METABOLISME PROTEIQUE

METABOLISME PROTEIQUE
1. Introduction. Gnralits sur le mtabolisme azot
2. Protines plasmatiques
Principales protines : albumine, glycoprotines, marqueurs tumoraux
Exploration biologique : protinurie, dosages, lectrophorse
Dysglobulinmies
3. Enzymes plasmatiques
Gnralits sur lenzymologie clinique
Principales enzymes dintrt clinique
Marqueurs de lischmie myocardique
4. Constituants azots non protiques
Ure, cratinine, applications la pathologie rnale
Ammoniac, bilirubine, applications la pathologie hpatique
Acide urique, dyspurinies.
Gnralit
En estimation :
Gnome humain : 30 000 50 000 gnes structurale
Une cellule : 3000 5000 protines diffrentes
Dans le srum : ~ 300 protines visualis par 2D lectrophorse
METABOLISME PROTEIQUE
1. Introduction. Gnralits sur le mtabolisme azot
1.1 Besoins,
quantitatifs : 1g/kg de poids corporel
qualitatifs : acides amins indispensables, vitamines
1.2 Digestion des protines alimentaires
1.3 Utilisation mtabolique des aminoacides
biosynthses, noglucognse
catabolisme : dsamination, transamination, urognse
excrtion urique rnale
1.4 Rgulation hormonale
Facteurs anabolisants : insuline, hormone de croissance,
andrognes, oestrognes, facteurs de croissance,
cytokines
Facteurs catabolisants : cortisol, thyroxine.
!
!
3-phosphoglycerate
Glucose 6-phosphate
Phosphoenol pyruvate
Alanine
Valine
Leucine
Pyruvate
family
Citric Acid
Cycle
Pyruvate
Oxaloacetate
2-Oxaloglutarate
Histidine
Hexose ! pathway
Glycolysis
Ribose 5- phosphate
Erythrose 4-
phosphate
!
Phenyl
alanine
Tyrosine
Trypto
phane
Serine
Synthesized from
phenylalanine
Aromatic
family
Cysteine
Serine Glycine
Serine family
Asparagine
Aspartate
Threo
nine
Iso
leucine
Methionine
Lysine
NH
3
!
Aspartate
family
Glutamate Glutamine
Proline
Ornithine
NH
3
2NH
3
Arginine
Urea
cycle
Glutamate family
Amino Acid Biosynthesis :
Overview
* *
*
*
*
*
*
*
Citric Acid
Cycle
Oxaloacetate
Fumarate
Succinyl CoA
2-Oxaloglutarate
Glucose
Serine
Cysteine
Pyruvate
Propionyl CoA
Asparagine
Aspartate
Valine
Phenylalanine
Tyrosine
Isoleucine
Acetyl CoA
Glutamate
Glutamine
Proline
Arginine
Methionine
Pyruvate
Alanine
Histidine
Typtophan
Pyruvate Serine
Glycine
Threonine
Alanine
Lysine
Leucine
K
e
t
o
n
e

b
o
d
i
e
Cysteine
Acetyl CoA
AcetoAcetate
Several patway
Amino acid degradation overview
Glutamate
Glutamine
Proline
Arginine
Methionine
Pyruvate
Alanine
Histidine
Typtophan
Pyruvate Serine
Glycine
Threonine
Alanine
Lysine
Leucine
K
e
t
o
n
e

b
o
d
i
e
Cysteine
Acetyl CoA
AcetoAcetate
Several patway
OAA
"- ketoglutarate
Pyruvate
3-phosphoglycerate
Glucose
ala
asn asp
ser
gly
ser gly
pro
arg
gln
his
glu
fumarate
succinylCoA
Pyruvate
3-phosphoglycerate
Glucose
acetylCoA
"- ketobutyrate
val
thr met
phe, tyr
ser gly thr
cys
ala
trp
ile
propionylCoA
acetoacetate
lys , tyr
ile,
leu trp
Metabolism fate of non
essential Amino acid
Metabolism fate of
essential Amino acid
The urea cycle, the TCA cycle, and the
transamination of oxaloacetate are linked by
fumarate and aspartate
Urea
"- Amino
acid
"- keto acid
Carbamoyl phosphate
CO
2
+ NH
4
+
Ornithine
Argino
Succinate
Citruline
Arginine
Aspartate
Fumarate
Malate
Oxaloacetate
Urea
cycle
TCA
cycle
protein
amino acid
"- ketoacids
energy
"- ketoglutarate
glutamate
alanine
pyruvate
glutamine
NH
4
+
pyruvate
urea
NH
4
+
glutamate
NH
4
+
"-ketoglutarate
glutamate
glutamine
NH
4
+
glutamate
urea
Muscle
Liver
Kidney
Major pathways of inter organ nitrogen
transport following muscle proteolysis
Glucose
Isoleucine
Methionine
Threonine
Valine
Aspartate
Phenylalanine
Tyrosine
Asparagine
Aspartate
Alanine
Cysteine
Glycine
Serine
Threonine
Tryptophane
Isoleucine
Leucine
Tryptophnae
Pyruvate
Acetyl CoA
Acetoacetyl CoA
Phosphoenol pyruvate
Fumarate
Succinyl CoA !-ketoglutarate
Citrate
Oxaloacetate
Leucine
Lysine
Phenylalanine
Tryptophane
Tyrosine
Arginine
Glutamate
Histidine
Proline
Fate of degradation of
carbon skeleton of amino acid
METABOLISME PROTEIQUE
1. Introduction. Gnralits sur le mtabolisme azot
2. Protines plasmatiques
Principales protines : albumine, glycoprotines, marqueurs tumoraux
Exploration biologique : protinurie, dosages, lectrophorse
Dysglobulinmies
3. Enzymes plasmatiques
Gnralits sur lenzymologie clinique
Principales enzymes dintrt clinique
Marqueurs de lischmie myocardique
4. Constituants azots non protiques
Ure, cratinine, applications la pathologie rnale
Ammoniac, bilirubine, applications la pathologie hpatique
Acide urique, dyspurinies.
Origines de protines plasmatiques
Cellules et tissu scrtent dans le plasma la suite dun
turnover naturel des tissus.
Cellule : protines structurales : membrane cellulaire, organelle,
cytoplasme.
Organe:
Production : foie, plasmocytes, glandes endocrines
Catabolisme : foie
Fonctions des protines sriques et plasmatiques
Garder la pression oncotique plasmatique un niveau acceptable
(surtout albumine).
Coagulation et fibrinolyse.
Molcules de signalisation (hormones et cytokines)
Fonction immunologique (immunoglobine et complments)
Anti protase (protines de la phase aigu et anticoagulant)
Systme de tampon
Liaison dautre molcules :
Fonction de porteur : augmentation la solubilit
Fonction de livraison: endocytose mdie par un rcepteur
Fonction de stockage
Fonction de tampon biologique
METABOLISME PROTEIQUE
1. Introduction. Gnralits sur le mtabolisme azot
2. Protines plasmatiques
Principales protines : albumine, glycoprotines, marqueurs tumoraux
Exploration biologique : protinurie, dosages, lectrophorse
Dysglobulinmies
3. Enzymes plasmatiques
Gnralits sur lenzymologie clinique
Principales enzymes dintrt clinique
Marqueurs de lischmie myocardique
4. Constituants azots non protiques
Ure, cratinine, applications la pathologie rnale
Ammoniac, bilirubine, applications la pathologie hpatique
Acide urique, dyspurinies.
METABOLISME PROTEIQUE
2. Protines plasmatiques
Rle, pression oncotique, holoprotine et glycoprotines
2.1 Principales protines :
Srum albumine, *
Glycoprotines de transport : transferrine, transcortine,
cruloplasmine,
Glycoprotines de linflammation : orosomucode, haptoglobine,
CRP*
Marqueurs tumoraux : ACE, AFP, PSA, CA 15.3, CA 19.9, hCG ***
Immunoglobulines *
2.2 Exploration biologique
Recherche et tude dune protinurie ***
Dosage, nature (lectrophorse, immuno-fixation),
classification
Dosages protiques
Protines totales, Immuno-dosages isols ou groups
profils protiques * *
Protinogramme
Albumine
Globuline
!
2
"
!
1
#
lectrophorse de protines srique
Fibrinogne C4
C5

2
microglobuline
Cruloplasmine
hmopexine

1
glycoprotine
acide
(oromucode)
Mineur
IgG
IgM
Transferrine
Complment
(C3)
IgA

2
microglobuline

2
haptoglobine

1
trypsine
inhibiteur

1
lipoprotine
(HDL)
Albumine Majeur
" globuline # globuline !
2
globuline !
1
globuline Albumine
Importance clinique de protines sriques principales
1. Albumine srique :
PM : 66 000 Da (580-585 acide amine), non glycosyl
Elle est le principal agent de la pression oncotique et
joue un rle trs important de transporteur: transport
de bilirubine, d'acides gras, de mdicaments,
d'hormones thyrodiennes.
Valeur de rfrence :
Nouveau-n : 2,8 4,4 g/dL
Adulte : 3,4 5,0 g/dL
Personne ge : 3,4 4,8 g/dL
Variation pathologique :
Hypoalbuminmie
Importance clinique de protines sriques principales
2. Transferrine,
Migration dans la zone , (plusieurs formes gntique)
Glycoprotine de PM 77 000 Da
Valeur de rfrence : 220 - 400mg/dL
Variation Pathologie :
Diminution: lors la raction de la phase aigu
Augmentation : carence de fer (anmie)
Sidrophiline apparat rapidement dans lurine, aprs
albumine, dans le syndrome nphrotique ( explique anmie
hypochrome )
Importance clinique de protines sriques principales
3. Transcortine
a1 globuline PM 56000
Fixant le cortisol avec une grande affinit. Elle est donc, comme la SBP
(sex binding protein) fixant les andrognes et la DBP (vitamin D binding
protein), la Retinol binding protein, un transporteur particulier d'hormones
lipidiques ou de produits proches.
Sa concentration normale est voisine de 70 mg/l.
Variation pathologique :
Augmentation au cours de la grossesse et les traitements andrognique ou
strognique.
Des dficits congnitaux ont t dcrits, lis au chromosome X
Importance clinique de protines sriques principales
4. Cruloplasmine :

2
glycoprotine de PM 120 000 160 000
Fonction :
Lier le Cu
2+
( 6 7 atome de Cu/molcule). 95 % de Cu srique lie
la cruloplasmine et 5 % est dialysable , qui lie faiblement au
albumine et histidine et des autres protines.
Anti-oxydant (protection contre les radicaux libre provenant des
granulocytes activs)
Valeur de rfrence chez adulte : 18 45 mg/dL
Variation pathologique :
Augmentation en cas dinfection , tumeur maligne (maladie de
Hodgkin),traumatisme.
Diminution dans le maladie de Wilson
Importance clinique de protines sriques principales
5. $lpha 1 glycoprotine ou acide orosomucode
Protine de la phase aigu (protine de linflammation) :
le taux augmenter fortement de manire non spcifique au cours de ltat
inflammatoire (RAA de lenfant), due une augmentation de synthse
hpatique, mdie par l'interleukine, qui n'a pas de retentissement sur la
protinmie totale.
Pas avoir la valeur de diagnostique mais permettant de suivre l'volution de
la maladie inflammatoire
Fonction: inconnu
Valeur de rfrence : 0,6 et 1,2 g/l
VS ( vitesse de sdimentation globulaire )
Importance clinique de protines sriques principales
6. Haptoglobine (hp)
Fixation lHb se forme en complexes Hp/Hb, qui sont phagocyt par les
systme rticuloendothlial.
Au maxi 3 g dHb (= 30ul de sang) peut tre lie par lHp prsente dans le
Sang. Si Hp diminue vers 0, elle redevient normal aprs environ une
semaine.
Valeur de rfrence : entre 0,5 et 1,5 g/l.
Variation pathologique :
Augmentation pendant linflammation (pas de valeur diagnostique
ni pronostique).
Diminution en cas dhmolyse (hmolyse discrte)
Hmopexine fixe hme , est un paramtre dhmolyse
Importance clinique de protines sriques principales
7. Protine C ractive (CRP)
Glycoprotine (120 KDa) , proprit de prcipiter au contact du
polysaccharide C du pneumocoque.
Un rle d'activation du complment, de facilitation de la phagocytose
et de modulation de la multiplication des lymphocytes T.
C'est un marqueur trs prcoce de l'inflammation , s'levant dans les
2 4 heures aprs le dbut du processus inflammatoire.
Du fait de sa demi-vie trs courte (24 heures), la CRP est aussi un
tmoin prcoce de l'efficacit thrapeutique, (ex. antibiothrapie )
Le taux normal varie de 0 6 mg/l
Variation pathologique :
les tats inflammatoires*
les infections bactriennes no-natales**,
la surveillance post-opratoire***
Importance clinique de protines sriques principales
8. Fibrinogne
Rle dans la coagulation
Il est aussi une protine de la phase aigu dont le taux augmente au
cours des syndromes inflammatoires.
C'est une glycoprotine, synthtis dans le foie essentiellement et
aussi, faiblement, par les mgacaryocytes.
Les valeurs de rfrence chez l'adulte sont 2,5 3,5 g/l.
L'intrt du dosage du fibrinogne sera donc mixte, dans tout
processus inflammatoire, o son lvation accompagnera celle de la
VS et des autres marqueurs protiques et en hmostase, o le temps
de thrombine explore plus particulirement la fibrino-formation.
Importance clinique de protines sriques principales
9. $lpha 1 antitrypsine (alpha 1 anti protase )
Inhiber bien d'autres srine-protases que la trypsine. Un inhibiteur
puissant des diverses enzymes protolytiques pouvant tre dverses dans
le plasma par des tissus ou par des cellules circulantes comme les
polynuclaires.
Glycoprotine de petite taille, ayant une demi-vie brve (5 jours).
Le taux normal est de 2 4 g/l.
Des variations pathologiques:
Au cours de l'inflammation o le taux est banalement augment.
Les diminutions, par contre, sont plus intressantes car
gntiques ou acquises.
Elles intressent la pathologie pulmonaire et hpatique.
*Au cours de bronchopneumopathies et d'emphysmes,
*Au cours de cirrhoses infantiles,
*Au cours des entropathies exsudatives,
Importance clinique de protines sriques principales
10. $lpha 2

macroglobuline (!
2
M) :
Glycoprotine PM 750 KDa
Inhibiteur de protase.
Se combine aux diverses enzymes protolytiques circulantes
(plasmine, collagnase, trypsine et a chymotrypsine, protases
bactriennes et protases granulocytaires).
Limiter les effets nfastes de la raction inflammatoire en inhibant
les enzymes lysosomiales dverses.
Les valeurs de rfrence sont: 2 3,5 g/l.
Les variations pathologiques sont surtout en "hyper":
Syndromes nphrotiques
l'inflammation aigu, moins nette toutefois que celle de
l'orosomucode, de l'haptoglobine ou de la CRP.
Cirrhose du foie
Importance clinique de protines sriques principales
11. %eta 2 microglobuline,
PM de 11 800, un composant de molcule de HLA Classe I
Filtre par le glomrule, rabsorption tubulaire et catabolise.
Moins de 10% arrive dans lurine.
2 microglobuline dans le srum :
Le taux plasmatique normal est de 1,2 2 mg/l.
Valeur leve : lympho prolifrative, SIDA, dsordre de la filtration
glomrulaire (ex, diabte, glomrulonphrite chronique,
inflammation).
2 microglobuline dans lurine : un marqueur de la fonction tubulaire.
Un prlvement optimal ncessite une urine lgrement alcalin ou
alcalinis.
Valeur de rfrence : 4- 370 "g/L
Augmentation: nphrite interstitielle, nphrite toxique, rjection de
greffe rnal.
Elle augmente aussi si la concentration srique est au dessus de seuil
de labsorption ( 4000 "g/L) dans le srum
Importance clinique de protines sriques principales
12. IMMUNOGLOBULINES
Valeur de Ig varie selon age
90-450 70-280 800-1800 Adult
96-280 50-178 697-1589 12 ans
48-204 42-174 605-1457 6 ans
39-123 19-167 440-1292 3 ans
2-98 19-104 344-1180 18 mois
5-79 19-96 225-757 5 mois
0-6 5-18 618-1380 Nouveau-n
IgA IgM IgG
Immunoglobuline en mg/100mL
Age
Importance clinique de protines sriques principales
7. IMMUNOGLOBULINES ( Variation pathologique):
Ig basses :
Une classe Ig ou dficience gnrale ?
Congnital ou acquise ?
Ig leves : (polyclonale vs monoclonale)
Ig monoclonale : bnin ou malin ?
Ig polyconale augmente :
Cirrhose du foie (surtout IgA)
Infection chronique (TB, ostomylite)
Cirrhose biliaire primitive (IgM !)
Hpatite chronique (IgG !)
Mylome
METABOLISME PROTEIQUE
1. Introduction. Gnralits sur le mtabolisme azot
2. Protines plasmatiques
Principales protines : albumine, glycoprotines, marqueurs tumoraux
Exploration biologique : protinurie, protidmie total, lectrophorse
Dysglobulinmies
3. Enzymes plasmatiques
Gnralits sur lenzymologie clinique
Principales enzymes dintrt clinique
Marqueurs de lischmie myocardique
4. Constituants azots non protiques
Ure, cratinine, applications la pathologie rnale
Ammoniac, bilirubine, applications la pathologie hpatique
Acide urique, dyspurinies.
RECHERCHE DE LA PROTEINURIE
DOSAGE DE LA PROTEINURIE TOTALE
ELECTROPHORESE DES URINES CONCENTREES
Absence de fractions anormales
< 0,3 g/l
> 0,5 g/l
PROTEINURIE PATHOLOGIQUE
Protinogramme
normal
PROTEINURIE
PHYSIOLOGIQUE
Protine monoclonale
srique
RECHERCHE PBJ
Classification
PROTEINURIE
GLOMERULAIRE
Slectivit ? PROTEINURIE
TUBULAIRE
Immunofixation
Dosages kappa ou
lambda
Dosage Albumine,
Transferrine
Ig G
Dosage RBP
2Microglobuline
.
Stratgie d'tude d'une protinurie
METABOLISME PROTEIQUE
2. Protines plasmatiques
2.3 Variations pathologiques
Hypoprotinmies : hypoalbuminmie, hypogamma-
globulinmies
Hyperglobulinmies diffuses ou polyclonales : infections
aigus ou chroniques, cirrhoses, maladies auto-immunes
Hyperglobulinmies monoclonales :
mylome multiple ou maladie de Kahler : clinique,
radio, biologie sanguine,urinaire, mdullaire,
macroglobulinmie de Waldenstrm,
gammapathies monoclonales bnignes
Causes de variation pathologique
Catabolisme :
Infection
Hyperthyrose
Perte :
Rnale
Gastrointestinal
Peau (brlure grave)
Grossesse
Alitement
Perfusion dans le bras
Malabsorption
Malnutrition
Alcoolisme
Insuffisant hpatique
hypogammaglobulinmie
"
Perte de liquide
Congestion (artfact)*
Gammopathie
Infection chronique**
!
Catabolisme/perte Hmodilution/concent
ration
synthse Protine
totale
synthse
Catabolisme/perte
5%
5%
Syndrome nphrotique
Normale