 2016)
Intérêt
Chez l’Homme, les effets de Fusarium spp sont divers. Quelques espèces sont à l’origine
d’infections systémiques, d’autres sont impliquées dans des kératites, des allergies, dans des
mycoses unguéales ou des otomycoses. Les patients immunodéprimés (diabétiques, grands
brûlés) sont des cibles privilégiées de ces champignons opportunistes. Fusarium
verticillioides est responsable de fusarioses disséminées chez les personnes atteintes par le
VIH (Gauthier, 2016).
25
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
milliers de molécules toxiques ont été identifiées chez les champignons mais seule une
vingtaine de familles posent des problèmes en nutrition humaine ou animale (Cahagnier et al.,
1998). L'origine chimique des mycotoxines est très diverses certaines dérivent, des acides
aminés (alcaloïdes de l'ergot, acide aspergillique, acide cyclopiazonique, slaframine,
gliotoxine, roquefortine, sporodesmine), des polycétoacides (aflatoxines, ochratoxine,
patuline, citrinine. acide pénicillique, stérigmatocystine, zéaralénone), des dérivés terpéniques
(diacétoxyscirpénol, fusarénone, désoxynivalénol, roridines, toxine T-2, verrucarine) ou
encore des dérivés d’acides gras (fumonisines, alternariol) (Pfohl-Leszkowicz, 1999). Les
mycotoxines sont produites dans les matières alimentaires, leur décontamination est très
difficile. Ces molécules ne sont pas détruites au cours d’un stockage prolongé et sont souvent
résistantes aux traitements thermiques ou chimiques (Langseth et al., 1993 ; Cahagnier et al.,
1998). La contamination des moisissures sur les aliments ne signifie pas obligatoirement la
présence de mycotoxines. La production des mycotoxines peut s’effectuer depuis le champ
jusqu’à l’assiette. Cependant, le type de mycotoxines contaminant les aliments ainsi que la
quantité de mycotoxine produite dépendent de plusieurs éléments comme les espèces
fongiques, les conditions écologiques dans lesquelles les champignons se développent. Il
dépend également de la stabilité de ces toxines dans le milieu alimentaire. Les céréales (maïs,
manioc, riz) consommées dans les régions tropicales sont souvent contaminées par des
mycotoxines produites par des moisissures du genre Apergillus ou Penicillium. Parmi les
mycotoxines connues, les Aflatoxines sont des substances hautement toxiques car elles sont
cancérogènes et tératogènes, provoquant des cancers hépatiques et extra hépatiques humains
(IARC, 1993; Massey et al., 1995; Castegnaro & Pfohl-Leszkowicz, 1999; Hussein et al.,
2001; INSPQ, 2002).
26
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
a. Aflatoxine (AF)
C’est en 1960 que, pour la première fois, a été établie la relation entre une intoxication
dans un élevage de dindons et la présence d'une moisissure (Aspergillus flavus) parasitant les
arachides. Ce sont les Anglais qui ont isolé une des molécules responsables, l'AF (Adams et
al. 2002 ; Chapeland-Leclerc et al., 2005). La pénétration dans l’organisme de l’AF peut avoir
lieu par voie orale et trachéale. L’absorption est rapide et s’effectue au niveau de l’intestin
grêle dans la partie duodénale. Pour l’homme, les suggestions d’une relation entre des
nourritures fortement contaminées en AFs et certaines maladies sont plus récentes. Les
intoxications aiguës, potentiellement liées à des consommations d’AFs, ont été répertoriées
par Hall &Wild 1994) et Wild & Hall (1996). La voie de biosynthèse des AFs est présentée
dans la figure 9.
27
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
En 1971, on a prouvé l’activité cancérogène des AFs chez l’animal. En 1987, les AFs
ont été classés dans le groupe I (produits cancérogènes pour l’homme) par l’IARC
(Castegnaro, 1999). L’interaction ADN-toxine est le point clef dans le développement du
processus de cancérogènese. Sur la figure 11 sont présentés des adduits d’AF sur l’ADN
(Pfohl-Leszkowicz, 1999).
Comme beaucoup de métabolites secondaires, les AFs sont une famille de composés
relativement proches, le plus abondant et le plus toxique est l’AFB1 (Adams et al., 2002). Les
propriétés physiques des AFs sont présentées dans le tableau 5 (Cole et al., 2003a).
28
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
b. Citrinine
La Citrinine (CIT) a été décrite en 1931 comme pouvant être utilisée comme un
antibiotique, mais finalement rejetée à cause de sa toxicité (Adams et al., 2002). La CIT est un
métabolite secondaire toxique, tout d’abord isolé de P. citrinum (Hetherington, 1931). Elle est
aussi produite par d’autres espèces de Penicillium (Ei-Banna et al., 1987), d’Aspergillus
(Kurata, 1990). La contamination par la CIT est observée dans divers aliments à base de
céréales (maïs, blé, orge, riz, fruits, produits de céréales…) (Janardhana et al., 1999 ; Comerio
et al., 1998 ; Abramson et al., 1999 ; Aziz, 2002 ; Meister, 2004). Caractères physico-
chimiques : La Citrinine [C13H14O5 : acide 4,6-dihydro- 8-hydroxy- 3,4,5- tri méthyle6-oxo
-3H-2-benzopyran- 7 carboxylique] est un composé acide jaune- citron dont l’absorption son
spectre varie entre à 250 nm et 333 nm (dans le méthanol). Son point de fusion est à 172°C.
Elle est peu soluble dans l’eau, mais soluble dans des solutions d’hydroxyde de sodium,
carbonate de sodium, ou acétate de sodium ; dans le méthanol, l’acétonitrile, l’éthanol et la
plupart des solvants organiques polaires (Deshpande, 2002). La CIT cristallisée sous deux
formes tautomeriques p-quinone et o-quinone (Figure 12).
29
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
c. Ochratoxine A
L’ochratoxine A (OTA) a été découverte pour la première fois chez A. ochraceus (Van der
Merwe et al., 1965). Elle est produite par deux genres fongiques : Aspergillus (A. ochraceus,
A. cabonarius, A. niger, etc.) et Penicillium (P. verrucosum, P. nordicum, etc.). Le genre
Aspergilllus est bien adapté pour les climats chauds alors que Penicillium se développe bien
dans les climats tempérés. C’est pour cette raison que la présence d’OTA a été détecté dans de
nombreux produits agricoles de différentes régions du monde (Smith et al., 1994). La strucure
chimique de l’OTA est montrée dans la figure 16. Elle s’agit de 7–carboxy–5–chloro–8–
hydroxy-3,4dihydro-3R-méthylisocoumarine-7-L-βphénylalanine.
Il existe d’autres ochratoxines comme l’OTB qui est le dérivé non chloré de l’OTA et
l’OTC qui est son ester éthylique. Structurellement les trois ochratoxines diffèrent très
légèrement les unes des autres, cependant ces différences ont des effets marqués sur leur
potentiel toxique respectif. L'OTA est la plus répandue. Elle est plus toxique que l’OTB, mais
moins que l’OTC. Leurs structures sont présentées dans la figure 13 (Cole et al., 2003).
L’OTA est toxique pour l’homme et l’animal. Elle est potentiellement néphrotoxique
chez toutes les espèces testées, à l’exception des ruminants adultes. Les normes d’OTA
tolérées par les pays européens dans les produits alimentaires ont été fixées à 3 μg/kg dans les
céréales transformés, 5 μg/kg dans les céréales brutes, 5 μg/kg dans les grains de café, 2 μg/l
dans le vin et le jus de raisin (Olsen et al., 2003, Règlement (CE) N° 1881/2006).
30
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Figure 14: Dérivés métaboliques de l'OTA (d'après Pfohl-Leszkowicz & Manderville, 2006).
31
Matériel et
Méthodes
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
I. Matériel
Plusieurs types de poissons séchés et fumés ont été échantillonnés dans les marchés
avoisinant le lac lagdo, arrondissement de la Bénoué, qui est une commune rurale de la région
du Nord au Cameroun. Cette localité est connue pour le lac de barrage de Lagdo dont il tient
son nom et qui est aussi la principale source d'approvisionnement en poisson de toute la
région du Nord. Le lac maga, par contre, assure l’irrigation de la région et permet la culture
du riz. Particulièrement poissonneux, on y pêche la carpe, le silure, le poisson ballon et le
capitaine.
II. Méthodes
1. Echantillonnage
Cinq (05) échantillons de poissons fumés et séchés d’espèce différente ont été choisis au
hasard sur les comptoirs des commerçants. Ces poissons ont été introduits de manière
aseptique dans des contenants stériles, stockés dans une glacière et conservés à 4°C au
préalable, puis transportés au laboratoire pour analyse.
56
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
2. Analyse microbiologique :
Pour effectuer cette analyse nous devons au préalable préparer notre solution mère et
effectuer des séries de dilutions
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
1150C. Nous allons par la suite couler le milieu de culture dans 72 boîtes de Pétri soit un total
de 1500 ml.
Analyse macroscopique
Lors de l’analyse macroscopique des colonies obtenues après culture des champignons
filamenteux, plusieurs aspects de l’appareil végétatif sont observés :
La présence d’un pigment diffusant dans la gélose ainsi que certains paramètres telle la
vitesse de la pousse des colonies ou la température de développement peuvent être de bons
indicateurs pour l’identification d’une moisissure.
Analyse microscopique
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Lors de l’analyse microscopique des colonies, plusieurs structures des champignons
filamenteux sont observées comme l’appareil végétatif, les organes de fructification et les
spores :
- le thalle végétatif : septé (diamètre étroit et régulier de 2 à 5 µm) ou siphonné (filaments peu
ou pas ramifiés, diamètre large et irrégulier de 5 à 15 µm), paroi pigmentée (mélanisée) ou
non (hyaline).
- les organes de fructifications: présence ou non d’organes protecteurs des conidies, modes de
formation des conidies (issues directement du thalle, solitaires (aleuriospores) ou en chaines
(arthrospores), ou produites par bourgeonnement et regroupées soit en grappes, en masse, en
têtes ou en chaînes basipètes ou acropètes), modes d’implantation des cellules conidiogènes
[indifférenciée ou peu indifférenciée, différenciées (sur le filament végétatif, porté sur les
conidiophores dispersés ou groupés)].
Comme présenté dans la partie les généralités, quelques moisissures sont capables de
produire plus d'une mycotoxine et quelques mycotoxines sont produites par plus d’une espèce
fongique. Il y a plusieurs facteurs qui affectent la formation de mycotoxines. Ceci représente
une difficulté pour déterminer toutes les moisissures productrices de mycotoxines dans les
échantillons. Le travail réalisé à a consisté à sélectionner des souches productrices des
mycotoxines telles qu’Aspergillus, penicillium, fusarium, etc…
Ces moisissures peuvent être identifiées sur les milieux de cultures spécifiques tels que les
milieux DG18, MEA, CYA, CA et YES dont la composition se trouve dans l’annexe.
59
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
2.7 Extraction des mycotoxines
Les souches sont cultivées sur les milieux gélosés DG18, MEA, CYA et CA pendant 7
jours, la fluorescence émise sous l’UV est détectée (Lin et al, 1976, Davis et al, 1987, Abarca
et al, 1994, Dyer et al, 1994).
Les toxines : AFB1, CIT et OTA sont extraites à partir d’une colonie et purifiées pour analyse
en HPLC. Les mycotoxines sont extraites avec 30 ml d’une solution « acétonitrile – solution
de chlorure de potassium 4% (9 :1) à pH 1,5 » à partir d’une colonie par gélose. Le mélange
est agité sur un agitateur orbital pendant 20 minutes. Ensuite, l’extrait est filtré sous vide sur
papier Whatman No. 4.
Trois creusets vides ont été séchés à l’étuve durant 35 min à 105 ± 2 °C, puis tarés
après refroidissement dans un dessiccateur. 10g de poisson séché et fumés obtenu de
60
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
différentes régions du nord-cameroun ont été pesés dans chacun des creusets, puis placés à
l’étuve à 105°C pendant 24h jusqu’à poids constant de l’échantillon
L’analyse a été faite en triplicate et la teneur en eau des échantillons a été calculée
selon la formule suivante :
Avec :
61
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
ce système, L* représente la brillance ou luminance, a* la balance vert-rouge et b* la balance
bleu jaune. Une valeur positive de a* et b* correspond à un mélange de rouge et de jaune dont
l'intensité relative dépend de leurs valeurs
Les mesures des paramètres de couleur L*, a*, b* sont effectuées sur les poissons
fumés et séchés à l’aide du colorimètre. Après une calibration de l'appareil avec une plaque
blanche fournie avec cet appareil, la cellule de l'appareil est directement appliquée sur le
bouchon contenant un morceau d’échantillon. Les mesures sont réalisées et les valeurs de L*
a* b* sont relevées sur le moniteur. L'indice de brunissement est déterminé selon les
équations suivantes:
62
Résultats et
Discussions
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Au total nous avons échantillonné 192 poissons fumés et séchés repartis selon le
Tableau 6 suivant :
I. Analyse microbiologique
1. Dosage des mycotoxines dans les échantillons de poissons fumés et séchés
65
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
NB : Les valeurs des résultats obtenues pour chaque analyse sont les moyennes de
trois essais successifs pour le même échantillon. La différence des résultats obtenus au bout
de chaque essai est matérialisée ici par la grandeur de la valeur de l’écart-type associé à la
valeur concernée. Les moyennes ± écart type dans la même colonne ayant la même lettre ne
sont pas significativement différentes (P<0,05 ; n=3).
Dans les deux villes on note la présence simultanée dans certains échantillons de
l’AFB1 et de l’OTA et la citrinine notamment dans la ville de Maga Cyprinus carpio/cf M qui
présente une teneur en AFB1 de 4,65µg/Kg, 1,09µg/Kg pour la CIT et de 1,73µg/Kg pour
l’OTA, alors que dans la ville de Lagdo nous notons Oréochromis sp/ts L qui présente une
teneur en AFB1 de 4,95µg/Kg, 0,78µg/Kg pour la citrinine et de 2,38µg/Kg pour l’OTA.
Selon le traitement appliqué l’on constate que la plupart des produits séchés ont une
teneur en AFB1 plus élevée que les échantillons fumés. Cette différence peut-être due à
l’activité de l’eau dans les échantillons séchés qui ont favorisé la toxinogénèse, car cest l’un
des facteurs qui favorisent la croissance fongique et la toxinogénèse (Nguyen, 2007). La
présence à la fois de l’aflatoxine et de l’ochratoxine dans un aliment est un risque à la
consommation ainsi le règlement (CE) N° 1881/2006 fixe à 5µg/kg et 2µg/kg la teneur
maximal d’AFB1 et CIT respectivement for ?? dans les aliments destinés à la consommation
humaine; pour l’OTA cette valeur est de 3µg/kg. D’après cette norme nous constatons que la
teneur en AFB1 de l’échantillon Syf L de lagdo est supérieure à celle de la valeur seuil
donnée par la norme.
66
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
2. Isolement
L’isolement a été réalisé à partir de poissons séchés/ fumés du Lac de Maga et de Lagdo et
a permis d’obtenir 143 moisissures. Pour la suite de notre analyse, nous en avons retenue 45.
Cet isolement s’est fait selon la méthode décrite par Bavaro et al., en 2017.
L’identification des genres fongiques a été réalisée selon les clés de détermination de
Nasraoui (2006), Botton (1990) et Rémi (1997). En se basant sur les caractères
macroscopiques des colonies (aspect, couleur, forme, contour, etc.) et sur les caractères
microscopiques du mycélium et des conidies ou spores (cloisonnement du mycélium, forme
des spores et conidies, forme des organes de fructification, etc.), les moisissures ont été
regroupés en 5 genres à savoir Aspergillus, Fusarium, Penicillium, Rhizopus, Mucor.
a. Identification macroscopique :
Sur la base des caractères macroscopiques des colonies observées qui donne des aspects
différenciables entre les résultats de l'ensemencement et la purification pratiquée afin de
séparer les colonies obtenues, suite à des dilutions décimales différentes pour chaque
échantillon. Celle-ci est fonction de la richesse et la diversité des populations fongiques de
l'échantillon.
67
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Echantillon Maga
(> 3 semaines) isolats Couleurs de face Couleurs du revers Aspects de la moisissure
68
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Il ressort de ce tableau que la région dans laquelle on a le plus isolé de moisissure est celle
de Maga avec 23 isolats et celle de Lagdo 22 isolats. Les différents caractères macroscopiques
étudiés ici nous montrent une variation des espèces fongique d’une ville à une autre.
b. Identification microscopique :
Sur la base des caractères microscopiques retenus après l'observation au microscope
optique de marque Carl Zeiss Jena et au grossissement X40, nous sommes arrivés à identifier
cinq (5) genres, avec une répartition en quantité et en qualité différente que nous allons
étudier et détailler ultérieurement.
1. Le genre Aspergillus
Le mycélium est cloisonné portant de nombreux conidiophores dressés, non
ramifiés, terminés en vésicule. Des phialides formées directement sur la vésicule ou
sur des métules, et tête conidiennes unisériées ou bisériées ; les conidies en chaîne
unicellulaires.
L’espèce Aspergilus flavus
Le tableau 10 ci-dessous nous présente l’aspect d’Aspergillus flavus sur milieu, SAB, DG
18 suivi de l’observation microscopique.
Tableau 10: Aspect d’Aspergillus flavus sur milieu SAB et DG 18 suivi de l’observation
microscopique
Aspergillus flavus sur SAB Aspergillus flavus sur DG18 Observation microscopique ×40
69
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
L’espèce Aspergillus fumigatus
Le tableau 11 ci-dessous nous présente l’aspect d’Aspergillus fumigatus sur milieu SAB
et DG 18 suivi de l’observation microscopique :
Tableau 11: Aspect d’Aspergillus fumigatus sur milieu SAB et DG 18 suivi de l’observation
microscopique
Après observations microscopiques, 1 isolat dans les échantillons de Maga présente les
caractéristiques liées à Aspergillus fumigatus. Il s’agit principalement pour Maga l’isolat Ss2.
Tableau 12: Aspect d’Aspergillus Versicolor sur milieu SAB et CYA suivi de l’observation
microscopique
Aspergillus Versicolor sur SAB Aspergillus Versicolor sur CYA Observation microscopique
Après observation microscopique, 1 isolat dans les échantillons de Maga présente les
caractéristiques liées à Aspergillus Versicolor. Il s’agit principalement pour Maga l’isolat
CfM3.
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
L’espèce Aspergillus niger
Le tableau 13 ci-dessous nous présente l’aspect d’Aspergillus niger sur milieu SAB et
DG 18 suivi de l’observation microscopique :
2. Le genre Penicillium
Tableau 14: Aspect de Penicilium sp sur milieu CYA et SAB suivi de l’observation
microscopique
Après observation microscopique, 1 isolat dans les échantillons de Lagdo présente les
caractéristiques liées à Pencillium sp. Il s’agit principalement pour Lagdo l’isolat CfL4.
71
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
3. Le genre Rhizopus
Tableau 15: Aspect de Rhizopus sp sur milieu SBA suivi de l’observation microscopique
4. Le genre Mucor
Tableau 16: Aspect de Mucor sp sur milieu SBA suivi de l’observation microscopique
72
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Après observation microscopique, 3 isolats dans les échantillons de Lagdo et 3 isolats
dans les échantillons de Maga présentent les caractéristiques liées à Mucor sp. Il s’agit
principalement pour Lagdo les souches sys 4, TsL2, TfL2 et pour Maga les souches CfM2,
Sf4, CsM2.
5. Le genre Fusarium
Tableau 17: Aspect de Fusarium sp sur milieu SAB et MEA suivi de l’observation
microscopique
73
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Tableau 18: Caractères culturaux des souches de moisissures sur les milieux d’identification
CYA, SAB, DG18, MEA
Milieux de Culture
SAB MEA
DC DC
CC CRC CC CRC espèces
(mm) (mm)
Blanc
Sys1, Cfl2, Ss6 65 Blanc verdâtre Brun 67 rose Fusarium sp
rose
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Maga
Le tableau 19 ci-dessous présente la fréquence d’apparition de souches isolées en
fonction des villes et du type de traitement.
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Maga
expliquer la forte présence de ce genre ( ???) puisque les conditions y sont favorables à sa
croissance. La présence de Penicillium sp est toujours importante grâce au grand pouvoir de
dissémination des spores dans l’air ambiant. Les autres souches isolées des genres Rhizopus,
Mucor, Fusarium, sont naturellement présentes sur les cultures en plein champs et dans le sol
et sont généralement les indicateurs d’un mauvais stockage (Hadjer, 2018; Nihel & Gherras,
2017). En effet lors de la transformation les poissons sont séchés soit au sol, soit sur des claies
qui ne sont généralement pas dans des bonnes conditions hygiéniques, de même lors de
l’échantillonnage on a observé les mouches se déposer sur les poissons avant stockage. Ces
mouches et les insectes transportent les spores des moisissures sur les poissons lorsqu’elles
s’y déposent (Hissein O. et al., 2019; Nganou et al., 2020). Dans les villes de Lagdo et Maga
le pourcentage de moisissure est plus élevé dans les échantillons de poissons fumés et
l’espèce la plus représentée est l’Aspergillus flavus avec une fréquence 61,5% pour Lagdo et
38,5% pour Maga. Cette différence peut être due aux mauvaises conditions de stockage, aux
conditions climatiques dans les différentes villes qui influencent sur l’humidité relative et
favorise le développement des moisissures. Lors de l’échantillonnage la température à Maga
et Lagdo variait de 23°C à 31°C au mois d’août et de septembre, ces températures sont
favorables à la croissance des moisissures qui en général ont besoin de 25°C comme
température optimal de croissance.
Ces résultats sont similaires avec les travaux de (Hissein O. et al., 2019) qui ont isolé à
partir du poisson fumé et séché au Tchad. Le genre Aspergillus présentait une fréquence
élevée par rapport aux autres genres. En outre, les études menées par ??? (Nganou et al.,
2020) au petit marché de Ngaoundéré sur la contamination des poissons fumés par les
moisissures ont montré la présence d’Aspergillus sp, Fusarium sp, Rhizopus sp, et
Penicillium sp et le genre Aspergillus sp était le plus représenté.
La production de mycotoxines est directement liée à la croissance fongique, alors que les
facteurs capables d’influencer la croissance fongique vont aussi jouer un rôle sur la
toxinogénèse (Tchikoua et al., 2016). Certaines moisissures sont capables de produire
plusieurs mycotoxines dans des conditions bien précises, et une même mycotoxine peut être
produite par plusieurs moisissures.
Pour réaliser cette évaluation du potentiel mycotoxinogène, les milieux CYA, MEA,
DG18 sont généralement utilisés, et certaines mycotoxines (L’AFB1, la CIT, l’OTA etc..)
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Maga
sont des substances fluorescentes sous lumière UV (Nguyen, 2007; Tchikoua et al., 2016).
Parmi nos moisissures isolées quelques unes sont susceptibles de produire les moisissures
fluorescentes et ce sont ces moisissures qui ont été sélectionnées.
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Maga
Tableau 21:Souches productrices d'aflatoxine B1 a 30°C après 7 jours d’incubation.
Souches productrices d'AFB1
Souches fongiques Température d'incubation MEA CYA DG18
Aspergillus flavus syf1 30°C + + +
Aspergillus flavus Syf 2 30°C - - -
Aspergillus flavus Syf 3 30°C - - -
Aspergillus flavus CfL1 30°C - + +
Aspergillus flavus CfL3 30°C + - -
Aspergillus flavus CsL2 30°C + - -
Aspergillus flavus CsL3 30°C - - -
Aspergillus flavus TfL1 30°C - - -
Aspergillus flavus TfL3 30°C - - -
Aspergillus flavus TfL4 30°C + - -
Aspergillus flavus Sf1 30°C + + +
Aspergillus flavus Ss4 30°C + + +
Aspergillus flavus CfM4 30°C - - -
Aspergillus flavus CfM5 30°C + + +
Aspergillus flavus CsM1 30°C + + +
Aspergillus flavus CsM3 30°C - - -
Aspergillus flavus MfM1 30°C + + +
Aspergillus flavus MfM3 30°C - - -
Aspergillus flavus Msm1 30°C + + +
Aspergillus Niger Sys3 30°C - - -
Aspergillus Niger CsL1 30°C - - -
Aspergillus Niger CFM1 30°C - - -
Aspergillus Niger Msm2 30°C - - -
Aspergillus Versicolor Cfm3 30°C + + +
Aspergillus fumigatus Ss2 30°C - - -
Pénicillium sp Cfl4 30°C - - -
Il ressort de ces tableaux que sur les 25 souches d’Aspergillus sp testées et 1 souche de
Pénicillium sp, à 25°C, 4 souches de Maga à savoir CfM5, CsM1, Mfm1, Msm1 et 4 souches
de Lagdo parmi lesquels Syf1, CfL3, CsL2, TfL4 ont produit l’aflatoxine B1 tandis qu’à 30°C
6 souches de Maga à savoir Sf1, Ss4, CfM5, CsM1, Mfm1, Msm1 et 4 souches de Lagdo
parmi lesquels Syf1, CfL3, CsL2, TfL4 et toutes ses souches sont des Aspergillus flavus. Mais
par contre, seule la souche cfm3 appartenant au genre Aspergillus versicolor a montré une
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activité stérigmatocystinogène à la température de 25°C et 30°C et la fluorescence sous
lumière ultraviolet est bleue, Cette mycotoxine est précurseur des aflatoxines B1(Gauthier,
2016).
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la présence d’oxygène et de dioxyde de Carbone, la composition du substrat, les interactions
microbiennes et la prédominance d’espèces toxinogènes (Nguyen, 2007).
L’activité de l’eau est la plus ou moins disponibilité de l’eau perceptible dans les aliments.
Elle dépend de sa composition chimique, c'est-à-dire de la quantité d'eau retenue par les sels,
sucres et protéines, ainsi que de ses caractéristiques physiques (porosité, polarité) (Tabuc,
2007). Ce paramètre peut varier de 0 (pour les substrats dans lesquels toute l'eau est retenue) à
1 (pour l’eau pure) (Tabuc, 2007). Le tableau 22 ci-dessous nous présente l’activité de l’eau
des échantillons de la région de Maga et Lagdo.
Il ressort de ce tableau que l’activité de l’eau la plus élevé dans la ville de Maga
s’agissant des échantillons séchés est Ss M (0,76) et Cf M (0,83) pour les échantillons fumés.
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Ces valeurs élevées d’activité de l’eau dans ces échantillons favorisent le développement des
moisissures xérophiles, mésophiles et peuvent être dues soit à la non maitrise du traitement
appliquée à savoir le fumage ou le séchage, soit aux mauvaises conditions de stockage car les
échantillons ont été stockés pendant les saisons de pluies.
Par ailleurs l’activité de l’eau la plus élevé dans la ville de Lagdo s’agissant des
échantillons séchés est Ts L (0,80) et SyF L (0,80) pour les échantillons fumés. Ces valeurs
élevées d’activité de l’eau dans ces échantillons favorisent le développement des moisissures
et peut être due soit à la non maitrise du traitement appliquée à savoir le fumage ou le
séchage, soit aux mauvaises conditions de stockage car les échantillons ont été stockés
pendant les saisons de pluies.
Ces résultats sont en accord avec les études de Nganou et al., 2020 à Ngaoundéré qui
ont isolé les moisissures dans les échantillons de poissons fumés et ces échantillons avaient
une activité de l’eau comprise entre 0,76 et 0,81. De même au Mali, Zakhia, 1992 a isolé les
moisissures dans les échantillons de Tilapia Sp qui avait une teneur en eau comprise entre
0,66 et 0,98.
2. Détermination de la couleur :
La couleur est l’un des premiers aspects qui attirent l’attention du consommateur. Elle est
une caractéristique importante pour les produits alimentaires. Elle dépend des caractéristiques
de l’aliment (Teneurs en eau, Sucres réducteurs et protéines) et des conditions opératoires
appliquées durant la production (température, humidité relative, mode de transfert) (Esteller et
al., 2008). Le paramètre L représente la luminance, le paramètre a* désigne la balance entre le
vert (si valeur négative) et le rouge (si valeur positive), le paramètre b* désigne la balance
entre le bleu (si valeur négative) et le jaune (si valeur positive).
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même lors du fumage les valeurs des paramètres L et a diminuent pendant que celle de b
augmentent (Sokamte, 2019).
Dendrogramme
1400
De
1200 cette
figure 22
1000
de la
800
Dissimilarité
600
400
200
0
Cs L Tf LSYS LTs LMf2 M
Cs1 M
Ss2 M
Cf3 MSf1 MSYf L
Ms3 MCf L
Figure 23: Classification des différents groupes des échantillons de poissons fumés.
classification hiérarchique ascendante il ressort que nous avons deux principaux groupes : le
premier groupe étant constitué de deux sous-groupes donc le premier est constitué des
échantillons Cs L, TfL, Sys L, et le second TsL, Mf2M, Cs1M, Ss2M tandis que le deuxième
groupes est constitué de deux sous-groupes, le premier étant constitué de l’échantillon Cf3M
et le second des échantillons Sf1M, SyfL, MS3M et CfL. Il en ressort que les échantillons
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
appartenant à la même ville ne sont pas similaires entre eux et présentent des différences avec
les échantillons de l’autre ville ayant presque les mêmes caractéristiques. Ces résultats sont en
désaccord avec l’un des travaux de Nganou et al., (2020) qui a montré à travers sa
classification hiérarchique que les échantillons de riz prélevé dans deux villes
géographiquement proches ayant à peu près les mêmes caractéristiques environnementales
(Yagoua et maga) appartiennent aux mêmes groupes. La figure 24 présente la disposition des
variables dans le système de composantes principales F1xF2.
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1
Variables (axes F1 et F2 : 62,98 %)
0.75
0.5
0.25
F2 (27,55 %)
-0.25
-0.5
-0.75
-1
-1 -0.75 -0.5 -0.25 0 0.25 0.5 0.75 1
F1 (35,43 %)
variables actives
3
SYf L
Cf M
2
Sf M
F2 (27,55 %)
Ss M
Ms M
0 Ts L
-7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8
Cs L
-1
Cf L Mf M
Tf L SYS L
-2
Cs M
-3
F1 (35,43 %)
Figure 25: distribution des échantillons de poissons fumés et séchés et des variables sur les axes F1 et
F2.
Légende : (CIT : Citrinine ; OTA : Ochratoxine A ; AF : Aflatoxine ; Aw : Activité de l’eau ; FB1 :
Fumonisine B1; L* : Luminance ; a* : Composante Chromatique rouge-vert ; b* : Composante
chromatique jaune-bleu ; IB : Indice de Blancheur).
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La figure 24 présente la disposition des variables dans le système de composantes
principales F1xF2. Cette représentation appelée cercles de corrélation montre que les axes F1
et F2 expliquent à eux seuls 62,98 % des variations de la toxinogénèse des échantillons de
poissons fumés et séchés de Maga et Lagdo. La première composante principale (F1) explique
35,43 % des variations observées et la seconde composante principale (F2) 27,55 % des
variations. On peut observer d’après ce cercle de corrélation que F1 est représenté par la
Citrine, la composante chromatique jaune-bleu, et l’Ochratoxine A. et l’axe F2 est représenté
par l’Aflatoxine B1, la Fumonisine B1, l’activité de l’eau et l’indice de Blancheur, la
luminance la composante chromatique rouge-verte.
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Maga
Les tableaux 24 et 25 permettent de ressortir les corrélations des variables entres elles,
et avec l’ensemble des axes (F1, F2, F3, F4).
F1 F2 F3 F4
AFB1 0,506 0,757 0,162 -0,187
FB1 0,854 -0,054 -0,058 -0,006
CIT 0,441 0,510 0,065 0,659
OTA 0,554 0,441 -0,160 -0,549
AW 0,720 0,510 0,051 0,117
L 0,565 -0,566 0,575 -0,144
a -0,692 0,620 0,226 -0,208
b 0,050 -0,179 0,974 0,004
BI 0,618 -0,672 -0,365 -0,053
Les nombres ayant une valeur absolue supérieure à 0,5 représentent une contribution
significative pour le dit facteur.
Le tableau 24 montre que pour la composante principale F1, les variables les plus
significatives sont : la teneur en AFB1 (50%), FB1 (85%), Aw (72%) et les paramètres de la
couleur telle que L (56%), a (69%), BI (61%). Pour la composante F2, AFB1 (75%), la CIT
(51%), Aw (51%), L (56%), a (62%) et le paramètre de la couleur BI (67%) sont les plus
significatives. Pour les composantes F3 L (57%) et b (97%) sont les plus significatives, pour
la composante F4 CIT (65%) et OTA (54%). Les autres variables associées ne présentent pas
globalement des contributions significatives.
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et Maga
Les corrélations entre les différentes variables sont facilement élucidées dans le tableau 25 ci-dessous
Tableau 25:Matrice de corrélation de Pearson présentant les corrélations des variables entre elles
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Conclusion
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Conclusion
Le dosage des mycotoxines tel que l’aflatoxine B1, la Fumonisine B1, la Citrinine et
l’ochratoxine A a montré que dans les deux villes les échantillons étaient tous contaminés en
AFB1 sauf les échantillons Arius africanus/mf M, puis il s’en suit des teneurs en OTA qui
sont élevés. S’agissant de l’AFB1, pour la ville de Maga les teneurs moyennes sont comprises
entre 0,91µg/Kg et 4,65µg/Kg respectivement pour Silurus sp/sf M et Cyprinus carpio/cf M,
pour la ville de Lagdo les teneurs en mycotoxines sont comprises entre 0,55µg/Kg et
5,09µg/Kg respectivement pour Synodontis sp/sys L et Synodontis sp/syf L. S’agissant de
l’OTA, pour la ville de Maga les teneurs moyennes sont comprises entre 0,33µg/Kg et
2,14µg/Kg respectivement pour Arius africanus/mf M et Arius africanus/ms M.
Pour l’isolement des moisissures il ressort de notre analyse que tous nos échantillons
sont contaminés par les moisissures du genre Aspergillus sp, Fusarium sp, Penicillium sp,
Rhizopus sp, Mucor sp. Ce sont principalement des moisissures de stockage (Bendjoudi &
Dehemi, 2020), nous avons identifié le genre Aspergillus sp au total 25, on a pu identifier les
espèces Aspergillus flavus (19), Aspergillus niger (4), Aspergillus versicolor (1), Aspergillus
fumigatus (1); le genre Rhizopus sp (10) ; le genre Mucor sp (5) ; le genre Fusarium (3); le
genre Penicilium sp (1)
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Maga
de Lagdo par contre, l’activité de l’eau la plus élevée dans la ville de Lagdo s’agissant des
échantillons séchés est Ts L (0,80) et SyF L (0,80) pour les échantillons fumés.
Pour la couleur l’indice de luminance L* à Maga est compris entre 22,1 et 43,04
respectivement pour les échantillons Mf M et ms M. Dans la ville de Lagdo elle est comprise
entre 23,3 et 51,4 respectivement pour les échantillons Syf L et sys L.
Pour les analyses en composante principale il ressort qu’il existe une corrélation entre
les différentes variables notamment la teneur en AFB1, CIT, OTA et l’Aw, cette dernière qui
est une caractéristique importante pour la toxinogénèse.
Perspectives
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Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Références bibliographiques
Bavaro, S. L., Susca, A., Frisvad, J. C., Tufariello, M., Chytiri, A., Perrone, G., Mita, G.,
Logrieco, A. F., & Bleve, G. (2017). Isolation , Characterization , and Selection of Molds
https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.01356
Bendjoudi, R., & Dehemi, H. (2020). Etude des méthodes d’isolement et d’identification de
Gauthier, A. (2016). Les mycotoxines dans l ’ alimentation et leur incidence sur la santé To
cite this version : HAL Id : dumas-01315198 Par Les mycotoxines dans l ’ alimentation
Gret. (1993a). Conserver et transformer le poisson, GRET, 1993: Deuxième partie comment
https://cgspace.cgiar.org/handle/10568/60495
durum L ).
Hissein O., Tidjani, A., Sawadogo, A., Tarnagda, B., Abakar, L. I., Cissé, H., Et, Y. T., &
91
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
Savadogo, A. (2019). Isolement Et Caracterisation De Souches Fongiques a Partir De
Poissons Fumes / Seches Du Lac Fitri Au Tchad Isolation and Characterization of Fungal
Strains From Fish /. American Journal of Innovative Research and Applied Sciences,
April, 155–160.
Kabahenda, M. K., Omony, P., & Hüsken, S. M. . (2009). Manutention après capture des
produits halieutiques de faible valeur et menaces pour la qualité nutritionnelle : une étude
production.
Nganou, N. D., Tchinda, E. S., Sokamte, A. T., Ngoualem, F. K., Nodem, S. F., Beumo, M. T.
citratus and Ocimum basilicum against Mycotoxin Producing Strains. 31(August), 36–
47. https://doi.org/10.9734/EJMP/2020/v31i1330310
vietnam -étude des conditions pouvant réduire la production des mycotoxines. 147.
Nihel, E. H., & Gherras, S. (2017). Présentée par : Etude mycologique et ind entification des
92
Evaluation de la contamination en mycotoxine des poissons séchés et fumés de Lagdo et
Maga
INFLUENCE DES CONDITIONS DE FUMAGE , DES Thèse au Département de
NGAOUNDERE.
Tabuc. (2007). THESE Présentée pour obtenir Spécialité : Pathologie, mycologie, genetique
des mycotoxines.
Tchikoua, R., Tatsadjieu, L. N., Moses, C., & Funtong, M. (2016). Antifungal Activity of
Lactic Acid Bacteria against Molds Isolated from Corn and Fermented Corn Paste. 4(4),
90–100. https://doi.org/10.12691/ajmr-4-4-1
(e .n .s .i.a .).
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Maga
Annexes
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Maga
Annexes
Tableau 1A : Composition des milieux de culture
A
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Coconut Agar (CA)
Cent grammes de la noix de coco déchiquetée ont été homogénéisés 5 minutes avec 300 ml
d'eau distillé chaude.la solution filtrée à l'aide du tissu. L’agar a été ajouté (20g/litre). Le
mélange a été alors stérilisé à l'autoclave à 121°C/15 minutes. Le PH final est de 7,0
Composition DG 18
FORMULE
Tryptone 5,00 Glucose 10,00 Sulfate de magnésium, 7H2O 0,50 Phosphate monopotassique
1,00 Dichloran (dichloro-2,6-nitro-aniline) 0,002 Chloramphénicol 0,10 Agar 15,00 Le milieu
en flacon contient en plus : Glycérol 220,00