Le Diagnostic

en Bactériologie

Pr. A. Iyane SOW

Bactériologie – Virologie
 Objectifs pédagogiques
1- Définir les deux types de diagnostic en Bactério
2- Classer les différents produits pathologiques
3- Décrire les catégories de milieux de culture,
leur ensemencement et la lecture des cultures
4- Décrire et interpréter les colorations de Gram
et de Ziehl Neelsen
5- Expliquer les différentes étapes du diagnostic
bactériologique (direct)
 1. Introduction
Rôles du Laboratoire :
Diagnostic : confirmation biologique d’un cas
suspect ou probable
Orientation du traitement antibiotique : tests
de sensibilité
Surveillance du traitement et évolution de la
maladie : contrôles biologiques
Types de diagnostic :
Diagnostic direct (bactériologique) :
. isolement et identification (culture),
. recherche d’Antigènes (D. immunologique),
. détection d’acide nucléique (D. moléculaire)
Diagnostic indirect (sérologique) : traces d’une
infection récente ou ancienne (anticorps)
 2. Produit pathologique
2.1. Définition :
Produits biologiques avec germes responsables
d’infection
Exemples : sang, selles, urines …

2.2. Types :
Produits pathologiques monomicrobiens :
/ Cavité naturelle stérile
/ une seule espèce bactérienne
/ milieux de culture non sélectifs
/ Exemples : ? ?
Produits pathologiques polymicrobiens :
/ Cavité naturelle ouverte
/ riche en bactéries
/ milieux de culture sélectifs
/ Exemples : ? ?

2.3. Renseignements : nécessaires

Sur le patient : âge, sexe, localisation, statut
immunitaire …
Sur la maladie : début, diagnostic, traitement, durée
hospitalisation
Produit pathologique : nature, conservation,
recherches demandées …
2.4. Prélèvements :
Choix du produit pathologique :
Selon la localisation et le type de l’infection
Conditions :
/ Générales : communes :
Début de maladie, asepsie + + + , sans antibiotique
/ Spécifiques : selon le produit à examiner
Transport - conservation :
/ Transport immédiat
/ Conservation : généralement à + 37° C
sauf selles et urines (+ 4° C)
/ Milieux de transport
 Quand prélever ?
- avant toute antibiothérapie
- tôt par rapport au début de la maladie
- heure (moment) de la journée
 Comment prélever ?
- technique physiologique
- technique instrumentale
 Où prélever ? :
site anatomique, lésions
 3. Milieux de culture
3.1. Définition :
Substance nutritive :
Contenant les nutriments et facteurs de
croissance des bactéries,
Présentés dans de la verrerie
Permettent développement de germes
Généralement stériles
3.2. Type de milieux :
Selon l’état physique :
- Milieux liquides : Bouillons
- Milieux solides : Géloses
Selon la composition :
- Milieux nutritifs : ordinaires
- Milieux riches ou enrichis
 Selon l’utilisation :
- Milieux d’enrichissement : culture abondante
- Milieux d’isolement
- Milieux électifs : délai de croissance
- Milieux sélectifs : inhibition d’espèces
- Milieux d’identification
3.3. Présentation :

Bouillons :
- Tubes
- Flacons
Géloses :
- Tubes : culot, pente
- Flacons
- Boîtes de Pétri
3.4. Ensemencement :
Bouillons :
- Mise en suspension
Géloses :
- Inondation
- Epuisement (stries transversales / cadrans)
- Taches
- Piqûre (tubes)
Types de
colonies
3.5. Aspect des cultures :

Sur Bouillons :
- Trouble- Culot - Voile

• Géloses : Colonies à décrire par :

taille, contours, surface,
transparence, pigment