SPERMOCULTURE

et AMP

Dr Florence BOITRELLE
Spermiologie et Biologie de la Reproduction – CHIPS Poissy
I) QUAND PRESCRIRE une spermoculture ?

 Ne devrait pas être prescrite en 1ère intention

(recommandations CNGOF 2010) ???
Pas d’étude de niveau de preuve élevée

 Indiquée
– Avant toute AMP +++ (JO bonnes pratiques
2008 et 2010)
de moins 6 mois avant IIU
et en FIV, ICSI ? récente ???
– Bilan d’altérations spermatiques
– Suspicion d’IGAM
II) COMMENT réaliser une spermoculture ?
 Conditions pré-analytiques rigoureuses +++

 2 à 5 j d’abstinence sexuelle (prescrite avec le spermogramme)

 Boire beaucoup d’eau la veille du recueil
 Recueil au laboratoire
 Information claire sur les consignes de recueil
– Miction préalable
– Lavage des mains
– Nettoyage du gland avec une solution antiseptique +rinçage +++
– Recueil du sperme par masturbation dans un réceptacle évasé

Réduction de moitié des

bactériospermies positives

D’après le service de spermiologie-BDR du CHU de Lyon

 Interrogatoire

- antécédents :
d’infections génito urinaires aigües ? chroniques ? type de germe ?

- facteurs favorisants:
diabète ? Sondages ? Malformations urogénitales ? toxiques ?
Antibiothérapie récente ?

 Acheminement rapide au laboratoire +++

- fragilité de certains germes : Neisseria gonorrhoeae

- milieu de transport ?
 Examen cyto bactériologique proprement dit
(cf. bactériologie, REMIC 2010)

en bactériologie
- le sperme est « stérile » physiologiquement
- examen direct à l’état frais
- examen cytologique
- ensemencement de divers milieux (germes banaux)
- galeries pour les mycoplasmes (à prescrire)
- PCR pour chlamydia

en spermiologie diagnostique
- leucospermie (> 1M/ml) associée et test à la péroxydase
- asthénozoospermie ? nécrozoospermie ?
- morphologie spermatique: flagelles enroulés ?
III) COMMENT INTERPRETER ?
 Connaître les modes d’infection du sperme

 Connaître le pouvoir pathogène des bactéries et des

médiateurs de l’inflammation sur les spermatozoïdes

 Interprétation délicate ++, rechercher des signes cliques

ou bio de retentissement spermatique associés
– Leucospermie?
– Asthénozoospermie? Necrozoospermie? Flagelles enroulés?

 Différencier :
contamination ≠ Bactériospermie ≠ IGAM
Pb des Seuil ≥ 103 – 104 UFC pour germes pathogènes…mais…ils dépendent
du germe, des circonstances cliniques

 Recontrôler +++
 Connaître les modes d’infection du sperme

- Endogène par voie lymphatique et tissulaire

Intestin, vessie : coliformes, streptocoques, Haemophilus, mycoplasmes
Surface : corynéformes, straphylocoques

- Exogène par voie uréthrale ascendante (IST)

Neisseria gonorrheae, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis

– Endogène de la partenaire :
Hemophilus, Mycoplasmes
Streptocoques B, Lactobacilles
Candida albicans, Gardnerella vaginalis
Anaérobies (Mobilincus,Actinomyces...)
 Pouvoir pathogène des bactéries et des médiateurs de
l’inflammation sur les spermatozoïdes
Escherichia coli
Bien décrits in Adhésion-agglutination
vitro : divers mécanismes (attachement, germe
spz-asthénospermie
intracellulaire, action desd’immobilisation
+/- facteur ROS par ex) spermatique
Altération des membranes
- Altération des fonctions
Altération de migratrices
la fonction acrosomale
par les germes (immobilisation, agglutination par ex) ou les ROS avec
Nécrospermie
enroulement flagellaire par
Fragmentation de peroxydation des lipides membranaires
l’ADN spermatique
- Fragmentation ADN, anomalie condensation de la chromatine avec
altération de l’implantation embryonnaire
- Nécrospermie
- Atteinte des glandes annexes si chronicité
altération de la maturation spermatique, diminution du volume de
l’éjaculat, avec à terme une éventuelle obstruction
- Rupture de la barrière hémato testiculaire si chronicité
auto-immunisation anti-spz

Conséquences in vivo mal précisées

- Études contradictoires, pas d’études de niveau de preuve élevé
- Effets plus délétères si oligospermie et temps de contact long
 Une étude récente non publiée: Laboratoire d’Eylau
P. Cohen Bacrie et al. ASRM 2012

- 3844 spermocultures
- 5% de spermocultures positives vraies (contaminations exclues)
- E. coli, E. faecalis, Proteus, Klebsiella pneumoniae : 90%
- Mycoplasmes (surtout UU) : 4,5%

Aucun effet sur les paramètres spermatiques de base

Augmentation de la fragmentation de l’ADN (Klebsiella)
Anomalie de condensation de la chromatine (mycoplasmes si ≥ 104 CFU/mL)

Même conclusion en ce qui concerne les paramètres spermatiques et la

fragmentation de l’ADN pour Domes et al. 2012 (7852 spc, 15% positives)
 Interprétation délicate : plusieurs éléments à prendre
en compte
Le germe
E. Coli +++
Enterococcus faecalis
Ureaplasma urealyticum leucospermie
Chlamydia trachomatis
Corynebactéries séminales
Candida albicans
Gardnerella vaginalis ?

Retentissement
Sur les spz
Aigue ou
chronique

Signes
d’IGAM
AMP envisagée
Tractus
défectueux ?
 Différencier : contamination ≠ Bactériospermie ≠ IGAM

Présence d’une flore polymorphe

Contamination
(>3 espèces différentes)

Germes pathogènes de par leur Chlamydia trachomatis

présence Neisseria gonorrhoeae
Escherichia coli
Germes pathogènes au seuil de Contrôler
≥ ++ Proteus mirabilis
Contrôler la négativation
Klebsiella pneumoniae
102 UFC/ml
+++
Morganella morganii
Corynebacterium seminale
Streptococcus pyogenes
Au seuil de ≥ 5.103 UFC/ml Staphylococcus aureus
Gardnerella vaginalis
Candida albicans

Mycoplasma Boitrelle
hominis F et al. GOF, 2012
Au seuil de ≥ 104 UFC/ml REMIC 2015
 IGAM

1 facteur A + 1 facteur B
 OATS + 1 facteur A + 1 facteur C
1 facteur B + 1 facteur C
2 facteurs C

Facteurs du groupe A Facteurs du groupe B Facteurs du groupe C

(après massage
prostatique)

ATCD infection urinaire Fluide prostatique Culture spermatique

et/ou IST et/ou epididymite anormal (bactério significative)

Épididyme épaissi et/ou Urines anormales Hypospermie

douloureux et/ou déférent et/ou viscosité
sensible augmentée
et/ou anomalies au TR et/ou anomalie du pH
WHO manual for the standardized investigation and
diagnosis of the infertile couple (Rowe et al., 1993)
séminal
et/ou perturbations de
IV) POURQUOI et COMMENT TRAITER ?

 Si bactériospermie confirmée, il faut traiter:

– si risque de transmission d’IST
– si IGAM
– si le recours à l’AMP est envisagé
– « alléger » la prise en charge en AMP ?
– Éviter contamination des milieux de culture ?
– Eviter un risque d’échec des techniques d’AMP ?

– Eviter le risque de contamination de la partenaire (oui en IIU)

– Améliorer la qualité nucléaire des spermatozoïdes et donc le
développement embryonnaire précoce et tardif
– Améliorer l’implantation embryonnaire si PV positif au même germe
Candida albicans, Ureaplasma urealyticum, Gardnerella vaginalis, Streptococcus B ou Escherichia
coli
 Mesures hygiéno-diététiques : clairance +++
– Cure hydrique+++, fréquence des éjaculations+++

 Antibiothérapie :
– Adaptée au germe et à l’antibiogramme
– Seuils cités précédemment
– Des 2 partenaires (en fonction du germe, du PV)
– Bonne pénétration dans le tissu uro-génital
– Quinolones, cyclines, macrolides…
– Effets délétères des ATB sur les spz ?
– Durée:
– 10 jours si bactériospermie asymptomatique
– Au moins 21 jours si IGAM
- Contrôle de la spermoculture +/- spg après tt +++

 AINS et anti-oxydants?
à discuter si IGAM et/ou leucospermie associée

 Le gradient de densité (3 à 6 couches)

– dernière barrière aux germes
– efficace si résistance ATB ? A prouver
Abeysundara et al. 2013
 CONCLUSION

 Examen de base du couple consultant pour

infertilité

 Débat sur la réponse à la question: Quand la

prescrire ? Ts les 6 mois, 1 an ? récente ?

 Interprétation délicate, notion de seuils

 Bénéfices du traitement ?
– discutés à titre individuel +++
– Oui si AMP !
Service d’Histologie-Embryologie-Spermiologie-Biologie de la Reproduction-
Cytogénétique- Génétique Médicale CHI de POISSY
Pr Jacqueline SELVA

SPERMIOLOGIE et BDR AMP CLINIQUE

Dr Marianne BERGERE Dr Bob WAINER
Dr Florence BOITRELLE Dr Marc BAILLY
Dr Laura ALTER Dr Céline MURATORIO
Dr Céline MEYNANT
Cécile LE ROUX Dr Bénédicte PAILLUSSON
Myriam GOMBAULT
Coraline MARCHAND
Vincent DELABROYE
Romain VILLENEUVE