1) Introduction :

La Flore Msophile Arobie Totale (FMAT) est un

indicateur sanitaire qui permet d'valuer le nombre d'UFC (Unit
Formant une Colonie) prsentes dans un produit ou sur une
surface. Ce dnombrement se fait 30 C ce qui permet de
dnombrer trois grands types de flore :

la flore thermophile, temprature optimale de croissance

45 C ;

la flore msophile, temprature optimale de croissance entre

20 C et 40 C ;

la flore psychrophile, temprature optimale de croissance

20 C.

Comme il s'agit d'un milieu ordinaire, la plupart des microorganismes peuvent se dvelopper, sauf ceux qui sont exigeants
et les micro-organismes anarobies stricts. Il est donc prfrable
de parler de Flore Msophile Arobie 30 C que de flore
totale .
L'unit est l'UFC (Unit Formant Colonie) car une colonie
observable sur la glose peut venir d'un micro-organisme isol,
d'une spore ou encore d'une association de micro-organismes
2) Le but :
Recherche et Mesure de la charge en germes arobies
msophile.
3) Matriels utiliss :
-

tube essai, agitateur tube (vortex).

Pipette, poire.
Micropipette.
Bec Bunsen.
Boite de ptri.

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- Chauffe ballon.
- Incubateur.
4) Produits utiliss :
- Milieu PCA.
- Diluant (eau physiologique).
- Lait pasteuris.
5) Mode opratoire :
A. La dilution :
prparer des dilutions dcimales allant de 10 -1 10-2 et10-3
(1ml de lait pasteuris +9 ml de diluant pour la premire
dilution, et 1ml de dilution prcdente +9ml de diluant et
ainsi de suite pour la cinquime dilution)
on strile le tube partir de bec bunsen et changement le
bouchon de micropipette dans un chaque dilution.
On agit chaque tube de dilution partir dun agitateur.
B. Lensemencement :
1 ml de chaque dilution est prlev et est introduit dans des
boites de Ptri"03 boites" (02 exemplaires
pour chaque
dilution)on ajoute le volume 15ml de glose PCA.
Faire des mouvements circulaires (forme de 8) pour permettre
linoculum de se mlanger la glose.
Aprs solidification sur la paillasse, une deuxime couche de
5ml est ajoute (pour viter les diverses contaminations).
Les boites de ptri sont annotes et doivent contenir sur la
tranche :
La date.
La dilution utilise.
La temprature et la dure dincubation.
C. Incubation :
Incuber les couvercles en bas pour viter la
contamination par la gouttelette deau, 30 C pendant 72h
avec trois lectures 24h ,48h, et 72h.
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D. Lecture :
Pour la dnombrement il est impossible de compter une
bote contenant plus de 300 colonies en raison d'un risque
d'erreur trop important. Ces rsultats sont donc rejets. Les botes
contenant moins de 30 colonies sont elles aussi cartes, les
colonies sont trop rares et peuvent induire en erreur.
On utilise la formule mathmatique suivante :

colonies
N=
VmL (n1+0.1n2) d1
O :
N : nombre dUFC par gramme ou par ml de
produit initial.
colonies : somme des colonies des boites
interprtable.
VmL : volume de solution dpos (1ml).
n1 : nombre de boites considres la premire
dilution.
n2 : nombre de boites considres la secondaire
dilution.
d1 : facteur de la premire dilution retenue.
6) Rsultats :
Rsultats obtenues aprs TP a fait :
Aprs 24h :

Boite 1

10-3

10-2

10-1

32

118

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Page 3

Boite 2

30

142

10-3

10-2

10-1

Boite 1

51

177

Boite 2

14

37

202

Apres 48h :

AN : on remplaant les rsultats obtenus la formule

mathmatique suivante :
colonies
32+30+118+142
N=
=
VmL (n1+0.1n2) d1

1(2+0.1(2)) 10

N=1.46 10

UFC/ml

7) Interprtation :

La lecture aprs 72h : On observe des colonies

lenticulaires avec un centre bomb blanchtre plus des
autres colonies fusiformes (la possibilit de contamination).

A partir de tableau des rsultats on remarque que le

nombre des germes totaux est normale selon les normes
algrienne qui est dans le lait pasteuris entre )10 4 ,108(
c

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 d
< 3.104 GAMT/gr (cette norme est partir du journal
officiel algrien :
(N JORA : 035 du 27-05-1998)CRITERES MICROBIOLOGIQUES
DES LAITS ET DES PRODUITS LAITIERS).
Ce rsultat signifie que le le lait est conformes aux normes et
quil est acceptable .
8) Conclusion :
On peut expliquer que ce rsultat ngatif est due :
La mal conservation de produit tudi (le lait pasteuris).
La contamination de la matriels utiliss.
La mal prparation de lexprience (fautes au niveau de
pse, au niveau des dilutions, )
La possibilit que la glose utilise t refroidi ce qui
permet un dveloppement des quelques souches
bactriennes.

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