LA TOXOPLASMOSE

Pr Emna Siala
Laboratoire de Parasitologie
Institut Pasteur de Tunis

1
2
 LA TOXOPLASMOSE
• Zoonose cosmopolite
• Provoquée par un protozoaire intracellulaire
Toxoplasma gondii

• Maladie bénigne chez l’immunocompétent

• Peut être grave dans 2 cas :

- Chez le fœtus
- Chez l’immunodéprimé
3
 LE PARASITE
Morphologie

1 -Tachyzoïte
2 - Kyste
3 - Oocyste

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 1. TROPHOZOÏTE ou TACHYZOÎTE

6-8µm / 3-4µm
Forme en croissant

Forme de multiplication

Parasite intracellulaire obligatoire

tachyzoïtes macrophages 5
 2. KYSTE

BRADYZOÏTES
(de même structure
que le tachyzoïte 50 à 200µm
mais à métabolisme
plus ralenti)

Forme de quiescence du parasite

Tissus musculaire, nerveux, œil

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 3. OOCYSTE
Résulte de la multiplication sexuée chez le chat
éliminé non sporulé

sporulation milieu extérieur

14µm /9µm

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Forme de résistance dans le milieu extérieur
HD : chat Le cycle HI
animaux
homéothermes
Cycle sexué Cycle asexué
OOCYSTE
R : +4°c (1 an)

Moutons
Volailles
Bœufs
Porcs

OOCYSTES KYSTES résistent à- 4°c (2 mois)

Destruction à T°> 65° (5mn)
20°c (72h)

TACHYZOITES
phase proliférative
~10j 8
 Modes de contamination de l’homme

1. Ingestion de kystes contenus dans la viande

insuffisamment cuite

2. Ingestion d'oocystes (crudités, eau de boisson,

aliments, mains souillées)

1. Passage transplacentaire (tachyzoïte)

2. Transmission par greffe d'organe (Kyste)

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 Répartition géographique

• Parasitose cosmopolite

• Prévalence humaine variable selon :

- Habitudes alimentaires
- Conditions climatiques

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 CLINIQUE

1. Toxoplasmose acquise de l’immunocompétent

2. Toxoplasmose materno-fœtale

3. Toxoplasmose de l’immunodéprimé

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1.Toxoplasmose acquise de l'immunocompétent
Formes asymptomatiques (80% des cas)

Forme symptomatique :
• Adénopathies cervicales
• une fébricule
• Asthénie
• un syndrome mononucléosique sanguin

Formes graves : exceptionnelles

Choriorétinites….
12
 2. Toxoplasmose congénitale
Est due à un passage transplacentaire du parasite à la suite d’une infection
maternelle en cours de grossesse ou en péri-conceptionnelle

Risque de transmission materno-foetale

100%

Gravité de l’atteinte fœtale

Age de la grossesse
13
2. Toxoplasmose congénitale
Mort fœtale in utéro

Formes inapparentes  traduction sérologique

choriorétinite tardive 14
3. Toxoplasmose de l’immunodéprimé
• Sujet infecté par le VIH (lymphocytes T CD4+<200/mm3)
• Greffé de moelle osseuse
• Transplanté d’organes

1. Réactivation endogène des kystes toxoplasmiques (bradyzoïtes tachyzoïtes) +++

2. Primo-infection symptomatique

• Toxoplasmose cérébrale ou neuro-toxoplasmose

• Toxoplasmose disséminée (pulmonaire…)

La toxoplasmose cérébrale est une infection opportuniste majeure

classant le malade VIH+ au stade SIDA

15
 Toxoplasmose cérébrale
Clinique :
- Fièvre
- Céphalées
- Tr conscience
- S° neuro-focaux
- Convulsions
Diagnostic :
• La sérologie est peu contributive
• Recherche des AC (LCR)
• Recherche de parasite (sang, LCR, cerveau) manquent
de sensibilité
• TDM +++ : lésion hypodense arrondie prenant le
contraste en périphérie
Autres localisations
Oculaires, pulmonaires.. 16
 4.La toxoplasmose oculaire
• Complication la plus fréquente de la toxoplasmose congénitale
parfois tardive (adolescence ou à l’âge adulte)
• Infection acquise chez l’immunocompétent (souche virulente)
• 2ème localisation en cas de réactivation chez l’immunodéprimé

Les signes cliniques dépendent de la localisation de la lésion

Rétinochoroïdite+++
17
 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

I. MOYENS DU DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

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 1. Diagnostic sérologique

A.Techniques :

• IFI (Immuno Fluorescence Indirecte)

• ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)

• ECLIA (ElectroChimiLiminesce)
• ELFA (Enzyme- Linked Immunofluorescent Assay)

• Test d’avidité des IgG

• Western Blot

Le suivi sérologique doit être fait dans le même laboratoire par la même technique 19
 Test d’Avidité des IgG => dater l’infection toxoplasmique
Principe: Etude de l’affinité des IgG spécifiques vis-à-vis de l’Ag toxoplasmique
Maturation des IgG  augmentation de leur avidité (affinité) pour les Ag

Technique : ELISA employant urée (un agent dissociant la liaison Ag-Ac)

DO avec urée
Indice d’Avidité =
DO sans urée

<0,3 >0,5
IA
4-5 mois
IA
IA faible 0,3 intermédiaire IA élevé
• Ig G de faible avidité • Ig G de forte avidité

• Liaison Ac-Ag dissociée • Liaison Ac-Ag peu modifiée

• En faveur d’une toxoplasmose récente • Exclut une infection récente de

moins de 4-5 mois 20
 DO avec urée
Indice d’Avidité =
DO sans urée

Vidas : IA < 0,2 faible avidité

0,2 < IA < 0,3 avidité intermédiaire
IA > 0,3 forte avidité

Biorad : IA < 0,4 faible avidité

0,4 < IA < 0,5 avidité intermédiaire
IA > 0,5 forte avidité

Excluent une infection récente de moins de 4-5 mois

21
 Le Western Blot
• le Western Blot TOXO II IgG :
- Technique sensible et spécifique pour la recherche des
Ig G
- Permet la détection des séroconversions précoces

• Le Western Blot (WB) comparatif :

 profils sérologiques des IgG et IgM
- Mère/bébé
- Sérum/humeur aqueuse ou vitrée

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Taux d’AC B.Cinétique des AC anti-toxoplasmiques

IgG

IgM

0 UI

J0 1S 2S 3S 2 mois 6 mois 1 an

23
Infection
 I.2. LA MISE EN ÉVIDENCE DU
PARASITE OU DE SON ADN
• MEE Toxoplasma gondii au niveau placenta,
biopsies digestives, pulmonaires…. après
coloration au May Grünwald Giemsa (MGG)

• MEE ADN parasitaire par la PCR (Polymerase

Chain Reaction)

24
 II. INDICATIONS

1-Toxoplasmose acquise d'un patient

immunocompétent :

Diagnostic sérologique basé sur l’ascension du titre

des IgG spécifiques à 2 examens successifs effectués à 20
jours d’intervalle avec présence d’IgM

25
2. Toxoplasmose materno-fœtale :
Dépistage sérologique précoce

Connaître son statut immunitaire vis-à-vis de la toxoplasmose

Dès le début de la grossesse+++

Diagnostic sérologique
+ Datation de l’infection

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 Interprétation
IgM - IgM + IgM + IgG + IgM -
IgG - IgG - Test d’avidité des IgG IgG +
IA faible IA élevé
Western Blot Toxo II IgG 2ème Prélèvement après 15j Immunité
Toxoplasmose évoluant ancienne probable
sérologie 2ème Prélèvement depuis plus de 4 mois
IgG (selon le kit) À contrôler
après 15j IgG stable par un 2ème prélèvement
Négative
IgG + Après 21j

Exclusion d’une infection

récente datant de moins
Infection récente de 4 mois à confronter IgG stable / IgM-
Absence Séroconversion Infection récente avec l’âge de la grossesse
d’immunité toxoplasmique <2 mois probable > 2 mois
Toxoplasmose (/1er prélèvement) (/1er prélèvement)
évolutive
Immunité ancienne
IgG – de plus de 5 mois
(pendant 2 mois)

IgM non
spécifiques

Absence d'immunité

J0 1S 2-3S 2-3 mois 5 mois 6 mois 1an

Infection
 IgM- IgG-

Absence d’immunité toxoplasmique

CAT
Sérologie mensuelle
jusqu’à 15 jours-1mois après l’accouchement
Mesures hygiéno-diététiques
1 - Bien cuire la viande
2 - Bien laver les crudités
3 - Eviter les chats (litière)
4- Eviter la restauration collective
5- Précautions lors activités de jardinage

28
 Interprétation d’une sérologie toxoplasmique

IgG-, IgM-  Sérologie négative

Absence d’immunité toxoplasmique

IgG-, IgM+  Toxoplasmose évolutive?

IgG+, IgM-  Toxoplasmose ancienne de plus de 5 mois

IgG+, IgM+  dater la séroconversion (test d’avidité)

29
 IgM+ IgG +

il faut DATER l’infection

Test d’avidité des IgG

• IA > 0,5 (IA élevé)  Exclut une infection récente de moins de 4

mois
• IA < 0,3 (IA faible)  marqueur d’une toxoplasmose récente, mais
insuffisant pour l’affirmer 30
Diagnostic de la toxoplasmose congénitale

Séroconversion certaine ou probable

Spiramycine
Rovamycine® 3MUx3/j Diagnostic anténatal

Surveillance échographique Recherche de l’ADN parasitaire

fœtale dans le liquide amniotique par PCR

Délai de 1 mois entre la

contamination et l’amniocentèse

> 18 semaines d’aménorrhée

31
 Diagnostic anténatal positif

IMG
PMT + SFD jusqu’à l’accouchement
puis traitement du NN

32
 Diagnostic anténatal négatif ou non pratiqué

poursuivre la spiramycine jusqu’à l’accouchement

Diagnostic néonatal de la toxoplasmose congénitale chez le NN à la

naissance
Sérologie :
Examen clinique, RX crâne, Recherche du parasite : Western Blot :
ELISA IgG/IgM
FO, ETF placenta Mère/enfant
Recherche des IgM (J10)

Suivi sérologique du nouveau-né

ELISA IgG-IgM Suivre le taux d’ IgG jusqu’à
Western blot :bébé/bébé ( j10, M1, M2, M3)
disparition des IgG maternelles transmises
33
 Diagnostic anténatal négatif ou non pratiqué

poursuivre la spiramycine jusqu’à l’accouchement

Diagnostic néonatal de la toxoplasmose congénitale chez le NN à la

naissance
Sérologie :
Examen clinique, RX crâne, Recherche du parasite : Western Blot :
ELISA IgG/IgM
FO, ETF placenta Mère/enfant
Recherche des IgM (J10)

Suivi sérologique du nouveau-né

ELISA IgG-IgM Suivre le taux d’ IgG jusqu’à
Western blot :bébé/bébé ( j10, M1, M2, M3)
disparition des IgG maternelles transmises
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La sérologie confirme le diagnostic de toxoplasmose
congénitale :

1. Présence d’IgM au-delà du 10ème jour de vie

2. Présence d’IgG et/ou d’IgM néosynthétisées

(profils comparés mère/enfant ou en suivi bébé/bébé)

3. Ascension des IgG ou leur persistance au-delà de la 1ère

année de vie
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3. Diagnostic de la toxoplasmose de l'immunodéprimé

Diagnostic évoqué :
- Signes cliniques
- TDM cérébral « image en cocarde » +++
Démarrer le traitement

Sérologie : peu contributive

Si pas d’amélioration :

Diagnostic parasitologique : MEE parasite/ADN : LCR, sang, LBA…

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 4. Diagnostic de la toxoplasmose oculaire
FO MEE choriorétinite toxoplasmique

1. Mise en évidence de l’ADN toxoplasmique au niveau de l’humeur aqueuse PCR

2. Calcul de la charge immunitaire qui permet de comparer le titre d’Ac spécifiques

synthétisés dans l’humeur aqueuse ou le vitré, à celui existant dans le sérum

Calcul du coefficient de Desmonts

charge immunitaire HA
charge immunitaire sérum

Charge immunitaire = taux d’IgG spécifiques

taux d’IgG totaux

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3. Westen Blot sérum/humeur aqueuse ou vitrée MEE AC synthétisés localement
 TRAITEMENT

1. LES MOLÉCULES :
Spiramycine (Rovamycine®) 50 mg/kg/jour
Pyriméthamine (Malocide®) 1 mg/kg/j
Sulfadiazine (Adiazine®) 100 mg/kg/j
Pyriméthamine + Sulfadoxine (Fansidar®)
Triméthoprime+sulfaméthoxazole (Bactrim®)

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2. INDICATIONS :

La toxoplasmose acquise

• La guérison est spontanée

• En cas d’asthénie importante : spiramycine 50-

100 mg/kg/j pendant 1 mois

39
Toxoplasmose materno-fœtale
Si séroconversion spiramycine

• Diagnostic anténatal (-) Spiramycine

• Diagnostic anténatal (+) PMT+ SDZ pendant 3
semaines par trimestre en alternance avec la
spiramycine

Traitement du nouveau-né
• Diagnostic anténatal (+) ou diagnostic néonatal (+)
PMT+SDZ
• Diagnostic anténatal et néonatal (-)Surveillance
sérologique
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 Traitement toxoplasmose de l’immunodeprimé

Traitement curatif
• Première intention
– Pyriméthamine : 1,5-3mg/Kg/j
– Sulfadiazine : 100-150mg/Kg/j Pendant 4 à 6 semaines
– Acide folique : 25mg/j
• Alternatives
– Pyriméthamine + Atovaquone : 750mg x4/j
– Pyriméthamine + clindamycine :2,4g/j
– Triméthoprime-sulfaméthoxazole

Prophylaxie secondaire
Traitement d ’attaque 1/2 dose

Arrêt de la prophylaxie en cas de restauration immunitaire (Taux de CD4 dépasse 200/mm3

pendant plus de 6 mois consécutifs)
41
 Prévention de la toxoplasmose chez le
sujet infecte par le VIH

SÉROLOGIE POSITIVE SÉROLOGIE NÉGATIVE

(CD4+ <200/mm3)

chimioprophylaxie conseils hygiénodiététiques

primaire Bactrim® (1 cp/j) Surveillance sérologique semestrielle

42
 Cas clinique 1
Mme S., 28 ans, enceinte à 12 semaines d’aménorrhée
1ère sérologie toxoplasmique :

Technique ELISA IgG

- IgG : 2 UI/ml négatif: Titre < 6 UI/ml
- IgM : négatives équivoque: 6≤Titre<9 UI/ml
positif: Titre ≥9UI/ml

1. Interpréter et CAT? 43
43
- IgG : 2 UI/ml Cas clinique 1
- IgM : négatives
sérologie négative
Absence d’immunité toxoplasmique

CAT
Sérologie mensuelle
jusqu’à 15 jours-1mois après l’accouchement
Mesures hygiéno-diététiques
1 - Bien cuire la viande
2 - Bien laver les crudités
3 - Eviter les chats (litière)
4- Eviter la restauration collective
5- Précautions lors activités de jardinage

44
44
La Toxoplasmose :
A. Est causée par un protozoaire flagellé
B. Est une zoonose
C. Ne se transmet à l’homme que par voie orale
D. Est une maladie grave dans tous les cas
E. Est une parasitose opportuniste

Réponses : B,E
45
 Cas clinique 2
Mme B., 29 ans, enceinte à 10 semaines d’aménorrhée
1ère sérologie toxoplasmique :

Technique ELISA IgG

- IgG : 5 UI/ml négatif: Titre < 6 UI/ml
- IgM : positives équivoque: 6≤Titre<9 UI/ml
positif: Titre ≥9UI/ml

1. Interpréter et CAT? 46
 IgM + Interprétation
IgG - Infection récente probable
ou
Western Blot Toxo II IgG Présence d’ Ig M non spécifiques
2ème Prélèvement CAT
après 15j
Spiramycine
IgG +
Diagnostic anténatal
Séroconversion
toxoplasmique Sérologie mensuelle
Toxoplasmose
évolutive jusqu’à 15 jours-1mois après l’accouchement
IgG –
(pendant 2 mois)

Mesures hygiéno-diététiques
IgM non
spécifiques
1 - Bien cuire la viande
2 - Bien laver les crudités
Absence d'immunité
3 - Eviter les chats (litière)
4- Eviter la restauration collective
5- Précautions lors activités de jardinage
J0 1S 2-3S 2-3 mois 5 mois 6 mois 1an
Infection
 Cas clinique 3
Mme A., 33 ans, enceinte à 13 semaines d’aménorrhée
1ère sérologie toxoplasmique :

Technique ELISA IgG

- IgG : 220 UI/ml négatif: Titre < 6 UI/ml
- IgM : positives équivoque: 6≤Titre<9 UI/ml
positif: Titre ≥9UI/ml

48
48
 - IgG : 220 UI/ml
Interprétation - IgM : positives

Il s’agit :
A. Infection récente certaine
B. Absence d’immunité toxoplasmique
C. Toxoplasmose évolutive probable
D. Immunité ancienne probable avec IgM
résiduelles
E. Immunité ancienne certaine

49
 - IgG : 220 UI/ml
- IgM : positives

Il s’agit :
A. Infection récente certaine
B. Absence d’immunité toxoplasmique
C. Toxoplasmose évolutive probable
D. Immunité ancienne probable avec IgM
résiduelles
E. Immunité ancienne certaine

50
 - IgG : 220 UI/ml 13 semaines d’aménorrhée
- IgM : positives
CAT? il faut DATER l’infection

Test d’avidité des IgG

Technique ELISA (Bio-Rad)

IA= 0,6 Faible avidité : <0,4
Douteux : ≥ 0,4 et <0,5
Forte avidité : ≥ 0,5  infection >20 semaines

• IA > 0,5 (IA élevé)  Exclut une infection récente de moins de 5

mois

51
 IgM + IgG +
Test d’avidité des IgG

IA faible IA élevé
2ème Prélèvement après 15j Toxoplasmose évoluant
depuis plus de 4 mois
IgG (selon le kit)
IgG stable

Exclusion d’une infection

récente datant de moins
Infection récente Infection récente de 4 mois à confronter
avec l’âge de la grossesse
<2 mois probable > 2 mois
(/1er prélèvement) (/1er prélèvement)

J0 1S 2-3S 2-3 mois 5 mois 6 mois 1an 52

Infection